Made available in DSpace on 2016-02-05T18:29:46Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2015-02-26. Added 1 bitstream(s) on 2016-02-05T18:33:49Z : No. of bitstreams: 1 000855560_20160301.pdf: 485708 bytes, checksum: 40d0a6f9af47b6e513d692b7a5af6965 (MD5) Bitstreams deleted on 2016-03-02T17:37:26Z: 000855560_20160301.pdf,. Added 1 bitstream(s) on 2016-03-02T17:38:10Z : No. of bitstreams: 1 000855560.pdf: 1834900 bytes, checksum: 2366bc918763ce442a4b11a2d2a7905d (MD5) / O carcinoma mamário é uma doença relativamente frequente entre as cadelas na faixa etária de 10 anos e apresenta morbidade importante, com expectativa de sobrevida média de 5 anos. A citoinclusão é usada rotineiramente na Medicina como método de escolha na investigação, pela rapidez que fornece subsídios para prever a resposta terapêutica. Entretanto, para a cadela se desconhece a aplicação da tal técnica, portanto, o estudo objetivou correlacionar os padrões morfológicos dos tumores mamários caninos encontrados na técnica de citoinclusão e na análise histológica da peça cirúrgica e comparar a marcação de RE, RP e CK5 nos os dois métodos em 25 amostras de carcinoma mamário. A citoinclusão e espécime cirúrgico foram submetidos ao processamento histológico, confecção das lâminas para coloração de hematoxilina-eosina (HE) e posterior reação imunoistoquímica (IQ) para receptores de estrógeno α (RE), progesterona (RP) e citoqueratina 5 (CK5). Foram consideradas positivas as marcações das células neoplásicas acima de 1% para RE e RP, e acima de 10% para CK5. Pela coloração de HE houve 100% de concordância no diagnóstico das neoplasias entre técnica de citoinclusão e análise histopatológica. A imunoistoquímica apresentou sensibilidade de 85,71%, 95,45% e 100% e índice Kappa de Cohen de 0,78, 0,84, e 0,95 para o RE, RP e CK5 respectivamente, e 100% de especificidade e p<0,01 para os três marcadores. Portando, a citoinclusão trata-se de um método acessível, rápido e de baixo custo, que oferece alta sensibilidade no diagnóstico citomorfológico e imunoistoquímico de carcinoma mamário em cadelas / Breast carcinoma in a dog is a disease relatively frequent in bitches of 10 years old, displays important morbidity and evolve to death. The cell block for the diagnosis of injury in women is the method of choice in the investigation, because it provides subsidies to provide for response to therapy. However, for the dog is unknown the application of this technique, therefore, this study aimed to correlate the morphological patterns of canine mammary tumors between cell block technique and surgical specimen and compare the immunohistochemical marking of ER, PR and CK5 between the two methods in 25 samples. The cell block and surgical specimens were submitted to histological processing, preparation of slides for HE and subsequent immunohistochemistry (IQ) for estrogen receptor α (ER), progesterone (PR) and cytokeratin 5 (CK5). Were considered positive for ER and PR cases where there was marking on more than 1% of neoplastic cells and for CK5 the cases where there was marking on more than 10% of neoplastic cells. The level of agreement between the cell block and the surgical specimen was 86.9% for CK5 and 82.6% for the RE. For the HE staining was 100% agreement for the diagnosis of cancer between the techniques. Immunohistochemistry showed a sensitivity of 85.71%, 95.45% and 100% and Cohen's Kappa index of 0.78, 0.84, and 0.95 for ER, PR and CK5 respectively, and 100% specificity and p <0.01 for all three markers. Therefore the citoinclusão it is an affordable method, fast and low cost, which offers high sensitivity in immunohistochemical marker and in cytomorphological diagnosis of mammary carcinoma in female dogs

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:31:23Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2005Bitstream added on 2014-06-13T19:41:12Z : No. of bitstreams: 1 amaral_as_dr_botfmvz.pdf: 11010569 bytes, checksum: f799834df6f5beed1bbe0ee377c40fe0 (MD5) / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP) / Foram analisados 132 casos de tumor venéreo transmissível (TVT) de ocorrência natural, atendidos no Hospital Veterinário de Botucatu, considerando aspectos clínicos e epidemiológicos. Os pacientes eram, em sua maioria, sem raça definida e com idade variando entre um e 18 anos, com maior freqüência na idade de quatro anos. A localização mais freqüente foi a genital, seguida pela nasal; 25% dos pacientes apresentavam metástases. Estas ocorreram mais freqüentemente na pele (31% das metástases), seguida pela localização mamária, em fêmeas, e em linfonodos, nos machos. Foram colhidas amostras de 188 tumores para avaliação citológica por microscopia ótica, microscopia eletrônica de transmissão, imunofenotipagem e estimação de danos no DNA pelo teste do cometa. As massas foram avaliadas de acordo com a localização, em genitais ou extragenitais, com o comportamento biológico, em primárias e não primárias (metastáticas ou recorrentes) e, ainda, de acordo com o tamanho e tempo de evolução clínica. A avaliação citológica incluiu a classificação de acordo com o padrão morfológico predominante, em linfocitóide (18,4%), plasmocitóide (52,5%) ou misto (29,1%). As amostras extragenitais e não primárias foram predominantemente do padrão plasmocitóide. Foram observadas as características de malignidade gerais, citoplasmáticas, nucleares e nucleolares apresentadas. Anisocitose, anisocariose e macrocariose foram observadas em todos os padrões citomorfológicos, assim como a presença de vacúolos citoplasmáticos, basofilia e eosinofilia citoplasmáticas e corpúsculos linfoglandulares. As características citoplasmáticas de malignidade observadas com maior freqüência foram projeções citoplasmáticas e espessamento... / A hundred and thirty-two dogs with naturally transplanted transmissible venereal tumor (TVT) from ambulatory service of the Veterinary Hospital UNESP, Botucatu, were analyzed for epidemiological and clinical aspects. The animals were predominantly mongrel dogs, with age range between one and eighteen years, and mean of four years. The most usual location was genital, followed by nasal; 25% presents metastasis, the cutaneous location being the most frequent, followed by lymph nodes, in males, and mammary, in females. A sample of 188 tumors were collected for cytologic evaluation in optical microscopy, transmission electron microscopy, immunophenotyping and measure of DNA damage by the Comet test. The masses were classified by location as genital or extragenital, by biological behavior as primary or non-primary (metastastatic or recurrent), and by size and time of clinical evolution. The cytologic evaluation included cytomorphological classification in lymphocyte-like (18.4%), plasma-cell-like (52.5%) and mixed pattern (29.1%). Extragenital and non-primary tumors were essentially plasma cell-like. Malignancy features were noted as general, cytoplasmatic, nuclear and nucleolar. Anisocytosis, anisocariosis and macrocariosis were present in all cytomorphological patterns, as well as cytoplasmatic vacuoles, basophilic and eosinophilic tintorial properties, and lymphoglandular bodies. Cytoplasmatic malignancy criteria most frequently observed were cytoplasmatic projections and cellular membrane thickness. Cells resembling a racket were related to lymphocyte-like pattern. Nuclear buds, perinuclear halos, hyperchromatic nuclei, pseudoinclusions, nuclear membrane thickness and mitosis (normal and abnormal), binucleation, and nuclear lobulations (pleomorphic nuclei) were the most frequents nuclear malignancy criteria. The lymphocyte-like pattern was less related... (Complete abstract click electronic address below)

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:33:25Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2012-11-23Bitstream added on 2014-06-13T18:48:23Z : No. of bitstreams: 1 figueiroa_fc_dr_botfmvz.pdf: 868542 bytes, checksum: 76abbb295655fa17bd152e2d78e90a3b (MD5) / Universidade Estadual Paulista (UNESP) / Por ser a maior causa de morte entre as fêmeas caninas, o câncer de mama desperta o interesse da comunidade científica, pois sua apresentação e evolução clínica são muito semelhantes aos casos de câncer de mama na mulher. No intuito de permitir a continuação dos estudos comparativos entre os tumores de cadelas e os das mulheres, foram realizadas as marcações imunoistoquímicas para receptores de estrógeno (RE), HER-2, p63 e CK5, a fim de classificar os tumores de acordo com sua expressão, nos diferentes subtipos. Além disso, foram utilizados os marcadores para CD10, BMI-1, CD44, CD24, ESA e MUC-1 por meio da imunoistoquímica em lâminas confeccionadas pela técnica de Tissue microarray (TMA) para avaliar a presença de células-tronco tumorais. A partir dos resultados da imunoistoquímica os tumores foram classificados em Luminal A (RE+ e HER-2- ) (25,89%), Luminal B (RE+ e HER-2+) (33,93%), Superexpressão de HER-2 (RE- e HER-2 +) (14,29%) e Basal (RE-, HER-2- e p63 e/ou CK5 +) (25,89%). Dos 112 tumores, 75 foram positivos para CD10 (66,96%), 81 positivos para BMI-1 (72,32%), para o CD44 apenas seis tumores (5,35%) foram positivos, 48 tumores positivos para CD24 (42,86%), 24 positivos para ESA (21,43%) e 23 tumores foram positivos para MUC-1 (20,54%). Desses tumores, quatro apresentaram o imunofenótipo CD44+CD24-, representando 3,57% dos tumores. Ao correlacionar as marcações para células-tronco tumorais com os diferentes subtipos, alguns marcadores apresentaram diferença estatística, sugerindo que os tumores com imunofenótipo mais agressivo (Superexpressão de HER-2 e Basal) foram positivos para a marcação de células-tronco tumorais. Além disso, houve uma maior marcação das células-tronco tumorais para os carcinomas classificados em complexo, o que desafia os dados de literatura, já que esses tumores eram considerados com melhor prognóstico do que os carcinomas simples. São necessários novos estudos... / For being the biggest cause of death among the canine females, mammary cancer arises the interest of the scientific community; therefore its presentation and clinical outcome are very similar to the cases of breast cancer in woman. In intention to allow the following of comparative studies between the tumors of dogs and women, immunohistochemical markers were performed to estrogen receptors (RE), HER-2, p63 e CK5, to classify the tumors according to their expression, in different subtypes. Beyond that, markers to CD10, BMI-1, CD44, CD24, ESA e MUC-1 were used through the immunohistochemical in slides made by Tissue microarray technique (TMA) to evaluate the presence of cancer stem cells. From the immunohistochemical results, tumors were classified in Luminal A (RE+ e HER-2-) (25,89%), Luminal B (RE+ e HER-2+) (33,93%), HER-2 Overexpression (RE- e HER-2 +) (14,29%) and Basal (RE-, HER-2- e p63 e/ou CK5 +) (25,89%). Among 112 tumors, 75 were positive to CD10 (66,96%), 81 positive to BMI-1 (72,32), to CD44 only six tumors (5,35%) were positive, 48 positive tumors to CD24 (42,86%), 24 positive to ESA (21,43%) and 23 tumors were positive to MUC-1 (20,54%). In these tumors, four presents CD44+CD24- immunophenotypes, performing 3,57% of tumors. To correlate cancer stem cells markers with the distinct subtypes, some markers presented statistical differences, suggesting that more aggressive tumors immunophenotypes (HER-2 Overexpression and Basal) were positive to cancer stem cells markers. Besides, there were higher cancer stem cell markers in complex carcinomas, which challenge literature data because this kind of tumor was considered with better prognosis when compared with simple carcinomas. More studies are necessary with new samples to confront this research results’ and determinate the more indicated markers. Still, the female dog must be considered to be used as experimental model for breast cancer ...

Made available in DSpace on 2015-04-09T12:28:17Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2014-08-06Bitstream added on 2015-04-09T12:47:47Z : No. of bitstreams: 1 000814334.pdf: 366656 bytes, checksum: 2e7a4dc11292190294b6fa3b7e78b66a (MD5) / Considerando a relevância do linfoma canino na rotina veterinária e o curto período de sobrevida alcançado com os protocolos quimioterápicos empregados, novas alternativas de tratamento estão sendo estudadas. Nas últimas décadas, diversos estudos foram realizados correlacionando o desenvolvimento e progressão de alguns tipos de neoplasias com a superprodução de prostaglandinas nas células tumorais e inflamatórias locais, em consequência à maior produção de COX-2, que leva à proliferação celular, à supressão da apoptose, à indução da angiogênese e da metástase, ações estas que contam para sua função oncogênica. Uma das estratégias para a redução das concentrações de PGE2 é a utilização de inibidores de COX-2 no tratamento antineoplásico. No presente estudo foram avaliados 20 cães com diagnóstico de linfoma multicêntrico, divididos em dois grupos. Os animais do grupo 1 foram tratados com o protocolo quimioterápico de Madson-Wisconsin convencional, e os do grupo 2, com o protocolo modificado pela substituição da prednisona por um inibidor seletivo de COX-2. Antes da primeira (T1) e da quinta (T2) sessão de quimioterapia, foram realizados hemograma e dosagem de PGE2 plasmática por ELISA. Observou-se um maior número de animais fêmeas, das raças Rottweiler e sem raça definida, de meia idade, que apresentaram com maior freqüência, o linfoma multicêntrico em estádio IVa, de origem celular B, e difuso de grandes células. No leucograma, notou-se em alguns animais, no momento do diagnóstico, a presença de leucocitose por neutrofilia ou por linfocitose, e após o primeiro ciclo de quimioterapia, sete casos de linfopenia. Os cães com remissão dos sinais clínicos após o primeiro ciclo de quimioterapia, apresentam menores concentrações de PGE2 plasmática quando comparados com aqueles sem remissão. A associação do tratamento quimioterápico com um inibidor de COX-2 foi capaz de reduzir ... / Considering the relevance of canine lymphoma in veterinary medicine and the short survival achieved with chemotherapy protocols employed, new treatment options are being studied. In the last decades, various studies have been conducted to correlate the development and progression of certain types of cancer with the overproduction of prostaglandins in tumor sites and inflammatory cells, due to increased production of COX-2, leading to cell proliferation, the suppression of apoptosis , the induction of angiogenesis and metastasis, these actions that count toward their oncogenic function. One strategy for reducing the levels of PGE2 is the use of COX-2 in anticancer treatment. In this study 20 dogs with diagnosis of multicentric lymphoma, divided in two groups were evaluated. Animals in group 1 were treated with the standard Madison-Wisconsin chemotherapy protocol, and group 2, with this protocol modified by the replacement of prednisone for a selective inhibitor of COX-2. Before the first (T1) and fifth (T2) chemo, blood samples and measurement of plasma PGE2 by ELISA were performed. We observed a higher number of female animals, Rottweiler breeds and mixed breed, middle age animals, who presented with greater frequency, multicentric lymphoma in stage IVa, B cell origin, and diffuse large cell. Leukocytosis with neutrophilia or lymphocytosis was observed for some animals at the moment of diagnosis, and after the first cycle of chemotherapy, seven cases of lymphopenia. Dogs with clinical signs of remission after the first cycle of chemotherapy show lower plasma PGE2 when compared with those without remission. The association of chemotherapy treatment with a COX-2 was able to reduce concentrations of PGE2 in 50% of patients, while only 10% of those in group 1 decreased. However, it was not possible to confirme the role of PGE2 as a marker of prognosis and survival time for dogs with lymphoma

Made available in DSpace on 2015-04-09T12:28:18Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2014-12-05Bitstream added on 2015-04-09T12:47:45Z : No. of bitstreams: 1 000814294_20150610.pdf: 154779 bytes, checksum: 51dd92acc01e4cdcca6fb139c344baff (MD5) Bitstreams deleted on 2015-06-12T11:19:03Z: 000814294_20150610.pdf,. Added 1 bitstream(s) on 2015-06-12T11:19:38Z : No. of bitstreams: 1 000814294.pdf: 481135 bytes, checksum: 6396c52973d54e22945046da7a3983f0 (MD5) / Em Medicina Veterinária o linfoma é uma neoplasia caracterizada por proliferação clonal de linfócitos malignos, sendo uma das mais comuns em cães. Há evidências que as Tregs inibem a função efetora contra tumores, resultando em disfunção de células T em humanos e cães com câncer. O aumento da expressão da enzima ciclooxigenase-2 (COX-2) pelas células do tumor e células inflamatórias locais, estimula o desenvolvimento das Tregs. Deste modo, o tratamento com inibidores de COX-2, como os anti-inflamatórios não esteroidais é mais uma estratégia para a supressão das Tregs. Neste contexto, este trabalho teve como objetivo avaliar quantitativamente, por intermédio da citometria de fluxo, as Tregs em cães com linfoma, submetidos ao protocolo quimioterápico CHOP, associado ou não a um inibidor de COX-2 (Firocoxib). Foram utilizados 12 cães controles (hígidos), 12 cães com linfoma tratados com o protocolo CHOP e 12 cães com linfoma, tratados com o CHOP+Firocoxib. As Tregs formam avaliadas por citometria de fluxo, no momento do diagnóstico, após a indução da quimioterapia (5ª semana) e ao término do protocolo (20ª semana). Os resultados mostraram que os cães com linfoma apresentaram porcentagens maiores de Tregs (17,08±1,62) quando comparados ao grupo controle (5,67±1,62) (p<0,0001). Além disso, no grupo linfoma teve uma diminuição das porcentagens de Tregs ao final do protocolo quimioterápico, nos grupos tratados com o protocolo CHOP tradicional (GT1) (8,648±1,736) e no grupo tratado com CHOP associado a um firocoxib (GT2) (5,903±1,126) (p<0,0001). E que entre os grupos, GT1 (20,66±2,487) e GT2 (12,79±0,7673), apenas no momento do diagnóstico (M0), foi estatisticamente diferente (p<0,0114). Conclui-se que cães com linfoma multicêntrico possui um aumento das Tregs, e durante o protocolo quimioterápico, associado ou não a um firocoxib, essas células diminuem significativamente / In Veterinary Medicine lymphoma is a neoplasm characterized by clonal proliferation of malignant lymphocytes, one of the most common in dogs. There is evidence that Treg inhibit the effector function against tumors, resulting in T cell dysfunction in humans and dogs with cancer. Increased expression of cyclooxygenase-2 enzyme (COX-2) by tumor cells and local inflammatory cells, stimulates the development of Treg. Thus, treatment with COX-2 inhibitors such as nonsteroidal anti-inflammatory is a further strategy for the removal of Tregs. In this context, this work aimed to evaluate quantitatively, through flow cytometry, Tregs in dogs with lymphoma undergoing chemotherapy protocol CHOP, with or without a COX-2 inhibitor (Firocoxib). 12 dogs were used controls (healthy), 12 dogs with lymphoma treated with CHOP protocol and 12 dogs with lymphoma treated with CHOP + Firocoxib. Tregs form assessed by flow cytometry at diagnosis after induction chemotherapy (Week 5) and the protocol termination (20 weeks). The results showed that dogs with lymphoma had higher percentages of Tregs (17.08 ± 1.62) compared with the control group (5.67 ± 1.62) (p <0.0001). Moreover, in the lymphoma group had a decrease of Treg percentages at the end of chemotherapy protocol, the groups treated with the traditional CHOP protocol (GT1) (8.648 ± 1.736) and in the CHOP arm associated with a firocoxib (GT2) (5,903 ± 1.126) (p <0.0001). And that between the groups, GT1 (20.66 ± 2.487), and GT2 (12.79 ± 0.7673) only at the time of diagnosis (M0), was statistically different (p <0.0114). It was concluded that dogs with multicentric lymphoma has increased Tregs, and during the chemotherapy protocol, with or without a firocoxib, these cells decrease significantly

Made available in DSpace on 2014-08-13T14:50:48Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2013-12-11Bitstream added on 2014-08-13T18:00:29Z : No. of bitstreams: 1 000758886.pdf: 1623359 bytes, checksum: 421c293d525c9437f7bb8843242c9b4e (MD5) / O linfoma cutâneo canino é uma dermatopatia neoplásica incomum em cães, que apresenta baixa expectativa de vida, pouca responsividade à quimioterapia e prognóstico ruim. O objetivo deste estudo foi a avaliação clínica e laboratorial de cães com linfoma cutâneo mediante ao tratamento com lomustina, estabelecer o imunofenótipo, grau de proliferação celular e apoptose do linfoma cutâneo; determinar o nível de expressão gênica do MDR-1 e avaliar a correlação de todas as variáveis com os índices de resposta terapêutica e sobrevivência. Foram avaliados 15 cães com diagnóstico histopatológico de linfoma cutâneo. Todos foram tratados com lomustina na dose de 90 mg/m2 a cada 21 dias. A taxa de resposta clínica à quimioterapia foi de 53,3 %, oito dos quinze animais apresentaram remissão parcial e sete cães (46,6%) não responderam ao tratamento testado. O tempo médio de sobrevivência nos animais tratados foi considerado baixo, 59,3 dias. As principais alterações hematológicas e bioquímicas encontradas durante a terapia foram: leucopenia (73,3%) trombocitopenia (60%) e anemia (46,1%). Toxicidade renal e hepática foi vista em 40% e 73,3% dos animais respectivamente. Em 93,3 % das amostras observou-se alto índice de proliferação celular e em 100% baixo índice apoptótico. Cerca de 93,3 % dos animais expressaram o gene MDR-1 nas células tumorais no momento do diagnóstico, com diferentes níveis de expressão. Os resultados obtidos demostram que o tratamento com lomustina deve ser extensivamente monitorado, devido a sua baixa eficácia e comprovada ação deletéria em cães. A avaliação imunohistoquímica e da expressão gênica confirmaram o comportamento biológico agressivo e a baixa expectativa de vida, no entanto, não houve correlação entre as variáveis avaliadas e a sobrevivência dos animais / The cutaneous lymphoma is an uncommon neoplastic skin disease in dogs, with decreased survival length, poor response to chemotherapy and poor prognosis. This study aimed to: 1) evaluate clinical and laboratory animals treated with lomustine; 2) establish the immunophenotype and the degree of cell proliferation and apoptosis in cutaneous lymphoma; 3) determine the level of gene expression of MDR – 1; 4) Correlate those variables to the rates of clinical response to therapy and survival. Fifteen dogs with histopathological diagnosis of cutaneous lymphoma were evaluated and treated with lomustine at a dose of 90 mg/m2 every 21 days. After chemotherapy, 53.3 % (8/15) of the animals showed partial remission and 7 dogs (46.6 %) did not respond to the treatment. The average survival time was considered short (59.3 days). The major hematological and biochemical changes observed during therapy were anemia (46.1%), leukopenia (73.3%) and thrombocytopenia (60 %). Kidney and liver toxicity was observed in 40% and 73.3 % of animals, respectively. Most of the samples (93.3 %) presented elevated rates of cell proliferation and 100% presented low apoptotic index. The majority of the animals (93.3 %) expressed MDR-1 gene in tumor cells at the moment of diagnosis, with levels of expression varying considerably. The results obtained in this work suggest that treatment with lomustine should be monitored, as its deleterious effects were demonstrated in dogs. The immunohistochemical evaluation and the gene expression confirm the aggressive biological behavior and low life expectancy, although there was no correlation between the assessed variables and the animals' survival length

Orientador: Renée Laufer Amorim / Banca: Veridiana Maria Brianezi Dignani De Moura / Banca: Sérgio Luis Felisino / Resumo: As lesões prostáticas em cães vêm sendo cada vez mais estudadas, uma vez que esta espécie é considerada modelo experimental para afecções prostáticas no homem. As principais são a hiperplasia prostática benigna (HPB), prostatites, cistos e o adenocarcinoma. Recentemente tem se dado atenção às lesões pré-neoplásicas, dentre elas a neoplasia intra-epitelial prostática (PIN) e a atrofia inflamatória proliferativa (PIA). Alguns marcadores imunoistoquímicos são utilizados com o objetivo de avaliar o desenvolvimento de câncer prostático a partir de lesões pré-neoplásicas. A cicloxigenase-2 (COX-2) apresenta papel fundamental na resposta inflamatória e, esta pode ter relação com o desenvolvimento do câncer, além de induzir estímulos mitogênicos, enquanto que o fator de crescimento transformador-ß (TGF-ß) induz a angiogênese e inibe a proliferação celular, sendo considerado um mediador do crescimento prostático. No presente trabalho estes marcadores foram utilizados com o objetivo de correlacionar lesões não neoplásicas, pré-neoplásicas e neoplásicas. Os resultados obtidos mostram que as neoplasias e as lesões pré-neoplásicas expressam grande quantidade de COX-2 e TGF-ß, o que permite afirmar o papel destas proteínas no desenvolvimento do câncer prostático em cães. / Abstract: Prostatic lesions in dogs are being studied more and more, since the dogs are considered na experimental model for prostatic diseases in humans. The main prostatic diseases are benign prostatic hyperplasia (BPH), prostatic inflammation, cysts and adenocarcinoma. Pre neoplastic lesions are being studied, among them prostatic intra epithelial neoplasia (PIN) and prostatic inflammatory atrophy (PIA). Immunohistochemistry markers are used to evaluate prostatic cancer from pre neoplastic lesions. COX-2 has the main role in inflammatory response and can be involved in cancer development, because induces mitosis, and TGF-ß) induces angiogenesis and inhibits cellular proliferation, and is considered a prostatic growth mediator. In this study, these markers were used to correlate non neoplastic lesions, pre neoplastic lesions and prostatic cancer. Our results show that neoplastic and pre neoplastic lesions express high amounts of COX-2 and TGF-ß, witch allows us to confirm the involvement of these proteins in prostatic cancer development in dogs. / Mestre

Orientador: Renée Laufer Amorim / Banca: Veridiana Maria Brianezi Dignani de Moura / Banca: Marcela Marcondes Pintos Rodrigues / Resumo: A próstata canina pode utilizada como modelo para estudo comparativo de afecções desta glândula no homem, constituindo as únicas espécies em que o carcinoma de próstata (CaP) se desenvolve espontaneamente. A próstata canina é sede de diversos processos patológicos que comumente acometem cães adultos e idosos. O papel do oncogene c-MYC e supressores tumorais NKX3.1 e E-caderina são bem estabelecidos no processo de carcinogênese da próstata humana, no entanto, não há pesquisas que relatem a expressão proteica dessas proteínas na progressão do CaP canino. Neste contexto, este estudo teve por objetivo avaliar a expressão proteica de c-MYC, NKX3.1 e Ecaderina na próstata normal, com Hiperplasia Prostática Benigna (HPB), Atrofia Inflamatória Proliferativa (PIA) e CaP e avaliar o papel dessas proteínas no processo de gênese tumoral. O presente estudo foi realizado em uma plataforma de Microarranjo de Tecido (TMA) contendo diferentes lesões prostáticas. Foi realizada Imuno-histoquímica com os anticorpos c-MYC, NKX3.1 e E-caderina pelo método da peroxidase e DAB. A análise estatística foi realizada pelo teste de Qui-quadrado ou teste de Fischer para determinar associação entre as variáveis. A proteína c-MYC apresentou maior expressão no CaP e na PIA quando comparada com a próstata normal e com HPB (p= 0,0068). Observou-se maior número de amostras com ausência da expressão do NKX3.1 no CaP (94.75% ) e PIA (100%) quando comparando com a próstata normal e HPB (p=0,0022). Em relação a E-caderina houve maior número de amostras positivas na HPB e próstata normal quando comparado CaP e a PIA, no entanto sem diferença estatística. O processo de gênese tumoral na próstata canina esta associado com o aumento de expressão proteica do c-MYC e a perda da expressão proteica do NKX3.1 / Abstract: The dog is the only species besides humans that develop spontaneous and naturally prostatic carcinoma (PCa) with high frequency. The canine model is primarily used for studies of molecular mechanisms of PCa and provides a natural animal model for studies of potential therapies. PCa in men presents CMYC oncogene mutation and reduced E-cadherin and NKX3.1 protein expression. In this context our objective was to evaluate NKX3.1, C-MYC and E-cadherin expression in benign prostatic hyperplasia (BPH), prostatic inflammatory atrophy (PIA) and PCa in dogs and verify the role of these proteins in the progression to prostate cancer. A tissue microarray (TMA) slide was constructed and immunohistochemistry with antibodies C-MYC, NKX3.1 and E-cadherin was performed with peroxidase method and DAB. Chi-square or Fisher exact test was used to determine the association between the categorical variables. The evaluation of the C-MYC oncogene protein showed higher cytoplasmic positivity in canine PCa and PIA compared to BPH (p= 0.0068). We observed a decrease of NKX3.1 expression in 94.75% of PCa, 100% of PIA in comparison to BPH (p=0.0022). E-cadherin expression was higher in BPH and PIA in comparison to PCa, with no statistical difference. The carcinogenesis process of canine prostatic lesion may be related to gain of CMYC and loss of NKX3.1 / Mestre

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:27:56Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2011-02-28Bitstream added on 2014-06-13T20:57:18Z : No. of bitstreams: 1 salgado_bs_me_botfm.pdf: 482776 bytes, checksum: 23c491910cd4c7da0d422455a7e9b2df (MD5) / Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico (CNPq) / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / Transição epithelial-mesenquimal (EMT) é a conversão de células epiteliais polarizadas para células migratórias com fenótipo fibroblasto-símile. A EMT está envolvida na progressão e metástase em diversos cânceres nos seres humanos, porém permanece a ser mais bem explorada na literatura veterinária. O objetivo desta pesquisa foi avaliar a imunoexpressão de proteínas relacionadas à EMT nos carcinomas mamários de cadelas (CMCs). Seis proteínas foram avaliadas por meio de imunoistoquímica em 94 amostras de CMCs. Tecidos mamários não neoplásicos de 17 cadelas e amostras de 9 tumores mamários benignos de cadelas foram avaliados de modo a determinar o perfil de imunoexpressão de Snai-1. Características anatomopatológicas foram comparadas com a imunoexpressão de proteínas relacionadas à EMT nos CMCs. A perda de proteínas epiteliais e/ou a aquisição de proteínas mesenquimais foi observada principalmente em neoplasias com evidência de invasão estromal; entretanto, somente foi observada significância estatística quando comparado S100A4 e invasão vascular. Snai-1 foi observado em células luminais de neoplasias simples malignas e em células mioepiteliais de tumores benignos ou malignos de caráter complexo, sendo também significativamente relacionado à baixa de expressão de Caderina-E. Conclui-se que a perda de proteínas epiteliais e/ou a aquisição de proteínas mesenquimais está associada com EMT e pode possuir importante papel na avaliação de CMCs. O padrão único de imunoexpressão de Snai-1 pode ajudar a distinção entre um adenoma e um carcinoma não metastático e aparenta estar relacionado à conversão de células mioepiteliais a um fenótipo mesenquimal completo. A perda de Caderina-E e citoqueratina e a mudança no padrão de imunoexpressão de Snai-1, Caderina-N, S100A4 e MMP-2 indica a ocorrência de EMT em carcinomas mamários de cadelas... / Epithelial-mesenchymal transition (EMT) is defined as switching of polarized epithelial cells to a migratory fibroblastoid phenotype. EMT is known to be involved in the progression and metastasis of various cancers in humans, but this specific process is still little explored in the veterinary literature. The aim of this research was to evaluate the expression of EMT-related proteins in canine mammary carcinomas (CMCs). The expression of six EMT-related proteins in CMC of 94 female dogs was evaluated by immunohistochemistry. Additionally, mammary tissues from 17 female dogs with no history of mammary tumor development and from 9 bitches with benign tumors were evaluated in order to determine Snai-1 immunoexpression patterns. Anatomopathological characteristics were compared with the expression of EMTrelated proteins in CMCs. Loss of epithelial protein and/or acquisition of the expression of mesenchymal proteins were observed, particularly in tumors with evidence of stromal invasion; however, significance was only observed between the S100A4 and vascular invasion. Snai-1 was only expressed in luminal cells of histologically malignant tumors and in myoepithelial cells of benign and malignant complex tumors and was significantly related to E-cadherin loss. In conclusion, loss of epithelial proteins and/or the acquisition of mesenchymal proteins are associated with EMT and may have an important role in the evaluation of CMC patients. The unique immunoexpression pattern of Snai-1 could help to distinguish between an adenoma and a non-metastatic carcinoma and seems to be related to conversion of myoepithelial cells to a complete mesenchymal-like phenotype. Loss of E-cadherin and cytokeratin and change of immunoexpression pattern of Snai-1, N-cadherin, S100A4 and MMP-2 indicate the occurrence of EMT in canine mammary carcinomas and should result in an en bloc resection or a close follow-up.

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:27:57Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2013-10-10Bitstream added on 2014-06-13T19:57:04Z : No. of bitstreams: 1 000735329.pdf: 2941475 bytes, checksum: c05397fe7f5f49eeb21cca723c619b7f (MD5) / As células dendríticas despertam atualmente um grande interesse de estudos, pois são alvos primários da atividade tumoral sobre o sistema imune. O objetivo principal deste estudo foi avaliar a relação entre o infiltrado inflamatório e as células dendríticas (DCs) nos carcinomas mamários do tipo simples em cadelas. Dois grupos de amostras foram formados, o primeiro composto por 18 amostras de tecido mamário sem alterações (grupo controle) e o segundo, de 26 carcinomas mamários do tipo simples (grupo tumor). Além disso, foram analisados 15 linfonodos provenientes das cadelas com tumor de mama e quatro linfonodos oriundos das cadelas sem tumor de mama. Foi realizada a imunodetecção de DCs mieloides imaturas e maduras, DCs plasmocitoides, linfócitos T, macrófagos e moléculas do complexo de histocompatibilidade maior classe II (MHC-II). Foram também identificados os mastócitos pela coloração especial de azul de toluidina. Para os linfonodos, realizou-se apenas a imunodetecção de DCs mieloides imaturas e maduras. A idade média das cadelas com tumor de mama foi de 9,3 anos (30%) e os cães sem raça definida (SRD) foram os mais afetados. Nenhum linfonodo apresentou focos de micrometástases. Das 17 cadelas acompanhadas para o estudo de seguimento, nove estão vivas e oito vieram a óbito. A causa de morte mais ocorrente foi a provocada por metástases (67%). Nas mamas com tumor, observou-se que os mastócitos e as DCs mieloides maduras apareciam nas regiões peritumorais. As DCs mieloides imaturas, as DCs plasmocitoides, os macrófagos e as células imunomarcadas para MHC-II foram visualizados somente no estroma tumoral. Já os linfócitos T foram encontrados nas porções tumoral e peritumoral. Nos linfonodos a marcação das DCs mieloides imaturas concentrou-se nos folículos linfoides e na zona paracortical; já as DCs maduras apareceram somente no centro dos folículos... / Dendritic cells currently represent a big focus of studies, because they’re primary targets of tumor activity on the immune system. The main objective of this study was to evaluate the relationship between the inflammatory infiltrate and dendritic cells (DCs) in mammary carcinomas simple type in female’s dogs. Two groups of mammary gland samples were formed, the first was composed of 18 mammary tissue samples unchanged (control group) and the second, with 26 mammary simple carcinomas (tumor group). In addition, 15 lymph nodes were analyzed from bitches with mammary gland tumor and four lymph nodes derived from bitches without mammary gland tumor. Immunodetection was performed to immature and mature myeloid DCs, plasmacytoid DCs, T cells, macrophages and molecules of the major histocompatibility complex class II (MHC -II). Mast cells have also been identified by the special staining toluidine blue. To lymph nodes, the immunodetection was performed only to immature and mature myeloid DCs. The average age of the bitches with mammary tumor was 9.3 years (30 %) and dogs without breed (SRD) were the most affected. No lymph node showed foci of micrometastases. From 17 bitches monitored for follow-up study, nine are alive and eight died. The cause of death more occurred was caused by metastasis (67%). In the mammary glands with tumor, it was observed that the mast cells and mature myeloid DCs appeared in peritumoral regions. The immature myeloid DCs, plasmacytoid DCs, macrophages and cells immunostained for MHC-II were seen only in the tumor stroma. The T cells were founded into the tumor and in peritumoral areas. Into the lymph nodes, the marking of immature myeloid DCs was concentrated in lymphoid follicles and paracortical zone; the mature DCs appeared only in the center of the lymphoid follicles. In mammary gland control, the number of inflammatory cells as well as DCs was minimal. Statistically ...