VARELA, Anna Lídia Nunes. Ação de galactomanana sulfatada isolada de Adenanthera pavonina na resposta bioquímica de defesa do feijão-de-corda [Vigna unguiculata (L.) Walp.] desafiado pelo fungo Colletotrichum gloeosporioides. 2012. 96 f. Dissertação (Mestrado em Bioquímica)-Universidade Federal do Ceará, Fortaleza-CE, 2012. / Submitted by Eric Santiago (erichhcl@gmail.com) on 2016-07-08T13:35:57Z No. of bitstreams: 1 2012_dis_alnvarela.pdf: 2177919 bytes, checksum: b7898740c28944706d715c2b6f0eb897 (MD5) / Approved for entry into archive by José Jairo Viana de Sousa (jairo@ufc.br) on 2016-08-02T20:17:13Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2012_dis_alnvarela.pdf: 2177919 bytes, checksum: b7898740c28944706d715c2b6f0eb897 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-08-02T20:17:13Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2012_dis_alnvarela.pdf: 2177919 bytes, checksum: b7898740c28944706d715c2b6f0eb897 (MD5) Previous issue date: 2012 / Cowpea [Vigna unguiculata (L.) Walp.] is a food of great commercial importance, being the main food source in some regions such as northeastern Brazil. Unfortunately, cowpea is subject to attack by various pathogens and pests, causing considerable losses in productivity. To reduce these losses, there are several chemical methods that are widely used, but the indiscriminate use of fungicides has caused damage to the environment and living beings. In search of alternative environmentally friendly, a promising option would be the induction of defense mechanisms of the plant itself through elicitor molecules. Given the above, this study aimed to elicit defense responses in cowpea through the use of galactomannan isolated from Adenanthera pavonina and induce resistance to Colletotrichum gloeosporioides. Twelve days after germination, cowpea plants (Vigna unguiculata) were treated with A. pavonina galactomannan (at concentrations of 100 mg/L and 200 mg/L) in the absence or presence of the fungus C. gloeosporioides (inoculated 6 hours after treatment with carbohydrate) for 6, 12, 24 and 48 h were carried out on biochemical analysis of protein extracts obtained from primary leaves. For enzymes POX and APX a significant increase occurred after 12 h of treatment with the galactomannan. With respect to antifungal activity of the enzymes and βGLU CHI, the plants treated with the galactomannan in general, showed an increase above 50% compared to control. Macroscopic analysis revealed that the leaves treated with 200 mg/L of galactomannan and infected with C. gloeosporioides showed necrotic lesions visibly reduced compared to control. Furthermore, the galactomannan was unable to inhibit the germination of spores and vegetative growth of the fungus C. gloeosporioides in vitro. The results of the present study indicate that galactomannan isolated from A. pavonina can increase crop tolerance of cowpea (V. unguiculata) against the fungus C. gloeosporioides. / O feijão caupi [Vigna unguiculata (L.) Walp.] é um alimento de grande importância comercial, sendo a principal fonte alimentícia em algumas regiões, como no Nordeste brasileiro. Infelizmente, o feijão-de-corda está sujeito ao ataque de vários patógenos e pestes, acarretando perdas consideráveis em sua produtividade. Para diminuir essas perdas, existem diversos métodos químicos que são largamente utilizados, porém o uso indiscriminado de fungicidas tem causado danos ao meio ambiente e aos seres vivos. Na busca de alternativas ecologicamente saudáveis, uma opção promissora seria a indução de mecanismos de defesa da própria planta através de moléculas elicitoras. Diante do exposto, o presente trabalho teve como objetivo elicitar respostas de defesa em feijão-de-corda através do uso de galactomanana sulfatada isolada de Adenanthera pavonina e induzir a resistência ao fungo Colletotrichum gloeosporioides. Doze dias após germinação, plantas de feijão-de-corda (Vigna unguiculata) foram tratadas com galactomana de A. pavonina (nas concentrações de 100 mg/L e 200 mg/L), na ausência ou presença do fungo C. gloeosporioides (inoculado após 6 h do tratamento com carboidrato) por 6, 12, 24 e 48 h, tendo sido realizadas as análises bioquímicas nos extratos protéicos obtidos das folhas primárias. Para as enzimas POX e APX ocorreu um significativo aumento a partir de 12 h do tratamento com a galactomanana. Em relação a atividade das enzimas antifungicas βGLU e CHI, as plantas tratadas com a galactomanana, no geral, apresentaram um aumento acima de 50% em relação ao controle. Análises macroscópicas revelaram que as folhas tratadas com 200 mg/L da galactomanana e infectadas com o C. gloeosporioides apresentaram lesões necróticas visivelmente reduzidas em relação ao controle. Ademais, a galactomana não foi capaz de inibir a germinação de esporos e crescimento vegetativo do fungo C. gloeosporioides in vitro. A partir dos resultados obtidos neste trabalho, conclui-se que, a galactomanana isolada de A. pavonina é capaz de aumentar a tolerância da cultura de feijão-de-corda (V. unguiculata) contra o fungo C. gloeosporioides.

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:33:40Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2010-04-28Bitstream added on 2014-06-13T19:44:37Z : No. of bitstreams: 1 carvalho_prs_dr_jabo.pdf: 817782 bytes, checksum: f660ce8f19f225b54d401b2637051704 (MD5) / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / Plantas e extratos vegetais podem apresentar ação antifúngica e de indução de defesa em função da presença de compostos com características elicitoras. Nesse sentido, foram objetivos do trabalho avaliar o efeito antifúngico dos extratos brutos aquosos de alecrim pimenta, nim e urtiga sobre Colletotrichum gloeosporioides; o potencial como elicitores de fitoalexina e o efeito de controle da antracnose em folhas destacadas de cajueiro. Os extratos brutos aquosos em três concentrações (5%, 10% e 15%) foram adicionados ao meio de cultura BDA para avaliar a ação sobre o crescimento micelial e esporulação e ao substrato Ágar-água para avaliar o efeito na germinação dos conídios e formação de apressórios. O potencial elicitor foi investigado em mesocótilos estiolados de sorgo e cotilédones de soja, determinando a capacidade elicitora das fitoalexinas deoxiantocianidina e gliceolina, respectivamente. Alecrim pimenta a 10% e 15% inibiu totalmente o crescimento micelial de C. gloeosporioides, a esporulação e germinação dos conídios. Nim inibiu parcialmente o crescimento micelial, esporulação e germinação dos conídios de forma proporcional à concentração usada. Urtiga estimulou o crescimento micelial, mas inibiu parcialmente a esporulação e a germinação. Apressórios não foram formados na presença dos três extratos brutos aquosos. Apenas alecrim pimenta a 15% mostrou potencial elicitor de deoxiantocianidina em sorgo. Já em soja foi observado potencial elicitor de gliceolina, embora com acentuada variação, tanto pelos três extratos brutos aquosos quanto pelas concentrações estudadas. O controle da antracnose em folhas destacadas de cajueiro foi observado em todas as concentrações dos extratos de alecrim pimenta e nim e, com urtiga a 15%. O maior efeito de controle foi proporcionado, igualmente, pelas concentrações do extrato de alecrim pimenta / The use of plant extracts have shown antifungal and induction of defense due to the presence of compounds with characteristics elicitors. Therefore, the goals were to evaluate the antifungal effect of aqueous extracts of rosemary pepper, neem and nettle on Colletotrichum gloeosporioides and the potential as elicitors of phytoalexin and the effect of control of anthracnose in detached leaves of cashew plant. The extracts of three concentrations (5, 10 and 15%) were added to the culture medium to evaluate the effect on the mycelial growth and sporulation or to the water-agar substrate to evaluate the effect on conidial germination and apressoria formation. The potential elicitor was investigated in etiolated sorghum mesocotyl and soybean cotyledons, determining the ability of the phytoalexin elicitor deoxyanthocyanidin and gliceollin respectively. Rosemary Pepper 10 and 15% completely inhibited the mycelial growth of C. gloeosporioides and sporulation and germination. Nim partially inhibited the mycelial growth, sporulation and spore germination in proportion to the concentration used. Nettle stimulated mycelial growth, but partially inhibited the sporulation and germination. Appressoria were not formed in the presence of the three extracts. Only rosemary pepper 15% showed potential elicitor of deoxyanthocyanidin in sorghum. In soybean, potential elicitor of gliceolina, although with marked variation, was observed so the three extracts as the concentration. Control of anthracnose in detached leaves of cashew plant was observed at all concentrations of extracts of rosemary pepper and neem and nettle to 15%. The biggest effect of control was provided equally by the concentrations of the extract of rosemary pepper

Feo-hifomicose refere-se a infecções por fungos pigmentados escuros. Revisamos a casuística brasileira entre 1953 e 2010, apresentando as características clínico-epidemiológicas e diagnósticas de 17 casos. Nas quais a coloração de hematoxilina-eosina foi usada para visualizar alterações estruturais nas lesões; a coloração da prata para identificação dos microrganismos; e coloração de Fontana-Masson confirmou a melanina na parede fúngica. Os fungos cresceram sob aspecto de micélio e produziam pigmentos de melanina, que dão às colônias cor negra característica. A observação das características microscópicas dos cultivos forneceu a identificação etiológica. A feo-hifomicose está amplamente disseminada no Brasil. Entretanto, é subestimada devido a fixação das biopsias em formol, o que impede o isolamento em cultivos. / Phaeohyphomycosis refers to infection caused by darkly pigmented fungi. We reviewed the Brazilian casuistic from 1953 to 2010 and presented the clinicalepidemiologic and diagnostic features of addictional 17 cases. In the cases hematoxilin and eosin stain was used to look for structural changes of the infected lesion; Gomori’s methenamine-silver stain identified these organisms; and Fontana-Masson staining confirm the presence of melanin fungal cell wall. The organisms formed mycelial colonies and produced melanin-like pigments that give the colonies the characteristic dark color. The microscopic study of cultures identified etiology. The phaeohyphomycosis is a widespread tropical disease in Brazil. However, it is underestimated due to formalin fixation tissue specimens that oppose the prior cultures.

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:28:30Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2011-02-28Bitstream added on 2014-06-13T20:37:27Z : No. of bitstreams: 1 souza_a_me_jabo.pdf: 1098095 bytes, checksum: 90c36824f4f63db09ab3ab57ecb91613 (MD5) / Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico (CNPq) / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP) / A mangueira (Mangifera indica L.) conta com diversos problemas de ordem fitossanitária, destacando-se como um dos mais importantes, a antracnose, causada na maioria das vezes pelo fungo C. gloeosporioides. Dada a importância comercial dessa doença, esse trabalho teve por objetivo realizar a caracterização genética e patogênica de uma população de isolados de Colletotrichum spp. oriundos de tecidos com sintomas de antracnose de diferentes variedades e órgãos das plantas de manga, dos principais municípios produtores do Estado de São Paulo, além de compará-los geneticamente com isolados obtidos de citros. O sequenciamento da região ITS1-5.8S-ITS2 possibilitou a identificação de 183 isolados de uma população obtida de mangueiras como C. gloeosporioides, com exceção de apenas um deles, o qual foi identificado como C. acutatum. Já os isolados de citros, sendo três obtidos de folhas assintomáticas e dois de flores com sintomas de podridão, foram classificados em C. gloeosporioides e C. acutatum, respectivamente. Os resultados obtidos mediante o emprego de marcadores fAFLP indicaram uma alta variabilidade genética entre isolados de uma mesma população e a ocorrência de fluxo gênico. Além disso, tais resultados corroboraram aqueles obtidos pelo sequenciamento da região ITS1-5.8S-ITS2, por agruparem os isolados do estudo segundo a sua espécie. Os isolados representativos da população, inclusive aqueles obtidos de citros, de ambas as espécies de Colletotrichum, causaram sintomas típicos de antracnose quando inoculados em folhas de mangueiras „Palmer‟ e „Tommy Atkins‟, indicando que, provavelmente, não há especificidade de hospedeiros para essas espécies / The mango crop (Mangifera indica L.) is attacked by several diseases and in this context, the anthracnose is one of the most important. This disease is caused by the fungus C. gloeosporioides in most situations. Due to economic importance of the anthracnose on mango, the aim of this study was to analyze the genetic and pathogenic variability of Colletotrichum spp. isolates obtained from different organs and varieties of mango plants with anthracnose symptoms, and from different municipalities of São Paulo State that are among the major producers of mango. The isolates from mango were also compared with isolates obtained from citrus. Sequencing of ITS1-5.8S-ITS2 region from 183 isolates obtained from mango allowed the identification of them as C. gloeosporioides, however, one of them, was identified as C. acutatum. The isolates from citrus, obtained from syptomless leaves and flowers with rot symptoms, were identified as C. gloeosporioides and C. acutatum, respectively. The results obtained by applying fAFLP markers indicated high level of genetic variability among isolates within population and the occurrence of gene flow. Moreover, these results corroborated those achieved by sequencing of the ITS1-5.8S-ITS2 region, because the isolates were grouped according to its species. Representative isolates of the population, including those obtained from citrus, belonging to both species of Colletotrichum, caused typical symptoms of anthracnose disease on mango leaves of Palmer and Tommy Atkins varieties, indicating the lack of host specificity for these species

Made available in DSpace on 2016-06-02T18:57:41Z (GMT). No. of bitstreams: 1 4635.pdf: 1080000 bytes, checksum: 7f72c6154417cfa404d1b1fbb1d30af2 (MD5) Previous issue date: 2012-07-31 / Universidade Federal de Minas Gerais / Brazil is the world's largest producer of orange, seated in an area of 839.000 hectares, of which 77% are located in the southeast. Despite the importance of this crop, the citrus industry faces serious problems represented by fungal diseases that reduce productivity such as citrus post-bloom fruit drop (PDF), caused by Colletotrichum acutatum. As control is predominant spraying chemicals. Considering the financial costs, environmental damage and public health of these applications, it is necessary to study new control alternatives, and among these, the biological control. Therefore this study aimed to develop a formulation of Bacillus subtilis, based different transport vehicles, with or without additives, aiming to control the PDF. The results showed that the powder as a vehicle for transport, provided a greater viability of bacterial cells stored in the two temperatures tested (1 and 22 ° C) for a period of 12 months. In vitro tests showed that the powder plus urea (0.02%) inhibited both the mycelial growth, as the germination of C. acutatum. The additives urea (0.02%) and ammonium molybdate (1mM) optimized the formulation, when tested in the same flower deployed. Control data under field conditions, showed that B. subtilis in powder plus urea (0.02%) yielded 72.7% of flowers without infection by the pathogen and 56.4% of the average number of effective fruits (ANEF) and on the other hand, the control treatment was obtained 8.8% flowers and 0.83% of healthy ANEF, chemical treatment (thiophanate-methyl) showed 69.6% of healthy flowers and 46.7% ANEF. It is concluded that, based formulation B. subtilis, with talc as a transport vehicle, plus an additive (urea 0.02%) kept the viability of bacteria cells and was effective in the controlling of disease. / O Brasil é o maior produtor mundial de laranja, assentado em uma área de 839 mil hectares, dos quais 77% encontram-se localizados na região sudeste do país. Não obstante a importância dessa cultura, o setor citrícola enfrenta sérios problemas representados por doenças fúngicas que diminuem a produtividade, como a podridão floral dos citros (PFC), causada pelo fungo Colletotrichum acutatum. A medida predominante de controle é a pulverização com defensivos químicos. Considerando os custos financeiros, prejuízos ambientais e de saúde pública envolvidos nestas aplicações, faz-se necessário o estudo de novas alternativas de controle e, dentre estas, o controle biológico. Portanto este trabalho teve por objetivo desenvolver uma formulação de Bacillus subtilis, usando diferentes veículos de transportes, com ou sem aditivos, visando o controle da PFC. Os resultados dos testes in vitro mostraram que o talco + uréia (0,02%) inibiram, tanto o crescimento micelial, quanto a germinação de C. acutatum. Os aditivos uréia (0,02%) e molibdato de amônio (1mM) otimizaram a formulação, quando a mesma foi testada em flores destacadas. Resultados de controle, sob condições de campo, revelaram que B. subtilis formulado em talco + uréia (0,02%) proporcionou 72,7% de flores sem infecção pelo fitopatógeno e 56,4% de número médio de frutos efetivos (NMFE); por outro lado, no tratamento testemunha obteve 8,8% de flores sadias e 0,83% de NMFE, o tratamento químico (tiofanato metílico) apresentou 69,6% de flores sadias e 46,7% de NMFE. Conclui-se que, a formulação à base de B. subtilis, tendo o talco como veículo de transporte, acrescido do aditivo uréia (0,02%) é eficiente na manutenção da viabilidade das células bacterianas para o controle da doença.

Resumo: Plantas e extratos vegetais podem apresentar ação antifúngica e de indução de defesa em função da presença de compostos com características elicitoras. Nesse sentido, foram objetivos do trabalho avaliar o efeito antifúngico dos extratos brutos aquosos de alecrim pimenta, nim e urtiga sobre Colletotrichum gloeosporioides; o potencial como elicitores de fitoalexina e o efeito de controle da antracnose em folhas destacadas de cajueiro. Os extratos brutos aquosos em três concentrações (5%, 10% e 15%) foram adicionados ao meio de cultura BDA para avaliar a ação sobre o crescimento micelial e esporulação e ao substrato Ágar-água para avaliar o efeito na germinação dos conídios e formação de apressórios. O potencial elicitor foi investigado em mesocótilos estiolados de sorgo e cotilédones de soja, determinando a capacidade elicitora das fitoalexinas deoxiantocianidina e gliceolina, respectivamente. Alecrim pimenta a 10% e 15% inibiu totalmente o crescimento micelial de C. gloeosporioides, a esporulação e germinação dos conídios. Nim inibiu parcialmente o crescimento micelial, esporulação e germinação dos conídios de forma proporcional à concentração usada. Urtiga estimulou o crescimento micelial, mas inibiu parcialmente a esporulação e a germinação. Apressórios não foram formados na presença dos três extratos brutos aquosos. Apenas alecrim pimenta a 15% mostrou potencial elicitor de deoxiantocianidina em sorgo. Já em soja foi observado potencial elicitor de gliceolina, embora com acentuada variação, tanto pelos três extratos brutos aquosos quanto pelas concentrações estudadas. O controle da antracnose em folhas destacadas de cajueiro foi observado em todas as concentrações dos extratos de alecrim pimenta e nim e, com urtiga a 15%. O maior efeito de controle foi proporcionado, igualmente, pelas concentrações do extrato de alecrim pimenta / Abstract: The use of plant extracts have shown antifungal and induction of defense due to the presence of compounds with characteristics elicitors. Therefore, the goals were to evaluate the antifungal effect of aqueous extracts of rosemary pepper, neem and nettle on Colletotrichum gloeosporioides and the potential as elicitors of phytoalexin and the effect of control of anthracnose in detached leaves of cashew plant. The extracts of three concentrations (5, 10 and 15%) were added to the culture medium to evaluate the effect on the mycelial growth and sporulation or to the water-agar substrate to evaluate the effect on conidial germination and apressoria formation. The potential elicitor was investigated in etiolated sorghum mesocotyl and soybean cotyledons, determining the ability of the phytoalexin elicitor deoxyanthocyanidin and gliceollin respectively. Rosemary Pepper 10 and 15% completely inhibited the mycelial growth of C. gloeosporioides and sporulation and germination. Nim partially inhibited the mycelial growth, sporulation and spore germination in proportion to the concentration used. Nettle stimulated mycelial growth, but partially inhibited the sporulation and germination. Appressoria were not formed in the presence of the three extracts. Only rosemary pepper 15% showed potential elicitor of deoxyanthocyanidin in sorghum. In soybean, potential elicitor of gliceolina, although with marked variation, was observed so the three extracts as the concentration. Control of anthracnose in detached leaves of cashew plant was observed at all concentrations of extracts of rosemary pepper and neem and nettle to 15%. The biggest effect of control was provided equally by the concentrations of the extract of rosemary pepper / Orientador: Modesto Barreto / Coorientador: Margarete Camargo / Banca: Luiz Evaldo de Moura Pádua / Banca: Érica Auxiliadora Giacheto Scaloppi / Banca: Rita de Cássia Panizzi / Banca: Antonio Baldo Geraldo Martins / Doutor

Este trabalho objetivou isolar leveduras capazes de produzir e excretar a toxina killer a partir de frutos tropicais, para atuarem no controle biolÃgico de fitopatogenos em pÃs-colheita. Inicialmente, foram isoladas 580 leveduras a partir de 87 amostras de frutos tropicais (mamÃo, caju, sapoti, murici, manga e acerola), dentre as quais 29 exibiram o fenÃtipo killer. Todas as cepas killer foram identificadas pelo sequenciamento da regiÃo D1/D2 do 28S rRNA, em que ficou demonstrada a presenÃa de Candida aaseri, Wickerhamomyces anomalus, Pichia kluyveri, Meyerozyma guilliermondii, Kodamaea ohmeri. Cinco leveduras foram capazes de inibir em 100% a germinaÃÃo de conÃdios em meio lÃquido e reduzir o crescimento micelial, em meio sÃlido de Colletotrichum gloeosporioides in vitro, com destaque para M. guilliermondii (cepa 443) que foi capaz de reduzir o crescimento micelial do fitopatogeno em 60% em meio sÃlido. As duas leveduras com melhores resultados in vitro foram testadas in vivo, contra C. gloeosporioides, agente da antracnose em pÃs-colheita de mamÃo e outros frutos tropicais, W. anomalus (cepa 422) e M. guilliermondii (cepa 443). TambÃm foi investigada a ocorrÃncia de micoparasitismo como mecanismo de aÃÃo do antagonista por meio de microscopia eletrÃnica de varredura â MEV e detecÃÃo das enzimas hidrolÃticas, quitinase e β-1-3 glucanase. Os resultados demonstraram que, quando aplicada simultaneamente ao fitopatÃgeno e incubadas em cÃmara Ãmida (95% U.R.) a 28 ÂC, as leveduras W. anomalus (cepa 422) e M. guilliermondii (cepa 443) foram capazes de reduzir a ocorrÃncia da doenÃa em 24,62%, 7,0% e 20,68%, respectivamente, atà 06 dias apÃs a inoculaÃÃo. Verificou-se que o tempo de inoculaÃÃo da levedura teve significativa influÃncia sobre sua aÃÃo antagonista; a aplicaÃÃo dos agentes com 24 ou 12 horas de antecedÃncia em relaÃÃo ao fitopatÃgeno resultou em reduÃÃo de 30% e 13,75% para W. anomalus (cepa 422), em 40% e 35% para W. anomalus (cepa 440) e em, 41,17 e 31,35% para M. guilliermondii (cepa 443) respectivamente. A ocorrÃncia de micoparasitismo foi confirmada atravÃs de eletromicrografias que evidenciaram a uniÃo das leveduras Ãs hifas do C. gloeosporioides, provocando, em alguns casos, perda de turgidez e atà ruptura dessas; tudo isso associado à produÃÃo de β 1-3-glucanase. As leveduras killer, W. anomalus (cepa 422) e M. guilliermondii (cepa 443) que apresentaram melhores resultados nos testes in vivo foram testadas associaÃÃo com cinco diferentes veÃculos de aplicaÃÃo na proteÃÃo em pÃs-colheita de mamÃo. ApÃs 90 dias de incubaÃÃo a 4 ÂC, essas leveduras mantiveram-se viÃveis em todos os veÃculos de aplicaÃÃo testados e durante todo o perÃodo de incubaÃÃo, frutos tratados com formulaÃÃes (leveduras + veÃculos de aplicaÃÃo) apresentaram incidÃncia de doenÃa, pelo menos 30% menores, quando comparadas aos frutos nÃo tratados. Para W. anomalus (cepa 422), o tratamento que utilizou amido (2%) reduziu em 48,3% a ocorrÃncia de doenÃas, jà para M. guilliermondii, (cepa 443), os tratamentos mais eficientes no controle da doenÃa foram os que utilizaram gelatina e cera lÃquida de carnaÃba (2%) como veÃculos de aplicaÃÃo, ambos foram capazes de reduzir em 50% a ocorrÃncia de doenÃas em pÃs-colheita de mamÃes. Eletromicrograficas revelaram que todos os veÃculos de aplicaÃÃo foram eficientes em permitir a fixaÃÃo das leveduras na superfÃcie do fruto. Leveduras killer podem atuar no biocontrole em pÃs-colheita de mamÃo e estes microrganismos atuam atravÃs de uma variedade de mecanismos de aÃÃo, o que potencializa seu efeito protetor e amplia sua eficiÃncia de aÃÃo. / This study aimed to isolate yeast able to produce and excrete the toxin from killer tropical fruits, to act in the biological control of plant pathogens in postharvest. A total of 580 yeasts strains, isolated from Ceara State of Brasil, were evaluated for their ability to produce killer toxin. Of these strains, 29 tested positive for the killer phenotype and were further evaluated for their ability to control Colletotrichum gloeosporioides germination in vitro. All yeast strains that expressed the killer phenotype were characterized by sequencing the D1/D2 regions of the large subunit of the rRNA gene. Five yeast strains provided a significant reduction in mycelial growth and conidial germination of C. gloeosporioides in vitro, especially Meyerozyma guilliermondii, which was able to reduce the fungal mycelial growth on solid medium (PDA) by 60% and block 100% of conidia germination in liquid media (PDB). Filtering and autoclaving the liquid cultures had no effect on the growth of the pathogen. These results indicate the potential use of antagonist yeasts isolated from tropical fruits in the control of anthracnose caused by C. gloeosporioides in papaya. Further elucidation of main mechanisms involved on anthracnose control by these yeasts could be helpful for the development of biocontrol techniques related to the management of this disease in tropical fruits. The efficiency of two killer yeast strains, with better results in vitro were tested in vivo against C. gloeosporioides, Wickerhamomyces anomalus (strain 422) and Meyerozyma guilliermondii (strain 443), as biocontrol agents against C. gloeosporioides, a postharvest anthracnose agent of papaya and other tropical fruits, was assessed. These strains were previously selected through in vitro assays, but in the present study, their in vivo action was assessed. In addition, the influence of phytopathogen inoculation time on the fruit in combination with the use of the biocontrol agent was also assessed. Through the use of scanning electron microscopy (SEM), we assessed mycoparasitism as an antagonistic mechanism of action. In addition, two hydrolytic enzymes, chitinase and β-1, 3 glucanase, were assayed. Our results indicated that W. anomalus (strain 422) and M. guilliermondii (strain 443) reduced the disease occurrence by 24.62% and 20.68%, respectively, for up to 6 days after inoculation, when applied 3 hours before the phytopathogen and incubated in a wet chamber (95% relative humidity) at 28ÂC. The time of yeast inoculation had a significant effect on its antagonistic action. Application of the yeasts 12 or 24 hours before the phytopathogen inoculation resulted in 13.75% and 30% of disease reductions for W. anomalus (strain 422) and 31.35% and 41.17% reductions for M. guilliermondii (strain 443), respectively. Electron micrographs confirmed mycoparasitism by clearly indicating the interaction of the yeasts with C. gloeosporioides hyphae, causing, in some cases, a loss of turgor and yeast penetration of walls with marked concavity formation on hypha cell walls. The efficiency of two killer yeasts, Wickerhamomyces anomalus (strain 422) and Meyerozyma guilliermondii (strain 443), which showed better results in tests in vtro and in vivo, associated with five different application vehicles was assessed for the protection of papayas postharvest. In this study, after 90 days of incubation at 4ÂC, W. anomalus (strain 422) and M. guilliermondii (strain 443) were viable with all application vehicles tested. Fruits treated with different formulations (yeasts + application vehicles) had a decreased incidence of disease (by at least 30%) compared with untreated fruits. The treatment of W. anomalus (strain 422) + 2% starch lowered disease occurrence by 48.3%. The most efficient treatments using M. guilliermondii (strain 443) were those with 2% gelatin or 2% liquid carnauba wax, both of which reduced anthracnose by 50% in postharvest papayas. Electron micrographs of the surface tissues of the treated fruits showed that all application vehicles provided excellent adhesion of yeast to the surface. The formulations based on starch (2%), gelatin (2%) and carnauba wax (2%) were the most efficient at controlling fungal diseases in postharvest papayas

CoordenaÃÃo de AperfeiÃoamento de Pessoal de NÃvel Superior / O feijÃo caupi [Vigna unguiculata (L.) Walp.] à um alimento de grande importÃncia comercial, sendo a principal fonte alimentÃcia em algumas regiÃes, como no Nordeste brasileiro. Infelizmente, o feijÃo-de-corda està sujeito ao ataque de vÃrios patÃgenos e pestes, acarretando perdas considerÃveis em sua produtividade. Para diminuir essas perdas, existem diversos mÃtodos quÃmicos que sÃo largamente utilizados, porÃm o uso indiscriminado de fungicidas tem causado danos ao meio ambiente e aos seres vivos. Na busca de alternativas ecologicamente saudÃveis, uma opÃÃo promissora seria a induÃÃo de mecanismos de defesa da prÃpria planta atravÃs de molÃculas elicitoras. Diante do exposto, o presente trabalho teve como objetivo elicitar respostas de defesa em feijÃo-de-corda atravÃs do uso de galactomanana sulfatada isolada de Adenanthera pavonina e induzir a resistÃncia ao fungo Colletotrichum gloeosporioides. Doze dias apÃs germinaÃÃo, plantas de feijÃo-de-corda (Vigna unguiculata) foram tratadas com galactomana de A. pavonina (nas concentraÃÃes de 100 mg/L e 200 mg/L), na ausÃncia ou presenÃa do fungo C. gloeosporioides (inoculado apÃs 6 h do tratamento com carboidrato) por 6, 12, 24 e 48 h, tendo sido realizadas as anÃlises bioquÃmicas nos extratos protÃicos obtidos das folhas primÃrias. Para as enzimas POX e APX ocorreu um significativo aumento a partir de 12 h do tratamento com a galactomanana. Em relaÃÃo a atividade das enzimas antifungicas βGLU e CHI, as plantas tratadas com a galactomanana, no geral, apresentaram um aumento acima de 50% em relaÃÃo ao controle. AnÃlises macroscÃpicas revelaram que as folhas tratadas com 200 mg/L da galactomanana e infectadas com o C. gloeosporioides apresentaram lesÃes necrÃticas visivelmente reduzidas em relaÃÃo ao controle. Ademais, a galactomana nÃo foi capaz de inibir a germinaÃÃo de esporos e crescimento vegetativo do fungo C. gloeosporioides in vitro. A partir dos resultados obtidos neste trabalho, conclui-se que, a galactomanana isolada de A. pavonina à capaz de aumentar a tolerÃncia da cultura de feijÃo-de-corda (V. unguiculata) contra o fungo C. gloeosporioides. / Cowpea [Vigna unguiculata (L.) Walp.] is a food of great commercial importance, being the main food source in some regions such as northeastern Brazil. Unfortunately, cowpea is subject to attack by various pathogens and pests, causing considerable losses in productivity. To reduce these losses, there are several chemical methods that are widely used, but the indiscriminate use of fungicides has caused damage to the environment and living beings. In search of alternative environmentally friendly, a promising option would be the induction of defense mechanisms of the plant itself through elicitor molecules. Given the above, this study aimed to elicit defense responses in cowpea through the use of galactomannan isolated from Adenanthera pavonina and induce resistance to Colletotrichum gloeosporioides. Twelve days after germination, cowpea plants (Vigna unguiculata) were treated with A. pavonina galactomannan (at concentrations of 100 mg/L and 200 mg/L) in the absence or presence of the fungus C. gloeosporioides (inoculated 6 hours after treatment with carbohydrate) for 6, 12, 24 and 48 h were carried out on biochemical analysis of protein extracts obtained from primary leaves. For enzymes POX and APX a significant increase occurred after 12 h of treatment with the galactomannan. With respect to antifungal activity of the enzymes and βGLU CHI, the plants treated with the galactomannan in general, showed an increase above 50% compared to control. Macroscopic analysis revealed that the leaves treated with 200 mg/L of galactomannan and infected with C. gloeosporioides showed necrotic lesions visibly reduced compared to control. Furthermore, the galactomannan was unable to inhibit the germination of spores and vegetative growth of the fungus C. gloeosporioides in vitro. The results of the present study indicate that galactomannan isolated from A. pavonina can increase crop tolerance of cowpea (V. unguiculata) against the fungus C. gloeosporioides.

Feo-hifomicose refere-se a infecções por fungos pigmentados escuros. Revisamos a casuística brasileira entre 1953 e 2010, apresentando as características clínico-epidemiológicas e diagnósticas de 17 casos. Nas quais a coloração de hematoxilina-eosina foi usada para visualizar alterações estruturais nas lesões; a coloração da prata para identificação dos microrganismos; e coloração de Fontana-Masson confirmou a melanina na parede fúngica. Os fungos cresceram sob aspecto de micélio e produziam pigmentos de melanina, que dão às colônias cor negra característica. A observação das características microscópicas dos cultivos forneceu a identificação etiológica. A feo-hifomicose está amplamente disseminada no Brasil. Entretanto, é subestimada devido a fixação das biopsias em formol, o que impede o isolamento em cultivos. / Phaeohyphomycosis refers to infection caused by darkly pigmented fungi. We reviewed the Brazilian casuistic from 1953 to 2010 and presented the clinicalepidemiologic and diagnostic features of addictional 17 cases. In the cases hematoxilin and eosin stain was used to look for structural changes of the infected lesion; Gomori’s methenamine-silver stain identified these organisms; and Fontana-Masson staining confirm the presence of melanin fungal cell wall. The organisms formed mycelial colonies and produced melanin-like pigments that give the colonies the characteristic dark color. The microscopic study of cultures identified etiology. The phaeohyphomycosis is a widespread tropical disease in Brazil. However, it is underestimated due to formalin fixation tissue specimens that oppose the prior cultures.

Fungos do gênero Colletotrichum são considerados um dos principais fitopatógenos do mundo, comprometendo diversas culturas e causando danos econômicos e sociais para diversos países, inclusive o Brasil. Apesar de medidas de controle já serem empregadas, estas nem sempre são eficazes, motivo pelo qual se faz necessária a busca por novas opções de controle que possam atuar no manejo integrado. Dentre estas, encontram-se os metabólitos secundários produzidos por fungos endofíticos, os quais estão envolvidos na produção de compostos de interesse biotecnológico, com aplicações em diversas áreas, inclusive a agronômica. Neste contexto, o presente trabalho de doutorado teve por objetivo explorar o potencial biológico e químico de metabólitos secundários produzidos por fungos endofíticos isolados de guaranazeiros da Amazônia, avaliando sua atividade antifúngica \"in vitro\" a Colletotrichum gloeosporioides, isolado da cultura do guaranazeiro, a C. acutatum e C. gloeosporioides, isolados da cultura do pimentão. Para tanto, 16 linhagens de fungos endofíticos foram avaliadas em ensaio biológico por cultivo pareado e pelo método de difusão em disco contra Colletotrichum spp. Observou-se que quatro linhagens se mostraram mais promissoras, as quais foram selecionadas para o estudo de bioprospecção. A partir do extrato bruto do endófito Aspergillus flavus (272) foi isolado o composto ativo asperfuran, que apresentou atividade inibitória aos três fitopatógenos, com CI50 < 100 &mu;g disco-1, semelhante ao fungicida comercial difenoconazol. A partir do extrato bruto de Xylaria sp. (214) foi isolado o composto ativo citocalasina D, que apresentou atividade inibitória a C. gloeosporioides isolado do guaranazeiro, com CI50 > 500 &mu;g disco-1. A partir do extrato bruto de Xylaria sp. (249) foi isolado o composto ativo ácido pilifórmico, que apresentou atividade inibitória a C. gloeosporioides isolado do guaranazeiro, com CI50 de 500 &mu;g disco-1 e à C. acutatum isolado o pimentão, com CI50 de 300 &mu;g disco-1. E, a partir do extrato bruto de Talaromyces aculeatus (507) foram isolados três compostos, da classe dos ésteres ftalicos, sendo um ativo. A fração antecessora destes três compostos apresentou atividade inibitória a C. gloeosporioides isolado do guaranazeiro, com CI50 > 500 &mu;g disco-1. A partir do extrato bruto de T. aculeatus também foi isolado um composto ativo parcialmente identificado e um composto ativo semi-purificado. A fração antecessora destes dois compostos apresentou atividade inibitória aos dois C. gloeosporioides, com CI50 > 300 &mu;g disco-1 e a C. acutatum, com CI50 em torno de 150 &mu;g disco-1. A atividade antifúngica destes compostos a fungos do gênero Colletotrichum está sendo relatada pela primeira vez neste estudo. / Colletotrichum fungi are considered one of the main pathogens in the world, affecting different cultures and causing social and economic damage to several countries, including Brazil. Despite control measures already being employed, these are not always effective, which is why the search for new control options that can act in the integrated management is necessary. Among these, the secondary metabolites produced by endophytes are involved in the production of compounds of biotechnological interest, with applications in several areas, including the agronomic. In this context, this study aimed to explore the biological and chemical potential of secondary metabolites produced by endophytic fungi isolated from the Amazonian guarana, evaluating their antifungal activity \"in vitro\" to Colletotrichum gloeosporioides, isolated from the culture of guarana and C. acutatum and C. gloeosporioides, isolated from the red pepper crop. For this purpose, 16 strains of endophytic fungi were evaluated in biological assay of dual culture and disk diffusion method against Colletotrichum spp. Four strains of these strains presented promising results which were selected for bioprospecting. From the crude extract of the endophyte Aspergillus flavus (272) was isolated the active compound asperfuran, which showed inhibitory activity to three pathogens, with IC50 <100 &mu;g disk-1, similar to the commercial fungicide difenoconazole. From the crude extract of Xylaria sp. (214) was isolated the active compound cytochalasin D, which showed inhibitory activity against C. gloeosporioides isolated from guarana (IC50> 500 &mu;g disk-1). From the crude extract of Xylaria sp. (249) was isolated the active compound piliformic acid, which showed inhibitory activity against C. gloeosporioides isolated from guarana (IC50 of 500 &mu;g disk-1) and C. acutatum isolated from red pepper (IC50 of 300 &mu;g disk-1). And from the crude extract of Talaromyces aculeatus (507) were isolated three compounds, of phthalate esters class, one of them with activity. The predecessor fraction of these three compounds showed inhibitory activity against C. gloeosporioides isolated from guarana (IC50> 500 &mu;g disk-1). From the crude extract of T. aculeatus it was also isolated a partially identified active compound and a semi-purified active compound. The predecessor fraction of these two compounds showed inhibitory activity to both C. gloeosporioides (IC50> 300 &mu;g disk-1) and to C. acutatum (IC50 around 150 &mu;g disk-1). The antifungal activity of the compounds isolated in this study is being reported for the first time against fungus of the genus Colletotrichum.