Orientador: Ramon Kaneno / Banca: Denise Fecchio / Banca: Priscila R. Martins / Banca: Orlando Ribeiro Filho / Resumo: Não disponível / Abstract: We have recently observed that treatment of colon tumor cells with low concentration of paclitaxel increased the expression of several genes associated with antigen-presenting machinery. Since 5-fluoruracil (5-FU) is the main antineoplastic agent for colon cancer, in this study we aimed to evaluate immunomodulatory properties analyzing: a) if the DC transfection with drug-treated tumor cells RNA, enhances the effectiveness of DC-based vaccine; b) if the modulatory effects of vaccine can be observed in vivo, and c) if the combination of DC with low dose chemotherapy schedule improves the antitumor responsiveness. To achieve these goals s.c. MC-38 bearing C57/Bl-6 mice were treated with DC sensitized with RNA from tumor cells pre-treated with the minimum effective concentration (MEC) of 5-fluorouracil. Our results of studies show that vaccination with tumor RNA-transfected DC delays the tumor growth, increases the percentage of CD86+ (35%) CD40+ (63%) and MHC class II+ (47%) DC and significantly increases the in vitro production of IFN-ɣ. These results suggest that treatment of tumor cells with 5-FU induces transcriptional changes that can be transfered to DC by RNA transfection, enhancing their ability to stimulate the antitumor response / Doutor

Orientador: Ramon Kaneno / Banca: Elaine Guadelupe Rodrigues / Banca: Daniela B. Kaneno / Resumo: O interferon alfa (IFN-α), um IFN do tipo I, se apresenta como uma citocina com grande potencial terapêutico, pois atua no combate direto às células tumorais, além de agir sobre a maturação de células dendríticas (DCs), que são células apresentadoras de antígenos profissionais e peças chave na elaboração da uma resposta antitumoral. Entretanto, a administração sistêmica de citocinas pode produzir toxicidade importante nos pacientes, de modo que a indução de sua produção in situ poderia representar uma forma de imunomodulação mais adequada. Assim, o objetivo deste estudo é verificar a ação de vetores lentivirais carregando o gene do IFN-α para transdução de células tumorais, permitindo assim a produção localizada de IFN-α, a fim de explorar, in vitro, seu potencial lítico e imunomodulatório sobre DCs. Vetores lentivirais carregando o gene do IFN-α humano (Lego-IFN) ou GFP (Lego-GFP) foram utilizados para a transdução in vitro de células de câncer colorretal. A transdução foi feita com diferentes multiplicidades de infecção (MOIs - 0.3, 1.0, 2.0, 4.0) para avaliarmos o efeito dose-dependente, seguido de co-cultura com DCs derivadas de monócitos de doadores saudáveis (DC-0.3, DC-1.0, DC-2.0, DC-4.0). Após 48h de co-cultura, as DCs foram avaliadas fenotípica e funcionalmente, através da análise dos marcadores de membrana por citometria de fluxo, capacidade de aloestimulação e de indução de linfócitos T citotóxicos (CTLs). Nós observamos que a transdução com Lego-GFP, mas não com Lego-IFN, aumentou a imunogenicidade das células tumorais, com aumento de expressão de CD54 e HLA-DR. A co-cultura de DCs com células tumorais transduzidas com Lego-IFN aumentou discretamente seu perfil de ativação, mas não seu potencial aloestimulatório in vitro. Observamos que linfócitos cultivados com DC-2.0 produziram níveis mais altos de IFN-γ, sugerindo a indução de um perfil Th1, enquanto que... / Abstract: Interferon alpha (IFN-α) is a type I IFN with great therapeutic potential, since it is able to directly fight tumor cells and enhance the maturation of dendritic cells (DCs), the main antigen-presenting cells, required for an effective antitumor response. However, the systemic administration of cytokines can induce severe collateral effects. Therefore, the induction of cytokine secretion in situ should represent a more adequate approach for cytokine-based immunotherapy. Thus, the goal of this study was to induce IFN-α secretion by colon cancer cells by transduction with a lentivirus vector carrying the human IFN-α gene, followed by analysis of its immunomodulatory potential over DCs. Transduction was made with different multiplicities of infection (MOIs - 0.3, 1.0, 2.0 and 4.0) to evaluate the dose-dependent effects. Such cells were co-cultured with monocyte-derived DCs from healthy donors (DC-0.3, DC-1.0, DC-2.0 and DC-4.0). Forty-eight hours later, DCs were evaluated for their phenotype (surface activation/maturation markers) by flow cytometry, their ability to induce allogeneic response in a mixed leukocyte reaction (MLR) and effectiveness to induce cytotoxic T cells. We observed that transduction with Lego-GFP, but not Lego-IFN, increased tumor cells' immunogenicity with up-regulation of the markers CD54 and HLA-DR. Co-culture of Lego-IFN-transduced tumor cells with DCs slightly enhanced their activation phenotype but not their potential to stimulate T cell proliferation in vitro. Furthermore, we observed that lymphocytes cultured with DC-2.0 produced higher levels of IFN-γ, suggesting an induction of Th1 profile on T cells, while DC-GFP induced more IL-10 and IL-4. Additionally, DC-4.0 was more efficient in generating cytotoxic T lymphocytes (CTLs) that the control DC, however DC-GFP induced even more CD8+T cell proliferation. The enhancement of tumor cell immunogenicity and the superior induction of CLTs ... / Mestre

Orientador : Christiane Pienna Soares / Coorientador: Valeria Valente / Banca: Raquel Alves dos Santos / Banca: Cleverton Roberto de Andrade / Resumo: O câncer de colo de útero é um problema de saúde pública mundial, especialmente nos países em desenvolvimento, configurando a quarta neoplasia feminina mais comum no mundo. A infecção pelo Papilomavírus Humano (HPV) é o principal fator de risco para o desenvolvimento do referido câncer, estando presente em 90% dos casos de câncer de colo uterino na população mundial. Frente a busca por novos agentes quimioterapêuticos, os produtos naturais tem contríbuido intensamente para a identificação dessas substâncias e o desenvolvimento da terapêutica moderna. Maitenina, é um triterpeno quinonametídeo extraído das raízes da plana Maytenus ilicifolia, que possui algumas atividades biológicas já relatadas, como antifúngica, antiprotozoária e principalmente ação antitumoral. No momento não existem relatos na literatura relacionando a atividade da maitenina em células infectadas por HPV-16. O objetivo do presente estudo foi avaliar a citotoxicidade da maitenina em linhagem de carcinoma cervical infectada por HPV-16 (SiHa), não-infectada pelo vírus (C-33 A) e queratinócitos humanos imortalizados (HaCaT), bem como verificar a indução de apoptose e/ou necrose pelo ensaio de Hoechst e Iodeto de Propídeo e indução de apoptose pela atividade de caspase-3 nas três linhagens celulares, além de verificar alterações no ciclo celular das células tratadas com maitenina e o potencial de genotoxicidade e mutagenicidade, além de avaliar a proliferação das três linhagens. O ensaio de citotoxicidade foi realizado pelo método da sulforodamina B, e as três linhagens celulares foram tratadas durante 6, 12 ou 24 horas. Foi possível observar um efeito concentração e tempo resposta nas três linhagens analisadas. O CI50 foi de 3,26, 8,49 e 3,09 μM para as linhagens SiHa, C-33 A e HaCaT respectivamente, no tempo de tratamento de 24 horas. Com o intuito de avaliar o potencial efeito indutor de apoptose foi realizado o ensaio... / Abstract: Cervical cancer is a worldwide public health problem, especially in developing countries, setting the fourth most common female cancer in the world. The infection by human papillomavirus (HPV) is the main risk factor for the development of this cancer, being present in 90% of cases of cervical cancer in the world population. Forward the search for new chemotherapeutic agents, natural products have strongly contributed to the identification of these substances and the development of modern therapeutics. Maytenin is a quinonemethide triterpene extracted from the roots of Maytenus ilicifolia plant, which has some biological activities previously reported as an antifungal, antiprotozoal and especially antitumor action. At the moment there are no reports in the literature relating the activity of maytenin in infected cells by HPV-16. The aim of this study was to evaluate the cytotoxicity of maytenin in cervical carcinoma line infected by HPV-16 (SiHa), non-infected by the virus (C-33 A) and by immortalized human keratinocytes (HaCaT), as well as verifying the induction of apoptosis and / or necrosis by Hoechst test and propidium iodide and the induction of apoptosis by caspase-3 activity in all three cell lines, in addition to check for changes in the cell cycle of treated cells with maytenin and the potential of genotoxicity and mutagenicity, and to evaluate the proliferation of the three cell lines. The cytotoxicity assay was performed by sulforhodamine B method and the three cell lines were treated during 6, 12 or 24 hours. It was possible to observe a concentration effect and response time in three lines analyzed. The IC50 was 3,26, 8,49 and 3,09 μM for SiHa, C-33 A and HaCaT lines respectively, in 24 hours treatment time. In order to evaluate the potential inductive effect of apoptosis it was performed a marking cytomorphological test with Hoechst and propidium iodide in 6 and 12 hours treatment times, and for the three cell lines it was ... / Mestre

Orientador: Sérgio Luis Felisbino / Coorientador: Elenice Deffune / Banca: Sylvia Stuchi Maria-Engler / Banca: Rosana Rossi-Ferreira / Banca: Patrícia Pintor dos Reis / Banca: Wagner José Favaro / Banca: José Andrés Yunes / Banca: José Roberto Bosqueiro / Banca: José Carlos Souza Trindade Filho / Resumo: O câncer de próstata (CaP) é importante causa de morte no mundo. Além do óbvio impacto na vida pessoal do paciente e na sua família, no Brasil esta doença gera custos altíssimos para o Sistema Único de Saúde (SUS), desde o diagnóstico até o óbito. As terapias disponíveis, além de causarem complicações e efeitos colaterais indesejáveis, não proporcionam sobrevida alta ao paciente. Além disso, os casos de cura são restritos aos diagnosticados precocemente, e com intervenção rápida, antes que o tumor se torne resistente à castração química. Neste sentido, estratégias preventivas são desejáveis para a diminuição da incidência e óbitos e, dentre elas, o uso da finasterida, um fármaco inibitório da enzima 5-α-redutase, foi proposto como potencial agente quimiopreventivo após estudo conduzido pelo Prostate Cancer Prevention Trial, que demonstrou significante diminuição na incidência de CaP no grupo de pacientes tratados, em comparação ao grupo controle. No entanto, mesmo com resultados promissores, foi detectado aumento, também significante, do número de casos de cânceres mais agressivos (alto grau) no grupo de pacientes que recebeu finasterida, em comparação aos pacientes do grupo controle. Após intenso debate entre urologistas, biologistas e cancerologistas, ainda não há consenso sobre a natureza artefatual ou de real indução de cânceres mais agressivos pela finasterida. O órgão regulatório americano Food and Drugs Administration (FDA) declarou que o aumento dos casos agressivos pela finasterida não deve ser negligenciado, e recentemente proibiu o uso deste fármaco como quimiopreventivo para o CaP. Uma vez que casos agressivos de câncer estão comumente relacionados à superexpressão de enzimas... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: Prostate cancer (PCa) is an important death cause in Brazil and other countries. Besides the obvious impact at patient's life, and their relatives, this disease consumes exorbitant resources from the Sistema Único de Saúde (SUS), from diagnosis to death. The available therapies not only cause undesirable complications and side effects, but also are inefficient at providing good survival expectancies for those affected. Moreover, the cure is only possible when the tumors are readily found and when the intervention is fast enough to prevent that the tumor become castration-resistant. In this sense, preventive strategies are desirable in order to lower incidence and death, and amongst them, finasteride (Fin) treatment, an inhibitor of the 5-alpha reductase enzyme, was proposed as a potential chemopreventive agent after the study conducted by the Prostate Cancer Prevention Trial reported a significant lower incidence of PCa cases on Fin-treated patients, when compared to control patients. However, even though these results were promising, this study also reported a significant increase on more aggressive, high-grade PCa, amongst Fin-treated patients, compared to those not exposed to Fin. After an intense debate about factual or artifactual Fin-induced high-grade PCa cases, between urologists, biologists and oncologists, there are still no decisive conclusions on this matter. The regulatory USA organ, Food and Drugs Administration (FDA), has recently declared that the higher incidence of a more serious form of PCa at the Fin-treated patients must not be neglected, and prohibited its use as a chemopreventive agent. Given that the aggressive cancer cases are commonly associated with the super-expression of matrix metalloproteinases (MMPs) enzymes, with consequently higher invasion and migration potential of tumor... (Complete abstract click electronic access below) / Doutor

Orientador: Rogério Saad-Hossne / Banca: Fábio Vieira Teixeira / Banca: Odair Carlito Michelin / Resumo: O câncer colorretal é o segundo câncer mais comum com 2,4 milhões de pessoas diagnosticadas. Desses casos, 27% são neoplasias retais (NR). Quimiorradioterapia neoadjuvante (QRTN) tornou-se padrão nestes casos, mas trouxe controvérsia no tratamento adjuvante. O objetivo foi avaliar o impacto da resposta patológica completa (RPC). Além disso, investigamos a influência da quimioterapia adjuvante (QADJ) após QRTN, biópsia, tempo entre QRTN e cirurgia e ausência de cirurgia após QRTN. Métodos: Entre mar/96 e Out/2010, 84 pacientes receberam QRTN, 58 foram submetidos à ressecção retal (RR). A QRTN consistiu de 5-FU em bolus, na primeira e na quinta semana das 25 sessões de radioterapia (RT) no acelerador linear (total 45 - 50 Gy). A biópsia foi feita de acordo com a opção do cirurgião após a RT. A cirurgia (excisão mesorretal total - TME), foi realizada idealmente 8 semanas após a QRTN. Aqueles não submetidos à cirurgia, também foram seguidos. Quando realizada, a QADJ consistiu de 5-FU no D1-D5 por 4 ciclos. Avaliação da sobrevida global (SG) e sobrevida livre de doença (SLD) foi realizada com uso da curva de Kaplan-Meier. Resultados: Dos 58 pacientes submetidos à cirurgia, 90% eram estágio II, 51% ocorreram no reto inferior e 66% eram ECOG 1. RPC foi obtida em 25,8% (15) dos casos. Destes, 20% (3) receberam QADJ. Pacientes sem RPC receberam QADJ em 51% dos casos (22). O tempo médio de seguimento foi de 41 meses. Tanto o SLD (p = 0,024) e SG (p = 0,0488) foram maiores em pacientes com RPC independente do uso de QADJ. Por outro lado, o uso de QADJ vs sem QADJ, independente da presença de RPC, não alterou significativamente a SLD (p = 0,74) ou SG (p = 0,32). Em pacientes com RPC, QADJ não interferiu nos desfechos (SLD, p = 0,76; SG, p = 0,73). No grupo dos pacientes sem RPC, o subgrupo com QADJ... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: Colorectal cancer is the second most common cancer with 2,4 million people diagnosed. The rectal cancer (RC) is 27% of these cases. Neoadjuvant chemoradiotherapy (NCRT) has become standard but brought controversy in the adjuvant treatment. The objective was to assess the impact of Pathologic Complete Response (pCR). Furthermore, we investigated the influence of adjuvant chemotherapy (ADJC) after NCRT, biopsy and time between NCRT and surgery, and the absence of surgery after NCRT. Methods: Between mar/96 and Oct/2010, 84 patients received NCRT, and 58 patients underwent resection of the rectum. The NCRT consisted of 5- Fluorouracil (5-FU) and Leucovorin (LV) bolus in the 1st and 5th week of the 25 sessions of radiotherapy (RT) in linear accelerator (total 45 - 50 Gy). Biopsy was made according to the surgeon option after RT. Ideally surgery (Total mesorretal excision - TME) was performed after 8 weeks NCRT ends. Those not undergoing surgery, were followed too. When performed, Adjuvant Chemotherapy (ADJC) consisted of 5-FU and LV bolus on D1-D5 for 4 cycles. Evaluation of Overall Survival (O.S) and Disease-Free Survival (DFS) performed using Kaplan-Meier curve. Results: Of the 58 patients who underwent surgery, 90% were stage II, 51% occurred in the lower rectum, 66% were ECOG 1 and pCR was obtained in 25.8% (15) of patients (group 1). Of these, 20% (3) received ADJC. Patients without PCR (group 2) received ADJC in 51% of the cases (22). The mean follow-up was 41 months. Both the DFS (p = 0.024) and OS (p = 0.0488) were higher in patients with pPCR independent of the use of ADJC. Patients treated with ADJC vs without ADJC, independent of presence of pCR, did not alter DFS (p = 0.74) or OS (p = 0.32). In pCR patients, ADJC do not interfere in the outcome... (Complete abstract click electronic access below) / Mestre

Orientador: Kátia Sivieri / Banca: Luís Fernando Barbisan / Banca: Fernanda Lopes Kinoushi / Banca: Luis Vitor Silva do Sacramento / Banca: Ana Lúcia Martiniano Nasser / Resumo: Ocâncer de cólon e reto representa a terceira causa mais comum de câncer no mundo, sendo que pesquisas apontam ação benéfica dos probióticos, prebióticos e simbióticos no câncer de cólon. O objetivo desta pesquisa foi definir as etapas da carcinogênese de cólon que são mais afetadas pelo consumo de extrato aquoso de yacon, Lactobacillus acidophilus CRL 1014 e extrato aquoso de yacon + Lactobacillus acidophilus CRL 1014 em ratos induzidos quimicamente ao câncer de cólon com 1,2-dimetilhidrazina (DMH). Cem ratos Wistar machos foram divididos aleatoriamente em cinco tratamentos: G1: ratos não tratados; G2: DMH; G3 (probiótico): DMH + L. acidophilus CRL 1014; G4 (prebiótico): DMH + extrato aquoso de yacon; G5 (simbiótico): DMH + L. acidophilus CRL 1014 + extrato aquoso de yacon. Todos os tratamentos foram administrados via oral durante 8 meses, sendo que o L. acidophilus CRL 1014 foi administrado na quantidade de 3 mL/ kg de peso/ dia na concentração de 109 UFC/ mL e o extrato aquoso de yacon administrado foi calculado em relação ao seu conteúdo de frutooligossacarídeos (FOS). Os animais ingeriram 10% de FOS na dieta. A concentração de FOS no extrato aquoso de yacon foi previamente determinada utilizando kit enzimático (Megazyme®). Cinco animais pertencentes a cada grupo experimental foram sacrificados após a primeira administração de DMH, no terceiro, quinto e oitavo meses. Os tecidos foram submetidos à análise macroscópica, verificando-se o número e volume de massa tumorais, análise de focos de criptas aberrantes (FCA), análise histológica do tecido, ensaio cometa em amostras de sangue periférico, índice de apoptose, imunohistoquímica para p53 e Ki-67. Houve redução no dano no DNA nos tratamentos G3, G4 e G5. Os grupos G5 e G4 apresentaram aumento no índice de apoptose e diminuição da proliferação celular em relação ao G2 (p<0.05). Não houve diferença na marcação de p53 nos grupos G3, G4 e G5 ... / Abstract: Colorectal cancer is the third commonest type of cancer in both sexes in the world. Research suggests beneficial effects of consuming probiotics and prebiotics on colon cancer. The aim of this project was to define the phases of the development of colon cancer that are more affected by aqueous yacon extract, Lactobacillus acidophilus CRL 1014 and aqueous yacon extract + Lactobacillus acidophilus CRL 1014 ingested by rats chemically treated with 1,2 dimethylhydrazine (DMH) to induce colon cancer. Hundred male Wistar rats were randomly divided into five treatments: G1: untreated rats; G2: DMH; G3 (probiotic): DMH + L. acidophilus CRL 1014; G4 (prebiotic): DMH + aqueous yacon extract; G5 (synbiotic): DMH + L. acidophilus CRL 1014 + aqueous yacon extract. All treatments were administered orally for 8 months, L. acidophilus CRL 1014 was administered at 109 CFU/ mL in 3 mL/ kg body weight and amount of aqueous yacon extract administered was calculated in relation of its fructooligosaccharides (FOS) content using fructan assay kit (Megazyme®). Animals ingested 10% of FOS in diet. Five animals from each treatment group were sacrificed after the first DMH injection and in the third, fifth and eighth months. Tissues were subjected to macroscopic analysis, measuring polyp number, volume and thickness, aberrant crypt foci (ACF) analysis, histological tissue analysis, comet assay in peripheral blood, apoptosis index, and colon samples from the first sacrifice were assessed for K-67 and p53 by immunohistochemical procedures. G3, G4 and G5 showed DNA damage reduction. G5 and G3 groups showed higher apoptosis index and decrease of Ki-67, compared to G2 (p<0.05). p53 staining did not differ among G2, G3, G4, G5. G5 showed fewer ACF number per colon in third month and in the fifth month G3, G4 and G5 showed a reduction of ACF number per colon relative to G2 (p<0.05). In the last month, G3, G4 and G5 showed no effect on ACF number per colon relative to G2.. / Doutor

Orientador: Luís Fernando Barbisan / Banca: Daniel Araki Ribeiro / Banca: Luiza Cristina Godim Domingues Dias / Resumo: O carcinoma hepatocelular (CHC) é o quinto mais frequente na população humana comum e o terceiro em mortalidade no mundo, evidenciando a necessidade de modelos biológicos para avaliação de fatores de risco, prevenção e tratamento desta malignidade. Existem vários modelos experimentais para o estudo da hepatocarcinogênese que utilizam substâncias químicas como a dietinitrosamina (DEN), agente iniciador da carcinogênese, e o tetracloreto de carbono (CCl4), agente promotor. Vários tipos celulares têm a capacidade de sintetizar/metabolizar e/ou serem estimuladas pela vitamina D (VD), incluindo as células hepáticas. Com isso, existe interesse em associar a deficiência de VD ao desenvolvimento de doenças hepáticas, incluindo o CHC. Desta forma, o presente estudo foi conduzido para avaliar o efeito da suplementação com VD3 (VD circulante) sobre o desenvolvimento de lesões pré-neoplásicas (LPN) induzidas no modelo DEN/CCl4 em ratos Wistar. Os animais foram randomicamente alocados em seis grupos experimentais (n=15/grupo): G1: animais não tratados, G2: animais iniciados com dose única intraperitoneal (i.p.) de 200 mg/kg de DEN e aplicações intragástricas (i.g.) semanais de 1,0 ml/kg de CCl4 até o final da 18ª semana do experimento; G3 a G6: os animais foram submetidos ao protocolo DEN/CCl4 e receberam em dias alternados doses i.g. de 250, 500, 1000 e 1500 μg/kg de VD3, respectivamente, durante dezesseis semanas. No final da 18ª semana do experimento, os animais foram eutanaziados e o sangue (dosagens séricas de AST e 25OHD) e fígado (detecção de LPN glutationa S-transferase positivas (GST-P+), hepatócitos Ki-67 positivos e expressão protéica do receptor da VD (VDR)) foram analisados. Os grupos que receberam as doses de 1000 e 1500 μg/kg de VD3 apresentaram menor evolução de peso corpóreo e ingestão de ração (p< 0,001) e maiores valores de peso hepático relativo e de níveis séricos ... / Abstract: Hepatocellular carcinoma (HCC) is the fifth most frequent cancer worldwide, ranking third among all cancer-related mortalities in the world, indicating the importance to development of bioassays for evaluation of risk factors, prevention and treatment this malignancy. There are several animal models for the study of hepatocarcinogenesis using chemicals such as diethylnitrosamine (DEN), as an initiator for carcinogenesis, and carbon tetrachloride (CCl4) as a promoting agent. Various cell types have the capacity to synthesize/metabolize and/or it are stimulated by vitamin D (VD), including hepatocytes. Thus, there is a crescent evidence for relationship between VD deficiency and the development of liver disease, including HCC. Therefore, this study was conducted to evaluate the beneficial effect of VD3 supplementation on development of preneoplastic lesions (PNL) in the DEN/CCl4 model. Male Wistar rats were randomly divided into six groups (15 animals each). G1: untreated control group; G2-G6: groups received a single i.p. dose of diethylnitrosamine (DEN) and weekly intragastric administrations (i.g.) of carbon tetrachloride (CCl4); G3-G6: groups were submitted to DEN/CCl4 protocol and received VD3 supplementation at doses of 250, 500, 1000 and 1500 μg/kg, i.g., respectively, on alternate days for 16 weeks. At the end of week 18, the animals were euthanized and blood (AST and VD3 serum levels analysis) and liver (placental glutathione S-trasferase (GST-P)-positive PNL, KI-67 cell proliferation and vitamin D receptor (VDR) analysis) samples were collected. Groups receiving 1000 and 1500 μg/kg vitamin D3 presented significantly lower mean body weight evolution and food intake (p <0,001) but a increase (p <0,001, p < 0,001) in relative liver weight and VD3 serum levels in relation to groups G1 and G2. The total number of GST-P-positive LPN per area (mm2) did not differ between the DEN-initiated groups, but the ... / Mestre

Sistemas parentais são construídos através das interações no cotidiano dos pais com seus filhos e com base nos padrões culturais vigentes, dentro de um perfil socioeconômico e da história de vida dos indivíduos. Importantes componentes dos sistemas parentais são as metas de socialização e as práticas educativas. As metas de socialização se referem a como os pais desejam que seus filhos sejam no futuro, àquilo que eles esperam que sua criação ajude a promover em seus filhos. Já as práticas educativas são as práticas de comunicar à criança a forma correta com que se espera que ela se comporte. A revisão bibliográfica evidencia que as metas de socialização e práticas educativas são afetadas pelo ambiente cultural dos cuidadores e por variáveis socioeconômicas, mas não há estudos a respeito de possíveis impactos causados por situações de vida particularmente difíceis. A presente dissertação se propôs a examinar as metas de socialização e práticas educativas de mães cujos filhos estão em tratamento oncológico, contrastando-as com as de mães de crianças saudáveis. Nesse sentido, o objetivo estabelecido foi o de investigar se havia particularidades nas metas de socialização e formas de cuidado de mães com filhos que tenham câncer devido à situação específica vivida de um tratamento oncológico. Hipotetizou-se que a vivência da experiência do câncer e a inserção em uma instituição de tratamento, no caso, o Instituto Nacional do Câncer (INCA), teriam impacto no sistema de cuidados e metas parentais. Participaram deste estudo 20 mães de crianças de três a cinco anos que estavam em tratamento oncológico no INCA e 20 mães de crianças na mesma faixa etária sem problemas de saúde diagnosticados. Todas assinaram o Termo de Consentimento Livre e Esclarecido. Foram aplicados os formulários "Dados de identificação" e "Dados sociodemográficos", e o Questionário de Metas de Socialização. Foi também realizada com as mães uma entrevista semiestruturada, com questões abertas que buscaram investigar práticas educativas. A análise de dados contemplou uma parte de análises quantitativas em que os dados foram tratados descritivamente (médias, percentuais etc.) e empregados testes não-paramétricos para comparação entre os grupos de mães. Análises qualitativas, voltadas para as respostas ao questionário de metas de socialização e à entrevista sobre práticas de cuidado educativas foram realizadas através do método de análise de conteúdo temático-categorial. Encontrou-se que as metas de socialização das mães de crianças em tratamento oncológico apresentaram diferenças em relação às das mães de crianças sem diagnóstico de doença, refletindo uma tendência mais individualista. Também foram encontradas diferenças entre os dois grupos nas ações para atingir as metas, sendo visto um uso menor da estratégia educar e orientar por parte do grupo das mães de crianças em tratamento no INCA, refletindo uma tendência mais pragmática. Quanto às práticas educativas não foram encontradas diferenças significativas entre os dois grupos. Espera-se que esse estudo traga contribuições para a formulação de programas de intervenção, para pais e cuidadores, através da melhor compreensão das metas e práticas maternas utilizadas nesta situação particular e de grande dificuldade para as crianças e suas famílias / Parental systems are built by means of the interactions between parents and children along their daily life and on the basis of the prevailing cultural patterns within a socioeconomic profile and life story of the individuals. Important components of the parental systems are the socialization goals and educational practices. The socialization goals refer to how parents want their children to be in the future and what they expect their rearing will help to promote. On the other hand, the educational practices are the process of communicating the correct way in which the child is expected to behave. The literature review evidences that socialization goals and educational practices are affected by the cultural environment of caregivers and by socioeconomics variables, but there are no studies that concerns the possible impacts caused by particularly difficult life situations. This work aims at examining the socialization goals and educational practices of mothers whose children are undergoing cancer treatment, contrasting them with those of mothers of healthy children. In this sense, objective was established on investigating if there were peculiarities in socialization goals and care practices of mothers of children who have cancer due to the specific situation of facing a cancer treatment. It was hypothesized that the life experience of cancer treatment in a health institution, in this case, the National Institute of Cancer (INCA) would impact the care and goals parental system. The study accessed 20 mothers of children age three to five who were undergoing cancer treatment at INCA and 20 mothers of children in the same age group without diagnosed health problems. All signed an Informed Term of Consent. Forms for Identification Data and for Demographic Data and a Questionnaire of Socialization Goals were filled by the mothers. It was also held a semi-structured interview with the mothers, with open questions that sought to investigate educational practices. Data analysis included a quantitative analysis in which, after a descriptive treatment of the data by average, percentages etc. non parametric tests for comparisons between the groups of mother were applied. Besides, a qualitative analysis, with focus on the answers to the Questionnaire of Socialization Goals and the interview on educational care practices, was performed using the method of categorical thematic analysis. It was found that the socialization goals of mothers of children undergoing cancer treatment are different from those of mothers of children with no diagnosis of disease, reflecting more individualistic features. Differences between the two groups were also found in respect to the actions used to achieve the goals, observing less use of the strategy educate and orientate by the groups of mother of children being treated in INCA, reflecting a more pragmatic tendency. For the educational practices, no meaningful differences between the two groups were detected. It is expected that the results obtained can contribute to the development of intervention programs for parents and caregivers, by the best understanding of their goals and actions used in this particular and very difficult situation for the children and their families

Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / Considerando que a geração de informações é essencial para a orientação de políticas assistenciais e de controle do câncer, este estudo tem como objetivo analisar a mortalidade por câncer no Estado do Rio de Janeiro com base nas características relativas à localização anatômica, a idade, ao sexo e a procedência. Os dados sobre óbitos foram obtidos no Subsistema de Informações sobre mortalidade do Ministério da Saúde relativos aos anos de 1979 a 1986. Os dados populacionais tiveram como fonte o Censo Demográfico de 1980, as Pesquisas Nacionais por Amostra de Domicílios (PNADs) de 1979, 1981-1986 da FIBGE e o Anuário Estatístico do Estado do Rio de Janeiro da Secretaria de Estado de Planejamento - 1988. A análise do período estudado evidencia que a freqüência relativa dos óbitos por câncer no Estado se acha em padrão intermediário ao observado mundialmente. A evolução das taxas de mortalidade para o total de cânceres permite observar um discreto declínio. Quando os dados são desagregados por grupos etários e pela Região Metropolitana e interior do Estado notam-se diferentes tendências para as localizações anatômicas mais frequentes. Ressalta-se, assim, que as taxas de mortalidade por câncer em geral são maiores na Região Metropolitana que no interior. No caso do câncer de estômago e de esôfago em homens, o interior mostrou taxas de mortalidade mais elevadas. Para o câncer de colo de útero as duas regiões estudadas apresentaram taxas muito próximas e com tendência a estabilidade. A mortalidade por câncer de pulmão, que para todo o Estado manteve-se sem grandes flutuações em ambos os sexos, teve taxas ligeiramente ascendentes principalmente entre as mulheres do interior. Os achados descritos neste estudo apontam para a necessidade da condução de pesquisas que possam analisar os diferentes padrões de risco aos quais está exposta a população fluminense.

Atualmente tem se discutido uma possível relação entre obesidade e câncer de próstata. No entanto, a obesidade está associada a desordens multifatoriais (hiperglicemia, hiperinsulinemia, dislipidemia, inflamação) e avaliar o impacto delas em células normais e tumorais é de grande relevância para a elaboração de estratégias terapêuticas. A metformina é uma droga antidiabética que apresenta efeitos antiproliferativos e tem sido apontada como tratamento para o câncer. Entretanto, sua eficiência em condições de intenso estímulo proliferativo ainda é desconhecida. Assim, este estudo objetivou analisar o efeito de altas concentrações de ácido graxo e/ou insulina, com ou sem metformina,em células normais e tumorais de próstata, com ênfase no perfil de proliferação e migração destas células. Foram utilizadas duas linhagens de células epiteliais humanas de próstata, sendo elas normais (PNT1A) e tumorais (PC3). Estas células foram tratadas com altas concentrações de ácido graxo saturado (100 gM palmitato, HF), e/ou insulina (50gU), na presença ou ausência de metformina (100 gM), por 24hrs ou 48hrs. Posteriormente, estas células foram submetidas às análises de apoptose, viabilidade/proliferação celular (MTT), migração e imunofluorescência para vimentina. Os resultados mostram que, de maneira geral, os tratamentos nas concentrações usadas não causaram morte celular nas células estudadas. O MTT revelou que as células PNT1A e PC3 proliferaram em maior quantidade quando tratadas com altas concentrações de ácido graxos (HF) e de insulina (HI) após as primeiras horas de tratamento. O mesmo resultado não foi observado para o grupo HFI. A metformina por si só estimulou a proliferação celular, mas em associação à HF foi capaz de reduzi-la em ambas as linhagens. Contudo, ela não inibiu a proliferação celular desencadeada por HI nas células normais.As análises de migração mostraram que PNT1A foram estimuladas a migrar para todos os tratamentos, enquanto PC3 foi influenciada somente por HF. A metformina inibiu a migração estimulada por todos eles. Em paralelo à migração, foi observado que os tratamentos HF e HI para PNT1A e HF para PC3 estimularam a maior expressão de vimentina, demonstrando maior transição epitélio mesenquima nessas células, e, consequentemente, estimulando a migração celular. A metformina inibiu a expressão de vimentina estimulada pelos meios tanto nas células normais como nas tumorais. Assim, conclui-se que as altas concentrações de ácido graxo saturado e insulina interferem nas células prostáticas estimulando atividades celulares que sabidamente influenciam na carcinogênese, tais como proliferação e migração celular.A metformina foi capaz de reverter boa parte das alterações estimuladas por esses meios, se mostrando uma boa ferramenta no controle da proliferação e migração celular em situações de hiperlipidemia e hiperinsulinemia. Assim, o potencial dessa droga para a terapia de pacientes obesos que sabidamente apresentam maior risco para câncer de próstata deverá ser investigado. / A potential association between obesity and prostate cancer has been proposed by several studies. Obesity is related with multifactorial disorders, such as hyperglycemia, hyperinsulinaemia, dyslipidemia, and inflammation. Regarding the impact of such disorders on normal and tumor cells is of great relevance for the development of therapeutic strategies. Metformin, an antidiabetic drug, has antiproliferative effects, being proposed as a cancer treatment. However, under intense proliferative stimulation conditions, its efficiency is still uncertain. The main objective of the present study was to analyze the effects of fatty acid and/or insulin under high concentrations, in the presence or not of metformin, on normal and prostate tumor cells, regarding their proliferation and migration profile. Two human prostate epithelial cell lines were used: non cancer (PNT1A) and tumor (PC3). These cells were treated with high concentrations of saturated fatty acid (100 gM palmitate, HF), and/or insulin (50 gU) in the presence or absence of metformin (100 gM) for 24 or 48 hours. After treatments we performed analyzes for caspase, cell viability/proliferation (MTT), migration and immunofluorescence for vimentin. The results showed that the concentration of all treatments was not cytotoxic. MTT revealed that PNT1A and PC3 cells had higher proliferation when treated with HF and HI after the first few hours of treatment. Similar results were not found for the HFI group. Metformin alone has stimulated cell proliferation, but in association with HF, has reduced it in both cell lines. However it did not inhibit the proliferative action of HI in PNT1A cells. Migration analyzes showed that PNT1A were stimulated to migrate after all treatments, whilst PC3 was influenced only by HF and that metformin inhibited the migration stimulated by all of them. Both HF and HI treatments in PNT1A and HF in PC3 stimulated greater vimentin expression, resulting in a larger epithelium-mesenchymal transition in these cells, which, in turns, has stimulated cell migration. Metformin inhibited vimentin expression in both normal and tumor cells. It is possible to conclude that higher concentrations of saturated fatty acid and insulin influence prostatic cells, stimulating cellular activities that could trigger carcinogenesis and/or sustain cancer progression, such as cell proliferation and migration. Most of these stimuli were inhibited by using Metformin, being efficient in the control of cell proliferation and migration in conditions of hyperlipidemia and hyperinsulinemia. Thus, the efficiency of this drug for obese patients therapy, which is a potential group for prostrate cancer risk, should be investigated. / Dissertação (Mestrado)