Submitted by Riscelly Santana Magalhães (riscellysm@yahoo.com.br) on 2018-04-17T14:08:44Z No. of bitstreams: 1 RISCELLY S MAGALHAES DISSERTAÇAO FINAL.pdf: 932501 bytes, checksum: c2d917ba32666cdb1776d82a3adf6c77 (MD5) / Approved for entry into archive by Maria Lucia Martins Frederico null (mlucia@fca.unesp.br) on 2018-04-17T15:32:45Z (GMT) No. of bitstreams: 1 magalhaes_rs_me_botfca.pdf: 878435 bytes, checksum: d236e45a87a39b3f6a57ac5f8dbbefb5 (MD5) / Made available in DSpace on 2018-04-17T15:32:45Z (GMT). No. of bitstreams: 1 magalhaes_rs_me_botfca.pdf: 878435 bytes, checksum: d236e45a87a39b3f6a57ac5f8dbbefb5 (MD5) Previous issue date: 2018-03-06 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / As brássicas são hortaliças de importante valor econômico, bem como boa fonte de minerais, vitaminas e de substâncias com propriedades anticarcinogênicas. O romanesco é uma hortaliça herbácea, com anatomia muito parecida à de brócolis e couve-flor, sendo mais tenra que a couve-flor. Foram realizados dois experimentos. No primeiro, objetivou-se avaliar a efetividade do uso de atmosfera modificada passiva na manutenção da qualidade pós-colheita do romanesco através das avaliações físico-químicas dos mesmos, mantidos sob refrigeração. No segundo, faz-se uma comparação entre as brássicas: romanesco, couve-de-folha, couve-flor, brócolis ramoso e brócolis de inflorescência única. No primeiro experimento foram realizados os seguintes tratamentos: T1: armazenamento em bandeja de poliestireno expandido sem filme; T2: armazenamento em bandeja de poliestireno expandido recoberta com filme de policloreto de vinila (PVC); T3: armazenamento em filme plástico de polietileno de baixa densidade (PEBD) de 0,6µ; T4: armazenamento em filme plástico de polietileno de baixa densidade (PEBD) de 0,8µ. Após a realização dos tratamentos os romanescos foram armazenados em câmara fria a temperatura de 5 ± 1 °C e UR entre 80 ± 5 % durante 16 dias, sendo avaliados de quatro em quatro dias. Utilizaram-se seis repetições por tratamento. Neste experimento foram realizadas as seguintes avaliações físico-químicas: teores de macronutrientes das folhas e inflorescências, perda de massa, sólidos solúveis, potencial hidrogeniônico (pH), acidez titulável, ácido ascórbico, açúcares redutores, clorofila a e b, antocianina e carotenoides. No segundo experimento foram avaliadas as características físico-químicas: número de folhas por planta; massa da matéria fresca das folhas; massa da matéria fresca da inflorescência; diâmetro transversal da inflorescência, circunferência da inflorescência, massa do ramo sem caule, sólidos solúveis, potencial hidrogeniônico (pH), acidez titulável, ácido ascórbico (exceto couve-de-folha), clorofila a e b, antocianina, carotenoides, açúcares redutores, proteína bruta, cinza, umidade, lipídeos e fibra bruta. Foi realizada análise de variância, teste de Tukey considerando-se um nível de significância p˂0,05, média e desvio padrão. Observou-se que para as características sólidos solúveis, pH, acidez titulável e ácido ascórbico, a utilização de filmes plásticos foi importante para a conservação e manutenção das características do romanesco, a partir do 12° dia de armazenamento, enquanto que para açúcares redutores, clorofila a e b, antocianina e carotenoides, foi importante em todos os tratamentos e dias de armazenamento. Para a perda de massa, a utilização de filmes plásticos foi essencial para a conservação do romanesco, possibilitando a viabilidade comercial do produto final. Para o número de folhas por planta; massa da matéria fresca das folhas; massa da matéria fresca da inflorescência; diâmetro transversal da inflorescência, circunferência da inflorescência e massa do ramo sem caule, as médias variaram, com exceção do número de folhas por planta e massa da matéria fresca das folhas do romanesco, quando comparado as demais brássicas. Para sólidos solúveis, pH, acidez titulável, pigmentos, açúcares redutores, proteína bruta, cinza, umidade, lipídeos e fibra bruta, foram observadas diferenças significativas entre as brássicas avaliadas. / The brassicas are vegetables of important economic value, as well as good source of minerals, vitamins and substances with anticarcinogenic properties. The romanesco is an herbaceous vegetable, with anatomy very similar to that of broccoli and cauliflower, being tenderer than cauliflower. Two experiments were carried out. In the first one, the objective was to evaluate the effectiveness of the use of passive modified atmosphere in the maintenance of post-harvest quality of the romanesco through the physical-chemical evaluations of the same, kept under refrigeration. In the second, a comparison is made between the brassicas: romanesco, cabbage leaf, cauliflower, branchy broccoli, and single inflorescence broccoli. In the first experiment the following treatments were performed: T1: tray storage of expanded polystyrene without film; T2: tray storage of expanded polystyrene coated with polyvinyl chloride (PVC) film; T3: storage of low density polyethylene (LDPE) film of 0.6μ; T4: low density polyethylene plastic film (LDPE) of 0.8μ. After the treatments, the romanescos were stored in a cold room at 5 ± 1 ° C and RH at 80 ± 5% for 16 days and evaluated every four days. Six replicates were used per treatment. In this experiment the following physical and chemical evaluations were performed: macronutrient contents of leaves and inflorescences, loss of mass, soluble solids, hydrogenation potential (pH), titratable acidity, ascorbic acid, reducing sugars, chlorophyll a and b, anthocyanin and carotenoids. In the second experiment the physical-chemical characteristics were evaluated: number of leaves per plant; mass of fresh leaf matter; mass of fresh inflorescence matter; (pH), titratable acidity, ascorbic acid (except leaf kale), chlorophyll a and b, anthocyanin, carotenoids, reducing sugars, crude protein , ash, moisture, lipids and crude fiber. A variance analysis was performed, Tukey's test considering a level of significance p˂0.05, mean and standard deviation. It was observed that for the soluble solid characteristics, pH, titratable acidity and ascorbic acid, the use of plastic films was important for the preservation and maintenance of the characteristics of the romanesco, from the 12 day of storage, whereas for reducing sugars, chlorophyll a and b, anthocyanin and carotenoids, was important in all treatments and storage days. For the loss of mass, the use of plastic films was essential for the preservation of the romanesco, allowing the commercial viability of the final product. For the number of leaves per plant; mass of fresh leaf matter; mass of fresh inflorescence matter; the transverse diameter of the inflorescence, the circumference of the inflorescence and the mass of the stem less branch, the averages varied, except for the number of leaves per plant and fresh matter mass of the leaves of the romanesco, when compared to the other brassicas. For soluble solids, pH, titratable acidity, pigments, reducing sugars, crude protein, ash, moisture, lipids and crude fiber, significant differences were observed among the evaluated brassicas.

Este trabalho teve por finalidade avaliar os efeitos de temperatura nos metabolismos de couves-flores e rúculas inteiras e minimamente processadas e diferentes materiais de embalagem na sua qualidade. No primeiro experimento, couves-flores, seus floretes, rúculas e suas folhas foram mantidos a 1º, 5º e 11ºC e determinados suas taxas de respiração, produção de etileno e quocientes de temperatura (Q10). No segundo, os floretes foram colocados em embalagens de filmes de polietileno de baixa densidade (PEBD), poliolefínicos coextrusados (PD - 941 e Clysar) e de policloreto de vinila, PVC esticável de 12 e 20 mm, envolvendo bandejas de poliestireno expandido mantidos a 5ºC. Análises físicas, químicas, físico-químicas, microbiológicas e sensoriais foram realizadas. No terceiro, folhas de rúculas foram colocadas em embalagens de filme de polietileno de baixa densidade (PEBD), laminado de polipropileno/polietileno (PP/PE), poliolefínicos coextrusados (PD - 900 e Clysar) e de policloreto de vinila, PVC esticável de 20 mm, envolvendo bandejas de poliestireno expandido e armazenados a 5ºC. Análises físicas, químicas, físico-químicas, microbiológicas e sensoriais foram realizadas. As taxas respiratórias das couves-flores inteiras e minimamente processadas foram iguais em quaisquer das temperaturas estudadas e sempre decrescentes até o 16º dia. A 1º e a 5ºC, tiveram a mesma taxa respiratória, diferindo das mantidas a 11ºC. Na faixa de 1º a 11ºC, o Q10 foi o mesmo para floretes e couves-flores; 2,1 e 2,2, respectivamente. Comportamento distinto tiveram as rúculas inteiras e as folhas soltas, pois, a 1ºC e a 5ºC, as taxas respiratórias foram significativamente iguais. A 11ºC, a partir do 4º dia, as folhas soltas começaram a apresentar taxas de respiração superiores às das inteiras, chegando a ser o dobro nos 14º e 16º dias de armazenamento. O Q10 médio para as rúculas inteiras situou-se ao redor de 3,54 e para as folhas soltas, 5,74, na faixa de 1º a 11ºC. Não foi detectada produção de etileno. As embalagens para floretes de couves-flores tiveram pouca ou nenhuma influência em seu pH, acidez, ºBrix, luminosidade, croma, Hue e firmeza. A embalagem PD - 941 foi a melhor por manter uma atmosfera modificada próxima à da recomendada para couves-flores (2-3% O2 e CO2 < 5%) e permitir menores perdas de vitamina C e melhores notas para vários atributos sensoriais de qualidade. Todas as embalagens mantiveram níveis de coliformes totais, bolores e leveduras bem abaixo dos limites permitidos pela Legislação Brasileira. As folhas de rúculas apresentaram níveis de coliformes totais ao redor de 10 5 UFC/g de produto no 10º dia a 5ºC, tornando-as impróprias para o consumo. Nestes 10 dias, as embalagens de PEBD e PP/PE se destacaram em relação às outras por reterem melhor a vitamina C e a coloração verde das folhas, por alcançarem melhores valores para sólidos solúveis, firmeza, presença de odor estranho, qualidade geral das folhas, deterioração e murchamento. As atmosferas modificadas desenvolvidas no interior destas embalagens, 5 a 7% O2 e 10 a 15% CO2, talvez sejam as mais indicadas para a conservação de rúculas minimamente processadas a 5ºC. / This work aimed at evaluating the effects of temperature on the metabolism of minimally processed and intact cauliflowers and salad rockets, and of different packaging materials on the quality of cauliflower florets and loose salad rocket minimally processed leaves. In the first experiment, intact cauliflowers, florets, intact salad rockets and loose salad rocket leaves were held at 1º, 5º and 11ºC and their respiration rates, ethylene production and temperature quotients (Q10) determined. In the second experiment, the florets were packed in low density polyethylene film (PEBD), co-extruded polyolefins (PD - 941 and Clysar AFG) and in 12 and 20 mm polyvinyl chloride (PVC) overwrapping expanded polystyrene trays, and maintained at 5ºC/85-95% relative humidity for 14 days. In the third experiment, loose salad rocket leaves were held under the same conditions in bags of low density polyethylene film (PEBD), laminated polypropylene/polyethylene film (PP/PE), co-extruded polyolefins, PD - 900 and Clysar HP and in expanded polystyrene trays overwrapped with 20 mm polyvinyl chloride (PVC). In the second and third experiments, physical, chemical, physical-chemical, microbiological and sensory analyses were performed. The respiration rates of both intact and fresh-cut cauliflowers declined over the 16-day period and were significantly the same at all temperatures studied. At 1º and 5ºC the respiration rates were the same but differed from those (cauliflower and florets) at 11ºC. From 1º to 11ºC, the Q10 for the cauliflowers was 2.2 and for the florets, 2.1. In contrast, the intact and fresh-cut salad rocket respiration rates were the same at 1º and 5ºC. At 11ºC, the fresh-cut salad rocket showed higher respiration rates than the intact ones as from the 4 th day. By the end of the experiment (14 th and 16 th days) the respiration rates of the fresh-cut salad rockets were twice those of the intact salad rockets, whose Q10 was about 3.45 from 1° to 11°C as compared to 5.74 for the fresh cut product. No ethylene production was detected by any sample at any temperature. The packaging materials had little or no effect on pH, titratable acidity, soluble solids, luminosity, chroma, hue and firmness of the florets at 5ºC. PD - 941 seemed to be the best packaging for florets, maintaining the atmosphere closest to that recommended for intact cauliflower (2-3%O2, CO2 < 5%), showing the lowest vitamin C losses and the best scores for several of the quality attributes. In general, all the packaging materials kept the yeast and mold counts low and the total coliform counts far below the maximum values permitted by the Brazilian Legislation, during 14 days at 5ºC, except for fresh-cut salad rocket leaves, which presented 10 5 CFU/g total coliforms by the 10 th day, being inappropriate for consumption. For 10 day periods, PEBD and PP/PE were the best packaging materials for green color and vitamin C retention, higher soluble solids, firmness, lack of off-odors, overall quality, decay and shriveling. The modified atmosphere generated inside these packaging materials (5-7% O2, 10-15% CO2) seemed the best for maintaining the quality of fresh-cut salad rockets held at 5ºC.

A couve-flor está entre as folhosas mais produzidas na região do Cinturão Verde de São Paulo. A planta apresenta alto valor nutricional para os consumidores e relevante importância econômica e social para os agricultores. Em campos comerciais, têm sido observadas plantas exibindo sintomas de enfezamento e deformação da inflorescência, além da necrose dos vasos condutores. A doença foi denominada de enfezamento e a sua incidência e severidade têm se tornado mais intensas nos últimos anos, afetando a produção e levando ao abandono do cultivo. O quadro sintomatológico levantou a suspeita de que a doença pudesse estar sendo causada por fitoplasmas. Desta forma, este trabalho teve como objetivos detectar e identificar os fitoplasmas associados às plantas doentes de couve-flor, demonstrar a sua patogenicidade, buscar possíveis insetos vetores do agente patogênico e analisar a distribuição espacial da doença no campo. Amostras de plantas coletadas na região do Cinturão Verde ou enviadas de outras localidades tiveram o DNA total extraído e submetido a reações de PCR. A amplificação de fragmentos genômicos de 1,2 kb evidenciaram a presença de fitoplasmas nos tecidos de 66% das plantas sintomáticas. A detecção de fitoplasmas em plantas assintomáticas revelou a ocorrência de infecção latente e que plantas sem sintomas aparentes podem ser portadoras do patógeno. O emprego de PCR com primers específicos, análises convencionais e virtuais de RFLP e análise filogenética permitiram a identificação de fitoplasmas afiliados aos grupos 16SrIII-J, 16SrXIII e 16SrXV-A, com predominância para a ocorrência do grupo 16SrIII. Secções histológicas feitas à mão da região vascular de plantas de couve-flor doentes observadas em microscópio de luz revelaram que a região do floema apresentava-se escurecido e com início de degeneração celular. Fitoplasmas do grupo 16SrXIII foram encontrados em cigarrinhas da espécie Balclutha hebe coletadas em campo cultivado com couve-flor. Estes insetos foram utilizados em experimentos de transmissão e foram capazes de inocular fitoplasmas em plantas sadias de couve-flor e vinca. A transmissão também ocorreu a partir de plantas doentes de couve-flor para plantas sadias de vinca, através do emprego da planta parasita cuscuta. Análise epidemiológica da doença foi feita em dez campos de cultivo de couve-flor, localizados no município de Sorocaba-SP. Análises do índice de dispersão, lei de Taylor modificada e áreas isopatas evidenciaram que plantas de couveflor com sintomas de enfezamento encontraram-se agregadas no campo, e que os focos da doença tinham início nos bordos da cultura. O presente trabalho demonstrou que o enfezamento da couve-flor está associado aos fitoplasmas, os quais podem estar sendo transmitidos por cigarrinhas, sendo que, em termos epidemiológicos, a doença tem padrão agregado de distribuição no campo. / Cauliflower is among the most produced vegetable in the region of the Green Belt of Sao Paulo State. It has high nutritional value and relevant social and economic importance for farmers. In commercial fields, it has been observed plants exhibiting symptoms of stunting, deformation of the inflorescence and conductive vessel necrosis. The disease was named cauliflower stunt and its incidence and severity have become more intense in the past years, the production is being affected and the field is abandoned by the growers. The symptomatology raised the suspect that the disease could be caused by phytoplasmas. Thus, this study aimed to detect and identify phytoplasmas associated to diseased cauliflowers, demonstrate its pathogenicity, look for possible insect vectors of the pathogen and analyse the spatial distributions of disease in the field. Plant samples collected in the region of the green belt or sent from other locations had the total DNA extracted and subjected to PCR reactions. Amplification of genomic fragments of 1.2 kb revealed the presence of phytoplasmas in 66% of the symptomatic plants. The detection of phytoplasmas in asymptomatic plants revealed the occurrence of latent infection and that plants without visible symptoms may be infected. The use of specific primers, conventional and virtual RFLP analysis and phylogenetic analysis allowed the identification of phytoplasmas affiliated to 16SrIII-J, 16SrXIII and 16SrXV-A groups, and predominantly the occurrence of 16SrIII group. Histological sections made by hand of the vascular region of symptomatic cauliflower were observed under light microscope and revealed that the phloem was darkened and with beginning of cellular degeneration. The 16SrXIII phytoplasma was found in Balclutha hebe from cauliflower field. These insects were used in experiments and were able to transmit phytoplasmas to healthy cauliflower and periwinkle. The transmission also occurred from diseased cauliflower to healthy periwinkle through the parasitic plant dodder. Epidemiological analysis of the disease was made in ten plots of cauliflower, located in Sorocaba, SP. Dispersion index, modified Taylors law and isopath areas analysis showed that cauliflower plants with symptoms of stunting were aggregated in field and initial foci were at the edge of the plot. This study demonstrated that cauliflower stunt is associated with phytoplasmas, that may be being transmitted by insects (Homoptera) and, in epidemiological terms, the diseased plants show aggregated pattern of distribution in the field.

Submitted by (lucia.rodrigues@ufrpe.br) on 2017-03-27T16:20:29Z No. of bitstreams: 1 Viviane Jurema Lopes Borges Rodrigues.pdf: 780077 bytes, checksum: c60257b425b95e0377eca176e4335872 (MD5) / Made available in DSpace on 2017-03-27T16:20:29Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Viviane Jurema Lopes Borges Rodrigues.pdf: 780077 bytes, checksum: c60257b425b95e0377eca176e4335872 (MD5) Previous issue date: 2003-03-13 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPES / Cabbage (Brassica oleracea var. capitata ), cauliflower (Brassica oleracea var. botrytis), Chinese cabbage (Brassica pekinnensis) and broccoli (Brassica oleracea var. italica) have high economic expression in the Agreste region in the State of Pernambuco, Brazil. However, the occurrence of foliar diseases such as Alternaria black spot, caused by Alternaria brassicicola, represent great worry in farming systems areas. Thus, this research aimed to analyze the epidemiology of Alternaria black spot on Taibyo cultivar of Chinese cabbage in different farming systems (conventional, organic and protected); at four transplant seasons and two irrigation systems under organic farming; at three transplant spacing under conventional farming; as well as analyze the comparative epidemiology of Alternaria black spot in 22 brassica cultivars being nine broccoli, five Chinese cabbage, four cauliflower andfour cabbage, under conventional and organic farming systems. Evaluations of the beginning of initial symptoms (BIS) and severity of the disease on every leaf of 10 plants were made. Disease progress curves were ploted, and epidemiology were compared through by BIS, maximum disease severity (ymax), disease progress rate (DPR), and the area under disease progress curves (AUDPC) in all experiments. The October 2000 transplant season was the most propitious to Alternaria black spot, while the July 2001 transplant season was unfavorable to disease development, since it took longer for the symptoms to show, and the values of ymax and DPR were lower than in other periods. Comparing the three farming systems, the highest values of ymax, DPR and AUDPC were observed in organic farming, indicating that this condition was the most favorable to Alternaria black spot. Trickle irrigation compared to the sprinkle system showed lower development of Alternaria blackspot, represented by lower values of ymax, DPR and AUDPC. As far as spacing is concerned, the combination 0.33 x 0.50 m showed the lowest values of ymax and AUDPC. All brassicacultivars evaluated were susceptible to A. brassicicola. In most situations, significative difference was detected among cultivars grown in the same farming system. Higher disease intensity was obeserved in organic farming system. Chinese cabbage (Tropical Pride and Tropical Delight), cauliflower (Arfak), and cabbage (Fuyutoyo and Rubro) had the lowest disease levels. . On all situations, significative correlations were noted among the severity of Alternaria black spot disease and both the highest temperature average and the relative air humidity in the 14 days prior to the disease evaluation. / O cultivo de repolho (Brassica oleracea var. capitata ), couve-flor (Brassica oleracea var. botrytis), couve-chinesa (Brassica pekinnensis) e brócolis (Brassica oleracea var. italica) têm grande expressão econômica na região Agreste do Estado de Pernambuco. No entanto, a ocorrência de doenças foliares como a alternariose, causada por Alternaria brassicicola, representa grande preocupação ao sistema de produção das áreas de plantio. Neste contexto, este trabalho teve como objetivos analisar a epidemiologia da alternariose em couve-chinesa, cv. Taibyo, em diferentes sistemas de cultivo (convencional, orgânico e protegido), em quatro épocas de plantio e dois sistemas de irrigação no cultivo orgânico, em três espaçamentos de plantio no cultivo convencional, bem como analisar a epidemiologia comparativa da alternariose em 22 cultivares de brássicas, sendo nove de brócolis, cinco de couve-chinesa, quatro de couve-flor e quatro de repolho, nos sistemas de produção convencional e orgânico.Foram avaliados o início do aparecimento dos sintomas (IAS) da alternariose e a severidade da doença em todas as folhas de 10 plantas por parcela. Curvas de progresso da doença foram plotadas e as epidemias comparadas em relação ao IAS, severidade máxima (ymax), taxa estimada de progresso da doença (TPD) e área abaixo da curva de progresso da doença (AACPD) em todos os experimentos. Na comparação entre os três sistemas de cultivo, no orgânico foram observados os maiores valores de ymax, TPD e AACPD, indicando que este sistema propiciou condições mais favoráveis para a alternariose. O transplantio em outubro de 2000 foi o mais propício para a alternariose da couve-chinesa no cultivo orgânico, enquanto o realizado em julho de 2001 foi desfavorável ao desenvolvimento da doença, pois os sintomas apareceram mais tardiamente e os valores de ymax e TPD foram menores que nos outros períodos. No cultivo irrigado por gotejamento ocorreu menor desenvolvimento da alternariosedo que no irrigado por microaspersão, representado pelos valores inferiores de ymax, TPD eAACPD. Com relação ao espaçamento, na combinação 0,33 x 0,50 m foram registrados os menores valores de ymax e AACPD. Todas as cultivares de brássicas avaliadas foram suscetíveis a A. brassicicola, embora na maioria das situações tenha sido detectada diferença significativa entre as cultivares dentro de um mesmo sistema de cultivo. Em geral, foram constatados maiores níveis de intensidade da alternariose no sistema orgânico que no convencional. As cultivares de couve-chinesa Tropical Pride e Tropical Delight, de couve-flor Arfak e de repolho Fuyutoyo e Rubro merecem destaque pelos menores níveis de alternariose apresentados nos dois sistemas de cultivo. Em todas as situações analisadas foram constatadas correlações significativas entre a severidade da alternariose e as médias da temperatura e da umidade relativa do ar nos 14 dias que antecederam a avaliação da doença

A couve-flor está entre as folhosas mais produzidas na região do Cinturão Verde de São Paulo. A planta apresenta alto valor nutricional para os consumidores e relevante importância econômica e social para os agricultores. Em campos comerciais, têm sido observadas plantas exibindo sintomas de enfezamento e deformação da inflorescência, além da necrose dos vasos condutores. A doença foi denominada de enfezamento e a sua incidência e severidade têm se tornado mais intensas nos últimos anos, afetando a produção e levando ao abandono do cultivo. O quadro sintomatológico levantou a suspeita de que a doença pudesse estar sendo causada por fitoplasmas. Desta forma, este trabalho teve como objetivos detectar e identificar os fitoplasmas associados às plantas doentes de couve-flor, demonstrar a sua patogenicidade, buscar possíveis insetos vetores do agente patogênico e analisar a distribuição espacial da doença no campo. Amostras de plantas coletadas na região do Cinturão Verde ou enviadas de outras localidades tiveram o DNA total extraído e submetido a reações de PCR. A amplificação de fragmentos genômicos de 1,2 kb evidenciaram a presença de fitoplasmas nos tecidos de 66% das plantas sintomáticas. A detecção de fitoplasmas em plantas assintomáticas revelou a ocorrência de infecção latente e que plantas sem sintomas aparentes podem ser portadoras do patógeno. O emprego de PCR com primers específicos, análises convencionais e virtuais de RFLP e análise filogenética permitiram a identificação de fitoplasmas afiliados aos grupos 16SrIII-J, 16SrXIII e 16SrXV-A, com predominância para a ocorrência do grupo 16SrIII. Secções histológicas feitas à mão da região vascular de plantas de couve-flor doentes observadas em microscópio de luz revelaram que a região do floema apresentava-se escurecido e com início de degeneração celular. Fitoplasmas do grupo 16SrXIII foram encontrados em cigarrinhas da espécie Balclutha hebe coletadas em campo cultivado com couve-flor. Estes insetos foram utilizados em experimentos de transmissão e foram capazes de inocular fitoplasmas em plantas sadias de couve-flor e vinca. A transmissão também ocorreu a partir de plantas doentes de couve-flor para plantas sadias de vinca, através do emprego da planta parasita cuscuta. Análise epidemiológica da doença foi feita em dez campos de cultivo de couve-flor, localizados no município de Sorocaba-SP. Análises do índice de dispersão, lei de Taylor modificada e áreas isopatas evidenciaram que plantas de couveflor com sintomas de enfezamento encontraram-se agregadas no campo, e que os focos da doença tinham início nos bordos da cultura. O presente trabalho demonstrou que o enfezamento da couve-flor está associado aos fitoplasmas, os quais podem estar sendo transmitidos por cigarrinhas, sendo que, em termos epidemiológicos, a doença tem padrão agregado de distribuição no campo. / Cauliflower is among the most produced vegetable in the region of the Green Belt of Sao Paulo State. It has high nutritional value and relevant social and economic importance for farmers. In commercial fields, it has been observed plants exhibiting symptoms of stunting, deformation of the inflorescence and conductive vessel necrosis. The disease was named cauliflower stunt and its incidence and severity have become more intense in the past years, the production is being affected and the field is abandoned by the growers. The symptomatology raised the suspect that the disease could be caused by phytoplasmas. Thus, this study aimed to detect and identify phytoplasmas associated to diseased cauliflowers, demonstrate its pathogenicity, look for possible insect vectors of the pathogen and analyse the spatial distributions of disease in the field. Plant samples collected in the region of the green belt or sent from other locations had the total DNA extracted and subjected to PCR reactions. Amplification of genomic fragments of 1.2 kb revealed the presence of phytoplasmas in 66% of the symptomatic plants. The detection of phytoplasmas in asymptomatic plants revealed the occurrence of latent infection and that plants without visible symptoms may be infected. The use of specific primers, conventional and virtual RFLP analysis and phylogenetic analysis allowed the identification of phytoplasmas affiliated to 16SrIII-J, 16SrXIII and 16SrXV-A groups, and predominantly the occurrence of 16SrIII group. Histological sections made by hand of the vascular region of symptomatic cauliflower were observed under light microscope and revealed that the phloem was darkened and with beginning of cellular degeneration. The 16SrXIII phytoplasma was found in Balclutha hebe from cauliflower field. These insects were used in experiments and were able to transmit phytoplasmas to healthy cauliflower and periwinkle. The transmission also occurred from diseased cauliflower to healthy periwinkle through the parasitic plant dodder. Epidemiological analysis of the disease was made in ten plots of cauliflower, located in Sorocaba, SP. Dispersion index, modified Taylors law and isopath areas analysis showed that cauliflower plants with symptoms of stunting were aggregated in field and initial foci were at the edge of the plot. This study demonstrated that cauliflower stunt is associated with phytoplasmas, that may be being transmitted by insects (Homoptera) and, in epidemiological terms, the diseased plants show aggregated pattern of distribution in the field.

Este trabalho teve por finalidade avaliar os efeitos de temperatura nos metabolismos de couves-flores e rúculas inteiras e minimamente processadas e diferentes materiais de embalagem na sua qualidade. No primeiro experimento, couves-flores, seus floretes, rúculas e suas folhas foram mantidos a 1º, 5º e 11ºC e determinados suas taxas de respiração, produção de etileno e quocientes de temperatura (Q10). No segundo, os floretes foram colocados em embalagens de filmes de polietileno de baixa densidade (PEBD), poliolefínicos coextrusados (PD – 941 e Clysar) e de policloreto de vinila, PVC esticável de 12 e 20 mm, envolvendo bandejas de poliestireno expandido mantidos a 5ºC. Análises físicas, químicas, físico-químicas, microbiológicas e sensoriais foram realizadas. No terceiro, folhas de rúculas foram colocadas em embalagens de filme de polietileno de baixa densidade (PEBD), laminado de polipropileno/polietileno (PP/PE), poliolefínicos coextrusados (PD – 900 e Clysar) e de policloreto de vinila, PVC esticável de 20 mm, envolvendo bandejas de poliestireno expandido e armazenados a 5ºC. Análises físicas, químicas, físico-químicas, microbiológicas e sensoriais foram realizadas. As taxas respiratórias das couves-flores inteiras e minimamente processadas foram iguais em quaisquer das temperaturas estudadas e sempre decrescentes até o 16º dia. A 1º e a 5ºC, tiveram a mesma taxa respiratória, diferindo das mantidas a 11ºC. Na faixa de 1º a 11ºC, o Q10 foi o mesmo para floretes e couves-flores; 2,1 e 2,2, respectivamente. Comportamento distinto tiveram as rúculas inteiras e as folhas soltas, pois, a 1ºC e a 5ºC, as taxas respiratórias foram significativamente iguais. A 11ºC, a partir do 4º dia, as folhas soltas começaram a apresentar taxas de respiração superiores às das inteiras, chegando a ser o dobro nos 14º e 16º dias de armazenamento. O Q10 médio para as rúculas inteiras situou-se ao redor de 3,54 e para as folhas soltas, 5,74, na faixa de 1º a 11ºC. Não foi detectada produção de etileno. As embalagens para floretes de couves-flores tiveram pouca ou nenhuma influência em seu pH, acidez, ºBrix, luminosidade, croma, Hue e firmeza. A embalagem PD – 941 foi a melhor por manter uma atmosfera modificada próxima à da recomendada para couves-flores (2-3% O2 e CO2 < 5%) e permitir menores perdas de vitamina C e melhores notas para vários atributos sensoriais de qualidade. Todas as embalagens mantiveram níveis de coliformes totais, bolores e leveduras bem abaixo dos limites permitidos pela Legislação Brasileira. As folhas de rúculas apresentaram níveis de coliformes totais ao redor de 10 5 UFC/g de produto no 10º dia a 5ºC, tornando-as impróprias para o consumo. Nestes 10 dias, as embalagens de PEBD e PP/PE se destacaram em relação às outras por reterem melhor a vitamina C e a coloração verde das folhas, por alcançarem melhores valores para sólidos solúveis, firmeza, presença de odor estranho, qualidade geral das folhas, deterioração e murchamento. As atmosferas modificadas desenvolvidas no interior destas embalagens, 5 a 7% O2 e 10 a 15% CO2, talvez sejam as mais indicadas para a conservação de rúculas minimamente processadas a 5ºC. / This work aimed at evaluating the effects of temperature on the metabolism of minimally processed and intact cauliflowers and salad rockets, and of different packaging materials on the quality of cauliflower florets and loose salad rocket minimally processed leaves. In the first experiment, intact cauliflowers, florets, intact salad rockets and loose salad rocket leaves were held at 1º, 5º and 11ºC and their respiration rates, ethylene production and temperature quotients (Q10) determined. In the second experiment, the florets were packed in low density polyethylene film (PEBD), co-extruded polyolefins (PD – 941 and Clysar AFG) and in 12 and 20 mm polyvinyl chloride (PVC) overwrapping expanded polystyrene trays, and maintained at 5ºC/85-95% relative humidity for 14 days. In the third experiment, loose salad rocket leaves were held under the same conditions in bags of low density polyethylene film (PEBD), laminated polypropylene/polyethylene film (PP/PE), co-extruded polyolefins, PD – 900 and Clysar HP and in expanded polystyrene trays overwrapped with 20 mm polyvinyl chloride (PVC). In the second and third experiments, physical, chemical, physical-chemical, microbiological and sensory analyses were performed. The respiration rates of both intact and fresh-cut cauliflowers declined over the 16-day period and were significantly the same at all temperatures studied. At 1º and 5ºC the respiration rates were the same but differed from those (cauliflower and florets) at 11ºC. From 1º to 11ºC, the Q10 for the cauliflowers was 2.2 and for the florets, 2.1. In contrast, the intact and fresh-cut salad rocket respiration rates were the same at 1º and 5ºC. At 11ºC, the fresh-cut salad rocket showed higher respiration rates than the intact ones as from the 4 th day. By the end of the experiment (14 th and 16 th days) the respiration rates of the fresh-cut salad rockets were twice those of the intact salad rockets, whose Q10 was about 3.45 from 1° to 11°C as compared to 5.74 for the fresh cut product. No ethylene production was detected by any sample at any temperature. The packaging materials had little or no effect on pH, titratable acidity, soluble solids, luminosity, chroma, hue and firmness of the florets at 5ºC. PD – 941 seemed to be the best packaging for florets, maintaining the atmosphere closest to that recommended for intact cauliflower (2-3%O2, CO2 < 5%), showing the lowest vitamin C losses and the best scores for several of the quality attributes. In general, all the packaging materials kept the yeast and mold counts low and the total coliform counts far below the maximum values permitted by the Brazilian Legislation, during 14 days at 5ºC, except for fresh-cut salad rocket leaves, which presented 10 5 CFU/g total coliforms by the 10 th day, being inappropriate for consumption. For 10 day periods, PEBD and PP/PE were the best packaging materials for green color and vitamin C retention, higher soluble solids, firmness, lack of off-odors, overall quality, decay and shriveling. The modified atmosphere generated inside these packaging materials (5-7% O2, 10-15% CO2) seemed the best for maintaining the quality of fresh-cut salad rockets held at 5ºC.

Das Pflanzenwachstum fördernde Bakterien (PGPB) kommen ubiquitär sowohl an der Wurzel als auch am Spross der Pflanzen vor und sie können über direkte oder indirekte Mechanismen einen bedeutenden Beitrag zur Stickstoffernährung der Pflanzen leisten. Die vorliegende Arbeit umfasst a) die Isolierung von PGPB, welche das Wachstum verschiedener Pflanzenarten fördern und durch Fusarien verursachte Pflanzenkrankheiten bekämpfen, b) die Analyse der Möglichkeiten Probleme der Pflanzenernährung durch den Einsatz von PGPB zu lösen, c) die Entwicklung neuer molekularbiologischer Methoden zur Messung der Diversität und Aktivität der PGPB. Im Rahmen dieser Arbeit wurden Methoden zur Beschreibung der Diversität von rhizosphären PGPB entwickelt und verbessert um Verbindungen zwischen applizierten PGPB und deren Aktivitäten zu prüfen. Die sensitive quantitative real-time-PCR Methode wurde zur Quantifizierung bzw. zum Nachweis der inokulierten PGPB und zum Nachweis des nitrogenase-reduktase-Gens (nifH), des Markergens für potentiell diazotrophe Bakterien. Bakterienartspezifische Primer wurden aus dem Sequenzvergleich der 16S-23S ISR ausgewählter Bakterienstämme selektiert und Protokolle zur Quantifizierung dieser Bakterienarten erarbeitet. Die nifH Gen Quantifizierung an Pflanzen eröffnet die Möglichkeit Schlüsselorganismen in der assoziativen biologischen Luftstickstoffbindung zu identifizieren und kurzfristige Reaktionen der Bakteriengesellschaften auf Umweltveränderungen und Regulationsmechanismen in situ zu analysieren. / Plant growth promoting bacteria (PGPB) are ubiquitous in both plant root and shoot, and are important contributors to the nitrogen-input of plants exerting their positive effects on plant growth directly or indirectly through different mechanisms. The present work focuses on a) the isolation of PGPB, which promotes the growth of different plant cultures and controls plant diseases caused by Fusarium species, b) the prospects of PGPB to solve plant nutritional problems, c) developing new molecular methods for the assessment of their diversity and activity. In the frame of this thesis, the methods for the description of the diversity of root colonizing PGPB have been developed and improved to provide links between introduced PGPB abundance and activities. The approach used was based on the sensitive real – time PCR detection/quantification of introduced PGBP and the nitrogenase reductase gene (nifH), which served as a marker gene for potential diazotrophs. The amplified 16S-23S ISR sequences of studied bacteria were subjected to strain – specific primer design and a highly specific bacteria quantification protocol were developed. The bacteria quantification protocol was based on real – time PCR using strain specific primers in order to evaluate the colonization ability of studied bacteria, which were inoculated to plant roots. The results presented in this thesis have shown that monitoring of nifH amount in plant root is a suitable and promising approach to link inoculated diazotrophic bacteria abundance and its potential activity. The study of nifH gene abundance in plant offers the opportunity to identify key players in asymbiotic nitrogen fixation, to study short-term community responses in changing environments, or to analyze the effect of regulation in situ.

<p>U ovom radu su ispitani hemijski sastav i biolo&scaron;ka aktivnost vrsta&nbsp;<em> Brassica oleracea&nbsp; </em>i<em>&nbsp; Brassica rapa</em>&nbsp; poreklom iz organskog i konvencionalnog sistema proizvodnje. Ispitivanja hemijskog sastava su obuhvatila određivanje volatilnih komponenata primenom headspace GC-MS tehnike, kvalitativnu analizu sokova ispitivanih vrsta pomoću LC-DAD-MS/MS tehnike, kvantifikaciju odabranih fenolnih jedinjenja&nbsp;pomoću LC-MS/MS tehnike i spektrofotometrijsko određivanje sadržaja ukupnih glukozinolata, fenola i flavonoida i sadržaja ukupnih monomernih antocijana. Biolo&scaron;ka aktivnost povrća je ispitana određivanjem antioksidantnog potencijal, antimikrobne i antitumorske aktivnosti sokova. Dobijeni rezultati pokazuju da su glavne volatilne komponente ispitivanih vrsta degradacioni proizvodi masnih kiselina i organosumpornih jedinjenja od kojih neke od identifikovanih komponenata predstavljaju ključne mirisne komponente. Na osnovu njihove distribucije nije bilo moguće utvrditi uticaj sistema proizvodnje na miris i ukus ispitivanih vrsta. Pomoću LC-DAD-MS/MS i LC-MS/MS tehnike je utvrđeno prisustvo primarnih metabolita, slobodnih hidroksibenzoevih i hidroksicimetnih kiselina, derivate hinske kiseline&nbsp;sa hidroksicimetnim kiselinama, glikozida flavonola, biflavonoida, i kumarina u sokovima spitivanih vrsta. Pored toga u svim sokovima subili prisutni kondenzacioni proizvodi degradacionih proizvoda indolnih glukozinolata sa askorbinskom kiselinom-&nbsp; askorbigen i metoksiaskorbigen. U sokovima crvenog kupusa su bili prisutni antocijani. Najveći sadržaj ukupnih glukozinolata je određen u brokoliju, dok je crveni kupus sadržao najveći sadržaj ukupnih fenola ukupnih flavonoida kao i hinske kiseline. Crveni kupus je bio varijetet koji je ispoljio najvi&scaron;i antioksidantni kapacitet u svim primenjenim testovima, brokoli i karfiol su ispoljili najjaču antimikrobnu aktivnost, dok je kelj bio varijetet sa najjačim antitumorskim delovanjem. Na osnovu analize hemijskog sastava i biolo&scaron;ke aktivnosti vrsta <em>B</em>. <span id="cke_bm_177S" style="display: none;">&nbsp;</span><em>oleracea</em><span id="cke_bm_177E" style="display: none;">&nbsp;</span> i&nbsp;<em> B. rapa</em>&nbsp; može se <span id="cke_bm_178E" style="display: none;">&nbsp;</span>zaključiti da u zavisnosti od primenjenog tipa&nbsp;proizvodnje mogu biti pobolj&scaron;ane neke od karakteristika ispitivanih vrsta i da je uticaj sistema proizvodnje značajan za pojedine varijetete, a nikako za celu vrstu. U konačnom obliku može se zaključiti da bi potencijalna kombinacija sokova crvenog kupusa, brokolija, karfiola i kelja mogla ostvariti značajno hemopreventivno i hemoterapeutsko delovanje, ispoljavajući istovremeno antioksidantnu, antimikrobnu i antitumorsku aktivnost.</p> / <p>Chemical composition and biological activity of<em>&nbsp; Brassica oleracea</em>&nbsp; and&nbsp; <em>B. rapa&nbsp;</em> species were investigated in the present work. Investigation of chemical composition&nbsp; encompassed determination of volatile compounds by headspace GC-MS technique, qualitative analysis of juices of investigated vegetables by LC-DAD-MS/MS technique, quantification of selected phenolic compounds by LC-MS/MS technique and spectrophotometric determination of total content of glucosinolates, phenolic compounds and flavonoids and total content of monomeric anthocyanes. Biological activity of vegetables was investigated by determination of antioxidant capacity, antimicrobial and antitumorigenic effect of juices. Obtained results showed that main volatile compounds were degradation products of fatty acids and organo-sulphur compounds among which some of the identified components were the key aroma compounds. Based on their distribution it was not possible to evaluate influence of cropping system on aroma and taste of investigated species. By LC-DAD-MS/MS and LC-MS/MS techniques, it was determined the presence of primary metabolites, freehydroxybenzoic and hydroxycinnamic acids, derivatives of quinic acid and hidroxicinnamic acids, flavonol glucosides, biflavnoids&nbsp; and a cumarin in juices of the investigated species. Furthermore, condensation products of degradation products of indole glucosinolates with ascorbic acid-&nbsp; ascorbigen and metoxiascorbigen were present in all juices. Anthocyanes were present in juices of red cabbage. The highest total content of glucosinolates was determined in broccoli, while red cabbage had the highest total phenolic content, total flavonoid content, as well as content of qunic acid. Red cabbage was a variety that showed the highest antioxidant capacity measured by different assays. Broccoli and cauliflower expressed the highest antimicrobial potential, while Savoy cabbage was a variety with the highest antitumor effect. Investigation of chemical composition and biological activity showed that applied cropping conditions may be useful for improving some of the characteristics of investigated species and significance of cropping system only&nbsp; for particular varieties, but not for the whole species in general. As the conclusion, potential&nbsp; combination of juices of red cabbage, broccoli, cauliflower and Savoy cabbage could be potent chemopreventive and chemotherapeutic agent, expressing simultaneously antioxidant, antimicrobial and antitumor activity.</p>