Made available in DSpace on 2012-09-06T01:11:53Z (GMT). No. of bitstreams: 2 license.txt: 1748 bytes, checksum: 8a4605be74aa9ea9d79846c1fba20a33 (MD5) 256.pdf: 1172274 bytes, checksum: 68658bbceb0ae55a41e1ecc9323bf1d7 (MD5) Previous issue date: 2001 / Tem sido relatado que infecçöes e estímulos inflamatórios causam alteraçöes da atividade e dos níveis de expressäo de várias formas de citocromos P450 (CYP) hepáticos em animais de laboratório e em seres humanos. Estas alteraçöes podem ter reflexos tanto no clearance de fármacos quanto na ativaçäo meólica de pró-mutágenos, pró-carcinógenos e pró-teratógenos. Assim, infecçöes e processos inflamatórios estäo entre os fatores que modulam a atividade ou a expressäo dos CYP e podem alterar a cinética e a toxicidade de xenobióticos. Teve como objetivo avaliar os efeitos da infecçäo com S., mansoni sobre o conteúdo total de citocromos P450, as atividades de isoenzimas das subfamílias 1A, 2A e 2B, e os níveis de CYP10 e 2A5 na fraçäo microssomal hepática de camundongos das linhagens Swiss Webster e DBA/2. Avalia a evoluçäo da esquistossomose murina em Swiss Webster e DBA/2 comparando dois modelos de infecçäo experimental animais infectados com 100 cercárias aos 10 dias de vida (lactentes) ou na vida adulta (45 dias de vida). Foram determinados o peso corporal e de órgäos (fígado, baço e intestinos), o ganho ponderal, o índice de penetraçäo das cercárias, a mortalidade, a taxa de recuperaçäo de vermes após perfusäo sistêmica e o número de ovos no fígado e intestinos. Indica que na fase intermediária de evoluçäo da esquistossomose mansônica murina (55 dias pós infecçäo) há uma acentuada diminuiçäo dos níveis totais de CYP e de atividades relacionadas as subfamílias CYP1A e CYP2B. Por outro lado, contrastando com esta depressäo generalizada de CYPs, há um claro aumento de CoH, relacionada ao CYP2A5/2 infectados.

Tesis para optar al Grado Académico de Magíster en Bioquímica Área de Especialización: Toxicología y Diagnóstico Molecular y Memoria para optar al Título Profesional de Bioquímica / Los médicos prescriben fármacos sobre la base de sus características farmacológicas y sobre la posibilidad de obtener resultados clínicamente reproducibles. Sin embargo, muchos de los fármacos son eficaces en sólo 25% a 60% de los pacientes, por lo tanto, muchos pacientes no responden a los tratamientos e incluso experimentan reacciones adversas e intoxicaciones. Existen variaciones individuales en las respuestas a fármacos que pueden deberse a diversos efectos, pero en la actualidad se sabe que muchas de estas variaciones se encuentran predeterminadas genéticamente; éste es el blanco de estudio de la farmacogenética. La debrisoquina-4-hidroxilasa (CYP2D6) es una de las enzimas más importante del metabolismo de fármacos que actúan tanto a nivel del sistema nervioso central (SNC) como del sistema circulatorio. Los polimorfismos de CYP2D6 presentan grandes diferencias en las frecuencias alélicas según la población y etnia. En este estudio se analizaron a través de PCR-AS semianidada, PCR RFLP y PCRL las variables CYP2D6*2, CYP2D6*3, CYP2D6*4 y la duplicación del gen CYP2D6 en 321 voluntarios sanos. Las frecuencias alélicas encontradas son muy similares a las registradas para la población española: para *2 un 40,5%, para *3 un 1,09%, para *4 un 11,8%. No se encontraron duplicaciones del gen CYP2D6 en un subgrupo de 20 voluntarios analizados. Para determinar con exactitud la influencia de los polimorfismos del gen CYP2D6 en su actividad debrisoquina hidroxilasa, se seleccionaron 23 voluntarios del grupo en estudio que presentaban genotipos relevantes, los cuales debieron ingerir el marcador metabólico debrisoquina. Se recolectaron las muestras de orina de 0-8 horas y se analizaron a través de HPLC. Presentaron el fenotipo esperado 18 voluntarios, de los cuales el más relevante es el genotipo *4/*4 que presentó una actividad catalítica muy disminuida en comparación al grupo wt/wt. Se obtuvo una correlación genotipo-fenotipo para algunos voluntarios logrando el objetivo fundamental que busca un estudio farmacogenético, es decir, la determinación de la respuesta individual

Tesis para Optar al Grado Académico de Magíster en Bioquímica, Área de Especialización: Toxicología y Diagnóstico Molecular / Memoria para Optar al Título de Bioquímica / El ser humano está constantemente expuesto a agentes externos (xenobióticos), entre los que se incluyen los fármacos. La mayoría de estos xenobióticos son lipofílicos siendo absorbidos por la mucosa gastrointestinal hacia la circulación sistémica. Para facilitar su excreción existen enzimas de biotransformación, tales como las monooxigenasas o citocromo P450 (CYP), las cuales se encuentran principalmente en el hígado y transforman sustancias lipofílicas en compuestos hidrofílicos modificando la velocidad de excreción, la vida media y otras propiedades fármaco/tóxicocinéticos. La variabilidad interindividual en el metabolismo y respuesta a fármacos es extensa debido a las características genéticas individuales y las interacciones con otros xenobióticos. Este tema es abordado por la farmacogenética, una disciplina que analiza la información genética del paciente para diseñar una terapia farmacológica más apropiada y por consiguiente, la información previa de esto puede ser beneficiosa, en especial en aquellos fármacos con un índice terapéutico estrecho o una concentración plasmática mínima. Ello debido a que es bien sabido que la mayoría de las enzimas de biotransformación son polimórficas, causando ya sea la supresión, disminución o aumento del metabolismo de fármacos. Por lo tanto, es necesario conocer su variación en un individuo para ajustar una terapia farmacológica individualizada. Una de las enzimas relevantes en la respuesta farmacológica, responsable del metabolismo de gran cantidad de fármacos y que corresponde casi al 30% de las enzimas P450 hepáticas es CYP3A4. Se han descrito numerosos polimorfismos en el gen que codifica para esta enzima, siendo CYP3A4*1B uno de los más estudiados. Al respecto, estudios in vitro han mostrado que esta variante exhibe una actividad enzimática dos veces menor que el genotipo común o wild type CYP3A4 wt/wt, sin embargo, in vivo no se ha logrado demostrar que esta variante esté asociada a una disminución de la actividad enzimática. El medicamento hipnosedativo Zolpidem utilizado para iniciar o mantener el sueño es biotransformado principalmente por CYP3A4, por lo que esta enzima puede tener un papel muy relevante en la respuesta farmacoterapéutica. A pesar de que se han realizado estudios in vitro que han demostrado su biotransformación por CYP3A4 (61%), CYP2C9 (22%) y CYP1A2 (14%), aún no se demuestra que la presencia del polimorfismo de CYP3A4 *1B altere los parámetros farmacocinéticos en humanos, ya sea sometidos a monodosis o a un tratamiento con Zolpidem. De acuerdo a estos antecedentes, el objetivo del presente trabajo de tesis persiguió determinar la frecuencia del polimorfismo CYP3A4 *1B en la población chilena sana, y asociar el polimorfismo a cambios en los parámetros farmacocinéticos de Zolpidem en un grupo de voluntarios sanos sometidos a una monodosis de Zolpidem. La detección de los diferentes genotipos se realizó a través de PCR-RFLP convencional y los parámetros farmacocinéticos se obtuvieron mediante análisis por cromatografía líquida de alta resolución (HPLC). Los resultados obtenidos mostraron una frecuencia genotípica de un 0,889 para el genotipo silvestre (wt/wt), 0,111 para los heterocigotos (wt/*1B) y no se encontraron individuos homocigotos mutados (*1B/*1B) en 253 chilenos sanos. La frecuencia alélica fue de un 0,945 para el alelo silvestre (wt) y un 0,055 para el alelo mutado (*1B). El análisis estadístico para establecer la relación entre el genotipo y los parámetros farmacocinéticos de 32 personas estudiadas (28 para wt/wt y 4 para wt/*1B) no mostró una asociación estadísticamente significativa, por lo que sería necesario disponer de un mayor número de individuos tratados con el fármaco de modo de establecer la presencia de metabolizadores rápidos o lentos de Zolpidem o en su defecto realizar un estudio farmacocinético en un grupo de individuos previamente identificados como portadores del alelo mutado. Sin perjuicio de lo anterior, es necesario destacar que el objeto último de la farmacogenética es establecer respuestas individuales, por lo que el hallazgo de 4 individuos con genotipo mutado y el análisis de sus niveles plasmáticos de Zolpidem podrían permitir disponer de una herramienta útil para el ajuste de la dosis de este medicamento. / Human beings are constantly exposed to external agents (xenobiotics), including drugs. Most of xenobiotics are lipophilic and therefore they are absorbed by gastrointestinal mucous towards the systemic circulation. To facilitate their excretion biotransformation enzymes, such as monooxygenases or cytochrome P450 (CYP), found mainly in the liver, change lipophilic substances to hydrophilic compounds by modifying their excretion rate, half-life, and other pharmacokinetics or toxicokinetics properties. The interindividual variability in metabolism and drug responses is huge because of individual genetics characteristic and interactions with other xenobiotics. This topic is approached by pharmacogenetics, an area that analyzes the genetic makeup of patients a suitable pharmacological therapy design and therefore. The knowledge derived from this research can be beneficial, especially for those drugs with a tight therapeutic index or minimum plasmatic concentration. Since it is well-known that most biotransformation enzymes are polymorphic, causing suppression, decrease or increase of drug metabolism, it is necessary to know individual variation to fit an individualized pharmacology therapy. One of the relevant enzymes responsible for the metabolization of many drugs and part of hepatic P450 enzymes is CYP3A4. This enzyme presents several polymorphisms, being CYP3A4*1B one of the most studied. In vitro studies have shown that this variant shows only half of the enzymatic activity of the common genotype (CYP3A4 wild type). It has not been shown in vivo that this variant is associated to an enzymatic activity reduction. The hypnosedative drug Zolpidem used to induce or maintain sleep is mainly biotransformed by CYP3A4, therefore this enzyme may have a relevant role in the pharmacotherapeutic response. In spite of in vitro studies have demonstrated its biotransformation by CYP3A4 (61%), CYP2C9 (22%) and CYP1A2 (14%), it still has not been shown that the presence of the CYP3A4*1B polymorphism modifies zolpidem pharmacokinetic parameters in humans, whether they are administered as a monodose or a treatment sustained. The goal of this thesis was to determine CYP3A4*1B polymorphism frequency in a healthy Chilean population and in a group of healthy volunteers under a Zolpidem monodose treatment, and to relate the genotypes frequencies to changes in Zolpidem pharmacokinetic parameters. Detection of correlated genotypes were realized through conventional PCR-RFLP and the pharmacokinetic parameters were measured through high performance liquid chromatography (HPLC) analysis. The results showed a genotypic frequency of 0,889 for the wild type genotype (wt/wt) and 0,111 for heterozygous (wt/*1B). We did not find homozygote individuals for the (*1B/*1B) genotype in 253 healthy Chileans. The allelic frequency was 0,945 for the wild type allele (wt) and 0,055 for mutated allele (*1B). The statistic analysis to establish the relation among genotype and pharmacokinetic parameters of 32 individuals (28 wt/wt and 4 wt/*1B) did not show a significant statistically association. It will be necessary to analyze a higher number of subjects treated with the drug to establish rapid or poor Zolpidem metabolizers. Alternatively a pharmacokinetic study can be restored in a group previously identified as carriers of mutated allele. It is important to stand out that the final purpose of pharmacogenetics is the establishment of individual answers, therefore, the finding of wt/*1B genotype subjects together with their plasma levels of Zolpidem could permit us to have an useful tool to fit the drug posology.

Introdução: A esquizofrenia é uma doença mental que evolui para a cronicidade em mais de 80 % dos casos, caracterizada por distorções do pensamento, delírios bizarros, alterações na senso-percepção e respostas emocionais inadequadas, que podem levar o paciente a algum grau de deterioração. É uma das formas mais importantes de doença psiquiátrica, porque afeta pessoas jovens, com evolução em geral para incapacitação funcional e prejuízo social. A farmacoterapia tem provado ser o ponto chave na terapêutica da esquizofrenia. Embora não curativas, as drogas antipsicóticas se estabeleceram como o tratamento primário para todos os estágios da doença, possuindo efeito clínico significativo em cerca de 80 % dos casos,os demais apresentam a chamada forma refratária, que responde em 60 % dos casos a medicação denominada Clozapina.A CYP1A2 é a principal enzima hepática de metabolização da clozapina, e o conhecimento prévio de sua atividade enzimática pode possibilitar a personalização da terapia medicamentosa, permitindo ao médico escolher o fármaco e a dose que melhor se adapte ao perfil de metabolização do paciente, aumentando desta forma a eficácia do tratamento e a redução do aparecimento dos efeitos adversos descritos para a clozapina. Objetivo: Avaliar a excreção de cafeína inalterada na urina, como um indicativo da atividade da CYP1A2, através da utilização de cafeína como fármaco de prova. Metodologia: Foram estudados 20 adultos portadores do diagnóstico DSM-IV e CID-10 de Esquizofrenia, com forma refratária, estabilizados, em uso continuado de clozapina há pelo menos 12 meses. Foi administrado 200mg de cafeína com coleta de urina 6 horas após, e dosagem através de uma técnica de cromatografia gasosa. Não foi evidenciada correlação entre a dose de clozapina administrada e a cafeína detectada, a qual deveria ser negativa, o que pode ser explicado pelo tamanho da amostra. Porém, a excreção de cafeína apresentou diferença (P=0,019) entre homens e mulheres, acompanhando o descrito na literatura para a atividade da CYP1A2.

Introdução: A esquizofrenia é uma doença mental que evolui para a cronicidade em mais de 80 % dos casos, caracterizada por distorções do pensamento, delírios bizarros, alterações na senso-percepção e respostas emocionais inadequadas, que podem levar o paciente a algum grau de deterioração. É uma das formas mais importantes de doença psiquiátrica, porque afeta pessoas jovens, com evolução em geral para incapacitação funcional e prejuízo social. A farmacoterapia tem provado ser o ponto chave na terapêutica da esquizofrenia. Embora não curativas, as drogas antipsicóticas se estabeleceram como o tratamento primário para todos os estágios da doença, possuindo efeito clínico significativo em cerca de 80 % dos casos,os demais apresentam a chamada forma refratária, que responde em 60 % dos casos a medicação denominada Clozapina.A CYP1A2 é a principal enzima hepática de metabolização da clozapina, e o conhecimento prévio de sua atividade enzimática pode possibilitar a personalização da terapia medicamentosa, permitindo ao médico escolher o fármaco e a dose que melhor se adapte ao perfil de metabolização do paciente, aumentando desta forma a eficácia do tratamento e a redução do aparecimento dos efeitos adversos descritos para a clozapina. Objetivo: Avaliar a excreção de cafeína inalterada na urina, como um indicativo da atividade da CYP1A2, através da utilização de cafeína como fármaco de prova. Metodologia: Foram estudados 20 adultos portadores do diagnóstico DSM-IV e CID-10 de Esquizofrenia, com forma refratária, estabilizados, em uso continuado de clozapina há pelo menos 12 meses. Foi administrado 200mg de cafeína com coleta de urina 6 horas após, e dosagem através de uma técnica de cromatografia gasosa. Não foi evidenciada correlação entre a dose de clozapina administrada e a cafeína detectada, a qual deveria ser negativa, o que pode ser explicado pelo tamanho da amostra. Porém, a excreção de cafeína apresentou diferença (P=0,019) entre homens e mulheres, acompanhando o descrito na literatura para a atividade da CYP1A2.

Introdução: A esquizofrenia é uma doença mental que evolui para a cronicidade em mais de 80 % dos casos, caracterizada por distorções do pensamento, delírios bizarros, alterações na senso-percepção e respostas emocionais inadequadas, que podem levar o paciente a algum grau de deterioração. É uma das formas mais importantes de doença psiquiátrica, porque afeta pessoas jovens, com evolução em geral para incapacitação funcional e prejuízo social. A farmacoterapia tem provado ser o ponto chave na terapêutica da esquizofrenia. Embora não curativas, as drogas antipsicóticas se estabeleceram como o tratamento primário para todos os estágios da doença, possuindo efeito clínico significativo em cerca de 80 % dos casos,os demais apresentam a chamada forma refratária, que responde em 60 % dos casos a medicação denominada Clozapina.A CYP1A2 é a principal enzima hepática de metabolização da clozapina, e o conhecimento prévio de sua atividade enzimática pode possibilitar a personalização da terapia medicamentosa, permitindo ao médico escolher o fármaco e a dose que melhor se adapte ao perfil de metabolização do paciente, aumentando desta forma a eficácia do tratamento e a redução do aparecimento dos efeitos adversos descritos para a clozapina. Objetivo: Avaliar a excreção de cafeína inalterada na urina, como um indicativo da atividade da CYP1A2, através da utilização de cafeína como fármaco de prova. Metodologia: Foram estudados 20 adultos portadores do diagnóstico DSM-IV e CID-10 de Esquizofrenia, com forma refratária, estabilizados, em uso continuado de clozapina há pelo menos 12 meses. Foi administrado 200mg de cafeína com coleta de urina 6 horas após, e dosagem através de uma técnica de cromatografia gasosa. Não foi evidenciada correlação entre a dose de clozapina administrada e a cafeína detectada, a qual deveria ser negativa, o que pode ser explicado pelo tamanho da amostra. Porém, a excreção de cafeína apresentou diferença (P=0,019) entre homens e mulheres, acompanhando o descrito na literatura para a atividade da CYP1A2.

Memoria para optar al título de Químico Farmacéutico / La toxicidad celular del cobre se ha relacionado con la capacidad que los iones de cobre libre tiene para catalizar, a través de las reacciones de Haber Weiss y/o Fenton, la producción de radicales libres del oxígeno (O2 .- y HO.); estos radicales inducen cambios en la estructura y/o función de las biomoléculas. Recientes investigaciones del laboratorio demostraron que diferentes enzimas tiólicas eran capaces de unir iones Cu2+ provocando pérdida de su actividad biológica. La monooxigenasa citocromo P450, enzima constituyente del sistema oxidativo citocromo P450, principal responsable de la biotransformación de xenobióticos lipofílicos, entre ellos los fármacos, es una proteína tiólica; ella une los sustratos a metabolizar en el primer paso del mecanismo catalítico, por lo tanto, la unión de cobre a esta enzima podría alterar la actividad catalítica del sistema oxidativo del citocromo P450. En este trabajo probamos los efectos de Cu2+ y Cu2+/ascorbato (sistema generador de radicales libres del oxígeno) sobre el espectro de absorbancia de la monooxigenasa citocromo P450 y sobre la O-desmetilación de p-nitroanisol, reacción catalizada por el sistema citocromo P450. Tanto el Cu2+ como el Cu2+/ascorbato disminuyeron la absorbancia máxima a 450 ηm de esta monooxigenasa. La extensión de esta disminución fue dependiente del tiempo de incubación y de la concentración de Cu2+; más aún, la disminución de la absorbancia fue prevenida por GSH, TTM y EDTA. Por otra parte, Cu2+ inhibió la O-desmetilación de p-nitroanisol; la extensión de esta inhibición fue dependiente de la concentración de Cu2+. Estos resultados parecen indicar que los mecanismos involucrados en esta inhibición están representados por la unión de los iones cobre a la monooxigenasa citocromo P450 y por los cambios redox provocados por la generación de radicales libres del oxígeno inducida por el sistema Cu2+/ascorbato. La importancia farmacodinámica de estos resultados es discutida en el texto / Cellular copper toxicity has been related to the capacity of free copper ions to catalyze, through Haber-Weiss/Fenton reaction, the production of oxygen free radicals species (O2 .- y HO.), so inducing oxidative changes to the structure and/or function of biomolecules. Recently, we have demonstrated that several thiol enzymes are capable to bind Cu2+, so altering their catalytic activities. Cytochrome P450 monooxygenase, enzyme constituent of cytochrome P450 oxidative system is a thiol protein. This monooxygenase binds the substrates in the first step of the catalytic mechanism; therefore, copper-binding to this enzyme may occur, so altering the catalytic activity of this oxidative system. In this work we assay the effects of Cu2+ and Cu2+/ascorbate on the cytochrome P450 monooxygenase spectrum and on the p-nitroanisole Odemethylation, enzymatic activity catalyzed by the cytochrome P450 system. Our results showed that Cu2+ and Cu2+/ascorbate decrease the monooxygenase absorbance to 450 nm as a copper concentration- and incubation-dependent manner. GSH, TTM and EDTA prevented this phenomenon. Moreover, Cu2+ inhibited the p-nitroanisol O-demethylation; the extension of this inhibitory effect was Cu2+ concentration-dependent. These results seem indicate that Cu2+ may inhibit the cytochrome P450 system activities by two mechanisms: copperbinding to the cytochrome P450 monooxygenase and oxidation induced by the oxygen free radicals generated by Cu2+/ascorbate. The pharmacodynamic importance of these phenomena is discussed in the text

O citocromo P450 (CYP450) e suas isoformas podem ser reguladas por compostos exogenos, endogenos e patologias. O Diabetes Mellitus (DM) e uma sindrome de etiologia multipla, decorrente da incapacidade da insulina em exercer adequadamente sua acao, sendo capaz de alterar a atividade do CYP450. Este estudo avalia a influencia do DM na atividade das isoformas CYP2D6 e CYP3A4 utilizando como marcadores de atividade o metoprolol (MET) e o midazolam (MDZ) respectivamente. Ratos machos Wistar, 200-250 g, foram tratados com dose unica, por via oral 20 mg/Kg para MET e 15 mg/Kg para MDZ. O DM foi induzido por estreptozotocina (50 mg/Kg) por via intravenosa. Midazolam, metoprolol e alfa-hidroximetoprolol foram analisados em plasma por cromatografia liquida de ultraperformance (coluna XR-ODS 100 mm x 3,0 mm) acoplada a espectrometro de massas. O preparo das amostras foi realizado por extracao liquido-liquido. A analise farmacocinetica do MDZ em ratos mostrou reducao significativa (54,01 vs 12,24 L/h/kg) no clearance dos animais diabeticos em relacao ao controle e aumento significativo (402,66 vs 1742,6 h.ng/mL) do AUC0- ‡ no grupo diabetico quando comparado com o controle. O DM modificou o AUC0- ‡ do MET no grupo diabetico em relacao ao controle (998,09 vs 348,45 h.ng/mL) acompanhado de reducao significativa do clearance no grupo diabetico (46,85 vs 17,80 L/h/kg). Desde que nao foi observada qualquer alteracao na farmacocinetica do alfa-hidroximetoprolol, o aumento do AUC0- ‡ do MET pode ser devido a inibicao de outra via de metabolizacao pelo DM, como comprovado pela alteracao na via do CYP3A. A analise dos dados sugere que o DM inibe a atividade do CYP3A4 e nao exerce influencia sobre a atividade do CYP2D6 / Cytochrome P450 (CYP450) and its isoforms can be regulated by exogenous and endogenous compounds and also diseases. Diabetes Mellitus (DM) is a multiple etiology syndrome resulting from a lack or inability of insulin to properly exercise its action, that can modify the CYP450 activity. This research evaluates the influence of DM on CYP2D6 and CYP3A4 isoforms activity employing metoprolol (MET) and midazolam (MDZ) as probe drugs. Male Wistar rats 200-250g, were treated with single oral dose of 20mg/kg for MET and 15 mg/kg for MDZ. Diabetes mellitus was induced by streptozotocin (50mg/kg) intravenously administered. Midazolam, metoprolol and alpha-hydroxymetoprolol were analyzed in plasma by ultraperformance liquid chromatography (column XR-ODS) coupled to a mass spectrometer. The sample preparation was perfomed using liquid-liquid extraction. Pharmacokinetics of MDZ in rats showed a significant decrease (54,01 vs 12,24 L/h/kg) of total clearance in the diabetic animals compared to control group and a significant increase (402.66 vs 1742.6 h.ng/mL) AUC0- ‡ in the diabetic group compared with the control. The DM altered the AUC0- ‡ of MET in the diabetic group compared to control (998.09 vs 348.45 h.ng/mL) followed by a significant decrease in clearance in the diabetic group (46.85 vs 17.80 L/h/kg). Since no changes in alpha- hydroxymetoprolol pharmacokinetics was observed, the increase in MET AUC0- ‡ can be explained by DM inhibition of other MET metabolization pathways. Data analysis suggests that DM inhibits CYP3A4 activity and had no effect on CYP2D6 activity / Conselho Nacional de Pesquisa e Desenvolvimento Científico e Tecnológico - CNPq

Made available in DSpace on 2012-09-05T18:24:04Z (GMT). No. of bitstreams: 2 license.txt: 1748 bytes, checksum: 8a4605be74aa9ea9d79846c1fba20a33 (MD5) 316.pdf: 1405673 bytes, checksum: 442a2a93e9c2d02b5b4d40ef2bbfe3a1 (MD5) Previous issue date: 2008 / (...) O objetivo deste estudo é fornecer informações para essas lacunas. Nós investigamos a cinética do antimoniato de meglumina (AM) em macacos Rhesus; avaliamos a transferência para o leite materno e lactentes quando ratas lactantes foram tratadas com AM; e estudamos a expressão e atividade de citocromos P450 (CYP) hepáticos em ratos machos tratados com AM. Macacos Rhesus foram tratados com injeções diárias intramusculares durante 21 diasconsecutivos e os níveis de antimônio no sangue, durante e após o tratamento, foram determinados. Níveis de antimônio residual (24 ou 48 horas) após a última injeção foram maiores em hemácias que no plasma. Tireóide, fígado, baço, vesícula, pulmões, pele e rins apresentaram níveis detectáveis de antimônio 60 dias após o fim dotratamento. Níveis detectáveis de antimônio foram encontrados no leite materno de ratas Wistar tratadas por via subcutânea com AM. As ninhadas das mães tratadas também apresentaram níveis detectáveis de Sb, sugerindo que o antimônio é transferido para o leite e absorvido pelos filhotes. Ratos machos adultos foram tratados com AM (300 mgSbV/ kg peso corpóreo/dia por via subcutânea) ou apenas com o veículo, durante 20 dias. As atividades de etoxiresorufina-O-desetilase (EROD), benziloxiresorufina-Odesbenzilase(BROD) erithromicina N-desmetilase (END) (marcadores de CYP1A1/2,CYP2B1/2 e CYP3A, respectivamente) estavam diminuídas nos microssomos hepáticos de ratos tratados com AM. Uma vez que as atividades de N-nitrosodimeilamina desmetilase (NDMA) e anilina 4-hidroxilase (A4H), marcadores de CYP2E1, estavamdiminuídas e a de p-nitrofenol-hidroxilase (PNPH) estava aumentada, sugerimos que a PNPH no fígado de ratos seja catalisada não somente CYP2E1, mas outras isoformas deCYP. As alterações encontradas e os resultados de immunoblotting e PCR real-time sugerem que o tratamento com AM altera as atividades de CYP através de mecanismos pós-traducionais.

Made available in DSpace on 2012-09-06T01:11:42Z (GMT). No. of bitstreams: 2 license.txt: 1748 bytes, checksum: 8a4605be74aa9ea9d79846c1fba20a33 (MD5) 759.pdf: 1770109 bytes, checksum: 7d8d95d8da9a2b5c5db2f639195ddba2 (MD5) Previous issue date: 2004 / Neste estudo avaliamos a freqüência de micronúcleos no sangue periférico, a atividade da etoxiresorufina-O-desetilase - EROD (marcador da atividade enzimática da subfamília CYP1A) no fígado, e os níveis de metais no músculo de peixes acarás (Geophagus brasiliensis) e cascudos (Hypostomus affinis e Hypostomus luetkeni) coletados na bacia do rio Paraíba do Sul. Biomarcadores inespecíficos como Fator de Condição e Índice Hepático também foram utilizados. Os peixes foram capturados nos trechos superior, médio-superior, médio-inferior e inferior da bacia do rio Paraíba do Sul em dois períodos distintos (chuva e estiagem). Dentre as espécies estudadas, G. brasiliensis foi a que coletamos com maior freqüência ao longo de toda a bacia. G. brasiliensis, H. affinis e H. luetkeni apresentaram uma tendência de aumento dos fatores de condição no período de chuvas quando comparamos aos valores obtidos no período de estiagem. Volta Redonda foi a região em que se coletou G. brasiliensis com os maiores valores de índice hepático. A freqüência de micronúcleos nos eritrócitos do sangue periférico das três espécies foi muito baixa (0,00-2,00 ) evidenciando ausência de dano genotóxico. A atividade de EROD em G. brasiliensis foi maior do que a das outras duas espécies em todos os locais de coleta. Na região de Levy Gasparian, onde foi possível capturar um grande número de peixes, a atividade de EROD em G. brasiliensis machos foi maior do que em fêmeas. A atividade de EROD de G. brasiliensis variou entre os locais de coleta, sendo os maiores valores registrados nos peixes de São Luiz do Paraitinga, Barra Mansa, Levy Gasparian, Três Rios e Sapucaia e os menores nos peixes de Paraibuna, Italva, Rio das Flores, Santo Antônio de Pádua e Campos. Os níveis de metais foram baixos nas três espécies em todas as regiões e no caso de chumbo e mercúrio, inferiores aos valores máximos permitidos pela regulamentação brasileira de alimentos (ANVISA). Estudos devem ser realizados para investigar as diferenças de EROD entre G. brasiliensis, H. affinis e H. luetkeni. As regiões de São Luiz do Paraitinga, Barra Mansa, Três Rios, Levy Gasparian e Sapucaia devem ser melhor investigadas quanto a poluentes indutores de CYP1A, uma vez que os peixes coletados nestes locais apresentaram as mais elevadas atividades de EROD.