Atualmente, a espectroscopia de Ressonância Magnética Nuclear (RMN) in vitro tem sido extensivamente empregada para estudar tecidos biológicos, atuando como uma poderosa ferramenta de análise química. Em particular, a RMN de próton (1H) e de fósforo (31P) vem sendo utilizada para estudar o metabolismo muscular de animais portadores de deficiências genéticas, como os camundongos com distrofia muscular mdx, modelos para a distrofia muscular Duchenne (DMD). A DMD, que afeta humanos, é um distúrbio recessivo ligado ao cromossomo-X e ocorre em 1 para cada 3500 nascidos vivos do sexo masculino. A DMD é caracterizada pela ausência da proteína distrofina, o que provoca um processo progressivo e rápido de degeneração muscular. Atualmente, o acompanhamento da evolução da doença e de benefícios de tratamentos é feito através de biópsias do tecido muscular. Neste estudo foram realizadas medidas de RMN de 1H em amostras de diafragma e do músculo quadríceps femural de camundongos mdx e de controle com 3 e 6 meses de idade. Os resultados foram comparados com a análise histológica dos mesmos tecidos. O objetivo deste trabalho é monitorar o desenvolvimento normal dos músculos de animais de controle e o progresso da distrofia nos músculos de animais mdx, através da análise dos espectros de RMN. Foi possível identificar diferenças entre os grupos de animais a partir das integrais dos picos observados, mostrando que a distrofia acarreta alterações em diversas vias metabólicas nos camundongos mdx. Estes resultados formam a base para estudos da doença in vivo, para que então seja possível diferenciar músculos distróficos de músculos sadios e caracterizar diferentes estágios de evolução da doença de maneira não invasiva. / Currently, Nuclear Magnetic Resonance spectroscopy in vitro has been extensively used to study biological tissues, acting as a powerful tool for chemical analysis. In particular, NMR of proton (1H) and phosphorus (31P) has been used to study muscle metabolism in animals with genetic diseases, such as mice with muscular dystrophy mdx, models for Duchenne muscular dystrophy (DMD). The DMD, which affects humans, is a recessive disorder linked to X-chromosome and occurs in 1 each 3,500 live births male. The DMD is characterized by the absence of dystrophin protein, which causes a progressive and rapid degeneration. Currently, the monitoring of disease progression and benefits of treatments is made by biopsy of muscle tissue. In this study, 1H NMR spectrum were acquired from samples of diaphragm and quadriceps muscle of mdx and control mice 3 or 6 months-old. Results were compared with histological analysis of the same tissues. The objective of this study is to monitor the normal development of the muscles of control animals and the progress of dystrophy in the muscles of mdx animals by analyzing the NMR spectra. Differences were found between the groups of animals comparing the integrals of the observed peaks, showing that dystrophy leads to alterations in several methabolic pathways in the mdx mouse. These results form the basis for studies of the disease in vivo, so then it can be possible to distinguish dystrophic muscles from healthy muscles and characterize different stages of the disease noninvasively.

A malária está entre as doenças mais prevalentes no mundo, acometendo aproximadamente 500 milhões de indivíduos por ano. Sabe-se que a resposta pró-inflamatória proporciona o controle da parasitemia, mas também desencadeia as manifestações clínicas que estão diretamente relacionadas aos casos fatais da doença. A utilização de modelos experimentais contribui para o conhecimento dos mecanismos intrínsecos relacionados à imunidade do hospedeiro. As análises em camundongos infectados com 106 eritrócitos parasitados pelo Plasmodium chabaudi AS mostram que, na fase aguda da malária, ocorre intensa proliferação com parasitemia detectável no dia 4 pós-infecção (p.i.), sendo o pico atingido no dia 7 p.i. e o declínio até o dia 10 p.i .. Acompanhando a cinética do parasita, observa-se o aumento no número de esplenócitos totais. A ativação do sistema imune caracterizasse pelo perfil de resposta Th1, com expansão da população de linfócitos T CD4+ convencionais e linfócitos T CD4+ Foxp3+ reguladores (Treg) e produção predominante de IFN-g. Nesse estudo, avaliamos em camundongos infectados com P. chabaudi AS: 1) O perfil de expressão das moléculas com papel fundamental na resposta imune nas células T CD4+ convencionais e Treg; 2) Os efeitos decorrentes da inibição in vitro das moléculas ICOS e OX40 presentes em ambas as populações celulares na resposta proliferativa a eritrócitos parasitados; 3) A atividade supressora das células Treg, sobre as células T CD4+ convencionais. Os resultados mostram que a partir do dia 4 p.i. ocorreu aumento na porcentagem de células T CD4+ convencionais e Treg, que expressavam as moléculas estimuladoras GITR, OX40 e ICOS. Observamos também que houve correlação entre a maior expressão da molécula CD25 com o aumento das outras moléculas ativadoras presentes nas células T CD4+ convencionais, o mesmo não sendo tão acentuado nas células Treg . Ao inibirmos a ação das moléculas ICOS e OX40, observamos que a inibição de ICOS interferiu de forma mais intensa na proliferação da população de células Treg , enquanto a inibição da molécula OX40 reduziu drasticamente a proliferação das células T CD4+ convencionais e Treg . Os ensaios de supressão indicaram que as células Treg ICOS+ são mais eficientes para controlar a proliferação das células T CD4+ convencionais. Além disso, observamos que, no baço dos camundongos infectados pelo P. chabaudi, ocorreu aumento na porcentagem de células T CD4+ convencionais que expressavam PD-1 e PD-L 1. No entanto, nas células Treg, detectamos diminuição na expressão de PD-1 e aumento de PD-L 1, fornecendo indícios sobre o mecanismo que pode estar envolvido no controle do número de células na fase aguda da infecção. Observamos ainda que, durante a expansão das células T CD4+, não houve modificações na porcentagem de células expressando a molécula CTLA-4 ou no nível de expressão desta molécula nos diferentes dias de infecção. Considerando os dados em conjunto, podemos concluir que a modulação da resposta imune à malária causada pelo P. chabaudi requer a ação de várias moléculas ativadoras e reguladoras, que muitas vezes são expressas de forma concomitante. A expressão orquestrada de cada uma dessas moléculas permite o desenvolvimento das várias etapas da resposta imune na malária. / Malaria is among the most prevalent diseases in the world, affecting approximately 500 million people per year. It is known that the pro-inflammatory response provides the control of parasitemia, but also triggers the clinical manifestations that are directly related to the fatal cases of the disease. The analyzes in mice infected with 106 erythrocytes parasitized with Plasmodium chabaudi AS show that, in the acute phase of malaria, there is an intense proliferation with detectable parasitemia on day 4 post-infection (p .i.), being the peak attained at day 7 p.i. and the decline until day 10 p.i .. Following the kinetics of the parasite, there is an increase in the total number of splenocytes. The activation of the immune system is characterized by a Th1 profile, with expansion of the populations of conventional CD4+ T cells and CD4+ Foxp3+ regulatory (Treg) T cells and predominant production of IFN-g. In this study, we evaluated in mice infected with P. chabaudi AS: 1} The expression profile of molecules with key roles in the immune responses of conventional CD4+ T cells and Treg cells; 2} The effects of in vitro inhibition of ICOS and OX40 molecules in the proliferative responses both cell populations that were stimulated with parasitized erythrocytes; 3} The suppressive activity of Treg cells on the conventional CD4+ T cells. The results showed that, from day 4 p.i. on, there was an increase in the percentages of conventional CD4+ T cells and Treg cells that expressed stimulatory GITR, OX40 and ICOS molecules. We also observed a correlation between the higher expression of CD25 with the increase of 0ther activation molecules that were present in conventional CD4+ T cells, a phenomenon less pronounced in Treg cells. By inhibiting the activity of ICOS and OX40 molecules, we observed that ICOS inhibition interfered more intensely in the proliferation of the Treg cell population, while the inhibition of OX40 dramatically reduced the proliferation of conventional CD4+ T cells and Treg cells. The suppression assays indicated that ICOS+ Treg cells were more effective to control the proliferation of conventional CD4+ T cells. Furthermore, we observed that, in the spleen of P. chabaudi-infected mice, there was an increase in the percentage of conventional CD4+ T cells expressing PD-1 and PD-L 1. However, in Treg cells, we detected a reduction in the expression of PD-1 and increase of PD-L 1, providing evidence about the mechanism that may be involved in the control of cell numbers in the acute phase of infection. We also observed that, during the expansion of CD4+ T cells, there was no change in the percentage of cells expressing CTLA-4 or the levei of expression of this molecule on the various days of infection. Considering the data together, we concluded that the modulation of the immune response to malaria caused by P. chabaudi requires the action of several activating and regulatory molecules, which are often expressed concomitantly. The orchestrated expression of each of these molecules allows the development of the various stages of the immune response to malaria.

Camundongos AIRmax e AIRmin diferem na sensibilidade à carcinogênese, sendo os AIRmin mais sensíveis à carcinogênese de pele devido ao seu fundo genético e um polimorfismo no gene Ahr. Mais que isso, estas linhagens possuem um desequilíbrio de frequência dos alelos do gene Slc11a1. Para estudar a interação dos alelos de resistência (R) ou suscetibilidade (S) do gene Slc11a1 com os loci de resposta inflamatória aguda dos animais AIRmax e AIRmin, foram produzidas sublinhagens homozigotas para estes alelos:AIRmaxRR, AIRmaxSS, AIRminRR e AIRminSS. Nosso objetivo foi investigar a diferença de sensibilidade à carcinogênese de pele induzida por DMBA nestas sublinhagens. A incidência de câncer de pele foi de 7% nos animais AIRminRR e de 13% nos animais AIRminSS.Os animais AIRmaxSS não apresentaram câncer de pele, mas a incidência de câncer em órgãos internos foi 100% nesta sublinhagem.Esses dados mostraram que os camundongos AIRmaxSS tem maior suscetibilidade à carcinogênese, sugerindo que o alelo S, no fundo genético AIRmax, pode influenciar na suscetibilidade ao câncer. / Mice AIRmax and AIRmin differ on sensibility to carcinogenesis. AIRmin mice are significantly more sensitive to skin carcinogenesis than AIRmax mice due to the genetic background and the polymorphism of aryl hydrocarbon receptor (Ahr) gene. Furthermore,these mice have an imbalance of frequency of Slc11a1 gene alleles.To study the interaction of resistant (R) or susceptible (S) Slc11a1 alleles with acute inflammatory reaction loci found in AIRmax and AIRmin mice, homozygous sublines for these alleles were produced: AIRmaxRR, AIRmaxSS, AIRminRR and AIRminSS. The objective of this study was to investigate the difference in skin carcinogenesis sensibility induced by DMBA agent in these sublines.The incidence of skin cancer was 7% in AIRminRR mice and 13% in AIRminSS mice.AIRmaxRR and AIRmaxSS mice did not show skin cancer, but the incidence of internal organs cancer was 100% only in AIRmaxSS mice. These data showed that AIRmaxSS animals have higher susceptibility, suggesting that the S allele in the AIRmax background could influence susceptible to cancer.

Orientador: Aureo Evangelista Santana / Banca: Edanir dos Santos / Banca: Rosemeri de Oliveira Vasconcelos / Banca: Alessandra Kataoka / Banca: Maria Angélica Dias / Resumo: Neste estudo buscou-se avaliar o uso do Benzeno preparado homeopaticamente em camundongos, no caso de intoxicação experimental aguda pela mesma substância química. Para tanto, foi utilizado um modelo experimental com 45 camundongos, subdivididos em 5 grupos (n=9). Os animais foram tratados durante 15 dias, sendo que o grupo controle recebeu 0,2mL óleo, via intraperitoneal (IP). O grupo branco 0,2mL álcool 30% (IP). Os grupos subseqüentes foram tratados com 0,2mL de Benzenum 6CH, 12CH e 30CH (IP). No 15° dia, administrou-se 3,0422mL/Kg Benzeno em óleo, e amostras de sangue foram colhidas para a realização de hemograma, exames bioquímicos séricos e após o óbito, fragmentos do fígado e dos rins foram colhidos, e o esterno, para a avaliação da medula óssea. As médias dos pesos demonstraram variações estatisticamente significantes, entre os grupos. O hemograma não revelou médias estatisticamente diferentes. Os exames bioquímicos ALT, FA, uréia e creatinina não mostraram resultados estatisticamente diferentes. A taxa de mortalidade foi menor entre os grupos tratados homeopaticamente, sobretudo Benzenum 12 CH. O Benzenum foi capaz de diminuir a mortalidade esperada (DL50 3,0422mL/Kg Benzeno) comprovando a Lei dos Semelhantes, um dos pilares da Homeopatia. / Abstract: This present study aimed to evaluate the use of homeopathically prepared benzene in acute experimentally intoxicated mice with benzene. Five groups with nine mice each were used (n=45). Those animals were pre-treated for 15 days with 0,2mL of oil, intraperitoneally (IP), control group; 0,2mL of alcohol 30%,(IP) -white group; 0,2mL of Benzenum (IP), each, 6CH, 12CH, 30CH, respectively. At the 15th day, the LD50 of Benzene (3,0422mL/kg), and oil was injected, IP, and blood samples were taken for execution of blood, serum biochemical tests. After death, fragments of the liver and kidneys and the sternum, were sent to histopathological evaluation. The mean weights demonstrated statistically significant variations among the groups; The blood did not reveal statistically different media. The examinations biochemical ALT, FA, urea and creatinine showed no statistically different results. The mortality rate was lowest among the groups treated homeopathically especially Benzenum 12 CH. The homeopathic medicine in question, Benzenum, was able to reduce the mortality expected for LD50 3.0422 mL / kg of benzene, showing the Law of Similar, one of the pillars of Homeopathy. / Doutor

Orientador: Madileine Francely Américo / Resumo: A contratilidade do músculo liso e o trânsito gastrintestinal (GI) são importantes parâmetros da motilidade, cujas alterações podem comprometer a absorção de nutrientes e a biodisponibilidade de fármacos. Diversos fármacos apresentam efeitos adversos associados ao trato GI e, mesmo aqueles utilizados para controlar esses efeitos, podem provocar alterações importantes na motilidade ainda pouco conhecidas. Camundongos das linhagens C57BL/6 e BALB/c são amplamente utilizados nas pesquisas biomédicas, entretanto poucos estudos consideram os parâmetros motores GI. Diante de métodos escassos para avaliar a motilidade in vivo e da importância de conhecer a fisiologia básica dos camundongos, bem como o efeito de fármacos sobre o trato GI, objetivou-se: 1) desenvolver protocolo para avaliação da contratilidade duodenal e trânsito gastrintestinal por meio da Biosusceptometria de Corrente Alternada (BAC), e avaliar comparativamente a morfologia e função gastrintestinal de camundongos das linhagens BALB/c e C57BL/6J e, 2) avaliar o efeito GI do tratamento com cisplatina e a influência da dexametasona como antiemético. A partir deste trabalho foi possível implementar um protocolo experimental inédito, por meio da BAC, para avaliar a contratilidade duodenal e o trânsito gastrintestinal em camundongos. Após prévia implantação de marcador magnético no duodeno de camundongos, observou-se uma alta e uma baixa frequência de contração, expressas em ciclos por minuto (cpm). BALB/c e C57BL/6J apre... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: The smooth muscle contractility and gastrointestinal (GI) transit are important parameters of motility, whose alterations may compromise nutrient absorption and bioavailability of drugs. Several drugs have side effects associated with the GI tract and, even those used to control these effects may cause significant changes in motility that are still poorly understood. Mice C57BL/6 and BALB/c strains are widely used in biomedical research, but a few studies consider the GI motor parameters. In front of scarce methods to evaluate the in vivo motility and the importance of knowing the basic physiology of the mice, as well as the effect of drugs on the GI tract. Then, the objectives of this study were 1) to develop protocol for the evaluation of duodenal contractility and gastrointestinal transit through Alternating Current Biosusceptometry (ACB), and comparing the morphology and gastrointestinal function of BALB/c and C57BL/6J mice, and 2) to evaluate the GI effect of cisplatin treatment and the influence of dexamethasone as an antiemetic. From this work, it was possible to implement an original experimental protocol, through the BAC, to evaluate the duodenal contractility and the gastrointestinal transit in mice. After the previous implantation of a magnetic marker in the duodenum of mice, a high and low frequency of contraction, expressed in cycles per minute (cpm), was observed. BALB/c and C57BL/6J presented a high frequency of 40 cpm, while the low frequency in BALB/c was 29 ... (Complete abstract click electronic access below) / Doutor

A flora brasileira possui plantas com grande potencial de investigação na carcinogênese humana, sendo uma delas o Pequi (Caryocar brasiliense Camb.). Esta fruta da região central do Brasil contém na sua polpa e principalmente no extrato do óleo da sua polpa, várias substâncias antioxidantes, as quais estão relacionadas com a redução do risco de doenças degenerativas. Neste estudo propomos avaliar o potencial quimiopreventivo do C. brasiliense contra mecanismos pré-neoplásicos no cólon induzidas quimicamente pelo azoximetano (AMO) em camundongos. O iniciador AMO na concentração 10mg/kg foi injetado por injeção subcutânea em camundongos de 40 dias de idade. Foram formados quatro grupos experimentais: C (controle sem tratamento); AMO (azoximetano 10mg/kg), PQ400 (óleo de pequi 400mg/kg) e OMAPQ400 (OMA+ 400mg/kg de óleo de pequi). Estes dois últimos grupos receberam o óleo de pequi a partir do 40º dia até o 110° dia de vida. A altura das criptas intestinais analisadas, não revelou diferença em nenhum dos grupos. O óleo de C. brasiliense reduziu em 18,7% a proliferação celular no grupo OMAPQ400 quando comparado com os grupos C e AMO. Houve aumento da produção de muco neutro no grupo AMO quando comparado com o C e diminuição no grupo AMOPQ400. Houve hipermetilação do DNA no grupo AMO, e hipometilação no grupo AMOPQ400, sendo estes iguais ao grupo controle (C). A expressão do gene oncogênico (c-Myc) diminuiu no grupo tratado com óleo de pequi em comparação com o grupo tratado com o iniciador AMO. Todos esses efeitos podem ser devidos à presença de antioxidantes na polpa do óleo. Por isso, concluímos que o óleo de C. brasiliense possui efeito protetor contra alguns mecanismos precursores de lesões pré-neoplásicas do cólon / The Brazilian native flora has several plants which have thigh research potential, among those the Pequi (Caryocar brasiliense Camb.). This fruit from the central region of Brazil contains several antioxidant substances in its pulp and mainly in its pulp oil extract, which are related with the reduction of the risk of degenerative diseases. In this study we propose to evaluate the chemopreventive potential of C. brasiliense against neoplastic mechanisms in the colon induced chemically by azoximetano (AMO) in mice. AMO 10mgkg concentration initiator was subcutaneous injection in mice of 40 days of age. Four experimental groups were formed: C (untreated control); AMO (azoximetano 10mg/kg), PQ400 (pequi oil 400mgkg) and AMOPQ400 (AMO 400mgkg pequi oil). These last two groups received the pequi. The height of the intestinal crypts analyzed revealed no difference among groups. The oil of C. brasiliense reduced the cell proliferation by 18.7% in AMOPQ400 group when compared with the groups C and AMO. There was increased production of neutral mucus in the group AMO when compared with the C group and decrease in the AMOPQ400 group. The pequi oil induced DNA hipomethylation in the AMOPQ400 group and hipermethylation in AMO group. The expression of the oncogenic gene c-Myc decreased in the group treated with pequi oil compared to the group treated with the initiator AMO alone. All these effects can be due to the presence of antioxidants in pulp oil. Therefore, we conclude that the oil of C. brasiliense has protective effect against some mechanisms that precede of neoplastic lesions of the colon

Os protozoários do gênero Leishmania são os agentes etiológicos da leishmaniose cutânea e visceral. A infecção é transmitida por insetos hematófagos, nos quais os parasitos se desenvolvem sob a forma promastigota. Nos hospedeiros mamíferos, incluindo a espécie humana, as formas encontradas são as amastigotas que proliferam nos macrófagos; estas células podem controlar a infecção produzindo radicais derivados do oxigênio e do nitrogênio. O óxido nítrico (NO) é um dos mais potentes radicais com atividade leishmanicida. Existem várias moléculas já descritas que liberam NO em meio aquoso ou quando adicionadas a suspensões celulares. São chamadas de doadoras de NO. Algumas destas vêm sendo estudadas pelo seu potencial terapêutico no tratamento das leishmanioses cutâneas. A molécula S-nitrosoglutationa (GSNO) pertence a um grupo de moléculas conhecido com S-nitroso-tióis e é um doador de NO relativamente estável. A GSNO havia sido previamente testada em culturas de formas promastigotas de L. amazonensis e causou a morte do parasito. O possível uso da GSNO na terapia das leishmanioses cutâneas demanda o conhecimento de suas ações sobre as formas amastigotas encontradas nos hospedeiros mamíferos. Terapias complementares aos antimoniais usados no tratamento da leishmaniose cutânea são necessárias porque estes são apenas injetáveis, têm efeitos colaterais e ocorrem altos índices de desistência do tratamento. O objetivo do trabalho foi analisar o efeito da molécula GSNO nas culturas de células THP-1 (linhagem de monócitos humanos leucêmicos) infectadas com L.major e o efeito da sua administração tópica diretamente na lesão ulcerada leishmaniótica de camundongos infectados. Os experimentos com células THP-1 infectadas com L. major e tratadas com GSNO, mostram marcada redução do parasitismo intracelular, dose dependente, em comparação às culturas sem tratamento. O tratamento com GSNO foi testado em camundongos Balb/c 8 infectados com L. major e em camundongos C57BL/6 desprovidos do gene de IFN<font face=\"symbol\">g- (Knockout de IFN ou IFN-<font face=\"symbol\">g KO) infectados com L. braziliensis. Grupos de animais foram infectados no dorso e após 60 dias iniciou-se o tratamento tópico com GSNO diluída em PBS, em GEL F127 ou com os respectivos veículos, como controles; ainda, outros grupos foram tratados sistemicamente (via endovenosa) com o antibiótico com ação leishmanicida, anfotericina B, ou com anfotericina B associada à aplicação tópica de GSNO. Foram feitas duas medições semanais das lesões. Decorridos aproximadamente 60 dias após o início do tratamento, os animais foram sacrificados e retirados o linfonodo drenante (inguinal superficial) e a lesão para fazer a quantificação parasitária. O tratamento tópico da infecção por L.major com a molécula GSNO reduziu o tamanho da lesão cutânea, chegando a se observar fechamento da úlcera em alguns animais; a carga parasitária no linfonodo drenante e/ou na lesão também sofreu redução. Nos camundongos IFN-<font face=\"symbol\">g KO infectados por L. braziliensis, também ocorreu inibição da progressão da lesão pelo tratamento local com GSNO em comparação ao grupo não tratado. Como conclusão, conseguimos demonstrar que GSNO apresenta efeito leishmanicida sobre formas amastigotas de L. major em cultura celular e reduz a lesão cutânea causada por L.major ou por L. braziliensis em comparação aos grupos controle. / Protozoa of the genus Leishmania are the etiological agents of cutaneous and visceral leishmaniasis. The infection is transmitted by hematophagous insects in which the parasite multiplies and differentiates as promastigotes. In the mammalian hosts, including man, the parasite proliferates as amastigotes inside macrophages; production of reactive oxygen or nitrogen intermediates (ROI and RNI) by these cells can control the infection. Nitric oxide (NO) is a very toxic RNI active against leishmania. The are many molecules that liberate NO in solution or when added to cellular suspensions. They are collectively called NO donors. A few of them have been studied because of their potential therapeutic use in cutaneous leishmaniasis. The molecule S-nitrosoglutathione (GSNO) belongs to the S-nitroso-thiols and is a relatively stable NO donor. GSNO has been previously tested and caused the death of L. amazonensis promastigotes in liquid culture. A putative application of GSNO in the treatment of cutaneous leishmaniasis requires the understanding of its activities on amastigote forms which are the parasite forms found in the mammalian host. Because the classical leishmaniasis treatment relies on injectable antimonial drugs which have many side effects, many patients abandon the treatment. Therefore, additional therapy to accelerate the cure is needed as well as new drugs are much needed. The aim of the present work is to analyze the effect of the molecule GSNO in cultures of THP-1 cells (a leukemia human monocyte cell line) infected with Leishmania major as well as the effect of administering it topically into the lesion of infected mice. The experiments done on L. major-infected THP-1 cells showed marked dose-dependent reduction of parasitism when compared to untreated infected cells. The topical treatment with GSNO was done in BALB/c mice infected with L. major and in C57BL/6 mice deprived of the IFN-<font face=\"symbol\">g gene (IFN- <font face=\"symbol\">g KO) infected with L. braziliensis. Groups of mice were infected in the shaven dorsal skin and 60 days later the topical treatment with GSNO dissolved in PBS, in GEL F127 was started. Still other groups were treated systemically (i.v.) with Amphotericin B which is leishmanicidal or with Amphotericin B associated to topically applied GSNO. The lesions were measured twice a week. After 60 days the mice were killed and the draining lymph node and the lesion were removed for quantifying the parasite numbers. The topical treatment of L. major-induced ulcer with GSNO reduced the size of the ulcer leading in some mice to complete healing; the parasitic loads in the draining lymph node or in the lesion were also reduced. In L. braziliensis-infected IFN-<font face=\"symbol\">g KO mice, inhibition of lesion growth also occurred in the mice topically treated with GSNO in comparison to the untreated control group. In conclusion we showed that GSNO is leishmanicidal to L. major intracellular amastigotes and that the topical treatment reduces the size of the lesion caused in mice by L. major or by L. braziliensis in comparison to the control groups.

Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico / O desenvolvimento de fibrose pulmonar (FP) induzida por bleomicina tem sido associado com as características genéticas e estresse oxidativo. Nosso objetivo foi investigar a influência do equilíbrio redox sobre a resistência a fibrose pulmonar induzida por bleomicina em diferentes linhagens de camundongos. Uma única dose de bleomicina (0,1 U/camundongo) ou salina (50 mL) foi administrada por via intratraqueal (i.t.) em camundongos C57BL/6, DBA/2 e camundongos BALB/c. Vinte e um dias após a administração de bleomicina, a taxa de mortalidade foi acima de 50% em camundongos C57BL/6 e 20% em DBA/2, enquanto não foi observada em BALB/c. Houve um aumento na elastância (p<0.001), &#916;P2 (p<0.05), &#916;Ptot (p<0.01) e DE,l (p<0.05) em camundongos C57BL/6. O volume dos septos aumentaram em camundongos C57BL/6 (p<0.05) e DBA/2 (p<0.001). Os níveis de INF-&#947; foram reduzidas em camundongos C57BL/6 (p<0.01). Níveis OH-prolina foram aumentados em camundongos C57BL/6 e DBA/2 (p<0.05). Atividade e expressão de SOD foram reduzidas em camundongos C57BL/6 e DBA/2 (p<0.001 e p<0.001, respectivamente), enquanto que a atividade de CAT reduziu em todas as linhagens (C57BL/6: p<0.05; DBA/2: p<0.01, BALB/c: p<0.01). A atividade da GPx e expressão GPx 1/2 diminuiram em camundongos C57BL/6 (p<0.001). Nós concluímos que a resistência da FP pode também estar relacionada com a atividade e expressão de SOD em camundongos BALB/c / The development of bleomycin-induced pulmonary fibrosis (PF) has been associated with differences in genetic background and oxidative stress status. Our aim was to investigate the cross-talk between the redox profile, lung architecture and function in PF in different mouse strains. A single dose of either bleomycin (0.1 U/mouse) or saline (50 &#956;L) was by intratracheal (i.t.) administration in C57BL/6, DBA/2 and BALB/c mice. Twenty-one days after bleomycin, the mortality rate was over 50% in C57BL/6 and 20% in DBA/2 mice and PF was not observed in BALB/c. There was an increase in Est (p<0.001), &#916;P2 (p<0.05), &#916;Ptot (p<0.01) and &#916;E (p<0.05) in C57BL/6 mice. Septa volume increase in C57BL/6 (p<0.05) and DBA/2 (p<0.001). The levels of INF-&#947; were reduced by in C57BL/6 mice (p <0.01). OH-proline levels were increased in C57BL/6 and DBA/2 mice (p<0.05). SOD activity and expression was reduced in C57BL/6 and DBA/2 mice (p<0.001 and p<0.001 respectively), whereas CAT was reduced in all strains 21 days following bleomycin when compared to saline groups (C57BL/6: p<0.05; DBA/2: p<0.01, BALB/c: p<0.01). GPx activity and GPx1/2 expression decreased in C57BL/6 (p<0.001). We conclude that the PF resistance may also be related to the activity and expression of SOD in BALB/c

Orientador: José Moacir Marin / Banca: Sebastião Hetem / Banca: Patrícia Amoroso / Banca: Renata Camacho Miziara / Banca: Deny Munari Trevisani / Resumo: A aderência de bactérias patogênicas a receptores na superfície de . células epiteliais tem sido reconhecida como um importante evento inicial da colonização bacteriana. O principal mecanismo de patogenicidade da EPEC é uma lesão provocada pela sua aderência ao epitélio através do "attaching and effacing" (AlE), que é caracterizado pela íntima adesão da bactéria à célula do hospedeiro, esta adesão às microvilosidades do enterócito ocorre devido a formação de estruturas semelhantes a pedestais. O objetivo deste estudo foi desenvolver um modelo de infecção com a Escherichía calí enteropatogenica (EPEC) em camundongo do tipo mus musculus. A estes animais foram administrados um inoculo de 108 CFU de linhagens EPEC, sendo que a linhagem 3111-90 foi proveniente de cepas que podem causar diarréia infantil e as linhagens 537-1, 263, 304-3 e 988-2 foram provenientes de leite mastítico bovino. As linhagens foram introduzidas em camundongos com vinte dias de vida por via intraperitonial, e estes foram eutanasiados cinco horas após a inoculação. Como resultado através de cortes histológicos seriados, verificou-se que algumas das linhagens inoculadas levaram ao aparecimento de lesões suaves na mucosa intestinal, com a quebra da camada celular superficial da mucosa, aparecimento de células epiteliais com contornos irregulares e infiltração de células inflamatórias. / Abstract: The aim of this study was to develop a enteropathogenic Escherichia colí (EPEC) infection model in mice. An inoculum of 108 CFU of EPEC strains 3111-90 from infantile diarrhea; 537-1, 263,304-3 and 988-2 from bovine mastitic milk to newborn mice lead to a mildly damage in the intestinal mucosa with breaking in the superficial stratum, epithelial cells with irregular shape and a inflammatory cell infiltration. / Doutor

Orientador: Patrícia Ucelli Simioni / Banca: Patricia Pasquali Parise / Banca: Daniela Maira Camargo / Resumo: A quebra da tolerância imunológica a antígenos próprios é um mecanismo gerador comum às respostas imunes deletérias. Várias estratégias têm sido propostas para modular respostas autoimunes, entre as quais se destacam a administração oral de antígenos relacionados à doença, a transferência adotiva de células tolerogênicas e/ou o tratamento com citocinas reguladoras. Nesse contexto, tem sido mostrado que a ingestão de antígenos proteicos presentes na dieta pode gerar efeitos indiretos sobre o sistema imune do hospedeiro, caracterizados pela supressão da resposta imune a proteínas antigenicamente não relacionadas, conhecidos como supressão bystander. O presente projeto teve por objetivo analisar os efeitos indiretos da tolerância oral induzida pela ingestão de ovalbumina (OVA) e a transferência adotiva de células dendríticas isoladas de animais tolerantes a OVA (tDC) na colite induzida por TNBS em camundongos. Os resultados mostraram que o tratamento de camundongos com OVA por via oral, antes ou após a indução da colite e a transferência adotiva de tDC, foram capazes de reduzir sinais da doença, tais como a perda de peso, bem como preservar parcialmente a integridade do tecido colônico, quando comparados aos animais colíticos não tratados com OVA (controles). A supressão bystander relacionada ao consumo de OVA foi associada à expansão da frequência de células T reguladoras (regs) e de células T secretoras de interleucina (IL) -10, possíveis mecanismos de regulação das manifestaç... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: The breakdown of immune tolerance to self antigens is a common mechanism for deleterious immune responses. Several interventions have been proposed to modulate autoimmune responses, such as oral administration of disease-related antigens, adoptive transfer of tolerogenic cells and/or treatment with regulatory cytokines. In this context, it has been demonstrated that the ingestion of protein antigens can generate indirect effects on the immune system of the host, characterized by suppression of the immune response to antigenically unrelated proteins, known as bystander suppression. The present project aims to analyze the indirect effects of oral tolerance induced by ovalbumin (OVA) and by adoptive transfer of tolerant dendritic cells (tDC) in TNBS induced colitis in mice. Our results showed that the treatment of oral OVA mice before or after induction of colitis and the adductive transfer of tDC were able to reduce the signs of the disease, such as weight loss, as well as partially preserve the integrity of the Compared to non-OVA treated animals (controls). The bystander suppression related to OVA consumption appears to favor the expansion of regulatory (regs) T and interleukin (IL)-10 secreting T cells responsible for reducing the clinical manifestations of TNBS-induced colitis. On the other hand, DC obtained from OVA-tolerant animals showed increased expression of CD80. Administration of this cells population to colitic animals was able to reduce the clinical and histological signs of colitis, possibly by reducing Th17 cells, reduction of secretion of Il-17 and IL-9 and augment of IL-10 and IL-4. To the best of our knowledge, there are no data in the literature showing the effect of oral tolerance and the adoptive transfer of tDC in the treatment of colitis / Mestre