Made available in DSpace on 2015-09-17T15:26:41Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2015-06-19. Added 1 bitstream(s) on 2015-09-17T15:45:21Z : No. of bitstreams: 1 000846545_20160619.pdf: 570368 bytes, checksum: 359b7619b228700f4adb6cdcb47ce67e (MD5) Bitstreams deleted on 2016-06-20T12:14:09Z: 000846545_20160619.pdf,. Added 1 bitstream(s) on 2016-06-20T12:14:48Z : No. of bitstreams: 1 000846545.pdf: 1592978 bytes, checksum: c27d71a38bf3f6a65e31951c06bb5e3b (MD5) / carcinoma hepatocelular (CHC) é um tumor primário mais frequente do fígado, sendo a terceira causa de mortalidade por câncer. Dentre os tumores hepáticos primários o CHC é responsável por quase 90% dos casos. Frente a busca para o desenvolvimento da produção de novos fármacos derivados de produtos naturais, os fungos endofíticos apresentam-se como fontes promissoras. Estudos recentes mostraram que os extratos de fungos endofíticos tem várias atividades, como propriedades anti-tumorais. O objetivo do presente estudo foi avaliar a capacidade de citotóxica dos extratos brutos produzidos pelos fungos endofíticos isolados de Eugenia jambolana nas linhagens hepatocarcinoma murinho (Hepa 1c1c7), linhagem humana de hepatocarcinoma (Hep G2) e queratinócito normal de pele (HaCat) e verificar a indução de apoptose, atividade de caspase, genotoxicidade, mutagenicidade e identificar a distribuição no ciclo celular. Nossos resultados indicam que ambos os extratos apresentaram atividade inibidoras. O extrato bruto do fungo Pseudofusicoccum stromaticum (Ej-fm1) apresentou maior seletividade para Hepa1c1c7, apresentando CI50 de 58 μg/mL, com uma inibição celular de 63,4% e 38,4% para as concentrações de 100 μg/mL e 50 μg/mL. Enquanto HepG2 e HaCat não apresentaram morte celular significativa. O extrato de Neofusicoccum sp. (Ej-fv1) induziu alta citotoxicidade, apresentando inibição celular 67,83% apenas na concentração de 100 μg/mL com um valor de CI50 de 89 μg/mL. HepG2 e HaCaT demonstraram inibição celular significativa (38,4% e 43,5%, respectivamente), mas também apenas na maior concentração (100 μg/mL). Na avaliação de apoptose usando o método Hoechst/Iodeto de propídeo em Hepa1c1c7, o extrato (Ej-fm1) apresentou diferença estatística para a presença de apoptose tardia, bem como necrose. Mas para o extrato (Ej-fv1) houve morte celular significativa apenas na concentração de 100 μg/mL para a apoptose precoce e... / Hepatocellular carcinoma (HCC) is more frequent primary liver cancer, and third most commum cause of cancer mortality. Among primary liver tumors HCC is responsible for nearly 90% of cases. Compared to search for the development of production of novel drugs from natural products, the endophytic fungi have been presented as promising sources. Recent studies showed that extracts of endophytic fungi have various activities, such as, properties antitumor. The aim of this study was to evaluate cytotoxicity capacity of the crude extract isolated endophytic fungus ripe fruit, Ej-fm1 and unripe fruit, Ej-FV1 Eugenia jambolana in Murine hepatoma cell (Hepa 1c1c7), Human hepatocarcinoma cell line (Hep G2) and spontaneously immortalized human keratinocytes (HaCaT) and check the induction of apoptosis, caspase activity, genotoxic activity, mutagenic and distribution of cell cycle. Our findings indicate that demonstrated that both extracts showed inhibitory activities. The crude extract from Pseudofusicoccum stromaticum (Ej-fm1) possessed more selectivity against Hepa1c1c7 showed IC50, value of 58 μg/mL, having a cellular inhibition 63.4% and 38.4% for the concentration 100μg / ml and 50μg/ml. While for HepG2 and HaCat, no significant cell death. The extract of Neofusicoccum sp.(Ej-fv1) induced high cytotoxicity, showed cellular inhibition 67.83% just at concentration 100μg/ml with IC50 value of 89 μg/mL. HepG2 and HaCaT cell also showed significant inhibition (38.4% and 43.5%, respectively) also only at the highest concentration. To evaluate apoptosis using Hoechst/ Propidium iodide method in Hepa1c1c7 cells, the extract (Ej-fm1) showed statistical difference for presence of late apoptosis, as well as necrosis. But the extract (Ej-fv1) there are significant cell death only in the concentration of 100μg / mL for early apoptosis and necrosis, noting a concentration-response for early apoptosis. About the analyses of cell death mechanisms, we ...

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:32:41Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2007-11-22Bitstream added on 2014-06-13T20:04:04Z : No. of bitstreams: 1 monnazzi_lgs_dr_arafcf.pdf: 1628105 bytes, checksum: 439e61c2131f392d13c659297a95020d (MD5) / Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico (CNPq) / Universidade Estadual Paulista (UNESP) / As três espécies patogênicas do gênero Yersinia, Y. pestis, Y. enterocolitica e Y. pseudotuberculosis, compartilham um tropismo pelos tecidos linfóides e um plasmídeo de 70-kb que é essencial para a virulência. O plasmídeo codifica um sistema de secreção do tipo III e proteínas efetoras chamadas Yops (Yersinia outer proteins). Este sistema de secreção é responsável por translocar as Yops para dentro das células do hospedeiro, onde elas interagem com alvos específicos e alteram as funções destas células. As Yops são capazes de modular a resposta imune do hospedeiro, permitindo à bactéria se replicar extracelularmente nos tecidos e órgãos linfóides. Embora haja muita informação sobre os mecanismos usados pela Yersinia para evadir do sistema imune inato de defesa, pouco se sabe sobre como ela afeta a resposta imune adaptativa in vivo. O objetivo deste trabalho foi analisar a influência das Yops E, H e M, translocadas pela Y. pseudotuberculosis, na colonização e persistência da bactéria no baço e fígado dos animais infectados, nas quantidades de LT-CD4 e LT-CD8 durante a infecção e na produção das principais citocinas Th1 e Th2 por estas subpopulações de linfócitos. Além disso, foi verificado o papel destas Yops sobre a ativação do fator nuclear κB (NF-κB) e sobre a atividade citotóxica dos LT-CD8. Para isso, camundongos BALB/c fêmeas foram infectados intravenosamente com a amostra selvagem de Y. pseudotuberculosis (WT), ou com amostras mutantes incapazes de secretar as Yops E, H e M (YopE-, YopH- e YopM-), ou ainda com a amostra curada do plasmídeo de virulência (YpIII). No 5°, 7°, 14° e 21° dia pós-infecção (pi), os animais foram sacrificados e as células esplênicas foram obtidas de camundongos infectados e de camundongos não infectados (grupo controle). Os níveis de colonização no baço e no fígado foram determinados por... / The three pathogenic species of the genus Yersinia, Y. pestis, Y. enterocolitica and Y. pseudotuberculosis, share a tropism for lymphoid tissues and a 70-kb plasmid essential for virulence. The plasmid encodes a type III secretion system and effector proteins called Yops (Yersinia outer proteins). This secretion system is responsible for translocating the Yops into the host cells, where they interact with specific host targets and alter the functions of these cells. Yops are able to modulate the host immune defenses allowing the bacteria to replicate extracellularly in lymphoid tissues and organs. Although there is ample information on the mechanisms used by Yersinia to evade the innate immune system, very little is known about how it affects the adaptive immune response in vivo. The aim of this research was to analyze the influence of translocated Yops E, H and M of Y. pseudotuberculosis on the colonization and persistence of the bacterium in the spleen and liver of infected animals, on the quantities of CD4 and CD8 T cells during the infection and on the production of the main Th1 and Th2 cytokines by these lymphocyte subpopulations. In addition, it was verified the role of these same Yops on the activation of nuclear factor κB (NF- κB) and on the CD8 T cells cytotoxic activity. To this end, female BALB/c mice were infected intravenously with the wild type Y. pseudotuberculosis (WT), or with the mutant strains unable to secrete the Yops E, H and M (YopE-, YopH- and YopM-) or with the plasmid-cured strain (YpIII). On the 5th, 7th, 14th and 21st days post-infection (pi), the animals were sacrificed and the spleen cells were isolated from infected and uninfected mice (control group). The levels of colonization in the spleen and liver were determined by counting the number of colony-forming units. Both the phenotypic analysis of lymphocytes and the intracellular... (Complete abstract click electronic access below)

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:33:01Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2008-08-18Bitstream added on 2014-06-13T19:22:59Z : No. of bitstreams: 1 lessa_fcr_dr_arafo.pdf: 4260399 bytes, checksum: 525a03c2dd993eddd2a9e6fcabbbc84b (MD5) / O objetivo da presente pesquisa foi avaliar o efeito citotóxico direto e transdentinário de diferentes concentrações de clorexidina (CHX), bem como sua atividade antibacteriana. Para isto, concentrações de 0,06%; 0,12%; 0,2%; 1% e 2% de CHX foram aplicadas sobre células odontoblastóides MDPC-23 em cultura (teste direto). Além disto, as concentrações de CHX também foram aplicadas sobre a superfície oclusal de discos de dentina de 0,5mm ou 0,2mm de espessura, os quais apresentavam células MDPC-23 cultivadas sobre sua superfície pulpar (teste indireto). O metabolismo e morfologia celular foram avaliados pelo teste de MTT e pela análise em MEV, respectivamente. O potencial antibacteriano da CHX foi avaliado sobre S.mutans com e sem interposição de discos de dentina. Os dados numéricos obtidos dos experimentos realizados foram submetidos à análise estatística. A redução do metabolismo celular provocado pela CHX mostrou-se dose e tempo dependentes. Foi demonstrado ainda que quanto menor a espessura do disco de dentina e maior a concentração da CHX, mais intensos são os efeitos tóxicos deste agente químico sobre as células pulpares em cultura, e mais efetiva é a atividade antibacteriana da CHX sobre S.mutans. Foi possível concluir que o intenso efeito tóxico direto observado para a CHX é notavelmente reduzido pela interposição de barreiras de dentina, cuja espessura interfere no metabolismo das células pulpares MDPC-23. Além disso, a CHX difunde através dos túbulos dentinários exercendo efeito antibacteriano contra S.mutans. / The aim of this in vitro study was to evaluate the direct and transdentinal cytotoxicity of different concentrations of chlorhexidine (CHX) and its antibacterial activity. The following concentrations of CHX: 0.06%; 0.12%; 0.2%; 1%; and 2% were applied directly on odontoblast-cell line MDPC-23 or on the occlusal surface of dentin discs (0.5mm or 0.2mm thick) which presented pulp cells seeded on their pulpal surface. Cell metabolic activity and morphology were evaluated by MTT assay and SEM, respectively. The influence of dentin thickness on the antibacterial activity of CHX against S. mutans was also assessed. The data were submitted to the statistical analysis of Mann-Whitney. Reduction in the cell metabolism from 42% to 78% was observed according to the concentration of CHX and its period of application on the cells. Therefore, the direct cytotoxicity of CHX is dose and time dependent. It was also observed that the most intense toxic effects occurred as thicker was the dentin disc and as higher was the concentration of CHX. Antibacterial activity against S. mutans was observed to the highest concentration of CHX. It was concluded that the intense cytotoxicity of all concentrations of CHX applied directly on the MDPC-23 cells is notably reduced by the presence of dentin discs interposed between this chemical agent and the cultured cells. In addition, the transdentinal diffusion of CHX causes antibacterial activity against S. mutans.

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:33:23Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2011-04-28Bitstream added on 2014-06-13T21:05:59Z : No. of bitstreams: 1 alves_rt_dr_arafcf.pdf: 451225 bytes, checksum: 5c66643bb27a768c6a425806c3aabdb0 (MD5) / Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico (CNPq) / Universidade Estadual Paulista (UNESP) / A atividade de 92 extratos etanólicos de espécies de Annonaceae, Apiaceae, Cucurbitaceae, Lauraceae, Moraceae, Nyctaginaceae, e Verbenaceae foi avaliada sobre formas epimastigotas das cepas Y e Bolívia de Trypanosoma cruzi, nas concentrações de 500, 350, 250 e 100 µg/ml. Quinze extratos de Lippia salviaefolia, L. sidoides, L. laciocalycina, L. lupulina, L. balansae, L. velutina e suas frações hexânicas, de acetato de etila, n-butanólicas e aquosas foram avaliados sobre formas epimastigotas do clone B5 da cepa CL Brener de T. cruzi, nas concentrações de 32, 8, 2 e 0,5 µg/ml. Adicionalmente, as amostras mais promissoras de Lippia sp foram avaliadas, in vitro, sobre as formas tripomastigotas e amastigotas de T. cruzi e, in vivo, em camundongos BALB/c. A citotoxicidade foi avaliada em fibroblastos da linhagem LLCMK2 e o benzonidazol foi utilizado como controle positivo. Todos os 92 extratos etanólicos, testados sobre as formas epimastigotas da cepa Y de T. cruzi, foram inativos. Os melhores resultados entre as 92 amostras avaliadas foram obtidos com o extrato etanólico de Ocotea paranapiacabensis, por apresentar atividade tripanocida sobre as formas epimastigotas da cepa Bolívia e toxicidade moderada, e com o extrato de Aegiphilla lhotzkyana, que demonstrou atividade tripanocida moderada sobre a cepa Bolívia e moderada citotoxicidade. Dentre os extratos etanólicos de Lippia sp avaliados, o de folhas de L. velutina apresentou a maior atividade tripanocida sobre as formas epimastigotas e toxicidade moderada, mas foi inativo contra as formas tripomastigotas e amastigotas de T. cruzi. Os melhores resultados foram obtidos da sua fração de acetato de etila que apresentou atividade, sobre formas epimastigotas, 42 vezes maior do que o benzonidazol, com Índice de Seletividade (IS) de 371,0, além de atividade moderada sobre as formas tripomastigotas. Esta amostra foi inativa contra... / Trypanocidal activity of 92 ethanol extracts of species of Annonaceae, Apiaceae, Cucurbitaceae, Lauraceae, Moraceae, Nyctaginaceae, and Verbenaceae was evaluated using the epimastigote forms of the Y and Bolivia strains of Trypanosoma cruzi at a concentration of 500, 350, 250, and 100 µg/ml. Fifteen extracts of Lippia salviaefolia, L. sidoides, L. laciocalycina, L. lupulina, L. balansae, L. velutina, their liquid-liquid extraction fractions of hexane, ethyl acetate, n-butanol and water were evaluated using the epimastigote forms of B5 clone of CL Brener strain of T. cruzi at a concentration of 32, 8, 2, 0.5 µg/ml. Additionally, samples of the most promising of Lippia sp were evaluated, in vitro, using trypomastigote and amastigote forms of T. cruzi and, in vivo, in BALB/c. The cytotoxic activity was evaluated on fibroblasts of lineage LLCMK2 and benznidazole was used as positive control. All the 92 ethanol extracts tested against epimastigote forms of the Y strain of T. cruzi are inactive. The best results among the 92 samples evaluated were obtained with ethanol extracts of Ocotea paranapiacabensis, for showing trypanocidal activity against epimastigote forms of the Bolivia strain and being moderately toxic, and the extracts of Aegiphilla lhotzkyana, which showed moderate trypanocidal activity against the Bolivia strain and moderate toxicity. Among the 15 ethanol extracts of Lippia sp assayed, the one from of leaves of L. velutina showed the highest trypanocidal activity on epimastigote forms and moderate toxicity, but was inactive against trypomastigote and amastigote forms of T. cruzi. Best results were obtained for its ethyl acetate fraction, which showed activity in epimastigote forms, 42 times more than benznidazole, with Selectivity Index (SI) of 371.0 and moderate activity on trypomastigote forms. This sample was inactive against the amastigote forms of the parasite... (Complete abstract click electronic access below)

Made available in DSpace on 2015-06-17T19:33:50Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2015-02-20. Added 1 bitstream(s) on 2015-06-18T12:47:58Z : No. of bitstreams: 1 000833323_20170220.pdf: 175044 bytes, checksum: 48c5028906dba0a5f090a189a7e9c467 (MD5) Bitstreams deleted on 2017-02-24T13:00:35Z: 000833323_20170220.pdf,. Added 1 bitstream(s) on 2017-02-24T13:01:24Z : No. of bitstreams: 1 000833323.pdf: 533020 bytes, checksum: a7a7c01dee33e19f3c26174f3a80f68a (MD5) / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / O herbicida seletivo de maior destaque, desenvolvido na década de 1940, é o ácido 2,4-diclorofenoxiacético (2,4-D), uma auxina sintética cujo modo de ação é semelhante ao das auxinas naturais, porém com maior estabilidade na planta e por isso, mais eficaz que o hormônio natural. O uso constante e indiscriminado desta classe de agroquímicos tem causado sérios danos ao meio ambiente. Diante do exposto o presente trabalho objetivou investigar a toxicidade do herbicida 2,4-D comercial DMA 806 BR® utilizando os organismos testes Allium cepa e Tradescantia pallida. Foi intuito ainda comparar os resultados aqui obtidos investigando a formulação comercial com os dados já constantes na literatura que investigaram o princípio ativo do ácido 2,4-diclofenoxiacético para verificar se há interação aditiva e/ou sinérgica entre o ingrediente e as demais substâncias que compõem o produto comercial. Para avaliar a ação do herbicida 2,4-D comercial foram testadas três concentrações, a utilizada em campo, metade e um quarto. Cem sementes de A. cepa foram submetidas à germinação de forma contínua para avaliação da toxicidade, citotoxicidade e genotoxicidade das três concentrações do herbicida testadas. O controle positivo foi feito com o herbicida Trifluralina® (0.95 μL mL-1) e o negativo com água destilada. O ensaio foi conduzido em triplicata. Para avaliar genotoxicidade por meio do teste de micronúcleo com T. pallida, 10 hastes florais jovens com botões fechados, foram coletadas e expostas as três concentrações do 2,4-D comercial por 8 horas, seguidas de 24 horas de recuperação em água destilada sob constante aeração. O mesmo foi feito com controle positivo metil metano sulfonato (7.7 x 10-3 μL ml-1) e controle negativo em água destilada. Foram contabilizadas 3.000 tétrades por tratamento. A distribuição dos dados em relação a normalidade foi realizada com o teste Shapiro-Wilk, o teste paramétrico... / The most prominent selective herbicide, developed in the 1940s, is the 2,4-dichlorophenoxyacetic acid (2,4-D), with an auxin whose mode of action is similar to the natural auxin, but with greater stability in plant and therefore, more effective than the natural hormone. The constant and indiscriminate use of this agrochemical class has caused serious damage to the environment. Given the above the present study aimed to investigate the toxicity of the commercial 2,4-D herbicide DMA 806 BR®, using the Allium cepa and Tradescantia pallida as models. It was still aimed to compare the results obtained by investigating a commercial formulation with data already constants in the literature that investigated the active ingredient (2,4-diclofenoxiacético acid) to check for additive interaction and/or synergic ingredient and other substances contained in the commercial product. Three concentrations of commercial 2,4-D herbicide were tested to assess the toxic potential effects: field concentration, half and a quarter of field concentration. One hundred seeds of A. cepa were subjected to continuously germination for evaluating the toxicity, cytotoxicity and genotoxicity of the three tested concentrations. The positive control was performed with the herbicide Trifluralin® (0.95 μL mL-1) and negative control with distilled water. The experiment was conducted in triplicate. To assess genotoxicity by means of the micronucleus test with T. pallida, 10 young flowers stems with closed buds were collected and exposed to three different concentrations of 2,4-D Commercial for 8 hours, followed by 24 hours recovery in distilled water under constant aeration. The positive control was performed with methyl methane sulfonate positive control (7.7 x 10-3 μL ml-1) and negative control in distilled water. Three thousand tetrads were counted per treatment. Data distribution for normality was performed with the Shapiro-Wilk test, the parametric test was performed...

Made available in DSpace on 2015-07-13T12:10:13Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2014-07-30. Added 1 bitstream(s) on 2015-07-13T12:25:35Z : No. of bitstreams: 1 000837449_20160730.pdf: 136013 bytes, checksum: 49574e22a9e757e3ebc3ea724b124dd5 (MD5) Bitstreams deleted on 2016-08-01T11:30:00Z: 000837449_20160730.pdf,. Added 1 bitstream(s) on 2016-08-01T11:30:56Z : No. of bitstreams: 1 000837449.pdf: 234638 bytes, checksum: 387573c17a92896157521148bb27d2aa (MD5) / Plantas condimentares definem espécies vegetais utilizadas para acrescentar odor ou sabor aos alimentos e está presentes na culinária humana por milhares de anos. Além do emprego na alimentação, destacam-se por apresentarem benefícios curativos e terapêuticos, apresentando atividade antiinflamatória, analgésica, antitumoral, antimicrobiana e antioxidante. Para assegurar os benefícios atribuídos a essas plantas, tornou-se importante o estudo da citotoxicidade das mesmas, considerando o risco iminente à saúde decorrente da utilização errônea e/ou abusiva de determinadas plantas condimentares, que podem ser potenciais causadores de alterações no DNA. Diante do exposto, o presente trabalho teve como objetivo avaliar o potencial citotóxico e antioxidante de Cinnamomum zeylanicum Breyn (Canela), Origanum vulgare L. (Orégano), Petrosolium sativum L. (Salsa), Piper nigrum L. (Pimenta do Reino), Zingiber officinale Roscoe (Gengibre) e Ocimum basilicum L. (Manjericão), por meio do bioensaio com Allium cepa, concluindo que nenhuma apresentou atividade citotóxica nas concentrações avaliadas. E pelos testes de DPPH, efeito quelante de Fe2+, teste FRAP, fenóis totais e flavonóides, foi demonstrado que as plantas condimentares avaliadas podem ser utilizadas como fonte de antioxidantes naturais, fenóis totais e flavonoides / Plants condiments define the species used to add odor or flavor to food and is present in human food for thousands of years. Than employment in food, stand out because they have healing and therapeutic benefits, with antiinflammatory, analgesic, antitumor, antimicrobial and antioxidant. To ensure the benefits attributed to these plants, it became important to study the cytotoxicity of the same, considering the likely health risk due to erroneous and / or misuse of certain condiments plants, which may potentially cause alterations in DNA. Given the above, the present work aimed to evaluate the cytotoxic and antioxidant potential of Cinnamomum zeylanicum Breyn (Cinnamon), Origanum vulgare (Oregano), Petrosolium sativum L. (Salsa), Piper nigrum L. (Black Pepper) Zingiber officinale Roscoe (ginger) and Ocimum basilicum L. (Basil), through bioassay with Allium cepa, concluding that showed no cytotoxicity at the concentrations evaluated. And the DPPH test, Fe2 + chelating effect, FRAP test, total phenols and flavonoids has been shown that the tested plant condiments can be used as a source of natural antioxidants, flavonoid and phenolic compounds

Made available in DSpace on 2015-09-17T15:25:52Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2015-03-27. Added 1 bitstream(s) on 2015-09-17T15:46:29Z : No. of bitstreams: 1 000845926_20170101.pdf: 227536 bytes, checksum: 2a191bf5d74671d97251e88e7f0145ba (MD5) Bitstreams deleted on 2017-01-02T15:03:51Z: 000845926_20170101.pdf,. Added 1 bitstream(s) on 2017-01-02T15:05:08Z : No. of bitstreams: 1 000845926.pdf: 1072676 bytes, checksum: cad2ff92580278b3dac67dc96e267389 (MD5) / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / O fungo Rhizoctonia solani, é um fitopatógeno que ataca diversas culturas, provocando o tombamento de plântulas. Há vários estudos visando o combate deste micro-organismo, no entanto, não há relatos da composição química de sua biomassa. De acordo com a literatura a biomassa fúngica pode ser uma fonte promissora de moléculas para aplicação em ensaios biológicos. A partir disso, um estudo inédito da composição química da biomassa do R. solani, principalmente em relação aos polissacarídeos, foi realizado. O micro-organismo foi cultivado em meio mínimo de Vogel com glucose como fonte de carbono. A biomassa resultante de vários cultivos foi tratada consecutivamente com etanol (1:20 m/v, 78 °C, 12h, 1x), e água destilada a quente (1:20 m/v, 100 °C, 4h, 4x). O extrato aquoso foi submetido a ciclos de congelamento e descongelamento de maneira a separar o material insolúvel da fração solúvel que foi precipitada em etanol e denominada PEH2O (precipitado etanólico do extrato aquoso). A fração solúvel foi analisada por GPC, cujos resultados indicaram a necessidade de purificação adicional. A cromatografia de filtração em gel Sepharose CL-6B, a pressão normal, separou o PEH2O em cinco frações distintas, denominadas de PI a PV, eluídas em ordem decrescente de suas massas moleculares. A análise cromatográfica para verificar o grau de homogeneidade de cada pico (GPC) indicou que tanto PIII quanto PV estavam puros e aptos a serem quimicamente caracterizados. A hidrólise ácida e os resultados das análises de metilação e ressonância magnética nuclear uni e bidimensional mostraram que PIII é uma β-D-glucana com cadeia principal formada por ligações (1→3), (1→6) e parcialmente substituída em O-6 por cadeias laterais β-D-glucopiranosídicas e PV uma fucomanogalactana com a cadeia principal formada por resíduos α-D-galactopiranosídicos (1→6) ligados, parcialmente substituídos em O-2 por unidades... / The Rhizoctonia solani is a phytopathogenic fungus that attacks various crops, causing the tipping of seedlings. There are several studies related to the combat this microorganism, however, no reports of its biomass chemical composition. According to the literature the fungal biomass can be a promising source of molecules for the use in biological studies. Then a novel study of the chemical composition from R. solani biomass, mainly in relation to the polysaccharides, was conducted. The microorganism was grown in Vogel minimal salts medium with glucose as carbon source. Biomass resulting from various cultivations was treated consecutively with ethanol (1:20 w/v), 78 °C, 12h, 1x) and hot distilled water (1:20 w/v, 100 °C, 4h, 4x). The aqueous extract was subjected to freezing and thawing cycles in order to separate the insoluble material. The soluble fraction was precipitated in ethanol and named PEH2O (ethanolic precipitated from aqueous extract). That fraction was analyzed by GPC and the results indicated that an additional purification procedure would be necessary. Gel filtration chromatography on Sepharose CL-6B at normal pressure, separated the PEH2O in five distinct fractions named PI to PV, which eluted in decreasing order of their molecular weight. The chromatographic analysis to verify the homogeneity degree of each peak (GPC) indicated that both PIII as PV were pure and able to be chemically characterized. The results from acid hydrolysis, methylation analysis and uni- and bidimensional nuclear magnetic resonance experiments showed that PIII is a glucan with β-D-Glcp(1→3), (1→6)-linked main chain, partially substituted at O-6 by β-D-Glcp side chains and PV a fucomannogalactan with a main chain composed by (1→6)-linked -D-Galp partially substituted in O-2 by non-reducing end-units of α- L-Fucp and α-D-Manp. Some Galp units from main chain were partially methylated at OH-3. Both...

Made available in DSpace on 2015-09-17T15:25:56Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2015-04-07. Added 1 bitstream(s) on 2015-09-17T15:46:23Z : No. of bitstreams: 1 000847893.pdf: 1252256 bytes, checksum: 1fd716895e2784e4359da8659fd760e0 (MD5) / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico (CNPq) / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP) / A prótese ocular é utilizada para a reabilitação estética e funcional da ausência ocular. O conhecimento da sua biocompatibilidade é importante para a utilização sem reações danosas aos usuários. O objetivo neste estudo foi avaliar a citotoxicidade de materiais utilizados na confecção de próteses oculares, por meio da análise da proliferação celular e da produção de citocinas pró-inflamatórias e de proteínas de matriz extracelular por células da conjuntiva humana. Inicialmente, foi analisada a influência de diferentes períodos de formação e de exposição dos extratos de resina acrílica branca (N1), termopolimerizada em água aquecida, sobre culturas de células da conjuntiva. Foram confeccionados 24 corpos de prova em resina, sendo 12 para cada período de exposição de células da conjuntiva aos extratos da resina testada (24 e 72 horas). Após a formação dos extratos por 24, 48 e 72 horas de imersão em meio de cultura e, 24 horas em água seguido de 24 horas de imersão em meio, os ensaios propostos foram realizados (n=3). Em seguida, foi avaliado o efeito citotóxico de diferentes métodos de polimerização de resina acrílica N1 em células da conjuntiva. Foram confeccionados 9 corpos de prova em resina (n=3), termopolimerizados em água aquecida, por energia de microondas ou ativados quimicamente, utilizados para a formação dos extratos dessas resinas. Os extratos foram obtidos após 72 horas de imersão dos corpos de prova em meio de cultura e, então, expostos às células da conjuntiva por 72 horas para a realização dos ensaios propostos. Adicionalmente, foi analisada a influência da presença do pigmento acrílico na confecção da prótese de resina acrílica N1, termopolimerizada em água aquecida... / Ocular prosthesis is a treatment option for esthetical and functional rehabilitation of ocular absence. The knowledge of ocular prosthesis material's biocompatibility is important to ensure a safe use in patients. The aim of this study was to evaluate the cytotoxic effect of ocular prosthesis materials, through the analysis of the cell proliferation, and the production of proinflammatory cytokines and extracellular matrix proteins by a human conjunctival cell line. Initially, the influence of different preparation and exposition periods of eluates from heat-polymerized ocular prosthesis N1 color acrylic resin in human conjunctival cell line was evaluated. A total of 24 acrylic resin samples were manufactured and divided into 2 groups, according to the eluate exposition period to conjunctival cell line (24 and 72 hours). Eluates corresponding to 24, 48 and 72 hours of resin sample immersion in medium and, 24 hours of resin sample immersion in water followed by 24 hours of immersion in medium, were prepared (n=3) for the proposed tests. Then, the cytotoxic effect of different polymerization methods of ocular prosthesis N1 color acrylic resin was analyzed. A total of 9 acrylic resin samples were manufactured (n=3), according to the polymerization method: heat-polymerization in water bath, polymerization by microwave energy and auto-polymerization. Eluates corresponding to 72 hours of resin sample immersion in medium were prepared for proposed tests and exposed to conjunctival cell line for 72 hours. Additionally, the influence of pigment incorporation on the cytotoxicity of heat-polymerized ocular prosthesis N1 color acrylic resin was evaluated...

Made available in DSpace on 2014-08-13T14:50:54Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2007-02-07Bitstream added on 2014-08-13T18:01:21Z : No. of bitstreams: 1 000766182.pdf: 2220320 bytes, checksum: 0d872d9c610a05baae89b1a4d138ca2e (MD5) / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / A anemia falciforme é uma anemia hemolítica hereditária crônica devida à herança de um gene para a hemoglobina S, de cada um dos progenitores, e caracteriza-se pela presença de glóbulos vermelhos que, quando privados de oxigênio, tomam a forma de foice. Tem sido relatado que pacientes com anemia falciforme apresentam aumento dos níveis circulantes de citocinas, incluindo fator de necrose tumoral-α (TNF-α). A hidroxiuréia (HU), fármaco citotóxico, é a estratégia terapêutica disponível para o tratamento, e atua como fonte de óxido nítrico beneficiando pacientes por aumentar os níveis de hemoglobina fetal (Hb F), uma hemoglobina geneticamente distinta que evita a polimerização de hemoglobina falciforme desoxigenada. Nesse contexto, dentro de uma linha de pesquisa que visa o planejamento, síntese e avaliação farmacológica de novos candidatos à protótipos de fármacos foram sintetizados uma série de compostos híbridos com propriedades inibidoras de TNF-α e doadoras de óxido nítrico, a fim de explorar eventual sinergismo de ação benéfico ao tratamento da anemia falaciforme.Foram sintetizados seis compostos, dos quais cinco, são derivados nitratos e um sulfonamídico. Os compostos: (1,3-dioxo-1,3-diidro-2H-isoindol-2-il)metil nitrato (composto I); (1,3-dioxo-1,3-diidro-2H-isoindol-2-il)etil nitrato (composto II);3-(1,3-dioxo-1,3-diidro-2H-isoindol-2-il)benzil nitrato (composto III);4-(1,3-dioxo-1,3-diidro-2H-isoindol-2-il)-N-hidroxibenzenosulfonamida (composto IV); 4-(1,3-dioxo-1,3-diidro-2H-isoindol-2-il)benzil nitrato (composto V); 2-[4-(1,3-dioxo-1,3-diidro-2H-isoindol-2-il)fenil]etil nitrato (composto VI), foram obtidos utilizando metodologia sintética linear, e obtidos com ótimos rendimentos globais. Todos os compostos apresentam atividade antinflamatória em edema de orelha de camundongo, e propriedades de inibição da infiltração leucocitária. Os compostos arílicos III, IV e V apresentam menor ... / The sickle cell disease is a chronicle hereditary hemolitic anemia due to the inheritance of each one of the ancestors, to a gene for the hemoglobina S. It is characterized for the red globule presence that, when private of oxygen, they take the form of a scythe. It has been reported that patient with sickle cell disease present increase the circulating levels of cytokines, including TNF-alpha. The hydroxyurea (HU), a cytotoxic drug, is the mainly available therapeutical strategy for the treatment which acts as nitric oxide source benefiting patient for increasing the levels of fetal hemoglobin (HbF), a kind of hemoglobin that decrease the polimerizaron of hemoglobin S in deoxy state. In this context, inside of a research program that aims at the designing, synthesis and pharmacological evaluation of new drug candidates we synthetized a hybrid compounds series with properties of TNF-alpha inhibition and nitric oxide donors, acting by a sinergic effect that may improve the life quality of sickle cells patients. We had sinthetized six compounds: five nitrates and one sulfonamidic.The compounds : 1,3-dioxo-1,3-dihydro-2H-isoindol-2-yl)methyl nitrate (compound I); (1,3-dioxo-1,3-dihydro-2H-isoindol-2-yl)ethyl nitrate (compound II); 3-(1,3-dioxo-1,3-dihydro-2H-isoindol-2-yl)benzyl nitrate (compound III); 4-(1,3-dioxo-1,3-dihydro-2H-isoindol-2-yl)-N-hydroxybenzenesulfonamide (compound IV); 4-(1,3-dioxo-1,3-dihydro-2H-isoindol-2-yl)benzyl nitrate (compound V); 2-[4-(1,3-dioxo-1,3-dihydro-2H-isoindol-2-yl)phenyl]ethyl nitrate (compound VI), had been synthetized using linear synthetic methodology, with good global yields. All compounds had presented antiinflamatory activity, and white blood cells infiltration inhibition properties. Aryl compounds III, IV and V had presented minor mutagenic effect when comparative to compounds I, II and VI. Compounds IV and VI, showed activity in the assay with erythroid progenitor K562 cells, increasing the genic expr

Made available in DSpace on 2014-11-10T11:09:59Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2014-02-24Bitstream added on 2014-11-10T11:57:26Z : No. of bitstreams: 1 000775423_20150301.pdf: 2148418 bytes, checksum: c1f9255bf325cb7092badd17921ea1d5 (MD5) Bitstreams deleted on 2015-03-03T12:45:18Z: 000775423_20150301.pdf,Bitstream added on 2015-03-03T12:45:55Z : No. of bitstreams: 1 000775423.pdf: 5973935 bytes, checksum: 4c211bb2075b58e6ac765675802ecb19 (MD5) / Ligantes N,S-doadores, bem como as fenantrolinas, vêm sendo amplamente utilizados na obtenção de complexos de elevada citotoxicidade. Tendo em vista estas propriedades, esses ligantes foram utilizados na síntese de complexos de paládio(II) com a finalidade de obter compostos com atividade antitumoral. A escolha do metal foi baseada na similaridade entre sua química de coordenação e a da platina(II), cujos complexos, como a cisplatina e a carboplatina, são amplamente utilizados como agentes quimioterápicos. Este trabalho apresenta a síntese de 4 ligantes e 23 complexos de Pd(II), dos quais 18 são inéditos. Os complexos 1-4 apresentam fórmula geral [PdX2(tmdmPz)] {X = Cl, Br, I, SCN; tmdmPz = 3,5-dimetil-1-metiltiocarbamoilpirazol}. Os complexos 5-23 são do tipo [PdCl2(NN)] ou [Pd(NN)(L)2]Cl2 {NN = 1,10-fenantrolina (phen), 4,7-dicloro-1,10-fenantrolina (Cl2-phen), dipirido[3,2-a:2’3’-c]fenazina (dppz), 7-metildipirido[3,2-a:2’3’-c]fenazina (CH3-dppz), 7-clorodipirido[3,2-a:2’3’-c]fenazina (Cl-dppz); L = tioureia (tu), N-metiltioureia (mtu), N,N’-dimetiltioureia (dmtu), N-feniltioureia (ftu)}. A caracterização dos compostos foi feita por espectroscopia na região do IV, RMN de 1H e 13C, análise elementar e condutividade. Os complexos preparados tiveram sua citotoxicidade avaliada frente a células tumorais e alguns ensaios foram realizados com o objetivo de avaliar sua possível interação com o DNA e, posteriormente, estabelecer relações estrutura-atividade. Para cada grupo de compostos, testes pertinentes foram realizados. Destacam-se os seguintes experimentos: reação com a guanosina, desenrolamento do DNA, determinação do Kb por espectroscopia UV, deslocamento do brometo de etídio, desnaturação térmica do DNA e coeficiente de partição dos complexos. Os resultados obtidos indicaram que diversos fatores interferem tanto na citotoxicidade quanto na afinidade pelo DNA. Dentre as propriedades mais... / The use of N,S-donor ligands, as well as phenanthrolines, has been widely explored in the preparation of complexes with increased cytotoxicity. Thus, these ligands were employed in the synthesis of new palladium(II) complexes with the aim to obtain compounds displaying good antitumor activity. The choice for using this metal was based on the similarity of its coordination chemistry to that of platinum(II) whose compounds, such as cisplatin and carboplatin, are widely used as antitumor agents. This works presents the synthesis of 4 ligands and 23 Pd(II) complexes. Complexes 1-4 have the general formulae [PdX2(tmdmPz)] {X = Cl, Br, I, SCN; tmdmPz = 3,5-dimethyl-1-methylthiocarbamoylpyrazole}. Complexes 5-23 of the type [PdCl2(NN)] or [Pd(NN)(L)2]Cl2 {NN = 1,10-phenanthroline (phen), 4,7-dichloro-1,10-phenanthroline (Cl2-phen), dipyrido[3,2-a:2’3’-c]phenazine (dppz), 7-methyldipyrido[3,2-a:2’3’-c]phenazine (CH3-dppz), 7-chlorodipyrido[3,2-a:2’3’-c]phenazine (Cl-dppz); L = thiourea (tu), N-methylthiourea (mtu), N,N’-dimethylthiourea (dmtu), N-phenilthiourea (ftu)} have been synthesized. These complexes were characterized by IR spectroscopy, 1H and 13C NMR, elemental analysis and molar conductivity. The complexes were tested against tumor cell lines. Some studies have been made aiming at evaluating their possible interaction with DNA and to establish preliminary structure-activity relationships. For each group of compounds selected experiments were made, including: reaction with guanosine, DNA unwinding, Kb determination, bromide ethidium displacement, thermal denaturation of DNA and partition coefficient of the complexes. The results indicated that cytotoxicity and also DNA binding affinity are influenced by several factors such as electronic distribution, hydrophobic effects and stereochemistry.