Made available in DSpace on 2014-06-11T19:23:43Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2008-02-11Bitstream added on 2014-06-13T20:11:27Z : No. of bitstreams: 1 cesar_jrf_me_jabo.pdf: 550352 bytes, checksum: 1d6db13e1ea88e0f7e6d7733821abce1 (MD5) / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP) / Tendo em vista a relação da cicloxigenase-2 com a progressão do câncer, objetivou-se neste trabalho avaliar a expressão da atividade desta enzima com a imunorreatividade de macrófagos no diagnóstico e prognóstico de mastocitoma canino. Para a realização deste estudo foram selecionadas 24 amostras de mastocitomas e 5 amostras de tecido cutâneo sem alterações patológicas (grupo controle). Os espécimes foram divididos em grupos: GO ¬ grupo controle (n=5), G1 -mastocitomas grau I (n=8) , G2 - mastocitomas grau 11 (n=8), G3 - mastocitomas grau 11I (n=8). A avaliação da expressão da COX-2 e macrófagos foi conduzida por imunoistoquímica, utilizando-se o complexo avidina-biotina (ABC). Os resultados mostraram que os dois anticorpos imunorreagiram com tecidos caninos normais ou neoplásicos. A expressão da COX-2 mostrou marcação crescente, conforme a agressividade do tumor e houve significância (P<O,05) entre os grupos GO e G1; GO e G2; GO e G3; G1 e G3. A imunomarcação de macrófagos foi decrescente em relação à gradação histológica e-houve significância (P<O,05) entre os grupos GO e G1; GO e G2; GO e G3; G1 e G3; G2 e G3. Assim como a expressão de macrófagos, a sobrevida dos animais foi decrescente em relação ao grau de malignidade do tumor e inversamente proporcional a marcação de COX-2. / Considering the relationship between cyclooxygenase-2 (COX-2) with the cancer evolution, this study aimed to assessment the expression of this enzyme with the immunoreactive of macrophage in the diagnosis and prognostic of canine mast cell tumor. Twenty four mast cell tumors samples were selected for the accomplishment of this study and tive samples of normal skin tissue (control group - GO). The samples were divided in groups: GO ¬ control group (n=5), G1 - mastocytoma grade I (n=8), G2 - mastocytoma grade 11 (n=8), G3 - mastocytoma grade 11I (n=8). The evaluation of the COX-2 and macrophage expression was achieved by immunohistochemistry, by means of complex avidine-biotine (ABC). The COX-2 expression increased, as the tumor grade progression; moreover. it had relevancy (P<O,05) among the groups: GO and G1, GO and G2, GO and G3, G1 and G3. The macrophage immunoreactive was decreased in relation of histological grade and it had a relevancy (P<O,05) among the groups: GO and G1, GO and G2. GO and G3. G1 and G3, G2 and G3. As macrophage expression, animal survival was decreased in relation of the histological grade of tumor and proportional reversed COX-2 expression.

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:23:47Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2012-02-17Bitstream added on 2014-06-13T19:30:24Z : No. of bitstreams: 1 ferioli_rb_me_botfmvz.pdf: 479951 bytes, checksum: 6950eaf7a2aab7b7e904602236642185 (MD5) / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / O mastocitoma cutâneo (MTC) canino é uma neoplasia maligna constituída por mastócitos, que corresponde a aproximadamente 11% das neoplasias cutâneas do cão. A classificação histopatológica em três graus de malignidade, proposta por Patnaik et al. (1984) para os MTCs é o principal fator prognóstico. Recentemente, uma nova classificação com dois graus de malignidade foi proposta (KIUPEL et al., 2011) e parece trazer menor discordância na graduação. Neste estudo foram avaliadas as expressões proteicas de SCF, IGF-1, m-TOR e c-KIT através da técnica de imunoistoquímica (IHQ) em MTCs caninos em busca de novos fatores prognósticos. Analisaram-se as relações entre estas quatro proteínas e, entre IGF-1 e SCF com fatores prognósticos como o grau histológico, índice mitótico e proliferação celular, além de dados epidemiológicos como idade, gênero, porte físico e localização da lesão. Foram utilizadas 133 amostras de MTCs de 133 cães dispostas em lâminas de microarranjo de tecidos (TMA). A associação estatística foi observada entre a expressão de SCF e grau histológico de acordo com Kiupel et al. (2011), índice mitótico, proliferação celular pelo KI-67, localização da Iesão, idade, c-KIT e IGF-1. A expressão do fator de crescimento IGF-1 teve relação com o índice mitótico, o porte físico dos animais e a expressão de c-KIT e m-TOR. A expressão de SCF está relacionada ao padrão aberrante de expressão do seu receptor c-KIT. Com base nas relações observadas podemos concluir que as proteínas IGF-1, m-TOR, SCF e c-KIT interagem no desenvolvimento dos MTCs caninos e que cães de porte grande e gigante apresentam maior expressão de IGF-1, corroborando com maior incidência de MTCs nestas raças / The canine mast cell tumor (MTC) is a malignant neoplasm composed of mast cells, which corresponds to approximately 11% of cutaneous neoplasms of the dog. The histopathological classification in three grades of malignancy, proposed by Patnaik et al. (1984), for MTCs is the main prognostic factor. Recently, a new classification with two malignancy degrees was suggested (KIUPEL et al., 2011) and seems to bring less disagreement in diagnosis. We carried out the study evaluating the protein expression of SCF, IGF-1, m-TOR and c-KIT by immunohistochemical technique (IHC) in canine MTCs searching new prognostic factors. We analyzed the relationships between these four proteins, and between IGF-1 and SCF with prognostic factors such as histological grade, mitotic index and cell proliferation, as well as epidemiological data such as age, gender, physical size and location of the lesion. Were used 133 samples of canine MTCs. The statistical association was observed between the expression of SCF and histological grade according to Kiupel et al. (2011), mitotic index, cell proliferation by Ki-67, Iesion location, age, c-KIT and IGF-1. The growth factor IGF-1 expression was related to mitotic index, the animals physical size and the m-TOR expression. The SCF expression is related to the aberrant pattern of expression of its c-KIT receptor. The association between the IGF-1 expression and the animal size was observed, and seems to interact with the m-TOR co-expression. Based on the observed relationships we can conclude that IGF-1, m-TOR, SCF and c-KIT proteins interacts on the development of canine MTCs, and large and giant-sized animals show higher expression of IGF-1, confirming increased incidence of MTCs on these races

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:24:00Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2013-02-15Bitstream added on 2014-06-13T19:51:04Z : No. of bitstreams: 1 000735057.pdf: 1377720 bytes, checksum: 27a124629e14b0c3deac7a29c3f1f0e7 (MD5) / A próstata canina pode utilizada como modelo para estudo comparativo de afecções desta glândula no homem, constituindo as únicas espécies em que o carcinoma de próstata (CaP) se desenvolve espontaneamente. A próstata canina é sede de diversos processos patológicos que comumente acometem cães adultos e idosos. O papel do oncogene c-MYC e supressores tumorais NKX3.1 e E-caderina são bem estabelecidos no processo de carcinogênese da próstata humana, no entanto, não há pesquisas que relatem a expressão proteica dessas proteínas na progressão do CaP canino. Neste contexto, este estudo teve por objetivo avaliar a expressão proteica de c-MYC, NKX3.1 e Ecaderina na próstata normal, com Hiperplasia Prostática Benigna (HPB), Atrofia Inflamatória Proliferativa (PIA) e CaP e avaliar o papel dessas proteínas no processo de gênese tumoral. O presente estudo foi realizado em uma plataforma de Microarranjo de Tecido (TMA) contendo diferentes lesões prostáticas. Foi realizada Imuno-histoquímica com os anticorpos c-MYC, NKX3.1 e E-caderina pelo método da peroxidase e DAB. A análise estatística foi realizada pelo teste de Qui-quadrado ou teste de Fischer para determinar associação entre as variáveis. A proteína c-MYC apresentou maior expressão no CaP e na PIA quando comparada com a próstata normal e com HPB (p= 0,0068). Observou-se maior número de amostras com ausência da expressão do NKX3.1 no CaP (94.75% ) e PIA (100%) quando comparando com a próstata normal e HPB (p=0,0022). Em relação a E-caderina houve maior número de amostras positivas na HPB e próstata normal quando comparado CaP e a PIA, no entanto sem diferença estatística. O processo de gênese tumoral na próstata canina esta associado com o aumento de expressão proteica do c-MYC e a perda da expressão proteica do NKX3.1 / The dog is the only species besides humans that develop spontaneous and naturally prostatic carcinoma (PCa) with high frequency. The canine model is primarily used for studies of molecular mechanisms of PCa and provides a natural animal model for studies of potential therapies. PCa in men presents CMYC oncogene mutation and reduced E-cadherin and NKX3.1 protein expression. In this context our objective was to evaluate NKX3.1, C-MYC and E-cadherin expression in benign prostatic hyperplasia (BPH), prostatic inflammatory atrophy (PIA) and PCa in dogs and verify the role of these proteins in the progression to prostate cancer. A tissue microarray (TMA) slide was constructed and immunohistochemistry with antibodies C-MYC, NKX3.1 and E-cadherin was performed with peroxidase method and DAB. Chi-square or Fisher exact test was used to determine the association between the categorical variables. The evaluation of the C-MYC oncogene protein showed higher cytoplasmic positivity in canine PCa and PIA compared to BPH (p= 0.0068). We observed a decrease of NKX3.1 expression in 94.75% of PCa, 100% of PIA in comparison to BPH (p=0.0022). E-cadherin expression was higher in BPH and PIA in comparison to PCa, with no statistical difference. The carcinogenesis process of canine prostatic lesion may be related to gain of CMYC and loss of NKX3.1

Orientador: Luiz Henrique de Araújo Machado / Banca: Maria Lúcia Gomes Lourenço / Banca: Mauro José Lahm Cardoso / Resumo: O linfoma cutâneo canino é uma dermatopatia neoplásica incomum em cães, que apresenta baixa expectativa de vida, pouca responsividade à quimioterapia e prognóstico ruim. O objetivo deste estudo foi a avaliação clínica e laboratorial de cães com linfoma cutâneo mediante ao tratamento com lomustina, estabelecer o imunofenótipo, grau de proliferação celular e apoptose do linfoma cutâneo; determinar o nível de expressão gênica do MDR-1 e avaliar a correlação de todas as variáveis com os índices de resposta terapêutica e sobrevivência. Foram avaliados 15 cães com diagnóstico histopatológico de linfoma cutâneo. Todos foram tratados com lomustina na dose de 90 mg/m2 a cada 21 dias. A taxa de resposta clínica à quimioterapia foi de 53,3 %, oito dos quinze animais apresentaram remissão parcial e sete cães (46,6%) não responderam ao tratamento testado. O tempo médio de sobrevivência nos animais tratados foi considerado baixo, 59,3 dias. As principais alterações hematológicas e bioquímicas encontradas durante a terapia foram: leucopenia (73,3%) trombocitopenia (60%) e anemia (46,1%). Toxicidade renal e hepática foi vista em 40% e 73,3% dos animais respectivamente. Em 93,3 % das amostras observou-se alto índice de proliferação celular e em 100% baixo índice apoptótico. Cerca de 93,3 % dos animais expressaram o gene MDR-1 nas células tumorais no momento do diagnóstico, com diferentes níveis de expressão. Os resultados obtidos demostram que o tratamento com lomustina deve ser extensivamente monitorado, devido a sua baixa eficácia e comprovada ação deletéria em cães. A avaliação imunohistoquímica e da expressão gênica confirmaram o comportamento biológico agressivo e a baixa expectativa de vida, no entanto, não houve correlação entre as variáveis avaliadas e a sobrevivência dos animais / Abstract: The cutaneous lymphoma is an uncommon neoplastic skin disease in dogs, with decreased survival length, poor response to chemotherapy and poor prognosis. This study aimed to: 1) evaluate clinical and laboratory animals treated with lomustine; 2) establish the immunophenotype and the degree of cell proliferation and apoptosis in cutaneous lymphoma; 3) determine the level of gene expression of MDR - 1; 4) Correlate those variables to the rates of clinical response to therapy and survival. Fifteen dogs with histopathological diagnosis of cutaneous lymphoma were evaluated and treated with lomustine at a dose of 90 mg/m2 every 21 days. After chemotherapy, 53.3 % (8/15) of the animals showed partial remission and 7 dogs (46.6 %) did not respond to the treatment. The average survival time was considered short (59.3 days). The major hematological and biochemical changes observed during therapy were anemia (46.1%), leukopenia (73.3%) and thrombocytopenia (60 %). Kidney and liver toxicity was observed in 40% and 73.3 % of animals, respectively. Most of the samples (93.3 %) presented elevated rates of cell proliferation and 100% presented low apoptotic index. The majority of the animals (93.3 %) expressed MDR-1 gene in tumor cells at the moment of diagnosis, with levels of expression varying considerably. The results obtained in this work suggest that treatment with lomustine should be monitored, as its deleterious effects were demonstrated in dogs. The immunohistochemical evaluation and the gene expression confirm the aggressive biological behavior and low life expectancy, although there was no correlation between the assessed variables and the animals' survival length / Mestre

Orientador: Renée Laufer Amorim / Banca: Júlio Lopes Sequeira / Banca: Giovana Wingeter Di Santis / Resumo: O mastocitoma cutâneo (MTC) canino é uma neoplasia maligna constituída por mastócitos, que corresponde a aproximadamente 11% das neoplasias cutâneas do cão. A classificação histopatológica em três graus de malignidade, proposta por Patnaik et al. (1984) para os MTCs é o principal fator prognóstico. Recentemente, uma nova classificação com dois graus de malignidade foi proposta (KIUPEL et al., 2011) e parece trazer menor discordância na graduação. Neste estudo foram avaliadas as expressões proteicas de SCF, IGF-1, m-TOR e c-KIT através da técnica de imunoistoquímica (IHQ) em MTCs caninos em busca de novos fatores prognósticos. Analisaram-se as relações entre estas quatro proteínas e, entre IGF-1 e SCF com fatores prognósticos como o grau histológico, índice mitótico e proliferação celular, além de dados epidemiológicos como idade, gênero, porte físico e localização da lesão. Foram utilizadas 133 amostras de MTCs de 133 cães dispostas em lâminas de microarranjo de tecidos (TMA). A associação estatística foi observada entre a expressão de SCF e grau histológico de acordo com Kiupel et al. (2011), índice mitótico, proliferação celular pelo KI-67, localização da Iesão, idade, c-KIT e IGF-1. A expressão do fator de crescimento IGF-1 teve relação com o índice mitótico, o porte físico dos animais e a expressão de c-KIT e m-TOR. A expressão de SCF está relacionada ao padrão aberrante de expressão do seu receptor c-KIT. Com base nas relações observadas podemos concluir que as proteínas IGF-1, m-TOR, SCF e c-KIT interagem no desenvolvimento dos MTCs caninos e que cães de porte grande e gigante apresentam maior expressão de IGF-1, corroborando com maior incidência de MTCs nestas raças / Abstract: The canine mast cell tumor (MTC) is a malignant neoplasm composed of mast cells, which corresponds to approximately 11% of cutaneous neoplasms of the dog. The histopathological classification in three grades of malignancy, proposed by Patnaik et al. (1984), for MTCs is the main prognostic factor. Recently, a new classification with two malignancy degrees was suggested (KIUPEL et al., 2011) and seems to bring less disagreement in diagnosis. We carried out the study evaluating the protein expression of SCF, IGF-1, m-TOR and c-KIT by immunohistochemical technique (IHC) in canine MTCs searching new prognostic factors. We analyzed the relationships between these four proteins, and between IGF-1 and SCF with prognostic factors such as histological grade, mitotic index and cell proliferation, as well as epidemiological data such as age, gender, physical size and location of the lesion. Were used 133 samples of canine MTCs. The statistical association was observed between the expression of SCF and histological grade according to Kiupel et al. (2011), mitotic index, cell proliferation by Ki-67, Iesion location, age, c-KIT and IGF-1. The growth factor IGF-1 expression was related to mitotic index, the animals physical size and the m-TOR expression. The SCF expression is related to the aberrant pattern of expression of its c-KIT receptor. The association between the IGF-1 expression and the animal size was observed, and seems to interact with the m-TOR co-expression. Based on the observed relationships we can conclude that IGF-1, m-TOR, SCF and c-KIT proteins interacts on the development of canine MTCs, and large and giant-sized animals show higher expression of IGF-1, confirming increased incidence of MTCs on these races / Mestre

Orientador: Noeme Sousa Rocha / Coorientador: Alfredo Ribeiro da Silva / Banca: Fernanda da Cruz Landim e Alvarenga / Banca: Carla Adriene da Silva Franchi / Banca: Luís Fernando Barbisan / Banca: Rafael Malagoli Rocha / Resumo: Por ser a maior causa de morte entre as fêmeas caninas, o câncer de mama desperta o interesse da comunidade científica, pois sua apresentação e evolução clínica são muito semelhantes aos casos de câncer de mama na mulher. No intuito de permitir a continuação dos estudos comparativos entre os tumores de cadelas e os das mulheres, foram realizadas as marcações imunoistoquímicas para receptores de estrógeno (RE), HER-2, p63 e CK5, a fim de classificar os tumores de acordo com sua expressão, nos diferentes subtipos. Além disso, foram utilizados os marcadores para CD10, BMI-1, CD44, CD24, ESA e MUC-1 por meio da imunoistoquímica em lâminas confeccionadas pela técnica de Tissue microarray (TMA) para avaliar a presença de células-tronco tumorais. A partir dos resultados da imunoistoquímica os tumores foram classificados em Luminal A (RE+ e HER-2- ) (25,89%), Luminal B (RE+ e HER-2+) (33,93%), Superexpressão de HER-2 (RE- e HER-2 +) (14,29%) e Basal (RE-, HER-2- e p63 e/ou CK5 +) (25,89%). Dos 112 tumores, 75 foram positivos para CD10 (66,96%), 81 positivos para BMI-1 (72,32%), para o CD44 apenas seis tumores (5,35%) foram positivos, 48 tumores positivos para CD24 (42,86%), 24 positivos para ESA (21,43%) e 23 tumores foram positivos para MUC-1 (20,54%). Desses tumores, quatro apresentaram o imunofenótipo CD44+CD24-, representando 3,57% dos tumores. Ao correlacionar as marcações para células-tronco tumorais com os diferentes subtipos, alguns marcadores apresentaram diferença estatística, sugerindo que os tumores com imunofenótipo mais agressivo (Superexpressão de HER-2 e Basal) foram positivos para a marcação de células-tronco tumorais. Além disso, houve uma maior marcação das células-tronco tumorais para os carcinomas classificados em complexo, o que desafia os dados de literatura, já que esses tumores eram considerados com melhor prognóstico do que os carcinomas simples. São necessários novos estudos ... / Abstract: For being the biggest cause of death among the canine females, mammary cancer arises the interest of the scientific community; therefore its presentation and clinical outcome are very similar to the cases of breast cancer in woman. In intention to allow the following of comparative studies between the tumors of dogs and women, immunohistochemical markers were performed to estrogen receptors (RE), HER-2, p63 e CK5, to classify the tumors according to their expression, in different subtypes. Beyond that, markers to CD10, BMI-1, CD44, CD24, ESA e MUC-1 were used through the immunohistochemical in slides made by Tissue microarray technique (TMA) to evaluate the presence of cancer stem cells. From the immunohistochemical results, tumors were classified in Luminal A (RE+ e HER-2-) (25,89%), Luminal B (RE+ e HER-2+) (33,93%), HER-2 Overexpression (RE- e HER-2 +) (14,29%) and Basal (RE-, HER-2- e p63 e/ou CK5 +) (25,89%). Among 112 tumors, 75 were positive to CD10 (66,96%), 81 positive to BMI-1 (72,32), to CD44 only six tumors (5,35%) were positive, 48 positive tumors to CD24 (42,86%), 24 positive to ESA (21,43%) and 23 tumors were positive to MUC-1 (20,54%). In these tumors, four presents CD44+CD24- immunophenotypes, performing 3,57% of tumors. To correlate cancer stem cells markers with the distinct subtypes, some markers presented statistical differences, suggesting that more aggressive tumors immunophenotypes (HER-2 Overexpression and Basal) were positive to cancer stem cells markers. Besides, there were higher cancer stem cell markers in complex carcinomas, which challenge literature data because this kind of tumor was considered with better prognosis when compared with simple carcinomas. More studies are necessary with new samples to confront this research results' and determinate the more indicated markers. Still, the female dog must be considered to be used as experimental model for breast cancer ... / Doutor

Orientador: Andrigo Barboza De Nardi / Coorientador: Geovanni Dantas Cassali / Banca: Rafael Ricardo Huppes / Banca: Bruno Watanabe Minto / Resumo: Estudos clinico-epidemiológicos reúnem informações importantes a respeito do comportamento de uma doença e do conhecimento e postura dos tutores em relação à essa doença, desta forma, revelam a realidade de uma região em um determinado período. Em cadelas, as neoplasias mamárias são as mais frequentes, sendo prevenidas pela realização da castração precoce. A proposta deste trabalho foi avaliar os aspectos clínicos e epidemiológicos das cadelas com tumor de mama. Foram obtidos dados clínicos e epidemiológicos de 54 pacientes mediante questionário aplicado aos tutores e, adicionalmente, foram analisados os laudos histopatológicos. Das 54 pacientes selecionadas foram identificadas 21 raças, sendo o SRD foi prevalente (29,63%), a idade média foi de 10,3 anos, a maioria das pacientes (68,52%) não foi submetida à ovariohisterectomia, e as que foram (31,48%), foram realizadas após 2,5 anos de idade. O tempo médio de evolução da doença foi de 12 meses. Das pacientes, 44 (81,48%) apresentavam lesões múltiplas, em 38 (70,37%) acometiam ambas as cadeias mamárias. Foram analisadas 163 lesões, sendo 84 (51,53%) localizados na cadeia mamária esquerda, e, a mama mais acometida foi a mama inguinal (34,97%). Das 163 lesões analisadas 21 (12,88%) eram lesões não neoplásicas, 21 (12,88%) eram lesões benignas e 121 (74,24%) eram lesões malignas, e, a maioria (78,53%) era de tamanho menor que 3 cm. Das lesões classificadas em grau tumoral, 49 (56,98%) foram classificadas em grau 1, 29 (33,72%) e... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: Clinical and epidemiological studies gather important information about the behavior of a disease and the knowledge and posture of the tutors in relation to this disease, thus, they reveal the reality of a region in a determinated period. In bitches, the most frequent neoplastic process is the breast tumor that can be prevented through the execution of early neutering (before two and a half years old). The purpose of this study was to evaluate the clinical and epidemiological aspects of female dogs with breast tumor. It was obtained clinical and epidemiological data from 54 patients through a questionnaire applied to tutors and in addiction histopathological reports were analyzed. We selected 54 patients, 21 races were identified, the prevalent was mixed breed (29.63%), the average age was 10.3 years, the majority (68.52%) was not submitted to spaying and the other (31.48%) the procedure was performed after 2.5 years of age. The average time of disease the evolution was 12 months. From the total of 54 patients, 44 (81.48%) had multiple lesions, in 38 (70.37%) both mamary chains were affected. We analyzed 163 lesions and 84 (51.53%) were located in the left mammary chain and the most affected breast was the inguinal breast (34.97%). We identified 21 (12,88%) non pre-neoplasic lesions, the same rate for benign lesions, 121 (74.24%) were malignant lesions, and the majority of the tumors had less than 3 cm (78.53%). The lesions that were classified by the tumor grade, 49 (56.98%) were classified as grade 1, 29 (33.72%) grade 2 and 8 (9.3%) grade 3. In our study it was identified 24 distinct histological types. From all the patients of this study, 13 (24.07%) had metastases in the regional lymph nodes (inguinal and / or axillary). We conclude that bitches not spayed to 2,5 years old, with irregular estrus and pseudopregnancy ... (Complete abstract click electronic access below) / Mestre

Orientador: Aureo Evangelista Santana / Coorientador: Mirela Tinucci Costa / Banca: Maura Rosane Valério Ikoma / Banca: Felipe Augusto Ruiz Sueiro / Banca: Marcia Ferreira da Rosa Sobreira / Banca: Sabryna Gouveia Calazans / Resumo: Em Medicina Veterinária o linfoma é uma neoplasia caracterizada por proliferação clonal de linfócitos malignos, sendo uma das mais comuns em cães. Há evidências que as Tregs inibem a função efetora contra tumores, resultando em disfunção de células T em humanos e cães com câncer. O aumento da expressão da enzima ciclooxigenase-2 (COX-2) pelas células do tumor e células inflamatórias locais, estimula o desenvolvimento das Tregs. Deste modo, o tratamento com inibidores de COX-2, como os anti-inflamatórios não esteroidais é mais uma estratégia para a supressão das Tregs. Neste contexto, este trabalho teve como objetivo avaliar quantitativamente, por intermédio da citometria de fluxo, as Tregs em cães com linfoma, submetidos ao protocolo quimioterápico CHOP, associado ou não a um inibidor de COX-2 (Firocoxib). Foram utilizados 12 cães controles (hígidos), 12 cães com linfoma tratados com o protocolo CHOP e 12 cães com linfoma, tratados com o CHOP+Firocoxib. As Tregs formam avaliadas por citometria de fluxo, no momento do diagnóstico, após a indução da quimioterapia (5ª semana) e ao término do protocolo (20ª semana). Os resultados mostraram que os cães com linfoma apresentaram porcentagens maiores de Tregs (17,08±1,62) quando comparados ao grupo controle (5,67±1,62) (p<0,0001). Além disso, no grupo linfoma teve uma diminuição das porcentagens de Tregs ao final do protocolo quimioterápico, nos grupos tratados com o protocolo CHOP tradicional (GT1) (8,648±1,736) e no grupo tratado com CHOP associado a um firocoxib (GT2) (5,903±1,126) (p<0,0001). E que entre os grupos, GT1 (20,66±2,487) e GT2 (12,79±0,7673), apenas no momento do diagnóstico (M0), foi estatisticamente diferente (p<0,0114). Conclui-se que cães com linfoma multicêntrico possui um aumento das Tregs, e durante o protocolo quimioterápico, associado ou não a um firocoxib, essas células diminuem significativamente / Abstract: In Veterinary Medicine lymphoma is a neoplasm characterized by clonal proliferation of malignant lymphocytes, one of the most common in dogs. There is evidence that Treg inhibit the effector function against tumors, resulting in T cell dysfunction in humans and dogs with cancer. Increased expression of cyclooxygenase-2 enzyme (COX-2) by tumor cells and local inflammatory cells, stimulates the development of Treg. Thus, treatment with COX-2 inhibitors such as nonsteroidal anti-inflammatory is a further strategy for the removal of Tregs. In this context, this work aimed to evaluate quantitatively, through flow cytometry, Tregs in dogs with lymphoma undergoing chemotherapy protocol CHOP, with or without a COX-2 inhibitor (Firocoxib). 12 dogs were used controls (healthy), 12 dogs with lymphoma treated with CHOP protocol and 12 dogs with lymphoma treated with CHOP + Firocoxib. Tregs form assessed by flow cytometry at diagnosis after induction chemotherapy (Week 5) and the protocol termination (20 weeks). The results showed that dogs with lymphoma had higher percentages of Tregs (17.08 ± 1.62) compared with the control group (5.67 ± 1.62) (p <0.0001). Moreover, in the lymphoma group had a decrease of Treg percentages at the end of chemotherapy protocol, the groups treated with the traditional CHOP protocol (GT1) (8.648 ± 1.736) and in the CHOP arm associated with a firocoxib (GT2) (5,903 ± 1.126) (p <0.0001). And that between the groups, GT1 (20.66 ± 2.487), and GT2 (12.79 ± 0.7673) only at the time of diagnosis (M0), was statistically different (p <0.0114). It was concluded that dogs with multicentric lymphoma has increased Tregs, and during the chemotherapy protocol, with or without a firocoxib, these cells decrease significantly / Doutor

Orientador: Aureo Evangelista Santana / Banca: Maria Angélica Dias / Banca: Maria Luísa Buffo de Cápua / Banca: Marcia Ferreira da Rosa Sobreira / Banca: Flávia Eiras dela Coleta / Resumo: Considerando a relevância do linfoma canino na rotina veterinária e o curto período de sobrevida alcançado com os protocolos quimioterápicos empregados, novas alternativas de tratamento estão sendo estudadas. Nas últimas décadas, diversos estudos foram realizados correlacionando o desenvolvimento e progressão de alguns tipos de neoplasias com a superprodução de prostaglandinas nas células tumorais e inflamatórias locais, em consequência à maior produção de COX-2, que leva à proliferação celular, à supressão da apoptose, à indução da angiogênese e da metástase, ações estas que contam para sua função oncogênica. Uma das estratégias para a redução das concentrações de PGE2 é a utilização de inibidores de COX-2 no tratamento antineoplásico. No presente estudo foram avaliados 20 cães com diagnóstico de linfoma multicêntrico, divididos em dois grupos. Os animais do grupo 1 foram tratados com o protocolo quimioterápico de Madson-Wisconsin convencional, e os do grupo 2, com o protocolo modificado pela substituição da prednisona por um inibidor seletivo de COX-2. Antes da primeira (T1) e da quinta (T2) sessão de quimioterapia, foram realizados hemograma e dosagem de PGE2 plasmática por ELISA. Observou-se um maior número de animais fêmeas, das raças Rottweiler e sem raça definida, de meia idade, que apresentaram com maior freqüência, o linfoma multicêntrico em estádio IVa, de origem celular B, e difuso de grandes células. No leucograma, notou-se em alguns animais, no momento do diagnóstico, a presença de leucocitose por neutrofilia ou por linfocitose, e após o primeiro ciclo de quimioterapia, sete casos de linfopenia. Os cães com remissão dos sinais clínicos após o primeiro ciclo de quimioterapia, apresentam menores concentrações de PGE2 plasmática quando comparados com aqueles sem remissão. A associação do tratamento quimioterápico com um inibidor de COX-2 foi capaz de reduzir ... / Abstract: Considering the relevance of canine lymphoma in veterinary medicine and the short survival achieved with chemotherapy protocols employed, new treatment options are being studied. In the last decades, various studies have been conducted to correlate the development and progression of certain types of cancer with the overproduction of prostaglandins in tumor sites and inflammatory cells, due to increased production of COX-2, leading to cell proliferation, the suppression of apoptosis , the induction of angiogenesis and metastasis, these actions that count toward their oncogenic function. One strategy for reducing the levels of PGE2 is the use of COX-2 in anticancer treatment. In this study 20 dogs with diagnosis of multicentric lymphoma, divided in two groups were evaluated. Animals in group 1 were treated with the standard Madison-Wisconsin chemotherapy protocol, and group 2, with this protocol modified by the replacement of prednisone for a selective inhibitor of COX-2. Before the first (T1) and fifth (T2) chemo, blood samples and measurement of plasma PGE2 by ELISA were performed. We observed a higher number of female animals, Rottweiler breeds and mixed breed, middle age animals, who presented with greater frequency, multicentric lymphoma in stage IVa, B cell origin, and diffuse large cell. Leukocytosis with neutrophilia or lymphocytosis was observed for some animals at the moment of diagnosis, and after the first cycle of chemotherapy, seven cases of lymphopenia. Dogs with clinical signs of remission after the first cycle of chemotherapy show lower plasma PGE2 when compared with those without remission. The association of chemotherapy treatment with a COX-2 was able to reduce concentrations of PGE2 in 50% of patients, while only 10% of those in group 1 decreased. However, it was not possible to confirme the role of PGE2 as a marker of prognosis and survival time for dogs with lymphoma / Doutor

Orientador: Carlos Roberto Daleck / Co-oorientador: Renée Laufer Amorin / Banca: Ney Luiz Pippi / Banca: Mirela Tinucci Costa / Banca: Gilson Hélio Toniollo / Banca: Duvaldo Eurides / Resumo: Tendo em vista a relação da ciclooxigenase-2 (COX-2) com a progressão do câncer, este trabalho teve como objetivo investigar a expressão da atividade desta enzima com a imunorreativadade do Ki-67 , P53 e Caspase-3 no diagnóstico e prognóstico de neoplasias mamárias em cadelas. Para a realização deste estudo foram selecionadas 60 amostras de tumores mamários de cadelas. As amostras foram divididas em seis grupos, com 10 tumores em cada grupo, de acordo com a classificação histopatológica. Nos grupos adenoma, carcinoma com prognóstico bom e carcinoma com prognóstico ruim a seleção dos casos se deu pela classificação histológica e evolução clínica do tumor. Os outros 30 tumores foram representados por 10 amostras de carcinoma primário metastático, 10 de metástase pulmonar e 10 de carcinoma inflamatório. A avaliação da expressão da COX-2 (Dako, CX-294), Ki67 (Dako, M7240), P53 (Novocastra, CM1), Caspase-3 (Neomarkers, Asp175) foi conduzida por imunoistoquímica, utilizando-se a técnica de estreptoavidina-biotinaperoxidase. Em relação aos resultados houve correlação da expressão da COX-2 com o índice de proliferação celular Ki-67 no grupo dos adenomas, metástases pulmonares e carcinomas inflamatórios (P<O,05). Em todos os grupos estudados a COX-2 apresentou correlação com a proteína P53 (P<0,01). Observou-se correlação da expressão da ciclooxigenase-2 com a Caspase-3 no grupo dos carcinomas primários metastáticos e nas metástases pulmonares (P<0,05). A expressão da ciclooxigenase-2 variou de acordo com a agressividade das neoplasias mamárias nos casos de adenoma, carcinoma metastático e carcinoma não metastáticos (P<O,05). A sobrevida das pacientes com neoplasias mamária no pós-operatório está ligada à expressão da COX-2, no grupo dos adenomas, carcinoma com prognóstico bom e carcinoma com prognóstico ruim (P<O,01). / Abstract: Considering the relationship between cyclooxygenase-2 (COX-2) with the cancer evolution, this study aimed to detect the expression of this enzyme with the immunoreactive of Ki-67, P53 and Caspase-3 in the diagnosis and prognostic of mammary neoplasms in bitches. Sixty mammary tumors samples were selected for the accomplishment of this study. The samples were divided into six groups, contenting 10 tumors in each group, in accordance to histopathology classification. In adenoma, good prognosis carcinoma and poor prognosis carcinoma groups the criteria for selection was made by histology classification and clinical tumor evolution. The others 30 tumors samples were represented by 10 samples of metastatic primary carcinoma, 10 of pulmonary metastases, and 10 of inflammatory carcinoma. The evaluation of the COX-2 (Dako, CX-294), Ki-67 (Dako, M7240), P53 (Novocastra, CM1), Caspase-3 (Neomarkers, Asp175) expression was achieved by immunohistochemistry, by means of streptavidine-biotine-peroxidase. About the results a positive correlation between COX-2 and the cellular proliferation index Ki-67 was found in the adenomas, pulmonary metastases, and inflammatory carcinomas groups (P<0,05). In ali studied groups the COX-2 presented correlation with P53 protein (P<O,01). There was correlation of cyclooxygenase-2 with caspase-3 in the primary metastatic carcinoma and in the pulmonary metastases group (P<0,05). The cyclooxygenase-2 expression varied in accordance with aggressiveness of mammary neoplasms in cases such adenoma, metastatic carcinoma, and non metastatic carcinoma (P<0,05). The post operative survival rate of patients with mammary neoplasms was linked to COX-2 expression in the adenomas, good prognosis carcinoma and poor prognosis carcinoma groups (P<O,01). / Doutor