Este trabalho avaliou o potencial antioxidante da N-acetilcisteína (NAC) frente a síndrome hepatopulmonar, uma complicação da cirrose, no modelo de cirrose biliar secundária através da ligadura de ducto biliar em ratos. Foi utilizado ratos machos Wistar e investigou-se a integridade hepática através de enzimas séricas e a gasometria arterial, juntamente com o dano oxidativo, enzimas antioxidantes, nitratos totais, assim como a histologia através de hematoxilina e eosina do fígado e pulmão e picrosírius do fígado desses animais. Os animais foram divididos em quatro grupos experimentais: CO – no qual foi simulado a cirurgia de ligadura de ducto biliar principal; LDB – no qual foi realizada a cirurgia de ligadura de ducto biliar principal; CO + NAC – no qual foi simulado a cirurgia de ligadura de ducto biliar principal e recebeu tratamento com NAC após o 14º dia da cirurgia; LDB + NAC – no qual foi realizada a cirurgia de ligadura de ducto biliar principal e recebeu tratamento com NAC após o 14º dia da cirurgia. A NAC foi administrada por via intraperitoneal, numa concentração de 10mg/Kg, durante 14 dias Foi observado melhora nos parâmetros enzimáticos e gasométricos após o tratamento com a NAC. Constatou-se redução do dano oxidativo, verificado pelas substâncias que reagem ao acido tiobarbitúrico (TBARS), assim como as enzimas antioxidantes, superóxido dismutase, catalase e glutationa peroxidase, que mostram-se com valores próximos ao do grupo controle após a administração da NAC. Na avaliação de nitratos totais, observou-se aumento na produção destes metabólitos no pulmão dos ratos cirróticos após o tratamento com NAC esses valores se equipararam ao grupo controle. Através da análise histológica, verificou-se nódulos de fibrose no tecido hepático e vasodilatação do tecido pulmonar, esses fenômenos foram revertidos após o uso da NAC. A partir desse dados, constatamos que a NAC mostra-se promissora no estudo das complicações hepáticas.

Orientador: Jose Pedrazzoli Junior / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciencias Medicas / Made available in DSpace on 2018-07-23T08:52:23Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Silva_ClaudiaMariaFerreirada_M.pdf: 4076648 bytes, checksum: 9f937705d5cb268369689bd871166ff4 (MD5) Previous issue date: 1997 / Resumo: Elevações dos níveis séricos de transaminases (AST e AL T) não refletem a gravidade da doença hepática, e a bilirrubina sérica, albumina e tempo de protrombina podem estar normais nos indivíduos que ainda não desenvolveram, ou apresentam-se em estágios iniciais de cirrose. Testes dinâmicos de função hepática como clearance de verde de indocianina, bromosulfaleína, lidocaína, galactose, têm sido utilizados paracomplementar os testes bioquímicosconvencionais. Contudo, estes testes não se alteram na presença de lesões histológicas mínimas. Neste trabalho, foi avaliada a razão plasmática hidroximetronidazol/ metronidazol em indivíduos com: cirrose hepática alcoólica, classificados de acordo com Child-Pugh nos graus A (n = 9), B (n = 9) e C (n = 8), hepatite alcoólica (n = 23), hepatite C crônica (n = 13), portadores assintomáticos de hepatite C (n = 14), que foram comparados a um grupo controle (n = 12). As concentrações plasmáticas foram medidas por cromatografia líquida de alta eficiência (HPLC) de fase reversa com detecção por absorção ultra violeta. Para a análise estatística foram utilizados os métodos de análise de variância (ANOV A) e o teste de Student-Newman-Keuls para múltiplas comparações. A razão hidroximetronidazol/metronidazol demonstrou, de modo significativo, a redução da capacidade dos portadores de doença hepática de metabolizar o metronidazol após sua administração endovenosa, quando comparada à dos indivíduos sadios. Este fenômeno foi observado nas amostras colhidas dos diversos grupos, logo aos dez minutos após o término da infusão de metronidazol (voluntários sadios 0,078 + 0,005; hepatite alcoólica 0,045 + 0,008, p<O,OI; cirrose hepática: Child-Pugh A 0,022 + 0,005, p<O,OOI, B 0,032 + 0,008, p<O,O 1, C 0,013 + 0,004, p< 0,001; portador assintomático de hepatite C 0,043 + 0,005, p<O,OO 1; hepatite C crônica 0,034 + 0,003, p<O,OO 1) / Abstract: Aims: To evaluate plasma hydroxy-metronidazole/metronidazole ratio as a dynamic liver function test in HCV-infected individuaIs withlwithout liver disease, in the absence of liver cirrhosis. Methods: Metronidazole was intravenously administered for 20 min to healthy volunteers, asymptomatic anti-HCV-positive blood donors, and to chronic hepatitisC patients. Serology to HCV was determined by a second generation assay and confirmed by gelatin particle agglutination test using recombinant antigens C22-3 and C200. Plasma concentration of metronidazole and hydroxymetronidazole was measured by high performance liquid chromatography in samples collected 5, 10, 20 and 30 min following the end of metronidazole infusion. Results: Chronic hepatitis C patients had abnormal liver enzymes, while healthy volunteers and anti-HCV -positive blood donors had normal -liver biochemistry tests. Plasma metronidazole concentration was similar in all groups studied. Plasma hy4roxy-metronidazole/metronidazole ratio was significantly reduced in HCV -infected subjects, an effect observed 10 min after the end of drug infusion. Conclusions: Metronidazole clearance is impaired in anti-HCV -positive blood donors and chronic epatitis C patients, indicating that HCV is capable of affecting liver function at early stages of the disease. The metronidazole clearance test can detect impaired liver function in HCV -i'nfected individuaIs even in the absence of liver cirrhosis / Mestrado / Farmacologia / Mestre em Ciências

Orientadores: Cecilia Amelia Fazzio Escanhoela, Ilka de Fatima Santana Ferreira Boin / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciências Médicas / Made available in DSpace on 2018-07-26T19:58:47Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Jorge_GracindadeLourdes_M.pdf: 3233833 bytes, checksum: 0e11fac86080a176faaf27f35705a90d (MD5) Previous issue date: 2000 / Resumo: Este experimento teve por objetivo o desenvolvimento de um modelo de obstrução biliar, através de procedimento cirúrgico sem ligadura, canulização ou secção do dueto biliar, que permitisse evolução para croniflcação, com o desenvolvimento de cirrose biliar (ou ao menos "fibrose de padrão biliar") e mantivesse a via biliar extra-hepática facilmente acessível a eventuais manuseios. A avaliação histopatológica do fígado destes animais e os efeitos bioquímicos séricos foram realizados após 30 dias da obstrução. Inicialmente foram utilizados 63 ratos Wistar, distribuídos em três grupos: 47 animais foram submetidos à obstrução do dueto hepático comum (grupo OB), 9 foram submetidos à operação simulada (grupo OS) e 7 foram adotados como controle para análise histológica (grupo CO). No desenvolvimento da técnica, o dueto hepático foi isolado logo após sua emergência justa-pancreática, deixando-se 1 cm de dueto livre, reparado com fio de polipropileno. Em seguida procedeu-se à exposição do apêndice xifóide e, através de marcador de orelha de rato, foi feito aí um pequeno orifício, pelo qual passou-se o fio tracionando o dueto biliar. Deste modo formou-se uma alça de dueto biliar emergindo pelo orifício do apêndice xifóide; um cateter de silicone foi colocado sob esta alça. O dueto biliar permaneceu, portanto, tracionado e exposto entre a musculatura e a pele. O fechamento da parede muscular e da pele foi feito com sutura contínua. Quinze ratos (32%) do grupo OB foram eliminados do estudo por óbito precoce (8 casos) ou falha técnica (7 casos). Para os demais 32 animais do grupo OB foi demonstrado aumento significativo nas dosagens séricas de bilirrubina, aminotransferases (ALT e AST), fosfatase alcalina e gama-glutamiltransferase, com redução da albumina, quando comparados aos valores das dosagens dos ratos do grupo OS. A análise histológica confirmou o desenvolvimento de "fibrose de padrão biliar" em todos os casos do grupo OB, com formação de nódulos regenerativos em 68.7%. Esta se caracterizou por fibrose portal (de grau leve e moderado) em 96,9% dos animais, com formação de septos fibrosos (de grau moderado e intenso) em 87,4 % e proliferação de duetos biliares em todos os casos (intensa em 81,3% e moderada em 18,7%). Conseguimos desta maneira, o desenvolvimento de um modelo experimental alternativo simples e eficaz. Devido à facilidade de manuseio, a obstrução provocada pela tração do dueto biliar oferece excelentes condições de pesquisa desde o momento da interrupção do fluxo biliar, até o desenvolvimento de colestase acompanhada por distorção da arquitetura hepática, com possibilidade ainda de reversão do quadro obstrutivo em qualquer fase evolutiva do processo / Abstract: The purpose of this study was to create an obstruction in the biliary duct using a surgical procedure without ligatures, sectioning, or cannulation that would evolve to chronicity and develop into cirrhosis (or at least standard biliary fibrosis) and also to maintain an easily accessible extra-hepatic biliary route .The histopathologic assessment of the liver and the biochemical effects on the serum were conducted 30 days after obstruction. This study was conducted on 63 Wistar rats, which were divided into 3 groups: 47 animals underwent a common obstruction of the hepatic duct (OB), 9 underwent a simulated surgery (OS) and 7 were used as the control group for histologic analysis (OC). The surgical technique used isolated the hepatic duct as it emerged near the pancreas with polypropylene thread, leaving 1cm of the duct free. The xiphoid appendix was then exposed and using the rat's ear marker a small orifice was made in it. The polypropylene thread attached to the biliary duct was then drawn through this orifice forming a biliary duct sling above the xiphoid appendix and a silicon catheter was then placed in it. It therefore remained stretched and exposed between the musculature and skin . The muscle wall and skin were closed with continuous sutures. The total number of rats in the OB group diminished by fifteen (32%): 8 rats suffered an early death and 7 rats died as a result of a technical error (in 4 cases, the catheter was not correctly placed and in 3 cases, the bile duct ruptured). The remaining 32 rats in the OB group when compared to those in the OS group presented a significant increase in the dosage of bilirubin, aminotransferases (ALT & AST), alkaline phosphatase and gammaglutami] transferase with a reduction in albumin The histologic analysis confirmed the development of "standard biliary fibrosis" in all the OB group cases and the formation of regenerative nodules in 68.7% of the group. "Standard biliary fibrosis" was characterized by portal fibrosis (slight to moderate) in 96.8% of the cases with the formation of fibrous septa (moderate to intense ) in 87.4% of the cases, together with an intense proliferation of the biliary ducts in 81.2% of the cases and in 18.7% the proliferation was moderate. An alternate experimental model that was simple and efficient was developed and as it was easy to manipulate the obstruction provoked by traction of the biliary duct, excellent research conditions were provided right from the moment the biliary flux was interrupted up to the development of cholestase and the distortion of the hepatic structure. This model also permits an interruption of the biliary obstruction and a study of the sequels caused by obstructive icterus / Mestrado / Ciencias Biomedicas / Mestre em Ciências Médicas

Orientador: Maria Aparecida Mesquita / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciencias Medicas / Made available in DSpace on 2018-08-09T19:06:25Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Cruz_CristianeKibuneNagasakoVieirada_M.pdf: 1050615 bytes, checksum: 568a2814333ee1681714d9d75ec14548 (MD5) Previous issue date: 2007 / Resumo: A disfunção autonômica (DA) parece ser freqüente na cirrose hepática (CH) de etiologia alcoólica, enquanto que os dados referentes à prevalência e repercussões clínicas desta complicação na cirrose de etiologia não alcoólica são controversos. Existem evidências na literatura de que o método da análise da variabilidade da freqüência cardíaca (VFC) em 24 horas é mais sensível que a pesquisa dos reflexos cardiovasculares para a avaliação da função autonômica. Esta técnica foi pouco utilizada na investigação de pacientes com CH. Estudos prévios em cirróticos demonstraram a presença de alterações da motilidade intestinal que predisporiam à ocorrência de supercrescimento bacteriano. Os mecanismos responsáveis por estas alterações não foram ainda esclarecidos. Considerando que o sistema nervoso autônomo (SNA) participa do controle da motilidade intestinal, parece provável que a DA esteja associada com as alterações da motilidade intestinal na CH. Os objetivos deste estudo foram investigar a presença de alterações do SNA parassimpático e simpático em pacientes com CH de etiologia não alcoólica, utilizando os métodos dos testes de reflexos cardiovasculares e da análise da VFC em 24 horas, e avaliar a associação das alterações autonômicas encontradas com a gravidade da disfunção hepática, com alterações do trânsito intestinal, e com o aparecimento de complicações da CH. Foram estudados trinta e quatro pacientes com diagnóstico de CH de etiologia não alcoólica, divididos em Child-Pugh A (13) e Child-Pugh B/C (21). A atividade autonômica foi avaliada através dos testes de reflexos cardiovasculares e da análise da VFC em 24 horas. O estudo do tempo de trânsito orocecal (TTOC) foi realizado pelo teste do H2 no ar expirado, após ingestão de lactulose. De acordo com os testes de reflexos cardiovasculares, a presença de disfunção parassimpática foi encontrada em 4 pacientes Child A (30,8%) e em 6 pacientes Child B/C (28,4%; p>0,05). A análise da VFC em 24 horas mostrou que os parâmetros relacionados com a atividade parassimpática (LF, lnLF, pNN50) e simpática (LF, lnLF) estavam significativamente (p<0,05) diminuídos nos pacientes Child B/C, tanto em relação ao grupo controle, como também em relação aos pacientes Child A. A avaliação individual mostrou a presença de disfunção parassimpática em 3 pacientes Child A (23,1%) e em 12 (57%; p=0,07) Child B/C. A diminuição da atividade simpática concomitante foi encontrada em 8 dos 12 pacientes Child B e C, com lesão parassimpática. Em relação ao TTOC, não houve diferença estatística entre os valores do TTOC no grupo Child A (52±17 minutos) e no grupo controle (52±13 minutos). Em contraste, os pacientes Child B/C apresentaram valores mais altos do TTOC (71±34minutos) em relação aos controles (p=0,02). Apenas dois pacientes apresentaram resultados sugestivos de supercrescimento bacteriano. O tempo de seguimento foi de 19±12 meses. Ao final do estudo, cinco pacientes (24%) Child B/C evoluíram para óbito. Os valores dos parâmetros representativos da atividade parassimpática (HF, lnHF) nesses pacientes foram significativamente (p=0,04) menores que os encontrados nos pacientes do grupo Child B/C que continuavam vivos. A encefalopatia foi a complicação mais freqüente, acometendo 42,8% dos pacientes durante o período de seguimento. Houve associação estatística entre a presença de DA e a incidência de encefalopatia hepática (p<0,05). Não houve correlação entre os parâmetros da atividade autonômica com os valores do TTOC. Também não houve associação entre TTOC prolongado e complicações da CH. Em conclusão, nossos resultados demonstraram que a DA é achado freqüente nos pacientes com CH de etiologia não alcoólica e está associada com o grau de disfunção hepática, sendo mais freqüente nos pacientes com CH Child B e C. Nossos dados não demonstraram associação entre a alteração da função autonômica e o prolongamento do trânsito intestinal observado nesses pacientes. A presença da DA é um fator predisponente para a ocorrência de encefalopatia hepática, e parece influir no prognóstico da doença / Abstract: Autonomic dysfunction (AD) is common in patients with alcoholic hepatic cirrhosis but information on its occurrence and clinical relevance in patients with non-alcoholic liver disease is contradictory. 24-hour heart rate variability (HRV) is considered to be more sensitive than the cardiovascular reflexes to detect autonomic damage. Only a few studies used this technique in the investigation of autonomic function in cirrhotic patients. Previous studies have demonstrated that intestinal transit is delayed in patients with cirrhosis, and that this alteration predisposes to bacterial overgrowth, bacterial translocation and risk of infections. The reasons for that remain unclear. Since the autonomic nervous system participates in the regulation of gastrointestinal motility, it seems likely that AD may play a role in the intestinal motility alterations observed in cirrhosis. Therefore, our aims were to assess autonomic function in patients with non-alcoholic hepatic cirrhosis, and to investigate the relationship of AD with severity of disease, delayed intestinal transit and the clinical outcome. Thirty four patients with non-alcoholic hepatic cirrhosis classified as Child¿s A (n=13) and Child¿ B/C (n=21) were studied. Autonomic function was assessed by using standard cardiovascular reflexes tests and 24- hour HRV analysis. Orocaecal transit time (OCTT) was measured using the lactulose hydrogen breath test. According to cardiovascular reflexes tests, 4 patients Child A (30.8%) and 6 patients Child B/C (28.4%), were found to have evidence of parasympathetic damage. The 24-hour HRV analysis showed that parameters reflecting parasympathetic (HF, lnHF, pNN50) and sympathetic (LF, lnLF) function were significantly decreased (p<0,05) in comparison with both controls and Child¿s A patients. Individual analysis showed parasympathetic damage in three patients Child A (23,1%) and in 12 (57%) Child B/C (p=0.07). Eight patients had combined sympathetic damage. No diference was found in OCTT values between Child¿ A patients (52±17 minutes) and controls (52±13 min). In contrast, OCTT values were significantly higher in Child¿ B/C patients (71±34minutes) than in controls. Bacterial overgrowth occurred in only two patients. The mean follow-up time was 19±12 months. At the end of the study, five Child¿s B/C patients (24%) have died. The values of parameters representative of parasympathetic function (HF, lnHF) were significantly lower (p<0.05) in these patients in comparison with survivors of Child¿s B/C group. Hepatic encephalopathy was the most frequent complication during follow-up, occurring in 42.8% of Child¿s B/C patients. AD was significantly associated with encephalopathy (p<0.05), but did not correlate with OCTT values. In conclusion, our study showed that autonomic dysfunction in common in patients with non-alcoholic liver disease and is related to the severity of hepatic dysfunction. Our results did not show a relationship between delayed intestinal transit and AD. The presence of autonomic damage predisposes these patients to the development of encephalopathy and may be associated to higher mortality / Mestrado / Clinica Medica / Mestre em Clinica Medica

Orientador: Jose Pedrazzoli Junior / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciências Médicas / Made available in DSpace on 2018-07-24T21:48:13Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Brandao_ClodomirGarcia_M.pdf: 4209082 bytes, checksum: 8e96be5381245e8bb8c9f6f4f60c8fa6 (MD5) Previous issue date: 1999 / Resumo: O desenvolvimento de fibrose é um ponto fundamental na formação da cirrose hepática e sua compreensão é essencial para o entendimento da fisiopatologia da cirrose e da conseqüente hipertensão portal. Assim, o desenvolvimento de um modelo experimental adequado de fibrose hepática é útil para o entendimento das enfermidades que podem evoluir para a cirrose hepática. A colchicina tem sido usada em pacientes com cirrose hepática mas efeitos não são totalmente conhecidos. Este estudo teve como objetivo desenvolvimento da fibrose hepática pela administração de tetracloreto de carbono (CCI4) por via intragástrica e o de avaliar o efeito da administração de colchicina neste modelo. Para este estudo foram utilizados 37 coelhos machos da raça New Zealand .(2,73 :t 0,05 Kg), os quais receberam água e ração ad libitum ao longo go período de experimentação. Estes animais foram divididos em 5 grupos. Catorze dias após o começo do tratamento com fenobarbita,1 os animais começaram a receber semanalmente o CCI4 (dose inicial de 20 mg diluído em-óleo I de milho a 10 %) por via intragástrica. A dose foi ajustada de acordo com controles bioquímicos indicativos de lesão hepática (aspartato aminotransferase [AST] e alanina aminotransferase [AL T], visando-se manter tais níveis plasmáticos entre 400 e 800 UII). Amostras de sangue dos animais foram coletadas 24 h após cada administração de CCI4, para dosagem de aminotransferases (AST e AL T), bilirrubinas (total e indireta), gama glutamil transpeptidase (y-GT), proteínas e albumina. Além dos controles bioquímicos, os animais foram pesados semanalmente. Para avaliar os efeitos do tratamento com fenobarbital e CCI4 sobre o fluxo sangüíneo hepático, foram determinadas as velocidades de depuração do verde de indocianina (ICG) antes e após o final do tratamento (aproximadamente 8 mg/kg em solução salina). A colchicina foi administrada diariamente em 2 grupos de animais (a partir da 11 a semana de tratamento com CCI4 e em outro, desde o início do tratamento com CCI4). Para este trabalho foram feitos 2 grupos controles, onde um dos grupos recebeu doses diárias de fenobarbital durante todo o experimento (controle fenobarbital) e o outro grupo apenas foi tratado com ração e água ad libitum. ' Ao final do período de estudo os animais foram sedados e sacrificados com' uma injeção de ar i. v. e foram retirados 3 fragmentos de cada lobo hepático parR análise histológica. Um número maior de animais que não recebeu colchicina desenvolveu cirrose, comparado com o grupo que recebeu a droga (8/10 vs. 0/10, p<, 0.01), tendo a fibrose sido menor nos animais tratados com colchicina (p<O. 01). Coelhos com 16 - semanas de tratamento com colchicina tiver~m, no final do experimento, ICG, y-GT, bilirrubina e ganho de peso semelhantes aos dos grupos cc 1trole, ao contrário dos animais que não receberam. A baixa letalidade e o elevado número de animais que desenvolveram cirrose hepática (8/10) leva a concluir que este tipo de modelo é eficaz. o peso corporal dos animais não serve como parâmetro para o ajuste da dose de tetracloreto de carbono, pois não houve alteração do mesmo durante o tratamento com CCI4. - Para o controle do desenvolvimento da lesão hepática, apenas a determinação das aminotransferases é suficiente / Abstract: The fibroses development is a fundamental point in the formation of the hepatic cirrhosis, and its comprehension is essential for the understandíng of ~the physiopatology of the cirrhosis and the consequent portal hypertension. The development of an adapted experimental model of hepatic fibroses is useful for the study of the illnesses that may develop the hepatic cirrhosis. The colchicine has been used in patients wíth hepaticcirrhosis, but its effects are not totally known. The aim of this study was to evaluate the colchicine effects in the hepatic cirrhosis chemically deveioped and to evaiuate if the Proctr Chatamra model is suitable to apply in rabbits. Thirty seven male New Zealand rabbtís were used (2.73 :t 0.05 Kg), Group A (n= 10), Group B (n= 10), Group C (n=10) and 7 controls animais. Group A was gíven only carbon tetrachroride (CCI4) and phenobarbitone (FB), Group B received the same treatment as Group A with the addition of colchicine (100 Ilg/daily/five days a week 16 weeks) and Group C received the as Group B ,but had the colchicine treatment for a longer period of time. They were given phenrr¿A dissolved in drinking water (approximately 50 mg/day/animal) and a week j,,-. treatment (10% solution in com oil; 20 mg/animallw,eek) concomítant with PB.The CCI4 dose was adjusted 'weekly in órder to obtain serun AST and AL T levels between 400 U/I and 800 U/I. The indocianine green (lCG) pharmacokinetics were determined after injecting the ICG (8mg/Kg, i.v.) and collecting plasma samples at suitable time points for the ICG quantifcation. At the end of the experiment, animais were sacrificed, and 3 fragments of each liver sent to histology examination. A higher proportion of animais which did not receive colchicine developed cirrhosis compared to those which received the drug (8/10 vs. 0/10, p.0.01), the líver flbrosis was also reduced (p.0.01). Rabbits that had been through the 16 week treatment had at the end of experiment, ICG, y-GT, bilirrubin and weight gain similar to controls. The serum enzymes and the elimination rate of ICG (before and after 16 weeks of treatment) in the CCI4 group were: AL T: 62.6 :t 170.87 UII; AST: 39,40 :t 0.3661 mllmin/kg, respectively. The low mortality and the quantity of the animais wich developed liver cirrhosis conduce to conclude with that model is suitable. The body wight is not suitable to regulate the CCI4 doses. Only the aminotransferases measurement is necessary for control of the liver development. The colchicine reduces the development of liver fibrosis and cirrhosis in a . experimental model of chronic toxic liver damage, supporting its potential therapy of liver díseases / Mestrado / Mestre em Farmacologia

Orientador: Elza Cotrim Soares / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciencias Medicas / Made available in DSpace on 2018-08-04T04:20:38Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Silva_GiovanniFaria_D.pdf: 17994471 bytes, checksum: 64a06ef0c300e2f7678f02277de2b533 (MD5) Previous issue date: 2005 / Resumo: A infecção pelo VHC apresenta uma progressão gradual da fibrose até a cirrose, porem esta evolução tem discrepâncias dependentes da amostragem (0,5 a 55%). Foi estudada a taxa de progressão da fibrose (TPF), fatores de risco associados à fibrose avançada (F3 e F4) e estimamos o tempo de evolução para cirrose. MÉTODOS: foram selecionados transversalmente 142 doadores de sangue com infecção exclusiva peio VHC, biopsiados à admissão e com rota da infecção conhecida. A TPF foi calculada pela razão: Estádio da fibrose (METAVIR) pela duração estimada da infecção. Foram utilizados testes não paramétricos e análise de regressão linear e logística com nível de significância de 5%. RESULTADOS: A mediana da idade à inclusão foi 38 e de 19,5 anos à contaminação. A mediana da TPF foi 0,086 U/ano (0,05 a 0,142). A cirrose foi diagnosticada em 10 pacientes (7,04%), e 17,6% do total apresentavam F3. As medianas da TPF apresentaram diferença significante (p=0,001) com a idade à contaminação, ALT e AST categorizadas. Não houve diferença entre o gênero, rotas de infecção, genótipo e abuso de álcool. Foi observada 3 velocidades na progressão da fibrose. Os fibrosadores moderados (F2) e os rápidos (F3 e F4), não apresentaram diferença estatística na expectativa da evolução para cirrose (40, 26 e 20 anos, respectivamente). As variáveis independentes associadas à fibrose avançada foram ALT 3 vezes acima do LSN (OR 7,2 95% Cl), GGT 3 vezes acima do LSN (OR 6,495% Cl) e idade (OR 1,12 95% Cl). CONCLUSÕES: este estudo sugere que a progressão da fibrose é extremamente variável, parece ser exponencial, e é influenciada principalmente pelas características do hospedeiro, particularmente a idade à contaminação. Estes pacientes assintomáticos apresentam uma alta porcentagem de fibrose nos estádios de 2 a 4 / Abstract: Chronic hepatitis by HCV is progressive towards cirrhosis, with variable rate. We evaluated the rate of fibrosis progression (RFP), risk factors associated with advanced fibrosis (F3 and F4), and estimated the evolution time to cirrhosis. Methods: we transversely selected 142 blood donors infected only with HCV, submitted to liver biopsy at admission with a known route of infection. RFP= ratio between stage of fibrosis (METAVIR) / estimated duration of infection in years. Non-parametric tests and logistic regression analysis, with significance level of 5% were used. Results: Median RFP was 0.086 U/year (0.05 - 0.142). Ten patients had F4 and 25 had F3. Median RFP values were significantly different (p=0.001) from one age group at contamination to the others and ALT and AST levels. There were no differences in expected evolution to cirrhosis between intermediate fibrosers (F2) and the rapid fibrosers (F3 and F4). The independent variables associated with advanced fibrosis were ALT (OR 7.2) and GGT (OR 6.4) and age at inclusion (OR 1.12). Conclusion: this study suggests that RFP is extremely variable, exponential with age, and mainly influenced by host characteristics, especially age at contamination. This asymptomatic patients had hight percentage of F2, F3 and F4 / Doutorado / Clinica Medica / Doutor em Clínica Médica

Não consta resumo na publicação. / Abstract not available.

A doença hepática gordurosa não alcoólica (DHGNA) compreende um amplo espectro morfológico de doenças com potencial de progressão em pacientes sem história de etilismo. Pode evoluir para esteatohepatite não alcoólica (EHNA), fibrose, cirrose e carcinoma hepatocelular. Com intuito de investigar as diferenças genéticas entre tecido hepático normal e cirrose secundária a EHNA, utilizamos microarranjos de oligonucleotídeos (CodeLink Uniset Human Whole Genome Bioarray System GE Healthcare - Bio-Sciences, Chalfont St. Giles, UK) para caracterizar os perfis de expressão nas duas condições. Analisamos 3 amostras de cirrose secundária a EHNA e 3 amostras de fígado normal provenientes de doadores durante o transplante hepático. Para a análise dos dados utilizamos o programa GenesifterTM analysis (VizX Labs LLC, Seattle, WA, USA; http://www.genesifter.net) para identificar os genes diferencialmente expressos e também as vias biológicas moduladas de acordo com a ontologia gênica. Posteriormente, para avaliarmos a expressão imunohistoquímica utilizamos a técnica de microarranjo tecidual em amostras de fígado normal (n=12), cirrose secundária a EHNA (n=10) e cirroses de outras etiologias (n=37). Identificamos 244 genes significativamente alterados em pelo menos 2 vezes. Destes, 138 genes apresentavam-se com expressão aumentada e 106 genes com expressão diminuída na cirrose secundária a EHNA comparados ao fígado normal. Foram selecionadas 9 vias metabólicas significativamente desreguladas. Dentre estas vias identificadas na cirrose secundária a EHNA, selecionamos a via de sinalização do mTOR e seu efetor 4EBP-1 para a análise da expressão protéica. Houve aumento significativo na expressão de 4EBP-1 no fígado normal comparado às outras cirroses, assim como na cirrose secundária a EHNA versus outras cirroses. Quanto à forma fosforilada houve apenas diferença na expressão entre fígado normal e cirroses de outras etiologias. A expressão de mTOR mostrou aumento significativo entre cirroses de outras etiologias quando comparadas ao fígado normal e cirrose secundária a EHNA. A expressão de mTOR fosforilado foi maior na cirrose secundária a EHNA quando comparada às cirroses de outras etiologias e fígado normal. Estudos recentes têm sugerido o papel do mTOR na DHGNA e o presente estudo corrobora a participação desta via também na cirrose secundária a EHNA. A avaliação imunohistoquímica de 4EBP-1 e mTOR fosforilado pode ser útil clinicamente para o diagnóstico diferencial entre cirrose secundária a EHNA versus cirroses de outras etiologias, quando a etiologia é desconhecida / Non-alcoholic fatty liver disease (NAFLD) encompasses the whole spectrum of steatosis, non-alcoholic steatohepatitis (NASH), and NASH-related cirrhosis (NASH/Cir). NASH/Cir can progress to hepatocellular carcinoma and reoccur post transplantation. Although molecular advances have been made in this field, the patogenesis of NAFLD is not completely understood. In an effort to investigate genetic differences between normal liver and NASH/Cir, first we used cDNA microarray (CodeLink Uniset Human Whole Genome Bioarray System GE Healthcare - Bio-Sciences, Chalfont St. Giles, UK) in normal liver from donor liver wedge biopsies taken at transplantation (n=3) and confirmed NASH/Cir tissues (n=3) and GenesifterTM analysis (VizX Labs LLC, Seattle, WA, USA; http://www.genesifter.net) to identify differentially expressed genes and biological pathways according to gene ontology (GO). Second, tissue microarray was used to determine immunohistochemical expression in normal liver samples (n=12), NASH/Cir (n=10) and in cirrhosis of other etiologies (n=37). Analysis of microarray data resulted in 244 genes changed in at least 2-fold with statistically significant ratio: 138 and 106 genes were, respectively, up and downregulated in NASH/Cir in comparison to normal liver. GO analysis by GeneSifterTM software identified nine statistically significant pathways containing differentially expressed genes. Among the 9 pathways identified as significantly modulated in NASH/Cir, we selected mTOR pathway and its downstream effector for immunohistochemical analysis. There was a significant increase in the expression of 4EBP-1 in normal liver compared to the other cirrhosis, as well as to NASH/Cir versus other cirrhosis. The phosphorylated 4EBP-1 showed only difference in expression between normal liver and cirrhosis of other etiologies. The expression of mTOR showed a significant increase in other cirrhosis when compared with normal liver and NASH/Cir. The expression of phosphorylated mTOR was higher in NASH/Cir when compared to other cirrhosis and normal liver. Recent findings have suggested a role for the cellular nutrient sensor mTOR in NAFLD and the present study corroborates the participation of this pathway in NASH/Cir. 4EBP-1 and phospho-mTOR evaluation might be of clinical utility as differential diagnostic of NASH/Cir from other cirrhosis, without knowing etiology

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:22:13Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2010-02-12Bitstream added on 2014-06-13T19:07:27Z : No. of bitstreams: 1 vulcano_dsb_me_botfm.pdf: 1165851 bytes, checksum: ae1702dfaee6063d32a01859daa38f20 (MD5) / A doença hepática crônica influencia direta e indiretamente o estado nutricional do paciente, sendo a desnutrição bastante prevalente nesta população. As causas da desnutrição são multifatoriais, relacionadas à alteração na ingestão, na absorção e no metabolismo dos macro e micronutrientes. O diagnóstico nutricional torna-se difícil, pois, não existe um método considerado padrão-ouro e os métodos disponíveis podem não ser fidedignos pela influência da própria doença no resultado. O objetivo do trabalho foi avaliar os indicadores do estado nutricional e a composição corporal dos pacientes portadores de cirrose hepática e relacioná-los com o sexo, a etiologia e a gravidade da doença hepática. Os indicadores nutricionais avaliados foram os antropométricos (Índice de Massa Corpórea específico para pacientes cirróticos, dobras cutâneas e circunferências), os funcionais (dinamometria e espessura do músculo adutor do polegar), a avaliação nutricional subjetiva global e os laboratoriais (albumina, hemoglobina, hematócrito e contagem total de linfócitos). Para a avaliação da composição corporal foi utilizada a bioimpedância elétrica unifrequencial (BIA) que mensurou a resistência (R), a reactância (Xc), o ângulo de fase (AF) e a massa celular corpórea (MCC). A gravidade da doença hepática foi estimada pelos critérios de Child-Pugh e pelo Meld (The model end-stage liver disease). Os indicadores do estado nutricional foram dicotomisados em: desnutrição e sem desnutrição ou com depleção e sem depleção. Os pacientes cirróticos de etiologia alcoólica apresentaram maior depleção em todos os parâmetros antropométricos, funcionais e na avaliação nutricional subjetiva global (ANSG), sendo estatisticamente significante para Circunferência do Braço (CB), Circunferência Muscular do Braço (CMB) e ANSG... / The chronic hepatic disease directly and indirectly influences on patient’s nutritional status and malnutrition is highly prevalent in this population. The causes of malnutrition are multifactorial, related to alterations on ingestion, absorption and metabolism of macro and micronutrients. The nutritional diagnosis is difficult, because there isn’t a gold standard method, and available methods are not reliable, once the disease itself interferes in the result. The objective of the work was to appraise nutritional status indicators and body composition of cirrhotic patients treated in the nutrition first aid posts of Faculdade de Medicina de Botucatu – UNESP, and relate them to gender, etiology and severity of the liver disease. The nutritional indicators appraised have been the anthropometrical (specific body mass index for cirrhotic patients, skinfolds and circumferences), the functional (dynamometry and thickness of the adductor pollicis muscles), the Subjective Global Assessment of Nutritional Status (SGA) and the laboratorial (albumin, hemoglobin, hematocrit, lymphocytes total count). On the appraisement of body composition, unifrequency bioelectrical impedance analysis (BIA) has measured resistance (R), reactance (Xc), phase angle (PA) and body cell mass (BCM). The severity of the liver disease has been estimated by the Child-Pugh score and by Meld (The Model end-stage liver disease). The nutritional status indicators have been dichotomized as following: malnutrition and without malnutrition, or with depletion and without depletion. Cirrhotic patients with alcoholic etiology have exhibited more depletion in all the anthropometrical and functional parameters and in the Subjective Global Assessment of Nutritional Status (SGA) and they have been statistically relevant for Arm Circumference (AC), Arm Muscular Circumference (AMC) and SGA... (Complete abstract click electronic access below)

Orientador: Benedito Barravieira / Coorientador: Lucilene Delazani dos Santos / Banca: Carlos Antônio Caramori / Banca: Alexandre Leite Rodrigues de Oliveira / Resumo: INTRODUÇÃO: A cirrose é o estágio final da doença hepática. Causada principalmente pelas hepatites virais e ingestão de álcool, o único tratamento específico atual é o transplante O projeto Global Burden of Disease (GBD) publicou recentemente na BMC Medicine uma nova avaliação da mortalidade pela cirrose. Vários métodos e fontes de dados levaram a estimativa global de pouco mais de um milhão de mortes em 2010, cerca de 2% de todas as mortes. Nos últimos anos, as pesquisas biotecnológicas favoreceram a descoberta da terapia alternativa para cirrose usando células tronco. Estas geraram grande expectativa na regeneração tecidual e sua aplicação no tratamento. Um dos grandes desafios enfrentados foi sua reduzida fixação das células no fígado, com dispersão para todo organismo e sem a efetividade esperada. As metodologias ainda não encontraram uma maneira eficaz de impedir que estas células difundam para os outros órgãos diminuindo sua eficácia pretendida. OBJETIVO: Avaliar o selante de fibrina derivado da peçonha de serpente (SFDPS) como arcabouço para células tronco mesenquimais (CTMs) em fígados cirróticos. MÉTODOS: O modelo de cirrose experimental em ratos foi induzido pela tioacetamida (C2H5NS), aplicada duas vezes por semana por via intraperitoneal (i.v.) na dose de 200mg/kg. A coleta de sangue foi realizada uma vez por mês para as analises bioquímicas. O isolamento das células tronco foi realizado de acordo com Gasparotto et al., 2014. A marcação para citometria foi realizada em segunda passagem com os marcadores RT1 AW2 FITC, CLASS RT1 PE, CD11b, CD44, CD90, CD34, CD105, CD73, CD45, ICAM. A biomarcação da serinoprotease, um dos componentes do selante, foi realizada com o kit Alexa Fluor 488 Protein Labeling Kit (A30006v). A cirurgia foi realizada sob anestesia inalatória com isoflurano; os animais foram selecionados aleatoriamente em três grupos os quais receberam o tratamento especificado. Na... / Abstract: Introduction: Cirrhosis is the final stage of liver disease mainly caused by viral hepatitis, alcohol intake, and currently it can only be reversed by liver transplantation. In a new assessment of mortality of liver cirrhosis by design Global Burden of Disease (GBD) in the BMC Medicine, a variety of methods and data sources has led to an overall estimate of just over a million deaths in 2010, which was about 2% of all deaths. In recent years, research has intensified on biotech issues, favoring therapeutic discovery of stem cells to cirrhosis, which have generated great expectations in tissue regeneration of the liver and its application. However, a major problem faced was its low setting in cirrhotic liver, with spread to the whole body and without the expected effectiveness. The investigations have not yet found a way to effectively prevent stem cells spread to other organs reducing their effectiveness regeneration. AIM: Evaluate the fibrin glue derived from snake venom (SFDPS) as a scaffold for stem cells in cirrhotic livers. Methods: The model of experimental cirrhosis in rats was induced by Thioacetamide (C2H5NS), twice per week intraperitoneally (iv) at 200 mg / kg. The of blood collection was performed for biochemical analysis in B200 equipment. Isolation of stem cells was performed according Gasparotto et al. 2014. The markup for cytometry was performed on the second pass with markers RT1 AW2 FITC, CLASS RT1 PE, CD11b, CD44, CD90, CD34, CD105, CD73, CD45, ICAM. The biomarker of serine protease was performed with Alexa Fluor 488 Protein Labeling Kit (A30006v) kit. The surgery has been realized with inhalational anesthesia, the animals were separated into three groups where they received the treatment selected. Histology of 5μm sections were hematoxylin and eosin for staining (HE) and Picrosirius. Immunostaining was performed according to kit Click-it ® Imaging kits EdU. RESULTS: The development of cirrhosis was macroscopically ... / Mestre