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Investigação do potencial antimicrobiano de Casearia sylvestris sobre microrganismo endossimbionte de Diabrotica speciosa / Investigation of the potential antimicrobial of casearia sylvestris on the endosymbiont microorganisms of diabrotica speciosaMarques, Fabiana Aparecida 27 March 2013 (has links)
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Previous issue date: 2013-03-27 / Financiadora de Estudos e Projetos / Diabrotica speciosa is a pest insect which occurs in most Brazilian states, standing out as one of the most important polyphagous pest of in grain crops. The understand of the role of the microbiota present in the digestive tract and of this insect the identification of ways to interfer or even to eliminate this microbial flora they are knowlegdes that, may lead mode of action to control of the pest insect. In this context, this study aimed to evaluate the microbial diversity present in the digestive tract of larvae and adults of D. speciosa and in the sometime, to investigate the potential of C. sylvestris as an antimicrobial agent. As results, they were obtained 21 bacterial isolates and 8 fungal isolates. The proteic profile of these microrganisms were analyzed by using MALDI-TOF/MS. Afterwards, these data were grouped identifying clusters of isolates. A bacteria each groups was identified by rDNA sequencing, 16S region. Identified bacteria were: Pantoea agglomerans, Luteibacter sp., Serratia marcescens, and Pseudomonas temperans Acidovorax sp. Two isolated fungi were identified through morphological comparison with literature data, and identified as Cladosporium sp. and Penicillium sp. A further study was carried out with Luteibacter sp bacteria, which were isolated from D. speciosa larva. In this study was evaluated growth profile and the parameters to carry out the antimicrobial assay. Several kind of microbial assays were investigated such as agar diffusion and microdilution plate ELISA®. The second method showed the best results. Thus, a microdiluition methodology using fluorometric assay, was developed and validated, highlighting parameter such as linearity, specificity, accuracy, precision, robustness, recovery, limites of detection, quantification and detection, etc. This method was applied evaluating extracts, fraction and secondary molecules of cerrado plants. Phytochemical study of C. sylvestris leaves resulted in the isolation of an umpublished tricyclic sesquiterpene, the flavonoid catechin and a clerodane diterpene, which was used as a reference marker in chromatographic method to quality control of the extracts and fractions of C. sylvestris that were used in assays. / A Diabrotica speciosa é uma espécie que ocorre na maioria dos estados brasileiros, destacando-se como uma das principais pragas polífagas nas culturas de grãos. O entendimento da função da microbiota presente no trato digestivo deste inseto e a identificação de meios de interferir ou até mesmo destruir essa flora microbiana são conhecimentos que podem levar a um novo modo de ação para o controle de insetos praga. Neste contexto, este trabalho teve como objetivo avaliar a diversidade microbiana presente no trato digestivo de larvas e insetos adultos de D. speciosa e avaliar o potencial de Casearia sylvestris e extratos de plantas do cerrado como agente antimicrobiano. Como resultados, foram obtidos 19 isolados bacterianos e 8 fúngicos. Estes foram avaliados em termos de perfis protéico por MALDI-TOF/MS, e após a obtenção de agrupamentos estatísticos alguns microrganismos foram identificadas através do seqüenciamento de rDNA região 16S. As bactérias identificadas foram: Pantoea agglomerans, Luteibacter sp., Serratia marcescens, Acidovorax temperans e Pseudomonas sp. Dos isolados fúngicos, dois foram identificados através de comparação morfológica como dados da literatura, pertencendo aos gêneros; Cladosporium sp. e Penicillium sp. Um estudo mais aprofundado foi realizado com a bactéria Luteibacter sp isolada da larva, que teve seu perfil de crescimento avaliado, possibilitando o ajuste de parâmetros para realização de ensaios antimicrobiano. Para estes ensaios foram testadas metodologias de difusão em ágar e por microdiluição em placa de ELISA®, sendo na segunda metodologia obtido os melhores resultados. Assim, uma metodologia por microdiluição foi validada através da utilização do fluorímetro, analisando figuras de mérito como faixa linear de trabalho, precisão, exatidão, limites de quantificação e detecção, etc. O método por microdiluição foi aplicado ensaiando extratos, frações e metabólitos de plantas do cerrado. O estudo fitoquímico das folhas de C. sylvestris propiciou o isolamento de um sesquiterpeno tricíclico inédito na literatura, um flavonóide (catequina) e um diterpeno clerodânico que foi utilizado como marcador de referência para controle cromatográfico de qualidade de extratos e frações C sylvestris que foram submetidos a ensaios antimicrobianos.
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Avaliação da Atividade Acaricida de Óleos Essenciais de Acanthospermum australe (Loefl.) O. Kuntze, Casearia sylvestris Sw e Pothomorphe umbellata (L.) Miq., em Tetranychus urticae Koch, 1836 (Acari: Tetranychidae)Becker, Carolina 15 May 2008 (has links)
Submitted by Ana Paula Lisboa Monteiro (monteiro@univates.br) on 2009-06-22T17:22:52Z
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CarolinaBecker.pdf: 503088 bytes, checksum: 6691aa24c9b4dfc671a9feae5b2172a0 (MD5) / Made available in DSpace on 2009-06-22T17:22:52Z (GMT). No. of bitstreams: 1
CarolinaBecker.pdf: 503088 bytes, checksum: 6691aa24c9b4dfc671a9feae5b2172a0 (MD5) / O uso de compostos químicos sintéticos para o controle de pragas é amplamente utilizado no cultivo de plantas, os quais desfavorecem a estabilidade ecológica de sistemas naturais. Por serem menos agressivos e possuírem mais de um princípio ativo, os pesticidas naturais de origem vegetal podem minimizar as conseqüências indesejadas. Avaliou-se no presente trabalho o potencial acaricida dos óleos essenciais das espécies vegetais Acanthospermum australe, Casearia sylvestris e Pothomorphe umbellata, em duas concentrações de solução etanólica (0,5% e 2,0%), além da análise de compisição dos extratos destas plantas por cromatografia gasosa e espectrometria de massas. Na análise de composição das plantas, os compostos em maior concenctração encontrados foram ß-elemeno (31,7%) e α-humuleno (28,2%) em C. sylvestris, apiol (46,6%) e dill apiol (14,5%) em P. umbellata. Em A. australe o elemento com maior concentração (81,0%) não foi identificado. A atividade acaricida foi constatada para as três plantas, após 72 horas na concentração 2,0%. O óleo de Acanthospermum australe foi o que apresentou desempenho mais próximo do acaricida comercial utilizado como controle negativo.
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Avaliação das atividades cicatrizante e antiinflamatória de Casearia sylvestris Swartz em animais e identificação dos marcadores químicos /Pierri, Elaise Gonçalves. January 2013 (has links)
Orientador : André Gonzaga dos Santos / Banca: Marcio Adriano Andréo / Banca: Cleverton Roberto de Andrade / Banca: Rosangela Gonçalves Peccinini / Banca: Jean Leandro dos Santos / Resumo: Casearia sylvestris Sw. (Salicaceae) é uma espécie vegetal arbórea ou arbustiva conhecida como "guaçatonga", utilizada na medicina popular por suas propriedades antisséptica, antiofídica, antiulcerativa, anti-inflamatória e cicatrizante. A partir da droga vegetal (folhas) desenvolveu-se tratamento prévio e controle de qualidade, com o objetivo de caracterizar a planta como matéria-prima farmacêutica. O extrato etanólico foi produzido a partir de 2,0 Kg da droga vegetal e o rendimento da extração foi de 11,8% (p/p). Foi realizada uma extração em fase sólida (EFS) com o extrato etanólico seco de folhas de C. sylvestris. A partir da fração EFSCs2 foi isolada uma substância por cromatografia em coluna de fase normal que foi identificada por análises espectrométricas como a casearina J. Análises cromatográficas foram realizadas para identificação e quantificação de diterpenos clerodânicos no extrato etanólico e suas frações. Os diterpenos clerodânicos caseargrewiina F, casearinas B e X foram identificados e o teor de diterpenos clerodânicos totais foi determinado por CLAE-DAD no extrato EEtCs e na fração EFSCs2, cujos valores foram 27,4% e 50,6%, respectivamente. Das análises por cromatografia líquida de alta eficiência foram também obtidos os teores de casearina J e caseargrewiina F no extrato etanólico das folhas, cujos valores foram de 2,35 e 1,1%, respectivamente. Para avaliarmos a atividade anti-inflamatória foi realizado o ensaio do edema de pata em ratos sendo os resultados obtidos promissores comparando-se à indometacina e tanto frações (EFSCs 1 e 2) como substâncias purificadas (Casgw F e Cas B) não apresentaram grau de lesão gástrica nos animais quando analisados macroscopicamente, ao contrário da indometacina que apresentou grau 5 (máximo) de lesão pelo índice de ulceração. Na atividade anti-inflamatória crônica (artrite)... / Abstract: Casearia sylvestris Sw (Salicaceae) is a tree or shrub known as "guaçatonga" used in folk medicine for its antiseptic, antiophidian, antiulcerogenic, anti-inflammatory and wound healing properties. From the leaves it was developed pretreatment and quality control, in order to characterize the plant as pharmaceutical raw material. The ethanol extract was produced from 2.0 kg of the plant drug, and the extraction yield was 11.8% (w/w).It was performed a solid phase extraction (EFS) with 20.0 g of the ethanol extract of dried leaves of C. sylvestris. The purification was carried out in three steps, including a solid phase extraction by means of silica and activated carbon, normal-phase column chromatography and aqueous reversed-phase high efficiency chromatography. The diterpenes caseargrewiin F, casearins B and X. were used as standards. The clerodane type diterpenes were identified and quantified via HPLC-DAD in the extract EEtCs and EFSCs2 fraction whose values were 27.4% and 50.6%, respectively. From EFSCs2 fraction it was isolated a substance identified via spectrometric analysis as casearin J, existing in the literature. From the HPLC-UV analysis the casearin J and caseargrewiin F contents were gotten in the leaves ethanol extract, which values were 2.35 and 1.1% respectively. In order to evaluate the anti-inflammatory activity, rat's paw edema was performed where the results were promising regarding to indomethacin and, either extract (EEtCs), fractions (EFSCs 1 and 2) and purified substances (Cas B and CasgwF) showed no gastric wound in the animals stomach when macroscopically examined, in opposite to indomethacin that showed wound level 5 (maximum) on the ulceration index. In the chronic anti-inflammatory activity (arthritis) the reestablishment of the joints proportion for the group treated with dexamethasone (1 mg / kg) was 80 % and for the group treated with the ... / Doutor
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Caracterização biológica e prospecção terapêutica de Casearia sylvestris Swartz não incorporada e incorporada em sistema nanoestruturado na atividade anti-Helicobacter pylori /Spósito, Larissa. January 2017 (has links)
Orientador: Taís Maria Bauab / Banca: Leonardo Gorla Nogueira / Banca: Rosimeire Cristina Linhari Rodrigues Pietro / Resumo: O uso de produtos naturais na terapêutica convencional vem ganhando destaque nos últimos anos com relação a atividade antimicrobiana devido à alta taxa de efeitos tóxicos e ao excessivo crescimento do número de cepas multirresistentes aos antimicrobianos convencionais empregados na prática. Entre as novas triagens terapêuticas frente às afecções bacterianas, as infecções causadas pelo Helicobacter pylori merecem atenção especial, uma vez que estão diretamente relacionadas com quadros clínicos severos, como a gastrite crônica, úlcera péptica e câncer gástrico. A Casearia sylvestris Swartz é uma planta popularmente conhecida como guaçatonga ou erva-de-bugre, utilizada na medicina popular no tratamento de transtornos gástricos que nos últimos anos vem despertando interesse na comunidade científica, por suas importantes propriedades com potencial terapêutico como atividade anti-inflamatório, antiofídico, cicatrizante, citotóxica em linhagens de células tumorais e principalmente antiulcerogênica. Neste contexto, uma excelente alternativa para o aprimoramento dos parâmetros biodisponíveis dos extratos vegetais muito utilizada na atualidade é a incorporação destes em sistemas nanotecnológicos de liberação de fármaco para que o produto ativo tenha uma melhor ação. Deste modo, o presente trabalho teve por objetivo avaliar o potencial biológico antibacteriano in vitro do extrato etanólico, extrato aquoso, fração e subfrações das folhas de Casearia sylvestris Swartz, incorporar em um si... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: The use of natural products in conventional therapeutics has been gaining highlight in recent years relative to the antimicrobial activity due to the high rate of toxic effects and the excessive growth of the number of multiresistant strains to he conventional antimicrobials used in practice. Among the new therapeutic screenings for bacterial diseases, infections caused by Helicobacter pylori deserve special attention, since they are directly related to severe clinical conditions, such as chronic gastritis, peptic ulcer and gastric cancer. Casearia sylvestris Swartz is a plant popularly known as guaçatonga or erva-de-bugre, used in popular medicine to the treatment of gastric disorders that in recent years has gained the interest of the scientific community due to its important properties with therapeutic potential as an anti-inflammatory, antiofidic, healing, cytotoxicity against tumor cells and mainly antiulcerogenic. In this context, an excellent alternative for the improvement of the bioavailability parameters of the vegetal extracts that is used today is the incorporation of these in nanotechnological systems of drug release so that the active product has a better action. Thus, the aim of this study was to evaluate the in vitro antibacterial potential of the ethanolic extract, aqueous extract, fraction and subfractions of the leaves of Casearia sylvestris Swartz, and incorporate into a drug... (Complete abstract click electronic access below) / Mestre
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Estudo da atividade antitumoral do extrato bruto e frações de Casearia sylvestrisFelipe, Karina Bettega January 2010 (has links)
Dissertação (mestrado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciências Biológicas, Programa de Pós-Graduação em Bioquímica, Florianópolis, 2010 / Made available in DSpace on 2012-10-25T06:10:24Z (GMT). No. of bitstreams: 1
280965.pdf: 2701870 bytes, checksum: a5029b89d148f5b308ec22279f8fb877 (MD5) / O desenvolvimento de novas alternativas terapêuticas, como as terapias que utilizam as plantas medicinais, tem despertado grande interesse no tratamento do câncer, pois as terapias disponíveis não são capazes de regredir totalmente a evolução da patologia e/ou apresentam elevada toxicidade. A C. sylvestris, planta medicinal que possui vários usos populares no Brasil e outros paises americanos, tem sido indicada para o tratamento de tumores. Nesse contexto, o presente trabalho propôs avaliar as atividades citotóxica, antiproliferativa, pró-apoptótica, antiangiogênica e antitumoral do extrato bruto (EB-ETOH), e das frações metanólica (f-MeOH), acetato de etila (f-AcOEt) e clorofórmica (f-CHCl3) de Casearia sylvestris utilizando modelos experimentais in vitro e in vivo. Nos ensaios do MTT e incorporação de timidina triciada realizados respectivamente, para investigar a citotoxicidade e influência dos extratos sobre a proliferação celular, os resultados demonstraram que EB-ETOH, f-CHCl3 e f-AcOEt reduziram de maneira significativa a viabilidade e proliferação de células do carcinoma de Ehrlich, sendo a citotoxicidade promovida pelo tratamento com esses extratos, tempo e concentração dependente. Diante do efeito citotóxico promovido por EB-ETOH, f-CHCl3 e f-AcOEt sobre células do carcinoma de Ehrlich, avaliou-se o tipo de morte celular promovida pelos tratamentos. A coloração com brometo de etídeo/laranja de acridina (BE/LA) revelou que o provável tipo de morte celular induzida pelos tratamentos trata-se de apoptose, uma vez que a grande maioria das células, após terem entrado em contato com a referida solução corante, adquiriram uma coloração laranja-avermelhada, característica da ocorrência do fenômeno apoptótico. Entretanto, em relação à avaliação da atividade nucleásica, verificada através da realização do teste de dano ao DNA plasmidial, observou-se que os efeitos antiproliferativo e citotóxico induzidos por EB-ETOH, f-CHCl3 e f-AcOEt, não são mediados por uma interação e dano direto ao DNA. Além disso, a realização desse ensaio permitiu observar que os extratos têm a capacidade de proteger o DNA do ataque induzido por EROs, excluindo-se portanto, a possibilidade de estarem exercendo seus efeitos citotóxico e antiproliferativo através da indução de estresse oxidativo no núcleo. As avaliações morfológicas e bioquímicas realizadas nas amostras obtidas de camundongos portadores do tumor ascítico de Ehrlich mostraram que os animais tratados com EB-ETOH e f-CHCl3 apresentaram menor ganho de peso corporal (26 e 31%, respectivamente) e de circunferência abdominal (52 e 58%, respectivamente), menor volume de líquido ascítico (46 e 43%, respectivamente), aumento do percentual de longevidade (48 e 40%, respectivamente) e da proporção de células inviáveis/viáveis (70 e 78%, respectivamente), quando comparados ao grupo controle negativo. Com a realização do modelo in vivo do TAE, observou-se ainda que o efeito antitumoral promovido por esses extratos é dose-dependente, uma vez que se apresentou-maior, quanto mais elevada a concentração de extrato administrada ao animal. A realização do ensaio do CAM, permitiu verificar que tanto o EB-ETOH, como f-CHCl3 de C. sylvetris, exercem um significativo efeito antiangiogênico, de maneira dose-dependente, onde a administração de 3,25; 7,5 e 15 µg/disco de EB-ETOH e f-CHCl3 foram capazes de diminuir o percentual de vasos, em torno de 54,5; 61,4 e 71% e 42,1; 59,1 e 70,9%, respectivamente. Por fim, cabe ressaltar que a realização da biometria dos embriões possibilitou observar que o tratamento dos mesmos com extrato bruto e fração clorofórmica não se apresentou tóxico, uma vez que não alterou o desenvolvimento embrionário nem a morfogênese externa, avaliados pelo comprimento total do embrião, razão comprimento cefálico/comprimento truncal e razão comprimento cefálico/comprimento total. Dessa forma, conclui-se que EB-ETOH e f-CHCl3 de C. sylvestris apresentaram efeito citotóxico, antiproliferativo, pró apoptótico e antitumoral in vitro e in vivo, sobre as células do carcinoma de Ehrlich. Tal efeito antitumoral mediado por esses extratos, não envolvem sua intercalação ao DNA, e sugere-se que se deva, pelo menos em parte, à inibição da formação de vasos e a conseqüente supressão nutricional das células tumorais.
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Efeito antitumoral e antiangiogênico dos extratos bruto e supercríticoo de Bidens pilosa Linné e Casearia sylvestris SwartzBücker, Nádia Cristina Falcão January 2012 (has links)
Dissertação (mestrado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciências da Saúde. Programa de Pós-Graduação em Farmácia / Made available in DSpace on 2012-10-26T11:29:08Z (GMT). No. of bitstreams: 0Bitstream added on 2015-03-18T20:42:43Z : No. of bitstreams: 1
310448.pdf: 1153725 bytes, checksum: a30e0a76515f31d96e76c1c23888958e (MD5) / O desenvolvimento de novas alternativas terapêuticas, como as que utilizam as plantas medicinais, tem despertado grande interesse no tratamento do câncer, pois as terapêuticas tradicionais não são capazes de regredir totalmente a evolução da doença e/ou apresentam elevada toxicidade. B. pilosa e C. sylvestris, plantas medicinais que possuem vários usos populares no Brasil e outros países americanos, têm sido indicadas para o tratamento de tumores. Neste estudo a extração supercrítica (ESC) foi o método de escolha, por seu bom fracionamento presentes na matriz vegetal. Assim sendo, o presente trabalho se propôs avaliar as atividades citotóxica, antiproliferativa, antitumoral, nucleásica, antiangiogênica e pró-apoptótica dos extratos bruto e supercrítico de B. pilosa e C. sylvestris em diferentes condições de extração utilizando modelos experimentais in vitro e in vivo. Para se atingir tal objetivo, foram realizados experimentos para avaliar primeiramente a atividade citotóxica (MTT) in vitro com extrato bruto (EB) (0-500 ?g/mL) e nos extratos na extração supercrítica (ESC) 250bar/40°C (0-100 ?g/mL), e a atividade antiproliferativa através do ensaio clonogênico (100 e 200 ?g/mL ) dos extratos de B. pilosa. Os resultados obtidos no MTT e ensaio clonogênico mostraram que os EB e ESC 250 bar/40°C de B. pilosa foram ineficazes em reduzir a viabilidade celular e antiproliferativa em células MCF-7 e T-24. A partir dos resultados obtidos com B. pilosa descritos acima, foram realizados os ensaios de viabilidade celular (MTT) em células MCF-7 (5, 10, 20, 40 e 80 ?g/mL) e T-24 (1; 2,5; 5; 7,7 e 10 ?g/mL) com as diversas condições de ESC de C. sylvestris. Já o EB de C. sylvestris foi realizado em células MCF-7, em concentrações de 62,5; 125; 250; 500 e 1000 ?g/mL e em T-24 nas concetrações de 10; 25; 50; 75 e 100 ?g/mL. Além disso, foi avaliado o efeito dos extratos (EtOH5% 300bar/40°C e EtOac5% 300bar/40°C) sobre o DNA plasmidial através da ativida nucleásica. A atividade antitumoral in vivo foi realizada em camundongos Balb/C inoculados com o TAE e tratados com EB de C. sylvestris e ESC (EtOH5% 300 bar/40°C e EtOac5% 300bar/40°C) de C. sylvestris nas concentrações de 0,1; 1 e 10 mg/kg e através da atividade antiangiogênica em ovos fertilizados de Gallus domesticus, através do ensaio da membrana corioalantóica (MCA), nas mesmas concentrações de 1, 5 e 10 mg/kg/dia. Também foi avaliada a capacidade pró-poptótica, através do ensaio de anexina V por citometria de fluxo em células TAE retiradas dos camundongos após o tratamento com os extratos supercríticos EtOH 5% 300bar/40°C de 0,1 mg/kg/dia, EtOac5% 300bar/40°C de 0,1mg/kg/dia e EtOac5% 300bar/40°C de 1 mg/kg/dia, que elevaram o percentual de células apoptóticas e necróticas de C. sylvestris. Os resultados demonstraram que os extratos supercríticos (EtOH5% 300bar/40°C e EtOac5% 300bar/40°C) de C. Sylvestris reduziram de maneira significativa a viabilidade de células MCF-7 e T-24. Em relação à avaliação da atividade nucleásica com o extrato supercrítico EtOH5% 300bar/40°C, se observou que houve dano direto ao DNA, sendo que o mesmo foi dose-dependente. Os ensaios in vivo demonstraram que os extratos supercríticos EtOH5% 300bar/40°C e EtOac5% 300bar/40°C apresentaram atividades antitumorais consideráveis. O tratamento com os extratos causaram importante inibição do crescimento tumoral nos camundongos, principalmente o extrato supercrítico EtOH5% 300bar/40°C (0,1 mg/kg/dia), causando também aumento do percentual médio de longevidade (PAL). O ensaio da anexina V revelou que a morte celular induzida pelos extratos supercríticos foi do tipo apoptose (EtOH 0,1 mg/kg/dia e EtOac 0,1 mg/kg/dia) e necrose (EtOac 1 mg/kg/dia). A atividade antiangiogênica dos EtOH5% 300bar/40°C e EtOAc5% 300bar/40°C (1, 5 e 10 mg/kg/dia) mostrou que os extratos foram capazes de reduzir de forma significativa o percentual de vasos sanguíneos em torno do embrião, sendo este efeito inversamente proporcional às concentrações. / The development of new therapies, such as therapies using medicinal plants, has aroused great interest in cancer treatment, because the available therapies are not able to completely regress the disease progression and/or presents high toxicity. B. pilosa and C. sylvestris, medicinal plants that possess multiple popular uses in Brazil and other American countries, has been indicated for tumor treatment. In this study, the supercritical extraction (ESC) was the choice method for its superior performance in isolation of chemical compounds. Therefore, this study aimed to assess the cytotoxic, antiproliferative, antitumor, nucleasic, antiangiogenic and apoptotic activity of supercritical extract of B. pilosa and C. sylvestris at different extraction conditions using experimental models in vitro and in vivo. To achieve this goal, experiments were performed previously to evaluate the cytotoxic activity (MTT) in vitro with EB (0-500 µg/mL) and supercritical extract 250bar/40 °C (0-100 µg/mL), and antiproliferative activity via the clonogenic assay of B. pilosa extracts. The results obtained from MTT and clonogenic assay demonstrated that the B. pilosa EB and supercritical extract 250bar/40°C were ineffective in reducing cell viability and antiproliferative in MCF-7 cells and T-24. Considering the results obtained with B. pilosa described above, assays were performed in cell viability (MTT) in MCF-7 cells (5, 10, 20, 40 and 80 ?g/mL) and T-24 (1; 2.5; 5; 7.7 and 10 µg/ml) with ESC conditions with C. sylvestris. The EBC was performed on MCF-7 cells at concentrations of 62.5, 125, 250, 500 and 1000 µg/mL and T-24 in concetrations 10, 25, 50, 75 and 100 µg/ mL. Furthermore, the effect of extracts (EtOH5% 300bar/40°C and EtOac5% 300bar/40 °C) on plasmid DNA through the nuclease activity was also evaluated. The in vivo antitumor activity was performed in Balb/C mice inoculated with TAE treated with EBC and supercritical extract (EtOH5% 300bar/40°C and EtOac5% 300bar/40°C) of C. sylvestris at concentrations of 0.1, 1 and 10 mg/Kg and through the antiangiogenic activity of Gallus domesticus eggs fertilized by the chorioallantoic membrane essay (CAM) at the same concentrations of 1, 5 and 10 mg/kg/day. The pro-apoptotic ability was also evaluated by annexin V essay using flow cytometry in TAE cells taken from mice after treatment with the supercritical extract EtOH5% 300bar/40°C of 0.1 mg/kg/day, EtOac5% 300bar/40°C of 0.1 mg/ kg/day and EtOac 1mg/kg/day of 1 mg/kg/day that increased the apoptotic and necrotic cells percentage of C. sylvestris. The results demonstrated that the supercritical extract (EtOH5% 300bar/40°C and EtOac5% 300bar/40 °C) of C. Sylvestris significantly reduced the viability of MCF-7 and T-24 cells. Regarding the nuclease activity assessment with the supercritical extract EtOH5% 300bar/40°C, there was a direct dose-dependent damage on DNA. In vivo assays demonstrated that supercritical extract EtOH5% 300bar/40°C and EtOac5% 300bar/40°C showed considerable antitumor activity. The treatment with the extracts caused significant inhibition of tumor growth in mice, mainly the supercritical extract EtOH5% 300bar/40°C (0.1 mg/kg/day), also causing increase in the average percentage of longevity (PAL). The annexin V essay revealed that the induced cell death by extracts was apoptosis type (EtOH5% 300bar/40°C 0.1 mg/kg/day and EtOac5% 300bar/40°C 0.1 mg/kg/day) and also necrosis type (EtOac5% 300bar/40°C 1mg/kg/day). The antiangiogenic activity of the EtOH5% 300bar/40°C and EtOac5% 300bar/40°C (1, 5 and 10 mg/kg/day) demonstrated that the extracts were able to reduce significantly the percentage of blood vessels around the embryo being this effect inversely proportional to their concentrations.
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Avaliação das atividades cicatrizante e antiinflamatória de Casearia sylvestris Swartz em animais e identificação dos marcadores químicosPierri, Elaise Gonçalves [UNESP] 30 August 2013 (has links) (PDF)
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000851828.pdf: 3616179 bytes, checksum: c1706c791e25d35b83bb5d81ab649593 (MD5) / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / Casearia sylvestris Sw. (Salicaceae) é uma espécie vegetal arbórea ou arbustiva conhecida como guaçatonga, utilizada na medicina popular por suas propriedades antisséptica, antiofídica, antiulcerativa, anti-inflamatória e cicatrizante. A partir da droga vegetal (folhas) desenvolveu-se tratamento prévio e controle de qualidade, com o objetivo de caracterizar a planta como matéria-prima farmacêutica. O extrato etanólico foi produzido a partir de 2,0 Kg da droga vegetal e o rendimento da extração foi de 11,8% (p/p). Foi realizada uma extração em fase sólida (EFS) com o extrato etanólico seco de folhas de C. sylvestris. A partir da fração EFSCs2 foi isolada uma substância por cromatografia em coluna de fase normal que foi identificada por análises espectrométricas como a casearina J. Análises cromatográficas foram realizadas para identificação e quantificação de diterpenos clerodânicos no extrato etanólico e suas frações. Os diterpenos clerodânicos caseargrewiina F, casearinas B e X foram identificados e o teor de diterpenos clerodânicos totais foi determinado por CLAE-DAD no extrato EEtCs e na fração EFSCs2, cujos valores foram 27,4% e 50,6%, respectivamente. Das análises por cromatografia líquida de alta eficiência foram também obtidos os teores de casearina J e caseargrewiina F no extrato etanólico das folhas, cujos valores foram de 2,35 e 1,1%, respectivamente. Para avaliarmos a atividade anti-inflamatória foi realizado o ensaio do edema de pata em ratos sendo os resultados obtidos promissores comparando-se à indometacina e tanto frações (EFSCs 1 e 2) como substâncias purificadas (Casgw F e Cas B) não apresentaram grau de lesão gástrica nos animais quando analisados macroscopicamente, ao contrário da indometacina que apresentou grau 5 (máximo) de lesão pelo índice de ulceração. Na atividade anti-inflamatória crônica (artrite)... / Casearia sylvestris Sw (Salicaceae) is a tree or shrub known as guaçatonga used in folk medicine for its antiseptic, antiophidian, antiulcerogenic, anti-inflammatory and wound healing properties. From the leaves it was developed pretreatment and quality control, in order to characterize the plant as pharmaceutical raw material. The ethanol extract was produced from 2.0 kg of the plant drug, and the extraction yield was 11.8% (w/w).It was performed a solid phase extraction (EFS) with 20.0 g of the ethanol extract of dried leaves of C. sylvestris. The purification was carried out in three steps, including a solid phase extraction by means of silica and activated carbon, normal-phase column chromatography and aqueous reversed-phase high efficiency chromatography. The diterpenes caseargrewiin F, casearins B and X. were used as standards. The clerodane type diterpenes were identified and quantified via HPLC-DAD in the extract EEtCs and EFSCs2 fraction whose values were 27.4% and 50.6%, respectively. From EFSCs2 fraction it was isolated a substance identified via spectrometric analysis as casearin J, existing in the literature. From the HPLC-UV analysis the casearin J and caseargrewiin F contents were gotten in the leaves ethanol extract, which values were 2.35 and 1.1% respectively. In order to evaluate the anti-inflammatory activity, rat's paw edema was performed where the results were promising regarding to indomethacin and, either extract (EEtCs), fractions (EFSCs 1 and 2) and purified substances (Cas B and CasgwF) showed no gastric wound in the animals stomach when macroscopically examined, in opposite to indomethacin that showed wound level 5 (maximum) on the ulceration index. In the chronic anti-inflammatory activity (arthritis) the reestablishment of the joints proportion for the group treated with dexamethasone (1 mg / kg) was 80 % and for the group treated with the ...
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Estudos fitoquímicos e avaliação da atividade antitumoral de extratos vegetais de Casearia sylvestris nanoencapsulados / Phytochemical studies and evaluation of the antitumoral activity of nanoencapsulated vegetable extracts of Casearia sylvestrisSantos, Karen Cristina dos 26 March 2013 (has links)
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Previous issue date: 2013-03-26 / Universidade Federal de Sao Carlos / The term cancer refers to neoplasias that are characterized by uncontrolled growth of cells that have some kind of genetic mutation. Prostate cancer is the cancer with the highest incidence in men. In its initial phase, the prostate cancer is hormone dependent, so current therapy is based on blocking the biosynthesis of hormones, but after the initial treatment, neoplastic cells grow back inordinately becoming resistant to treatment. Although there are drugs in clinical trials, it´s still necessary the search for molecules that exhibit activity against prostate cancer cells. Natural products have a great importance in cancer treatment. Due to its past history of beneficial effects on human health and especially its cytotoxic activity on cancer cells, the plant Casearia sylvestris was studied. However, the insolubility and low bioavailability in aqueous media hamper the use of these compounds. In an attempt to reduce this limitation, nanostructured systems for drug delivery have been recognized as promising vehicles. Polymeric nanoparticles have been used to overcome problems of solubility, bioavailability and aiming the target cells (tumor). The purpose of this work was the preparation of formulations of polymeric nanoparticles containing plant extract of C. sylvestris and evaluation of cytotoxic activity in cell lines and healthy prostate carcinoma. Thus, 3 factorial 22 designs were developed, and parameters as solution stability, recovery and encapsulation efficiency were considered. The nanoparticles were prepared by the method of nanoprecipitation, and the stability, recovery and encapsulation efficiency were satisfactory. In biological tests, the nanoparticles formulations showed selectivity up to 23 % on healthy and neoplastic cells, decreasing the viability of prostate carcinoma cells by 45%. Therefore, plant extracts of C. sylvestris shown to be active in cancer cells, and polymeric nanoparticle delivery systems may be promising in the treatment of prostate carcinoma. / O termo câncer refere-se a neoplasias que são caracterizadas pelo crescimento desordenado de células que apresentam algum tipo de mutação genética. O câncer de próstata é a neoplasia com maior incidência em homens. Em sua fase inicial, a neoplasia de próstata é hormônio dependente, dessa forma a terapia atual é baseada no bloqueio da biossíntese de hormônios, porém após o período inicial do tratamento as células neoplásicas voltam a crescer desordenadamente se tornando resistente ao tratamento. Apesar de existirem fármacos em triagens clínicas, ainda se faz necessária a procura de moléculas que exibem atividade contra células neoplásicas prostáticas. Os produtos naturais possuem grande importância no tratamento do câncer. Devido ao seu antigo histórico de efeitos benéficos a saúde humana e principalmente a sua atividade citotóxica sobre células neoplásicas a planta estudada foi a Casearia sylvestris. Porém a insolubilidade e biodisponibilidade baixa em meios aquosos dificulta a utilização destes compostos. Na tentativa de diminuir essa limitação, sistemas nanoestruturados de liberação de fármacos têm sido reconhecidos como veículos promissores. As nanopartículas poliméricas têm sido utilizadas para superar problemas de solubilidade, biodisponibilidade e direcionamento para células alvo (tumor). O objetivo desse trabalho foi o preparo de formulações de nanopartículas poliméricas contendo extrato vegetal de C. sylvestris e avaliação da atividade citotóxica em linhagens de células sadias e carcinoma de próstata. Para isso, foram desenvolvidos 3 planejamentos fatoriais 22 , para análise dos parâmetros: estabilidade em solução, eficiência de encapsulameto e recuperação. As nanopartículas foram preparadas pelo método de nanoprecipitação, e a estabilidade a eficiência de recuperação e eficiência de encapsulamento foram satisfatórias. Nos ensaios biológicos em células, as formulações de nanopartículas apresentaram seletividade de até 23 % entre células sadias e neoplásicas, diminuindo a viabilidade de células de carcinoma de próstata em 45 %. Dessa forma, extratos vegetais de C. sylvestris mostraram ser ativos em células neoplásicas, e nanopartículas poliméricas podem ser sistemas de liberação promissores no tratamento de carcinoma de próstata.
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Derivados de diterpenos clerodânicos de Casearia sylvestris Swartz obtidos por ensaios in vitro : caracterização estrutural e avaliação da atividade anti-inflamatória /Oda, Fernando Bombarda. January 2017
Orientador: André Gonzaga dos Santos / Coorientador: Eduardo José Crevelin / Banca: Alberto José Cavalheiro / Banca: Natália Valadares de Moraes / Resumo: Casearia sylvestris Swartz, conhecida como guaçatonga, está distribuída em todo Brasil e é muito utilizada na medicina popular, com registro etnofarmacológico desde 1877. Muitos desses usos, como o antiofídico, antiulcerogênico e antiinflamatório já foram comprovados em estudos farmacológicos, os quais mostraram também a baixa toxicidade aguda por via oral de seus derivados vegetais. Estudos in vivo revelaram que os diterpenos clerodânicos são os responsáveis pelas atividades antiulcerogênica e anti-inflamatória de C. sylvestris, o que valoriza ainda mais o uso medicinal desta planta. Entretanto, a constatação de que os diterpenos clerodânicos podem sofrer degradação em meio ácido levantaram dúvidas sobre quais substâncias realmente chegam aos receptores e têm atividade: diterpenos ou seus produtos de degradação? Para elucidar essa questão, os diterpenos clerodânicos isolados casearina J (cas J) e O (cas O) foram submetidos isoladamente à degradação ácida em fluido gástrico simulado sem enzimas (PDA) e, posteriormente, metabolizados com enzimas hepáticas da fração S9 (PDA-ME). A metabolização direta dos diterpenos com a fração S9 também foi realizada (PME). As respectivas casearinas remanescentes foram quantificadas em todos os produtos de metabolização. Posteriormente, foram conduzidos ensaios de síntese e/ou liberação de óxido nítrico em macrófagos RAW 267.7 estimulados por LPS in vitro. Para a determinação estrutural dos derivados formados foram utilizadas técnicas cromato... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: Casearia sylvestris Swartz known as guaçatonga is distributed throughout Brazil and has been widely used in folk medicine since 1877. Many of these uses, such as anti-fungal, antiulcerogenic and anti-inflammatory, have already been proven in pharmacological studies, also demonstrating low acute oral toxicity. In vivo studies have shown that clerodane diterpenes are responsible for the antiulcerogenic and antiinflammatory activities of C. sylvestris, which further enhances the medicinal use of this plant or its derivatives. However, the finding that clerodane diterpenes may suffer degradation in acid medium have raised doubts about the actual substances reached the receptors and carry out activity: diterpenes or their degradation products? In order to elucidate this issue, purified clerodane diterpenes casearin J (cas J) and O (cas O) were subjected to acid degradation in simulated gastric fluid without enzymes (PDA) alone and subsequently metabolized with S9 fraction (PDAME) liver enzymes. A direct metabolization of diterpenes with a S9 fraction (PME) was also performed. Respective remaining casearins were quantified in all the metabolizing products. In the end, macrophage stimulated by LPS in vitro assays of nitric oxide synthesis were conducted using as sample the purified cas J and O, PDA, PME and PDAME. Chromatographic (HPLC-PDA) and spectrometric techniques (UPLC-PDA-MS, 1H and and 13C NMR) were used for the structural determination of the generated derivatives. Ten substances were identified after the acid degradation of cas J (PDA-J), in addition to the remaining casearin (5.05%) and its epimer. Proposed structures... (Complete abstract click electronic access below) / Mestre
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Desenvolvimento e comparação de métodos em cromatografia líquida mono e bidimensional abrangente (LC×LC), utilizando ferramentas quimiométricas para análise de folhas de Casearia sylvestris /Correia, Lilian Cherubin. January 2016 (has links)
Orientador: Alberto José Cavalheiro / Banca: Paulo Clairmont Feitosa de Lima Gomes / Banca: Carmen Lúcia Cardoso / Resumo: Separações utilizando cromatografia líquida bidimensional têm atraído grande interesse nas últimas décadas devido ao seu elevado potencial no poder de separação para análises de misturas complexas. Apesar do uso de colunas ortogonais e da multiplicação teórica da capacidade de picos quando essa técnica é utilizada, uma questão permanece: "As técnicas bidimensionais são realmente melhores do que as monodimensionais para análises de extratos vegetais?". Esta questão motivou o presente trabalho, que consistiu em comparar o desempenho entre LC e LC×LC, utilizando amostras de folhas de Casearia sylvestris, também conhecida como "guaçatonga", uma árvore amplamente utilizada na medicina popular brasileira por apresentar diversas atividades biológicas. Além disso, devido ao grande volume de resíduos gerados em LC, a substituição de solventes convencionais por etanol (EtOH), um candidato menos tóxico e biodegradável, foi implementada. A parte mais desafiadora de qualquer cromatografia multidimensional é o desenvolvimento do método cromatográfico, pelo grande número de variáveis que devem atuar de forma integrada em uma única análise. Duas estratégias de desenvolvimento foram propostas neste trabalho. A primeira foi dividida em 4 etapas, que consistiram em selecionar o par de colunas mais ortogonal dentre as combinações disponíveis; o desenvolvimento de um método para a 1D utilizando planejamento experimental; seguido do estudo das melhores condições para a 2D (2tc, tempo de modulação ... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: Bidimensional liquid chromatographic separations have attracted intense interest over the past decade based on the potential improvements in resolving power they offer for analysis of complex samples. Despite the use of orthogonal columns and the theoretical multiplication of peak capacity from both dimensions, one question remains: "Are bidimensional techniques superior to monodimensional ones for analysis of vegetal extracts?". This question led to the purpose of the present work, that was to compare the performance between LC and LC×LC, using leaves from Casearia sylvestris, a widely used tree in Brazilian folk medicine by its biological activities. Furthermore, due to the large volume of waste generated by LC, the replacement of conventional solvents by ethanol (EtOH), a less toxic and biodegradable alternative solvent was chosen. The most challenging issue of any multidimensional chromatography is the method development, since the large number of interacting parameters that must work together in a single run. Two strategies for method development were used in this work. The first one was divided into 4 steps: experiments were carried out to select the most orthogonal pair of columns, 1D method development using design of experiments, another design of experiments for 2D conditions was proposed (2tc, modulation time and tre, re-equilibration time after each modulation) and aware of the best conditions for both dimensions, 2D gradient types were evaluated. The second strat... (Complete abstract click electronic access below) / Mestre
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