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Proteoglicanos da cartilagem epifisaria de rãs : composição, estrutura e variações regionais

Covizi, Daniela Zanin 02 November 2000 (has links)
Orientador: Hernandes Faustino de Carvalho / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-07-26T17:38:14Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Covizi_DanielaZanin_D.pdf: 13938387 bytes, checksum: a9c8d5412d13c4061558e5289ee2d843 (MD5) Previous issue date: 2000 / Resumo: A cartilagem epifisária de Rana catesbeiana foi estudada com o intuito de caracterizar aspectos relacionados aos proteoglicanos, em especial ao agrecam. A cartilagem epifisária foi dividida em três regiões, denominadas articular, lateral e de crescimento, que foram analisadas em IÚvel bioquírnico e estrutural. A partir de experimentos bioquímicos e imunoquímicos, utilizando diferentes anticorpos contra os domínios G 1, G 1/G2 e G3 do core protéico, contra os sítios de ligação das cadeias de condroitim sulfato, da análise do padrão de sulfatação das cadeias de condroitim e queratam sulfato e da associação com o ácido hialurônico e proteína link, o grande proteoglicano de rã foi caracterizado e classificado como agrecam, dada a sua semelhança com o agrecam de mamíferos e de aves. O tamanho do core protéico não variou entre as três regiões (-300kDa). A presença dos três domínios globulares foi também confirmada através da ultraestrutura da molécula de agrecam após rotary shadowing. Quando analisadas por métodos cromatográficos, as cadeias de condroitim sulfato apresentaram o mesmo tamanho hidrodinâmico (Kav=O.42) nas três cartilagens. Entretanto, na região de crescimento foi detectada uma sub-população de cadeias de condroitim sulfato maiores (Kav=O,35). Estes resultados foram confirmados através da análise dos dissacarídeos saturados e insaturados, que constituem as cadeias de condroitim sulfato, obtidas após digestão das cadeias com enzimas específicas seguidas por análise cromatográfica, que mostrou que as cadeias de condroitim sulfato na região de crescimento, possuem em média 56 dissacarídeos comparados com os 42 estimados para as outras duas regiões. O dissacarídeo Wi4S foi predominante em todas as cartilagens e a razão entre L / Abstract: A large proteoglycan was isolated fTom the articular, lateral and growth regions of the femoral distal cartilage of the bullfTog, Rana catesbeiana, and identified as aggrecan by a series of biochemical and immunochemical assays. The isolated monomer showed a polydisperse behavior on Sepharose CL2B, with a peak at Kav= 0,17. This proteoglycan was shown to contain the three globular domains G1 and G2 (spaced 21nm ftom each other) and G3, and to aggregate with hyaluronan and bovine link protein. The core protein was prepared after chondroitinase and keratanase digestion and visualized by Westem blotting with the aggrecan domain specific antibodies anti-ATEGQV (G1), anti-CDAGWL (Gl/G2) and Lec7 (reactive with the lectin-like domain ofG3). All three antibodies reacted with a predominant species that migrated with an apparent molecular size of 300kDa. The bullfTog aggrecan was substituted with both chondroitin and keratan sulfate chains. The condroitim sulfate chains showed a Kav of 0.42 after chromatography of all cartilages, but in the growth cartilage a population showed a Kav of 0.35. Aggrecan fTom articular and lateral cartilages contained concroitim sulfate chains that were composed of an average of 42 disaccharide units and 56 dissaccharide units in the growth cartilage. The ratio between the unsaturate disaccharides (Wi6S/Wi4S) was 0.4 for articular and lateral cartilage and 0.7 for the growth cartilage and contained a higher proportion ofunsulfated and 6-sulfated disaccharides. The condroitin sulfate chains contained mostly either GalNAc4S or GalNAc4,6S at non-reducing terminal in all three regions. Keratan sulfate was also detected on both the intact aggrecan and the isolated KS-rich region. For all three cartilage regions, the disaccharides of keratan sulfate were -80% Gal-GlcNAc6S and -20% Gal6S GlcNAc6S. These data demonstrate the evolutionary conservation of the aggrecan structure in a lower vertebrate andsuggest a high dependence of its functions on the domain organization / Doutorado / Bioquimica / Doutor em Biologia Funcional e Molecular
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Extração e fracionamento dos proteoglicanos e proteinas não colagenicas de cartilagem xifoide de frango : influencia do solvente utilizado

Arcanjo, Katia Denise de Souza 25 November 1991 (has links)
Orientadores : Edson Rosa Pimentel, Laurecir Gomes / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-07-14T01:21:22Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Arcanjo_KatiaDenisedeSouza_M.pdf: 4495900 bytes, checksum: 7f4ab1df5341cbfe3f8e3717aa51fb69 (MD5) Previous issue date: 1991 / Resumo: Este trabalho teve como objetivo a identificaçao de PGs e proteinas não colagênicas de cartilagem xifóide de frango. Extrações com MgCl2 e GuCl em diferentes concentrações e tempos, eletroforese em gel de poloacrilamida e agarose, cromatografia de troca iônica e digestões enzimáticas, constituiram a metodologia utilizada. As extrações realizadas com MgC12 e GuCl em concentrações que variaram de 1M a 5M apontaram um rendimento maxlmo de ácido urônico quando empregado o MgC12 3M, indicando que estas condiç:ões são mais propícias para a remoção dos proteoglicanos. o melhor tempo de extração observado tanto para GuCl 3M quanto para MgC12 3M foi o de 48 horas. As análises dos extratos feitas após eletroforese em gel de poliacrilamida, indicaram ser a extração pelo MgCl2 um procedimento alternativo ao uso de GuC I , na extração de proteoglicanos e proteínas não colagênicas da matriz extracelular. o emprego de cromatografia de troca iônica indicou que embora eficiente na extração de PGs e proteínas não colagênicas, o MgC12 exibe um menor efeito dissociativo quando comparado ao GuCl. Uma maior remoção de PGs observada após análise dos extratos obtidos por MgC12 em gel de agarose, reforç:a os resultados obtidos nas dosagens de ácido urônÍco. Após digestão com papalna, todos os extratos apresentaram mobilidade similar ao CS padrão. O emprego de condroitinase ABC e posterior análise em gel de agarose, indicou apresença de CS como único glicos.ami"'à_ 1 icano obtido em cartilagem xifóide de frango com dois meses de idade / Abstract: This research was unded ak en to identific proteogl cans <PGs) and ncollagenous proteins of chicken xiphoid cartilage as well as the behaviour of these components in different extraction procedures. Extractions with MgCI2 and GuCl in different concentrations and periods of time, electrophoresis 1n pol_acrilam_de and agarose gels, ion exchange chromatograph_ and en2_matic dige_tions were the methods employed to evaluate of phisico-chemical phenomena in matrix compounds. The use of extractions with MgC12 and GuCl at concentrations of 1-5M showed a ver_ high _ieId of uron1.c acid when 3M MgCI2 was used. MgCI2 was found to be the most effective extractant at this ion strength, suggesting that the chemical nature of the solvent, pla_s an important role in the extractabilit_ of the PGs an noncollagenous proteins of chicken xiphoid cartilage. Extraction of cartilage PGs whith MgC12 and GuCI exhibited an optimal efficienc_ when performed for 48 hours. Anal_ses of the extracts b_ SDS-pol_acr_lamide geI electrophoresis pointed out that the extraction with MgC12 is an aIternative assa_ to remove noncollagenous proteins of extracellular matrix. Ion-exchange chromatograph_ suggests that MgC12 can be used as an efficient solvent to remove PGs and noncollagenous roteins. However, its application demonstrates a poor dissoclation capaclt_ when compared to GuCl. Agarose gel electrophoresis anal_sis showed ahigher extraction of PGs with MgCI2' which reinforces results obtained with the uronic acid reaction. AlI extracts showed similar chondroitin-sulfate (CS) mobiI it a ft er papaln proteol_sis. Anal_sis of the GAGs released from Chase ABC b_ agarose pol_acr_lamide gel electrophoresis, indicated CS as the onl_ pol_dispersed component extracted ln the chicken xiphoid cartiIage with two months old / Mestrado / Biologia Celular / Mestre em Ciências Biológicas
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Alterações provocadas por esforços repetitivos na cartilagem articular do joelho: estudo realizado em ratos / not available

Camargo Filho, José Carlos Silva 17 June 1998 (has links)
Esta pesquisa teve como objetivo estudar as alterações da cartilagem articular dos côndilos femural de ratos, provocadas pela variação da amplitude de movimento e da frequência, utilizando-se uma máquina de movimentação de flexo-extensão contínua passiva. Foram utilizados 24 ratos machos Wistar, divididos em quatro grupos: G1 (exercitados com 80 ciclos/minuto em grande amplitude), G2 (exercitados com 80 ciclos/minuto em pequena amplitude), G3 (exercitados com 40 ciclos/minuto em grande amplitude) e G4 (exercitados com 40 ciclos/minuto em pequena amplitude). Os animais pertencentes aos quatro grupos realizaram exercícios de flexo-extensão contínuas, diariamente, por 1 hora, através de um equipamento que atende aos princípios do mecanismo biela-manivela, o qual produz movimentos contínuos de flexo-extensão com grande e pequena amplitude, em frequência de 80 e 40 ciclos por minuto. Após 15 dias os animais foram sacrificados e de cada um a cartilagem articular do côndilo lateral do joelho direito foi retirada, incluída, cortada, corada com hematoxilina-eosina e analisada em fotomicroscópio. Pela análise histológica observou-se aumento do número de células na área da cartilagem articular definida para o estudo, nos quatro grupos exercitados, quando comparados ao respectivo controle. Os animais exercitados à velocidade de 80 ciclos por minuto e grande amplitude apresentaram um aumento no número de células quando comparados aos animais exercitados à velocidade de 40 ciclos por minuto em grande e pequena amplitude. O mesmo ocorreu com os animais exercitados com velocidade de 80 ciclos por minuto e pequena amplitude, comparados aos animais exercitados com velocidade de 40 ciclos por minuto e pequena amplitude. Quanto à análise das medidas de espessura foi encontrado aumento em todos os grupos em relação ao respectivo controle. Os animais exercitados à velocidade de 80 ciclos por minuto e grande amplitude apresentaram um aumento da medida de espessura quando comparados aos animais exercitados à velocidade de 40 ciclos por minuto e pequena amplitude, o mesmo ocorrendo com os animais exercitados com velocidade de 40 ciclos por minuto e pequena amplitude. Os dados demonstram que os exercícios de flexo-extensão contínua passiva estimulam aumento do número de células e aumento da espessura, não podendo ser atribuída como processo de lesão e, sim, como aumento de atividade metabólica e fator de proteção e adaptação. / This research had as objective to study the alterations of the articular cartilage of the knee of mices provoked by the variation of the movement width and of the frequency, using a machine of movement of passive continuous flexo-extension. 24 Wistar male mices were used, divided in four groups: G1 (exercised with 80 cycles/minute in great width), G2 (exercised with 80 cycles/minute in small width), G3 (exercised with 40 cycles/minute in great width) and G4 (exercised with 40 cycles/minute in small width). The animals belonging to the four groups accomplished flexo-extension exercises daily for 1 hour, through a equipment that assists to the principles of the \"rod-cranck\" mechanism, which produces continuous movements of flexo-extension with great width and small width in frequency of 80 and 40 cycles per minute. After 15 days the animals were sacrificed, the articular cartilage was collected, included, cut, colored with hematoxiline-eosine and analyzed in a photomicroscope. For the histologic analysis an increase of the number of cells was observed in every area of the articular cartilage in the 4 exercised groups when compared to the respective control, that the exercised animals at the speed of 80 cycles/minute and great width presented an increase in the number of cells when compared the exercised animals at the speed of 40 cycles/minute in great and small width, the same thing happening with the animals exercised with speed of 80 cycies/minute and small width, when compared to the exercised animals of 40 cycles/minute and small width. As the analysis of the measures of thickness it was found an increase in all the groups in relation to the respective control. The exercised animals at the speed of 80 cycles/minute and great width presented an increase of the measure of thickness when compared the exercised animals the speed of 40 cycles/minute and small width, the same happening with the animals exercised with speed of 40 cycles/minute and small width. The data demonstrate that the exercises of passive continuous flexo-extension stimulate an increase of the number of cells and increase of the thickness, not allowing us to attribute it as a Iesion process, but as an increase of metabolic activity as a protection and adaptation factor.
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Alterações provocadas por esforços repetitivos na cartilagem articular do joelho: estudo realizado em ratos / not available

José Carlos Silva Camargo Filho 17 June 1998 (has links)
Esta pesquisa teve como objetivo estudar as alterações da cartilagem articular dos côndilos femural de ratos, provocadas pela variação da amplitude de movimento e da frequência, utilizando-se uma máquina de movimentação de flexo-extensão contínua passiva. Foram utilizados 24 ratos machos Wistar, divididos em quatro grupos: G1 (exercitados com 80 ciclos/minuto em grande amplitude), G2 (exercitados com 80 ciclos/minuto em pequena amplitude), G3 (exercitados com 40 ciclos/minuto em grande amplitude) e G4 (exercitados com 40 ciclos/minuto em pequena amplitude). Os animais pertencentes aos quatro grupos realizaram exercícios de flexo-extensão contínuas, diariamente, por 1 hora, através de um equipamento que atende aos princípios do mecanismo biela-manivela, o qual produz movimentos contínuos de flexo-extensão com grande e pequena amplitude, em frequência de 80 e 40 ciclos por minuto. Após 15 dias os animais foram sacrificados e de cada um a cartilagem articular do côndilo lateral do joelho direito foi retirada, incluída, cortada, corada com hematoxilina-eosina e analisada em fotomicroscópio. Pela análise histológica observou-se aumento do número de células na área da cartilagem articular definida para o estudo, nos quatro grupos exercitados, quando comparados ao respectivo controle. Os animais exercitados à velocidade de 80 ciclos por minuto e grande amplitude apresentaram um aumento no número de células quando comparados aos animais exercitados à velocidade de 40 ciclos por minuto em grande e pequena amplitude. O mesmo ocorreu com os animais exercitados com velocidade de 80 ciclos por minuto e pequena amplitude, comparados aos animais exercitados com velocidade de 40 ciclos por minuto e pequena amplitude. Quanto à análise das medidas de espessura foi encontrado aumento em todos os grupos em relação ao respectivo controle. Os animais exercitados à velocidade de 80 ciclos por minuto e grande amplitude apresentaram um aumento da medida de espessura quando comparados aos animais exercitados à velocidade de 40 ciclos por minuto e pequena amplitude, o mesmo ocorrendo com os animais exercitados com velocidade de 40 ciclos por minuto e pequena amplitude. Os dados demonstram que os exercícios de flexo-extensão contínua passiva estimulam aumento do número de células e aumento da espessura, não podendo ser atribuída como processo de lesão e, sim, como aumento de atividade metabólica e fator de proteção e adaptação. / This research had as objective to study the alterations of the articular cartilage of the knee of mices provoked by the variation of the movement width and of the frequency, using a machine of movement of passive continuous flexo-extension. 24 Wistar male mices were used, divided in four groups: G1 (exercised with 80 cycles/minute in great width), G2 (exercised with 80 cycles/minute in small width), G3 (exercised with 40 cycles/minute in great width) and G4 (exercised with 40 cycles/minute in small width). The animals belonging to the four groups accomplished flexo-extension exercises daily for 1 hour, through a equipment that assists to the principles of the \"rod-cranck\" mechanism, which produces continuous movements of flexo-extension with great width and small width in frequency of 80 and 40 cycles per minute. After 15 days the animals were sacrificed, the articular cartilage was collected, included, cut, colored with hematoxiline-eosine and analyzed in a photomicroscope. For the histologic analysis an increase of the number of cells was observed in every area of the articular cartilage in the 4 exercised groups when compared to the respective control, that the exercised animals at the speed of 80 cycles/minute and great width presented an increase in the number of cells when compared the exercised animals at the speed of 40 cycles/minute in great and small width, the same thing happening with the animals exercised with speed of 80 cycies/minute and small width, when compared to the exercised animals of 40 cycles/minute and small width. As the analysis of the measures of thickness it was found an increase in all the groups in relation to the respective control. The exercised animals at the speed of 80 cycles/minute and great width presented an increase of the measure of thickness when compared the exercised animals the speed of 40 cycles/minute and small width, the same happening with the animals exercised with speed of 40 cycles/minute and small width. The data demonstrate that the exercises of passive continuous flexo-extension stimulate an increase of the number of cells and increase of the thickness, not allowing us to attribute it as a Iesion process, but as an increase of metabolic activity as a protection and adaptation factor.
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Efeitos da galactomanana de Cyamopsis tetragonolobus na osteoartrite induzida por transecção do ligamento cruzado anterior em ratos / Effects of the galactomannan of Cyamopsis tetragonolobus in the osteoarthritis induced by anterior cruciate ligament transection in rats

Castro, Rondinelle Ribeiro January 2008 (has links)
CASTRO, Rondinelle Ribeiro. Efeitos da galactomanana de Cyamopsis tetragonolobus na osteoartrite induzida por transecção do ligamento cruzado anterior em ratos. 2008. 115 f. Tese (Doutorado em Farmacologia) - Universidade Federal do Ceará. Faculdade de Medicina, Fortaleza, 2008. / Submitted by denise santos (denise.santos@ufc.br) on 2012-10-17T13:25:25Z No. of bitstreams: 1 2008_tese_rrcastro.pdf: 1140635 bytes, checksum: a6f5a88fce53ef8b178c61b2081f2695 (MD5) / Approved for entry into archive by Erika Fernandes(erikaleitefernandes@gmail.com) on 2012-10-18T12:04:06Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2008_tese_rrcastro.pdf: 1140635 bytes, checksum: a6f5a88fce53ef8b178c61b2081f2695 (MD5) / Made available in DSpace on 2012-10-18T12:04:07Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2008_tese_rrcastro.pdf: 1140635 bytes, checksum: a6f5a88fce53ef8b178c61b2081f2695 (MD5) Previous issue date: 2008 / Using the osteoarthritis (OA) model induced by anterior cruciate ligament transection (ACLT) in rats, we have demonstred that guar gum (GG), a galactomannan extracted from Cyamopsis tetragonolobus seeds, displays analgesic activity similar to Hylan G-F 20, a hyaluronate derivate used as local therapy in human OA. In the same model, we objective to develop a parametric biochemical method for joint lesion evaluation, and to investigate the mechanism for analgesia and the chondroprotective effect of GG. Wistar rats subjected to ACLT (OA group) were sacrificed at different endpoints. Joint pain was daily measured using the test for articular incapacitation in rats, until 70 days. Joint lavage was used for NO determination. Articular cartilage was evaluated by the chondroitin-sulfate (CS) content and determination of its molar weight. Histophatologic analysis using the OARSI score system was also performed. Sham-operated groups were used for comparison. In the studies of joint pain, OA groups received indomethacin (2mg/kg/d s.c.), meloxicam (6mg/kg/d i.p.), tadalafil (0.5mg/kg/d p.o.) between days 4 and 7.Morphine (200µg i.art.) was given at day 4 only, 30 min before the pain evaluation. Naloxone (500µg i. art.) was given 15 min prior morphine. Sodium alendronate (30 or 240µg i. art.) was given prophilactically, starting 3 days prior ACLT, and repeated at each 3 days, until day 6. Original or chemically modified GG (100μg/50μl i. art.) was given as a single dose at day 4. Galactose or mannose was co-administred (500μg/50μl i. art.) with original GG. In the study of chondroprotection, GG (100μg/50μl i. art.) was given once weekly, starting at day 14, during 8 weeks. Non-treated animals (NT) received vehicle (saline). OA animals presented maximal joint pain and NO release in the first week. Both CS content and molar weight were higher at day 70 (p<0.05). At this endpoint, important histopathologic changes were found in the OA group. Indomethacin, meloxican, tadalafil and morphine significantly reduced joint pain (p<0.05). Naloxone reverted the effect of morphine. Alendronate prevented the joint pain development. Modified GG structures were unable to promote analgesia. The analgesic effect of unmodified GG could be reverted by galactose (p<0.01), but not by mannose. GG treatment prevented the CS changes, and it reduced the histopatologic lesion (p<0.05). CS changes seem to reflect the tecidual damage, and may be used as an index for the joint lesion. The analgesic efficacy of GG is due to galactose residues. In addition, the chondroprotective effect by GG was demonstrated. This is an important contribution to propose GG as an antiarthrosic drug. / No modelo de osteoartrite (OA) induzida por transecção do ligamento cruzado anterior em ratos (TLCA), havíamos demonstrado que a goma guar (GG), uma galactomanana extraída das sementes de Cyamopsis tetragonolobus goma guar, apresenta atividade analgésica em magnitude semelhante à exibida pelo Hilano G-F 20, um derivado do ácido hialurônico utilizado em terapia intra-articular da OA humana. Utilizando o referido modelo, objetivamos desenvolver um métido bioquímico paramétrico para avaliação da lesão articular no referido modelo, e investigar o mecanismo para a analgesia e a eficácia condroprotetora da GG. Ratos Wistar submetidos à TLCA (grupo OA) foram sacrificados em diferentes períodos. A dor articular foi avaliada diariamente pelo teste de incapacitação para ratos, por até 70 dias. O lavado articular foi usado para determinação da liberação de NO. A cartilagem foi avaliada pela determinação do teor de condrotin-sulfato (CS) na matriz, além da avaliação da massa molar do mesmo. A lesão articular foi avaliada também por análise histopatológica, segundo os escores OARSI. Grupos falso-operados (sham) foram utilizados para comparação. Para estudos sobre a dor articular, animais do grupo OA receberam terapeuticamente indometacina (2mg/kg/d s.c.), meloxicam (6mg/kg/d i.p.), ou tadalafila (0,5mg/kg/d p.o.), do quarto ao sétimo dias. Morfina (200µg i. art.) foi administrada apenas no quarto dia, 30 min antes da avaliação da dor. Naloxona (500µg i. art.) foi administrada 15 min antes de morfina. Alendronato sódico (30 ou 240µg/kg s.c.) foi administrado profilaticamente três dias antes da indução, e repetido a cada três dias, até o sexto dia. GG original ou quimicamente modificada foi administrada em dose única no quarto dia (100μg/50μl i. art.). Galactose ou manose (500μg/50μl i. art.) foram co-administrados à GG original. Para avaliação sobre a lesão da cartilagem, GG (100μg/50μl i. art) foi administrada como dose única semanal, do 14º ao 63º dias. Animais não tratados (NT) receberam veículo (salina) nas respectivas vias. O grupo OA apresentou dor articular máxima durante a primeira semana, período no qual houve a maior liberação de NO. 70 dias após TLCA, o teor e a massa molar do CS da matriz da cartilagem mostraram-se ambos aumentados (p<0,05). Importantes alterações histopatológicas foram encontradas no grupo OA nesse período. Indometacina, meloxicam, tadalafila e morfina reduziram significantemente a dor (p<0,05), sendo o efeito desta última revertido por naloxona. Alendronato sódico preveniu a ocorrência da dor. As estruturas modificadas de GG não exibiram eficácia analgésica. Galactose, mas não manose, reverteu significativamente o efeito analgésico da GG não-modificada (p<0,01). GG preveniu as alterações do CS da cartilagem, e reduziu significativamente a lesão histopatológica (p<0,05). As alterações sofridas pelo CS parecem refletir o dano tecidual, validando tal metodologia para avaliação da lesão estrutural. A eficácia analgésica da GG decorre de um efeito farmacológico dependente de galactose. Mais ainda, demonstramos a eficácia condroprotetora in vivo para a GG, indispendável para sua validação como droga anti-artrósica.
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Avaliação qualitativa e quantitativa de glicosaminoglicanos em pacientes com osteoartrite / Qualitative and quantitative evaluation of glycosaminoglycans in patients with osteoarthritis

Nunes, Rodolfo de Melo January 2013 (has links)
NUNES, Rodolfo de Melo. Avaliação qualitativa e quantitativa de glicosaminoglicanos em pacientes com osteoartrite. 2013. 52 f. Dissertação (Mestrado em Ciências Médicas) - Faculdade de Medicina, Universidade Federal do Ceará, Fortaleza, 2013. / Submitted by denise santos (denise.santos@ufc.br) on 2015-05-11T16:21:39Z No. of bitstreams: 1 2013_dis_rmnunes.pdf: 710852 bytes, checksum: a84d4bba0dde9f9afb47a0f5b570f489 (MD5) / Approved for entry into archive by denise santos(denise.santos@ufc.br) on 2015-05-11T16:23:56Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2013_dis_rmnunes.pdf: 710852 bytes, checksum: a84d4bba0dde9f9afb47a0f5b570f489 (MD5) / Made available in DSpace on 2015-05-11T16:23:56Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2013_dis_rmnunes.pdf: 710852 bytes, checksum: a84d4bba0dde9f9afb47a0f5b570f489 (MD5) Previous issue date: 2013 / Articular cartilage is na avascular tissue composed of chondrocytes scattered in an abundant extracellular matrix (ECM) that lines the joint surfaces and protects the bone ends. In addition to the intersticial fluid, the ECM is composed of proteoglycans, glycosaminoglycans (GAGs) and glycoproteins. Joint diseases such as osteoarthritis (OA), promote the degradation of articular cartilage and subchondral bone sclerosis, leading to chronic pain and functional impairment of the joints. In this context, the quantification of GAGs is used as a means to study the physiological or pathological changes of articular cartilage. The objective this study was to evaluate the biochemical changes of the articular cartilage of human and rat normal or affected by OA. The human cartilage were obtained from patients submitted to arthroplasty for OA or fracture. Male Wistar rats (150-180g) were submitted to the anterior cruciate ligament transection (ACLT). Sham group was submitted to only to surgery without transection. Initialy, the cartilage samples were submitted to the action of the enzymatic complex PROLAV 750R, getting to the end of the process, the GAGs. These were identified and quantified in agarose gel (0.6%) and molar mass was assessed in polyacrylamide gel (6% w/v). The results were expressed as mean ± standard error of mean (S.E.M.) were submitted to ANOVA and Tukey’s test (P<0.05) or “t” test of Student (P<0.05).In rats, the effective proteolysis was significantly decreased after 70 days of ACLT (P<0.05). In the quantification of GAGs, there was a significant increase in GAG content after 70 days of ACLT. In humans, the percentage of mass degraded by PROLAV was altered by presence of OA. The OA patients under 80 years of age showed a significant increase in the amount of GAGs compared to the control group. In the electrophoretic mobility, GAGs of patients with OA showed abnormalities of the molar mass. These findings show that both cartilage from patients affected by OA as experimental animals subjected to OA have lower effective proteolysis, increasing the amount of CS and alteration of the molar mass. / A cartilagem articular é um tecido avascular constituído por condrócitos dispersos em uma matriz extracelular abundante (MEC) que reveste as superfícies articulares e protege as extremidades ósseas. Além do fluido intersticial, a MEC é composta por proteoglicanos, glicosaminoglicanos (GAGs) e glicoproteínas. Doenças articulares, como a osteoartrite (OA), promovem a degradação da cartilagem articular e esclerose do osso subcondral, levando à dor crônica e comprometimento funcional das articulações. Neste contexto, a quantificação de GAGs é utilizada para estudar o papel das alterações fisiológicas ou patológicas da cartilagem articular. Assim, o objetivo do trabalho foi avaliar as alterações bioquímicas da cartilagem articular humana e de rato com ou sem a OA. As cartilagens humanas foram obtidas de pacientes submetidos à artroplastia por OA ou por fratura. Ratos Wistar machos (150-180g) foram submetidos à osteoartrite experimental que consiste na transecção do ligamento cruzado anterior (TLCA). Grupo sham foi submetido apenas ao procedimento cirúrgico, sem transecção. Inicialmente, as amostras de cartilagem foram submetidas à ação do complex enzimático PROLAV 750R, obtendo-se ao final do processo, os GAGs. Esses foram identificados e quantificados em gel de agarose (0,6%) e a massa molar foi avaliada em gel de poliacrilamida (6% w/v). Os resultados foram expressos como média ± erro padrão da média (e.p.m.), submetidos à ANOVA e teste de Tukey (P<0,05) ou teste “t” de Student (P<0,05). Em ratos, o rendimento da degradação da cartilagem pela PROLAV 750R foi significativamente diminuída após 70 dias de TLCA (P<0,05). Quanto à quantificação de GAGs, houve um aumento significativo do conteúdo de GAGs após 70 dias de TLCA. Em humanos, o percentual de massa degradada pela PROLAV foi reduzida na presença de OA. Os pacientes com OA com idade inferior a 80 anos apresentaram aumento significativo da quantidade de GAGs, quando comparado ao grupo controle. Quanto à mobilidade eletroforética, GAGs de pacientes com OA apresentaram alteração da massa molar. Esses achados mostram que tanto a cartilagem proveniente de pacientes acometidos por OA quanto animais submetidos à OA experimental apresentam menor rendimento à degradação enzimática, aumento da quantidade de CS e alteração da massa molar.
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Tratamento de lesões osteocondrais em joelho pela aplicação do gel de plaquetas /

Danieli, Marcus Vinicius. January 2012 (has links)
Orientador: Elenice Deffune / Banca: Hamilton da Rosa Pereira / Banca: Marco Antonio Batista / Resumo: Foi realizado estudo experimental em coelhos para avaliar o efeito da aplicação do gel de plaquetas no reparo de lesões osteocondrais, comparada com o mesmo tipo de lesão não tratada. Foram utilizados 30 coelhos machos com idade mínima de três meses e peso acima de 2kg. Foi colhido sangue dos animais para preparo do gel de plaquetas e depois estes foram operados para realização de uma lesão osteocondral, com trefina, no côndilo femoral medial, de ambos os joelhos, de 3,5mm de diâmetro e 4,0mm de profundidade. A lesão do joelho esquerdo foi preenchida com o gel de plaquetas e o joelho direito foi usado como controle, sem tratamento. Após 180 dias realizou-se a eutanásia dos animais. As peças foram analisadas e seu tecido de reparo classificado macroscopicamente e depois histologicamente. Utilizou-se uma tabela de escore histológico que avalia os seguintes critérios: morfologia celular, regularidade da superfície, metacromasia, espessura condral e integração do tecido de reparo ao tecido normal. Foi observado que o grupo tratado com gel de plaquetas obteve uma melhor cicatriz na avaliação macroscópica, e na avaliação histológica o único critério que não apresentou diferença estatística foi a metacromasia, sendo que o grupo tratado com gel foi melhor em todos os outros, inclusive no escore total. Desta forma conclui-se que o grupo tratado com gel de plaquetas obteve melhor reparo macroscópica e histologicamente, com 180 dias, quando comparado com o mesmo tipo de lesão não tratada / Abstract: An experimental study was performed on rabbits to evaluate the application effects of Platelet Gel for the repair of osteochondral injuries compared to the same, yet not treated, type of injuries. Thirty male rabbits were used, with minimum age of 3 months and weight over 2kg. The animals' blood was collected to prepare the Platelet Gel; afterwards, these animals were operated in order to make an osteochondral injury with 3.5mm in diameter and 4.0mm in depth, with trephine, at the medial condyle of femur of both knees. The left knee injury was filled with the Platelet Gel and the right knee was used as control, without treatment. After 180 days, euthanasia was performed on the animals. The pieces were analyzed and the repair tissue was macroscopically and, subsequently, histologically classified. One has used a Histological Grading Scale, which evaluates the following criteria: cell morphology, surface regularity, metachromasy, chondral thickness, and repair tissue integration with the normal tissue. It was observed that the group treated with Platelet Gel obtained better repair tissue under macroscopic evaluation; and, under histologic evaluation, the only criteria which did not present statistical difference was the metachromasy, being that the group treated with gel was better at all others, including the total score. Thus, one concludes that the group treated with Platelet Gel obtained better repair, macroscopically and histologically, after 180 days, in comparison to the same non-treated type of injury / Mestre
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Tratamento de lesões osteocondrais em joelho pela aplicação do gel de plaquetas

Danieli, Marcus Vinicius [UNESP] 27 January 2012 (has links) (PDF)
Made available in DSpace on 2014-06-11T19:23:07Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2012-01-27Bitstream added on 2014-06-13T20:50:03Z : No. of bitstreams: 1 danieli_mv_me_botfm.pdf: 410656 bytes, checksum: 2c3ee8db9f55397380d6e42d6d5b5ebc (MD5) / Foi realizado estudo experimental em coelhos para avaliar o efeito da aplicação do gel de plaquetas no reparo de lesões osteocondrais, comparada com o mesmo tipo de lesão não tratada. Foram utilizados 30 coelhos machos com idade mínima de três meses e peso acima de 2kg. Foi colhido sangue dos animais para preparo do gel de plaquetas e depois estes foram operados para realização de uma lesão osteocondral, com trefina, no côndilo femoral medial, de ambos os joelhos, de 3,5mm de diâmetro e 4,0mm de profundidade. A lesão do joelho esquerdo foi preenchida com o gel de plaquetas e o joelho direito foi usado como controle, sem tratamento. Após 180 dias realizou-se a eutanásia dos animais. As peças foram analisadas e seu tecido de reparo classificado macroscopicamente e depois histologicamente. Utilizou-se uma tabela de escore histológico que avalia os seguintes critérios: morfologia celular, regularidade da superfície, metacromasia, espessura condral e integração do tecido de reparo ao tecido normal. Foi observado que o grupo tratado com gel de plaquetas obteve uma melhor cicatriz na avaliação macroscópica, e na avaliação histológica o único critério que não apresentou diferença estatística foi a metacromasia, sendo que o grupo tratado com gel foi melhor em todos os outros, inclusive no escore total. Desta forma conclui-se que o grupo tratado com gel de plaquetas obteve melhor reparo macroscópica e histologicamente, com 180 dias, quando comparado com o mesmo tipo de lesão não tratada / An experimental study was performed on rabbits to evaluate the application effects of Platelet Gel for the repair of osteochondral injuries compared to the same, yet not treated, type of injuries. Thirty male rabbits were used, with minimum age of 3 months and weight over 2kg. The animals’ blood was collected to prepare the Platelet Gel; afterwards, these animals were operated in order to make an osteochondral injury with 3.5mm in diameter and 4.0mm in depth, with trephine, at the medial condyle of femur of both knees. The left knee injury was filled with the Platelet Gel and the right knee was used as control, without treatment. After 180 days, euthanasia was performed on the animals. The pieces were analyzed and the repair tissue was macroscopically and, subsequently, histologically classified. One has used a Histological Grading Scale, which evaluates the following criteria: cell morphology, surface regularity, metachromasy, chondral thickness, and repair tissue integration with the normal tissue. It was observed that the group treated with Platelet Gel obtained better repair tissue under macroscopic evaluation; and, under histologic evaluation, the only criteria which did not present statistical difference was the metachromasy, being that the group treated with gel was better at all others, including the total score. Thus, one concludes that the group treated with Platelet Gel obtained better repair, macroscopically and histologically, after 180 days, in comparison to the same non-treated type of injury
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A influencia da força muscular em joelhos com osteoartrite : dor equilibrio e espaço da fenda articular

Mara, Cristiane Sampaio de 29 April 2005 (has links)
Orientadores: Ibsen Bellini Coimbra, Adil Muhib Samara / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciências Médicas / Made available in DSpace on 2018-08-05T05:49:09Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Mara_CristianeSampaiode_M.pdf: 5589890 bytes, checksum: 37e7a7ef90d6e59d7e9113b1e500731c (MD5) Previous issue date: 2005 / Resumo: A Osteoartrite (OA) é definida como um distúrbio da cartilagem hialina, osso subcondral e das estruturas periarticulares que são envolvidas, incluindo sinóvia, músculo e tecido neurovascular. As principais queixas apresentadas são dor articular, diminuição da função articular, fraqueza dos músculos periarticulares e fadiga. As alterações radiológicas incluem diminuição do espaço articular, presença de osteófitos e esclerose subcondral. Tem-se tomado evidente que OA é uma doença mais complexa do que se pensava outrora. Fraqueza muscular tem sido relatada como um aspecto primário, e assim o propósito deste estudo foi: (1) Medir a força muscular e relacionar com: medida do espaço articular, escore do teste Timed Up and Go e Dor, comparando o resultado com indivíduos sadios. (2) Comparar os joelhos dominantes e não dominantes quanto à força muscular e espaço articular. (3) Relacionar a medida do espaço articular com dor e equilíbrio. Quarenta e oito mulheres com OA (definido pelo grau 2 ou 3 de Kellgren e Lawrence) e treze mulheres assintomáticas participaram do estudo. O espaço articular foi medido em radiografias com a incidência de joelho semi-fletido com carga. Três leitores avaliaram o espaço articular com um calibrador digital. A força muscular isométrica foi medida com dinamômetro manual e o equilíbrio foi medido através do teste "Timed Up and Go". O aumento da idade foi associado com menor força muscular (P<O,OO56),menor espaço articular (P<O,OO58)e menor equilíbrio. O espaço articular foi maior em joelhos dominantes (P<O,O32)quando comparado com joelhos não dominantes. A força muscular mostrou ter um papel importante na manutenção do equilíbrio tanto em indivíduos com OA como naqueles do grupo comparativo. O espaço articular maior em joelhos dominantes mostrou que movimentos finos e coordenados resultariam numa maior proteção proprioceptiva para articulação. Maior dor teve uma forte influência na atividade muscular de pacientes com OA, contudo, nos grau 2 e 3 de Kellgren e Lawrence a força muscular isométrica não se diferenciou do grupo comparativo quando de corrigia para o fator da idade / Abstract: Dsteoarthritis is defined as a structural disorder of hyaline cartilage, nevertheless alI of the periarticular structure can be involved, including the synovium, muscle, and neurovascular tissue. The principal clinical features reported by the patients with osteoarthritis (DA) in knee are joint pain, decreased function, periarticular muscle weakness and fatigue. Radiographically, the features are joint space narrowing and presence of osteophyte. It is becoming c1earthat DA is much more complex than previously thought. Weakness muscle has been implicated as the primary clinical feature. The purpose of this study was (1) To measure the strength muscle and to compare with health subject. (2) To compare the dominant knee and no dominant knee, strength muscle and joint space width. (3) To compare the joint space width with pain and balance. Forty-eight patients with knee DA, (defined by Kelgreen/Lawrence [K/L] radiographic grade 2 or 3) and 13 asymptomatic women participated. JSW was measured on plain weight bearing tunnel view radiographs. Three investigators assessed JSW with a digital caliper. Isometric muscle strength of the quadriceps and balance as measured by the Timed Up & Go test were evaluated. Increasing age was associated with the loss isometric muscle strength (P<O,OO56),lesser JSW (P<O,OO58)and poorer balance. Increased pain was associated with lesser isometric muscle strength (P<O,OOOI).The JSW was greater in dominant knees (P<O,O32)as compared with non-dominant knees. The ageing is a large factor in DA. Muscle strength appears to play a significant role in maintaining balance in subjects with knee DA. The greater JSW in dominant knees may show that more precise, coordinated movements may result in the greater proprioceptive protection to that joint. Pain has a strong influence of muscular activity in DA patients ranked as 2 and 3 according to K/L, whereas isometric muscle strength, does not differ from that of healthy individuals of the same age / Mestrado / Ciencias Basicas / Mestre em Clinica Medica
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Avaliação clinicopatologica de condrossarcomas de cabeça e pescoço / Clinicopathological analysis of head and neck chondrosarcomas

Prado, Fabio Ornellas 20 February 2006 (has links)
Orientador: Marcio Ajudarte Lopes / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Odontologia de Piracicaba / Made available in DSpace on 2018-08-06T02:39:06Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Prado_FabioOrnellas_D.pdf: 1979883 bytes, checksum: 0895b272310133fed868ff45f0215c36 (MD5) Previous issue date: 2006 / Resumo: Os condrossarcomas são tumores malignos de etiologia desconhecida, em que as células tumorais formam tecido cartilaginoso. Embora a ocorrência seja rara, principalmente na região de cabeça e pescoço, é o segundo tumor ósseo primário maligno mais freqüente. O objetivo deste trabalho foi correlacionar os dados clinicopatológicos ao prognóstico dos pacientes portadores de condrossarcomas de cabeça e pescoço tratados no Departamento de Cabeça e Pescoço e Otorrinolaringologia do Hospital do Câncer A.C. Camargo. Foram selecionados 16 casos tratados no Hospital do Câncer A.C. Camargo entre 1953 e 2002. A idade média de acometimento no momento do diagnóstico foi de 36,5 anos, variando de 11 a 70 anos. Observou-se ligeira predileção pelo gênero masculino (56,2%). De acordo com a localização, 7 casos (43,8%) acometeram a maxila; 5 casos ocorreram em outros sítios (região etmoidal, fossa nasal [2 casos], fossa infra-temporal, região parietooccipital) e 4 pacientes (25,0%) desenvolveram condrossarcomas em mandíbula. A maioria dos casos foi tratada somente com cirurgia (6 casos, 40% do total). A sobrevida global, observada foi de 66,7% em 3 anos e 56,4% em 5 anos / Abstract: Chondrosarcomas are malignant tumors of unknown etiology, in which tumoral cells form cartilagenous tissue. Although rare in head and neck region, chondrosarcomas are the second primary osseous tumor in frequency. The aim of the present study was correlate clinicopathological data to prognostic of patients with head and neck chondrosarcomas treated in the Head and Neck and Otolaringology Department of the A.C. Camargo Cancer Hospital. There were 16 cases treated in the institution from 1953 to 2002. The mean age at diagnosis was 36.5 years, ranging from 11 to 70 years. A slight male preference was observed (56,2%). According to the location, 7 cases (43,8%) accomited maxilla; 5 cases occured at other sites (ethmoidal region, nasal fossa [2 cases], infratemporal fossa, parieto-occipital region) and 4 patients (25,0%) had mandibular lesions. Most of cases were treated with surgery alone (6 cases, 40%). The observed overall survival was 66,7% for 3-year and 56,4% for 5-year / Doutorado / Patologia / Doutor em Estomatopatologia

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