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Síntese, caracterização físico-química, morfológica e avaliação de viabilidade de células tumorais de mama (MCF-7) submetidas à nanoesferas de PLGA contendo clorambucilDias, Diego Juscelino Santos 17 December 2012 (has links)
Dissertação (mestrado)—Universidade de Brasília, Faculdade de Ciências da Saúde, Programa de Pós-Graduação em Ciências da Saúde, 2012. / Submitted by Alaíde Gonçalves dos Santos (alaide@unb.br) on 2013-03-14T10:55:33Z
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2012_DiegoJuscelinoSantosDias.pdf: 1894976 bytes, checksum: 7aecd85cf7d7607c1680b1c4e54c6cc5 (MD5) / Sendo uma doença de alta incidência no mundo e no Brasil, o câncer de
mama causa temor e morte entre as mulheres. Visando uma melhoria da qualidade de vida do paciente e uma maior eficiência dos tratamentos, há uma busca
constante por novos medicamentos e formas para transporta-los até os tumores. Neste trabalho, através dos procedimentos de simples e de dupla emulsificação foram sintetizadas nanopartículas poliméricas biodegradáveis de ácido poli(D,L-láctico-co-glicólico) contendo o agente antitumoral clorambucil (CHB). Através do processo de nanoencapsulamento espera-se evitar a precipitação sistêmica do fármaco, efeitos adversos indesejados além de aumentar a seletividade e eficiência
da quimioterapia. Após o preparo das nanopartículas, foram avaliados parâmetros físico-químicos, morfológicos e citotóxicos, onde se destacam as análises de: distribuição de tamanho, potencial zeta, perfil de liberação in vitro, eficiência de encapsulamento, análises térmicas diferencias e termogravimétricas simultâneas, análises espectroscópicas de absorção eletrônica na região UV-vis, no infravermelho com transformada de Fourier e de fluorescência do clorambucil e fluoresceína, em
solução e quando encapsulados na matriz polimérica. As técnicas de microscopia
eletrônica de varredura e de espalhamento dinâmico da luz mostraram que as
partículas apresentam forma esférica, não porosa, com distribuição de tamanho
entre 235,0 e 345,0 nm. As estruturas produzidas apresentaram baixa tendência a
se agregarem devido ao valor de potencial zeta (entre -23,0 e -5,90 mV). A eficiência
de encapsulamento foi de até 92,0%. A citotoxidade celular in vitro para células tumorais de mama (MCF-7) e para a linhagem de fibroblastos NIH-3T3 foi avaliada através de ensaios de viabilidade com MTT, sendo que, o sistema de liberação se apresentou mais eficiente do que o fármaco na forma livre em diversas
concentrações para ambas as linhagens. Dessa forma, os sistemas de liberação
produzidos apresentaram-se promissores DDS e poderão contribuir para o aumento da eficiência terapêutica, biodisponibilidade e redução de efeitos adversos. _______________________________________________________________________________________ ABSTRACT / Being a high incidence of disease in the world and in Brazil, breast cancer
causes fear and death among women. With an aim of improving the live quality of
patients and greater efficiency of the treatments there is a constant search for new drugs and ways to transport them to the tumor cells. Through the procedures single and double emulsification followed by solvent evaporation were synthesized biodegradable polymeric nanoparticles of poly(D,L-lactic-o-glycolic) acid containing chlorambucil. This technique has been widely adopted to obtain particles containing hydrophobic drugs and its purpose is to prevent systemic precipitation of the drug, undesirable side effects, increase the selectivity and efficiency of chemotherapy. Were determined physicochemical parameters such as size, morphology and regularity of particles, zeta potential, in vitro release profile, encapsulation efficiency.
simultaneous differential thermal and thermogravimetric analysis, differential
scanning calorimetry, and electronic absorption spectra in the UV-vis region, FTIR spectroscopy and fluorescence of chlorambucil, fluorescein, polymeric matrix and nanoparticles containing these encapsulated compounds were obtained. Scanning electron microscopy which together with the technique of dynamic light scattering
showed that the particles showed up spherical, non-porous, with homogeneous
distribution in size and diameter up to 235.0-345.0 nm. The structures produced showed no tendency to aggregate due to their negative zeta potential (below -5.90 mV) and the encapsulation efficiency was up to 92.0%. The in vitro cell cytotoxicity to breast tumor cells (MCF-7) and the fibroblast line NIH-3T3 cells was evaluated by MTT viability assays, where the release system is made more effective than the free drug for both tumor and fibroblasts cells in several concentrations. Thus, the delivery systems manufactured as showed promising DDS which can contribute to increasing the therapeutic efficacy, bioavailability and reduced adverse
effects of chlorambucil.
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Análise do perfil de expressão do gene SMYD4 em câncer de mama e seu envolvimento na carcinogênese mamáriaMoura, Carolina Amaro de 22 January 2013 (has links)
Dissertação (mestrado)—Universidade de Brasília, Faculdade de Ciências da Saúde, Programa de Pós-Graduação em Ciências da Saúde, 2013. / Submitted by Albânia Cézar de Melo (albania@bce.unb.br) on 2013-04-17T16:32:00Z
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2013_CarolinaAmaroMoura.pdf: 3170359 bytes, checksum: e846389c8492193330a8768a4450adcb (MD5) / Modificações epigenéticas estão relacionadas a padrões de expressão
gênicas diferentes. A desregulação nos processos epigenéticos, incluindo metilação
nas caudas de histona, tem sido associada à biologia das lesões cancerosas e seus
resultados clínicos. Até agora, diversos genes codificadores de metiltransferases
tem sido descritos e associados à carcinogênese mamária. Os genes codificadores
de metiltransferases de lisina de histonas apresentam um domínio SET o qual é capaz de metilar resíduos de lisina nas caudas das histonas. A desregulação neste
processo de metilação pode mudar a conformação da cromatina e permitir a
transcrição de genes que agem na carcinogênese. Proteínas que contêm os
domínios SET e MYND (SMYDs) constituem uma família de cinco proteínas
altamente conservadas desde leveduras até vertebrados, e nem todas foram
completamente caracterizadas. O gene SMYD4 humano está localizado no
cromossomo 17 (17p13.3), em uma região que perde comumente a
heterozigosidade em cânceres de mama. No presente estudo, investigou-se o perfil
de expressão do gene SMYD4 em tumores de mama e seus tecidos não tumorais
adjacentes, em sete diferentes linhagens celulares de câncer de mama e em treze
diferentes tecidos humanos não cancerosos. Além disso, foram utilizadas células
estáveis com SMYD4 superexpresso na investigação da localização subcelular de
sua proteína e na análise da proliferação celular em consequência desta
superexpressão. Ademais, analisou-se a consequência da inibição de expressão
deste gene em linhagem celular de câncer de mama. Diante desses objetivos, descobriu-se que SMYD4 está frequentemente hipoexpresso em cânceres de mama, comparado às contrapartes não tumorais, e diminuídos em todas as
linhagens celulares de câncer de mama. Interessantemente, há uma maior
expressão nos tecidos mamários em comparação a todos os outros analisados.
Além disso, observou-se maior proliferação em células com expressão do SMYD4
silenciada. Os resultados demonstram novos caminhos na elucidação do papel de SMYD4, evidenciando a importância de sua hipoexpressão na progressão do câncer
de mama. ______________________________________________________________________________ ABSTRACT / Epigenetic modifications are related to different gene expression patterns.
Misregulation of epigenetic processes, including methylation in histone tails, has been associated to the biology of cancer and their clinical outcome. Up to date, several methyltransferase genes have been described to be involved in breast carcinogenesis. Histone lysine methyltransferase genes encode proteins containing a SET domain with the ability to methylate lysine residues in histone tails. Misregulation on this methylation process can change the chromatin conformation and allow transcription of genes that operate in carcinogenesis. SET and MYND
domain proteins (SMYDs) are a family of five proteins highly conserved from yeast to
vertebrates, which have not yet been fully characterized. Human SMYD4 gene is
located at chromosome 17 (17p13.3) which is a region commonly exhibiting loss of
heterozygosity in breast cancers. In the present study it was investigated the
expression profile of SMYD4 in breast tumors and its adjacent non-tumor tissues, in
seven different breast cancer cell lines and in thirteen human normal tissues. In addition it was used stable cell lines overexpressing SMYD4 to investigate its subcellular localization, as well as its impact on cellular growth behavior before SMYD4 overexpression. It was also analyzed the effects of SMYD4 inhibition on the proliferation of a breast cancer cell line. It was found that SMYD4 is frequently downregulated in breast cancers compared to its non-cancerous counter-parts and frequently decreased in all breast cancer cell lines. Interestingly, it showed a higher expression in breast tissues comparing to all normal tissues analyzed. In addition it was found an increased proliferation in cells with silenced expression of SMYD4. These results shed new lights on the role of SMYD4, evidencing the importance of its
downregulation for breast cancer progression.
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Avaliação clínica e radiográfica da osteonecrose maxilomandibular associada ao uso de bisfosfonatos em pacientes com câncerLuz, Adriana Marques de Almeida January 2007 (has links)
Dissertação (mestrado)—Universidade de Brasília, Faculdade de Ciências da Saúde, 2007. / Submitted by Raquel Viana (tempestade_b@hotmail.com) on 2009-11-23T17:34:03Z
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Previous issue date: 2007 / Os bisfosfonatos (BP) são medicamentos efetivos para o controle de várias doenças ósseas, são recomendados como coadjuvantes no tratamento de pacientes portadores de mieloma múltiplo e com metástases ósseas de doenças malignas. Sua ação basicamente é de inibir a reabsorção óssea. Este estudo foi desenvolvido visando caracterizar a osteonecrose através da avaliação clínica e radiográfica de pacientes que procuraram por atendimento na Clínica de Estomatologia e Centro de Câncer Bucal da Divisão de Odontologia do HUB. Um total de quatro homens e 10 mulheres, com idade média de 66,4 anos, que usavam pamidronato ou ácido zoledrônico ou fizeram uso dos dois BP por mais de um ano. As lesões de osteonecrose foram avaliadas quanto à sua localização (mandíbula ou maxila), quanto à extensão da exposição óssea e sua associação com fatores locais. Os resultados do tratamento oferecido aos pacientes para a osteonecrose foram qualificados e um estudo estatístico realizado correlacionando as diversas variáveis. As alterações imaginológicas foram detalhadas. Concluiu-se que: todos os pacientes avaliados tiveram um fator local envolvido para desencadear a osteonecrose; o tempo de uso de BP é fator decisivo para o desenvolvimento da osteonecrose; quando o ácido zoledrônico é usado seqüencialmente ao pamidronato existe uma tendência de piora do quadro clínico; a radiografia panorâmica ajuda no diagnóstico, sendo que a tomografia computadorizada oferece melhores recursos para delimitar a extensão da lesão. Constatou-se ainda que medidas apropriadas devem ser implementadas para reduzir o risco e controlar com eficiência a osteonecrose em pacientes portadores de neoplasias malignas, usuários de BP. ______________________________________________________________________________________ ABSTRACT / Bisphosphonates (BP) are effective drugs for various bone diseases control, they are recommended as adjuvant therapy in the multiple myeloma and bone metastasis from solid tumors patients. BP’s action is basically to inhibit bone resorption. This study was developed aiming to characterize jaw BP’s osteonecrosis through clinical and radiographical evaluation of patients who were looking for care at the Stomatology Clinic and the Oral Cancer Center on the Dentistry Division in the University Hospital of Brasilia. A total of four men and ten women, in the average of 66.4 years old, who have used pamidronato or zoledronic acid or both BP for more than a year. Osteonecrosis’ lesions were evaluated on their location (mandible or maxilla), as to the bone exposure extent and its association with local factors. The results of treatment offered to patients were qualified and a statistical study done about the different variables correlations. The radiographic changes were detailed. This study’s conclusions are: all evaluated patients had a local factor involved that unchained the osteonecrosis; BP’ time use is a decisive factor for the osteonecrosis development; when the zoledronic acid is used sequentially to pamidronate exist a trend of osteonecrosis worsening, a panoramic radiograph aid in the diagnosis, and the computed tomography offers better resources to limit the osteonecrosis extent. Appropriate measures must be implements to reduce the risks and control efficiently the bisphosphonate-related jaw osteonecrosis in patients with malignancies.
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Prevalência do papilomavírus humano - HPV em mulheres atendidas no serviço de atendimento especializado, no município de Cacoal - RO, no período de 2003 a 2005 / Prevalence of Human Papillomaviruses - HPV in women wich were atended in SAE in Cacoal City, between 2003 and 2005Lima, Sheila Carminati de 15 February 2007 (has links)
Dissertação (mestrado)—Universidade de Brasília, Faculdade de Ciências da Saúde, 2007. / Submitted by mariana castro (nanacastro0107@hotmail.com) on 2009-12-18T21:14:15Z
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Previous issue date: 2007-02-15 / Populações expostas a precárias condições de vida estão mais vulneráveis, pois as desigualdades sociais, culturais e econômicas influenciam diretamente no processo de adoecer e morrer da população, sendo assim, as Doenças Sexualmente Transmissíveis (DST) encontramse entre as causas mais comuns de doenças no mundo e trazem conseqüências de natureza sanitária, social e econômica estando entre as cinco principais causas de procura por serviços de saúde. Uma DST que vem sendo disseminada com grande velocidade é a infecção pelo Papilomavírus Humano (HPV). A persistência da infecção pelo Papilomavírus Humano em altas cargas virais, representa o principal fator de risco para o desenvolvimento do câncer de colo do útero. Este estudo teve como objetivo conhecer a magnitude da prevalência do Papilomavírus Humano – HPV em mulheres no município de Cacoal – RO. Foi realizado um estudo transversal descritivo onde 31 mulheres portadoras do HPV foram entrevistadas por meio de um questionário com questões abertas e fechadas. Na análise das variáveis utilizou-se o software EPI-Info 6.04. Os sujeitos foram entrevistados em uma única sessão, foram identificados fatores de risco para o HPV e câncer de colo de útero e apresentaram as seguintes características: mulheres com idade média de 28,5 (DP=9,49) anos, 51,5% convivendo com companheiro, com segundo grau como média de escolaridade, predominância de 58,1% da cor branca, condição social predominante da classe C (35,5%), idade média de 17 (DP=2,7) anos na primeira relação sexual, média de 3,6 (DP=2,3) parceiros na história sexual, paridade de 2,2 filhos, alta prevalência de tabagismo 22,6%, uso de anticoncepcional por 54,8% das mulheres e o uso freqüente do preservativo por 29,0% das mulheres. Realização anual de exame preventivo do câncer cérvico-uterino de 58,1% e 74,2% das mulheres descobriram que eram portadoras do HPV através do aparecimento de verrugas na genitália. A análise das falas revelou um conhecimento razoável sobre a doença e sua principal forma de transmissão, porém existe a necessidade de maiores esclarecimentos sobre a prevenção, riscos para a saúde e tratamento. Concluiu-se que os fatores de risco identificados devem direcionar ações voltadas à prevenção das DST e estimular mudanças de comportamento sexual nas mulheres do município de Cacoal. _________________________________________________________________________________________ ABSTRACT / Population subjected to poor life conditions are more vulnerable, because the social, cultural and economical inequality influence directly on the population process of becoming sick and dying, as, the Sexually Transmitted Diseases (STDs) are among the more common disease causes in the world and bring sanitary, social and economical nature consequence being among the five most principal causes of looking for health services. A STD which is being spread very rapidly is the infection by the Human Papillomaviruses (HPV). The persistence of the infection by Human Papillomaviruses in high viral charge represents the main risk factor to develop the endometrial cancer. This study had as an objective to know the bulk Human Papillomaviruses prevalence – HPV in women in Cacoal City – RO. It was realized a descriptive side study where 31 women, HPV carriers were interviewed by questionnaire with open and close questions. In the variable analysis was used the EPI-Info 6.04 software. The subjects were interviewed in the one section, were identified risk factors of HPV and endometrial cancer and they showed the following characteristics: women at average age of 28,5 (DP= 9,49) years old, 51,5% living with a partner, with high school as Education level, predominance of 58,1 of white skin, predominant social class C (35,5%), age average at 17 (DP= 2,7) years old in the first intercourse, on average of 3,6 (DP= 2,3) partners in the sexual history, parity of 2,2 children, high prevalence of tobacco smoking 22,6%, the use of the birth pills by 54,8% of the women and the frequent use of condom by 29,0 of the women. The annual realization of the preventive exam of the endometrial cancer of the 58,1 women and 74,2 of the women discovered that they were carriers of HPV through appearing of the warts on the genitals. The speech analyses revealed a reasonable knowledge about the disease and its principal way to transmit, so, there is a need of more information about the prevention, health risk and treatment. It is concluded that the identified risk factors must direct actions towards STD prevention and stimulate sexual behavior changes in women of Cacoal City.
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Avaliação clínica e radiográfica das manifestações bucomaxilofaciais em pacientes portadores de polipose adenomatosa familial e câncer colo-retalAbrantes, Dayane Martins January 2009 (has links)
Dissertação (mestrado)—Universidade de Brasília, Faculdade de Ciências da Saúde, 2009. / Submitted by Allan Wanick Motta (allan_wanick@hotmail.com) on 2010-03-11T18:19:17Z
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Previous issue date: 2009 / O Câncer Colo-retal (CRC) pode ser classificado em esporádico e familial. O CRC esporádico é resultado da interação de mutações somáticas e fatores ambientais. O CRC familial é definido como aquele que afeta vários membros de uma mesma família e em idades precoces. No grupo do CRC familial estão a Polipose Adenomatosa Familial (FAP) e sua variante fenotípica, a Síndrome de Gardner, e o Câncer Colo-retal Hereditário Sem Polipose (HNPCC). Na literatura existem relatos da ocorrência de manifestações bucomaxilofaciais nos pacientes portadores de CRC familial. Este estudo foi realizado com o objetivo de avaliar essas alterações pelo exame clínico e radiografia panorâmica da face em pacientes acompanhados pelo Serviço de Coloproctologia e encaminhados à Clínica de Estomatologia do Hospital Universitário de Brasília. Foram examinados 30 pacientes distribuídos em quatro grupos de estudo: grupo controle (13 pacientes), CRC esporádico (8 pacientes), HNPCC (3 pacientes) e FAP (6 pacientes). Ao todo foram 16 mulheres e 14 homens com média de idade de 47,16 anos. Com relação às alterações de tecido mole foram estudadas a presença e localização de glândulas sebáceas intra-orais (Grânulos de Fordyce). Dos casos de glândulas sebáceas intra-orais 53,32% ocorreram na mucosa ou semimucosa labial acometendo com maior freqüência as mulheres em uma relação de 2:1. Os testes estatísticos não demonstraram associação entre a presença de glândulas sebáceas intra-orais e o tipo de doença quando comparada aos grupos estudados. As radiografias panorâmicas foram avaliadas segundo o método DPRS (Dental Panoramic Score System) proposto por Thakker e colaboradores (1995), por três especialistas em Radiologia que desconheciam a que grupo pertencia o paciente. Foram encontradas alterações significantes (escore ≥ 7) em 23,3% do total da amostra, destas, 85,71% ocorreram em homens. Dos pacientes do grupo FAP 83,33% apresentaram alterações significantes. As alterações ósseas encontradas com maior freqüência foram as escleroses ósseas (52,94%). O teste qui-quadrado mostrou associação entre presença de alterações dento-ósseas significantes e a Polipose Adenomatosa Familial quando comparada ao grupo controle e aos demais grupos de estudo. Concluímos que a presença de glândulas sebáceas intra-orais (Grânulos de Fordyce) não está associada à ocorrência de Câncer Colo-retal na amostra estudada e que houve associação entre achados radiográficos e a Polipose Adenomatosa Familial quando comparada aos demais grupos estudados. _______________________________________________________________________________ ABSTRACT / The colorectal cancer (CRC) can be classified as sporadic or familial. The sporadic CRC is a result of the interaction between somatic mutations and environmental factors. The familial CRC defined as the one that affects several members of the same family and at early age. In the group of the familial CRC are: Familial Adenomatous Polyposis (FAP) and its phenotypic variation, the Gardner syndrome and hereditary non polypomatous colorectal cancer (HNPCC). In the literature are available reports of the occurrence of bucomaxillofacial manifestation in patients with familial CRC. This study was carried out aiming to evaluate these alterations through the clinic examination and panoramic radiographics of the face in patients screened by the Proctology Service and referred to the Oral Medicine Clinic of the University Hospital of Brasília. Thirty patients were examined and distributed in four study groups: control group (13 patients), sporadic CRC (8 patients), HNPCC (3 patients) and FAP (6 patients). There were 16 female and 14 male and average age 47,16 years-old. In relation of soft tissues alterations the presence and site of intraoral sebaceous glands (Fordyce’s granules) were studied. In the cases of intraoral sebaceous glands, 53,32% occurred in the labial mucosa or semi mucosa affecting more frequently the females in a proportion of 2:1. Statistic analysis did not demonstrate relation between the presence of intraoral sebaceous glands and the type of disease comparing to the study groups. The panoramic radiographics were evaluated with the DPRS (Dental Panoramic Score System) method that was proposed by Thakker et al. (1995). Significant alterations were found (score ≥ 7) in 23,3% of the entire sample, and between these, 85,71% occurred in male. The bone alterations found more frequently were bone sclerosis (52,94%). The qui-square test demonstrated relation between the presence of significant bone alterations and the Familial Adenomatous Polyposis (p=0,001), comparing to the control group. We conclude that the presence of intraoral sebaceous glands is not associate to the occurrence of the CRC in the studied sample and there were relation between radiographic founds and the Familial Adenomatous Polyposis when compared to the other studied groups.
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Análise da variabilidade genética, filogenia e expressão gênica de HPV de alto risco no Distrito FederalAlencar, Tainá Raiol January 2009 (has links)
Tese (doutorado)—Universidade de Brasília, Instituto de Ciências Biológicas, Departamento de Biologia Celular, 2009. / Submitted by Jaqueline Ferreira de Souza (jaquefs.braz@gmail.com) on 2010-04-06T11:52:20Z
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Previous issue date: 2009 / Mais de 100 tipos de HPV foram descritos, dos quais 13 são classificados como de alto risco devido à sua associação com o desenvolvimento do câncer cervical. O presente estudo investigou a variabilidade e filogenia dos HPV de alto risco -31, -33, - 35, -52 e -58, isolados a partir de amostras do Distrito Federal. Para tanto, a LCR e os genes E6 e L1 foram sequenciados. Diversos variantes foram detectados, incluindo 13 novos variantes de todos os tipos analisados. A análise filogenética dos isolados de HPV-31, -33, -35 e -58 não revelaram agrupamentos étnicos ou geográficos como observados previamente para os HPV-16 e -18. A análise do HPV-35 mostrou uma topologia dicotômica característica de subtipos do HPV. Interessantemente, quatro agrupamentos foram identificados na análise de variantes de HPV-52, dos quais dois puderam ser classificados como ramos Asiático e Europeu. Além disso, nós comparamos a atividade do promotor de E6/E7 de variantes moleculares do HPV-58 detectados no Distrito Federal, uma vez que este é o segundo tipo mais frequentemente detectado em lesões cervicais de alto grau nessa região. Para este propósito, as sequências da LCR do protótipo do HPV-58 e de três variantes foram amplificadas e clonadas à montante do gene repórter luciferase e transfectados transientemente em células C33. Para comparação, também foram analisadas as sequências da LCR dos HPV-18 e -16. O protótipo do HPV-58 e os variantes Bsb-329 e Bsb-327 mostraram atividade transcricional similar ao HPV-16, mas cerca de seis vezes menor que o HPV- 18. Interessantemente, o variante de HPV-58 Bsb-295 apresentou uma alta atividade transcricional, mesmo comparável ao HPV-18. Esse variante de HPV-58 é o único isolado em que foi detectada a substituição nucleotídica na posição 7788. Foram construídos mutantes por meio de mutagênese sítio-dirigida com o intuito de analisar o impacto dessa alteração nucleotídica na atividade do promotor viral. A introdução da mutação 7788 no isolado protótipo do HPV-58 levou a uma atividade transcricional similar ao observado para o variante Bsb-295 e o protótipo do HPV-18. Em conjunto, os dados indicam que essa única variação é capaz de aumentar a atividade do promotor viral e poderia levar a uma maior expressão dos oncogenes virais E6 e E7 in vivo. Entretanto, estudos adicionais são necessários para identificar os fatores transcricionais celulares envolvidos nessa regulação. O estudo dos variantes de HPV é crucial para entender a sua distribuição geográfica e as diferenças biológicas desses vírus, contribuindo ainda para estudos sobre sua infectividade e patogenicidade. _________________________________________________________________________________ ABSTRACT / More than 100 HPV types have been described, of which 13 are classified as high-risk due to their association with the development of cervical cancer. The present study explores nucleotide variability and phylogeny of high-risk HPV-31, -33, -35, -52 and -58, isolated from samples from Distrito Federal. For this purpose, the LCR and E6 and L1 genes were sequenced. Several variants of these HPV types were detected, including 13 new variants among all types analyzed. The phylogenetic analysis of HPV- 31, -33, -35 and -58 isolates did not reveal any ethnic or geographical clustering, as observed previously for HPV-16 and -18. HPV-35 analysis showed a dichotomic branching characteristic of HPV subtypes. Interestingly, four clusters relative to the analysis of HPV-52 variants were identified, of which two could be classified as Asian and European branches. In addition, we compared E6/E7 promoter activity of HPV-58 molecular variants detected in Distrito Federal, since this is the second most frequent type detected among high-grade cervical lesions in this geographical area. For this porpouse, complete LCR sequences from HPV-58 prototype and three more variants were amplified, cloned upstream of the luciferase reporter gene and transiently transfected in C33 cells. For comparison, plasmids containing HPV-18 or -16 prototype LCR sequences were also analyzed. HPV-58 prototype and HPV-58 variants Bsb-329 and Bsb-327 showed promoter activity similar to HPV-16 but about six times lower than HPV-18. Interestingly, HPV-58 variant Bsb-295 presented a high promoter activity, even comparable to HPV-18. This HPV-58 variant is the only isolate in which we detected a substitution in nucleotide position 7788. Mutants were constructed by site-direct mutagenesis in order to analyze the impact of this nucleotide alteration on viral promoter activity. The introduction of the 7788 mutation in the HPV-58 prototype isolate led to a transcription activity similar to that observed for HPV-58 variant Bsb- 295 and HPV-18 prototype. Taken together, these data indicate that this single nucleotide variation is capable of enhancing viral promoter activity and could lead to a higher expression of E6 and E7 viral oncogenes in vivo. Nevertheless, additional studies are necessary to further identify cellular transcriptional factors involved in this regulation. The study of HPV variants is crucial to understand the intrinsic geographical relatedness and biological differences of these viruses and further contributes to studies concerning their infectivity and pathogenicity.
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Síntese e avaliação citotóxica de nitroderivados planejados a partir do SafrolNascente, Luciana de Camargo 08 1900 (has links)
Dissertação (mestrado)—Universidade de Brasília, Instituto de Química, 2009. / Submitted by Larissa Ferreira dos Angelos (ferreirangelos@gmail.com) on 2010-04-05T16:10:58Z
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Previous issue date: 2009-08 / Câncer é uma doença causada pelo crescimento desordenado de células que ocorrem em tecidos e órgãos, cujo desenvolvimento de novos agentes mais efetivos e menos tóxicos tem sido alvo de intensos estudos. Nitrocompostos aromáticos são bem conhecidos por serem ativados in situ em espécies radicalares, as quais induzem a formação de espécies reativas de oxigênio, especialmente radicais hidroxila, as quais têm apresentado atividade para linhagens de células com câncer. Descrevemos a síntese de novos nitroderivados planejados a partir do safrol e baseados no metronidazol bem como a avaliação da atividade citotóxica em linhagens células tumorais MDA-MB435 (melanoma), HL60 (leucemia), HCT-8 (cólon) e SF295 (glioblastoma). Os resultados apontam o grupo nitro como farmacofórico, onde espécies hidrofóbicas com logP acima de 1,55 apresentaram melhor perfil citotóxico. 4A (LDT-43), contendo subunidade metilenodioxola, mostrou atividade significante com valores de IC50 em concentração nanomolar para as linhagens: HL60 (10,81), SF295 (7,42), MDAMB-435 (10,48) e HCT-8 (6,68), enquanto 2B (LDT-171) e 4B (LDT-175), contendo subunidade dimetóxibenzeno, apresentaram melhor resultado para a linhagem HL60 com IC50 6,47 e 7,70, respectivamente. __________________________________________________________________________________________ ABSTRACT / Cancer is a disease caused by disorderly growth of cells that occurs to tissues and organs, where the development of more effective and less toxic drugs have been target of intensive studies. Aromatic nitrocompounds are well known to be activated in situ to radical species, which lead to the generation of reactive oxygen species, especially hydroxyl radicals, that have been showed activity in cancer cells lines. We describe the synthesis of new nitroderivatives designed from safrole and based on metronidazole as well as and their cytotoxic activity evaluation on tumor cells lines MDA-MB435 (melanoma), HL60 (leukemia), HCT-8 (colon) and SF295 (glioblastome). The results pointed out that nitro group as pharmacophoric, where hydrophobic species with logP above 1.55 showed the best cytotoxic profile. 4A (LDT-43), with methylenedioxole moiety, showed significant activity with IC50 values in nanomolar concentrations to the cell lines HL60 (10.81), SF295 (7.42), MDAMB-435 (10.48) e HCT-8 (6.68), while 2B (LDT-171) and 4B (LDT-175), with dimethoxybenzene moiety, showed the best results to the cell line HL60 with IC50 6.47 and 7.70, respectively.
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Diagnóstico por imagem na identificação de linfonodos metastáticos cervicais em pacientes com carcinoma espinocelular da cavidade oralFigueiredo, Paulo Tadeu de Souza January 2009 (has links)
Tese (doutorado)—Universidade de Brasília, Faculdade de Ciências da Saúde, 2009. / Submitted by Larissa Ferreira dos Angelos (ferreirangelos@gmail.com) on 2010-04-12T18:43:46Z
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Previous issue date: 2009 / O estadiamento das linfadenopatias cervicais pode ser considerado como um dos principais fatores de determinação do prognóstico do câncer de boca. Somente o exame clínico não é suficiente para avaliação do envolvimento de linfonodos no carcinoma espinocelular da cavidade oral. Por conseguinte, os exames por imagem oferecem informações importantes para adequada identificação de metástases cervicais. Visto que cirurgiões-dentistas e médicos geralmente são os responsáveis pelo diagnóstico inicial dos carcinomas da cavidade oral, torna-se importante comparar as diferenças nas avaliações entre os profissionais. O principal objetivo deste trabalho foi comparar o exame clínico, a tomografia computadorizada (TC) e a ressonância magnética (RM) para identificação de metástases em linfonodos cervicais. O estudo também examinou diferenças entre as avaliações de quatro radiologistas. A amostra foi composta de 10 pacientes com diagnóstico inicial de carcinoma espinocelular da cavidade oral, sem tratamento. Todos os pacientes realizaram exame clínico, TC e RM. Dois radiologistas odontológicos (observadores 1 e 2) e dois radiologistas médicos (observadores 3 e 4) avaliaram o estádio N e o número de linfonodos metastáticos na TC e na RM. Não houve associação entre a avaliação clínica e por imagem (na TC e na RM) do estádio N. Foram identificados mais linfonodos metastáticos na TC e na RM do que clinicamente. Comparando as análises dos quatro radiologistas, houve concordância na determinação do estádio N ( 2, p<0,05) e na identificação de linfonodos metastáticos (coeficiente de correlação intraclasse, p<0,05). A concordância foi maior entre os radiologistas odontológicos do que entre os radiologistas médicos, sendo que os radiologistas odontológicos identificaram mais linfonodos metastáticos na TC. O observador 3 detectou mais linfonodos metastáticos na TC, enquanto que o observador 4 identificou mais linfonodos na RM. _______________________________________________________________________________________ ABSTRACT / The staging of cervical lymphadenopathy may be considered one of the most significant factors in determining patients' prognosis. Clinical examination alone is not sufficient to evaluate lymph node involvement in oral squamous cell carcinoma. Therefore, imaging examinations provide key information for the adequate identification of cervical metastasis. As dentists and physicians generally perform the initial diagnosis of oral cancer, it is important to compare the evaluation differences of these professionals. The main aim of this study was to compare clinical examination, computed tomography (CT) and resonance magnetic imaging (MRI) for identifying cervical lymph node metastases. This work also verified the evaluation differences of CT and MRI between four radiologists. The sample consisted of ten patients with an initial diagnosis of squamous cell carcinoma of oral cavity without treatment. All of the selected patients underwent clinical, CT and MRI examinations. Two oral and maxillofacial radiologists - OMFRs (observer 1 and 2) and two medical radiologists (observer 3 and 4) analyzed all the examinations. The radiologists evaluated the N-Stage, and also counted the metastatic lymph nodes. No association was demonstrated between clinical and imaging (CT and MRI) staging evaluations. There were more clinically negative necks than revealed by CT and MRI. Comparing the four radiologists, there was concordance in determining the N-Stage ( 2, p<0,05), and also in identifying lymph node metastasis (intraclass correlation coefficiente, p<0,05). The concordance was higher between OMFRs than medical radiologists. OMFR were able to identify more negative lymph nodes in CT. The third observer detected more lymph node metastasis in CT, but the fourth identified more lymph nodes in MRI.
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Estudo da instabilidade de microssatélites no pólipo endometrial uterino / Microssatellite instability in endometrial polypsRios, Salete da Silva 01 September 2010 (has links)
Tese (doutorado)-Universidade de Brasília, Faculdade de Medicina, 2010. / Submitted by Shayane Marques Zica (marquacizh@uol.com.br) on 2011-02-25T20:22:22Z
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2010_SaletedaSilvaRios.pdf: 2330864 bytes, checksum: ba31c2ddc03194240de86fc8a653433b (MD5) / A instabilidade de microssatélites tem se mostrado importante na patogênese molecular do carcinoma de endométrio. Apesar do pólipo endometrial ter sido implicado com a neoplasia de endométrio, ainda não está claro se a instabilidade de microssatélites desempenha algum papel na gênese do pólipo endometrial uterino. O objetivo deste estudo foi estimar a prevalência da instabilidade de microssatélites no pólipo endometrial e avaliar se existem parâmetros clínicos e histopatológicos que possam estar associados a este tipo de instabilidade. Entre setembro/2008 a abril/2009, pólipos endometriais de 109 pacientes foram coletados. A instabilidade de microssatélites foi pesquisada utilizando-se os marcadores recomendados pelo National Câncer Institute (NCI), a saber BAT25, BAT26, D2S123, D5S346 e o D17S250. Foi realizada análise histopatológica e as informações clínicas foram obtidas dos prontuários das pacientes. Foram detectadas instabilidade de microssatélites em 7 das 109 amostras válidas (6.4%). Destas, 6 foram positivas para instabilidade com o marcador D17S250 e uma com o D5S346. Todas as amostras apresentaram baixa instabilidade. Não houve diferença na instabilidade de microssatélites com relação às seguintes variáveis: idade, índice de massa corpórea, menarca, paridade, abortamento, menopausa e uso de terapia de reposição hormonal. A instabilidade de microssatélites ocorreu mais freqüentemente em pólipos hiperplásicos (3/20;15%) do que em pólipos endometriais comuns (4/86;4.6%) e para pacientes com múltiplos pólipos houve um aumento marginal, porém estatisticamente não significante na freqüência de instabilidade de microssatélites (p>0. 07). Este é o primeiro estudo de instabilidade de microssatélites em pólipo endometrial uterino com uma amostra de 109 pacientes, com material obtido através de histeroscopia. A instabilidade genética foi infreqüente no pólipo endometrial uterino. Apesar desta alteração ter sido mais freqüente em pólipos hiperplásicos sem atipia e em múltiplos pólipos, isto não se demonstrou estatisticamente significante. Investigações adicionais e seguimento de longo prazo serão necessários para avaliar os resultados oncológicos destas pacientes. _______________________________________________________________________________ ABSTRACT / The Microsatellite instability (MSI) has been shown to be important in the molecular pathogenesis of endometrial carcinoma. However, although endometrial polyps have been associated with endometrial carcinoma, it is still unclear whether MSI may play a role in endometrial polyp. The objective of this study was to estimate the prevalence of MSI in endometrial polyp and to evaluate whether there are clinical and histopathological parameters that are associated with this kind of instability. Between September/2008 and April/2009, endometrial polyps were collected from 109 patients. MSI was evaluated using the National Cancer Institute-recommended markers BAT25-BAT26-D2S123-D5S346 and D17S250. Histopathological analysis was performed, and clinical information was obtained from patients’ records. MSI low was detected in 7/109 validated samples (6.4%). Of these, six were positive for instability at D17S250, while one at D5S346. There were no significant differences between endometrial polyps with and without MSI with regard to age, Body Mass Index, menarche, parity, miscarriage or menopause. However, MSI was more frequent in simple hyperplastic polyps without atypia (3/20; 15%) than in benign polyps (4/86; 4.6%) and, for patients with multiple polyps, had a marginal but statistically insignificant increase in the frequency of MSI (p<0.07). This is the first prospective study of MSI in endometrial polyp in a population of 109 patients with samples obtained by hysteroscopy. MSI was infrequent in endometrial polyps. Although MSI appears to be more frequent in multiple and/or simple hyperplastic polyps without atypia it was not statistically significant. Further investigations and long term follow up are required to evaluate the oncologic outcomes of such patients.
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Estudo randomizado comparando drenagem versus não drenagem após linfadenectomia axilar por câncer de mamaRibeiro, Luiz Fernando Jubé 09 April 2010 (has links)
Tese (doutorado)—Universidade de Brasília, Convênio Rede Centro - Oeste (UnB, UFG, UFMS), 2010. / Submitted by Albânia Cézar de Melo (albania@bce.unb.br) on 2011-06-07T15:57:20Z
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2010_LuizFernandoJubeRibeiro.pdf: 1212987 bytes, checksum: b7a758acf5d2007ef8f76223130c3656 (MD5) / Approved for entry into archive by Patrícia Nunes da Silva(patricia@bce.unb.br) on 2011-06-09T18:53:56Z (GMT) No. of bitstreams: 1
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2010_LuizFernandoJubeRibeiro.pdf: 1212987 bytes, checksum: b7a758acf5d2007ef8f76223130c3656 (MD5) / Introdução: A drenagem após linfadenectomia axilar reduz o número de punções evacuadoras
para o seroma; não obstante, gera desconforto e ansiedade para a paciente.
Objetivo: Avaliar a possibilidade de não se drenar a axila após linfadenectomia axilar em
pacientes com câncer de mama. Métodos: Estudo randomizado incluindo 240 pacientes, portadoras de câncer de mama, submetidas à linfadenectomia axilar, alocadas em dois grupos: drenagem e não drenagem do leito
operatório, como parte do tratamento de conservação mamária. Resultados: As características demográficas das pacientes foram semelhantes em ambos os grupos. Quanto às complicações, houve dois casos (2,4%) de deiscência no grupo com dreno, enquanto no grupo sem dreno, foram 13 (13,5%) casos (p=0,007, OR=3,70, IC95%= 1,31 – 13,59).
As taxas de infecção, necrose e hematoma foram semelhantes entre os dois grupos. A mediana de volume aspirado foi de 0,00ml (0,00 – 270,00) no grupo drenado e de 522,50ml (130,00 – 1148,75) (p<0,001) no grupo sem dreno. A mediana de aspirações realizadas foi de 0,5 (0,0 – 4,0) e 5,0 (3,0
– 7,0), para os grupos de dreno e sem dreno, respectivamente (p<0,001). O volume de fluido
seroso total foi semelhante nos dois grupos.
Conclusão: É factível a realização da linfadenectomia sem a drenagem axilar, uma vez que a taxa de segurança (número total de pacientes sem complicações) foi similar nos dois grupos estudados, porém com possibilidade do aumento do número de punções evacuadoras e de deiscência da
ferida operatória. ______________________________________________________________________________ ABSTRACT / Introduction: Drainage following axillary lymphadenectomy reduces the number of evacuating punctures for seroma. Nonetheless, it causes discomfort and anxiety for patients. Objective: To evaluate the possibility of not draining the axilla following axillary lymphadenectomy
for breast cancer patients. Methods: This randomized study included 240 breast cancer patients who underwent axillary lymphadenectomy as part of the breast conservation treatment. They were divided between two groups: with or without drainage of the operative bed. Results: The patients’ demographic characteristics were similar in the two groups. Regarding complications, there were two cases (2.4%) of dehiscence in the group with drainage, while there
were 13 cases (13.5%) in the group without drainage (p = 0.007, OR = 3.70, 95% CI = 1.31 – 13.59). The infection, necrosis and hematoma rates were similar between the two groups. The median aspirated volume was 0.00 ml (0.00 – 270.00) in the drained group and 522.50 ml (130.00 – 1148.75) (p < 0.001) in the group without drainage. The median number of aspirations performed as
part of the breast conservation treatment was 0.5 (0.0 – 4.0) and 5.0 (3.0 – 7.0), for the groups with and without drainage, respectively (p < 0.001). The volume of serous fluid was similar in the two
groups. Conclusion: It is feasible to perform lymphadenectomy without axillary drainage, since the safety rate (total number of patients without complications) was similar in the two groups studied; however a greater numbers of evacuating punctures and occurrences of dehiscence of the operative wound might be expected.
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