Los sistemas de defensa de procariotas denominados CRISPR–Cas dan lugar a la formación de un complejo nucleoproteico compuesto por proteínas Cas y un ARN guía derivado de las regiones CRISPR que se encarga de interferir en la propagación de elementos genéticos móviles a través de la degradación mediada por nucleasas Cas de secuencias foráneas que coinciden con los ARN guía. La fácil reprogramación de la guía ha propiciado el desarrollo de un arsenal de herramientas para la modificación y manipulación de ácidos nucleicos, cuyas aplicaciones superan con creces la utilización implementada inicialmente para la proteína Cas9 de Streptococcus pyogenes como editor del ADN. En un intento de paliar las limitaciones encontradas en el uso de la Cas9 de S. pyogenes, que sigue siendo la herramienta CRISPR más empleada, el repertorio de nucleasas Cas disponibles ha aumentado considerablemente en los últimos años, en particular las pertenecientes a la clase 2. La actividad de corte inespecífico fuera de la diana, el requerimiento de un motivo concreto adyacente a la diana y su gran tamaño, que limita su administración celular, han motivado la búsqueda de nuevas nucleasas en datos genómicos y metagenómicos, así como la generación de variantes derivadas de proteínas nativas mediante evolución dirigida o ingeniería de proteínas. En la presente tesis, llevamos a cabo una búsqueda de sistemas CRISPR–Cas de clase 2 a partir de 10 metagenomas provenientes de tres ambientes previamente inexplorados en este sentido, dando como resultado la identificación de 107 sistemas pertenecientes a alguno de los subtipos descritos hasta la fecha. El análisis de las características de las proteínas Cas encontradas y su relación evolutiva con otras ortólogas empleadas en edición genética nos llevó a la selección de 9 candidatas para su caracterización funcional. Entre todas ellas, la proteína EH6Cas9 mostró actividad nucleasa sobre secuencias diana de ADN en E. coli, adyacentes al motivo 5’-NGG-3’. Con el fin de desarrollar una nueva herramienta de biología molecular, la simplificación del sistema nos llevó a diseñar un ARN guía sintético compatible con EH6Cas9. La caracterización bioquímica de la herramienta demostró que EH6Cas9 es una ADNasa metal dependiente, programable mediante guías de ARN, que muestra su máxima actividad frente a dianas adyacentes a la secuencia consenso 5’-NGGDT-3’ a temperaturas entre 25 °C y 37 °C. Finalmente, EH6Cas9 también demostró su aplicabilidad como herramienta de edición genética. En E. coli, EH6Cas9 mostró una gran eficacia como estrategia para la selección positiva de mutantes, mientras que en células de ratón indujo la formación de inserciones y deleciones en una secuencia diana, presentando características distintivas respecto a la Cas9 de S. pyogenes que la hacen especialmente indicada para aplicaciones de edición genética en eucariotas en las que se requiera una actividad nucleasa moderada y más restringida.

Au 20ème siècle, la position traditionnelle de l’épistémologie cartésienne a reçu de nombreuses critiques. La transparence de l’esprit et notre accès authentique à nos propres états mentaux sont couramment attaqués par les arguments selon lesquels nos jugements prétendument fondamentaux ne sont point infaillibles. Le problème de la « poule tachetée » proposé par Chisholm est ici un bon exemple. D’autres épistémologues ont proposé des scénarios où les cognitions fondamentales sont les victimes, soit des processus cognitifs étranges, soit des environnements défavorables. On a aussi constaté qu’il y a de cognitions fondamentales qui sont obscures ou fausses. Ces trois groupes d’objections faillibilistes ne sont pas irréfragables, mais il n’y a pas non plus de réponse systématique et suffisamment solide de la part de ceux qui défendent la thèse de l’infaillibilité fondamentale. Dans le présent travail, nous reconstruirons un modèle de l’intuition à l’inspiration des Regulae ad directionem ingenii. Nous réfuterons avec ce modèle la plupart des objections contemporaines, et proposerons en même temps une nouvelle interprétation des textes principaux de Descartes. / During the 20th century, the position of Cartesian epistemology has been much criticized. The transparency of the mind, as well as our authentic access to our own mental states, have been continuously attacked by arguments that attempt to reveal the fallibility of our putatively foundational cognitions. The famous problem of the speckled hen is representative; some epistemologists have also configured fictional scenarios where our foundational cognitions suffer from strange cognitive process or unfavorable epistemic environment, so that the relevant cognitions are no longer reliable, a fortiori infallible; others directly state that there are fundamental cognitions that are actually mistaken. These three groups of fallibilist objections are not flawless, but there are no systematic and sufficiently solid responses that defend the infallibility thesis either. In this dissertation, we shall reconstruct a model of intuition on the basis of Descartes’ Regulae ad directionem ingenii. The model will be used to refute most of the contemporary anti-Cartesian objections. It also provides a new interpretation of Descartes’ Meditations and other related texts.

Made available in DSpace on 2017-07-10T16:38:39Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Dissert Rosiene Soares2.pdf: 2119695 bytes, checksum: d2e06a6bd437c8604d603d95ab7640e8 (MD5) Previous issue date: 2016-08-04 / This paper results from a literature and documental review, which is also grounded on field work. It encompasses the deeds of CAS facilities (Training Center for Education Professionals and Care to the Deaf) and the inclusion of death children in the city of Cascavel (PR). Main objectives: writing about the History of Deaf Education in the world and in Brazil; showing the educational proposals that guided education and the process of deaf inclusion; reporting on the Public Policies for Inclusion; reporting on the work CAS facilities in Brazil have developed for deaf inclusion; and describing the deeds of the CAS facility in Cascavel in the matter of teaching deaf children enrolled at public schools. The reason for this paper is the lack of material regarding the work of CAS facilities, as well as the need for theoretical orientation for the development of educational experience at schools where the deaf have been included. Some of the outcomes of our research show, on the one hand, the importance of the inclusion work developed by CAS facilities and, on the other, the lack of financial resources for CAS facilities. Such facilities have offered support for inclusion throughout the nation, by means of graduate school courses, orientation to teaching institutions, and pedagogical support to the deaf. The CAS facility in Cascavel offers sign language courses for newly graduates, helps deaf students out, and counsels public schools. However, by means of queries posed to teachers in charge of the bilingual pedagogical support, it was perceived the need to resize the works of the facilities, in order to meet the need of teachers, who called out for more specific courses. They were unanimous in claiming the importance of having learned sign language for their teaching, but they also said that sign language is a language per se, not a teaching methodology, which points out to a gap in their education. In this sense, this essay understands based on the queries and on observations carried out at CAS facilities that more courses should be oriented to the teaching of deaf children, to the studies on adequate teaching methodologies, to playful stimulation and to technology as a pedagogical support in the teaching of deaf children. Keywords: CAS fac / A presente dissertação resulta de investigação bibliográfica, documental e de campo a respeito da atuação dos Centros de Capacitação dos Profissionais da Educação e Atendimento às Pessoas com Surdez (CAS), e em especial, na inclusão de crianças surdas no município de Cascavel-PR, e teve como objetivos: escrever sobre a história da Educação de Surdos no mundo e no Brasil; apresentar as propostas educacionais que nortearam a educação e o processo de inclusão dos surdos; relatar as Políticas Públicas de Inclusão; relatar o trabalho que os CAS do Brasil desenvolvem para a inclusão de surdos; e descrever atuação do CAS/Cascavel no processo de ensino e aprendizagem das crianças surdas incluídas na Rede Pública Municipal de ensino de Cascavel-PR. Essa pesquisa se justificou ante a carência de materiais a respeito do trabalho dos CAS, bem como pela necessidade de orientação teórica para o desenvolvimento da sua prática educacional e nas escolas onde há inclusão de crianças surdas. Como resultados da pesquisa verificou-se a importância do trabalho dos CAS para inclusão de surdos e a falta de investimento no trabalho desses Centros, que tem ofertado suporte à inclusão de surdos em todos os estados do Brasil, por meio de formações continuadas, orientações às instituições de ensino e suporte pedagógico aos surdos. Com relação ao CAS/Cascavel este oferece cursos de Libras como formação continuada, atende alunos surdos e orienta escolas municipais de Cascavel. Contudo, por meio das entrevistas aplicadas aos professores regentes e de apoio pedagógico bilíngues percebeu-se a necessidade de redimensionar o trabalho deste Centro, a fim de atender a necessidade dos professores que reivindicaram nas entrevistas formações mais específicas. Todos ressaltaram que suas formações em Libras são de suma importância para o trabalho com alunos surdos, porém, que Libras é uma língua e não uma metodologia de ensino, havendo aqui uma lacuna na formação. Neste sentido, este trabalho compreende com base nas entrevistas e observações realizadas no CAS, que as formações a serem realizadas devem estar voltadas à formação de professores para atuar no ensino de crianças surdas, nos estudos sobre metodologias de ensino para essas crianças, na estimulação infantil e em tecnologias como suporte pedagógico no ensino de crianças surdas.

Les fentes orales sont des malformations congénitales d'origine complexe, dépendant à la fois d'expositions environnementales et d'influences génétiques. L'objectif général de ce travail est la recherche d'interactions gène-environnement dans leur étiologie. Ce projet s'appuie sur une étude épidémiologique cas-témoins menée en France (1998-2001, 240 cas-236 témoins) intégrant un schéma d'étude cas-parents. Il présente les méthodes statistiques à ce jour disponibles pour évaluer une interaction gène-environnement selon les deux schémas d'étude. Un modèle spécifique est utilisé pour différencier les effets du génotype de l'enfant de celui de la mère. Ce projet s'intéresse au gène ADH1C et à la consommation maternelle d'alcool, au gène MTHFR et à l'apport en folates de la mère, et à l'exposition professionnelle de la mère aux solvants organiques en interaction avec des gènes de métabolisme/détoxication tels que CYP2E1, ADH1C, GSTM1 et GSTT1.

The use of new tools for mathematics at school wins increasingly Importance. It follows from this that they are consquences as well as on aims and contents of mathematics at school us like on methods in the lessons. It is not unusual, that students and parents and also university professors are to be feared, that the calculation competence is decreasing with the use of CAS. In the lesson should be showed a possible way to developing such competences in the beginning phase of the learning process in Algebra. The examples refer to a level of school mathematics for students in the middle school age. The methods tell apart phases with and without CAS and shows a didactic principles of mathematics lessons in the case of use of CAS handheld technology.

L'électronique intégrée connaît des développements importants pour des applications mettant en œuvre des capteurs en couches minces associés à une acquisition et un traitement des données appropriés. Le développement de couches minces qui peuvent être associées à des composants électroniques est un élément clé pour la mise en œuvre de nouveaux dispositifs. Un des objectifs de ma thèse est de montrer la faisabilité de couches minces de composés à base de soufre, par des techniques autres que celles mettant en jeu le vide. Ces techniques simples sont le spray et le dépôt chimique en solution aqueuse.Trois matériaux binaires et à base de soufre m'ont été proposés pour l'élaboration en couches minces par voie aqueuse, ce sont : SnS, à applications photovoltaïques, et MgS et CaS à applications dosimétriques.Le sulfure d'étain est un absorbeur utilisé dans les dispositifs photovoltaïques, connu pour ces propriétés physiques pertinentes pour cette application. Cependant, c'est un piètre conducteur et différents dopages tel que le fer, l'argent et le gallium ainsi qu'un recuit sous atmosphère contrôlé ont été réalisés dans le but d'augmenter la conductivité de ces couches minces. Il s'est avéré par la suite qu'un simple dopage des films minces de SnS n'aboutit pas à la diminution de la résistivité d'où la proposition d'un recuit sous atmosphère contrôlé dans cette étude. L'étude cristallographique révèle une amélioration cristalline avec la coexistence des deux phases pour des températures de recuit croissantes. A une certaine température, un changement de phase est noté. La transformation de phase se produit à des températures de recuit différentes pour les couches minces recuites et avec différents éléments dopants. La partie électrique étudiée par courants thermiquement stimulés montre que les pièges disparaissent pour des températures de recuit croissantes. Ce résultat a été consolidé par une augmentation progressive de l'intensité du courant d'obscurité en fonction de la température de recuit suivie d'un changement notable du processus de conduction. Ce changement observé est attribué à la transition de phase produite lors du recuit.Nous avons ensuite optimisé les paramètres de croissance des films minces de MgS et de CaSO4 à applications dans les mesures dosimétriques. Nous avons réussi par la technique de spray à élaborer des couches minces de MgS. Suivant l'analyse cristallographique et chimique, nous avons conclu à l'existence des deux matériaux : le MgSO4 en une forte proportion et le MgS en une faible proportion. La présence importante du taux d'oxygène dans les couches minces a été expliquée par le fait que la technique de croissance n'est pas sous vide d'une part et d'autre part par la présence de l'oxygène dans les réactifs. L'effet du recuit réalisé sous vide ou sous azote montre que ce matériau n'est pas stable à atmosphère ambiante et que l'élaboration de ce dernier en couches minces nécessite des techniques de fabrication plus performantes et qui mettent en jeu le vide.Par ailleurs, le CaSO4 a été élaboré par la technique de Spray. Du dopage intentionnel a été analysé afin de préciser le comportement de luminescence du matériau. Cependant, comme on a constaté que la luminescence du matériau après dopage est la même que celle du non dopé et ce quelque soit le dopage utilisé, nous pouvons conclure que la luminescence de ce composé est attribuée aux états de défauts intrinsèques.Une étude de la TL a été réalisée sur un échantillon irradié à différentes doses. Il a été noté que le signal de la TL augmente pour des doses d'irradiation croissantes.Ce travail constitue une première étape cruciale vers la maîtrise des propriétés de certaines couches minces incluses dans des dispositifs photovoltaïques et dosimétriques. Les perspectives s'ouvrent vers d'autres matériaux soufrés bien connus en dosimétrie, et pour lesquels le spray pourrait constituer une méthode de fabrication bien adaptée. / This thesis reports the growth of sulfur thin films using low cost techniques other than those involving vacuum. These simple techniques are spray pyrolysis and chemical bath deposition. In this context, it is necessary to control the development of thin films. Various analyzes were performed such as: XRD, SEM, EDS, AFM, spectrophotometry and TSC. All these analyzes allowed us to improve the physical properties of thin films of SnS in photovoltaic application in a first stage and a second stage to optimize the growth parameters of dosimetric thin films.In the first part, we have elaborated tin sulphide thin films using as an absorber material in photovoltaic devices. For this, different doping such as iron, silver, and gallium as well as annealing in a controlled atmosphere have been made in order to increase the conductivity of these thin films. The doping was carried out during the growth process by adding relative concentration of the aqueous solutions containing Fe2+; Ag2+ and Ga2+ ions. It was found later that the doping of SnS thin films does not result in the decrease of resistivity. So,other physical characterizations are in progress to optimize thin films properties and particularly the resistivity by means of an appropriate heat treatment under controlled atmosphere. The XRD patterns show an increase in crystallite size with annealing temperature, correlated with an improvement in surface topography. In addition, annealing at 600°C results in the structural transition from rocksalt to orthorhombic, leading to enhanced conductivity. From TSC measurement, a gradual increase in the current intensity with increasing annealing temperature was observed. A significant change in the electrical conduction regime occurred for the film annealed at 600°C. The TSC intensity increased by 5 decades compared with that of the SnS annealed at 500°C. The SnS thin film had semiconductor electrical behavior, which can be attributed to the structural transition.During the second part of my thesis, we have optimized the growth parameters of dosimetric thin films. For this, we started with the first material the MgS using spray pyrolysis technique. Different growth parameters were varied such as the substrate temperature, the pH of the solution, the nature of the solvent and that of the carrier gas and the concentration of EDTA. Along the crystallographic analysis (XRD) and chemical (EDS), we concluded the existence of two materials: a high proportion of MgSO4 and MgS in a small proportion. The significant presence of oxygen in in thin films was explained by the fact that the growth of such compound needs a vacuum technique. Another reason may be to the presence of oxygen in the reactants. In fact, the presence of the dominant phase magnesium sulfate may be due to the little amount of the rate of the dissociation MgSO4 to release Mg2+ cation through the EDTA complexing. The effect of annealing performed under vacuum and under nitrogen atmosphere show that this material is not stable at ambient atmosphere and the development of the latter requires thin film manufacturing techniques more efficient and which involve vacuum.We then chose to prepare a second dosimeter material is CaSO4 by spray technique. Intentional doping (Sm, Mn or doubly doped such as (Cu, F), (Cu, Mn)) was analyzed to clarify the behavior of luminescence of the material. However, as it was found that the luminescence of the material after doping is the same as that in the case of undoped and whatever the doping used, we can conclude that the luminescence there is given to the states of its own defects -even and which are present in the spray solution. Hence the luminescence of the material is intrinsic. A study of the TL was performed on a sample irradiated at different doses. It was noted that the signal of the TL increases for increasing irradiation doses.

Cette étude traite du concept de l’intérêt (à susciter chez le lecteur) dans les guides de rédaction professionnelle. Une analyse de contenu de 38 livres électroniques sur la rédaction nous a permis d’observer la prise en compte et la variété du concept de l’intérêt. Les discours sur l'intérêt portent essentiellement sur l’importance de le créer ainsi que sur les moyens pour le susciter. Parmi les 21 sous-catégories de moyens qui se sont manifestées dans le discours des auteurs, les 5 principales concernent l’importance de cibler le lecteur (50 énoncés, 17 sources), d'attirer l'attention (42 énoncés, 22 sources), d’être pertinent (22 énoncés, 12 sources), d’être concis (16 énoncés, 13 sources) et d’écrire avec simplicité (14 énoncés, 11 sources).

Tableau d'honneur de la Faculté des études supérieures et postdorales, 2015-2016 / Nous étudions le facteur de la qualité de gestion dans la coupe transversale des rendements boursiers suivant Fama et French (1992). Une entreprise dont la gestion excédait la moyenne du marché d’un écart-type en début de période rapportait 2,32 % de rendement de moins que la moyenne annuellement pour la période 2004-2007, et 1,63 % de moins en 2007-2010. Ces rendements sont anormaux : la qualité de gestion ne réduisait pas le risque de variance des rendements de marché durant la crise financière survenue dans la période 2007-2010. Ainsi, une entreprise bien gérée réduit significativement son coût du capital sans réduire son risque. Les données proviennent de la construction d’une base de données sur la gestion des entreprises du S& P 500 contenant six indicateurs agrégés en un indice de la qualité de gestion. L’indice pondéré par régression demeure significatif dans un modèle à trois facteurs de Fama et French (1993). / A company with management quality lying one standard deviation from the average before the start of the period earned 2.32 % more than the market average annually during the period 2004-2007, and 1.63 % more in 2007-2010. The returns did not result from the risk of variation of market returns, since the firms with the worst management earned the best return with less risk during the financial crisis during the period 2007-2010. Therefore, without a clear explanation from the financial theory, a well-managed company significantly reduces its cost of equity. A new database on management of the companies of the S& P 500 was constructed, with data on six indicators aggregated in an index of management. The regression weighted index remains significant inside the three factor model of Fama and French (1993) and the factors are closely related to the index of management.

La microcéphalie est une maladie neurologique du nouveau-né qui se traduit par une circonférence réduite de la tête, une déficience intellectuelle et des défauts anatomiques du cerveau. La microcéphalie peut être la conséquence d’une infection, de stress environnementaux ou de mutations génétiques.Le cerveau commence à se former dès la cinquième semaine de grossesse et est majoritairement constitué de cellules souches neuronales, cellules qui conservent une capacité a se reproduire a l’identique sans se spécialiser. Cette première phase de prolifération est importante pour générer suffisamment de cellules. Suit une phase de différenciation, durant laquelle les cellules préalablement formées se différencient en deux groupes : les neurones, qui permettent de partager l’information grâce à des influx électriques, et les cellules gliales, qui soutiennent activement les fonctions des cellules neuronales.Je m’intéresse à un gène en particulier, KNL1, muté chez certains patients microcéphales. Grace aux nouvelles techniques d’édition du génome, j’ai reproduit la mutation retrouvée chez les patients dans des cellules souches pluripotentes humaines. En utilisant un modèle tridimensionnel (mini-cerveaux en culture), à partir de cellules souches neuronales, j’ai analysé de manière quantitative les étapes-clés de développement: les phases de prolifération et de différenciation.Mes travaux de recherche ont montré que les cellules souches neuronales portant la même mutation que les patients prolifèrent moins, réduisant le nombre de cellules initiales nécessaires au développement cérébral normal. Par ailleurs, les cellules souches neuronales se différencient prématurément en neurones et cellules gliales, ce qui réduit davantage le nombre le nombre final de cellules. Cette hypothèse a été confirmée par l’utilisation du modèle tridimensionnel, ou les mini-cerveaux sont plus petits que la normale.Cette étude est essentielle non seulement pour comprendre le développement de la maladie, mais également pour comprendre les étapes clés du développement du cerveau humain, et ne pourrait pas être mener à bien sur des modèles animaux. En outre, l’utilisation de cellules souches induites nous permet de ne pas utiliser de cellules embryonnaires, si nécessaire pour raisons d’éthique. / Microcephaly is a neurological condition, resulting in patients having a small head circumference, intellectual impairment and brain anatomical defects. A pre-requisite for achieving a better understanding of the cellular events that contribute to the striking expansion of the human cerebral cortex is to elucidate cell-division mechanisms, which likely go awry in microcephaly. Most of the mutated genes identified in microcephaly patient encode centrosomal protein, KNL1 is the only gene that encodes a kinetochore protein, it plays a central role in kinetochore assembly and function during mitosis. While the involvement of centrosome functions is well established in the etiology of microcephaly, little is known about the contribution of KNL1.In an attempt to assess the role of KNL1 in brain development and its involvement in microcephaly, we generated isogenic human embryonic stem cell (hESC) lines bearing KNL1 patient mutations using CRISPR/Cas9-mediated gene targeting. We demonstrated that the point mutation leads to KNL1 reduction in neural progenitors. Moreover, mutant neural progenitors present aneuploidy, an increase in cell death and an abrogated spindle assembly checkpoint. Mutant fibroblasts, derived from hESC, do not have a reduced expression of KNL1 and do not present any defect in cell growth or karyotype, which highlight a brain-specific phenotype.The subsequent differentiation of mutant neural progenitors into two-dimensional neural culture leads to the depletion of neural progenitors in the favor of premature differentiation. We developed a three-dimensional neural spheroids model from neural progenitors and reported a reduced size of mutant neural spheroids, compare to control. Lastly, using knockdown and rescue assays, we proved that protein level of KNL1 is responsible of the premature differentiation and the reduced size.These data suggest that KNL1 has a brain-specific function during the development. Changes in its expression might contribute to the brain phenotypic divergence that appeared during human evolution.

La présente recherche est une enquête longitudinale se rapportant à la question de la pérennité de la concertation patronale/syndicale au sein des organisations. Elle s'est déroulée auprès de deux établissements situés au Québec et que la littérature présente comme des cas illustratifs du partenariat patronal/syndical. Son objectif est d'identifier, voire confirmer l'effet positif ou négatif de certains facteurs sur la longévité de la concertation patronale/syndicale. Les résultats confirment, d'une part, l'influence positive de certains facteurs, externes ou internes, sur le partenariat patronal/syndical et sa durée et mettent en exergue, d'autre part l'existence de nouveaux facteurs. Les facteurs s'étant avérés les plus significatifs et qui semblent favoriser la pérennité de la concertation patronale/syndicale se rapportent à la culture organisationnelle, la confiance, l'implication et la formation des acteurs, la communication, la vision partagée et les objectifs communs. Les résultats mettent aussi en évidence, au-delà du modèle applicable à la majorité des organisations et selon lequel toute concertation patronale/syndicale aboutit nécessairement à sa mise en veilleuse ou à son abandon au cours de sa trajectoire, la possibilité d'un partenariat durable, et ce, par l'entremise de nouveaux mécanismes dans les relations entre les parties. Toutefois, l'enquête rétablit la croyance selon laquelle, dans un contexte économique dominé par le néo libéralisme, la concertation patronale/syndicale demeure un simple mécanisme de gestion de crise et que, somme toute, sa pérennité ne saurait exister.