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Ocorrência e caracterização molecular de Cryptosporidium spp. em suínos no município de Araçatuba, estado de São Paulo, Brasil /

Nascimento, Isabela Garcia do January 2019 (has links)
Orientador: Marcelo Vasconcelos Meireles / Resumo: Existem poucos estudos relacionados à epidemiologia e aspectos clínicos da infecção por Cryptosporidium spp. em suínos, especialmente no Brasil. Os suínos apresentam infecções clínicas ou subclínicas e são mais comumente infectados por Cryptosporidium suis e Cryptosporidium scrofarum. O objetivo deste trabalho é determinar a ocorrência e realizar a caracterização molecular de Cryptosporidium spp. em suínos originados de quatro fazendas com sistemas de produção semi-intensivos no Estado de São Paulo, Brasil. Duzentas amostras fecais foram coletadas de suínos, de março a agosto de 2018, e analisadas para verificar a ocorrência de Cryptosporidium spp. por nested PCR visando a amplificação de fragmento parcial do gene da subunidade 18S do rRNA (18S rRNA) e sequenciamento genético. Resultados positivos para Cryptosporidium spp. foram detectados em 17% (34/200) das amostras. O sequenciamento dos fragmentos amplificados identificou C. scrofarum em 10 das 11 amostras sequenciadas. Dessa forma, verificamos que a espécie zoonótica C. scrofarum está presente em fazendas de suínos com sistemas de produção semi-intensivos no Estado de São Paulo e que não houve diferença significativa entre as taxas de prevalência entre suínos de <3 meses e >3 meses de idade. / Mestre
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Ocorrência e caracterização molecular de Cryptosporidium spp. em bezerros leiteiros da região noroeste do Estado de São Paulo /

Oliveira, Fernando Paes de. January 2010 (has links)
Resumo: Um total de 196 amostras fecais de bezerros leiteiros mestiços, de 7 a 30 dias de idade de ambos o sexos foram colhidas em 31 propriedades com o objetivo de determinar a ocorrência de Cryptosporidium na região Noroeste do Estado de São Paulo, assim como caracterizar molecularmente as espécies envolvidas nesta parasitose. Realizou-se a análise microscópica pela técnica de coloração negativa com verde malaquita em todas as amostras de fezes. Para identificação molecular de Cryptosporidium, utilizou-se a reação de nested PCR, utilizando primers específicos para amplificação de fragmentos do gene codificador da subunidade 18S do RNA ribossômico e do gene da glicoproteína GP 60, submetendo o produto da PCR a sequenciamento e análise filogenética. Por meio de exame de fezes, foi observada positividade de 2% (4/196), por meio de microscopia, e de 10,7% (21/196) pela nested PCR. Como resultado do sequenciamento, foram identificadas quatro espécies de Cryptosporidium: C. parvum (subtipo IIa15G2R1) C. ryanae, C. bovis e C. andersoni. Esta descoberta de C. parvum subtipo IIaA15G2R1 na região estudada ilustra a utilidade da subtipagem. Embora estes resultados iniciais baseados em subtipos com GP60 sejam úteis para compreender a dinâmica de transmissão das espécies de Cryptosporidium, o número de amostras analisadas é relativamente pequeno e muito mais ainda pode ser pesquisado. É interessante notar que as informações de tipagem molecular com o gene 18S rRNA e a subtipagem com o gene GP60, permitem que os epidemiologistas possam rastrear as fontes de surtos das diferentes espécies de Cryptosporidium. / Abstract: A total of 196 fecal samples from crossbred calves, 7-30 days old of both sexes were collected in 31 properties with the objective of determining the prevalence of Cryptosporidium in the northwestern region of São Paulo, as well as characterizing the molecular species involved in this parasite. We performed microscopic analysis by the technique of negative staining with malachite green in all stool samples. For molecular identification of Cryptosporidium, we used the reaction of nested PCR using specific primers for amplification of gene fragments coding for the 18S subunit ribosomal RNA gene and the glycoprotein GP 60 by subjecting the PCR product sequencing and phylogenetic analysis. By stool examination, positivity was observed 2% (4 / 196) by means of microscopy, and 10.7% (21/196) by nested PCR. As a result of sequencing, we identified four species of Cryptosporidium: C. parvum (subtype IIa15G2R1) C. Ryanair, C. bovis and C. andersoni. This discovery of C. IIaA15G2R1 parvum subtype in the studied region illustrates the usefulness of subtyping. Although based on these initial results with GP60 subtypes are useful for understanding the transmission dynamics of the species of Cryptosporidium, the number of samples is relatively small and much more can still be searched. It is interesting to note that the information of molecular typing with 18S rRNA gene and subtyping with the GP60 gene, allow epidemiologists can track sources of outbreaks of different species of Cryptosporidium. / Orientador: Luiz Claudio Nogueira Mendes / Coorientador: Marcelo Vasconcelos Meireles / Banca: Ricardo Velludo Gomes de Soutello / Banca: Katia Denise Saraiva Bresciani / Mestre
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Caracterização molecular de Cryptosporidium spp. em calopsitas (Nymphicus hollandicus) / Molecular characterization of Cryptosporidium spp. in cockatiels (Nymphicus hollandicus)

Panegossi, Mariele Fernanda da Cruz [UNESP] 17 March 2017 (has links)
Submitted by Mariéle Fernanda da Cruz Panegossi null (marielepanegossi@hotmail.com) on 2017-03-21T13:39:59Z No. of bitstreams: 1 DISSERTAÇÃO FINAL.pdf: 931083 bytes, checksum: b480e23b8edae9c630109878a2a61738 (MD5) / Approved for entry into archive by Luiz Galeffi (luizgaleffi@gmail.com) on 2017-03-22T14:34:04Z (GMT) No. of bitstreams: 1 panegossi_mfc_me_araca.pdf: 931083 bytes, checksum: b480e23b8edae9c630109878a2a61738 (MD5) / Made available in DSpace on 2017-03-22T14:34:04Z (GMT). No. of bitstreams: 1 panegossi_mfc_me_araca.pdf: 931083 bytes, checksum: b480e23b8edae9c630109878a2a61738 (MD5) Previous issue date: 2017-03-17 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / Cryptosporidium spp. é um protozoário que completa seu ciclo biológico na superfície de células epiteliais do trato gastrintestinal, respiratório e urinário de mamíferos, aves, répteis, anfíbios e peixes. Foi incluído na Iniciativa das Doenças Negligenciadas da Organização Mundial da Saúde (OMS) por sua estreita relação à população com baixo poder aquisitivo e precárias condições de saneamento básico. Esse gênero de parasito causa doença clínica e subclínica em Psitaciformes, com detecção de Cryptosporidium meleagridis, Cryptosporidium baileyi, Cryptosporidium galli e dos genótipos I, II, III, IV e V. A calopsita é um dos psitacídeos mais vendidos atualmente, sendo frequentemente encontrada em residências. O contato próximo com humanos é motivo de preocupação, uma vez que pode ser reservatório desse coccídio intestinal, sendo imprescindível atentar para medidas de prevenção, controle e diagnóstico dessa enfermidade parasitária. Os métodos baseados na microscopia são mais utilizados para o diagnóstico de Cryptosporidium spp., por serem menos onerosos. No entanto, apenas a caracterização molecular é capaz de identificar a espécie de Cryptosporidium spp. Em relação ao tratamento dessa enfermidade em aves, é importante ressaltar que ainda não há quimioterapia efetiva disponível. Boas condições de higiene e saneamento básico são essenciais, a fim de prevenir e controlar surtos dessa enfermidade em humanos e animais. / Cryptosporidium spp. is protozoa that complete their biological cycle on the surface of epithelial cells of the gastrointestinal, respiratory and urinary tract of mammals, birds, reptiles, amphibians and fish. This parasite was included in the World Health Organization's Neglected Diseases Initiative because of its close relationship to the population with low purchasing power and poor basic sanitation conditions. This infection causes clinical and subclinical disease in Psitaciformes with detection of Cryptosporidium meleagridis, Cryptosporidium baileyi, Cryptosporidium galli and genotypes I, II, III, IV and V. The cockatiel is one of the best selling psittacines currently found in homes. Close contact with humans is cause for concern, since they may be reservoirs of this coccidia, being essential to watch for measures of prevention, control and diagnosis of this parasitic disease. The methods based on the microscopy are more used for the diagnosis of cryptosporidiosis, because they are less expensive. However, only molecular characterization is able to identify the species of Cryptosporidium spp. in relation to the treatment of this disease in poultry, it is important to emphasize that there is still no effective chemotherapy available. Good hygiene and basic sanitation conditions are essential, in order to prevent and control disease in animals and animals.
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Production of Cryptosporidium parvum recombinant proteins aiming the development of diagnostic methods /

Souza, Milena Sato de. January 2017 (has links)
Orientador: Marcelo Vasconcelos Meireles / Resumo: Cryptosporidium spp. são parasitos protozoários que infectam principalmente as células epiteliais do trato digestivo em vários animais, incluindo humanos. Este protozoário causa doença entérica, que se caracteriza como diarréia auto-limitante em indivíduos saudáveis, ou mesmo doença fatal em pacientes imunodeficientes. Cryptosporidium parvum é a principal causa de infecção em mamíferos e é o principal responsável pela criptosporidiose zoonótica. Novos métodos de detecção, prevenção, tratamento e estratégias de controle para criptosporidiose em seres humanos são cada vez mais necessários. Anticorpos e proteínas recombinantes têm potencial para o desenvolvimento de medicamentos, vacinas ou podem ser usados para desenvolver técnicas de diagnóstico mais acessíveis com alta sensibilidade e especificidade. Neste estudo, o objetivo principal foi a expressão da proteína recombinante CP41 de C. parvum em Escherichia coli e produção de um anticorpo específico para CP41 recombinante (rCP41), visando a detecção de oocistos de Cryptosporidium por imunofluorescência. / Doutor
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Ocorrência e caracterização molecular de Cryptosporidium spp. em caprinos jovens do município de Quixadá-Ceará

Brito, Roberta Lomonte Lemos de [UNESP] 18 June 2014 (has links) (PDF)
Made available in DSpace on 2015-04-09T12:28:09Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2014-06-18Bitstream added on 2015-04-09T12:48:06Z : No. of bitstreams: 1 000816635.pdf: 1408307 bytes, checksum: 5daacbf627e5bb9b1039a599a8e5bed4 (MD5) / O presente estudo teve como objetivo avaliar a ocorrência da infecção e realizar a caracterização molecular de Cryptosporidium spp. em caprinos jovens do município de Quixadá, Ceará, Brasil. Participaram do estudo um total de 400 animais, com idade entre três e 360 dias, com e sem padrão racial definido, nos quais 154 eram machos e 246 fêmeas, procedentes de 25 estabelecimentos rurais distribuídos em três circuitos. Amostras de fezes foram obtidas diretamente da ampola retal dos cabritos e cadastradas de acordo com o aspecto e a coloração. Uma quantidade de 200 mg de cada amostra foi distribuída em microtubos de 2 mL e congeladas “in natura” a -20 °C, até o momento das extrações de DNA genômico do parasito com auxílio de kit comercial. Todas as amostras foram submetidas a “Nested”-PCR para amplificação de fragmentos do gene da subunidade 18S RNA ribossômico. As positivas nesta amplificação foram testadas na “Nested”-PCR com os genes actina e HSP 70. As amostras que tiveram amplificação nesses três genes foram submetidas a “Nested”-PCR em triplicata e posterior sequenciamento nas direções “sense” e “anti-sense”. A ocorrência da infecção por Cryptosporidium spp. em cabritos de Quixadá foi de 7,50% (30/400) e 64,00% (16/25) das propriedades tinham cabritos positivos. O distrito Tapuiará foi o que apresentou maior número de animais positivos, e a frequência no período seco e chuvoso foi de 9,55% (19/199) e 5,47% (11/201), respectivamente (P = 0,1218). Das 30 amostras de fezes positivas, 50,00% (15/30) tinham aspecto normal e 70,00% (21/30) coloração normal, sugerindo que cabritos assintomáticos eliminam oocistos no ambiente. Não foi observada positividade para Cryptosporidium spp. em animais com 301 a 360 dias. Por meio do sequenciamento foi possível identificar que as espécies do coccídio detectadas nas fezes dos cabritos foram Cryptosporidium xiaoi ... / The present study aimed to evaluate the occurrence of infection and perform molecular characterization of Cryptosporidium spp. in goats kids from the town of Quixadá – state of Ceará – Brazil. A total of 400 animals, 154 males and 246 females, with aged between three and 360 days, with and without defined breed, from 25 farms distributed in three circuits, participated in this study. Stool samples were obtained directly from the goats rectum and registered in accordance to their appearance and coloring. An amount of 200 mg of each sample, were distributed in micro tubes of 2 mL and frozen “in nature” at -20 °C until the moment of extraction of the parasite genomic DNA using a commercial kit. All samples were submitted to Nested-PCR to amplify fragments of 18S subunit of ribosomal RNA. The positives samples in this amplification were tested in Nested-PCR with actin and HSP 70 genes. Samples that were amplified in these three genes were subjected to Nested-PCR triplicate and subjected to sequencing in sense and anti-sense directions. The occurrence of the infection by Cryptosporidium in goats kids of the town of Quixadá was 7.50% (30/400) and 64.00% (16/25) of the farms with positive goats. The Tapuiará district showed the highest number of positive animals and the frequency in dry and rainy period was 9.55% (19/199) and 5.47% (11/201), respectively (P = 0.1218). Considering 30 samples of positive stools, 50.00% (15/30) had normal appearance and 70.00% (21/30) normal coloring, suggesting that asymptomatic goats can eliminate oocysts in the environment. It was not observed positivity for Cryptosporidium spp. in animals aged between 301 and 360 days. Through sequencing, it was possible to identify that the species of coccidian found in the feces of the goats are Cryptosporidium xiaoi, Cryptosporidium ubiquitum and Cryptosporidium meleagridis. Different species of protozoa are present in rural farms ...
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Infecção por Cryptosporidium em bezerros e humanos de assentamentos rurais na região de Araçatuba, São Paulo

Matos, Lucas Vinicius Shigaki de [UNESP] 30 July 2014 (has links) (PDF)
Made available in DSpace on 2015-04-09T12:28:19Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2014-07-30Bitstream added on 2015-04-09T12:47:40Z : No. of bitstreams: 1 000816038.pdf: 29679 bytes, checksum: 125c0e781f09a27e015da5f54d34b980 (MD5) / Os objetivos foram determinar a ocorrência, avaliar a distribuição espacial e caracterizar molecularmente a infecção por Cryptosporidium spp. em bezerros e humanos procedentes de dois assentamentos rurais na região Noroeste do Estado de São Paulo, assim como associar a positividade para o parasito com as variáveis estudadas. Neste estudo, foram examinados 231 bovinos com até seis meses de idade e 54 pessoas dos dois assentamentos que mantém uma relação estreita com os animais. Positividade diagnóstica da infecção por Cryptosporidium spp. foi observada em 17 bezerros, por meio da coloração negativa por verde malaquita e pela reação em cadeia da polimerase (nested-PCR) e somente por esta última técnica, em uma pessoa. Por meio da análise estatística de correspondência múltipla houve associação entre a ocorrência do referido protozoário por meio da nested-PCR com a consistência de fezes aquosas. Os sequenciamentos do DNA das amostras de fezes de bezerros revelaram em 15 amostras semelhança com Cryptosporidium andersoni, em uma Cryptosporidium bovis e em outra 100% de identidade com Cryptosporidium parvum, sendo essa espécie detectada no humano considerado infectado. A partir dos resultados obtidos nesse estudo, pode-se inferir que quanto à distribuição espacial, em um dos assentamentos, havia maior ocorrência da infecção por Cryptosporidium nos bezerros examinados e nesse local foi detectado um humano positivo para esse parasito. Adicionalmente, em animais até dois meses de idade foi isolado C. parvum e nos acima dessa faixa etária, C. bovis e C. andersoni. Complementarmente, a consistência aquosa das fezes foi associada com a positividade para esse gênero parasitário / The objectives were to determine the occurrence, evaluate the spatial distribution and molecularly characterize infection by Cryptosporidium spp. in calves and humans living in two rural settlements in the northwestern state of São Paulo, as well as associate positiveness for the parasite to the studied variables. In this study, 231 cattle aged up to six months and 54 people from the two settlements who maintains a close relationship with the animals were examined. Diagnostic positivity of infection by Cryptosporidium spp. was observed in 17 calves by malachite green negative stain and polymerase chain reaction (nested PCR), and by only the latter technique, infection in one person. Statistical analysis of multiple correspondence showed an association between the presence of Cryptosporidium spp. by nested PCR, and watery stools. Analysis of the sequences revealed in 15 samples a similarity to Cryptosporidium andersoni, in one sample a resemblance with Cryptosporidium bovis, and in one sample 100% of identity with Cryptosporidium parvum, being this species detected in the person considered infected. From the results obtained in this study, it can be inferred that, as spatial distribution, in one of the settlements, there was a higher occurrence of Cryptosporidium infection in calves, and in this location a positive human for this parasite was detected. Additionally, in animals up to two months was isolated C. parvum and above this age range, C. bovis and C. andersoni. Complementarily, the aqueous consistency of stools was associated with seropositivity to this parasitic gender
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Ocorrência de Criptosporidium spp. (Tyzzer, 1907) e Giardia spp. (Kunstler, 1882) em leitões ao desmame

Matos, Denise Junqueira [UNESP] 21 July 2009 (has links) (PDF)
Made available in DSpace on 2014-06-11T19:27:19Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2009-07-21Bitstream added on 2014-06-13T19:26:14Z : No. of bitstreams: 1 matos_dj_me_araca.pdf: 760484 bytes, checksum: c06dae3728a9ffd470f98e2c615bdd6d (MD5) / O presente trabalho teve como objetivo investigar a ocorrência dos protozoários Cryptosporidium spp. e Giardia spp. em leitões com 45 dias de idade. Amostras fecais de 107 leitões foram colhidas, em três dias alternados, em suinoculturas do Município de Araçatuba, São Paulo, Brasil. A ocorrência de oocistos de Cryptosporidium spp., foi observada em 4,7% (5/107) dos animais usando a técnica de Kinyoun, e a detecção de oocistos de Giardia spp. foi concomitantemente observada em 1,9% (2/107) dos animais pelo método de Faust.. Animais com a presença concomitante de ambos os parasitos apresentaram fezes com aspecto diarréico. A partir dos resultados obtidos é possível inferir que a ocorrência de Cryptosporidium e Giardia foi baixa, o que se atribuiu ao manejo e que a presença destes protozoários não estava associada a todos animais com sintomas diarréicos envolvidos no estudo. / The goal of this research was to investigate the occurrence of Cryptosporidium spp. and Giardia spp. in 45-days-old pigs. Fecal samples of 107 pigs were collected at three alternate days in piggeries in Araçatuba, São Paulo, Brazil. Cryptosporidium spp. oocysts were observed in 4.7% (5/107) of animals by means of Kinyoun acid-fast stain and cysts of Giardia spp. were simultaneously observed in 1.9% (2/107) of the animals by the method of Faust. Animals with positivity for the both parasites presented feces with diarrheal aspect. From these results it is possible to infer that the occurrence of Cryptosporidium and of Giardia was low because of the good management practices and both protozoa were not associated the presence of clinical symptoms.
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Infecção por Cryptosporidium em bezerros e humanos de assentamentos rurais na região de Araçatuba, São Paulo /

Matos, Lucas Vinicius Shigaki de. January 2014 (has links)
Orientador: Katia Denise Saraiva Bresciani / Coorientador: Alvimar José da Costa / Banca: José Jurandir Fagliari / Banca: Carlos Noriyuki Kaneto / Resumo: Os objetivos foram determinar a ocorrência, avaliar a distribuição espacial e caracterizar molecularmente a infecção por Cryptosporidium spp. em bezerros e humanos procedentes de dois assentamentos rurais na região Noroeste do Estado de São Paulo, assim como associar a positividade para o parasito com as variáveis estudadas. Neste estudo, foram examinados 231 bovinos com até seis meses de idade e 54 pessoas dos dois assentamentos que mantém uma relação estreita com os animais. Positividade diagnóstica da infecção por Cryptosporidium spp. foi observada em 17 bezerros, por meio da coloração negativa por verde malaquita e pela reação em cadeia da polimerase (nested-PCR) e somente por esta última técnica, em uma pessoa. Por meio da análise estatística de correspondência múltipla houve associação entre a ocorrência do referido protozoário por meio da nested-PCR com a consistência de fezes aquosas. Os sequenciamentos do DNA das amostras de fezes de bezerros revelaram em 15 amostras semelhança com Cryptosporidium andersoni, em uma Cryptosporidium bovis e em outra 100% de identidade com Cryptosporidium parvum, sendo essa espécie detectada no humano considerado infectado. A partir dos resultados obtidos nesse estudo, pode-se inferir que quanto à distribuição espacial, em um dos assentamentos, havia maior ocorrência da infecção por Cryptosporidium nos bezerros examinados e nesse local foi detectado um humano positivo para esse parasito. Adicionalmente, em animais até dois meses de idade foi isolado C. parvum e nos acima dessa faixa etária, C. bovis e C. andersoni. Complementarmente, a consistência aquosa das fezes foi associada com a positividade para esse gênero parasitário / Abstract: The objectives were to determine the occurrence, evaluate the spatial distribution and molecularly characterize infection by Cryptosporidium spp. in calves and humans living in two rural settlements in the northwestern state of São Paulo, as well as associate positiveness for the parasite to the studied variables. In this study, 231 cattle aged up to six months and 54 people from the two settlements who maintains a close relationship with the animals were examined. Diagnostic positivity of infection by Cryptosporidium spp. was observed in 17 calves by malachite green negative stain and polymerase chain reaction (nested PCR), and by only the latter technique, infection in one person. Statistical analysis of multiple correspondence showed an association between the presence of Cryptosporidium spp. by nested PCR, and watery stools. Analysis of the sequences revealed in 15 samples a similarity to Cryptosporidium andersoni, in one sample a resemblance with Cryptosporidium bovis, and in one sample 100% of identity with Cryptosporidium parvum, being this species detected in the person considered infected. From the results obtained in this study, it can be inferred that, as spatial distribution, in one of the settlements, there was a higher occurrence of Cryptosporidium infection in calves, and in this location a positive human for this parasite was detected. Additionally, in animals up to two months was isolated C. parvum and above this age range, C. bovis and C. andersoni. Complementarily, the aqueous consistency of stools was associated with seropositivity to this parasitic gender / Mestre
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Ocorrência e caracterização molecular de Cryptosporidium spp. em caprinos jovens do município de Quixadá-Ceará /

Brito, Roberta Lomonte Lemos de. January 2014 (has links)
Orientador: Katia Denise Saraiva Bresciani / Coorientador: Luiz da Silva Vieira / Coorientador: Marcelo Vasconcelos Meireles / Banca: Márcia Benedita de Oliveira Silva / Banca: Jancarlo Ferreira Gomes / Banca: Luis Antonio Mathias / Banca: Gilson Helio Toniollo / Resumo: O presente estudo teve como objetivo avaliar a ocorrência da infecção e realizar a caracterização molecular de Cryptosporidium spp. em caprinos jovens do município de Quixadá, Ceará, Brasil. Participaram do estudo um total de 400 animais, com idade entre três e 360 dias, com e sem padrão racial definido, nos quais 154 eram machos e 246 fêmeas, procedentes de 25 estabelecimentos rurais distribuídos em três circuitos. Amostras de fezes foram obtidas diretamente da ampola retal dos cabritos e cadastradas de acordo com o aspecto e a coloração. Uma quantidade de 200 mg de cada amostra foi distribuída em microtubos de 2 mL e congeladas "in natura" a -20 °C, até o momento das extrações de DNA genômico do parasito com auxílio de kit comercial. Todas as amostras foram submetidas a "Nested"-PCR para amplificação de fragmentos do gene da subunidade 18S RNA ribossômico. As positivas nesta amplificação foram testadas na "Nested"-PCR com os genes actina e HSP 70. As amostras que tiveram amplificação nesses três genes foram submetidas a "Nested"-PCR em triplicata e posterior sequenciamento nas direções "sense" e "anti-sense". A ocorrência da infecção por Cryptosporidium spp. em cabritos de Quixadá foi de 7,50% (30/400) e 64,00% (16/25) das propriedades tinham cabritos positivos. O distrito Tapuiará foi o que apresentou maior número de animais positivos, e a frequência no período seco e chuvoso foi de 9,55% (19/199) e 5,47% (11/201), respectivamente (P = 0,1218). Das 30 amostras de fezes positivas, 50,00% (15/30) tinham aspecto normal e 70,00% (21/30) coloração normal, sugerindo que cabritos assintomáticos eliminam oocistos no ambiente. Não foi observada positividade para Cryptosporidium spp. em animais com 301 a 360 dias. Por meio do sequenciamento foi possível identificar que as espécies do coccídio detectadas nas fezes dos cabritos foram Cryptosporidium xiaoi ... / Abstract: The present study aimed to evaluate the occurrence of infection and perform molecular characterization of Cryptosporidium spp. in goats kids from the town of Quixadá - state of Ceará - Brazil. A total of 400 animals, 154 males and 246 females, with aged between three and 360 days, with and without defined breed, from 25 farms distributed in three circuits, participated in this study. Stool samples were obtained directly from the goats rectum and registered in accordance to their appearance and coloring. An amount of 200 mg of each sample, were distributed in micro tubes of 2 mL and frozen "in nature" at -20 °C until the moment of extraction of the parasite genomic DNA using a commercial kit. All samples were submitted to Nested-PCR to amplify fragments of 18S subunit of ribosomal RNA. The positives samples in this amplification were tested in Nested-PCR with actin and HSP 70 genes. Samples that were amplified in these three genes were subjected to Nested-PCR triplicate and subjected to sequencing in sense and anti-sense directions. The occurrence of the infection by Cryptosporidium in goats kids of the town of Quixadá was 7.50% (30/400) and 64.00% (16/25) of the farms with positive goats. The Tapuiará district showed the highest number of positive animals and the frequency in dry and rainy period was 9.55% (19/199) and 5.47% (11/201), respectively (P = 0.1218). Considering 30 samples of positive stools, 50.00% (15/30) had normal appearance and 70.00% (21/30) normal coloring, suggesting that asymptomatic goats can eliminate oocysts in the environment. It was not observed positivity for Cryptosporidium spp. in animals aged between 301 and 360 days. Through sequencing, it was possible to identify that the species of coccidian found in the feces of the goats are Cryptosporidium xiaoi, Cryptosporidium ubiquitum and Cryptosporidium meleagridis. Different species of protozoa are present in rural farms ... / Doutor
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Towards the development of pro and prebiotics against cryptosporidiosis /

Oliveira, Bruno César Miranda. January 2019 (has links)
Orientador: Katia Denise Saraiva Bresciani / Resumo: A criptosporidiose, uma das principais causas de diarreia infantil, é causada por parasitos do Filo Apicomplexa pertencentes ao gênero Cryptosporidium. A falta de medicamentos eficazes está motivando pesquisas para desenvolver tratamentos alternativos. Para este objetivo, o impacto dos probióticos no curso da criptosporidiose foi investigado. A microbiota intestinal nativa de camundongos imunossuprimidos livres de patógenos específicos foi inicialmente esgotada com antibióticos administrados por via oral. Um produto probiótico comercialmente disponível destinado ao consumo humano foi subsequentemente adicionado à água potável. Os camundongos foram infectados com oocistos de Cryptosporidium parvum. Em média, os camundongos tratados com probiótico desenvolveram uma infecção mais grave. Os probióticos alteraram significativamente a microbiota fecal, mas não foi observada associação direta entre a ingestão de bactérias probióticas e sua abundância na microbiota fecal. Esses resultados sugerem que os probióticos alteram indiretamente o microambiente intestinal ou o epitélio intestinal de maneira a favorecer a proliferação de C. parvum. / Abstract: Cryptosporidiosis, a leading cause of infant diarrhea, is caused by apicomplexan parasites classified in the genus Cryptosporidium. The lack of effective drugs is motivating research to develop alternative treatments. To this aim, the impact of probiotics on the course of cryptosporidiosis was investigated. The native intestinal microbiota of specific pathogen-free immunosuppressed mice was initially depleted with orally administered antibiotics. A commercially available probiotic product intended for human consumption was subsequently added to the drinking water. Mice were infected with Cryptosporidium parvum oocysts. On average, mice treated with probiotic developed a more severe infection. The probiotics significantly altered the fecal microbiota, but no direct association between ingestion of probiotic bacteria and their abundance in fecal microbiota was observed. These results suggest that probiotics indirectly altered the intestinal microenvironment or the intestinal epithelium in a way that favors proliferation of C. parvum. / Doutor

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