A tuberculose (TB) é uma doença infectocontagiosa causada pelo bacilo 288 Mycobacterium tuberculosis, a qual ocupa a segunda posição mundial entre 289 causas de mortes por um único agente infeccioso. O desenvolvimento da 290 imunidade protetora e o controle da infecção por M. tuberculosis são amplamente 291 atribuídos a função desempenhada por citocinas pró e anti-inflamatórias. No 292 entanto, 90-95% dos indivíduos infectados com o bacilo conseguem conter ou 293 eliminar a infecção enquanto o restante desenvolve a TB ativa. As razões pelas 294 quais 5-10% dos indivíduos com competência imunológica completa são 295 suscetíveis `a TB ainda permanecem desconhecidas. Porém, nas últimas 296 décadas, estudos epidemiológicos têm trazido fortes evidências de que 297 componentes genéticos humanos contribuem significativamente para essa 298 interindividual variabilidade na suscetibilidade `a TB. Assim, o objetivo deste 299 trabalho foi avaliar a influência dos polimorfismos IL2 -330 T>G (rs2069762); IL4 -300 590 C>T (rs2243250); IL6 -174 G>C (rs1800795); IL10 -592 A>C (rs1800872); 301 IL10 -1082 G>G (rs1800896); IL17A -692 C>T (rs8193036); IL17A -197 G>A 302 (rs2275913); TNF -238 G>A (rs361525); TNF -308 G>A (rs1800629) e IFNG +874 303 T>A (rs2430561) localizados em genes de citocinas na suscetibilidade ao 304 desenvolvimento da tuberculose pulmonar (TBP) em uma população de adultos 305 do sul do Brasil.Os resultados obtidos sugerem fortemente um papel protetor para 306 os polimorfismo IL17A -197G>A (rs2275913) e IL6-174 G>C (rs1800795) no 307 desenvolvimento da TBP nessa população. O efeito protetor foi atribuído ao alelo 308 IL17A-197A (OR=0.29; p=0.04), genótipo AA (OR=0.12; p=0.04) e portadores do 309 alelo A (AG/AA) (OR=0.29; p=0.004). Da mesma forma, o polimorfismo IL6-310 174G>C mostrou ter um efeito protetor no desenvolvimento da TBP em 311 portadores do alelo C (CC/CG) (OR= 0.46; p=0.04). Ambos os polimorfismos 312 mantiveram a significância estatística após a correção usando o teste FDR. Os 313 demais polimorfismos avaliados não mostraram evidências que suportem 314 associação ao desenvolvimento da TBP em adultos nesta população. Os 315 polimorfismos IL17A -692 C>T (rs8193036) e IFNG +874 T>A (rs2430561) foram excluídos das análises porque não estavam em equilíbrio de Hardy-Weinberg. Em 317 conclusão, este trabalho identificou pela primeira vez na população do sul do 318 Brasil um efeito protetor dos polimorfismo IL17A -197 G>A e IL6 -174 G>C no 319 desenvolvimento da TBP em adultos. Esses resultados indicam o papel 320 importante para as citocinas pro-inflamatórias IL17A e IL6 na imunofisiologia da 321 TB. / Tuberculosis is an infectious disease caused by Mycobacterium 340 tuberculosis bacillus, which ranks second worldwide position among causes of 341 deaths from a single infectious agent. The development of protective immunity and 342 control of infection by M. tuberculosis are largely attributed to the role of pro and 343 anti-inflammatory cytokines. However, 90-95% of individuals infected with bacillus 344 can contain or eliminate the infection while the remainders develop active TB. The 345 reasons why 5-10% of individuals with full immune competence are susceptible to 346 TB remain unknown. However, in recent decades, epidemiological studies have 347 brought strong evidence that human genetic components contribute significantly to 348 this interindividual variability in susceptibility to TB.Thus the aim of this work was 349 to evaluate the influence of polymorphisms IL2 -330 T>G (rs2069762); IL4 -590 350 C>T (rs2243250); IL6 -174 G>C (rs1800795); IL10 -592 A>C (rs1800872); IL10 -351 1082 A>G (rs1800896); IL17A -692 C>T (rs8193036); IL17A -197 G>A 352 (rs2275913); TNF -238 G>A (rs361525); TNF -308 G>A (rs1800629) and IFNG 353 +874 T>A (rs2430561) located in cytokine candidates genes in the susceptibility to 354 development of pulmonary tuberculosis in south Brazil population.The results 355 strongly suggest a protective role for the IL17A -197G > A (rs2275913) and IL6-356 174 G>C polymorphism (rs1800795) in the development of pulmonary 357 tuberculosis in this population. The protective effect was attributed to IL17A -197 358 allele A (OR = 0.29; p = 0:04), AA genotype (OR = 0:12; p = 0:04) and carriers of 359 the A allele (AG / AA) (OR = 0.29; p = 0.004 ). Likewise, the IL6 -174G>C shows 360 an association for C carriers (CC/CG) (OR= 0.46; p=0.04). Both polymorphisms 361 maintained the statistical significance after correction using FDR test. However, no 362 evidence of association was identified for any other polymorphism studied in this 363 population.IL17A polymorphisms -692 C>T (rs8193036) and IFNG +874 T>A 364 (rs2430561) polymorphisms were excluded from the analysis because they were 365 not in Hardy-Weinberg equilibrium. In conclusion, our results identified for the first 366 time in Southern Brazil population a protective role for IL17A -197 G>A and IL6 -367 174 G>C polymorphisms in adult pulmonary tuberculosis development. These results indicate an important role for IL-17A and IL-6 pro-inflammatory cytokines in 369 immunophysiology of tuberculosis.

Resumo não disponível

Submitted by Heitor Rapela Medeiros (heitor.rapela@ufpe.br) on 2015-03-06T11:29:09Z No. of bitstreams: 2 tese Yone-final-20-12-12.pdf: 714270 bytes, checksum: 2a36b003dfa84355204e28d809e01cff (MD5) license_rdf: 1232 bytes, checksum: 66e71c371cc565284e70f40736c94386 (MD5) / Made available in DSpace on 2015-03-06T11:29:09Z (GMT). No. of bitstreams: 2 tese Yone-final-20-12-12.pdf: 714270 bytes, checksum: 2a36b003dfa84355204e28d809e01cff (MD5) license_rdf: 1232 bytes, checksum: 66e71c371cc565284e70f40736c94386 (MD5) Previous issue date: 2012 / A tuberculose pulmonar é um problema de saúde pública mundial e apresenta alta incidência no Brasil. Atualmente, o Brasil ocupa o 19º lugar no ranking dos 22 países que concentram 80% dos casos em todo o mundo. A resposta imune humana contra a tuberculose é especialmente mediada pelos linfócitos T CD4+. Entretanto, muitos estudos ainda são necessários para o entendimento exato do papel de cada citocina no mecanismo de cura da doença. A fim de caracterizar a produção das citocinas TNF-a, IFN-g, IL-10, o óxido nítrico (NO) e a expressão do marcador Foxp3, células mononucleares do sangue periférico (PBMC) de contatos intradomiciliares de indivíduo com tuberculose pulmonar com (CTb) e sem (STb) história prévia de TB foram estimuladas in vitro com antígeno de Mycobacterium tuberculosis (AgTb) e com o mitógeno Concanavalina A por 24 e 48 horas. A dosagem das citocinas foi feita por ELISA de captura e de NO pela quantificação do nitrito (NO2 -). PCR em Tempo Real foi a técnica utilizada para detectar o mRNA para Foxp3. Em 24 horas de cultivo celular com antígeno total de M. tuberculosis (CTb = 10.158,38 ± 7.438,38; STb = 15.083,10 ± 9.292,66), observou-se uma produção significativa de TNF-a (0,05) no grupo STb. Os grupos analisados não apresentaram diferenças na expressão do mRNA do marcador Foxp3. Foi verificado aumento (p= 0,04) entre IL-10 e Foxp3 e correlação negativa (p = 0,009) entre NO (aumento) e Foxp3 (diminuição) após 48h de estímulo com AgTb. Observou-se também no grupo STb em 24 horas de culturas estimuladas com AgTb um resultado semelhante ao grupo CTb (p = 0,03). Portanto, os resultados obtidos sugerem que produção de IL-10, IFN-g e de NO indicam que os indivíduos CTb e STb produziram uma resposta celular específica; porém, sem valores que possam indicar uma maior ou menor susceptibilidade à doença, e que TNF-a, possivelmente funciona como um elemento fundamental para a manutenção do estado de saúde dos comunicantes. A expressão do marcador Foxp3 não está associada diretamente a uma maior predisposição nos indivíduos com história de tuberculose pulmonar.

Submitted by Ramon Santana (ramon.souza@ufpe.br) on 2015-03-10T13:57:56Z No. of bitstreams: 2 DISSERTAÇÃO DANIELLY CANTARELLI.pdf: 2222925 bytes, checksum: 6d35973456253a2c27e15b93187e36d7 (MD5) license_rdf: 1232 bytes, checksum: 66e71c371cc565284e70f40736c94386 (MD5) / Made available in DSpace on 2015-03-10T13:57:56Z (GMT). No. of bitstreams: 2 DISSERTAÇÃO DANIELLY CANTARELLI.pdf: 2222925 bytes, checksum: 6d35973456253a2c27e15b93187e36d7 (MD5) license_rdf: 1232 bytes, checksum: 66e71c371cc565284e70f40736c94386 (MD5) Previous issue date: 2013-03-05 / PROPESQ - UFPE CNPq / Introdução: É comum a associação de esquistossomose mansônica com desnutrição, uma vez que populações com baixo padrão socioeconômico habitam regiões endêmicas. Estudos sugerem que deficiências nutricionais podem estar relacionadas com a supressão da resposta imunológica em animais infectados por S. mansoni. Quando imposta no período crítico da lactação, a desnutrição é um agente estressor indutor de alterações tardias na resposta imunológica, implicada em diversas modificações fisiológicas e metabólicas, relacionadas à depressão do sistema imune. A desnutrição também tem sido considerada na patogênese da translocação bacteriana (TB), por promover aumento da permeabilidade e diminuição das enzimas intestinais. Estudos têm relatado uma maior ocorrência de TB em animais infectados por S. mansoni, quando comparados a animais sem infecção, contudo conhecimentos imunológicos acerca da relação são escassos. Objetivo: Investigou-se a associação entre os níveis de IFN- γ e IL-10 e a ocorrência de translocação bacteriana, em camundongos submetidos à desnutrição neonatal. Métodos: Camundongos fêmeas Swiss webster (n=32) foram divididos, no período de aleitamento, em 2 grupos: Nutrido (N) e Desnutrido (D) – amamentados por mães alimentadas com dieta contendo 17% e 8% de proteína à base de caseína, respectivamente. Aos 35-45 dias de vida, 8 animais de cada grupo foram infectados com, em média, 30 cercárias de S. mansoni, constituindo os grupos: Nutrido Infectado (NI), Nutrido Não Infectado (NNI), Desnutrido Infectado (DI) e Desnutrido Não Infectado (DNI). O peso corporal (PC) dos animais foi mensurado diariamente no período de aleitamento e semanalmente a partir do 22º dia. 45 dias após a exposição cercariana, foi realizada a confirmação da infecção pelo método de Kato-katz. Aos 161 dias de vida, os animais foram eutanasiados para coleta de amostras biológicas. Coletou-se sangue cardíaco para contagem total (CT) e diferencial de leucócitos. Para estudo da translocação bacteriana (TB), foram coletados sangue periférico, sangue portal, baço, fígado, linfonodos mesentéricos e fezes da região média do intestino delgado. Realizou-se cultura de células esplênicas para dosagem de IFN-γ e IL-10 no sobrenadante, através de ensaio imunoenzimático – ELISA. Resultados: Os animais do grupo D apresentaram um menor ganho de PC em relação ao grupo N a partir do 4º dia, diferença observada durante todo o período experimental. Verificou-se um maior índice de TB nos animais infectados, comparando-os aos não infectados. Entre os infectados, houve tendência a uma maior incidência de TB no grupo D comparado ao N, entretanto, a diferença não foi significativa. Os isolados bacterianos responsáveis pela TB em animais nutridos foram Bacillus sp., Citrobacter freundii, Enterococcus faecalis, Proteus rettgeri e Staphylococcus saprophyticus. Nos animais desnutridos, foram encontrados Bacillus sp., Corynebacterium sp., Enterococcus faecalis, Serratia liquefaciens, Staphylococcus aureus, Staphylococcus coagulase negativa e Staphylococcus saprophyticus. Foi observada uma menor produção de IFN-γ no grupo DI, comparado ao NI. Os níveis de IL-10 foram mais elevados no grupo NI, em relação ao grupo DI. A CT de leucócitos mostrou-se elevada nos grupos infectados, quando comparados aos controles. Os números de neutrófilos e monócitos foram maiores nos grupos NI e DI, quando comparados aos grupos NNI e DNI, respectivamente. Os valores de linfócitos mostraram-se aumentados no grupo DI, comparado ao DNI. Conclusões: A desnutrição modifica a resposta imune e pode favorecer translocação bacteriana em camundongos infectados por S. mansoni.

Submitted by Amanda Silva (amanda.osilva2@ufpe.br) on 2015-04-08T15:09:37Z No. of bitstreams: 2 tese Yone-final-20-12-12.pdf: 714270 bytes, checksum: 2a36b003dfa84355204e28d809e01cff (MD5) license_rdf: 1232 bytes, checksum: 66e71c371cc565284e70f40736c94386 (MD5) / Made available in DSpace on 2015-04-08T15:09:37Z (GMT). No. of bitstreams: 2 tese Yone-final-20-12-12.pdf: 714270 bytes, checksum: 2a36b003dfa84355204e28d809e01cff (MD5) license_rdf: 1232 bytes, checksum: 66e71c371cc565284e70f40736c94386 (MD5) Previous issue date: 2012 / A tuberculose pulmonar é um problema de saúde pública mundial e apresenta alta incidência no Brasil. Atualmente, o Brasil ocupa o 19º lugar no ranking dos 22 países que concentram 80% dos casos em todo o mundo. A resposta imune humana contra a tuberculose é especialmente mediada pelos linfócitos T CD4+. Entretanto, muitos estudos ainda são necessários para o entendimento exato do papel de cada citocina no mecanismo de cura da doença. A fim de caracterizar a produção das citocinas TNF-a, IFN-g, IL-10, o óxido nítrico (NO) e a expressão do marcador Foxp3, células mononucleares do sangue periférico (PBMC) de contatos intradomiciliares de indivíduo com tuberculose pulmonar com (CTb) e sem (STb) história prévia de TB foram estimuladas in vitro com antígeno de Mycobacterium tuberculosis (AgTb) e com o mitógeno Concanavalina A por 24 e 48 horas. A dosagem das citocinas foi feita por ELISA de captura e de NO pela quantificação do nitrito (NO2 -). PCR em Tempo Real foi a técnica utilizada para detectar o mRNA para Foxp3. Em 24 horas de cultivo celular com antígeno total de M. tuberculosis (CTb = 10.158,38 ± 7.438,38; STb = 15.083,10 ± 9.292,66), observou-se uma produção significativa de TNF-a (0,05) no grupo STb. Os grupos analisados não apresentaram diferenças na expressão do mRNA do marcador Foxp3. Foi verificado aumento (p= 0,04) entre IL-10 e Foxp3 e correlação negativa (p = 0,009) entre NO (aumento) e Foxp3 (diminuição) após 48h de estímulo com AgTb. Observou-se também no grupo STb em 24 horas de culturas estimuladas com AgTb um resultado semelhante ao grupo CTb (p = 0,03). Portanto, os resultados obtidos sugerem que produção de IL-10, IFN-g e de NO indicam que os indivíduos CTb e STb produziram uma resposta celular específica; porém, sem valores que possam indicar uma maior ou menor susceptibilidade à doença, e que TNF-a, possivelmente funciona como um elemento fundamental para a manutenção do estado de saúde dos comunicantes. A expressão do marcador Foxp3 não está associada diretamente a uma maior predisposição nos indivíduos com história de tuberculose pulmonar.

Submitted by Fernanda Rodrigues de Lima (fernanda.rlima@ufpe.br) on 2018-07-10T19:21:00Z No. of bitstreams: 2 license_rdf: 811 bytes, checksum: e39d27027a6cc9cb039ad269a5db8e34 (MD5) DISSERTAÇÃO Rafaela Silva Guimarães Gonçalves.pdf: 3196655 bytes, checksum: e1e60fb5f279a2fdb67f19af87a2f6a2 (MD5) / Made available in DSpace on 2018-07-10T19:21:00Z (GMT). No. of bitstreams: 2 license_rdf: 811 bytes, checksum: e39d27027a6cc9cb039ad269a5db8e34 (MD5) DISSERTAÇÃO Rafaela Silva Guimarães Gonçalves.pdf: 3196655 bytes, checksum: e1e60fb5f279a2fdb67f19af87a2f6a2 (MD5) Previous issue date: 2015-02-26 / A Esclerose Sistêmica (ES) é uma doença do tecido conjuntivo rara, complexa, multissistêmica, e sem tratamento específico. A doença é definida por três importantes pilares: comprometimento vascular, produção de autoanticorpos e inflamação, e a fibrose. Esta última é considerada a via final comum, e caracteriza-se por deposição excessiva de matriz extracelular (MEC), provocando dano orgânico, e implica em alta morbi-mortalidade dos pacientes. Embora uma série de citocinas e quimiocinas tenham sido investigadas como possíveis mediadores da fibrose em ES, a correlação específica entre citocinas e envolvimento de órgãos não foram bem elucidados ainda, e uma característica do perfil de citocinas está longe de ser identificado. Esse estudo teve como objetivo estabelecer um perfil de expressão gênica de moléculas envolvidas na fibrose: TGF-β, PDGF, CTGF, CCL3, IL-6, IL-13, IL- 7, IFN-y, IL-17, IL-22, e RORC, e compará-los com controles saudáveis, correlaciona-los entre si, e relacionar com dados clínicos e de exames de imagem, de maneira a contribuir para um melhor conhecimento da doença. Foram avaliadas expressões relativas de mRNA em 14 biópsias de pele de pacientes com ES do Hospital das Clínicas de Pernambuco, e 5 controles saudáveis pareados por sexo e idade, através da reação em cadeia da polimerase quantitativa em tempo-real (qRT-PCR) utilizando sondas TaqMan. Todos os pacientes cumpriram os critérios para a classificação de esclerose sistêmica segundo o Colégio Americano de Reumatologia (ACR). Foi observada maior expressão de CCL3, IL-13, IFN-γ e IL-7 na pele de pacientes com ES (respectivamente, p = 0,0002, p = 0,0243, p = 0,0335, p = 0,0082) quando comparado com controles saudáveis. Encontramos correlação positiva entre os níveis de expressão de CCL3 e IL-7 (p = 0,0050 r = 0,7187), além de correlação negativa entre a IL-7 e TGF-β (p = 0,0136 r = -0,6527), e do TGF-β com IFNγ (p = 0.0001; r = -0.8637). Obtivemos, também, a relação destas expressões com dados de exames de imagem e clínicos. O aumento da expressão relativa das citocinas IL-7, IFN-γ, CCL3 e IL-13 na biópsia de pele fibrótica da ES sugere que sejam importantes alvos terapêuticos, bem como a possibilidade de serem usados como biomarcadores da fibrose. Ratificamos, também, o potencial papel antifibrótico de IL-7 e IFN-γ. Além disso a correlação entre a IL-7 e CCL3 deve ser melhor elucidada na fisiopatologia da fibrose. / Systemic sclerosis (SSc) is a multisystemic, complex and rare disease of connective tissue, with high morbidity and mortality, and there is no specific treatment. The disease is characterized by three main principles: vascular disease, autoantibody production and inflammation, and fibrosis. The latter is regarded as the final common pathway, and is characterized by being a type of scar tissue secondary to excessive ECM deposition, and therefore the final result of inflammation or damage, and in turn leading to organ damage. The persistent activation of fibroblasts results in pathological fibrosis. Although a number of cytokines and chemokines have been investigated as potential mediators of fibrosis in ES, a characteristic cytokine profile is far from being identified. This study aimed to establish a gene expression profile of molecules involved in fibrosis: TGF-β, PDGF, CTGF, CCL3, IL-6, IL-13, IL-7, IFN-y, IL-17, IL-22, and RORC and compare them with healthy controls, correlates them with each other and relate with clinical and imaging data. We evaluated the relative mRNA expression in 14 patients with SSc skin biopsies at the Clinical’s Hospital of Pernambuco, and 5 healthy controls matched by sex and age, by the reaction in quantitative polymerase chain in real-time (qRT-PCR). We observed increased expression of CCL3, IL-13, IFN-γ and IL-7 in the skin of patients with SSc (respectively, p = 0.0002, p = 0.0243, p = 0.0335, p = 0.0082) compared with healthy controls. We found a positive correlation between the expression of CCL3 and IL-7 (r = 0.0050 p = 0.7187), and a negative correlation between IL-7 and TGF-β (p = 0.0136 r = -0 , 6527), and TGF-β with IFNγ (p = 0.0001, r = -0.8637). We also obtained the relationship of these expressions with imaging and clinical data. The increase expression of the cytokines IL-7, IFN-γ, IL-13 and CCL3 in the fibrotic skin’s microenvironment of the SSc suggests important therapeutic targets, as well the possibility to be used as biomarkers of fibrosis. Reaffirm also antifibrotic potential role of IL-7 and IFN-γ. Furthermore, the correlation between IL-7 and CCL3 needs further elucidated in the physiopathology of fibrosis.

Submitted by Pedro Barros (pedro.silvabarros@ufpe.br) on 2018-09-05T19:06:09Z No. of bitstreams: 2 license_rdf: 811 bytes, checksum: e39d27027a6cc9cb039ad269a5db8e34 (MD5) TESE Jailson Oliveira da Silva.pdf: 4020261 bytes, checksum: 65ef6a03233194408e03a6c34d15aca2 (MD5) / Approved for entry into archive by Alice Araujo (alice.caraujo@ufpe.br) on 2018-09-14T18:51:37Z (GMT) No. of bitstreams: 2 license_rdf: 811 bytes, checksum: e39d27027a6cc9cb039ad269a5db8e34 (MD5) TESE Jailson Oliveira da Silva.pdf: 4020261 bytes, checksum: 65ef6a03233194408e03a6c34d15aca2 (MD5) / Made available in DSpace on 2018-09-14T18:51:37Z (GMT). No. of bitstreams: 2 license_rdf: 811 bytes, checksum: e39d27027a6cc9cb039ad269a5db8e34 (MD5) TESE Jailson Oliveira da Silva.pdf: 4020261 bytes, checksum: 65ef6a03233194408e03a6c34d15aca2 (MD5) Previous issue date: 2014-02-26 / CAPES / Introdução: compostos das classes semicarbazônas e tiosemicarbazônas tem sido relatados em diferentes estudos por apresentarem variadas ações biológicas de interesse farmacológico. Neste sentido, novos compostos derivados, fruto de síntese recente, têm sinalizado seu potencial terapêutico. Assim, neste estudo objetivou-se testar o efeito anti-inflamatório, antinociceptivo e antitumoral de alguns compostos derivados carbazônico. Metodologia: Para avaliar a atividade anti-inflamatória de VH02 os ensaios de inflamação o agente flogístico utilizado foi a carragenina, óleo de cróton e ácido acético, enquanto que em testes de nocicepção foram utilizados ácido acético e formalina. Os experimentos foram conduzidos de acordo com as normas do colégio brasileiro de experimentação animal (COBEA) e realizados sob consentimento do comitê de ética e experimentação animal CCB/UFPE, processo: 035663/2013-90. Os animais foram mantidos sob condições de controle de temperatura 21±2 ºC e luminosidade 12/12h claro/escuro, com disponibilidade de água e ração a vontade. Para cada ensaio os animais foram, divididos em grupos de 6/gaiola, climatizados, mantidos em jejum por período de 4h e todos foram pré-tratados com as substâncias testes 1h antes do início de cada prática experimental. Os experimentos foram conduzidos a partir da administração de seis diferentes compostos e doses baseadas no teste de toxicidade aguda para cada substância. Resultados: No teste de pleurisia, os compostos VH28 e VH21 apresentaram inibição de 29 e 35% na migração de leucocitária. Os compostos VH08 (3mg/Kg), VH02 e LS18A (100mg/Kg) promoveram inibição da migração leucocitária de 80%, 86% e 64% no ensaio de peritonite. No ensaio de contorções abdominais provocadas pelo ácido acético os compostos VH21 e LS18A nas doses de 6,25; 25 e 100 mg/Kg apresentaram 62%, 79% e 68% e 50%, 65% e 58% de inibição nas contorções abdominais provocadas pelo ácido acético, quando comparadas ao controle. O teste de viabilidade celular demonstrou inibição de 71% e 77% do composto VH25 nas concentrações de 1 e 2 μg/mL para a linhagem de HL60, a doxorrubicina utilizada como padrão apresentou inibição de 73%. Ainda, em teste de coloração por May-grunwald-giemsa as células apresentaram picnose, condensação da cromática e formação de corpos apoptóticos. A morte por apoptose foi comprovada em ambas as doses através da técnica de anexina5/Iodeto de propídeo por citometria de fluxo. Conclusões: Os resultados apresentados demonstram que houve atividade anti-inflamatória e antinociceptiva, bem como ação citotóxica de alguns derivados carbazônicos. No entanto, são necessários novos testes para esclarecimento do real mecanismo de ação para as atividades anti-inflamatória e antinociceptiva. / Introduction: compounds from thiosemicarbazones and semicarbazones classes have been reported in different studies by presenting a wide range of functions, of which we highlight the anti-inflammatory, antitumor and antifungal activities. This study aimed to identify the anti-inflammatory, antinociceptive and antitumor activities of new carbazones derivatives, and the mechanisms involved in each activity. Methods: For the inflammation tests, the phlogistic agent used was carrageenin, croton oil and acetic acid, while in tests of nociception acetic acid and formalin were used. The experiments were conducted in accordance with the standards of the Brazilian College of Animal (COBEA) and performed under the consent of ethics and animal experimentation CCB/UFPE, process number: 035663/2013-90. The animals were kept under controlled conditions of temperature 21±2 ºC and luminosity 12/12h light/dark, with availability of water and feed at will. For each test, the animals were divided into groups 6/cage, air conditioned, fasted for 4h period and all were pre-treated with the test substances 1h before the beginning of each experimental practice. The experiments were conducted through the administration of six different compounds and doses, based on acute toxicity test for each substance. Results: For pleurisy test, VH28 and VH21 compounds were inhibited 29% and 35% in leukocyte migration. The VH08 (3mg/kg), VH02 and LS18A (100mg/kg) compounds promoted inhibition of leukocyte migration 80%, 86% and 64% in the assay of peritonitis. In the test of writhing induced by acetic acid and the VH21 and LS18A compounds in doses of 6.25, 25 and 100 mg/kg showed 62%, 79%, 68% and 50%, 65% and 58% inhibition in writhing caused by acetic acid when compared to control. The cell viability test showed inhibition of 71 % and 77 % of the compound VH25 concentrations of 1 and 2 μg/mL for strain HL60, doxorubicin used as the control showed 73% inhibition. Even in coloring test by May-Grunwald-Giemsa cells showed pyknosis, condensation and formation of apoptotic chromatic bodies. Death by apoptosis was confirmed at both doses using the technique of annexin 5/propidium iodide by flow cytometry. Conclusions: The results showed that there were anti-inflammatory and antinociceptive activity and cytotoxic action of some derivatives carbazones. However, further tests to elucidate the actual mechanism for anti-inflammatory and antinociceptive activities are needed.

Orientador: Sara Teresinha Olalla Saad / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciencias Medicas / Made available in DSpace on 2018-08-06T06:16:10Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Carvalho_MarceloAddasde_D.pdf: 1285336 bytes, checksum: 9f0a8c27299796261470ed0167c4e315 (MD5) Previous issue date: 2005 / Resumo: Citocinas inflamatórias como IL-1a e ß, IL-1RA, IL-6, IL-10 e TNF estão envolvidas na resposta imune inclusive na ocorrência de reação febril não hemolítica. Podem acumular nos concentrados de plaquetas (CPs) durante o armazenamento ou serem liberadas por células do receptor de transfusão. Alguns polimorfismos dos genes destas citocinas interferem na produção frente a estímulos. O presente trabalho tem como objetivo avaliar a importância dos polimorfismos IL1B-511C/T, IL1+3953C/T, IL1RN intron2 VNTR, IL6-174G/C, IL10-1082G/A, IL10-819C/T, TNF308G/A e TNF+252G/A em pacientes multitransfundidos e em doadores de sangue, utilizado para produção de CPs, através da avaliação da ocorrência precoce de RFNH associada a transfusão de concentrado de hemácias ou do acúmulo de IL-1a e ß, IL-1RA e TNF nos CPs. Utilizamos o método PCR e digestão com enzimas de restrição (PCR-RFLP) ou sequenciamento automatizado para identificações destes polimorfismos. Em nossa amostra de população da região de Campinas, São Paulo, encontramos freqüências genotípicas comparáveis às populações européia e norte americana e diferenças significativas das populações asiática e de origem africana. O raro alelo IL1RN*0 foi identificado em nosso grupo, não foi demonstrado interferência deste alelo, em heterozigose, na expressão do gene IL1RN em modelo in vitro. Nos CPs obtidos de plasma rico em plaquetas (CP-PRP) foi observado maior acúmulo de IL-1ß nos doadores IL1B-511CC, evidenciado no D5 e D7 de armazenamento. Foi observada correlação inversa entre o conteúdo de plaquetas nos CP-PRP e o acúmulo de IL-1ß e TNF, não havendo correlação com a contaminação leucocitária. Não houve acúmulo de IL-1a e IL- 1RA durante o armazenamento. No grupo de pacientes multitransfundidos, o alelo IL1RN*2 e o genótipo IL1RN*2.2 correlacionaram-se com a ocorrência de RFNH precoce. Concluímos que, o estudo de características genéticas dos doadores de sangue e pacientes pode ajudar a esclarecer as variações de ocorrência e gravidade dos efeitos adversos associados à transfusão de sangue, identificando grupos de maior risco e delineia uma nova linha de investigação / Abstract: Inflammatory cytokines such as IL-1a e ß, IL-1RA, IL-6, IL-10 and TNF have been related with immune responses including febrile non-hemolytic reactions. These biological mediators may accumulate in platelet concentrates (PCs) during storage or be secreted by receptor immune cells. Many cytokine gene polymorphisms interfere in the production of cytokines after stimulus. The present study aims to value the significance of polymorphisms IL1B-511C/T, IL1B+3953C/T, IL1RN intron2 VNTR, IL6-174G/C, IL10-1082G/A, IL10-819C/T, TNF308G/A and TNF+252G/A in multitransfused patients and in PCs donors using the evaluation of precocious FNHTR occurrence associated with red blood cells (RBCs) transfusion or accumulations of IL-1a e ß, IL-1RA and TNF in PCs during storage. The methods used were based on PCR and restriction enzymes (PCR-RFLP) or automated DNA sequencing for polymorphism characterizations. In our population sample from Campinas, southeast Brazilian region, we detected similar genotype frequencies to European and North American populations and significant differences to the Asiatic and African ones. A rare allele IL1RN*0 was detected in our control group, we did not demonstrate the interference of this allele in heterozygousity, in the IL1RN gene expression in the in vitro model. In PCs from plasma rich in platelet (PRP-PC), we observed increased IL-1ß accumulation in PCs from IL1B-511CC blood donors on storage days 5 and 7 (D5 and D7). IL-1ß and TNF levels were inversely correlated with platelet content in PRP-PCs and no correlation with leukocyte content. There was no increase in IL-1a e IL-1RA levels during storage. In the multitransfused patients group, the IL1RN*2 allele and IL1RN*2.2 genotype were correlated with the occurrence of precocious FNHTR. We concluded that studies of genotypic characteristics of blood donors and patients might contribute to explain the variations in frequencies and gravity of side effects related with blood transfusion characterizing high risk groups and may outline a new and promising investigation field / Doutorado / Hematologia e Hemoterapia / Doutor em Clínica Médica

Orientador: Edmur Franco Carelli / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciências Médicas / Made available in DSpace on 2018-08-03T19:54:39Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Conceicao_MargaridaPerpetuodaSilva_M.pdf: 2783202 bytes, checksum: 75b56463fbc26fc796fe363fae55cb82 (MD5) Previous issue date: 2003 / Resumo: A presente dissertação visa organizar os conhecimentos sobre a citocina Oncostatin M (OSM) , ao mesmo tempo que realça as vias indiretas de sua expressão com o objetivo de clarear conceitos para aplicabilidade futura. Esta revisão apresenta a molécula isolada e suas propriedades benéficas e adversas, além de uma discussão sobre as ações biológicas atualmente conhecidas que favorecem a concepção para possíveis protocolos de tratamento nos Glioblastoma Multiforme (GBM). Ressalta também a possibilidade de associação entre os inibidores da cic1o-oxigenase 2 (ICOX-2) e os indutores desta citocina visando o melhor bloqueio da proliferação tumoral em seu uso futuro e também discutir a manipulação da angiogênese. Desta forma as evidências levantadas favorecem a proposta de uma possibilidade de uso desta citocina combinado com os indutores de sua expressão e os inibidores da cic1o-oxigenase 2 (ICOX-2) / Abstract: The purpose of this artic1e is to organize available information on Oncostatin M as well as higblight its indirect pathways of expression so that concepts are clarified for future applicability. This review presents the isolated molecule with its adverse as well as beneficial properties and a discussion on known biological activities that favor the developrnent of possible treatment protocols, especially in the case oftumors ofthe central nervous system. The possibility of an association between COX-2 inln"bitors and this cytokine with a view to its use in the future is also highlighted / Mestrado / Neurologia / Mestre em Ciências Médicas

Orientador: Maria Heloisa Souza Lima Blotta / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciencias Medicas / Made available in DSpace on 2018-08-04T03:34:42Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Mamoni_RoneiLuciano_D.pdf: 2710116 bytes, checksum: 0509d4df3007265d7ee581ed17507d5e (MD5) Previous issue date: 2005 / Resumo: A paracoccidioidomicose (PCM) pode ser classificada em três grupos principais: PCM-infecção (PI); forma adulta (FA) e forma juvenil (FJ). O presente trabalho teve como objetivo comparar a resposta imunológica nesses diferentes grupos, por meio da análise da cinética da expressão do RNA mensageiro (RNAm) de citocinas e quimiocinas (IL-2, IL-4, IL-5, IL-6, IL-10, IFN-g, TGF-b, TNF-a, CXCL8, CXCL9, CXCL10) por RT-PCR, e caracterizar fenotipicamente as células produtoras dessas citocinas por citometria de fluxo. Como resultado obtivemos que indivíduos do grupo PI expressam precocemente maior quantidade de RNAm para IFN-g, TNF-a, CXCL9 e CXCL10, quando comparados aos pacientes com a FJ da PCM, e níveis similares de CXCL10 e IFN-g e aumentados de CXCL9 e TNF-a quando comparados aos pacientes com a FA. A expressão do RNAm para citocinas Th2 (IL-4, IL-10, IL-5 e TGF-b), de maneira geral, foi maior e mais precoce em indivíduos com a FA ou FJ, quando comparados aos indivíduos do grupo PI. Em relação a expressão proteica, observamos que indivíduos do grupo PI apresentam um número maior de células produtoras de IFN-g, TNF-a, IL-2, CXCL9 e CXCL10 quando comparados aos dois grupos de pacientes. A produção de IFN-g foi observada principalmente em células CD3+CD8+, enquanto que IL-2 e TNF-a foram detectados principalmente em células CD3+CD4+. Em relação à expressão de moléculas de superfície, observamos que monócitos de indivíduos do grupo PI apresentam maior expressão de CD80 e menor expressão de CD86 e CD54, quando comparados aos indivíduos com a FA ou FJ, e maior expressão de HLA-DR e CD11a quando comparados aos indivíduos com a FJ da PCM. Nossos resultados indicam que a cinética diferencial de produção de RNAm para citocinas do tipo Th1 ou Th2 pelos grupos estudados pode direcionar a resposta imunológica após a infecção, originando as diferenças clínicas observadas / Abstract: Paracoccidioidomycosis (PCM) presents three major forms: PCM-infection (PI); adult form (AF) and juvenile form (JF). The aim of this study was to compare the immunological response in these groups through the analysis of the kinectics of mRNA expression of some cytokines and chemokines (IL-2, IL-4, IL-5, IL-6, IL-lO, IFN-y, TGF p, TNF-a, CXCLS, CXCL9 and CXCLlO) by RT-PCR, as well as, to characterize the phenotype of the cytokines producing cells by flow cytometry. The results showed that PI individuaIs express earlier and higher levels of mRNA for IFN-y, TNF-a, CXCL9 and CXCLIO when compared to JF patients and similar levels of CXCLlO and IFN-y and higher levels of CXCL9 and TNF -a when compared to AF ones. On the other hand, the mRNA expression ofTh2 cytokines (IL-4, IL-IO, IL-5 and TGF-P) was higher and earlier in JF and AF groups when compared to PI individuaIs. In relation to protein expression, we observed that PI group presents a higher percentage of cells producing IFN-y, TNF-a, IL-2, CXCL9 and CXCLIO when compared to both groups ofpatients. The production ofIFN-y was predominantIy done by CD3+CDS+ T cells, whereas IL-2 and TNF-a production was higher in CD3+CD4+ cells. Monocytes ofPI individuaIs also presented higher expression of CDSO and lower expression of CDS6 and CD54 when compared to JF and AF patients, and higher expression of HLA-DR and CDIIa only when compared to JF patients. These results indicate that the differential kinetic of mRNA expression of ThI or Th2 cytokines observed in the different forms of PCM may modulate the immunological response resulting in the different outcomes observed in this disease / Doutorado / Ciencias Biomedicas / Doutor em Ciências Médicas