Made available in DSpace on 2014-12-17T15:37:13Z (GMT). No. of bitstreams: 1 YwllianeRSM_DISSERT_noPW.pdf: 1856202 bytes, checksum: 7b03b226d479c14a9f1c59d7a70f7f2a (MD5) Previous issue date: 2012-04-26 / The protozoan parasite Toxoplasma gondii transforms the innate aversion of rats for cat urine into a fatal attraction, that increases the likelihood of the parasite completing its life cycle in the cat s intestine. The neural circuits implicated in innate fear, anxiety, and learned fear all overlap considerably, raising the possibility, that T. gondii may disrupt all of these nonspecifically. In this study, we evaluated immunoreactivity for tyrosine hydroxylase (TH) in areas associated with innate fear of infected male swiss mice. The latent Toxoplasma infection converted the aversion of mice to feline odors into attraction. This loss of fear is remarkably specific, as demonstrated by Vyas et al (2007), because infection did not diminish learned fear, anxiety-like behavior, olfaction, or nonaversive learning. However, the neurochemical mechanism related to alterations in innate fear due to T. gondii infection remains poorly studied. 20 mice were inoculated with bradyzoites (25 cysts) from a Toxoplasma gondii (Me-49 strain). The brains were removed after 60 days, sectioned and processed for TH immunohistochemistry. The correlation between the amount of cysts per area and the densitometric analysis of neurotransmitter reactivity was low in the areas implicated in innate fear of infected animals, when comparated with noninfected controls / O protozo?rio Toxoplasma gondii transforma a avers?o inata de ratos ? urina de gato em atra??o. Essa mudan?a pode aumentar a probabilidade de transmiss?o do parasito para o seu hospedeiro definitivo, os felinos, onde pode se reproduzir sexualmente. Os circuitos neurais envolvidos no medo inato, ansiedade ou medo aprendido se sobrep?em consideravelmente, aumentando a possibilidade de que o T. gondii possa interferir com todos de maneira n?o-espec?fica. Neste estudo, foi avaliada a imunorreatividade para tirosina hidroxilase (TH) em ?reas dopamin?rgicas relacionadas com o medo inato em camundongos sui?os machos infectados. A infec??o latente pelo parasita inverteu a avers?o aos odores de felinos. Esta modifica??o pode estar relacionada com a presen?a dos cistos na am?gdala, pois a infec??o n?o diminui medo aprendido, a ansiedade, o olfato, ou a aprendizagem n?o-aversiva. No entanto, o mecanismo neuroqu?mico relacionado a estas altera??es no medo inato durante a infec??o permanece pouco estudado. Os animais foram infectados com bradizo?tos (25 cistos) da cepa ME-49 de T. gondii. Os c?rebros foram removidos ap?s 60 dias, seccionados e processados para revelar a reatividade da enzima TH. Os cistos foram contados nas ?reas associadas ao circuito dopamin?rgico, bem como em regi?es relacionadas ao medo inato. A contagem por ?rea e a an?lise densitom?trica mostrou baixa rela??o entre a presen?a de cistos e a reatividade para TH regi?es de interesse nos animais infectados, quando comparados aos controles n?o-infectados

Made available in DSpace on 2015-03-26T13:46:34Z (GMT). No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 205677 bytes, checksum: 93ca0cf3833e543ffed5592e081337ba (MD5) Previous issue date: 2006-03-23 / Fundação de Amparo a Pesquisa do Estado de Minas Gerais / The viability of the formulation with nematophagous fungi D. flagrans was evaluated in the biological control of cattle gastrointestinal nematodes. Two groups, with eight Holsteinzebu calves each, it was placed in two lots grazed with Brachiaria decumbens on four hectare each one. The experiment started in March of 2005 and turn off in September of 2005. In the control group (A), each animal received 20 grams without fungus of the pellets; in the treated group (B), the animals received 20 grams of with D. flagrans fungus pellets. The counting of the infective larvae recovered in the paddock of the group B, it harvested until 20 centimeters of the distance in the dung pats, it was lower than in the plot A (P<0.01) harvested until 20 centimeters in the distance in the dung pat), there was significative reduction in the larvae recovered in the pasture in 53, 71, 65 e 85 %, respectably, in the April, July, August and September months. The genera Cooperia was the most prevalence (59.9 %). The monthly averages of the weight were bigger in the group B (P<0.05), there was difference between the group B and A in relation in profit weight, in June, July, August and September in de 21, 13, 8,5 e 20 %, respectably. The accountings of the egg per grams of the feces were obtained by the of the Gordon & Whitlock; modified by Lima, and of the Wisconsin of the Cox & Todd, for dairy cattle, modified by Ito techniques and they present differences in the value of the eggs per grams counts for control and treated group (P<0.05). It was observed significative reduction in the count eggs obtained by Gordon & Whitlock technique in May, June, July and August months in treated group in the 35, 46, 36 e 30 % , respectably e do not significative reduction in September (26 %). By Wisconsin modified technique, it there were difference in the June, July and August months in 58, 47 e 51 %, in the treated group, in relation in the control group and do not significative reduction in May (26 %) and September (25 %). It can to conclude that the application of the sodium alginate pellets with nematophagous fungus D. flagrans is effective in the control of the infective larvae of the bovine. / A viabilidade de uma formulação de fungo nematófago Duddingtonia flagrans foi avaliada no controle biológico de nematóides parasitos gastrintestinais de bovinos. Dois grupos de oito bezerros cada, mestiços Holandês-zebu foram colocados em duas pastagens de Brachiaria decumbens de 4 hectares cada. O experimento foi realizado no período de março a setembro de 2005. No grupo controle (A), os animais receberam 20 gramas de péletes sem fungo; no grupo tratado (B), os animais receberam 20 gramas de péletes com o fungo D. flagrans via oral. As contagens de larvas infectantes encontradas na pastagem B, coletadas até 20 centímetros de distância do bolo fecal, foram significativamente menores (P < 0,01) que na pastagem A (até 20 cm), sendo que houve redução no número de larvas recuperadas nas pastagens de 53, 71, 65 e 85 %, respectivamente nos meses de abril, julho, agosto e setembro do grupo tratado em relação ao controle. sendo que o gênero Cooperia foi o mais prevalente (59,96 %). As médias mensais de peso foram maiores significativamente no grupo B (P < 0,05), sendo que houve diferença no ganho de peso entre os grupos tratado e controle nos meses de junho, julho, agosto e setembro de 21, 13, 8,5 e 20 %. As contagens de ovos por gramas de fezes (OPG) foram obtidas pelas técnicas de Gordon & Whitlock, modificada por Lima e de Wisconsin, de Cox & Todd, modificada por Ito e apresentaram diferenças para valores de contagens de ovos por gramas entre grupo tratado e controle (P<0,05). Foi observada redução significativa nos valores da contagem no grupo tratado obtidos pela técnica de Gordon & Whitlock nos meses de maio, junho, julho e agosto de 35, 46, 36 e 30 % respectivamente e redução não significativa no mês de setembro de 26 %. E os dados obtidos pela técnica de Wisconsin houve redução significativa nos meses de junho, julho e agosto respectivos de 58, 47 e 51 % no grupo tratado em relação ao controle e redução não significativa nos meses de maio (26 %) e setembro (25 %). Pode se concluir que a aplicação de péletes de alginato de sódio contendo o fungo nematófago D. flagrans é efetiva no controle de larvas infectantes de bovinos.

Made available in DSpace on 2015-03-26T13:46:53Z (GMT). No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 289107 bytes, checksum: 35ee72e2a4506163a5f402f0961d85fc (MD5) Previous issue date: 2004-05-19 / The viability of a formulation of the fungus Monacrosporium thaumasium (Drechsler, 1937) was evaluated for the biological control of bovine gastrointestinal nematode parasites. Two groups of seven female calves each, holstein x zebu crossbred, four to six months of age, were placed in Cynodon dactylon pastures. In group A, each animal received 20g of pellets of M. thaumasium orally twice a week during a four-month period that began with the onset of the rainy season (October, 2001). In group B (control), the calves did not receive any fungal treatment. The counts of eggs per gram of faeces (EPG) for anima1s of the group B were significantly greater (P< 0.05) than those for animaIs of the group A and the difference of the EPG between the animals of group A and B at the end of the study period was 88,8%. The nematodes of the Cooperia genus were the most prevalent in the both pastures. It is concluded that use of this dose and periodicity of application of M. thaumasium pellets were efficient in the control of bovine gastrointestinal nematode parasites. / A viabilidade de uma formulação do fungo Monacrosporium thaumasium (Drechsler, 1937) foi avaliada no controle biológico de nematóides parasitos gastrintestinais de bovinos. Dois grupos de sete bezerras cada, mestiças holandês x zebu, de quatro a seis meses de idade, foram colocados em pastagens de Cynodon dactylon. No grupo A, cada animal recebeu 20 g de péletes (formulação granulada) de M. thaumasium via oral, duas vezes por semana, durante quatro meses, com início na estação chuvosa (outubro de 2001). No grupo B (controle), os bezerros não receberam nenhum tratamento fúngico. As contagens de ovos por grama de fezes (OPG) dos animais e das larvas infectantes encontradas na pastagem do grupo B foram significativamente maiores (P< 0,05) do que as dos animais do grupo A, e a diferença entre o OPG dos animais do grupo A e o do grupo B, no final do experimento, foi de 88,8%. Os nematóides do gênero Cooperia foram os mais prevalentes em ambas as pastagens. Concluiu-se que a aplicação de péletes de M. thaumasium na dosagem e periodicidade de aplicação usadas foi eficiente no controle de nematóides parasitos gastrintestinais de bovinos.

Infection with Human Papillomavirus (HPV) is the sexually transmitted viral disease most prevalent in world. The infections can range from asymptomatic establishment to induction of squamous cell carcinomas. It has been discussed the correlation of HPV infection and the development and/or aggravation of lesions in the oral mucosa. The aim of this study was to evaluate the occurrence of HPV and its genotypes in patients with oral lesions and in healthy oral mucosa of users and non-users of drugs in the state of Sergipe, Brazil. Thirty-nine patients aged 2 to 83 years with clinically detectable lesions in the oral mucosa and 106 patients with healthy oral mucosa between 11 and 79 years were evaluated. Samples were collected by exfoliating the oral mucosa. For quality control of DNA extraction beta-globin PCR was performed. HPV DNA was detected using primers MY09/MY11 and GP5+/GP6+. Genotyping was performed by multiplex-PCR with specific primers for HPV types 6, 16 and 18. Our study detected the virus in all types of lesions evaluated. The occurrence of HPV was 76.92% (30/39) in patients with oral lesions. The most common virus type was HPV-6 in 56.67% (17/30), followed by HPV-18 in 26.67% (8/30) and HPV-16 in 6.67% (2/30). Positive results were found in 83.02% (88/106) of patients with healthy oral mucosa. The most common virus type was HPV-6 in 45.45% (40/88), followed by HPV-18 in 35.23% (31/88) and HPV-16 in 4.54% (4/88). Between multiple drug users 86.67% (52/60) were positive and multiple HPV infections were identified in 23.08% (12/52). At |non-users| the occurrence was 78.26% (36/46). A high occurrence of HPV was found in the study, both in oral lesions and in healthy mucosa. Rates of HPV detection in the oral cavity vary markedly in the world and make the relationship between HPV and oral carcinogenesis still controversial. Additional studies to evaluate the role of human papillomavirus in the development of lesions in the oral mucosa are necessary. There are few data available on the frequency of oral HPV infection in Brazilian population and especially among drug users. Other studies on HPV prevalence among drug users are needed for a better understanding of their exposure to the virus and for the development of prevention strategies. / A infecção pelo Papilomavírus Humano (HPV) é a doença viral sexualmente transmissível mais prevalente no mundo. Suas infecções podem variar de assintomáticas à indução de Carcinomas de Células Escamosas. Entre os agentes infecciosos associados ao câncer oral, tem-se discutido a correlação da infecção por HPV em mucosa oral e o desenvolvimento e/ou agravamento das lesões. O objetivo deste estudo foi avaliar a ocorrência do HPV e seus genótipos em pacientes com lesão oral e em mucosa oral saudável de usuários e não-usuários de drogas no estado de Sergipe, Brasil. Foram avaliados 39 pacientes com idade entre 2 e 83 anos, com lesões clinicamente detectáveis na mucosa oral e 106 pacientes com mucosa oral saudável entre 11 e 79 anos. As amostras foram coletadas por esfoliação da mucosa oral. Para o controle de qualidade da extração de DNA foi utilizado PCR para beta-globina. DNA-HPV foi detectado utilizando primers MY09/MY11 e GP5+/GP6+. A genotipagem foi realizada através de multiplex-PCR com primers específicos para os tipos virais 6, 16 e 18. Nosso estudo detectou DNA-HPV em todos os tipos de lesões avaliadas. A prevalência do HPV foi de 76,92% (30/39) nos pacientes com lesões orais. O tipo viral mais frequente foi o HPV-6, presente em 56,67% (17/30), seguido do HPV-18 em 26,67% (8/30) e do HPV-16 em 6,67% (2/30). DNA-HPV foi encontrado em 83,02% (88/106) dos pacientes com mucosa oral sadia. O tipo viral mais frequente foi o HPV-6, presente em 45,45% (40/88), seguido do HPV-18 em 35,23% (31/88) e do HPV-16 em 4,54% (4/88). Entre usuários de múltiplas drogas 86,67% (52/60) foram positivos e infecções múltiplas por mais de um tipo viral foram identificadas em 23,08% (12/52) dos indivíduos. Entre os "não usuários" a taxa de infecção pelo HPV foi de 78,26% (36/46). Desta forma, foi verificada uma alta ocorrência do HPV em nosso estudo, tanto em lesões orais quanto em mucosas saudáveis. As taxas de detecção do vírus em cavidade oral variam acentuadamente no mundo e tornam a relação do HPV com o processo de carcinogênese oral ainda controversa. Isso faz necessária a realização de estudos adicionais que avaliem o papel do Papilomavírus Humano no desenvolvimento de lesões na mucosa oral. Há poucos dados disponíveis sobre a frequência de infecção oral por HPV na população brasileira e especialmente entre usuários de drogas. Novos estudos sobre a prevalência do HPV entre usuários de drogas são necessários para melhor compreensão da sua exposição ao vírus e o desenvolvimento de estratégias de prevenção.

Submitted by Aline Batista (alinehb.ufpel@gmail.com) on 2017-04-13T19:34:20Z No. of bitstreams: 2 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Tiago Gallina Corrêa.pdf: 1514650 bytes, checksum: d88af72f3dfc4c6107504dc1ec16ea8a (MD5) / Approved for entry into archive by Aline Batista (alinehb.ufpel@gmail.com) on 2017-04-13T19:42:38Z (GMT) No. of bitstreams: 2 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Tiago Gallina Corrêa.pdf: 1514650 bytes, checksum: d88af72f3dfc4c6107504dc1ec16ea8a (MD5) / Made available in DSpace on 2017-04-13T19:42:38Z (GMT). No. of bitstreams: 2 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Tiago Gallina Corrêa.pdf: 1514650 bytes, checksum: d88af72f3dfc4c6107504dc1ec16ea8a (MD5) Previous issue date: 2005-10-14 / Sem bolsa / Dermatite alérgica estacional foi estudada em um rebanho de ovinos Hampshire Down em um estabelecimento no município de Capão do Leão, Rio Grande do Sul. A epidemiologia, sinais clínicos e lesões macroscópicas foram observadas no estabelecimento verificando-se a época de ocorrência da enfermidade, a idade e sexo dos animais afetados e localização das lesões. A patologia microscópica foi estudada em biopsias de pele de ovinos afetados. Para a verificação da etiologia, insetos foram capturados com aspiradores entomológicos, semanalmente, das 16h00minh às 09h00minh, entre os meses de janeiro a abril de 2005. Os dados relativos à temperatura média, umidade relativa do ar e velocidade média dos ventos na região de ocorrência da doença foram obtidos na Estação Agro-climatológica da Universidade Federal de Pelotas. A prevalência da doença no período estudado foi de 40% e animais de qualquer idade e ambos os sexos foram afetados. A enfermidade ocorreu principalmente entre dezembro e março e alguns animais permaneceram com lesões durante todo o ano. Os sinais clínicos eram de inquietação e prurido e as lesões ocorriam principalmente nas orelhas, ao redor dos olhos e na região ventral do abdômen, caracterizando-se pela presença de eritema e pápulas, nos casos agudos, e espessamento da pele com rachaduras, exsudação, formação de crostas, e alopecia, nos casos crônicos; esses freqüentemente apresentavam infecções secundárias. As lesões histológicas eram principalmente de dermatite eosinofílica perivascular, observando-se, também, hiperqueratose, acantose e presença de pústulas sub corneais ou intra-epidérmicas nos casos crônicos. Os insetos capturados no período de estudo da doença foram identificados como Anopheles albitarsis e Culicoides insignis. Durante a captura observou-se que os animais apresentavam prurido intenso quando picados por Culicoides, mas não por Anopheles. As temperaturas média mínima e máxima no período, foram de 17ºC e 28ºC, respectivamente, e a velocidade média dos ventos foi de 12,84km/h. Ambas as espécies de insetos capturados têm hábitos noturnos aproximando-se dos animais para hematofagia em torno de 30min após o ocaso do sol.Testes intradérmicos realizados com antígenos obtidos a partir desses dípteros revelaram reação de hipersensibilidade aos antígenos de C. insignis. Os resultados obtidos indicam que a enfermidade estudada ocorre em conseqüência de hipersensibilidade imediata causada pela picada desse díptero. / A seasonal dermatitis was studied in a Hampshire Down flock in a farm at the minicipality of Capão do Leão, state of Rio Grande do Sul, southern Brazil. Frequency and seasonal distribution of the disease, breed, sex and age of affected sheep, and clinical signs, macroscopic pathology and distribution of the lesions were obtained by visiting the farm. Histological lesions were studied in skin biopsies of affected sheep. Biting insects were collected weekly between 4:00 p.m. to 9:00 a.m., from January to April of 2005 to identify the etiological agent of disease. Data about temperature, humidity and wind speed in the region where the disease occurs were obtained in the agro climatologic Station of Pelotas Federal University. The prevalence of disease during the study period was 40% and the age of affected animals was variable. The disease occurs between December and March, but some animals stayed with lesions during the whole year. Clinical signs were characterized by pruritus and skin lesions in the ears, around the eyes, and ventral abdomen. Erythema and papules were observed in acute cases. In chronic cases, the skin was thicken, exsudative, crusty and alopecic, frequently with secondary infections. Histological lesions of affected sheep were characterized by perivascular eosinofilic dermatitis. Hyperkeratosis, acanthosis and intraepidermal pustules were observed in chronic lesions. Anopheles albitarsis and Culicoides insignis were captured during the observation period. Sheep showed pruritus mainly during de Culicoides bites. The mean minimum and maximum temperature in the period were 17ºC e 28ºC, respectively, and the mean speed wind was 12,84km/h. Both insects were caught when they approached the sheep bait 30minutes after sunset. Intradermal tests performed with de antigens of the insect extracts showed hypersensitivity reaction to C.insignis antigens. Based on the results it was suggested that the disease occurs as a consequence of an immediate hypersensitivity caused by C. insignis bite.

Dyslipidemia are changes in the metabolism of lipids that trigger changes in the concentrations of plasma lipoproteins, favoring the development of chronic degenerative diseases. Epidemiological studies demonstrate that these are associated with cardiovascular diseases, representing the leading cause of death among adults. The lipid profile is considered an important predictor of risk for cardiovascular disease (CVD ), being an important tool in the planning of more effective public health policies. It can be obtained by judicious use database, such as lipidogramas performed in clinical laboratories. High triglycerides rates (TG), total cholesterol (TC) and low density lipoprotein cholesterol (LDL -c) increase the chances of developing CVD. His literature review become in an article a systematic review. This research aimed to evaluate the association between the amount of lipid profile parameters gender and age group in the population of a city in Brazil. It is a descriptive, epidemiological, retrospective and longitudinal study, based on data collected in the 2003-2013 period, in a laboratory in Aracaju city, Sergipe. Sample surveys were excluded who presented incomplete or omitted information. This research was submitted to the Ethics Committee of the institution and had the consent of the laboratory coordinator where it was developed. The lipid profile was determined using the following markers: CT; High density lipoprotein cholesterol (HDL-C); LDL-C and TG. Statistical analysis was performed by means of variance and the central tendency measures. The inference was performed by Student t-test and the p value was < 0.05. The sample was intentional, consisting of 63,396 individuals, 24,425 males and 38,971 females, mean age 42.02 ± 17.38 years. The average value of TC, HDL-C, LDL -C and TG was, respectively, 193.39 ± 43.62 mg / dl, 48.80 ± 11.24 mg / dl, 118.35 ± 36.75mg / dl and 131.28 ± 82.21mg / dl. Between genders, there were statistically significant differences between TC, HDL-C, LDL -C and TG. Regarding age, there were significant differences among the values surveyed, with a peak between 40-59 years. It might be inferred that women have higher rates of TC and LDL -c; while men have low HDL- C and high TG levels, which predisposes to the development of metabolic syndrome. / Dislipidemias são modificações no metabolismo dos lipídios que desencadeiam alterações nas concentrações das lipoproteínas plasmáticas, favorecendo o desenvolvimento de doenças crônico-degenerativas. Estudos epidemiológicos demonstram que essas estão associadas às doenças cardiovasculares, representando a principal causa de mortalidade entre adultos. O perfil lipídico é considerado um importante preditor do risco de doença cardiovascular (DCV), sendo uma importante ferramenta no planejamento de políticas públicas de saúde mais eficazes. Pode ser obtido através da utilização criteriosa de banco de dados, como os lipidogramas realizados em laboratórios de análises clínicas. Taxas elevadas de triglicerídeos (TG), colesterol total (CT) e colesterol de lipoproteína de baixa densidade (LDL-c) aumentam as chances de desenvolvimento de DCVs. Sua revisão de literatura foi trasformada em um artigo de revisão sistemática. Esta pesquisa teve como objetivo principal avaliar a associação entre o valor dos parâmetros do perfil lipídico entre os sexos e a faixa etária, na população de uma cidade no Brasil. Trata-se de um estudo descritivo, epidemiológico, retrospectivo e longitudinal, baseado em dados coletados no período de 2003 a 2013, em um laboratório na cidade de Aracaju, Sergipe. Foram excluídos da amostra os exames que se apresentaram incompletos ou com informações omitidas. Esta pesquisa foi submetida ao Comitê de Ética em Pesquisa da instituição de ensino e teve a anuência do coordenador do laboratório onde foi desenvolvida. O perfil lipídico foi determinado utilizando-se os seguintes marcadores: CT; colesterol de lipoproteína de alta densidade (HDL-c); LDL-c e TG. A análise estatística foi realizada por meio de medidas de tendência central e variância. A inferencial foi realizada pelo teste t de Student e o valor de p foi < 0,05. A amostra foi do tipo intencional, composta por 63.396 indivíduos, sendo 24.425 do sexo masculino e 38.971 do sexo feminino, com idade média de 42,02 ± 17,38 anos. O valor médio de CT, HDL-c, LDL-c e TG foi de, respectivamente, 193,39 ± 43,62 mg / dl, 48,80 ± 11,24 mg / dl, 118,35 ± 36.75mg / dl e 131,28 ± 82.21mg/dl. Entre os gêneros, observaram-se diferenças estatisticamente significativas entre CT, HDL-c, LDL-c e TG. Com relação à idade, houve diferenças significativas entre os valores pesquisados, tendo um pico entre 40-59 anos. Pôde-se inferir que as mulheres têm taxas mais elevadas de CT e LDL-c; enquanto os homens têm baixo HDL-C e níveis elevados de TG, o que os predispõe ao desenvolvimento da síndrome metabólica.

Made available in DSpace on 2014-08-20T13:32:50Z (GMT). No. of bitstreams: 1 dissertacao_vanusa_hora.pdf: 894481 bytes, checksum: 1cff4e13f238f761e9054b5864d2655e (MD5) Previous issue date: 2006-10-30 / Schistosomiasis, caused by Schistosoma mansoni, is the second most prevalent parasitic disease worldwide causing chronic disease in millions of people in developing countries. Similarly, fascioliasis, caused by the trematode Fasciola hepatica, represents a recognized unsolved agricultural problem responsible for economic losses as well as causing a significant number of human infections worldwide. Although chemotherapy for both parasites has been available, this approach has limitations, including high reinfection rates in endemic areas. Vaccines represent the most attractive long-term alternative to invert this scenario. Accordingly, the World Health Organization selected S. mansoni fatty acid-binding protein 14kDa (Sm14) as one out of two anti-schistosome vaccine priority candidates for human clinical trials. Furthermore, Sm14 is the only vaccine candidate to have been shown to afford significant immune protection against both of the above-mentioned helminthes. The objective of this study was to develop and evaluate in mice a recombinant subunit vaccine containing the Sm14 fused to the B subunit of the heat-labile enterotoxin of Escherichia coli (LTB), which is a potent immunoadjuvant; furthermore, was describe the production and characterization of monoclonal antibodies (MAbs) against the Sm14 for use as a tool to detect and characterize Sm14 and for development of future diagnostic test. The ltb and sm14 gene were obtained by PCR amplification from E. coli DNA and plasmid pAESm14, respectively, and fused by PCR. The recombinant chimera was expressed in E. coli and purified by nickel affinity chromatography. Groups of outbreed Swiss mice were immunized with three footpad doses of either rLTB/Sm14, rLTB/Sm14 plus aluminum hydroxide (Al(OH)3), rSm14 plus Al(OH)3, rLTB or Al(OH)3. Levels of protection were determined by number of worms recovered after S. mansoni cercarial challenge. The pooled sera of immunized mice were evaluated by ELISA and Western blot. The results showed that the chimera protein was able to elicit specific antibody production to rSm14 and rLTB, however the use of LTB as adjuvant to rSm14 immunization failed to enhance protection against challenge. Furthermore, seven MAbs were obtained after immunization of BALB/c mice with rLTB/Sm14. MAbs isotyping revealed that five were of the isotype IgG1, one belonged to the IgG2b isotype and another to the IgM isotype. These MAbs will be usefull for monitoring protein expression in recombinant systems, protein stability and may have potential for developing diagnostic test. / A esquistossomose, causada por Schistosoma mansoni, é a segunda doença parasitária mais prevalente no mundo causando doença crônica em milhões de pessoas em países em desenvolvimento. Semelhantemente, a fasciolose, causada pelo trematódeo Fasciola hepatica, representa um reconhecido problema agrícola responsável por perdas econômicas assim como causa um significante número de infecções em humanos por todo mundo. Embora a quimioterapia para ambos os parasitas esteja disponível, ela tem apresentado limitações, incluindo altas taxas de reinfecção em áreas endêmicas. Vacinas representam a alternativa mais atraente para inverter este cenário. Assim, a Organização Mundial da Saúde selecionou a proteína ligadora de ácidos graxos 14kDa de S. mansoni (Sm14) como uma de duas candidatas à vacina anti-esquistossomose prioritárias para triagem clínica em humanos. Além disso, a Sm14 é a única proteína candidata a vacina que induz imunidade protetora significativa contra ambos os helmintos acima mencionados. O objetivo deste estudo foi desenvolver e avaliar em camundongos uma vacina de subunidade contendo a Sm14 fusionada com a subunidade B da enterotoxina termolábil de Escherichia coli (LTB), a qual é um potente imunoadjuvante; além disso, foi descrever a produção e caracterização de anticorpos monoclonais (MAbs) contra a Sm14 para usa-los como uma ferramenta para detectar e caracterizar a Sm14 e para o desenvolvimento de futuro teste diagnóstico. Os genes ltb e sm14 foram amplificados por PCR a partir do DNA de E. coli e do plasmídeo pAESm14, respectivamente, e fusionados por PCR. A quimera recombinante foi expressa em E. coli e purificada por cromatografia de afinidade em coluna com níquel. Grupos de camundongos suíços não singênicos foram imunizados por via subcutânea com três doses de rLTB/Sm14, rLTB/Sm14 mais hidróxido de alumínio (Al(OH)3), rSm14 plus Al(OH)3, rLTB ou Al(OH)3. Os níveis de proteção foram determinados através do número de parasitas recuperados após desafio com cercárias de S. mansoni. O pool de soros dos camundongos imunizados foi avaliado por ELISA e Western blot. Os resultados mostraram que a proteína quimera foi capaz de estimular a produção de anticorpos específicos para Sm14 e LTB, contudo o uso de LTB como adjuvante para imunização de rSm14 falhou em aumentar a proteção contra o desafio. Além disso, sete MAbs foram obtidos após imunização de um camundongo BALB/c com rLTB/Sm14. A isotipagem dos MAbs revelou que cinco foram do isotipo IgG1, um pertencente ao isotipo IgG2b e outro ao isotipo IgM. Estes MAbs serão úteis para monitorar a expressão da proteína em sistemas recombinantes, a estabilidade protéica e pode ter potencial para desenvolver teste diagnóstico.

Made available in DSpace on 2014-08-20T13:32:51Z (GMT). No. of bitstreams: 1 dissertacao_flavia_vasconcellos.pdf: 444073 bytes, checksum: 28496ede24da5ffceb810c4c3dfa434f (MD5) Previous issue date: 2007-04-27 / Leptospirosis is an infectious disease caused by pathogenic spirochetes of the genus Leptospira that can affect vital organs such as lungs, liver and kidneys. The illness is characterized by an acute bacteremic phase of approximately one week, followed by an immune phase in which specific antibodies are found in blood and leptospires are eliminated in urine. Clinical signs in the initial phase of leptospirosis can be confused with other feverish diseases, making laboratory diagnosis of extreme importance to start antibiotic treatment. The existing laboratory tests for early diagnosis of leptospirosis are based on IgM detection and are of low sensitivity. Thus, there is an urgent need for development of new diagnostic strategies for use in the acute phase of leptospirosis. In the present work monoclonal antibodies (MAbs) and polyclonal IgY were used in the standardization of three different antigen capture ELISA formats for direct detection of leptospires in blood during the acute phase of the disease. Detection limit of leptospires in human sera experimentally contaminated ranged from 10 5 to 10 7 cells per millilitre in the different formats. The ELISA format with the best performance was able to detect 10 5 leptospires per millilitre of human sera, using as capture antibody a MAb against LipL32, the major outer membrane protein of pathogenic leptospires, and as detection antibody biotinilated policlonal IgY against a pathogenic serovar of Leptospira interrogans. Although this format did not present the adequate sensitivity for detection of circulating leptospires at the levels existing in blood in the initial phase of the disease, it can be improved in order to do so. / A leptospirose é uma doença infecciosa causada por espiroquetas do gênero Leptospira que pode afetar diversos órgãos vitais como pulmões, fígado e rins. A doença caracteriza-se por uma fase inicial bacterêmica de aproximadamente uma semana, seguida de uma fase imune na qual anticorpos específicos são detectados no sangue e leptospiras são eliminadas na urina. Os sinais clínicos da fase inicial da leptospirose podem ser confundidos com diversas doenças febris, o que torna o diagnóstico laboratorial extremamente importante para decidir sobre o início do tratamento com antibióticos. Os testes laboratoriais existentes para o diagnóstico na fase inicial da doença são todos baseados na detecção de IgM e apresentam baixa sensibilidade. Assim, há uma necessidade urgente de desenvolvimento de novas estratégias de diagnóstico precoce da leptospirose. Neste trabalho foram utilizados anticorpos monoclonais (MAbs) e anticorpo policlonal (IgY) para padronizar três formatos de ELISA de captura de antígeno para uso na detecção direta de leptospiras no sangue durante a fase aguda da doença. O limite de detecção de leptospiras em soro humano experimentalmente contaminado variou entre 10 5 e 10 7 células por mililitro nos diferentes formatos. O formato que apresentou melhor desempenho detectou 10 5 leptospiras por mililitro de soro, e utilizou como anticorpo de captura um MAb contra LipL32, a principal proteína de membrana externa de leptospiras patogênicas, e como anticorpo de detecção IgY biotinilada, produzida contra um sorovar patogênico de Leptospira interrogans. Embora este formato não apresente ainda a sensibilidade adequada para detectar o nível de leptospiras circulantes no sangue na fase inicial da doença, ele possui potencial para ser aperfeiçoado de forma a atingir aquele nível.

Made available in DSpace on 2014-08-20T13:59:09Z (GMT). No. of bitstreams: 1 dissertacao_cristiane_kruger.pdf: 1966216 bytes, checksum: 66de5146aa5816f5e065444215ce151b (MD5) Previous issue date: 2006-08-31 / Cavia aperea, or popularly preá (Brazilian guinea pig), it is a rodent of diurne habits, mainly in the first hours of the morning and in finish them of the afternoon. They are fed of herbaceous vegetables, they live in tunnels of grassy, being able many times to inhabit agricultural peridomiciliar regions, close to highways of the south region it Brazil, being many adopted times as animal of esteem. With the objective to know the diversity of parasites of this rodent, were examined 33 specimens of Cavia aperea that after abated according to Protective Association of the Animals, they had been brushed and washed for collection of ectoparasites, being after that necropsied and its organs examined in search of endoparasites. The ectoparasites after removed from the animal, were clarified in acetate of metila and mounted in slides with Canada balsam. For collection of the helminths it was examined and one washed separately each organ in sieve, nematodes had been clarified in lactofenol and the members of the Classes Trematoda and Cestoda were prepared according Amato s technique diaphaned in creosote and mounted in slides with Canada balsam. Of the total of examined animals, 100% were infested by lice of the species: Trimenopon hispidum, Gyropus ovalis, Gliricola lindolphoi and G. porcelli, with exception of this, all others are registered for the first time in the State Rio Grande do Sul. Of Siphonaptera, Polygenis (Neopolygenis) atopus it was registered prevalence of 6,1%. The helminthes were: of the Phylum Nematoda - Trichostrongylus sp., Paraspidodera uncinata, Vianella travassosi, Ackertia burgosi and Graphidioides subterraneus; Class Trematoda - Pseudoquinqueserialis caviae, Pseudohippocrepis suttonae n.g. n.sp., Taxorchis caviae and the Cestoda Monoecocestus parcitesticulatus, all cited for the first time in the state Rio Grande do Sul, with exception of Paraspidodera uncinata. / Cavia aperea, ou popularmente preá, é um roedor de hábito diurno, principalmente nas primeiras horas da manhã e nas ultimas da tarde. Alimentam-se de vegetais herbáceos, vivem em túneis de gramíneas, podendo muitas vezes habitar regiões peridomiciliares rurais, perto de rodovias da região sul do Brasil, sendo muitas vezes adotados como animais de estimação. Com o objetivo de conhecer a diversidade de parasitos deste roedor, examinou-se 33 exemplares de Cavia aperea que após eutanásiados segundo a Associação Protetora dos Animais, foram escovados e lavados para coleta de ectoparasitos, sendo em seguida necropsiado e seus órgãos examinados em busca de endoparasitos. Os ectoparasitos após removidos do animal foram clarificados em acetato de metila e montados em lâminas com bálsamo do Canadá. Para coleta dos helmintos examinou-se e lavou-se cada órgão em separado em tamis, os nematóides foram clarificados em lactofenol e os membros das classes Trematoda e Cestoda foram preparados segundo técnica de Amato e em seguida diafanizados em creosoto de Faia e montados em lâminas com bálsamo do Canadá. Dos dos animais examinados, 100% estavam infestados por piolhos das espécies: Trimenopon hispidum, Gyropus ovalis, Gliricola lindolphoi e G. porcelli, e com exceção deste último, todos os outros são registrados pela primeira vez no Rio Grande do Sul. De Siphonaptera encontrou-se Polygenis (Neopolygenis) atopus com prevalência de 6,1%. Os helmintos encontrados foram: do Filo Nematoda Trichostrongylus sp., Paraspidodera uncinata, Vianella travassosi, Ackertia burgosi e Graphidioides subterraneus; Classe Trematoda Pseudoquinqueserialis caviae, Pseudohippocrepis suttonae n.g. n.sp. e Taxorchis caviae e a Classe Cestoda - Monoecocestus parcitesticulatus, todos citados pela primeira vez no Rio Grande do Sul, com exceção de Paraspidodera uncinata.

Made available in DSpace on 2014-08-20T14:31:27Z (GMT). No. of bitstreams: 1 dissertacao_juliana_nunes_vieira.pdf: 749761 bytes, checksum: d10f921e3d83dd0cb845cc767149a9f3 (MD5) Previous issue date: 2012-03-14 / The rapid development of resistance to gastrointestinal parasites anthelmintics has shown the limited efficiency of this method in the suppression of endoparasitoses in ruminants, and has furthered research in alternative control methods. The use of chemicals in animal anthelmintic treatment, in association with nematophagous fungi used for biological control, is a strategy that has proven to be effective in reducing the nematode population density of farm animals. This study aims to verify the in vitro susceptibility of the nematophagous fungi Arthrobotrys oligospora, Duddingtonia flagrans, Paecilomyces fumosoroseus, Paecilomyces lilacinus, Paecilomyces marquandii and Paecilomyces variotii against the antiparasitic drugs albendazole, thiabendazole, ivermectin (100%), levamisole (7.5%) and closantel (10%) by using the Minimum Inhibitory Concentration (MIC). MICs ranged between 4 and 0,031µg/mL for albendazole, thiabendazole and ivermectin, between 0,937 and 0,117µg/mL for levamisole, and between 0,625 and 0,034 for closantel. The results obtained showed that all antiparasitic drugs tested had an in vitro inhibitory effect on nematophagous fungi, being able to jeopardize the fungus action as a biological control bioagent. / O rápido desenvolvimento de resistência de parasitos do trato gastrintestinal a antihelmínticos tem demonstrado limitada eficiência desse método para o controle de determinadas endoparasitoses em ruminantes, incentivado assim, pesquisas com métodos alternativos de controle parasitário. A utilização de compostos químicos no tratamento anti-helmíntico de animais, em associação com fungos nematófagos usados no controle biológico, é uma estratégia que vem se mostrando eficaz para a redução da densidade populacional de nematódeos nos animais de produção e pouco se sabe sobre seu emprego simultâneo. Este trabalho teve por objetivo verificar, através da Concentração Inibitória Mínima (CIM), a suscetibilidade in vitro dos fungos nematófagos Arthrobotrys oligospora, Duddingtonia flagrans, Paecilomyces fumosoroseus, Paecilomyces lilacinus, Paecilomyces marquandii e Paecilomyces variotii aos antiparasitários albendazol, tiabendazol e ivermectina (100%), levamisol (7,5%) e closantel (10%). As CIMs variaram de 4 a 0,031µg/mL para albendazol, tiabendazol e ivermectina, de 0,937 a 0,117µg/mL para o levamisol e de 0,625 a 0,039µg/mL para o closantel, dependendo do fungo testado. Os resultados mostram que todos os antiparasitários testados tiveram efeito inibitório in vitro sobre os fungos nematófagos, podendo comprometer suas ações como bioagentes de controle biológico.