Dissertação (mestrado)—Universidade de Brasília, Instituto de Ciências Biológicas, Programa de Pós-Graduação em Zoologia, 2016. / Submitted by Fernanda Percia França (fernandafranca@bce.unb.br) on 2017-04-27T20:07:58Z No. of bitstreams: 1 2016_PriscilaMariaColombodaLuz.pdf: 1563517 bytes, checksum: a5cda72676984405519c86f4bfb11ea3 (MD5) / Approved for entry into archive by Patrícia Nunes da Silva(patricia@bce.unb.br) on 2017-04-30T14:16:22Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2016_PriscilaMariaColombodaLuz.pdf: 1563517 bytes, checksum: a5cda72676984405519c86f4bfb11ea3 (MD5) / Made available in DSpace on 2017-04-30T14:16:22Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2016_PriscilaMariaColombodaLuz.pdf: 1563517 bytes, checksum: a5cda72676984405519c86f4bfb11ea3 (MD5) / O Brasil é o segundo maior produtor de soja do mundo, com áreas de cultivo ocupando 3,5% do território nacional. Grande parte da produtividade é oriunda de cultivares transgênicas que expressam a toxina Cry1Ac de Bacillus thuringiensis Berliner, que visam reduzir densidades populacionais dos lepidópteros praga-chave. A cienciometria realizada nos registros do sítio Web of ScienceTM, aponta um número crescente de pesquisas envolvendo toxinas Cry e os noctuóideos, buscando estratégias e soluções para uma melhor gestão dos agroecossistemas. O trabalho foi desenvolvido em cultivo de soja não-Bt e Bt sem a utilização de inseticidas, na safra 2015/2016, na área experimental da Embrapa Cerrados, Planaltina, DF. Foram listadas 13 espécies de noctuóideos associados à cultura da soja, registrando-se pela primeira vez as espécies Elaphria deltoides (Möschler, 1880) e Utetheisa ornatrix (Linnaeus,1758). A baixa incidência de lagartas em campo não atingiu o nível de controle, no entanto o número de lagartas coletadas na soja não-Bt foi 11,5 vezes superior ao encontrado na soja Bt, indicando os efeitos da toxina Cry1Ac sobre os noctuóideos associados à soja. Dessa forma, reforça-se a necessidade de monitoramento das áreas de cultivos de soja, visando a melhor avaliação dos reais acontecimentos em nível de campo. Ao final, aponta-se que o os parasitoides foram beneficiados pelo manejo da área experimental sem a utilização de inseticidas, proporcionando o controle biológico natural com uma taxa de parasitismo superior a 35%. / Brazil is the second largest producer country of soybean in the world, with crop areas occupying 3.5% of the national territory. Most of the productivity comes from transgenic varieties that express the Cry1Ac toxin from Bacillus thuringiensis Berliner, which aim to reduce the population densities of the moth key pests. In the cienciometry carried out by the registries on the Web of ScienceTM, it is pointed out an increase of investigations involving Cry toxins and noctuids, searching strategies and solutions for a better management of the agroecosystems. Our study realized in the 2015/2016 crops in the experimental area of Embrapa Cerrados, Planaltina, DF on non-Bt and Bt soybean cultivation areas without insecticides sprayed reports a total of 13 species of noctuids associated with soybean cultivation, with Elaphria deltoides (Möschler, 1880) and Utetheisa ornatrix (Linnaeus,1758) being registered for the first time. The low incidence of caterpillars in the field did not reach the Control Level, however the number of caterpillars collected in non-Bt soybean was 11.5 times higher than that found in Bt soybean, indicating the effects of the Cry1Ac toxin on the noctuids associated with soybean. Therefore, it is necessary to reinforce monitor soybean crop areas, aiming at the best evaluation of the real events at the field level. It is pointed out that the parasitoids were benefited by the management of the experimental area without the use of insecticides, providing the natural biological control with a parasitism rate up to 35%.

Tese (doutorado)—Universidade de Brasília, Instituto de Ciências Biológicas, Programa de Pós-Graduação em Ecologia, 2017. / Submitted by Fernanda Percia França (fernandafranca@bce.unb.br) on 2017-05-09T16:08:40Z No. of bitstreams: 1 2017_ÉricaSevilhaHarterreitenSouza.pdf: 2049221 bytes, checksum: 914cc48360ef6d3fe93e68473763936e (MD5) / Approved for entry into archive by Guimaraes Jacqueline (jacqueline.guimaraes@bce.unb.br) on 2017-05-10T14:51:18Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2017_ÉricaSevilhaHarterreitenSouza.pdf: 2049221 bytes, checksum: 914cc48360ef6d3fe93e68473763936e (MD5) / Made available in DSpace on 2017-05-10T14:51:18Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2017_ÉricaSevilhaHarterreitenSouza.pdf: 2049221 bytes, checksum: 914cc48360ef6d3fe93e68473763936e (MD5) / A maioria das espécies de moscas da família Dolichopodidae é predadora generalista. Podem ser encontradas em uma variedade de ambientes de clima quente e úmido, incluindo ambientes agrícolas. No entanto, informações sobre a diversidade, a influência de fatores abiótico e biótico na abundância das espécies e as características bionônomicas são escassas. Assim, o objetivo nesta tese, foi contribuir para o conhecimento de Dolichopodidae, considerando os seguintes tópicos: (1) conhecer a diversidade de Dolichopodidae na região estudada; (2) identificar os efeitos de hábitats e a influência da sazonalidade na abundância do grupo, e se o aumento da abundância do predador está correlacionado com o aumento da abundância da presa; (3) testar as variáveis abióticas (umidade e temperatura) e bióticas (recurso alimentar), além de avaliar alguns aspectos bionômicos no desempenho dos adultos. O estudo foi conduzido em diferentes propriedades rurais localizadas no Distrito Federal, em hábitats de hortaliças, pousio, agrofloresta e vegetação nativa. Um total de 17 gêneros foi identificado, com, pelo menos, 70 espécies/morfoespécies. Destes, destacaram-se os gêneros Chrysotus e Condylostylus porque eles apresentam elevada abundância e diversidade. Hábitats com cultivos de hortaliças, que são mais abertos e perturbados pelas práticas agrícolas, abrigaram uma fauna mais rica e diversa de Dolichopodidae, quando comparados com os demais hábitats, com base em coletas com armadilhas Malaise. No entanto, hábitats de agrofloresta e vegetação nativa são importantes na paisagem agrícola, uma vez que contribuem para o aumento da diversidade regional do grupo. Coletas de adultos com armadilhas adesivas amarelas também mostraram que hábitats mais abertos e perturbados de hortaliças foram capazes de produzir populações mais abundantes de Condylostylus e, por isso, podem ser hábitats fontes. Hábitats considerados sumidouros, como agroflorestas e vegetação nativa, podem funcionar como amortizadores dos efeitos de perturbação advindos das práticas agrícolas, servindo como local de refúgio ou abrigo temporário quando os hábitats de hortaliças estiverem sendo manejados para a comercialização. Um efeito da sazonalidade na abundância Condylostylus e Chrysotus foi também identificado, com populações mais abundantes na estação chuvosa quando comparada com a estação de seca. Além disso, comprovou-se que os fatores abióticos, como umidade e temperatura, influenciam diretamente a viabilidade de ovos e no tempo de desenvolvimento embrionário de espécies Condylostylus enquanto recurso alimentar de origem proteica (mosca-branca e pulgões) parece não influenciar a sobrevivência dos adultos. O conhecimento dos fatores que estruturam as assembleias de dolicopodídeos aqui estudados poderá ajudar a estabelecer estratégias de manejo visando à conservação do grupo e a entender seu papel ecológico para o controle biológico de pragas agrícolas. / Most species of Dolichopodidae are generalist predators. They can be found in a variety of warm moist environments, including agricultural environments. However, information on the diversity, the influence of abiotic and biotic factors on the abundance of species and their biononomic characteristics are scarce. The objective of this thesis was to contribute to the knowledge of Dolichopodidae considering the following topics: (1) recognize the diversity of Dolichopodidae in the study region; (2) identify the effects of habitat and the influence of seasonality in the abundance of the group, and the increased abundance of the predator is correlated with the increase in abundance of prey; (3) test the abiotic variables (temperature and humidity) and biotic (food source), and to evaluate some aspect bionomics in the performance of adults. The study was conducted in different farms located in the Federal District, in habitats of vegetables, fallow, agroforestry and native vegetation. A total of 17 genera and 70 species/morphospecies were indentified. Of these, we highlight the genera Chrysotus and Condylostylus, because they have high abundance and diversity. Habitats with vegetable crops, which are more open and disturbed by agricultural practices, housed a richer and diverse fauna of Dolichopodidae when compared to the other habitats, based on collections with Malaise traps. However, agroforestry and native vegetation habitats are importante in the agricultural landscape, since they contribute to increase of the regional diversity of the group. Collections of adults with yellow adhesive traps also showed that more open and disturbed habitats of vegetables were able to produce more abundant populations of Condylostylus and Chrysotus, therefore, can be source habitats. Habitats considered to be sink, as agroforestry and native vegetation, can act as a buffer against the disturbing effects of agricultural practices, serving as refuge or temporary place when the vegetable habitats are being managed for commercialization. An effect of seasonality on the Condylostylus and Chrysotus abundance was also identified, with populations more abundant in the rainy season when compared to the dry season. In addition, it was shown that the abiotic factors, as humidity and temperature, directly affect the viability of eggs and at the time of embryonic development of Condylostylus species, whereas the food source of protein origem (whitefly and aphids) does not seem to influence adult survival. The knowledge of the factors that structure the Dolichopodidae assemblages here studied can help to establish strategies of management for the conservation of this group of insects, and to understand their ecological role for the biological control of agricultural pests.

Tese (doutorado)—Universidade de Brasília, Departamento de Biologia Celular, Instituto de Ciências Biológicas, Programa de Pós-Graduação em Biologia Molecular, 2017. / Submitted by Raquel Almeida (raquel.df13@gmail.com) on 2017-11-01T19:00:02Z No. of bitstreams: 1 2017_RenataVelôzoTimbó.pdf: 8302374 bytes, checksum: 8724badf3895a4628309af58c87e789c (MD5) / Approved for entry into archive by Raquel Viana (raquelviana@bce.unb.br) on 2017-11-21T16:45:25Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2017_RenataVelôzoTimbó.pdf: 8302374 bytes, checksum: 8724badf3895a4628309af58c87e789c (MD5) / Made available in DSpace on 2017-11-21T16:45:25Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2017_RenataVelôzoTimbó.pdf: 8302374 bytes, checksum: 8724badf3895a4628309af58c87e789c (MD5) Previous issue date: 2017-11-21 / A identificação de presas consumidas por predadores constitui-se em importante área da Ecologia por possibilitar o estudo das interações intra e interespecíficas em um ecossistema. Esse conhecimento ajuda a avaliar seu funcionamento e como as interações mudam em resposta ao ambiente. Para muitos estudos de predação o ideal é determinar a biodiversidade de presas consumidas por um dado predador a campo, o que ainda não tem sido satisfatoriamente alcançado pelos métodos em voga de detecção de presas devido a limitações diversas. Muitos deles não conferem resolução taxonômica desejável, ou são dependentes do conhecimento prévio das espécies predadas para ser possível detectá-las através do uso de marcadores específicos, ou se baseiam no uso de PCR, o que é limitado à eficiência dos primers utilizados. Este trabalho visou avaliar a meia-vida de detecção, a sensibilidade (número mínimo de presa detectável), a especificidade (resolução taxonômica) e a variabilidade do método de sequenciamento de alto desempenho do DNA do conteúdo gastrointestinal de predadores para identificação de presas consumidas, o qual teoricamente tem potencial para detectar a biodiversidade de presas consumidas. Nesse método, não há etapa intermediária de amplificação de regiões barcodes das presas. As presas são prontamente identificadas através da detecção de fragmentos de seus DNA mitocondriais sequenciados, graças ao uso de banco de referência de DNA mitocondrial de várias espécies, incluindo aquelas com potencial de serem presas do predador em estudo. Adicionalmente, avaliou-se a relação de dependência da detecção da presa em função: das espécies de presapredador em interação; da fase do ciclo de vida do predador; do seu modo de alimentação; do número de presas predadas; da predação ser primária ou secundária; da temperatura de digestão; do número de unidades experimentais (indivíduo-predador) utilizado por biblioteca de DNA; do tamanho do inserto (550 e 350 pb) utilizado nas bibliotecas. Quatro bioensaios de alimentação foram realizados utilizando como presas as espécies Myzus persicae, Bemisia tabaci, Spodoptera frugiperda, importantes pragas agrícolas, e como predadores Cycloneda sanguinea, Harmonia axyridis, Hippodamia convergens, Chrysoperla externa, importantes inimigos naturais de pragas agrícolas. Após controle de qualidade dos dados de sequenciamento e de análises de bioinformática (pipelines customizados) constatou-se que: houve detecção da ingestão de uma unidade experimental da presa pelo menos imediatamente após predação; houve detecção das presas com alta resolução taxonômica (nível de espécie), porém houve também detecção de falsos-positivos na maioria das bibliotecas e de falsonegativo nas bibliotecas de B. tabaci; o tempo pós-predação, as espécies de presa-predador em interação e a forma de alimentação do predador afetaram a detecção da presa; o período de detectabilidade variou em função das espécies de presa-predador em interação; houve detecção de predação secundária. Por outro lado, a temperatura de digestão da presa e o número de presas consumidas não afetaram a detecção da presa, no entanto quanto maior o número de presas consumidas maior foi o período de detectabilidade. Portanto, esse método é adequado para identificar a biodiversidade de predadores amostrados a campo, no entanto, devido a possibilidade de detecção de falsos positivos, recomenda-se confirmar o consumo de cada espécie detectada através de método complementar espécie-específico. Adicionalmente, recomenda-se também sempre usar controle negativo (predador sem alimentação) para verificação de potenciais falsos positivos. / Identification of prey species is an important area of ecology because it enables the study of intra- and inter- specific interactions in an ecosystem. This knowledge supports the evaluation of ecosystem functioning and how species interactions change in response to the environment. For many field predation studies an ideal situation would be to determine the biodiversity of prey consumed by a given predator, which has not yet been satisfactorily achieved by prevailing methods of prey detection due to diverse limitations. Many of the prevailing methods do not confer desirable taxonomic resolution; or they are dependent on prior knowledge of the prey species to be able to detect them with specific markers; or they are based on PCR, which is limited by primer efficiency. This work aimed to evaluate the detectability half-life, sensitivity (minimum number of detectable prey), specificity (taxonomic resolution) and variability of prey detection (number of reads) using massively parallel DNA sequencing of the predator gut contents. This theoretically has the potential to detect the biodiversity of prey consumed. In this method, there is no intermediate stage of amplification of prey DNA barcodes by PCR. Prey are readily identified by detection of fragments of their mitochondrial DNA sequences, which are matched to a reference mitochondrial DNA database of species, including those likely to be preyed upon by the predator(s) under investigation. In addition, this study evaluated the dependence of prey detection as a function of: prey-predator species in interaction; predator stage; feeding mode; number of prey; primary or secondary predation; environmental temperature of prey digestion; number of experimental units (individual-predator) used per DNA library; insert size (350 and 550 bp) used in the libraries. Four feeding bioassays were performed using as prey species: Myzus persicae, Bemisia tabaci, and Spodoptera frugiperda, which are all important pests, and as predators: Cycloneda sanguinea, Harmonia axyridis, Hippodamia convergens, and Chrysoperla externa, which are important natural enemies of pests. After quality control of the sequencing data and bioinformatic analyses (using customized pipelines), the following were found: one prey individual can be detected, at least immediately after predation; false positives were detected in the majority of the libraries and B. tabaci was not detected in any of the libraries of the predator that fed on it (the sole false-negative case); elapsed time after consumption, prey-predator species in interaction and predator feeding mode affected prey detection; detectability period varied according to the prey-predator species in interaction; secondary predation was detected, although there was no discrimination of primary versus secondary predation without prior knowledge of the history of the predation events. On the other hand, temperature of prey digestion and number of prey consumed did not affect prey detection, although higher was the number of prey consumed, the longer was the detectability period. Therefore, this method is suitable to identify biodiversity of prey consumed by fieldsampled predators. However, due to the possibility of detection of false positives, it is recommended to validate prey consumption using a complementary species-specific detection method (e.g., PCR). In addition, it is also recommended to include a library for negative control (predator in starvation) to check for the potential of false positives.

Tese (doutorado)—Universidade de Brasília, Instituto de Ciências Biológicas, Programa de Pós-Graduação em Biologia Molecular, 2016. / Texto liberado parcialmente pelo autor. Conteúdo restrito: Capítulo 2 e Anexos. / Submitted by Fernanda Percia França (fernandafranca@bce.unb.br) on 2016-07-26T16:10:44Z No. of bitstreams: 1 2016_LorenaCarvalhodeSouzaChaves_Parcial.pdf: 2413443 bytes, checksum: c9dc564135b9d2985ba35dcfc919d239 (MD5) / Approved for entry into archive by Raquel Viana(raquelviana@bce.unb.br) on 2016-09-08T19:10:33Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2016_LorenaCarvalhodeSouzaChaves_Parcial.pdf: 2413443 bytes, checksum: c9dc564135b9d2985ba35dcfc919d239 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-09-08T19:10:33Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2016_LorenaCarvalhodeSouzaChaves_Parcial.pdf: 2413443 bytes, checksum: c9dc564135b9d2985ba35dcfc919d239 (MD5) / Os baculovírus são vírus de insetos amplamente utilizados no controle biológico de pragas agrícolas e também como ferramenta para expressão de proteínas heterólogas. Os baixos custos, a segurança na manipulação e as diferentes formas de expressão de proteínas tornam os baculovírus e células de inseto uma escolha eficaz para a correta expressão de antígenos vacinais e produção de VLPs (“Virus like particles”). No capítulo 1 deste trabalho, foi avaliado o potencial imunogênico de BVs (“Budded virus”) recombinantes contendo o EDIII (Domínio III da proteína de envelope do vírus da Febre amarela – FA) fusionado à proteína GP64 dos baculovírus Autographa californica multiple nucleopolyhedrovirus (AcMNPV) e Anticarsia gemmatalis multiple nucleopolyhedrovirus (AgMNPV); e também de uma massa protéica gerada pela fusão de EDIII com a proteína poliedrina de AcMNPV. O EDIII interage com os receptores celulares e contém os epítopos reconhecidos pelos anticorpos neutralizantes, sendo assim alvo para a produção de uma vacina de subunidade. Foi mostrado neste trabalho, a confirmação da correta expressão das proteínas recombinantes (GP64 + EDIII e Poliedrina + EDIII) por Western blot, microscopia de luz e confocal. No caso do EDIII fusionado à GP64 de AcMNPV e AgMNPV, as partículas virais recombinantes foram purificadas e inoculadas em camundongos. O teste de proliferação de linfócitos indicou uma maior proliferação em camundongos inoculados com o vírus recombinante contendo o EDIII fusionado à proteína GP64 do baculovírus AgMNPV quando comparado com o controle LPS. Testes complementares serão feitos, para avaliar o perfil da resposta imunológica e confirmar a obtenção de um antígeno vacinal contra FA. No capítulo 2, o sistema baculovírus de expressão foi utilizado para expressar o precursor da proteína GAG (Pr55) de HIV-1. A expressão de Pr55 HIV-1 é suficiente para a montagem de VLPs na membrana plasmática da célula do hospedeiro. Porém, a proteína GP64 de baculovírus é altamente imunogênica e também é expressa na superfície de células infectadas e normalmente está presente na superfície da VLP. Neste trabalho, mostramos que não é possível separar BVs e VLPs produzidos em um mesmo ciclo de infecção por baculovírus mesmo usando diferentes metodologias de separação. Então, utilizando um sistema que consegue produzir baculovírus recombinantes livres de GP64, foi construído o vírus recombinante vGAGHIV-1 GP64 null e utilizado na infecção de células Sf9. Por Western blot foi observado a perda do sinal da proteína GP64 de baculovírus no extrato de células infectadas com esse vírus recombinante. Essas mesmas células foram visualizadas por microscopia eletrônica de transmissão (MET), mostrando que mesmo quando GP64 não está presente (o que resulta na ausência de produção de BVs), o brotamento de VLPs continua a acontecer. Essa técnica mostrou-se eficiente para a produção de VLPs livres de partículas ou proteínas baculovirais. Este trabalho confirma a eficiência do uso do sistema de expressão baseado em baculovírus para a expressão de proteínas e VLPs de interesse famacológico. _________________________________________________________________________________________________ ABSTRACT / Baculoviruses are insect viruses widely used in the biological control of agricultural pests and as a tool for heterologous protein expression. Their low production costs, security in manipulation and the many ways of protein expression, make baculoviruses and insect cells an effective choice for the efficient expression of vaccine antigens and VLPs (Virus like particles) production. In chapter 1 of this work, it was evaluated the immunogenic potential of recombinant BVs (Budded virus) containing EDIII (Yellow fever virus -YF- envelope protein domain III) fused to the Autographa californica multiple nucleopolyhedrovirus (AcMNPV) and Anticarsia gemmatalis multiple nucleopolyhedrovirus (AgMNPV) GP64 protein; and also of a protein mass generated by the fusion of the EDIII and AcMNPV polyhedrin protein. The EDIII interacts with cell receptors and contains epitopes recognized by neutralizing antibodies, being the target for the production of a subunit vaccine. We showed in this work the confirmation of the correct recombinant protein expression (GP64 + EDIII and Polyhedrin + EDIII) by Western blot, optical and confocal microscopy. In the case of the EDIII fused with AcMNPV and AgMNPV GP64, the recombinant viral particles were purified and inoculated in mice. The lymphocyte proliferation assay showed a higher proliferation in mice immunized with recombinant virus containing the EDIII fused with the GP64 from the AgMNPV baculovirus comparing to the LPS control. Complementary assays will be carried out in order to evaluate the immunological response pattern and to confirm the production of a vaccine antigen against YF. In chapter 2, the baculovirus expression system was used to express the GAG protein precursor (Pr55) of HIV-1. The Pr55 expression is sufficient to VLP assembly on the cell host plasma membrane. However, the GP64 baculovirus protein is highly immunogenic and is also expressed on the surface of infected cells and is also present on the surface of the VLP. In this work, we showed that is not possible to separate BVs and VLPs produced in the same baculovirus infection cycle using different separation methodologies. Then, using a system able to produce GP64 free recombinant baculovirus, the recombinant virus vGAGHIV-1 GP64 null was produced and used to infect Sf9 cells. By Western blot analyses, it was shown that the baculovirus protein GP64 signal was missing in the recombinant virus infected cell extract. These same cells were observed by transmission electron microscopy (MET), showing that even when the GP64 is absent (which results in the absence of BVs production), VLPs budding continues to happen. This technique was shown to be efficient for VLPs production, free of baculvirus particles or proteins. This work confirms the efficiency of the baculovirus expression system for protein expression and VLPs of pharmacological interest.

Dissertação (mestrado)—Universidade de Brasília, Faculdade de Agronomia e Medicina Veterinária, Programa de Pós-Graduação em Agronomia, 2015. / Submitted by Raquel Viana (raquelviana@bce.unb.br) on 2015-10-08T18:20:55Z No. of bitstreams: 1 2014_ClaudiaPatríciaBravoChaucanés_Parcial.pdf: 1879341 bytes, checksum: c8fbb407d6733d5dcdf63c5ba3fe3cff (MD5) / Approved for entry into archive by Raquel Viana(raquelviana@bce.unb.br) on 2015-10-08T18:21:26Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2014_ClaudiaPatríciaBravoChaucanés_Parcial.pdf: 1879341 bytes, checksum: c8fbb407d6733d5dcdf63c5ba3fe3cff (MD5) / Made available in DSpace on 2015-10-08T18:21:26Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2014_ClaudiaPatríciaBravoChaucanés_Parcial.pdf: 1879341 bytes, checksum: c8fbb407d6733d5dcdf63c5ba3fe3cff (MD5) / Meloidogyne enterolobii vem sendo detectado parasitando goiabeiras e hortaliças. O impacto negativo dos agrotóxicos tem levado ao uso restrito de alguns nematicidas. O potencial de fungos nematófagos vem sendo avaliado como estratégia complementar de controle dessa doença. O objetivo do presente estudo foi avaliar a patogenicidade de isolados de Pochonia chlamydosporia e Purpureocillium lilacinum (=Paecilomyces lilacinus) em ovos de Meloidogyne enterolobii em ensaios in vitro e em casa de vegetação. Foram avaliados 19 isolados de P. chlamydosporia e 17 isolados de Paecilomyces-like pertencentes à Coleção de Fungos de Invertebrados (CFI) da Embrapa Cenargen. Foram conduzidos três experimentos em placas de Elisa com o objetivo de: 1) avaliar a ação patogênica dos isolados sobre ovos do nematoide 2) avaliar os quatro melhores isolados de cada gênero quanto a patogenicidade sobre massas de ovos; 3) avaliar os dois melhores isolados de cada gênero quanto a patogenicidade sobre ovos quando aplicados em conjunto. Foram selecionados os isolados: CG1006, CG1044 (P. chlamydosporia), CG179 (P. lilacinum) e o produto Rizotec® (P. chlamydosporia) para avaliação do controle exercido por esses fungos, sobre a reprodução de M. enterolobii, em cultura de ciclo curto (tomate) e longo (banana), em condições de casa de vegetação. Na avaliação in vitro os isolados CG1006, CG1044, CG1042 e CG1101 (P. chlamydosporia) e CG179, CG1038, CG348 e CG959 (Paecilomyces-like) proporcionaram reduções superiores a 66%, quando aplicados sobre ovos. Na avaliação sobre massas de ovos, os mesmos apresentaram um resultado inferior. A aplicação em conjunto, não alterou a eclosão dos juvenis de segundo estádio (J2) de M. enterolobii. Nos experimentos em casa de vegetação se observou uma alta suscetibilidade da bananeira ao nematoide, embora a cultivar Terra tenha apresentado tolerância ao parasita. O isolado CG1006 proporcionou uma redução de 33% no número de ovos nessa cultura. No experimento com tomateiros, o isolado CG179 apresentou redução de 44,2% no número de ovos no tratamento sob baixa densidade populacional do nematoide; o isolado CG1006 causou uma redução de 33,6%. Não houve controle do nematoide em tomateiros em altas infestações de M. enterolobii, em condições de casa de vegetação. Essa pesquisa sugere que os agentes de controle biológico não podem substituir outros métodos de controle, mas podem ser integrados a outras estratégias de manejo que visem o re-estabelecimento do equilíbrio biológico do solo. / Meloidogyne enterolobii has been detected parasitizing guava and vegetables. The negative impact of pesticides has led to restricted use of some nematicides. The potential of nematophagous fungi has been evaluated as a complementary strategy to control this disease. The aim of this study was to evaluate the pathogenicity of Pochonia chlamydosporia and Purpureocillium lilacinum (=Paecilomyces lilacinus) on Meloidogyne enterolobii eggs in vitro and in greenhouse conditions. Were evaluated 19 isolates of P. chlamydosporia and 17 isolates of P. lilacinum belonging to the Fungi Invertebrates Collection (CFI) of Embrapa Genetic Resources and Biotechnology. Three experiments were conducted in Elisa plates in order to: 1) evaluate the pathogenic action of these isolates on nematode eggs; 2) select the best four isolates of each genus for pathogenicity on egg masses; 3) evaluate the best two isolates of each genus for pathogenicity on eggs when applied together. In vitro evaluation isolates CG1006, CG1044, CG1042 and CG1101 (P. chlamydosporia) and CG179, CG1038, CG348 and CG959 (P. lilacinum) provided reductions of more than 66% when applied on eggs. When applied on egg masses, they show a lower result. The application together, did not alter the hatching of second stage juveniles (J2) of M. enterolobii . The experiments in greenhouse showed a high susceptibility of banana cv. Terra to M. enterolobii, although this plant had shown tolerance to the parasite. The isolated CG1006 provided a 33% of reduction in the number of eggs on this culture. On the experiment with tomato, isolated CG179 decreased 44.2% the number of eggs in the treatment under low nematode; population density; the isolate CG1006 caused a reduction of 33.6%. No control was observed on high infestations of M. enterolobii on tomato, under greenhouse conditions. This research suggests that biological control agents cannot replace other methods of control, but can be integrated with other management strategies to re-establish the biological balance of the soil.

Submitted by Marco Antônio de Ramos Chagas (mchagas@ufv.br) on 2015-10-19T13:48:28Z No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 763255 bytes, checksum: 11f247d451047f658af1c92d00bd40d7 (MD5) / Made available in DSpace on 2015-10-19T13:48:28Z (GMT). No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 763255 bytes, checksum: 11f247d451047f658af1c92d00bd40d7 (MD5) Previous issue date: 2015-02-20 / Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico / Fitonematoides são patógenos de difícil manejo, extremamente importantes para a agricultura mundial. Entre as medidas de manejo utilizadas, o controle biológico tem ganhado espaço, principalmente pela maior conscientização acerca dos malefícios causados pelos nematicidas químicos à saúde humana e ao meio ambiente. No presente trabalho, avaliou-se a compatibilidade entre o fungo nematófago Pochonia chlamydosporia e isolados bacterianos obtidos em raízes de plantas antagonistas no manejo de Meloidogyne javanica em casa de vegetação, bem como a utilização de substrato sólido para a multiplicação do isolado bacteriano selecionado para o controle de nematoides. Testando o efeito de Pochonia chlamydosporia, Gracilibacillus dipsosauri e de um condicionador de solo organo-mineral no controle de Meloidogyne javanica em tomateiro, observou-se que na interação dos três tratamentos, e na interação entre G. dipsosauri e P. chlamydosporia, a redução no número de galhas radiculares causadas pelo nematoide foi de 48 e 41% respectivamente. Os tratamentos com G. dipsosauri e P. chlamydosporia + Ribumin proporcionaram redução de 26 e 21% no número de ovos respectivamente. A interação entre o fungo nematófago e a rizobactéria foi positiva para o controle do nematoide, apesar do fato de G. dipsosauri ter inibido o crescimento do fungo P. clamydosporia em até 30% em teste in vitro. Avaliando o controle de M. javanica em tomateiro com bactérias endofíticas, observou-se que dos 51 isolados obtidos, 18 foram eficientes em reduzir o número de galhas de M. javanica, resultando em 51 a 75% de controle em relação à testemunha. Cinco isolados reduziram o número de massas de ovos de 65 a 75% em relação ao tratamento testemunha. Os tratamentos com os isolados Cs-2, Cs-12 e Mc-3 causaram 22, 24 e 27% de imobilidade nos J2 de M. javanica respectivamente. Os isolados Cs-2, Cp-5 e Mc-3, quando aplicados via irrigação do solo, reduziram em até 46% o número de galhas de M. javanica. Além disso, o isolado Mc-3 mostrou-se eficiente também na microbiolização de sementes, reduzindo grandemente a multiplicação do nematoide no interior das raízes. O fungo P. chlamydosporia não produziu compostos antibióticos contra os isolados bacterianos testados e os isolados Cs-2, Cs-12, Cp-1 e Mc-3 foram os que apresentaram maior compatibilidade nos testes de antibiose, efeito dos compostos voláteis e confrontação direta realizados in vitro. Quando aplicados via microbiolização de sementes, observou-se que o tratamento com a bactéria Mc-3 proporcionou redução de 23% no número de ovos do nematoide. A combinação da bactéria Cs-2 com Pc-10 proporcionou redução de 31% e a combinação das três bactérias com P. chlamydosporia proporcionou redução de 37%. Na aplicação via irrigação, Pc-10 isoladamente reduziu o número de galhas em 33% e quando associado a Mc-3, em 30%. Já quanto ao número de ovos por sistema radicular, as reduções foram de 64, 60 e 49% quando o solo foi tratado com Mc-3, Pc-10 e na interação de ambos, respectivamente. Por fim, nos testes para produção de esporos do isolado Mc-3 (Bacillus sp.) em meio sólido, observou-se que a aplicação de 100 mL de água nos sacos contendo 300g de arroz em pré autoclavagem, seguido da aplicação de suspensão bacteriana e incubação por 5 dias a 30° é eficiente em produzir C esporos de Mc-3, gerando em média 1 x 109 esporos por grama de arroz. A adição de meios de cultura líquidos à suspensão bacteriana pós autoclavagem não resultou em aumento da produção. Já a aplicação de doses crescentes de farelo de soja ao arroz, mostrou que a aplicação de 10-20 g de farelo de soja por saco, proporciona aumento da produção de esporos de Mc-3. / Plant-parasitic nematodes are unwieldy pathogens, extremely important for global agriculture. Among the management measures used, biological control has gained ground, mainly due to increased awareness of the harm caused by chemical nematicides to human health and the environment. In this study, were evaluated the compatibility between the nematophagous fungus Pochonia chlamydosporia (Pc-10) and bacteria isolated from nematode-antagonistic plant roots in the management of Meloidogyne javanica in the greenhouse, and the use of solid substrate for multiplication of selected bacterial isolate for the control of nematodes. Testing the effect of Pochonia chlamydosporia, Gracilibacillus dipsosauri and an organo-mineral soil conditioner in the control of Meloidogyne javanica in tomato plants, it was observed that the interaction of the three treatments, and the interaction between G. dipsosauri and P. chlamydosporia, reduction the number of root galls caused by the nematode was 48 and 41%, respectively. Treatments with G. dipsosauri and P. chlamydosporia + soil conditioner resulted in the reduction of 26 and 21% of the number of eggs, respectively. The interaction between the nematophagous fungi and rhizobacteria was positive for controlling nematode, despite the fact that G. dipsosauri inhibited the growth of the fungus P. clamydosporia by 30% in vitro test. Evaluating the control of M. javanica in tomato with endophytic bacteria, it was observed that from the 51 isolates obtained, 18 were effective in reducing the number of galls caused by M. javanica, resulting in 51-75% control when compared to the control treatment. Five isolates reduced the number of egg masses from 65 to 75% when compared to the control treatment. The treatments with the isolates Cs-2, Cs-12 and Mc-3 caused 22, 24 and 27% in immobility J2 of M. javanica respectively. The isolates Cs-2, Cp-5 and Mc-3, when applied via irrigation of the soil, reduced the number of galls of M. javanica by 46%. Furthermore, the isolate Mc-3 was also efficient when used through seed treatment, greatly reducing nematode multiplication in the roots. The fungus P. chlamydosporia did not produce antibiotic compounds against the bacterial isolates, and Cs-2, Cs-12, Cp-1 and Mc-3 isolates had the highest compatibility with the fungus in antibiosis, effect of volatile compounds and direct confrontation tests, performed in vitro. When applied to seeds, it was observed that treatment with Mc-3 bacterium gave 23% of reduction in the number of nematode eggs. The combination of Cs-2 bacteria and Pc-10 gave a reduction of 31%, and combining the three bacteria with P. chlamydosporia gave 37% reduction. When the antagonists where applied through soil irrigation, the number of galls caused by M. javanica was reduced by 33 and 30% for Pc- 10 alone and in combination with Mc-3, respectively. As for the number of eggs per root system, the reductions were 64, 60 and 49% when the soil was treated with Mc-3, Pc-10 and the interaction of both, respectively. Finally, in tests for the production of the Mc-3 (Bacillus sp.) spores in solid state fermentation, we observed that the application of 100 ml of water in bags containing 300g of pre- autoclaved rice, followed by the application of bacterial solution and incubated for 5 days at 30° is effective in producing Mc-3 spores, generating an average C of 1 x 109 spores per gram of rice. The addition of liquid culture media after autoclaving the bacterial solution did not result in increased production. The application of increasing doses of soybean meal into the rice showed that the application of 10-20 g of soybean meal provides increases in the production of Mc-3 spores.

Submitted by Reginaldo Soares de Freitas (reginaldo.freitas@ufv.br) on 2015-10-29T09:44:12Z No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 2576663 bytes, checksum: 55014ed647040658178f84127b49b7ad (MD5) / Made available in DSpace on 2015-10-29T09:44:12Z (GMT). No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 2576663 bytes, checksum: 55014ed647040658178f84127b49b7ad (MD5) Previous issue date: 2014-02-25 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / Dolichandra unguis-cati (Bignoniaceae), comumente conhecida no Brasil e Paraguai como unha de gato, é uma planta trepadeira lenhosa perene, nativa da América, do México até a Argentina que tem uma ampla distribuição pelo Brasil e Paraguai. Depois de introduzida como uma planta ornamental em vários países naturalizou-se e tornou-se uma importante invasora causando sérios problemas em jardins, pomares, florestas cultivadas e nativas na Austrália, África do Sul, China, USA (Sul da Flórida) entre outros. A unha de gato representa uma ameaça significativa para a biodiversidade, em áreas densamente afetadas, pois cobre totalmente a vegetação, dominando-a e levando ao declínio de morte das plantas subjacentes. Os métodos convencionais de controle, como o químico e mecânico não podem ser aplicados no seu controle pois são inviáveis economicamente e danosos ao meio ambiente. Com isso, o controle biológico com fungos fitopatogénicos é considerado uma das medidas para o manejo desta invasora. Com o objetivo de complementar o trabalho feito na busca de agentes adicionais para o biocontrole de D. unguis-cati foi realizado um levantamento ampliado dos fungos associados a esta planta invasora no Brasil e Paraguai visando produzir uma descrição mais completa da micobiota fitopatogênica e orientar a seleção de potenciais agentes de controle biológico. Durante o levantamento foram obtidos 45 amostras, provenientes das regiões sul, sudeste do Brasil e da região oriental do Paraguai. Foram encontrados, descritos e fotografados quatorze fungos, dentre os quais três são aqui reconhecidos como novos taxa, dez são novas adições a micobiota do Brasil e doze são novos relatos para o Paraguai. Compreendem esta micobiota: sete hifomicetos- Alternaria alternata, Cercospora rodmanii, Cercospora appii, Passalora sp. nov. Passalora macfadyenae, Pseudocercospora unguis-cati, Ramularia sp. nov., e Myrothecium roridum; três celomicetos- Colletotrichum dematium, Colletotrichum karssi e Phoma sp. nov. e duas ferrugens- Uropyxis rickiana e Prospodium macfadyenae. Dentre as espécies encontradas, Uropyxis rickiana, Prospodium macfadyenae e Passalora macfadyenae são considerados como tendo o maior potencial para uso em programas de controle biológico clássico. / Introduced as an ornamental plant in several countries it has became naturalized and it is causing serious problems as invasive in gardens, orchards, cultivated and natural forests of Australia, South Africa, China and USA (south Florida), among others. The cat's claws represent a significant threat to the biodiversity once its covers the vegetation, dominating it and leading to the decline and death to the adjacent plants. The conventional methods of control, as the chemical and mechanical controls, can not be used since they are uneconomical and damaging to the environment. Thereby the biological control is considered as the only viable measure to the management of this weed. In order to complement the search for biocontrol agents for cat's claws it was conducted a another survey of the fungi associated with this weed in Brazil and Paraguay aimed at the description of the plant pathogenic mycobiota associated with it and select potentials agents of biocontrol. This survey resulted in 45 samples, from the south, southeast of Brazil and oriental region of Paraguay. It was found, described and photographed fourteen fungi, among witch three are recognized as new taxa, ten as new reports to Brazil and twelve to Paraguay. Comprise this mycobiota: seven hyphomycetes - Alternaria alternata, Cercospora rodmanii, Cercospora appii, Passalora sp. nov., Passalora macfadyenae, Pseudocercospora unguis-cati, Ramularia sp. nov., Pseudocercosporella sp. nov. and Myrothecium roridum; three coelomycetes- Colletotrichum dematium, Colletotrichum karssi and Phoma sp. nov. and two rust- Prospodium macfadyenaeand Uropyxis rickiana. Among the species that were collected in the course of this work, Uropyxis rickiana, Prospodium macfadyenae and Passalora macfadyenae are consideredhere preliminarly to have the greatest potential for use in classical biological control programs.

Submitted by LUAN ALBERTO ODORIZZI DOS SANTOS null (luanodorizzi1@hotmail.com) on 2017-06-21T02:16:39Z No. of bitstreams: 1 TESE_LUAN_ALBERTO_ODORIZZI_DOS_SANTOS.pdf: 1320242 bytes, checksum: f90ac4fa9e096f32cb4444a87944e21f (MD5) / Approved for entry into archive by Luiz Galeffi (luizgaleffi@gmail.com) on 2017-06-21T14:31:07Z (GMT) No. of bitstreams: 1 santos_lao_dr_jabo.pdf: 1320242 bytes, checksum: f90ac4fa9e096f32cb4444a87944e21f (MD5) / Made available in DSpace on 2017-06-21T14:31:07Z (GMT). No. of bitstreams: 1 santos_lao_dr_jabo.pdf: 1320242 bytes, checksum: f90ac4fa9e096f32cb4444a87944e21f (MD5) Previous issue date: 2017-04-24 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / L'expansion des zones agricoles a conduit à la perte de biodiversité due à la réduction des habitats naturels et semi-naturels dans les paysages agricoles. Avec l'augmentation de la production agricole dans le monde, des techniques écologiquement rationnelles sont de plus en plus discutées qui permettent une gestion durable des habitats environnants. Les effets de ces habitats sur la population des insectes nuisibles et de leurs ennemis naturels sont encore mal connus. L'objectif de cette thèse était de comprendre les effets des environnements naturels et semi-naturels sur la population des insectes nuisibles et des ennemis naturels dans les régions tropicales (Brésil) et tempérées (France). Au Brésil (chapitre II), on a évalué l'effet de la distance des fragments sur la population de fourmis prédatrices et omnivores dans la canne à sucre. Les résultats montrent que la richesse en espèces diminue avec la distance des fragments forestiers et que la prédominance des espèces Dorymyrmex bruneus et Pheidole oxyops augmente. Des espèces de fourmis colonisant les champs de canne à sucre ont également été trouvées dans des fragments forestiers, ce qui suggère que ces derniers habitats sont des refuges pour les espèces de fourmis prédatrices pendant les périodes de perturbation comme la récolte de la canne à sucre ou le travail du sol. Cela a été confirmé par des différences plus fortes dans les communautés de fourmis après la récolte de la canne à sucre (saison sèche) que quatre mois plus tard / (saison des pluies) quand l'absence de perturbation a permis la re-lonosiation par les fourmis. Il y avait aussi une différence dans la richesse des espèces de fourmis entre les différents types de fragments (vallées fluviales et plaines). En France, on a évalué l'effet des bandes de fleurs sauvages, de la végétation spontanée et des bandes d'herbe sur la communauté des ennemis naturels et la régulation du puceron de la pomme rosâtre Dysaphis plantaginaea (chapitre III). En ce qui concerne les principaux ennemis naturels, nos résultats ont montré une densité plus élevée de hoverflies par rapport à d'autres types de bande, mais aucune différence pour les coccinelles (coccinelidae). Cependant, aucune différence de densité naturelle de l'ennemi n'a été observée à l'intérieur des vergers. Le nombre de pucerons était plus élevé près des marges, ce qui suggère que la colonisation à partir des bandes marginales peut contrecarrer les effets régulateurs positifs des ennemis naturels. Les effets positifs de la végétation de la marge de bande sur la régulation des ravageurs de la pomme nécessitent un mouvement d'ennemis naturels dans le verger. Nous avons testé les mouvements des prédateurs généralistes en étiquetant les bandes de marge avec des protéines d'oeufs et nous avons vérifié si elles se nourrissaient d'insectes nuisibles en utilisant l'analyse de marqueurs génétiques des gènes de papillon (Cydia pomonella) à l'intérieur des prédateurs (chapitre IV). Les résultats ont montré que peu de personnes se déplaçaient des marges de champ dans le verger. Cependant, 25% des prédateurs capturés se nourrissaient de C. pomonella indiquant encore un haut niveau de régulation naturelle. En conclusion, le mouvement limité des prédateurs à partir des bandes de marges dans les vergers peut expliquer l'absence de différences entre les traitements de bandes dans la régulation des ravageurs du verger (pucerons). Les habitats naturels et semi-naturels peuvent contribuer à la lutte contre les ravageurs en marge des cultures, mais dans les vergers de pommiers cet effet a fortement diminué avec la distance. / A expansão das áreas agrícolas levou à perda de biodiversidade devido à redução dos habitats naturais e semi-naturais nas paisagens agrícolas. Com o aumento da produção agrícola no mundo, são cada vez mais discutidas técnicas ambientais que permitem uma gestão sustentável dos habitats do entorno. Os efeitos desses habitats sobre a população de insetos-pragas e seus inimigos naturais ainda são mal compreendidos. O objetivo desta tese foi compreender os efeitos dos ambientes naturais e semi-naturais na população de insetos-pragas e inimigos naturais nas regiões tropicais (Brasil) e temperadas (França). No Brasil (Capítulo II) foi avaliado o efeito da distância de fragmentos sobre a população de formigas predadoras e omnívoras em cana-de-açúcar. Os resultados mostraram que a riqueza de espécies diminui com a distância dos fragmentos florestais e que a dominância das espécies Dorymyrmex bruneus e Pheidole oxyops aumenta. As espécies de formigas que colonizam áreas de cana-de-açúcar também foram encontradas em fragmentos de florestas, sugerindo que estes últimos são abrigos para espécies de formigas predatórias durante períodos de perturbação como colheita de cana-de-açúcar ou preparo do solo. Isto foi confirmado por diferenças mais fortes nas comunidades de formigas após a colheita da cana (estação seca) do que quatro meses depois (estação chuvosa) quando a ausência de perturbação permitiu recolonização por formigas. Houve também uma diferença na riqueza de espécies de formigas entre diferentes tipos de fragmentos (vales de rios e planícies). Na França, foi avaliado o efeito de faixas de flores silvestres, vegetação espontânea e gramíneas na comunidade de inimigos naturais e a regulação do pulgão cinza Dysaphis plantaginaea (Capítulo III). No que diz respeito aos principais inimigos naturais, os nossos resultados mostraram uma maior densidade de sirfideos nas faixas de flores em comparação com outros tipos de faixas, mas nenhuma diferença para joaninha (Coccinelidae). Não foram observadas diferenças nas densidades de inimigos naturais dentro dos pomares. O número de afídeos foi maior perto das margens, sugerindo que a colonização das faixas nas margens pode neutralizar os efeitos reguladores positivos dos inimigos naturais. Os efeitos positivos da vegetação nas faixas da margem na regulação de pragas da maçã requerem um movimento de inimigos naturais no pomar. Nós testamos os movimentos de predadores generalistas marcando as faixas das margens com proteína de ovo e verificamos se eles se alimentavam de insetos pragas usando a análise de marcadores moleculares de genes de mariposas (Cydia pomonella) nos predadores (capítulo IV). Os resultados mostraram que poucos indivíduos se movimentaram das margens do campo para o pomar. No entanto, 25% dos predadores capturados alimentados com C. pomonella ainda indicam um alto nível de regulação natural. Em conclusão, o movimento limitado de predadores das faixas de plantas nas margens em pomares pode explicar a ausência de diferenças entre os tratamentos na regulação de pragas do pomar (pulgões). Habitats naturais e semi-naturais podem contribuir para o controle de pragas nas margens das culturas, mas em pomares de maçã este efeito diminuiu fortemente com a distância. / The expansion of agricultural areas has led to the loss of biodiversity due to the reduction of natural and semi-natural habitats in agricultural landscapes. With the increase of agricultural production in the world, environmentally sound techniques are increasingly discussed that allow a sustainable management of surrounding habitats. The effects of these habitats on the population of insect pests and their natural enemies are still poorly understood. The objective of this thesis was to understand the effects of natural and semi-natural environments on the population of insect pests and natural enemies in tropical (Brazil) and temperate (France) regions. In Brazil (Chapter II) the effect of the distance of fragments on the population of predatory and omnivorous ants in sugarcane was evaluated. The results showed that the species richness decrease with distance from forest fragments and that the dominance of the species Dorymyrmex bruneus and Pheidole oxyops increase. Ant species colonizing sugarcane fields were also found in forest fragments suggesting that the latter habitats are refuges for predatory ant species during periods of disturbance such as sugarcane harvest or soil tillage. This was confirmed by stronger differences in ant communities after sugarcane harvest (dry season) than four months later (rainy season) when absence of disturbance allowed re-colonosiation by ants. There was also a difference in the richness of ant species between different fragment types (river valleys and plateaus). In France, the effect of wildflower strips, spontaneous vegetation and grass strips on the community of natural enemies and the regulation of the rosy apple aphid Dysaphis plantaginaea (Chapter III) were evaluated. Concerning major natural enemies, our results showed a higher density of hoverflies in wild flower strips compared with other strip types but no differences for ladybirds (coccinelidae). However, no differences in natural enemy densities were observed inside orchards. Aphid number was higher close to the margins suggesting that colonization from margin strips may counteract positive regulatory effects of natural enemies. Positive effects of strip margin vegetation on regulation of apple pests require a movement of natural enemies into the orchard. We tested the movements of generalist predators by labelling margin strips with egg protein and we checked whether they fed on pest insects using specific genetic marker of the codling moth (Cydia pomonella) (chapter IV). The results showed that few individuals were moving from the field margins into the orchard. However, 25% of the captured predators fed on C. pomonella still indicating a high level of natural regulation. In conclusion, the limited movement of predators from margin strips into orchards may explain the absence of differences between strip treatments in orchard pest regulation (aphids). Natural and semi-natural habitats can contribute to pest control at the margins of crops, but in apple orchards this effect strongly decreased with distance.

Submitted by BRUNA MAGDA FAVETTI null (favettibruna@yahoo.com.br) on 2017-07-04T18:56:59Z No. of bitstreams: 1 Tese Doutorado_Bruna Magda Favetti_Agronomia_Proteção de Plantas_2017.pdf: 4736038 bytes, checksum: e4e1eee97d6fceda7b39a3070b6ff22c (MD5) / Approved for entry into archive by Luiz Galeffi (luizgaleffi@gmail.com) on 2017-07-04T19:52:05Z (GMT) No. of bitstreams: 1 favetti_bm_dr_bot.pdf: 4736038 bytes, checksum: e4e1eee97d6fceda7b39a3070b6ff22c (MD5) / Made available in DSpace on 2017-07-04T19:52:05Z (GMT). No. of bitstreams: 1 favetti_bm_dr_bot.pdf: 4736038 bytes, checksum: e4e1eee97d6fceda7b39a3070b6ff22c (MD5) Previous issue date: 2017-04-11 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / A soja (Glycine max) é uma das culturas mais importantes no agronegócio brasileiro. Um dos principais problemas fitossanitários ocorrentes nesse cultivo é o ataque de insetos-praga, que estão presentes desde a emergência da plântula até a fase de colheita. O controle desses insetos é realizado a partir de inseticidas sintéticos. Porém, a tática de controle biológico tem sido cada vez mais utilizada no Brasil, tornando-se uma importante ferramenta no Manejo Integrado de Pragas (MIP). Entre as opções, o parasitoide de ovos Trichogramma pretiosum Riley (Hymenoptera: Trichogrammatidae) reduz a infestação de populações de insetos-praga da ordem Lepidoptera, propiciando menor impacto ambiental e a produção de alimentos mais saudáveis. Com isso, o presente trabalho verificou as características bioecológicas de T. pretiosum em espécies de Heliothinae, como também avaliou diferentes quantidades e formas de liberação deste parasitoide, demostrando o seu papel no manejo de lepidópteros-praga na cultura da soja. Para atingir este objetivo a tese foi dividida em quatro capítulos: (1) características biológicas e exigências térmicas de T. pretiosum em três espécies de Heliothinae; (2) capacidade de parasitismo de T. pretiosum em três espécies de Heliothinae sob diferentes temperaturas; (3) técnicas de liberação de T. pretiosum para o controle de lepidópteros-praga da soja; (4) manejo integrado de insetos-praga na cultura da soja com e sem controle biológico. No laboratório avaliou-se o potencial do parasitoide de ovos no controle das espécies de Helicoverpa armigera (Hübner) (Lepidoptera: Noctuidae), Helicoverpa zea (Boddie) (Lepidoptera: Noctuidae) e Chloridea virescens (Fabricius) (Lepidoptera: Noctuidae) sendo os experimentos mantidos em câmaras climatizadas (BOD), nas temperaturas de 15, 20, 25, 30 e 35 ± 2 ºC, umidade relativa de 70 ± 10% e fotofase de 14 horas. No campo, os experimentos de avaliação das diferentes técnicas de liberação de T. pretiosum (adulto e cápsula contendo pupas protegidas) e quantidade de T. pretiosum liberado (120 mil e 60 mil parasitoides/liberação/hectare), bem como, o manejo de insetos-praga com e sem a liberação deste parasitoide, foram conduzidos na Fazenda de Ensino, Pesquisa e Extensão (FEPE), Universidade Estadual “Júlio de Mesquita Filho” - FCA/UNESP, Campus Botucatu-SP, safras 2014/15 e 2015/16. Pode-se afirmar que T. pretiosum controla as espécies de Heliothinae e a temperatura influencia a biologia e capacidade de parasitismo deste inseto, com impacto negativo nas temperaturas extremas (15 e 35ºC). Tanto a liberação de T. pretiosum via cápsula contendo pupas protegidas quanto adulto, bem como o uso de 120 mil parasitoides/liberação/hectare, exercem o controle das populações de lepidópteros-praga. A adoção do manejo biológico de lepidópteros com o uso de T. pretiosum evitou a utilização de inseticidas nas duas safras avaliadas, uma vez que o nível de controle não foi atingido. De maneira geral, conclui-se o agente biológico T. pretiosum é eficiente no controle de lepidópteros-praga e, juntamente com a adoção dos preceitos do MIP (monitoramento, adoção do nível de controle e integração de táticas), favorece a atuação de agentes benéficos, subsidiando assim a perspectiva de inserção desse parasitoide de ovos em programas de MIP-Soja, visando à busca por um ambiente agrícola mais sustentável. / The Soybean (Glycine max) is one of the most important crops in Brazilian agribusiness. One of the main phytosanitary problems occurring in this crop is the attack of insect pests, which are present from the emergence of the seedling until the harvest. The control of these insects is carried out from synthetic insecticides. However, the biological control tactic has been increasingly used in Brazil, becoming an important tool in Integrated Pest Management (IPM). Among the options, the Trichogramma pretiosum Riley (Hymenoptera: Trichogrammatidae) is a parasitoid egg reduces the infestation of populations of insect pests of the order Lepidoptera, providing less environmental impact and the production of healthier foods. Thus, the present work verified the bioecological characteristics of T. pretiosum in Heliothinae species, as well as evaluating different amounts and forms of release of this parasitoid, demonstrating its role in the management of lepidopteran pests in the soybean crop. To achieve this objective the thesis was divided into four chapters: (1) biological characteristics and thermal requirements of T. pretiosum in three species of Heliothinae; (2) the parasitism capacity of T. pretiosum in three Heliothinae species under different temperatures; (3) techniques for the release of T. pretiosum for the control of lepidopteran pests of soybean; (4) integrated pest-insect management in soybean crop with and without biological control. In the laboratory the potential of the parasitoid of the eggs in the control of the species of Helicoverpa armigera (Lepidoptera: Noctuidae), Helicoverpa zea (Boddie) (Lepidoptera: Noctuidae) and Chloridea virescens (Lepidoptera: Noctuidae) were evaluated in temperatures of 15, 20, 25, 30 and 35 ± 2ºC, relative humidity of 70 ± 10% and photophase of 14 hours. In the field, the evaluation experiments of the different techniques of T. pretiosum release (adult and capsule containing protected pupae) and quantity of T. pretiosum released (120 thousand and 60 thousand parasitoids/ release/hectare), as well as the management of pest insects with and without the release of this parasitoid, were conducted at Fazenda de Ensino, Pesquisa e Extensão (FEPE), Universidade Estadual “Júlio de Mesquita Filho” - FCA/UNESP, Campus Botucatu-SP, in 2014/15 and 2015/16 seasons. The T. pretiosum controls Heliothinae species and temperature influences the biology and parasitism capacity of this insect, with a negative impact on extreme temperatures (15 and 35 ºC). Both the release of T. pretiosum via capsule containing protected pupae as adult, as well as 120 thousand parasitoids/release/hectare exert control of the populations of lepidopteran pest. The adoption of biological management of lepidopteran with the use of T. pretiosum avoided the use of insecticides in the two seasons evaluated, once the level of control was not reached. In general, the biological agent T. pretiosum is efficient in controlling lepidopteran pests and, together with the adoption of IPM precepts (monitoring, adoption of the level of control and integration of tactics), favors the performance of agents beneficial, thus subsidizing the perspective of insertion of this parasitoid of eggs into IPM-Soybean programs, aiming at the search for a more sustainable agricultural environment.

Orientador: Reinaldo José Fazio Feres / Banca: Antonio Carlos Lofego / Banca: Denise Navia Magalhães Ferreira / Resumo: A árvore nativa Triplaris americana L. (Polygonaceae) é dióica e ocorre preferencialmente nas margens de rios e áreas ciliares das Florestas Latifoliadas Semidecíduas nos estados de Mato Grosso, Mato Grosso do Sul e região oeste do estado de São Paulo. No período de floração, que ocorre entre os meses de agosto a outubro, os indivíduos masculinos, pela produção de pólen, podem servir como reservatório para ácaros preponderantemente predadores, mantendo-os e promovendo seu aumento populacional. Em geral, ácaros dessa família constituem um grupo eficiente de predadores de ácaros fitófagos, pois vários estudos indicam que esses ácaros são importantes agentes para controle biológico e elementos essenciais para programas de manejo integrado de pragas. O presente trabalho teve como objetivo analisar a diversidade e ocorrência sazonal de ácaros em indivíduos masculinos e femininos de T. americana. As coletas foram realizadas em cinco indivíduos masculinos e cinco femininos, presentes em área urbana de São José do Rio Preto, São Paulo. Para comparar a abundância de ácaros entre os indivíduos masculinos e femininos de T. americana, foi aplicada a análise de variância (ANOVA) de medidas repetidas. Para verificar possíveis relações entre a abundância e riqueza de espécies com a pluviosidade, foi usada regressão linear. A diversidade máxima teórica também foi determinada. Nos exemplares masculinos foram coletados 29.968 ácaros pertencentes a 29 espécies, e nos femininos, 22.767 ácaros de 30 espécies. A diversidade de espécies de ácaros em exemplares de ambos os sexos de T. americana estudados foi inferior a 50% da diversidade máxima teórica prevista. As espécies fitófagas mais abundantes em ambos os sexos foram Lorryia formosa Cooreman, Allonychus brevipenis Feres, Aculus sp. e Lorryia sp.1. Entre os ácaros predadores, Euseius citrifolius... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: The native tree Triplaris americana L. (Polygonaceae) is dioecious and occurs mainly along rivers and riparian areas of semi-deciduous broadleaf forest in the states of Mato Grosso, Mato Grosso do Sul and west of the state of São Paulo. During flowering, which occurs between the months of August to October, the production of pollen in male individuals may serve as a reservoir for mites mainly predators, keeping them and promoting increase of their population. In general, mites of this family are a group of efficient predators of phytophagous mites, as several studies indicate that these mites are important biological control agents and essential programs for integrated pest management. This study aims to analyze the diversity and seasonal occurrence of mites in male and female individuals of T. americana. Samples were collected from five male and five females trees, present in the urban area of São José do Rio Preto, São Paulo. To compare the abundance of mites between male and female subjects of T. americana, was applied to analysis of variance (ANOVA) with repeated measures. To verify the relationship between the abundance and species richness with rainfall, was used linear regression. The maximum theoretical diversity was also determined. In male specimens were collected from 29,968 mites belonging to 29 species, and in female, 22,767 mites of 30 species. The diversity of species of mites in samples of both sexes of T. americana study was less than 50% of the maximum theoretical diversity. As phytophagous species more abundant in the sexes were Lorryia formosa Cooreman, Allonychus brevipenis Feres, Aculus sp. and Lorryia sp.1. The highest abundance of predators occurred during flowering, Euseius citrifolius Denmark & Muma and Metapronematus sp.1., predatory mites, were the most common and of constant occurrence. Euseius citrifolius presented its highest abundance... (Complete abstract click electronic access below) / Mestre