Made available in DSpace on 2014-06-11T19:23:45Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2012-07-05Bitstream added on 2014-06-13T18:19:57Z : No. of bitstreams: 1 silva_alm_me_jabo.pdf: 515451 bytes, checksum: e4541fd6e085b2151dc035caa5bdb7d9 (MD5) / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / O rhG-CSF é uma citocina que eleva o número de neutrófilos e também mobiliza células-tronco hematopoéticas (CTH) para o sangue periférico, porém sua aplicação pode ocasionar a queda de plaquetas. O objetivo do presente trabalho foi estabelecer entre três diferentes doses (5, 10 e 20μg/Kg/dia) do rhG-CSF qual proporcione mobilização de pelo menos 10 CTH CD34+/μL ao sangue periférico, elevação do número de neutrófilos, além de avaliar seu efeito sobre o número de plaquetas em cães sadios. O rhG-CSF (filgrastine) foi aplicado em cães sadios durante quatro dias e a contagem no número de CTH CD34+/μL, neutrófilos e plaquetas foi obtida durante a aplicação da citocina e sete dias após o término da aplicação. A leucocitose ocorreu devido à elevação dose-dependente de neutrófilos segmentados que ocorreu 24 horas após a primeira aplicação do medicamento com diferença estatística. Entretanto, 48 horas após a última dose, os valores retornaram aos níveis basais nos três grupos. O número de plaquetas reduziu após a primeira dose e não recuperou até o último momento de avaliação. Em relação às CTH CD34+, para os grupos que receberam 10 e 20μg/Kg/dia ocorreu elevação dose–dependente 24h após primeira aplicação com diferença estatística; no grupo que recebeu 5μg/Kg/dia os valores não elevaram. A dose de 5μg/Kg/dia foi suficiente para elevar os valores de neutrófilos, porém não acarretou na mobilização de CTH CD34+. As três doses administradas aos animais levou a queda nos valores de plaquetas, sendo necessária precaução ao administrar em cães trombocitopenicos / The rhG-CSF is a cytokine that increase the number of neutrophils and also mobilizes hematopoietic stem cell (HSC) to peripheral blood, but their application can cause a drop in platelets. The aim this work was to establish between three different doses (5, 10 e 20 μg/kg/day) of rhG-CSF which provides mobilization at least 10 HSC CD34+/μL to peripheral blood, increased number of neutrophils and to evaluate its effect on the number platelets in normal dogs. The rhG-CSF (Filgrastine®) was applied from healthy dogs for four days and couting the number of HSC CD34+, neutrophils and platelets was obtained during the application of cytokine and seven days after the application. The leukocytosis occurred due to increase dose relation of segmented neutrophils that occurred 24 hours after the first application of the drug with a statistical difference. However, 48 hours after the last dose, the values returned to baseline levels in the three groups. The number of platelets reduced after the first dose and not returns to the last time point. Regarding the number HSC CD34+, for the groups receiving 10 and 20 μg/kg/day occurred increase dose relation 24 hours after the first application with a statistical difference; in the group that received 5 μg/kg/day, values did not improve. The dose of 5 μg/kg/day was enough to raise the values of neutrophils, but did not result in the mobilization of HSC CD34+. All three doses administered to animals led to a drop in platelets, necessitating caution when administering in thrombocytopenic dogs

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:24:15Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2012-02-27Bitstream added on 2014-06-13T19:30:54Z : No. of bitstreams: 1 tasca_ki_me_botfm.pdf: 1366114 bytes, checksum: a6a5d90366e1c3b04e75d3635d087c88 (MD5) / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / Universidade Estadual Paulista (UNESP) / O Brasil é um dos países mais afetados pelo HIV, com notificação de 608.230 casos acumulados de 1980 até junho de 2011, com a maior concentração na região Sudeste. Sabe-se que, entre muitos outros fatores a progressão para aids sofre influência de variáveis metabólicas, virológicas e imunológicas. Além disso, persistente ativação imune e contínuo estímulo inflamatório, mesmo durante a terapia antirretroviral (TARV) ou ausência de sintomatologia, podem levar ao desequilíbrio de várias citocinas e influenciar, potencialmente, a progressão da própria doença ou outras comorbidades, que são determinantes para aumentar a morbidade e mortalidade, associadas ou não à aids. Foram estudados 80 voluntários atendidos no Serviço de Ambulatórios Especializados e Hospital Dia “Domingos Alves Meira”, FMB/UNESP e no Hemocentro de Botucatu, divididos em quatro grupos: 20 pacientes com infecção pelo HIV, virgens de tratamento (G1); 20 pacientes em uso de TARV com carga viral (CV) detectável (G2); 24 pacientes em uso de TARV com CV indetectável (G3); 16 indivíduos saudáveis, grupo controle (GC). O objetivo do estudo foi avaliar parâmetros imunovirológicos (contagem de linfócitos T CD4+, T CD8+ e dosagem da CV plasmática do HIV) de pacientes infectados pelo HIV, correlacionando citocinas séricas inflamatórias (IL-6, IL-17, TNF- e IFN-) e antinflamatória (IL-10) pelo método de ELISA, tempo de infecção, uso de TARV e outros exames laboratoriais (hemograma, perfil lipídico, glicemia, enzimas hepáticas, DHL, creatinina e PCR). As comparações das variáveis numéricas em relação aos grupos foram feitas utilizando o teste de Mann-Whitney, Kruskal-Wallis, seguido de teste de Dunn e análise da variância ANOVA, seguido de Tukey... / Brazil is one of the most affected countries by HIV, reporting 608,230 cases that have accumulated from 1980 to June 2011 with the largest concentration in the south-east. It is known that, among many other factors, progression to AIDS is influenced by metabolic, virological and immunological variables. Moreover, persistent immune activation and continuous inflammatory stimulus, even during antiretroviral therapy (ART), or the absence of symptomatology may lead to the instability of various cytokines and potentially influence the progression of the disease itself or other comorbidities that are determinant to increase morbidity and mortality in association with AIDS or not. Eighty volunteers were assisted and studied in the Specialized Outpatient Service and Day Hospital “Domingos Alves Meira” at the Botucatu School of Medicine (FMB) - UNESP and at the Hemocenter of Botucatu. They were divided into four groups: 20 HIV-infected patients who had never been treated (G1); 20 patients using ART with a detectable viral load (VL) (G2); 24 patients using ART with undetectable VL (G3); 16 healthy individuals, control group (CG). The study aimed at evaluating immunovirological parameters (T CD4+, T CD8+ lymphocyte count and HIV plasma VL quantification) of HIV-infected patients and correlate them with inflammatory (IL-6, IL-17, TNF- and IFN-) and anti-inflammatory (IL-10) serum cytokines by the ELISA method, time of infection, ART use and other laboratory tests (hemogram, lipid profile, glycemia, liver enzymes, LDH, creatinine and CRP). Comparison of numeric variables in relation to the groups were performed by using the Mann-Whitney, Kruskal-Wallis test followed by Dunn’s test, analysis of variance ANOVA and Tukey’s test. Associations were made between variables and the study groups by analyzing contingency tables with the application of the... (Complete abstract click electronic access below)

Made available in DSpace on 2016-06-07T17:12:01Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2015-02-03. Added 1 bitstream(s) on 2016-06-07T17:16:33Z : No. of bitstreams: 1 000865423.pdf: 1848743 bytes, checksum: 5434932daa9880daa223b56bf1dbc009 (MD5) / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / Os objetivos do presente estudo são: 1) Estudar o perfil inflamatório das lesões periapicais de dentes com infecções endodônticas primárias através dos níveis das citocinas inflamatórias: IL-1beta, IL-6, TNF-alfa; correlacionando com a presença de sintomatologia clínica; 2) Investigar os níveis das metaloproteinases [MMP-1, -2 e -9], inibidores de metaloproteinase [TIMP-1 e -2] e complexos MMP/TIMP [MMP1/TIMP1, MMP1/TIMP2, MMP2/TIMP1, MMP2/TIMP2, MMP9/TIMP1 e MMP9/TIMP2], presentes nos tecidos periapicais de dentes com infecções endodônticas primárias e lesão periapical; correlacionando com a presença de sintomatologia clínica e reabsorção óssea; 3) Correlacionar os níveis das citocinas inflamatórias [IL-1beta, IL-6 e TNF-alfa] e seus antagonistas [IL1-RA, IL6-RA, sTNF-R1], presentes nos tecidos periapicais; 4) Estudar a efetividade de diferentes medicações intracanal no controle do processo inflamatório periapical, através do monitoramento dos níveis de citocinas inflamatórias, [IL-1beta, IL-6, TNF-alfa], MMP's [MMP-1, -2 e -9], TIMP's [TIMP-1 e -2] e complexos [MMP1/TIMP1, MMP1/TIMP2, MMP2/TIMP1, MMP2/TIMP2 MMP9/TIMP1, MMP9/TIMP2] coletadas dos tecidos periapicais. Vinte dentes unirradiculares com necrose pulpar e lesão periapical foram selecionados. Após o preparo biomecânico (PBM) os dentes foram divididos aleatoriamente em 2 grupos de acordo com a medicação intracanal utilizada: Ca(OH)2+SSL [Ca(OH)2 + solução salina fisiológica]; e Ca(OH)2+CLX [Ca(OH)2 + clorexidina gel 2%]. Para a análise dos biomarcadores inflamatórios, foram realizadas coletas utilizando cones de papel estéril/apirogênico, ultrapassando 2 mm além ápice para obtenção do fluído intersticial. As coletas foram realizadas em dois momentos operatórios : coleta após PBM (Coleta inicial-CIF1) e coleta após 14 dias de medicação intracanal (Coleta final-CFF2). Citocinas... / The aim of this study was: 1) To investigate the inflammatory profile of apical periodontitis disease present in primarily infected root canals determined by the levels of inflammatory cytokines : IL-1beta, IL-6, TNF-alfa; and to correlate with the presence of clinical features; 2) To investigate the levels of metalloproteinases [MMP-1, -2, -9], metalloproteinase inhibitors [TIMP-1 e -2] ; complexes MMP/TIMP [MMP1/ TIMP1, MMP1/TIMP2, MMP2/TIMP1, MMP2/TIMP2, MMP9/TIMP1 e MMP9/TIMP2], present in apical peridontitis disease from teeth with primary endodontic infection; and to correlate with the presence of clinical features; 3) To correlate the levels of IL-1beta, IL-6, TNF-alfa with their respectively antagonists - IL1-RA, IL6-RA, s TNF-R1, all present in apical peridontitis; 4) To evaluate the effectiveness of different root canal medications in the inflammatory process by monitoring the levels of inflammatory cytokines [IL-1beta, IL-6, TNF-alfa], MMP's [MMP-1,-2,-9]; TIMP [TIMP-1 and -2] and complexes [MMP1/TIMP1, MMP1/TIMP2, MMP2/TIMP1, MMP2/TIMP2, MMP9/TIMP1 e MMP9/TIMP2] in apical periodontitis. Twenty patients with single-rooted teeth that had necrotic pulp and periapical periodontitis will be selected. After BMP teeth will be randonly devided into 2 groups according to the root canal medication selection: Ca(OH)2+SSL [Ca(OH)2 + Saline Solution]; e Ca(OH)2+CHX [Ca(OH)2 + chlorhexidine gel 2%]. Samples will be collected from intersticial fluid by using sterile/ apyrogenic paper points. Samples will performed at two diferente times: After chemomechaical preparation (S1) and after 14 of root canal medication (S2). Inflammatory cytokines, metalloproteinases and their antagonists will be dosage by ELISA-assay. The levels of inflammatory cytokines, metalloproteinases and their antagonists will be typed on a spreadsheet and statiscally analyzed by SPSS for Windows and Statistic packpage 9.0. ...

Made available in DSpace on 2016-08-12T18:48:44Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2015-05-25. Added 1 bitstream(s) on 2016-08-12T18:50:58Z : No. of bitstreams: 1 000865661.pdf: 1072062 bytes, checksum: 10bc25031317dce0b4b6d74a8b1c13c1 (MD5) / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP) / A cárie e a doença periodontal são doenças infecciosas que refletem falha no equilíbrio da microbiota bucal, e seus agentes podem ser transmissíveis. A clorexidina tem sido utilizada como agente antimicrobiano no combate à carie, porém seu uso é controverso devido à ocorrência de efeitos colaterais. Assim, tem sido incansável a busca de novos produtos com atividade antimicrobiana e com menor efeito colateral. A própolis é um produto resinoso, elaborado pelas abelhas a partir de diversas partes das plantas, e se destaca por suas propriedades biológicas e farmacológicas, e pela possibilidade de aplicação na indústria farmacêutica e alimentícia. Neste projeto, visamos comparar a própolis com um agente antimicrobiano (clorexidina), bem como a combinação própolis/clorexidina, diretamente sobre Streptococcus mutans ou sobre a ação de monócitos humanos contra esta bactéria. Para tal, monitoramos a qualidade do produto odontológico elaborado à base de própolis em relação à sua estabilidade e possível contaminação durante 120 dias. Avaliamos o efeito do produto sobre S. mutans, determinando a concentração inibitória mínima e a concentração bactericida mínima, bem como seu efeito sobre monócitos humanos, avaliando a expressão de receptores celulares, a via de sinalização do NF-kB, a produção de citocinas pró- e antiinflamatórias, e a atividade bactericida de monócitos contra este agente causador da cárie. Tomados em conjunto, os dados evidenciaram que o produto apresentou-se palatável e livre de contaminantes, além de inibir o crescimento de S. mutans. Este produto pode favorecer o reconhecimento de antígenos por monócitos, ativar a via de sinalização do NF-kB e aumentar a atividade bactericida de monócitos humanos contra S. mutans. Ademais, o produto também desempenhou papel anti-inflamatório quanto à produção de citocinas, o que pode trazer benefícios no tratamento de doenças... / The caries and periodontal disease are infectious diseases, reflecting failure to balance the oral microbiota, whose agents can be transmitted. Chlorhexidine has been used as anti-caries agent, but its use is controversial due to the occurrence of side-effects. Thus, there is a need to search for new products with antimicrobial activity and fewer side-effects. Propolis is a resinous product produced by bees from different parts of the plants, and stands out for its biological and pharmacological properties, and the application possibility in the pharmaceutical and food industry. In this project, we aimed to investigate propolis, an antimicrobial agent (chlorhexidine) and the combination propolis/chlorhexidine, directly on S. mutans and the action of human monocytes against this bacteria. The quality of propolis-based odontological product was analysed with regard to its stability and possible contamination for 120 days. We evaluated the effect of this product on S. mutans determining the minimum inhibitory concentration and minimum bactericidal concentration, and its effect on human monocytes, evaluating cell receptors expression, the NF-kB signaling pathway, the production of pro- and anti-inflammatory cytokines, and the bactericidal activity of these cells against S. mutans. Together, data showed that propolis/chlorhexidine in combination was palatable and contaminant-free, besides inhibiting the growth of S. mutans. The product may favor the recognition of antigens by human monocytes, activate the NF-kB signaling pathway and increase the bactericidal activity of monocytes against S. mutans. Also, the combination played an anti-inflammatory role in cytokine production, what can be beneficial in the treatment of periodontal diseases. The findings open perspectives for further research, denoting the practical application of this research and its implications for the pharmaceutical industry / FAPESP: 11/22112-0

Made available in DSpace on 2016-12-09T13:52:16Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2015-12-04. Added 1 bitstream(s) on 2016-12-09T13:55:19Z : No. of bitstreams: 1 000867906.pdf: 965887 bytes, checksum: d1a5b342453f51ebb99b6d2d7f7d7ecf (MD5) / A esporotricose é uma micose de distribuição universal causada por fungos termodimórficos do complexo de espécies de Sporothrix schenckii. A forma mais comum da doença é a linfocutânea que compromete pele, tecido subcutâneo e gânglios linfáticos regionais. Células do sistema imune inato reconhecem patógenos por meio de receptores de reconhecimento de padrão (PRRs). Dentre esses, podemos destacar a família dos receptores do tipo Toll-like (TLRs) e dos receptores de lectina do tipo C (CLRs), os quais possuem membros capazes de reconhecer antígenos fúngicos. A interação entre os PRRs e os padrões moleculares associados aos patógenos (PAMPs) desencadeia uma série de vias de sinalização envolvidas na modulação da resposta adaptativa subsequente e na potencialização da capacidade fagocítica e microbicida dos macrófagos e de outros fagócitos. A Dectina-1 é um CLR amplamente expresso em macrófagos, células dendríticas e neutrófilos, sendo um receptor para β-glucana implicado no processo de fagocitose, no burst oxidativo e na produção de fatores solúveis, tais como citocinas e quimiocinas. O objetivo do presente estudo foi avaliar o papel das β-glucanas, reconhecidas ligantes de Dectina-1, na fagocitose e na produção de intermediários do oxigênio (H2O2) e nitrogênio (NO) e de mediadores solúveis por macrófagos peritoneais de camundongos Balb/c durante a infecção por S. schenckii ATCC 16345. Para tanto, os macrófagos foram desafiados com a fração álcali-insolúvel (F1) extraída da parede celular de S. schenckii, composta principalmente de β-glucanas, com uma β-1,3-glucana pura comercial ou com o fungo íntegro termo-inativado. Nossos resultados mostraram que tanto a fagocitose das leveduras de S. schenckii, como a produção de NO, H2O2 e das citocinas IL-10, TNF-α e IL-1β se dá pelo reconhecimento tanto das β-glucanas... / Sporotrichosis is a worldwide distributed mycosis caused by thermodimorphic fungi from the Sporothrix schenckii species complex. The disease's most common form is the lymphocutaneous, which compromises the skin, subcutaneous tissue and regional lymphatic ganglia. Cells from the innate immune system recognize pathogens through pattern recognition receptors (PRRs). Among these, the toll-like (TLRs) and C-type lectin (CLRs) receptors can be highlighted for having members capable of recognizing fungal antigens. The interaction between PRRs and pathogen-associated molecular patterns (PAMPs) triggers various signaling pathways involved in modulating the following adaptive response and in potentiating the phagocytic and microbicidal capabilities of macrophages and other phagocytes. Dectin-1 is a widely expressed CLR in macrophages, dendritic cells and neutrophils, being a receptor for β-glucan implicated in the phagocytic process, the oxidative burst, and in the production of soluble mediators such as cytokines and chemokines. The present study was aimed at assessing the role of β-glucans, known Dectin-1 ligands, in the phagocytosis and production of soluble mediators, oxygen (H2O2), and nitrogen (NO) intermediates by peritoneal macrophages from Balb/c mice during infection with S. schenckii ATCC 16345. In order to do that, the macrophages were challenged with the alkali-insoluble fraction (F1) extracted from the S. schenckii cell wall, which is mainly composed of β-glucans, with a purified commercial β-1,3-glucan, or with whole heat-killed S. schenckii yeasts. Our results showed that phagocytosis of the S. schenckii yeasts, as well as production of NO, H2O2, and the cytokines IL-10, TNF-α and IL-1β occur by the recognition of both the β-glucans and other additional components found in the F1 fraction. Furthermore, Dectin-1 expression was augmented on days 10 and 15 ...

?rea de concentra??o: Farmacologia de produtos naturais e plantas medicinais. / Submitted by Rodrigo Martins Cruz (rodrigo.cruz@ufvjm.edu.br) on 2015-10-23T16:44:04Z No. of bitstreams: 2 valeria_gomes_almeida.pdf: 1888901 bytes, checksum: 721c755514ecbe7426926c79618f632a (MD5) license_rdf: 22974 bytes, checksum: 99c771d9f0b9c46790009b9874d49253 (MD5) / Approved for entry into archive by Rodrigo Martins Cruz (rodrigo.cruz@ufvjm.edu.br) on 2015-10-23T16:45:38Z (GMT) No. of bitstreams: 2 valeria_gomes_almeida.pdf: 1888901 bytes, checksum: 721c755514ecbe7426926c79618f632a (MD5) license_rdf: 22974 bytes, checksum: 99c771d9f0b9c46790009b9874d49253 (MD5) / Made available in DSpace on 2015-10-23T16:45:38Z (GMT). No. of bitstreams: 2 valeria_gomes_almeida.pdf: 1888901 bytes, checksum: 721c755514ecbe7426926c79618f632a (MD5) license_rdf: 22974 bytes, checksum: 99c771d9f0b9c46790009b9874d49253 (MD5) Previous issue date: 2012 / A Pseudobrickellia brasiliensis (Asteraceae), conhecida como arnica-do-campo, ? uma planta nativa da flora brasileira cuja prepara??o alco?lica tem sido utilizada como anti-inflamat?rio pela medicina popular. No entanto, os mecanismos biol?gicos envolvidos nessa atividade, ainda n?o foram devidamente elucidados. Nesse contexto, o presente estudo avaliou o potencial anti-inflamat?rio de P. brasiliensis atrav?s da an?lise da produ??o de citocinas anti e pr?-inflamat?rias por leuc?citos mononucleares do sangue perif?rico. Foram utilizados extratos de P. brasiliensis ap?s extra??o com os solventes Acetato de Etila (ACE) e Etanol (ETA), ambos dilu?dos em Dimetilsulf?xido (DMSO), bem como o extrato aquoso dilu?do em PBS (AQU). A citotoxicidade dos extratos, ap?s 24h ou 5 dias de cultura celular, foi avaliada por meio da t?cnica de exclus?o com Azul de Tripan e, tais resultados foram confirmados por meio de ensaios de apoptose e necrose, ap?s marca??o com Anexina V-FITC e Iodeto de Prop?deo. No ensaio de inibi??o da produ??o de citocinas, C?lulas Mononucleares do Sangue Perif?rico humano (PBMC) foram incubadas em meio de cultura, contendo Miristato-Acetato de Forbol (PMA) e Ionomicina como agentes estimuladores, na aus?ncia ou presen?a do extrato AQU nas concentra??es finais de 0,025 mg/mL, 0,05 mg/mL ou 0,1 mg/mL. Tamb?m, foi avaliado o efeito do extrato AQU sobre a resposta proliferativa de linf?citos ao est?mulo mitog?nico Fitohemaglutinina (PHA) como teste complementar na an?lise de ativa??o celular. De acordo com os dados obtidos, os extratos ACE e ETA apresentaram um alto grau de citotoxicidade, sendo, portanto exclu?dos das an?lises posteriores, que avaliaram o perfil de produ??o de citocinas e prolifera??o. O extrato AQU, al?m de n?o induzir apoptose e necrose, n?o demonstrou a??o t?xica, mesmo ap?s 5 dias de cultura. Nas culturas tratadas com AQU na concentra??o final de 0,1 mg/mL foi observada redu??o significativa da express?o de IFN-? e TNF-? em resposta ? estimula??o com PMA e ionomicina. O efeito inibit?rio do extrato AQU, tamb?m, pode ser observado por meio da diminui??o da resposta proliferativa de linf?citos ao PHA. Estes achados sugerem que o efeito anti-inflamat?rio atribu?do ? P.brasiliensis na medicina popular pode, pelo menos em parte, ser devido ? inibi??o da produ??o de citocinas pr?-inflamat?rias por linf?citos, bem como da resposta proliferativa. Ensaios futuros, utilizando subst?ncias isoladas e identificadas a partir do extrato aquoso, s?o necess?rios para fortalecer os dados aqui apresentados e para demonstrar quais os mecanismos moleculares envolvidos nas a??es inibit?rias apresentadas no presente trabalho. / Disserta??o (Mestrado) ? Programa Multic?ntrico de P?s-gradua??o em Ci?ncias Fisiol?gicas, Universidade Federal dos Vales do Jequitinhonha e Mucuri, [2012]. / ABSTRACT Pseudobrickellia brasiliensis (Asteraceae), also known as ?Arnica-do-Campo? is a native plant from Brazilian flora and its alcoholic preparation has been used as anti-inflammatory in folk medicine. However, the biological mechanisms involved in the anti-inflammatory activity are not well elucidated. In this context, the present study evaluated the anti-inflammatory potential of P. brasiliensis by performing an anti- and pro-inflammatory cytokine analysis on human peripheral blood leucocytes as well as cell activation, measured by proliferation assay. We used P. brasiliensis extracts utilizing different solvents including Ethyl Acetate (ACE) and ethanol (ETA), both diluted in dimethylsulfoxide (DMSO), and aqueous extract (AQU) diluted in PBS. After 24h or 5 days, in vitro cytotoxicity promoted by those extracts was evaluated using the exclusion technique with Trypan Blue. Furthermore, apoptosis and necrosis was measured by Annexin V-FITC and propidium iodide staining, after 4 hours of culture. For cytokine production inhibitory assay, humans Peripheral Blood Mononuclear Cells (PBMC) were incubated in medium containing Phorbol Myristate Acetate (PMA) plus ionomycin as stimulating agents in the absence or presence of AQU extract at the final concentrations 0.025 mg/ml, 0.05 mg/ml or 0.1 mg/ml. We also assessed, as a complementary test for cellular activation analysis, the effect of AQU extract on lymphocytes proliferative response after mitogenic stimulation with Phytohemagglutinin (PHA). According to the obtained data, ACE and ETA showed a high cytotoxicity rate and, therefore, they were not used in cytokine and proliferative analysis. The AQU extracts, besides not inducing apoptosis and necrosis, showed no toxic effects even after 5 days of culture. In cultures treated with AQU extract at final concentration of 0.1 mg / ml was observed a significant reduction in IFN-? and TNF-? expression in response to PMA stimulation. The AQU extract inhibitory effect can also be observed by the decrease of lymphocytes proliferative rate in response to PHA stimulation. These findings suggest that P.brasiliensis anti-inflammatory effect can be, at least in part, due PBMC pro-inflammatory cytokines inhibition as well as the proliferative response. Further assays, using aqueous extract isolated and identified substances are needed to strengthen the presented data and to demonstrate the molecular mechanisms involved in inhibitory actions reported in this study.

Submitted by BRUNO CÉSAR ALMEIDA COSTA (brunnocesaracosta@hotmail.com) on 2018-05-14T19:21:25Z No. of bitstreams: 1 Dissertação _ Bruno Costa _ Completa 14_05.pdf: 1611275 bytes, checksum: 5bb1aa80f51943c2d30ac036450829f3 (MD5) / Approved for entry into archive by Silvana Alvarez null (silvana@ict.unesp.br) on 2018-05-14T19:42:43Z (GMT) No. of bitstreams: 1 costa_bca_me_sjc.pdf: 1611275 bytes, checksum: 5bb1aa80f51943c2d30ac036450829f3 (MD5) / Made available in DSpace on 2018-05-14T19:42:44Z (GMT). No. of bitstreams: 1 costa_bca_me_sjc.pdf: 1611275 bytes, checksum: 5bb1aa80f51943c2d30ac036450829f3 (MD5) Previous issue date: 2018-05-02 / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP) / No tecido ósseo, as injúrias decorrentes da radioterapia variam desde osteopenia até osteoradionecrose e devido a estas alterações, pacientes irradiados portadores de implantes vêm demonstrando maior taxa de insucesso. O objetivo neste estudo foi avaliar os efeitos da radioterapia, simulando uma dose total de um tratamento radioterápico convencional para pacientes oncológicos, na neoformação óssea ao redor de implantes instalados em fêmures de ratos, assim como na expressão de citocinas IL-6 e TGF-ß. Foram utilizados neste estudo 36 ratos que receberam implantes rosqueados de titânio grau V nos fêmures esquerdos. Os animais foram divididos em 3 grupos: a) Grupo controle (C): cirurgia de colocação dos implantes (tecido sadio sem irradiação); b) Grupo irradiação (I): irradiação e após 4 semanas cirurgia de colocação dos implantes c) Grupo irradiação imediata (IP): cirurgia de colocação dos implantes e depois de 24 horas irradiação. A irradiação foi realizada em duas etapas com doses de 15 Gy, totalizando ao final da segunda dose 30 Gy. Os animais foram eutanasiados nos períodos de 3 dias, 2 e 7 semanas após o tratamento. No momento da eutanásia, 0,5 ml de sangue foi coletado e os níveis séricos de IL-6 e TGF-β foram mensurados pelo método imunoenzimático (ELISA). Em cada período 04 animais foram submetidos à microtomografia computadorizada (µCT), visando avaliar a neoformação óssea na interface osso-implante. Os valores obtidos foram submetidos ao teste ANOVA um fator para análise estatística e quando necessário foi aplicado o teste de comparação múltipla de Tukey (p<0,05). Nos resultados obtidos por meio da análise de microtomografia em geral não foi observada diferença estatística entre os grupos (p>0,05). Contudo, no parâmetro volume ósseo observou-se no período de 2 semanas, diferença estatística (p<0,05) entre os grupos C e IP e o parâmetro separação de trabéculas mostrou no período de 2 e 7 semanas, diferença estatística (p<0,05) entre os grupos C e IP e Na avaliação de IL-6 o grupo C exibiu o maior valor e foi observada diferença estatisticamente significante (p<0,05) entre ele e os demais grupos em todos os períodos. Na avaliação de TGF-β foi observada diferença estatisticamente significante (p<0,05) entre o grupo I em comparação com os outros grupos nos períodos de 3 dias e 2 semanas, sendo o grupo I aquele que apresentou maior expressão. Concluiu-se que o osso irradiado recupera-se da irradiação com o decorrer do tempo, porém quando a irradiação ocorre imediata a cirurgia do implante o tecido ósseo exibe alterações mais significativas. / In bone tissue, the injuries resulting from radiotherapy vary from osteopenia to osteoradionecrosis and due to these alterations, irradiated patients with implants have been showing a higher rate of failure. The objective of this study was to evaluate the effects of radiotherapy, simulating a total dose of a conventional radiotherapy treatment for cancer patients, in the new bone formation around implants in rat femurs, as well as in the expression of IL-6 and TGF-β cytokines . Thirty-six rats receiving grade V titanium implants in the left femora were used in this study. The animals were divided into 3 groups: a) Control group (C): implant placement surgery (healthy tissue without irradiation); b) Group irradiation (I): irradiation and after 4 weeks implant placement surgery c) Immediate irradiation (IP) group: implant placement surgery and after 24 hours irradiation. Irradiation was performed in two steps with doses of 15 Gy, totaling at the end of the second dose 30 Gy. The animals were euthanized at 3 days, 2 and 7 weeks after treatment. At the time of euthanasia, 0.5 ml of blood was collected and serum levels of IL-6 and TGF-β were measured by the enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA). In each period, 04 animals were submitted to computerized microtomography (μCT), aiming to evaluate the bone neoformation at the bone-implant interface. The obtained values were submitted to ANOVA a factor for statistical analysis and when necessary the Tukey multiple comparison test (p <0.05) was applied. In the results obtained through the microtomography analysis in general no statistical difference was observed between the groups (p> 0.05). However, the parameter separation of trabeculae showed, in the period of 2 and 7 weeks, statistical difference (p <0.05) between groups C and PI and in the bone volume parameter showed in the period of 2 weeks, statistical difference (p <0, 05) between groups C and IP. In the evaluation of IL-6, group C showed the highest value and a statistically significant difference (p <0.05) was observed between him and the other groups in all periods. In the evaluation of TGF-β, a statistically significant difference (p <0.05) was observed between group I in comparison with the other groups in the periods of 3 days and 2 weeks, with group I being the one with the highest expression. It was concluded that irradiated bone recovers from irradiation over time, but when irradiation occurs near implant surgery, the bone tissue exhibits more significant changes. / 2015/24986-8

Orientador: Angela Maria V. Campos Soares / Coorientador: Luciane Alarcão Dias-Melicio / Banca: Denise Fecchio / Banca: Dulce Helena Jardim Costantino / Resumo: O fungo Paracoccidioides brasiliensis é o agente etiológico da Paracoccidioidomicose, uma micose sistêmica, endêmica na América Latina. As células dendríticas (DCs) desempenham papel crucial na detecção de patógenos, desencadeamento de uma resposta inicial do hospedeiro, assim como na instrução da resposta imune adaptativa. Mediadores liberados pelas DCs, de uma forma autócrina, modulam as suas funções. Entre esses, destacamos as prostaglandinas e leucotrienos. Assim, avaliamos se DCs humanas produzem PGE2 e LTB4 em resposta ao fungo, a participação de receptores de reconhecimento de padrões moleculares (PRRS) nessa produção, assim como o papel modulador desses eicosanóides sobre a maturação fenotipica dessas células e a produção das citocinas IL-6, IL-10, IL-12, IL-23 e TNF-α. DCs humanas imaturas (CD14- / CD1ahigh / CD83 low) obtidas a partir da diferenciação de monócitos cultivados com GM-CSF e IL-4 (7 dias) liberaram substanciais concentrações de PGE2 e LTB4 que aumentaram significativamente, no caso da PGE2, com incubação com LPS durante 1h, 2h, 4h, 8h, 12h, 18h, 24h ou 48h. No entanto, os níveis de PGE2 e LTB4 foram significativamente inibidos após o desafio com as duas cepas do fungo. Ensaios de bloqueio dos PRRS mostraram que o processo de inibição de PGE2 envolveu o receptor de manose. Adicionalmente, ensaios de fenotipagem mostraram que após o desafio com o fungo, as DCs não alteraram o seu fenótipo de imaturas para o de células maduras. Assim, detectamos uma clara associação entre inibição da produção de PGE2 e LTB4 e a incapacidade do fungo em induzir a maturação de DCs. Ensaios utilizando PGE2 ou LTB4 exógenos confirmaram essa associação. Estas células ainda produzem altos níveis de IL-6... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: The fungus Paracoccidioides brasiliensis is the etiological agent of paracoccidioidomycosis, a systemic mycosis, endemic in Latin America. Dendritic cells (DCs) play a crucial role in the detection of pathogens, triggering an initial response from the host as well as the instruction of the adaptive immune response. Mediators released by DCs, by an autocrine way, modulate their functions. Among these, we highlight the prostaglandins and leukotrienes. We therefore assessed whether human DCs produce PGE2 and LTB4 in response to fungus, the participation of recognition receptors of molecular patterns (PRRS) in this production, as well as the modulating role of these eicosanoids on phenotypic maturation of these cells and the production of the cytokines IL-6, IL-10, IL-12, IL-23 e TNF-α. Human immature DCs (CD14-/ CD1ahigh/CD83low) derived from the differentiation of monocytes cultured with GMCSF and IL-4 (7 days) released substantial concentrations of PGE2 and LTB4 which increased significantly in the case of PGE2, with incubation with LPS for 1h, 2h, 4h, 8h, 12h, 18h, 24h or 48h. However, the levels of PGE2 and LTB4 were significantly inhibited after challenge with two different strains of the fungus. Trials have shown that blockade of PRRS process involved the inhibition of PGE2 mannose receptor. Additionally, phenotyping assays showed that after challenge with the fungus, DCs did not change their phenotype of immature cells to mature ones. Accordingly, we detected a clear association between inhibition of the production of PGE2 and LTB4 fungus and inability to induce maturation of DCs. Assays using exogenous PGE2 and LTB4 confirmed this association. These cells also produce high levels of IL-6 in response to fungus, which, however, were not associated with inhibition of the production of eisosanóides. Rather than that, these DCs do not produce... (Complete abstract click electronic access below) / Mestre

Orientador: Aureo Evangelista Santana / Banca: Mirela Tinucci Costa / Banca: Thiago Demarchi Munhoz / Banca: Daniela Gomes da Silva / Banca: Geórgia Modé Magalhães / Resumo: Este estudo teve como objetivo a quantificação sérica de hormônios e citocinas indutores (eritropoietina e IL-3) e supressores (paratormônio, IL-1β, TNFα e IFNγ) da eritropoiese, correlacionando-os com as variáveis eritrocitárias periféricas e centrais. Amostras de sangue periférico, urina e medula óssea foram obtidas de 10 cães com doença renal crônica estádio 2 (DRC2), 10 cães com DRC estádio 3 (DRC3), 10 cães com DRC estádio 4 (DRC4) e 10 cães adultos saudáveis (grupo controle) com vistas à realização de hemograma, análise bioquímica sérica e urinária, urinálise, ensaios imunoenzimáticos e análise citológica da medula óssea. As concentrações dos fatores indutores e supressores da eritropoiese, assim como os resultados do mielograma dos cães do DRC2 assemelharam-se aos do grupo controle, e apesar de não terem manifestado anemia, a presença de reticulocitose alerta para o fato de fatores externos a medula óssea estarem precocemente causando perda ou destruição dos eritrócitos. A anemia em cães com DRC está relacionada ao aumento nas concentrações de paratormônio e TNFα, e a exacerbação dos referidos fatores supressores, bem como à hipoplasia da série eritróide, representada principalmente pela redução da população de eritroblastos policromatofílicos e ortocromáticos, constituem, parcialmente, a base da gênese e do agravamento do estado anêmico nas fases mais avançadas da DRC em cães / Abstract: The aim of this study was to evaluate bone marrow precursor cells, circulating concentrations of cytokines and hormones that can stimulate (erythropoietin and IL-3) and suppress (parathyroid hormone, IL-1β, TNF and IFN) erythropoiesis, and make their correlation with the peripheral and central erythrocyte variables. Peripheral blood samples, urine and bone marrow were obtained from 10 dogs with chronic kidney disease stage 2 (CKD2), 10 dogs with CKD stage 3 (CKD3), 10 dogs with CKD stage 4 (CKD4), and 10 healthy adult dogs (control group) for complete blood count (CBC), serum and urinary biochemical analysis, urinalysis, immunoassays and cytological analysis of bone marrow. The concentrations of erythropoiesis stimulator and suppressor factors, and cytological bone marrow results from CKD2 dogs were similar to those of the control group. This group also exhibited reticulocytosis even though not have expressed anemia, which means that extrinsic factors are early cause of blood loss or destruction of red blood cells. The anemia in dogs with CKD is related to increased parathyroid hormone and TNFα serum concentrations. The increases of such suppressor factors in association with erythroid hypoplasia are considered as part of the genesis and the aggravation of the anemic state in the end stages of CKD in dogs / Doutor

Orientador: Elizabeth Orika Ono / Banca: João Domingos Rodrigues / Banca: Sarita Leonel / Banca: Elisangela Clarete Camili / Banca: Leonardo Ferreira / Resumo: O estudo objetivou avaliar os efeitos de reguladores vegetais na emergência e no desenvolvimento de plantas de macadâmia (Macadamia integrifolia Maiden & Betche). Para o estudo da emergência de plântulas de macadâmia, as sementes foram tratadas com: T1- água (testemunha) sob Sombrite®; T2- GA4+7 + N-(fenilmetil)- aminopurina (Promalin®) a 200 mg L-1 sob Sombrite®; T3- GA4+7 + N-(fenilmetil)- aminopurina (Promalin®) a 400 mg L-1 sob Sombrite®; T4- GA3 + IBA + Kt (Stimulate®) a 5 mL kg-1 sementes sob Sombrite®; T5- GA3 + IBA + Kt (Stimulate®) a 10 mL kg-1 sementes sob Sombrite® e T6-água (testemunha) sem Sombrite®. Os efeitos dos reguladores vegetais foram avaliados pelo número e porcentagem de emergência de plântulas de cada tratamento. Foram utilizados 6 tratamentos com 450 sementes cada. Os resultados permitiram concluir que o tratamento que promoveu os melhores resultados na emergência de plântulas foi com GA4+7 + N-(fenilmetil)-aminopurina (Promalin®) a 400 mg L-1 sob Sombrite®. Sete meses após o transplantio das plantas jovens de macadâmia, estas foram tratadas com os seguintes tratamentos através de pulverização foliar: Testemunha (água); T2- GA4+7 + N-(fenilmetil)-aminopurina (Promalin®) a 200 mg L-1 em 1, 2 e 3 aplicações; GA4+7 + N-(fenilmetil)-aminopurina (Promalin®) a 400 mg L-1 em 1, 2 e 3 aplicações; GA3 + IBA + Kt (Stimulate®) a 2,5 mL L-1 em 1, 2 e 3 aplicações; GA3 + IBA + Kt (Stimulate®) a 5,0 mL L-1 em 1, 2 e 3 aplicações. Nos tratamentos com 2 ou 3 aplicações, foram realizadas a intervalo de 21 dias. As características avaliadas foram comprimento de caule, diâmetro do caule, teor de clorofila, taxa de assimilação de CO2 (A), condutância estomática (gs), transpiração (E) e concentração interna de CO2 na câmara subestomática (Ci). As avaliações de comprimento e diâmetro do caule foram realizadas antes da aplicação ... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: This study aimed to evaluate the effect of plant growth regulators on seed germination and development of macadamia nut trees (Macadamia integrifolia Maiden & Betche). For germination, seeds were treated with: T1- water (control) under shading screen; T2- GA4+7 + N-(phenylmethyl)-1H-purine-6-amine at 200 mg L-1 under shading screen; T3- GA4+7 + N-(phenylmethyl)-1H-purine-6-amine at 400 mg L-1 under shading screen; T4- GA3 + IBA + Kt at 5 mL kg-1 seeds under shading screen; T5- GA3 + IBA + Kt at 10 mL kg-1 seeds under shading screen, and T6-water (control) without shading screen. The effect of plant growth regulators was evaluated based on the number and percentage of emerged seedlings under each treatment. Experimental design was completely randomized, including 5 treatments with 450 seeds each. The greatest seedling emergence was detected with GA4+7 + N-(phenylmethyl)-1H-purine-6- amine at 400 mg L-1 under shading screen. At seven months after transplanting, young macadamia nut trees were subjected to 1, 2 and 3 leaf applications of: water (control); T2- GA4+7 + N-(phenylmethyl)-1H-purine-6-amine at 200 mg L-1; GA4+7 + N- (phenylmethyl)-1H-purine-6-amine at 400 mg L-1; GA3 + IBA + Kt at 2.5 mL L-1; GA3 + IBA + Kt at 5.0 mL L-1. The second and the third applications were performed at 21- days intervals. Shoot length, stem diameter, chlorophyll levels, net CO2 assimilation rate (A), stomatal conductance (gs), transpiration (E), and CO2 concentration inside the substomatal chamber (Ci) were evaluated. Plant height and stem diameter were measured before application of treatments and at 21-day intervals, considering the difference among evaluations. Gas exchange evaluations were performed at the 1st and at the 150th days after application of plant growth regulators. Experimental design was in completely randomized blocks, in the factorial arrangement 4 (4 treatments) x 3 (frequency of ... (Complete abstract click electronic access below) / Doutor