Made available in DSpace on 2014-06-11T19:29:09Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2010-03-05Bitstream added on 2014-06-13T20:38:27Z : No. of bitstreams: 1 passareli_f_me_araiq.pdf: 8997721 bytes, checksum: a69e7054a6bba5e85800139250ac1c79 (MD5) / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / Tendo em vista o pequeno acervo de padrões de referência disponíveis para uso no controle de qualidade de fitoterápicos preparados a partir de espécies nativas brasileiras, este trabalho tem como objetivos preparar e caracterizar padrões de alta pureza de casearinas a partir de Casearia sylvestris, uma planta nativa da flora brasileira, que há muito tempo vem sendo usada pela população. A estratégia utilizada para o isolamento das casearinas consistiu no fracionamento do extrato etanólico das folhas por extração em fase sólida utilizando sílica e carvão ativo, cromatografia em coluna em fase normal, além de desenvolvimento de método em CLAE preparativo em fase reversa no modo isocrático e reciclante. Para as análises por CLAE preparativo no modo isocrático, inicialmente, alguns parâmetros como resolução, carga e volume de injeção foram otimizados em coluna analítica e posteriormente foi feita a transferência de escala para coluna preparativa utilizando fator de escalonamento de 21,2. A transferência foi adequada, resultando no isolamento de 10,5 mg da casearina J, 30,0 mg da casearina X e 3,0 mg da casearina Z. Em modo reciclante, foram isolados 60,0 mg da caseargrewiina F. As análises de pureza dessas substâncias foram feitas através de CLAE- DAD, calculando-se primeiramente a pureza de pico, que foi de 100% para as três casearinas analisadas e, posteriormente, a pureza cromatográfica, pelo método de normalização de área, sendo de 85,5, 97,2, e 98,6% para as casearinas J, X e caseargrewiina F, respectivamente. As análises por CLAE-DAD-EM foram importantes para confirmar o resultado de pureza de pico, assim como para obter os dados de massas dos contaminantes presentes nessas amostras. O grau de pureza por DSC não pôde ser obtido, devido à ausência do pico referente à fusão das casearinas, inferindo que as substâncias... / Taking into account the few library of reference standards available for the use in quality control of phytotherapic agents from Brazilian native species, the aim of this work was to prepare and characterize high purity standards of casearins from Casearia sylvestris, a native plant of the Brazilian flora that has been used traditionally by population for a long time as remedy. The strategy to isolate the casearins was to fraction at the ethanolic extract from leaves by solid phase extraction using silica and active charcoal, column chromatography (normal phase) and, additionally, the method development in preparative HPLC (reverse phase) using isocratic e recycling mode. For the analyses by preparative HPLC using isocratic mode, firstly of all some parameters like resolution, amount of sample and volume injection were optimized in analytical column and then the scale-up to preparative column was carried out using a scale factor of 21.2. The scale-up was appropriate, leading to the isolation of 10.5 mg of the casearin J, 30.0 mg of the casearin X and 3.0 mg of the casearin Z. In recycling mode, 60.0 mg of the caseargrewiin F were isolated. The purity analyses of these substances were carried out by HPLC-DAD, firstly measuring the peak purity, wich was 100.0% for the three analyzed casearins, and then, the chromatographic purity, by the area normalization method, wich was 85.5, 97.2 and 98.6% for the casearins J, X and caseargrewiin F, respectively. The HPLC-DAD-MS analyses were important to confirm the peak purity results as well as to obtain the mass data of contaminants wich are usually present in these samples. The measurement of the purity degree by DSC method was not possible due to the absence of fusion peak, thus it suggests an amorphous state for these substances. From the TG/DTG/DTA curves, it was possible to suggest the absence of volatile... ((Complete abstract click electronic access below)

Enxaguatórios bucais podem ocasionar a alteração de cor do elemento dental, devido à desmineralização ocasionada pelo uso prolongado dos mesmos, e consequente aumento da rugosidade superficial. Outros fatores, como o clareamento caseiro e o consumo diário de bebidas ácidas são, da mesma forma, responsáveis pela dissolução do esmalte dental. Buscando superar os efeitos adversos da Clorexidina 0,12%, desenvolveu-se um enxaguatório bucal à base de uma planta medicinal, denominada Casearia sylvestris. O presente estudo teve como objetivo avaliar a ação dos enxaguatórios bucais à base de Casearia sylvestris e Clorexidina 0,12% na cor e rugosidade superfícial do esmalte dental submetido a agente clareador e bebida alimentícia de pH 2,4. Amostras de dentes bovinos foram divididas em 3 grupos (n= 30), de acordo com a solução utilizada: Água destilada, Clorexidina 0,12% e Enxaguatório bucal à base de Casearia sylvestris. Cada grupo foi ainda dividido em subgrupos, de acordo com as categorias (n=10): Grupo controle, dentes clareados e dentes submetidos à imersão em bebida alimentícia ácida. O clareamento caseiro foi realizado com peróxido de carbamida 16%, por 6 horas diárias durante 8 dias, enquanto a imersão em suco de limão (pH 2,4) foi realizada por 2 minutos cada, 1 vez ao dia, durante 6 dias. Posteriormente, os grupos tiveram seus corpos de prova imersos nas respectivas soluções por 2 minutos, 3 vezes ao dia, durante 7 dias. As leituras de cor e rugosidade superficial foram realizadas anteriormente ao período experimental e após a imersão nos enxaguatórios bucais. A análise dos resultados foi realizada através dos testes estatísticos ANOVA - II way e Teste de Tukey 5%. Os dentes submetidos ao clareamento caseiro e à imersão em bebida ácida apresentaram uma maior alteração de cor. As diferentes soluções não apresentaram diferença estatística quanto à alteração de cor. A rugosidade superficial foi maior para o período de 7 dias, sendo que apenas o grupo submetido à imersão em bebida ácida apresentou um aumento significante na rugosidade superficial. Foi possível concluir que apenas o clareamento caseiro e a imersão em bebidas ácidas promoveram alteração na coloração da estrutura dental. Não houve influência dos enxaguatórios bucais utilizados isoladamente ou em associação com os tratamentos na rugosidade superficial. Apenas a imersão em bebida ácida ocasionou aumento na rugosidade superficial. / Mouthwashes can induce the tooth color alteration, due to the desmineralization occured by the prolonged use of them and consequent increase of surface roughness. Another factors, as the home bleaching and the daily consumption of acid drinks are, in the same way, responsible for the dental enamel dissolution. Attempting to overcome the Chlorhexidine 0,12% adverse effects, it was developed a mouthwash containing a medical plant, denominated as Casearia sylvestris. The aim of this study was to evaluate the action of a mouthwash containing Casearia sylvestris and Chlorhexidine 0,12% on color and surface roughness from the dental enamel submitted to bleaching gel and a drink with pH 2,4. Bovine teeth samples were divided in 3 groups (n=30), according to the solution: distillated water, Chlorhexidine 0,12% and a mouthwash containing Casearia sylvestris. Each group was divided in subgroups, according to the categories (n=10): Control group, bleached teeth and teeth immersed in an acid drink. The bleaching procedure was realized with carbamide peroxide 16%, during 6 hours by 8 days, while the acid drink immersion was done during 2 minutes each, once in a day and during 6 days. Posteriorly, the samples were immersed on the respective solutions by 2 minutes, three times at a day, during 7 days. The color and surface roughness lecture were performed before the experimental period and after the immersion on mouthwashes. The data were analyzed by two-way analysis of variance (ANOVA) and Tukey`s test. The teeth submitted to home bleaching and to the immersion in acid drink showed higher color alteration. At the group wich no treatment was applied, the mouthwash containing Casearia sylvestris induce the highest color alteration when compared with the other solutions, and that was statistically equal when the teeth were submitted to different treatments. The surface roughness was higher to the 7 days period, although the only the group submitted to the immersion in acid drink presented a significant enhance on surface roughness. In conclusion, only the bleaching and the immersion in acid drinks promoted a higher color alteration. The mouthwashes did not promoted an alteration on the color of the dental structure. There was no influence from mouthwashes utilized when isolated or in association with the treatments on surface roughness. Only the immersion in acid drink caused an increase on surface roughness.

O câncer representa uma das principais causas de morte no mundo. De acordo com a Organização Mundial da Saúde (OMS) surgem, a cada ano, nove milhões de casos e cerca de cinco milhões de pessoas morrem em consequência da doença. Apesar do aprimoramento nos métodos de diagnóstico, muitos tipos de câncer ainda são diagnosticados em fase avançada, assim os tratamentos convencionais são apenas paliativos. Muitos medicamentos rotineiramente utilizados em tratamento quimioterápico são oriundos de produtos naturais e o Brasil dispõe de uma ampla diversidade de plantas, as quais são úteis como fonte de pesquisa para a identificação de novos compostos com atividade antitumoral. O objetivo desse trabalho foi avaliar o potencial antitumoral de nove espécies de plantas coletadas na Mata Atlântica da região sul de Minas Gerais, sendo elas: Duguetia lanceolata (folhas), Trichilia emarginata (folhas), Miconia willdenoii (folhas), Allophylus racemosus (folhas e galhos), Metrodorea stipularis (folhas), Mollinedia widgrenii (folhas), Casearia arborea (folhas), Acacia polyphylla (folhas) e a Casearia sylvestris (folhas). Os resultados mostraram que o extrato obtido a partir das folhas de Casearia sylvestris foi potencialmente ativo contra cinco linhagens diferentes de células derivadas de cânceres humanos: A549 (adenocarcinoma pulmonar), MCF7 (adenocarcinoma mamário), HepG2 (hepatocarcinoma), U251 MG (glioblastoma), HT144 (melanoma). Assim sendo, o extrato bruto dessa espécie foi fracionado por extração líquido-líquido a fim de selecionar as frações enriquecidas com substâncias bioativas. As frações acetato de etila e hexânica (substâncias de média e baixa polaridade) mostraram promissoras nos resultados dos ensaios bioguiados, sendo que a fração acetato foi selecionada para isolamento de substâncias com potencial antitumoral. Após Cromatografia em Coluna e Cromatografia Líquida foi possível o isolamento da casearina D. A mesma foi submetida aos testes biológicos e verificou-se que tem potencial antitumoral sobre as linhas de hepatocarcinoma e adenocarcinoma pulmonar. / Cancer has emerged as a major cause of morbidity and mortality in recent times. According the report from the World Health Organization (WHO), there were 9 million deaths with 5 million new cases of cancer for wear. Unfortunately, many cases are still diagnosed at advanced stages when treatment options are only palliative. Many medications routinely used in chemotherapy are derived from natural products, and Brazil has a wide diversity of plants, which are useful as a source of research for the identification of new compounds with antitumor activity. The aim of this study was to evaluate the anti-tumor potential of nine species of plants collected in the Atlantic Forest in the southern region of Minas Gerais, which are: Duguetia lanceolata (leaves), Trichilia emarginata (leaves), Miconia willdenoii (leaves), Allophylus racemosus (leaves and branches), Metrodorea stipularis (leaves), Mollinedia widgrenii (leaves) and Casearia arborea (leaves), Acacia polyphylla (leaves), Casearia sylvestris (leaves). The results showed that the extract obtained from Casearia sylvestris leaves were potentially active against five different strains derived from human cancer cells: A 549 (lung adenocarcinoma), MCF 7 (breast carcinoma), HepG2 (hepatocellular carcinoma), U251 MG (glioblastoma) HT 144 (melanoma). Thus, the crude extract of this species was fractionated by liquid-liquid extraction in order to select the fractions enriched with bioactive substances. The ethyl acetate fraction (medium polarity substance) showed a higher antitumor activity and was selected for isolation for the isolation of substances with antitumor potential. After column chromatography, liquid chromatography has been possible to isolate the casearin D. The same was subjected to biological tests and have found that antitumor potential on the lines of hepatocellular carcinoma and lung adenocarcinoma. / Programa Institucional de Bolsas de Pós-Graduação - PIB-PÓS

Submitted by Ana Paula Lisboa Monteiro (monteiro@univates.br) on 2009-06-22T17:43:23Z No. of bitstreams: 1 AnaGuntzel.pdf: 435546 bytes, checksum: 800c7475c065b4cd13aefb059ff97402 (MD5) / Made available in DSpace on 2009-06-22T17:43:23Z (GMT). No. of bitstreams: 1 AnaGuntzel.pdf: 435546 bytes, checksum: 800c7475c065b4cd13aefb059ff97402 (MD5) / A espécie vegetal Casearia sylvestris, popularmente conhecida como guaçatonga ou erva-de-bugre, foi escolhida para estudo considerando seu uso relevante na medicina popular, escasso material bibliográfico. Foram avaliadas as atividades farmacológicas antioxidante, antimicrobiana e a toxicidade dos extratos etanólico (EE) e aquoso (EA) de folhas, além da descrição dos constituintes de seu óleo essencial e sua atividade antimicrobiana. Para avaliação da atividade antioxidante desta espécie, realizou-se ensaio espectrofotométrico baseado no princípio de redução do radical livre 2,2-difenil-1-picrilhidrazila (DPPH). Para avaliação do potencial antimicrobiano, o ensaio da Concentração Inibitória Mínima (CIM), seguido da Concentração Bactericida Mínima (CBM) e Concentração Fungicida Mínima (CFM). A CIM foi avaliada pela técnica de microdiluição em caldo, enquanto que a CBM e CFM foram realizadas em placas de Petri. Ainda, verificou-se a atividade tóxica, através da utilização da Artemia salina (L.). Na investigação da atividade antioxidante, obtiveram-se inibições do radical livre DPPH nas concentrações de 0,1 mg. mL-1 a 0,005 mg. mL-1 para os extratos etanólico (EE) e aquoso (EA) das folhas, onde através da análise estatística ANOVA, seguida de Student-Newman-Keuls, demonstrou a potencial atividade antioxidante dos extratos ser superior aos padrões testados. Na atividade antimicrobiana, obtiveram-se valores de CIM na faixa de 2,5 mg. mL-1 a 1,25 mg.mL-1 para o EE, enquanto que para EA não verificou-se atividade. No ensaio da letalidade da A. Salina o EA não foi verificada toxicidade, e o EE apresentou, devido ao seu baixo valor encontrado no cálculo da regressão linear da DL 50, apresentou toxicidade moderada. Do óleo essencial, 97,3% dos seus constituintes foram identificados por cromatografia gasosa e espectrometria de massas, tendo como constituintes majoritários o β-elemeno (31,7%) e o α-humuleno (28,2%). A avaliação antimicrobiana, do óleo essencial, foi realizada por bioautografia, apresentando atividade bacterida para Staphylococcus aureus, Staphylococcus epidermidis e Escherichia coli e Pseudomonas aeruginosa, já para os fungos a atividade foi menor.

Orientador: Marlise Inêz Klein / Resumo: A cárie dentária é um problema de saúde pública mundial causada por uma interação entre dieta rica em açúcar e microrganismos em biofilmes dentais. Abordagens para controlar esses microrganismos em biofilmes são necessárias. Portanto, o objetivo foi avaliar potencial antimicrobiano (cultura planctônica) e antibiofilme de doze extratos de Casearia Sylvestris (0,50 mg/mL) de diferentes biomas brasileiros (Mata Atlântica, Cerrado, Caatinga, Pampa e Pantanal) e variedades (sylvestris, lingua e intermediária) contra duas espécies encontradas em biofilmes cariogênicos (Streptococcus mutans e Candida albicans). A caracterização química dos extratos brutos foi feita via cromatografia. A atividade antimicrobiana foi determinada pela população microbiana (UFC/mL) enquanto a atividade antibiofilme pela população microbiana (UFC/mL) e biomassa dos biofilmes tratados. Para os extratos ativos para S. mutans, foi avaliado o efeito na formação inicial da matriz de glucanos (atividade de GtfB), o desprendimento após a adesão desta bactéria à película salivar e à matriz inicial de glucanos e citotoxicicidade via ensaio MTT. Também foi avaliado o potencial antimicrobiano contra S. mutans de três frações (metanol, acetato de etila e hexano; 0,25 mg/mL) oriundas dos doze extratos. Três extratos do bioma Mata Atlântica e variedade sylvestris reduziram em >50% (ou >3 logs) as contagens de células viáveis de S. mutans (vs. veículo; p <0,0001), enquanto dois extratos, pertencentes ao mesmo bioma e va... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: Dental caries is a worldwide public health problem caused by an interaction between a diet rich in sugar and microorganisms in dental biofilms. Approaches to control these microorganisms in biofilms are necessary. Therefore, the objective of this study was to evaluate the antimicrobial (planktonic) and antibiofilm potential of twelve Casearia sylvestris extracts (0.50 mg/mL) from different Brazilian biomes (Atlantic Forest, Cerrado, Caatinga, Pampa and Pantanal) and variety (sylvestris, lingua and intermediate) against two species found in cariogenic biofilms (Streptococcus mutans and Candida albicans). The chemical characterization of crude extracts was done via chromatography. The antimicrobial activity was determined by the viable microbial population (CFU/mL) and the antibiofilm activity by the viable microbial population (CFU/mL) and biomass of the biofilms treated. For the extracts active for S. mutans, the effect on the initial formation of the glucan matrix (GtfB activity), the release after adhesion of this bacterium to the salivary film and the initial matrix of glucans and cytotoxicity via the MTT assay was evaluated. In addition, the antimicrobial potential against S. mutans of three fractions (methanol, ethyl acetate and hexane, 0.25 mg/mL) from the twelve extracts was also evaluated. Three extracts of the Atlantic Forest biome and sylvestris variety reduced the counts of viable S. mutans cells (vs. vehicle, p <0.0001) by >50% (or >3 logs), while two extracts bel... (Complete abstract click electronic access below) / Mestre

Submitted by Reginaldo Soares de Freitas (reginaldo.freitas@ufv.br) on 2017-06-08T18:05:36Z No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 4386521 bytes, checksum: 95810ed79cb1aecc3b3e8eb50cba2fac (MD5) / Made available in DSpace on 2017-06-08T18:05:36Z (GMT). No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 4386521 bytes, checksum: 95810ed79cb1aecc3b3e8eb50cba2fac (MD5) Previous issue date: 2016-03-08 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / Casearia Jacq. é um dos maiores gêneros de Salicaceae com aproximadamente 180 espécies, das quais 50 ocorrem no Brasil, distribuídas em diferentes formações vegetacionais, sendo 21 endêmicas. Apesar das descrições taxonômicas relatarem a ocorrência de pontos e traços translúcidos nas lâminas foliares e glândulas nos ápices nos dentes marginais, estudos anatômicos caracterizando as estruturas secretoras são escassos. Os pontos e traços translúcidos foram descritos como cavidades e ductos em apenas seis espécies. O tipo de estrutura secretora tem sido utilizado, com sucesso, como marcador morfológico para estabelecimento de parentescos, bem como auxiliando o esclarecimento de problemas taxonômicos. Adicionalmente, a elucidação dos sítios de síntese/acúmulo de compostos, assim como a identificação da natureza química da secreção, podem corroborar os estudos fitoquímicos, indicando os locais responsáveis pela produção dos compostos secundários de interesse medicinal. Este trabalho teve os seguintes objetivos: (1) Identificar as estruturas secretoras que correspondem aos pontos e traços translúcidos das folhas das espécies de Casearia e verificar se presença, o tipo e a posição destas variam entre as espécies; (2) Caracterizar anatomicamente as glândulas dos ápices dos dentes marginais das espécies de Casearia; (3) Identificar os locais de síntese e/ou acúmulo de compostos secundários responsáveis pelas propriedades medicinais de C. sylvestris, espécie amplamente utilizada na medicina popular, e identificar a natureza química da secreção; (4) Elucidar os mecanismos de produção e eliminação das secreções produzidas nas diferentes estruturas secretoras de C. sylvestris. Em relação à descrição da presença de pontos e traços translúcidos na lâmina foliar, foi possível confirmar a correlação entre os mesmos com cavidades e ductos, respectivamente. Tais estruturas estavam presentes em 41 das 45 espécies analisadas. As três espécies da seção Piparea (C. commersoniana, C. javitensis e C. spruceana) estudadas, bem como C. eichleriana, não apresentam cavidades e ductos, o que sugere uma revisão do posicionamento destas espécies. Também foi possível estabelecer padrões de distribuição das cavidades/ductos no gênero. Os dados anatômicos possibilitaram identificar os sítios de síntese e/ou acúmulo dos compostos secundários de C. sylvestris. A localização, estrutura anatômica, atividade secretora precoce e a natureza polissacarídica/proteica da secreção, permitem reconhecer as glândulas associadas aos dentes marginais das folhas de Casearia como coléteres do tipo padrão. A secreção produzida pelos mesmos tem sido relacionada com a proteção de meristemas e órgãos em desenvolvimento, lubrificando e protegendo contra a dessecação e/ou contra o ataque de patógenos. Os dados ultraestruturais das diferentes estruturas permitiram compreender o papel das organelas nos processos de síntese, possibilitando correlacionar a ultraestrutura com a natureza química dos produtos secretados. / Casearia Jacq. is one of the largest genera in Salicaceae, with ca. 180 species, among them 50 occur in Brazil in some vegetation types, 21 of them are endemic. Despite that taxonomic descriptions have reported the occurrence of pellucid–punctuations or –lines on the leaf blade and the glands at the apex of marginal leaf teeth, anatomical studies characterizing secretory structures, are scarce. Only for six species the pellucid– punctuations and pellucid–lines have been anatomically reported as cavities and ducts, respectivelly. The type of secretory structure has been successfully used as a morphological characters to establish relationships as well as to clarify taxonomic problems. In additional, elucidating the sites of synthesis/accumulation of compounds, as well as identifying the chemical nature of the secretion, may aid phytochemical studies by indicating the specific sites responsible for the production of secondary metabolites in medicinal plants. This work aimed to: (1) Identify the secretory structures that correspond to the pellucid–punctuations and –lines on leaves of Casearia species and verify whether the presence, type and position of these structures vary among species; (2) Anatomically characterize the glands at the apex of the marginal leaf teeth in Casearia species; (3) Identify the sites of synthesis and/or accumulation of the secondary metabolites responsible for the medicinal properties of C. sylvestris, a widely used species in folk medicine, as well as identify the chemical nature of the secretion; and (4) Elucidate the mechanisms of production and exudation of the secretions produced by the different secretory structures in leaves of C. sylvestris. The correlation of pellucid–punctuations and –lines on the leaf blade with cavities and ducts, respectively, was confirmed. These structures were present in 41 of the 45 analyzed species. C. commersoniana, C. javitensis, C. spruceana (the three studied species from section Piparea) and C. eichleriana do not have cavities or ducts, which suggests the need for a revision of the taxonomical positioning of these species. Distribution patterns of cavities and ducts in the genera were also established. The anatomical data allowed the identification of the sites of synthesis and/or accumulation of the secondary metabolites in C. sylvestris. The placement, anatomical structure, precocious secretory activity and the polysaccharide/protein prodution allow recognize the glands associated with the marginal leaf teeth in Casearia as standard-type colleters. Colleter secretion has been suggested to be related with the protection of apical meristems and developing organs, by lubricating them and thus protecting them against desiccation, and/or also protecting them against pathogen. The ultrastructural data on the different secretory structures allowed the comprehension of the role played by organelles on the synthesis processes, thus it was possible to stablish correlation between the ultrastructure with the chemical nature of the secreted products.

A Casearia sylvestris, conhecida popularmente como erva-de-bugre, cafezinho-do-mato ou guaçatonga tem distribuição em todo território brasileiro. As folhas, a casca e a raiz possuem ação antisséptica e febrífuga, além da ação cicatrizante. A espécie apresenta óleo essencial que vem sendo vastamente utilizado na farmacologia. Estudos com C. sylvestris vem demonstrando que a mesma apresenta potencial para o controle de diversos patógenos. Objetivou-se neste trabalho desenvolver estudos a respeito do efeito da sazonalidade sobre o rendimento e composição do óleo essencial desta espécie e acerca da possível ação antifúngica. Além disso, foram analisadas as características morfoanatômicas da formação de suas raízes na propagação por estacas semilenhosas. Para a realização do primeiro experimento, folhas de três populações de Casearia sylvestris, naturais do Rio Grande do Sul foram coletadas para obtenção do rendimento e composição química de seu óleo essencial nas quatro estações do ano. No segundo experimento foram realizados testes de inibição de crescimento de Botrytis sp, Altenaria alternata, Alternaria radicinia e Alternaria brassicicola com uso do extrato aquoso e óleo essencial. As concentrações utilizadas de extrato aquoso foram de 80 e 100%, enquanto as de óleo essencial foram de 0%; 1,5% e 2,5%. O terceiro experimento envolveu a analise anatômica do enraizamento de estacas de C. sylvestris. Depois de instalado o experimento, as estacas foram avaliadas a cada 15 dias, quando 3 estacas eram retiradas para a realização de cortes histológicos para a analise da origem das mesmas. Os resultados obtidos indicam que a produção sazonal do óleo essencial de C. sylvestris sofre alteração em função da estação de coleta, sendo o seu maior rendimento na primavera e no verão. O extrato aquoso da espécie não é capaz de inibir o crescimento micelial de Botritys, A. alternata, A. radicinia e A. brassicicolain vitro nas concentrações de 80 e 100%. Já o óleo essencial mostrou-se significativamente eficiente na inibição do crescimento micelial in vitro na concentração de 2,5% para os mesmos patógenos. No que se refere às caracterisitcas morfo-anatômicas da formação das raízes adventícias de C. sylvestris, observou-se que estas são formadas tanto por células do calo quanto por células do câmbio. / The Casearia sylvestris, popularly known as wort-buggy, coffee of the woods or guaçatonga has great distribution throughout Brazil. The leaves, bark and roots have antiseptic and febrifuge action, beyond presents healing action. The species presents essential oil that has been widely used in pharmacology. Studies with C. sylvestris has demonstrated that it has potential to control various pathogens. The objective of this work was to develop studies about the effect of season on the yield and essential oil composition of this specie, although the possible antifungal action. Furthermore, we aimed to analyze the morpho-anatomical characteristics involved in roots formation in assexual propagation by softwood cuttings. To perform the first experiment, leaves of three populations of C. sylvestris, natural of Rio Grande do Sul were collected to obtain the yield and composition of essential oil in the four seasons. In the second experiment growth inhibition tests were performed using Botrytis spp., Altenaria alternata, Alternaria brassicicolaandAlternaria radicinia with the use of the aqueous extract and essential oil. The aqueous extract concentrations used were 80 and 100%, while the essential oil were 0%,1.5% and 2.5%. The third experiment involved the analysis of anatomical rooting of C. sylvestris. After installing the experiment, cuttings were evaluated every 15 days, when 3 cuttings were taken for performing histological sections to analyze the origin of the same. The results obtained indicates that the seasonal production of essential oil of C. sylvestris suffer alteration due to collection station. The higher yield is in spring and summer. The aqueous extract of the species is not able to inhibit the mycelial growth of Botritys, A. alternata, A. brassicicola and A. radicinia in vitro at concentrations of 80 and 100 %. The essential oil was significantly effect in inhibiting the mycelial growth in vitro at a concentration of 2.5% for the same pathogens. About morphological and anatomical characteristcs by formation of adventitious roots of C. sylvestris, it was observed that these are formed both by callus cells as by cells of the vascular cambium.

Tese (doutorado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciências Biológicas, Programa de Pós-Graduação em Bioquímica, Florianópolis, 2014. / Made available in DSpace on 2015-02-05T20:34:19Z (GMT). No. of bitstreams: 1 328156.pdf: 3621653 bytes, checksum: a1674e84d3d1c5637439c7111832d541 (MD5) Previous issue date: 2014 / Casearia sylvestris é uma planta utilizada popularmente no tratamento de tumores. Quinonas tratam-se de compostos que apresentam significativo efeito antitumoral. Evidências indicam que o efeito antineoplásico de quinonas pode ser elevado pela associação destas com o ascorbato de sódio (ASC). Desta forma, este trabalho tem como objetivo avaliar os mecanismos envolvidos nos efeitos antiproliferativo e antitumoral mediados pelo extrato bruto (EB-ETOH) e frações de Casearia sylvestris, bem como pelas fenilaminonaftoquinonas 7 (Q7) e 9 (Q9) administradas isoladamente ou em associação ao ascorbato de sódio. A análise fitoquímica demonstrou a presença de casearina C na fração clorofórmica (f-CHCl3) e EB-ETOH de C. sylvestris. EB-ETOH e f-CHCl3, apresentaram importante citotoxicidade sobre células MCF-7. Quando administrados em doses subtóxicas (= CI20), EB-ETOH e f-CHCl3 exerceram atividade antiproliferativa sobre células MCF-7, sendo capazes de promover a parada do ciclo celular em G1, devido ao aumento da expressão de p53 e p16, bem como da redução da expressão de CDK2. Além disso, os extratos elevaram a fosforilação de ?H2Ax. EB-ETOH e f-CHCl3 apresentaram significativa atividade antitumoral in vivo em camundongos isogênicos Balb-C portadores do tumor sólido de Ehrlich, reduzindo a razão área da massa tumoral/área do osso em torno de 18 e 40%, respectivamente. Q7 e Q9 mostraram citotoxicidade seletiva sobre células T24, a qual foi potencializada pela associação destes compostos a ASC (CI50 Q7 = 27,1; CI50 Q9 = 44,3; CI50 Q7 + ASC = 14,5; CI50 Q9 + ASC= 16,9 µM). Fenilaminonaftoquinonas (10 µM) isoladas ou associadas à ASC não foram capazes de promover a ativação de caspases e a clivagem da PARP, sugerindo-se que o mecanismo de morte induzido pelas associações trata-se de necrose, visto que ambos tratamentos promoveram lise celular. Q7, Q9, Q7 + ASC e Q9 + ASC reduziram a proliferação de células T24 em torno de 29,7; 3,5; 36,7 e 88,8 %, respectivamente Além disso, fenilaminonaftoquinonas associadas ao ASC modificaram o número de células presentes na fase G2/M e elevaram a atividade da ß-galactosidase ácida, sugerindo que tais tratamentos são capazes de induzir senescência. Os efeitos citotóxico e antiproliferativo promovidos pela associação de fenilaminonaftoquinonas ao ASC envolve modificações na sinalização mediada por MAPKs. Os resultados obtidos permitem sugerir que tanto a associação de fenilaminonaftoquinonas ao ASC, quanto os extratos deC. sylvestris tratam-se de promissores coadjuvantes na terapêutica do câncer quando administrados juntamente a agentes citotóxicos.<br> / Abstract : The branches and leafs of Casearia sylvestris tree has medicinal properties comproved through ethnobotanical surveys reporting plant extracts has being used in traditional therapy as first approaches to several conditions, including cancer. Evidences indicate that quinones antineoplastic effect could be raised up through sodium ascorbate association (ASC). Thus, this study aims to evaluate some mechanisms related to in vitro antiproliferative and antitumor effects mediated by C. sylvestris ethanol crude extract (EB-EtOH) and fractions, as well mediated only by synthetic phenylaminonaphthoquinones or co-administered with ASC. EB-EtOH and its chloroformic fraction (f-CHCl3) had casearin C, a clerodane diterpene with chemopreventive activity. Consequently, both extracts showed significant cytotoxicity over MCF-7 cells. Furthermore, using subtoxic concentrations (= IC20), EB - EtOH and f-CHCl3 exerted antiproliferative activity on MCF - 7 cells, being able to promote cell cycle arrest in G1 due to increased expression of p53 and p16, as well as reducing CDK2 expression. Additionally, these extracts were still able to increase the ?H2Ax expression. EB-EtOH and f-CHCl3 had significant in vivo antitumor activity throught Ehrlich carcinoma-bearing Balb-c mice model causing reduction in the ratio tumor over bone area about 18 and 40 %, respectively. On the other hand, synthetic phenylaminonaphthoquinone 7 (Q7) and phenylaminonaphthoquinone 9 (Q9) showed selective cytotoxicity for T24 cells, which enhanced in the ASC presence (IC50 Q7 = 27.1; IC50 Q9 = 44.3; IC50 Q7 + ASC = 14.5; IC50 Q9 + ASC = 16.9 µM). Take into account that both phenylaminonaphthoquinones (10 µM) isolated or associated with ASC were not able to activate caspase 3 or PARP cleavage, ours results suggest that necrosis occurs instead apoptosis as cell death mechanism possible induced by the ASC association, since both treatments showed cytolytic effect. Q7, Q9, Q7 + ASC and Q9 + ASC reducing cell proliferation about 29.7; 3.5; 36.7 and 88.8%, respectively. Besides, phenylaminonaphthoquinones associated with ASC augment G2 / M phase cells and also increase acid ß-galactosidase activity, suggesting senescence induction capability. Moreover, cytotoxic and antiproliferative effects promoted by the ASC association involves changes in MAPK signaling pathways. These results suggest that C. sylvestris extracts and the association between phenylaminonaphthoquinones and ASC are promising adjuvants incancer therapy and could be administered together with conventional quimioterapic agents.

A Casearia sylvestris, conhecida popularmente como erva-de-bugre, cafezinho-do-mato ou guaçatonga tem distribuição em todo território brasileiro. As folhas, a casca e a raiz possuem ação antisséptica e febrífuga, além da ação cicatrizante. A espécie apresenta óleo essencial que vem sendo vastamente utilizado na farmacologia. Estudos com C. sylvestris vem demonstrando que a mesma apresenta potencial para o controle de diversos patógenos. Objetivou-se neste trabalho desenvolver estudos a respeito do efeito da sazonalidade sobre o rendimento e composição do óleo essencial desta espécie e acerca da possível ação antifúngica. Além disso, foram analisadas as características morfoanatômicas da formação de suas raízes na propagação por estacas semilenhosas. Para a realização do primeiro experimento, folhas de três populações de Casearia sylvestris, naturais do Rio Grande do Sul foram coletadas para obtenção do rendimento e composição química de seu óleo essencial nas quatro estações do ano. No segundo experimento foram realizados testes de inibição de crescimento de Botrytis sp, Altenaria alternata, Alternaria radicinia e Alternaria brassicicola com uso do extrato aquoso e óleo essencial. As concentrações utilizadas de extrato aquoso foram de 80 e 100%, enquanto as de óleo essencial foram de 0%; 1,5% e 2,5%. O terceiro experimento envolveu a analise anatômica do enraizamento de estacas de C. sylvestris. Depois de instalado o experimento, as estacas foram avaliadas a cada 15 dias, quando 3 estacas eram retiradas para a realização de cortes histológicos para a analise da origem das mesmas. Os resultados obtidos indicam que a produção sazonal do óleo essencial de C. sylvestris sofre alteração em função da estação de coleta, sendo o seu maior rendimento na primavera e no verão. O extrato aquoso da espécie não é capaz de inibir o crescimento micelial de Botritys, A. alternata, A. radicinia e A. brassicicolain vitro nas concentrações de 80 e 100%. Já o óleo essencial mostrou-se significativamente eficiente na inibição do crescimento micelial in vitro na concentração de 2,5% para os mesmos patógenos. No que se refere às caracterisitcas morfo-anatômicas da formação das raízes adventícias de C. sylvestris, observou-se que estas são formadas tanto por células do calo quanto por células do câmbio. / The Casearia sylvestris, popularly known as wort-buggy, coffee of the woods or guaçatonga has great distribution throughout Brazil. The leaves, bark and roots have antiseptic and febrifuge action, beyond presents healing action. The species presents essential oil that has been widely used in pharmacology. Studies with C. sylvestris has demonstrated that it has potential to control various pathogens. The objective of this work was to develop studies about the effect of season on the yield and essential oil composition of this specie, although the possible antifungal action. Furthermore, we aimed to analyze the morpho-anatomical characteristics involved in roots formation in assexual propagation by softwood cuttings. To perform the first experiment, leaves of three populations of C. sylvestris, natural of Rio Grande do Sul were collected to obtain the yield and composition of essential oil in the four seasons. In the second experiment growth inhibition tests were performed using Botrytis spp., Altenaria alternata, Alternaria brassicicolaandAlternaria radicinia with the use of the aqueous extract and essential oil. The aqueous extract concentrations used were 80 and 100%, while the essential oil were 0%,1.5% and 2.5%. The third experiment involved the analysis of anatomical rooting of C. sylvestris. After installing the experiment, cuttings were evaluated every 15 days, when 3 cuttings were taken for performing histological sections to analyze the origin of the same. The results obtained indicates that the seasonal production of essential oil of C. sylvestris suffer alteration due to collection station. The higher yield is in spring and summer. The aqueous extract of the species is not able to inhibit the mycelial growth of Botritys, A. alternata, A. brassicicola and A. radicinia in vitro at concentrations of 80 and 100 %. The essential oil was significantly effect in inhibiting the mycelial growth in vitro at a concentration of 2.5% for the same pathogens. About morphological and anatomical characteristcs by formation of adventitious roots of C. sylvestris, it was observed that these are formed both by callus cells as by cells of the vascular cambium.

A Casearia sylvestris, conhecida popularmente como erva-de-bugre, cafezinho-do-mato ou guaçatonga tem distribuição em todo território brasileiro. As folhas, a casca e a raiz possuem ação antisséptica e febrífuga, além da ação cicatrizante. A espécie apresenta óleo essencial que vem sendo vastamente utilizado na farmacologia. Estudos com C. sylvestris vem demonstrando que a mesma apresenta potencial para o controle de diversos patógenos. Objetivou-se neste trabalho desenvolver estudos a respeito do efeito da sazonalidade sobre o rendimento e composição do óleo essencial desta espécie e acerca da possível ação antifúngica. Além disso, foram analisadas as características morfoanatômicas da formação de suas raízes na propagação por estacas semilenhosas. Para a realização do primeiro experimento, folhas de três populações de Casearia sylvestris, naturais do Rio Grande do Sul foram coletadas para obtenção do rendimento e composição química de seu óleo essencial nas quatro estações do ano. No segundo experimento foram realizados testes de inibição de crescimento de Botrytis sp, Altenaria alternata, Alternaria radicinia e Alternaria brassicicola com uso do extrato aquoso e óleo essencial. As concentrações utilizadas de extrato aquoso foram de 80 e 100%, enquanto as de óleo essencial foram de 0%; 1,5% e 2,5%. O terceiro experimento envolveu a analise anatômica do enraizamento de estacas de C. sylvestris. Depois de instalado o experimento, as estacas foram avaliadas a cada 15 dias, quando 3 estacas eram retiradas para a realização de cortes histológicos para a analise da origem das mesmas. Os resultados obtidos indicam que a produção sazonal do óleo essencial de C. sylvestris sofre alteração em função da estação de coleta, sendo o seu maior rendimento na primavera e no verão. O extrato aquoso da espécie não é capaz de inibir o crescimento micelial de Botritys, A. alternata, A. radicinia e A. brassicicolain vitro nas concentrações de 80 e 100%. Já o óleo essencial mostrou-se significativamente eficiente na inibição do crescimento micelial in vitro na concentração de 2,5% para os mesmos patógenos. No que se refere às caracterisitcas morfo-anatômicas da formação das raízes adventícias de C. sylvestris, observou-se que estas são formadas tanto por células do calo quanto por células do câmbio. / The Casearia sylvestris, popularly known as wort-buggy, coffee of the woods or guaçatonga has great distribution throughout Brazil. The leaves, bark and roots have antiseptic and febrifuge action, beyond presents healing action. The species presents essential oil that has been widely used in pharmacology. Studies with C. sylvestris has demonstrated that it has potential to control various pathogens. The objective of this work was to develop studies about the effect of season on the yield and essential oil composition of this specie, although the possible antifungal action. Furthermore, we aimed to analyze the morpho-anatomical characteristics involved in roots formation in assexual propagation by softwood cuttings. To perform the first experiment, leaves of three populations of C. sylvestris, natural of Rio Grande do Sul were collected to obtain the yield and composition of essential oil in the four seasons. In the second experiment growth inhibition tests were performed using Botrytis spp., Altenaria alternata, Alternaria brassicicolaandAlternaria radicinia with the use of the aqueous extract and essential oil. The aqueous extract concentrations used were 80 and 100%, while the essential oil were 0%,1.5% and 2.5%. The third experiment involved the analysis of anatomical rooting of C. sylvestris. After installing the experiment, cuttings were evaluated every 15 days, when 3 cuttings were taken for performing histological sections to analyze the origin of the same. The results obtained indicates that the seasonal production of essential oil of C. sylvestris suffer alteration due to collection station. The higher yield is in spring and summer. The aqueous extract of the species is not able to inhibit the mycelial growth of Botritys, A. alternata, A. brassicicola and A. radicinia in vitro at concentrations of 80 and 100 %. The essential oil was significantly effect in inhibiting the mycelial growth in vitro at a concentration of 2.5% for the same pathogens. About morphological and anatomical characteristcs by formation of adventitious roots of C. sylvestris, it was observed that these are formed both by callus cells as by cells of the vascular cambium.