A mucopolissacaridose tipo VI (MPS VI) ou Síndrome de Maroteaux-Lamy, é uma doença autossômica recessiva causada pela deficiência da enzima lisossomal Nacetilgalactosamina- 4-sulfatase (ARSB), a qual resulta no armazenamento lisossômico de dermatan sufato em vários tecidos e órgãos, dando origem a uma condição clínica de espectro variável, desde formas mais graves até formas mais atenuadas. O acúmulo de substrato não degradado causa um importante comprometimento ósseo, problemas respiratórios, baixa estatura e outros problemas, afetando os olhos, o coração e outros órgãos. Embora a síndrome de Maroteaux-Lamy não tenha uma incidência definida no Brasil, é reconhecido que, no nosso meio, é muito mais freqüente do que em outros países e regiões. Ela é particularmente freqüente no município de Monte Santo (Bahia), de aproximadamente 50.000 habitantes e onde já foram registrados 13 casos da doença. O diagnóstico é importante porque existe hoje um tratamento específico para a doença, a terapia de reposição enzimática (TRE), que vem mostrando bons resultados, especialmente quando iniciada em idade precoce. Descrevemos neste trabalho uma adaptação para microplacas da medida fluorimétrica da atividade de ARSB, e uma nova metodologia de análise molecular, ambas padronizados para sangue total impregnado em papel-filtro (STIPF). Essas técnicas foram desenvolvidas para incluir um teste de triagem neonatal para MPS VI, realizado nas amostras coletadas para o “teste do pezinho” nos neonatos do município de Monte Santo. Esses métodos permitem a detecção de pacientes com MPS VI e dos portadores da mutação específica que parece ser responsável pela alta incidência de MPS VI nessa localidade, uma vez que todos os pacientes lá diagnosticados apresentavam a mesma mutação (p.H178L) em homozigose. O trabalho foi desenvolvido em três etapas: na primeira foi realizada a padronização das técnicas em 100 amostras de STIPF; na segunda foi feito um teste-piloto com amostras de neonatos de Monte Santo, para avaliação das técnicas padronizadas e para o estudo de termoestabilidade em controles hígidos; na terceira foram analisadas amostras de STIPF de neonatos provenientes de Monte Santo pelos dois métodos (bioquímico e molecular). A padronização para realização da medida fluorimétrica da atividade enzimática de ARSB em microplacas indicou que o método é sensível, permitiu diferenciar os valores da população normal dos valores dos pacientes afetados e possibilitou a identificação segura de pacientes com MPS VI. Nas padronizações da análise molecular da mutação p.H178L em STIPF foi possível diferenciar os indivíduos normais, heterozigotos e homozigotos. Os resultados preliminares disponíveis indicam que o protocolo de triagem neonatal para MPS VI desenvolvido no presente trabalho poderá ser facilmente incorporado por laboratórios de referência, contribuindo para a detecção e tratamento precoce dos pacientes afetados por MPS VI. / Mucopolysaccharidosis type VI (MPS VI) or Maroteux-Lamy syndrome, is an autosomal recessive disorder caused by deficiency of the lysosomal enzyme Nacetylgalactosamine- 4-sulfatase (ARSB), which results in lysosomal storage of dermatan sufate in various tissues and organs and leads to a variable clinical spectrum, including more severe and attenuated forms. The accumulation of undegraded substrate causes bone involvement, respiratory problems and short stature, among other signs and symptoms, affecting the eyes, heart and other organs. Although the Maroteaux-Lamy syndrome does not have a defined incidence in Brazil, it is recognized that in our environment it is much more frequent than in other countries and regions. It is particularly frequent in the municipality of Monte Santo (Bahia) approximately 50,000 inhabitants and where there have already been 13 cases of the disease. The diagnosis is important because today there is a specific treatment for the disease, enzyme replacement therapy (ERT) which has shown good results, especially when started at an early age. We describe herein the standardization of the microplate fluorometric method for the ARSB test and a new methodology of molecular analysis, both adapted for dried blood spots (DBS) samples. These techniques were developed for inclusion of MPS VI in the newborn screening program that already tests the neonates of the city of Monte Santo, Bahia, Brasil for metabolic diseases. The methods were developed to detect patients with MPS VI and also for carriers, once the disease seems to have a high incidence (around 1:5.000) at this location. Also, all patients that have already been diagnosed in this city presented the same mutation (p.H178L) in homozygosis. The study was conducted in three stages: in the first was performed in 100 DBS samples an standardization of the techniques; in the second was done a pilot test with samples of newborns of Monte Santo, for the evaluation of standardized techniques and for the thermostability study in healthy controls; in the third were analyzed newborns samples from Monte Santo for both biochemical and molecular methods. Standardization on microplate for fluorimetric enzyme activity of the ARSB showed the assay sensitivity, differentiating values between normal and affected and allowing a reliable detection of patients with MPS VI. On the standardization for molecular analysis in DBS it was possible to differentiate the results for normal individuals, heterozygous and affected for the mutation p.H178L. The preliminary results available indicate that the protocol of neonatal screening for MPS VI developed in this work can be easily incorporated by reference laboratories, contributing to the detection and premature treatment of MPS VI affected patients.

Submitted by JULIANA ROSA LUIZ ALONSO null (ju29alonso@hotmail.com) on 2016-05-02T19:21:59Z No. of bitstreams: 1 Versão Final_Dissertação_Juliana Alonso.pdf: 3284684 bytes, checksum: 5cf89df8ddd554ca35ba036626ed5bdb (MD5) / Approved for entry into archive by Felipe Augusto Arakaki (arakaki@reitoria.unesp.br) on 2016-05-04T18:51:25Z (GMT) No. of bitstreams: 1 alonso_jrl_me_arafo.pdf: 3284684 bytes, checksum: 5cf89df8ddd554ca35ba036626ed5bdb (MD5) / Made available in DSpace on 2016-05-04T18:51:25Z (GMT). No. of bitstreams: 1 alonso_jrl_me_arafo.pdf: 3284684 bytes, checksum: 5cf89df8ddd554ca35ba036626ed5bdb (MD5) Previous issue date: 2016-04-06 / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP) / A estabilidade da união resina-dentina pode ser melhorada pelo uso de agentes promotores de ligações cruzadas (cross-linkers). Todavia, existe pouca informação quanto ao desempenho desses agentes em dentina radicular. Portanto, o objetivo do presente estudo foi avaliar o efeito de três cross-linkers na atividade proteolítica e na resistência da união cimento resinoso-dentina radicular. Raízes unirradiculares foram obtidas de pré-molares humanos (n=48). Após tratamento endodôntico, essas raízes foram distribuídas em 4 grupos (n=12): água deionizada (controle), carbodiimida (EDC) 0,5 mol/L, proantocianidina (PA) 5% ou glutaraldeído (GD) 5%. Decorridas 24h do tratamento com esses agentes e da cimentação de pinos de fibra de vidro com cimento resinoso, as raízes foram seccionadas transversalmente para a obtenção de espécimes com 1 mm de espessura, das regiões cervical, média e apical. Nove raízes por grupo foram utilizadas para o ensaio mecânico de extrusão e três para determinação da atividade proteolítica dentinária, por meio de zimografia in situ. Os dados de resistência de união (RU) foram submetidos aos testes de ANOVA e Tukey e a existência de associação entre o tipo de fratura e as variáveis independentes do estudo foi determinada pelo teste de qui-quadrado (2) (=0,05). Nenhum dos cross-linkers afetou a RU imediata. GD aumentou esses valores significativamente em comparação à PA, mas não ao controle. Houve redução significante da RU do terço cervical para o apical, exceto para o grupo PA. Aumento na porcentagem de fraturas adesivas entre o pino de fibra de vidro e o cimento resinoso foi observado para os grupos EDC e GD, em relação ao grupo controle, enquanto, para PA, houve aumento de fraturas adesivas entre o cimento resinoso e a dentina. Foi observada grande atividade gelatinolítica no grupo controle, a qual foi reduzida por todos os cross-linkers . Em conclusão, além de não interferirem negativamente na RU imediata, os cross-linkers reduziram a atividade proteolítica na camada híbrida da união cimento resinoso-dentina radicular. / The resin-dentin bond stability can be improved by the use of cross-linkers. However, only scarce information is available as to the performance of these agents on root dentin. Therefore, the aim of this study was to evaluate the effect of three cross-linkers on the proteolytic activity of root dentin and on the bond strength of resin-based cement-root dentin interfaces. Single canal roots were obtained from human premolars (n=48). After endodontic treatment, they were randomly divided into four groups: deionized water (control), 0.5 mol/L carbodiimide (EDC), 5% proanthocyanidin (PA) or 5% glutaraldehyde (GD). After 24h from dentin treatment with the cross-linkers and the cementation of a fiber post with a resin-based cement, the roots were transversally sectioned to obtain 1 mm-thick specimens, from the cervical, mid and apical areas. Nine roots per group were used for the push-out test and three for determining the proteolytic activity of the root dentin by in situ zymography. Bond strength data were submitted to ANOVA and Tukey tests and the existence of an association between the type of fracture and the independent variables of the study was determined by chi-square test (=0.05). None of the cross-linkers affected the bond strength. GD increased bond strength compared to PA, but both were similar to the control. Significant reduction in bond strength was observed between the cervical and the apical root thirds. Increase in the percentage of adhesive fractures between the glass fiber post and resin cement was observed for EDC and GD groups, in comparison with the control group, while for PA, an increase of adhesive fractures between the resin cement and dentin was observed. Intense gelatinolytic activity was seen in the control group which was remarkably reduced in the cross-linker-treated groups. In conclusion, besides not interfering with bond strength, the cross-linkers reduced the proteolytic activity in the hybrid layers of the resin cement-root dentin bond. / FAPESP: 2014/10183-8

Orientador: Josimeri Hebling / Resumo: A estabilidade da união resina-dentina pode ser melhorada pelo uso de agentes promotores de ligações cruzadas (cross-linkers). Todavia, existe pouca informação quanto ao desempenho desses agentes em dentina radicular. Portanto, o objetivo do presente estudo foi avaliar o efeito de três cross-linkers na atividade proteolítica e na resistência da união cimento resinoso-dentina radicular. Raízes unirradiculares foram obtidas de pré-molares humanos (n=48). Após tratamento endodôntico, essas raízes foram distribuídas em 4 grupos (n=12): água deionizada (controle), carbodiimida (EDC) 0,5 mol/L, proantocianidina (PA) 5% ou glutaraldeído (GD) 5%. Decorridas 24h do tratamento com esses agentes e da cimentação de pinos de fibra de vidro com cimento resinoso, as raízes foram seccionadas transversalmente para a obtenção de espécimes com 1 mm de espessura, das regiões cervical, média e apical. Nove raízes por grupo foram utilizadas para o ensaio mecânico de extrusão e três para determinação da atividade proteolítica dentinária, por meio de zimografia in situ. Os dados de resistência de união (RU) foram submetidos aos testes de ANOVA e Tukey e a existência de associação entre o tipo de fratura e as variáveis independentes do estudo foi determinada pelo teste de qui-quadrado (2) (=0,05). Nenhum dos cross-linkers afetou a RU imediata. GD aumentou esses valores significativamente em comparação à PA, mas não ao controle. Houve redução significante da RU do terço cervical para o apical, excet... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: The resin-dentin bond stability can be improved by the use of cross-linkers. However, only scarce information is available as to the performance of these agents on root dentin. Therefore, the aim of this study was to evaluate the effect of three cross-linkers on the proteolytic activity of root dentin and on the bond strength of resin-based cement-root dentin interfaces. Single canal roots were obtained from human premolars (n=48). After endodontic treatment, they were randomly divided into four groups: deionized water (control), 0.5 mol/L carbodiimide (EDC), 5% proanthocyanidin (PA) or 5% glutaraldehyde (GD). After 24h from dentin treatment with the cross-linkers and the cementation of a fiber post with a resin-based cement, the roots were transversally sectioned to obtain 1 mm-thick specimens, from the cervical, mid and apical areas. Nine roots per group were used for the push-out test and three for determining the proteolytic activity of the root dentin by in situ zymography. Bond strength data were submitted to ANOVA and Tukey tests and the existence of an association between the type of fracture and the independent variables of the study was determined by chi-square test (=0.05). None of the cross-linkers affected the bond strength. GD increased bond strength compared to PA, but both were similar to the control. Significant reduction in bond strength was observed between the cervical and the apical root thirds. Increase in the percentage of adhesive fractures between th... (Complete abstract click electronic access below) / Mestre

A mucopolissacaridose tipo VI (MPS VI) ou Síndrome de Maroteaux-Lamy, é uma doença autossômica recessiva causada pela deficiência da enzima lisossomal Nacetilgalactosamina- 4-sulfatase (ARSB), a qual resulta no armazenamento lisossômico de dermatan sufato em vários tecidos e órgãos, dando origem a uma condição clínica de espectro variável, desde formas mais graves até formas mais atenuadas. O acúmulo de substrato não degradado causa um importante comprometimento ósseo, problemas respiratórios, baixa estatura e outros problemas, afetando os olhos, o coração e outros órgãos. Embora a síndrome de Maroteaux-Lamy não tenha uma incidência definida no Brasil, é reconhecido que, no nosso meio, é muito mais freqüente do que em outros países e regiões. Ela é particularmente freqüente no município de Monte Santo (Bahia), de aproximadamente 50.000 habitantes e onde já foram registrados 13 casos da doença. O diagnóstico é importante porque existe hoje um tratamento específico para a doença, a terapia de reposição enzimática (TRE), que vem mostrando bons resultados, especialmente quando iniciada em idade precoce. Descrevemos neste trabalho uma adaptação para microplacas da medida fluorimétrica da atividade de ARSB, e uma nova metodologia de análise molecular, ambas padronizados para sangue total impregnado em papel-filtro (STIPF). Essas técnicas foram desenvolvidas para incluir um teste de triagem neonatal para MPS VI, realizado nas amostras coletadas para o “teste do pezinho” nos neonatos do município de Monte Santo. Esses métodos permitem a detecção de pacientes com MPS VI e dos portadores da mutação específica que parece ser responsável pela alta incidência de MPS VI nessa localidade, uma vez que todos os pacientes lá diagnosticados apresentavam a mesma mutação (p.H178L) em homozigose. O trabalho foi desenvolvido em três etapas: na primeira foi realizada a padronização das técnicas em 100 amostras de STIPF; na segunda foi feito um teste-piloto com amostras de neonatos de Monte Santo, para avaliação das técnicas padronizadas e para o estudo de termoestabilidade em controles hígidos; na terceira foram analisadas amostras de STIPF de neonatos provenientes de Monte Santo pelos dois métodos (bioquímico e molecular). A padronização para realização da medida fluorimétrica da atividade enzimática de ARSB em microplacas indicou que o método é sensível, permitiu diferenciar os valores da população normal dos valores dos pacientes afetados e possibilitou a identificação segura de pacientes com MPS VI. Nas padronizações da análise molecular da mutação p.H178L em STIPF foi possível diferenciar os indivíduos normais, heterozigotos e homozigotos. Os resultados preliminares disponíveis indicam que o protocolo de triagem neonatal para MPS VI desenvolvido no presente trabalho poderá ser facilmente incorporado por laboratórios de referência, contribuindo para a detecção e tratamento precoce dos pacientes afetados por MPS VI. / Mucopolysaccharidosis type VI (MPS VI) or Maroteux-Lamy syndrome, is an autosomal recessive disorder caused by deficiency of the lysosomal enzyme Nacetylgalactosamine- 4-sulfatase (ARSB), which results in lysosomal storage of dermatan sufate in various tissues and organs and leads to a variable clinical spectrum, including more severe and attenuated forms. The accumulation of undegraded substrate causes bone involvement, respiratory problems and short stature, among other signs and symptoms, affecting the eyes, heart and other organs. Although the Maroteaux-Lamy syndrome does not have a defined incidence in Brazil, it is recognized that in our environment it is much more frequent than in other countries and regions. It is particularly frequent in the municipality of Monte Santo (Bahia) approximately 50,000 inhabitants and where there have already been 13 cases of the disease. The diagnosis is important because today there is a specific treatment for the disease, enzyme replacement therapy (ERT) which has shown good results, especially when started at an early age. We describe herein the standardization of the microplate fluorometric method for the ARSB test and a new methodology of molecular analysis, both adapted for dried blood spots (DBS) samples. These techniques were developed for inclusion of MPS VI in the newborn screening program that already tests the neonates of the city of Monte Santo, Bahia, Brasil for metabolic diseases. The methods were developed to detect patients with MPS VI and also for carriers, once the disease seems to have a high incidence (around 1:5.000) at this location. Also, all patients that have already been diagnosed in this city presented the same mutation (p.H178L) in homozygosis. The study was conducted in three stages: in the first was performed in 100 DBS samples an standardization of the techniques; in the second was done a pilot test with samples of newborns of Monte Santo, for the evaluation of standardized techniques and for the thermostability study in healthy controls; in the third were analyzed newborns samples from Monte Santo for both biochemical and molecular methods. Standardization on microplate for fluorimetric enzyme activity of the ARSB showed the assay sensitivity, differentiating values between normal and affected and allowing a reliable detection of patients with MPS VI. On the standardization for molecular analysis in DBS it was possible to differentiate the results for normal individuals, heterozygous and affected for the mutation p.H178L. The preliminary results available indicate that the protocol of neonatal screening for MPS VI developed in this work can be easily incorporated by reference laboratories, contributing to the detection and premature treatment of MPS VI affected patients.

Submitted by Luciana Ferreira (lucgeral@gmail.com) on 2018-05-07T13:39:49Z No. of bitstreams: 2 Dissertação - Thiago Damasceno Pinto Milhomem - 2018.pdf: 14290151 bytes, checksum: 86ef286d465a454e620f90c2592bfcb4 (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) / Approved for entry into archive by Luciana Ferreira (lucgeral@gmail.com) on 2018-05-07T14:00:10Z (GMT) No. of bitstreams: 2 Dissertação - Thiago Damasceno Pinto Milhomem - 2018.pdf: 14290151 bytes, checksum: 86ef286d465a454e620f90c2592bfcb4 (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) / Made available in DSpace on 2018-05-07T14:00:10Z (GMT). No. of bitstreams: 2 Dissertação - Thiago Damasceno Pinto Milhomem - 2018.pdf: 14290151 bytes, checksum: 86ef286d465a454e620f90c2592bfcb4 (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Previous issue date: 2018-02-27 / Pilgrimage to the holy city of Mecca (ḥajj) has been one of the pillars of Islam since the seventh century, the time of the advent of the religion in the Arabian Peninsula, as an ordering in the Holy Qur'an and in the sayings and deeds of Prophet Muḥammad. Being this pilgrimage mandatory for all faithful adults in good enough physical and material conditions, different personalities of the Islamic world have realized the sacred journey in different times. Many have left their written testimonies, as a legacy of their observations and impressions on societies and historical events of Islamic and non-Islamic domains, thus influencing the emergence of a specific literary genre of Arab-Islamic culture, the travel journal (rihla). One of the pioneers of this genre was Ibn Jubayr (1145-1217), a Muslim from the city of Valencia, writer of a journal of his travels to the region that today corresponds to the Middle East, between 1183 and 1185, a period between the Second and the Third Crusade. We use Ibn Jubayr's travel journal edited as “Through the East (Rihla)”, a version published by Alianza Literaria in 2007, and which consists of a translation from Arabic into Spanish by Felipe Maíllo Salgado. From this testimony, centered on the religious journey of the writer-traveler to Mecca, we analyze the possibilities and social conditions of ḥajj at the end of the twelfth century, in the context of the Crusades, a long-lasting historical phenomenon permeated by important religious, political, economic, military and cultural aspects / A peregrinação à cidade santa de Meca (ḥajj) é um dos pilares do Islã desde o século VII, época do advento da religião na Península Arábica, configurando como uma ordenação no Alcorão Sagrado e nos ditos e feitos do Profeta Muḥammad. Sendo essa peregrinação obrigatória para todo fiel adulto e são e em condições físicas e materiais para tal, diferentes personalidades do mundo islâmico realizaram a jornada sagrada em diversas épocas. Muitos deixaram seus testemunhos por escrito, legando à posteridade suas observações e impressões sobre sociedades e eventos históricos de domínios islâmicos e não islâmicos, influenciando assim no surgimento de um gênero literário específico da cultura árabe-islâmica, o relato de viagem (rihla). Um dos pioneiros do gênero foi Ibn Jubayr (1145-1217), muçulmano natural da cidade de Valência, escritor de um relato referente às suas viagens à região que hoje corresponde ao Oriente Médio, entre 1183 e 1185, período situado entre a Segunda e a Terceira Cruzada. Utilizamos o relato de viagens de Ibn Jubayr editado como A través del Oriente (Rihla), versão publicada pela editora Alianza Literaria em 2007 e que consiste em uma tradução do árabe para o espanhol feita por Felipe Maíllo Salgado. A partir desse testemunho, centrado no périplo religioso do viajante-escritor a Meca, analisaremos as possibilidades e condições sociais de realização do ḥajj em fins do século XII, contexto de Cruzadas, fenômeno histórico de longa duração permeado por importantes aspectos religiosos, políticos, econômicos, militares e culturais.

A mucopolissacaridose tipo VI (MPS VI) ou Síndrome de Maroteaux-Lamy, é uma doença autossômica recessiva causada pela deficiência da enzima lisossomal Nacetilgalactosamina- 4-sulfatase (ARSB), a qual resulta no armazenamento lisossômico de dermatan sufato em vários tecidos e órgãos, dando origem a uma condição clínica de espectro variável, desde formas mais graves até formas mais atenuadas. O acúmulo de substrato não degradado causa um importante comprometimento ósseo, problemas respiratórios, baixa estatura e outros problemas, afetando os olhos, o coração e outros órgãos. Embora a síndrome de Maroteaux-Lamy não tenha uma incidência definida no Brasil, é reconhecido que, no nosso meio, é muito mais freqüente do que em outros países e regiões. Ela é particularmente freqüente no município de Monte Santo (Bahia), de aproximadamente 50.000 habitantes e onde já foram registrados 13 casos da doença. O diagnóstico é importante porque existe hoje um tratamento específico para a doença, a terapia de reposição enzimática (TRE), que vem mostrando bons resultados, especialmente quando iniciada em idade precoce. Descrevemos neste trabalho uma adaptação para microplacas da medida fluorimétrica da atividade de ARSB, e uma nova metodologia de análise molecular, ambas padronizados para sangue total impregnado em papel-filtro (STIPF). Essas técnicas foram desenvolvidas para incluir um teste de triagem neonatal para MPS VI, realizado nas amostras coletadas para o “teste do pezinho” nos neonatos do município de Monte Santo. Esses métodos permitem a detecção de pacientes com MPS VI e dos portadores da mutação específica que parece ser responsável pela alta incidência de MPS VI nessa localidade, uma vez que todos os pacientes lá diagnosticados apresentavam a mesma mutação (p.H178L) em homozigose. O trabalho foi desenvolvido em três etapas: na primeira foi realizada a padronização das técnicas em 100 amostras de STIPF; na segunda foi feito um teste-piloto com amostras de neonatos de Monte Santo, para avaliação das técnicas padronizadas e para o estudo de termoestabilidade em controles hígidos; na terceira foram analisadas amostras de STIPF de neonatos provenientes de Monte Santo pelos dois métodos (bioquímico e molecular). A padronização para realização da medida fluorimétrica da atividade enzimática de ARSB em microplacas indicou que o método é sensível, permitiu diferenciar os valores da população normal dos valores dos pacientes afetados e possibilitou a identificação segura de pacientes com MPS VI. Nas padronizações da análise molecular da mutação p.H178L em STIPF foi possível diferenciar os indivíduos normais, heterozigotos e homozigotos. Os resultados preliminares disponíveis indicam que o protocolo de triagem neonatal para MPS VI desenvolvido no presente trabalho poderá ser facilmente incorporado por laboratórios de referência, contribuindo para a detecção e tratamento precoce dos pacientes afetados por MPS VI. / Mucopolysaccharidosis type VI (MPS VI) or Maroteux-Lamy syndrome, is an autosomal recessive disorder caused by deficiency of the lysosomal enzyme Nacetylgalactosamine- 4-sulfatase (ARSB), which results in lysosomal storage of dermatan sufate in various tissues and organs and leads to a variable clinical spectrum, including more severe and attenuated forms. The accumulation of undegraded substrate causes bone involvement, respiratory problems and short stature, among other signs and symptoms, affecting the eyes, heart and other organs. Although the Maroteaux-Lamy syndrome does not have a defined incidence in Brazil, it is recognized that in our environment it is much more frequent than in other countries and regions. It is particularly frequent in the municipality of Monte Santo (Bahia) approximately 50,000 inhabitants and where there have already been 13 cases of the disease. The diagnosis is important because today there is a specific treatment for the disease, enzyme replacement therapy (ERT) which has shown good results, especially when started at an early age. We describe herein the standardization of the microplate fluorometric method for the ARSB test and a new methodology of molecular analysis, both adapted for dried blood spots (DBS) samples. These techniques were developed for inclusion of MPS VI in the newborn screening program that already tests the neonates of the city of Monte Santo, Bahia, Brasil for metabolic diseases. The methods were developed to detect patients with MPS VI and also for carriers, once the disease seems to have a high incidence (around 1:5.000) at this location. Also, all patients that have already been diagnosed in this city presented the same mutation (p.H178L) in homozygosis. The study was conducted in three stages: in the first was performed in 100 DBS samples an standardization of the techniques; in the second was done a pilot test with samples of newborns of Monte Santo, for the evaluation of standardized techniques and for the thermostability study in healthy controls; in the third were analyzed newborns samples from Monte Santo for both biochemical and molecular methods. Standardization on microplate for fluorimetric enzyme activity of the ARSB showed the assay sensitivity, differentiating values between normal and affected and allowing a reliable detection of patients with MPS VI. On the standardization for molecular analysis in DBS it was possible to differentiate the results for normal individuals, heterozygous and affected for the mutation p.H178L. The preliminary results available indicate that the protocol of neonatal screening for MPS VI developed in this work can be easily incorporated by reference laboratories, contributing to the detection and premature treatment of MPS VI affected patients.

O crescimento dos países em desenvolvimento aumentará em várias vezes o consumo de energia, materiais e alimentos. Para suprir essa demanda é necessário o aproveitamento racional dos resíduos gerados por processos industriais, agrícolas e lixo urbano, transformando-os em energia economicamente competitiva com as outras formas de energia, e em materiais com propriedades otimizadas. O objetivo do presente trabalho foi comparar o comportamento da sílica da casca de arroz obtida por pré-hidrólise ácida seguida de calcinação controlada (Sil-PH) com sílicas de casca de arroz comerciais obtidas simplesmente pela queima da casca (Sil-B e Sil-C) e com a sílica comercial obtida da areia quartzítica (Sil-Z), como carga de reforço em borracha de estireno-butadieno (SBR), que é a mais usada na indústria de fabricação de pneus. Estudos foram conduzidos em SBR 1502, preparados conforme norma ASTM 3191-2010. Foram adicionadas à borracha as sílicas em concentrações de 0, 10, 20 e 40 ppcb. Foram conduzidos testes físicos, químicos, mecânicos, reométricos, dinâmico-mecânicos e análise térmica, bem como ensaios de inchamento dos corpos de prova em toluol e análise microestrutural das sílicas e dos compostos por microscopia eletrônica de varredura, com o objetivo de determinar a natureza do reforço. O número de ligações cruzadas foi avaliado e a energia de formação dessas ligações foi calculada. A relação entre as metodologias de cálculo da densidade de ligações cruzadas foi também avaliada, obtendo a caracterização desse tipo de carga de reforço não somente por correlações mecânicas mas também pela energia de formação das ligações. Os resultados mostraram que quanto maior a adição de sílica, maior é sua interação com a borracha. Dentre as sílicas adicionadas, Sil-Z alcançou os maiores valores de propriedades mecânicas dos compostos, e Sil-PH mostrou os melhores resultados dentre as sílicas de casca de arroz. Por avaliação por inchamento em toluol (teste estático) e por testes de tração e testes dinâmicos foi possível afirmar que as densidades de ligações cruzadas estão correlacionadas, Usando os resultados de reometria e as equações de Arrhenius estimou-se uma energia média de ligação, concluindo que esta corresponde a uma ligação do tipo covalente. Pelos valores de tan ? confirmou-se que os compostos com Sil-PH têm maior aderência no chão molhado do que aqueles com Sil-Z. A sílica nos compostos tende a diminuir a temperatura de transição vítrea. Os resultados da análise térmica mostraram elevada estabilidade térmica dos compostos com Sil-PH e Sil-Z. A falta de cominuição adequada da Sil-PH ocasionou uma dispersão irregular da sílica na SBR, uma molhabilidade parcial da sílica pela borracha e pelo agente de acoplamento, com consequente aparecimento de falhas na estrutura do composto. Por esse motivo as propriedades mecânicas dos compostos com Sil-PH foram inferiores às dos compostos com Sil-Z. / Developing countries are increasing by several times their consumption of energy, materials, and food. To attend their demand it is necessary to rationally reuse industrial, agricultural, and municipal solid waste residues, transforming them into economically competitive energy and materials with optimized properties. The objective of this work was to compare the behavior of a rice husk silica obtained by acidic prehydrolysis and controlled calcination (Sil-PH) with commercial amorphous silicas obtained from quartzite sand (Sil-Z) and from simply burned rice husks (Sil-B and Sil-C), as reinforcing filler in styrene-butadiene rubber (SBR) composites, which is the most used rubber in the tire manufacture industry. Studies were conducted on SBR 1502 rubber according to ASTM 3191-2010 in which amorphous silicas obtained from rice husk and quartzite silica were added at concentrations of 0, 10, 20, and 40 phr. Physical, chemical, mechanical, rheometric, dynamic-mechanical tests, thermal analysis, swelling studies in toluol and scanning electron microscopy of the silicas and composite specimens were made with objective to determine the nature of reinforcement. The number of crosslinks was evaluated and the energy of formation of these bonds calculated. The correlation between the methodologies of calculation of crosslink density was also evaluated, getting the characterization of this type of reinforcing filler not only by mechanical correlations but also by the energy of their formation. The results showed that the higher the content of added silica, the greater the interaction with rubber. According to the mechanical properties values Sil-Z achieved the highest properties values but Sil-PH showed better results compared to the other types of rice husk silicas. By evaluation by swelling in toluene (static), tensile tests and dynamic tests it was possible to affirm that the crosslink densities are correlated. By using the rheometry results and the Arrhenius equations the average bound was estimated to be of a covalent type. The silica in the compounds tends to lower the values of the glass transition temperature. The evaluation of tan ? showed that Sil-PH has more stickiness on the wet floor, which is an important property to tire application. Due to the lack of appropriate grinding of the Sil-PH the dispersion of the silica on SBR was irregular; partial wetting of the silica particles by rubber and silane had also occurred. Those facts had caused failures on the compound structural integrity, with a consequent lowering of the mechanical property values as compared to the compounds with Sil-Z addition.

O rebanho brasileiro de bovinos leiteiros é composto predominantemente por vacas mestiças criadas em condições tropicais. Os principais modelos usados no Brasil para a formulação e avaliação de dietas são norte-americanos e baseados nas exigências de vacas Holandesas em clima temperado. A principal contribuição do primeiro capítulo deste estudo foi o desenvolvimento e avaliação de um novo modelo para estimar a ingestão de matéria seca (IMS) de vacas mestiças. A nova equação de predição da IMS foi desenvolvida e avaliada usando um banco de dados com 161 médias de tratamentos provenientes de 38 estudos brasileiros publicados com vacas mestiças [n = 446 vacas, 16,60 ± 5,70 (DP) kg leite/dia]. O modelo proposto foi: IMS (kg/dia): [0,5552 (± 0,06636 EP) × LC4%G + 0,06332 (± 0,009455) × PV0,75] × [1 - e (- 0,7732 (± 0,7019) × (SEM - 1,629 (± 1,9313))) ]. O novo modelo apresentou maior acurácia (QMEP = 1,64, r2 = 0,88) na predição da IMS quando comparado com modelos norte-americanos. O novo modelo de predição da IMS pode ser aplicado na formulação de dietas para vacas leiteiras mestiças em condições tropicais. No capítulo 2, um estudo avaliou as novas atualizações das exigências nutricionais de bezerras leiteiras sugeridas por Van Amburgh e Drackley (2005) e inseridas em programa comercial (AMTS, Agricultural Modeling and Training Systems, AMTS.Cattle.ProTM Calf Model versão 3.5.8.0, 2015). Dados de 16 estudos brasileiros envolvendo 51 dietas para bezerros leiteiros (n = 485, peso ao desmane de 62,02 ± 10,16 kg) foram usados para avaliar os modelos do NRC (2001) e o AMTS. Nas condições do conjunto de dados do presente estudo, ambos os sistemas superestimaram o ganho calculado a partir da proteína disponível. O ganho de peso estimado pela energia disponível da dieta, foi superestimado em 19 g/dia quando calculado pelo NRC e subestimado em 68 g/dia quando calculado pelo AMTS. O ganho de peso possível a partir da energia disponível foi menor quando calculado pelo AMTS em relação ao NRC (2001). Para o conjunto de dados experimentais brasileiros, os ganhos de peso de bezerros foram 32% inferiores aos descritos na literatura para sistemas norte-americanos. As razões para esta discrepância precisam ser compreendidas, pois somente assim novos modelos poderão ser desenvolvidos e parametrizados para estimar o desempenho animal de forma mais acurada e precisa. / The Brazilian dairy herd is mainly made up of crossbred cows fed under tropical conditions. The main models in use to formulate and evaluate diets in Brazil are from North America. These models are based on the requirements of Holstein dairy cows under temperate climate. Therefore, the main contribution of this first Chapter was the development and evaluation of a new model to estimate dry matter intake (DMI) of crossbred dairy cows. The new DMI equation was developed and evaluated using a database with 161 treatment means from 38 published studies of Brazilian crossbred cows [n = 446 dairy cows, mean milk production of 16.60 ± 5.70 (SD) kg/day]. The new model showed higher DMI prediction accuracy (MSEP = 1.64, r2 = 0.88) than American models. Therefore, this model can be used in the formulation of diets for crossbred dairy cows under tropical conditions. In Chapter 2, we evaluated the updates on the nutritional requirements of dairy calves suggested by Van Amburgh and Drackley (2005) and inputted into Agricultural Modeling and Training Systems (AMTS, AMTS.Cattle.ProTM Calf Model version 3.5.8.0, 2015). Data from 16 previous Brazilian studies involving 51 diets for dairy calves (n = 485 calves, weaning weight of 62.02 ± 10.16 kg) were used to evaluate the Nutrient Requirements of Dairy Cattle - NRC (2001) and AMTS models. According to the data set from this study, both systems overestimated the gain calculated from the available protein. The weight gain estimated by the energy available from the diet was overestimated by 19 g/day when calculated by the NRC and underestimated by 68 g/day when calculated by AMTS. Weight gain estimated by the dietary energy of the AMTS system was lower than the NRC (2001). The Brazilian data set showed a calf gain around 32% lower than those described in U.S. dairy farms. The reasons for this discrepancy need to be understood, for only then can new models be developed and parameterized to estimate animal performance more accurately and precisely.

Submitted by Renata Lopes (renatasil82@gmail.com) on 2016-01-25T12:57:00Z No. of bitstreams: 1 eniomarcosdeoliveira.pdf: 1019097 bytes, checksum: f6f07fb49d39201c72e3d1d1105acd75 (MD5) / Approved for entry into archive by Adriana Oliveira (adriana.oliveira@ufjf.edu.br) on 2016-01-25T19:29:38Z (GMT) No. of bitstreams: 1 eniomarcosdeoliveira.pdf: 1019097 bytes, checksum: f6f07fb49d39201c72e3d1d1105acd75 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-01-25T19:29:38Z (GMT). No. of bitstreams: 1 eniomarcosdeoliveira.pdf: 1019097 bytes, checksum: f6f07fb49d39201c72e3d1d1105acd75 (MD5) Previous issue date: 2014-10-02 / Esta tese analisa a trajetória de Francisco de Assis e o significado do encontro com o Sultão num período de conflitos entre cristãos e muçulmanos, durante a V Cruzada. A vida segundo a forma do Santo Evangelho e a escolha da Minoridade como modo de ser no mundo abriram caminhos para que Francisco de Assis pudesse ser apontado como um buscador do diálogo inter-religioso. Sua postura e seus textos são analisados nesta pesquisa através de autores que escreveram sobre o encontro acontecido entre Francisco de Assis e o Sultão Malek-al-Kamil, em Damieta, no ano de 1219, um encontro claramente dialogal. A pesquisa foi dividida em três Partes e em sete Capítulos, contendo a primeira Parte, três Capítulos, e a segunda e terceira Partes, dois Capítulos cada uma. Na primeira Parte foi abordado o processo de conversão pelo qual passou Francisco; na segunda Parte foi abordado o processo de evolução da fraternidade formada ao redor de Francisco, a constituição da Regra de vida da Ordem, os momentos de aproximação e de distanciamento da visão de Francisco diante da visão da Igreja. Na terceira e última Partes foram abordados os textos e atos de Francisco que mostram como o seu projeto de vida segundo a forma do Santo Evangelho e a escolha da minoridade o apontam como um buscador de diálogo. / This thesis seeks to analyze the trajectory of Francisco de Assis and the meaning of his meeting with the sultan in a time of conflicts between Christians and Muslims during the V Crusades. Life according to the Holy Gospel and the Minority's choice as to how to exist in the world opened up paths so that Francisco de Assis could be appointed as a man who searched for inter religious dialogue. His stance and his texts are analyzed in this research through authors that wrote about the meeting that occurred between Francisco de Assis and Sultan malek-al-kamil in the city of Damieta in the year 1219-- it was clearly meeting for dialogue. The research was divided into three parts and seven chapters. The first part has three chapters, and the second and third have two each. The first part contains the process of conversion in which Francisco went through, the second part contains the process of the evolution of the brotherhood formed around Francisco, a constitution of the Law of Life of Order, the moments of nearing and distancing of the vision of Francisco compared to the church's vision. The third and last part explain Francisco's texts and acts show how his life project according to a form of the Holy Gospel and the choice of the minority indicate him as a dialogue seeker.

Orientador: Josimeri Hebling / Resumo: Objetivo: Investigar a citotoxicidade transdentinária da acroleína (ACR) sobre células pulpares e a resistência máxima à tração (RMT) da matriz dentinária e resistência da união (RU) resina-dentina após a biomodificação do colágeno dentinário por esse agente promotor de ligações cruzadas. Métodos: Discos de dentina (0,4 mm de espessura) foram obtidos de molares humanos hígidos e adaptados em câmaras pulpares artificiais. Células MDPC-23 foram semeadas na superfície pulpar desses discos e a superfície oclusal foi condicionada com ácido fosfórico por 15s. Sobre a dentina condicionada foi aplicado (n=9): água deionizada (controle), ACR 0,02%, 0,01%, 0,005%, glutaraldeído 5% (GD) ou peróxido de hidrogênio 3%. Após 60s, a superfície foi lavada e as câmaras foram incubadas por 24h. Foi avaliada a viabilidade das MDPC-23 (alamarBlue) aderidas na parede pulpar dos discos e os extratos foram aplicados em novas MDPC-23 e HDPCs (células da polpa dental humana) cultivadas em placas de cultura. Após 24h, essas células foram avaliadas quanto a viabilidade, atividade de fosfatase alcalina (ensaio da timolftaleína), presença de nódulos de mineralização (Alizarin red) e expressão gênica de ALPL, DSPP, MMP2, MMP9 e IL1B (PCRq). Vinte cinco molares adicionais foram seccionados para obter espécimes de dentina (n=50) que foram completamente desmineralizados com ácido fosfórico por 24h. Os espécimes de matriz dentinária foram tratados por 60s com: água, ACR 0,02%, 0,01%, 0,005% ou GD 5% e submetid... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: Objective: To investigate the transdentinal cytotoxicity of acrolein (ACR) on pulp cells, as well as the ultimate tensile strength (UTS) of the dentin matrix, and the strength of resin-dentin bonds after dentin collagen biomodification with this cross-linker. Methods: Dentin disks (0.4 mm thick) were cut from sound human molars and adapted in artificial pulp chambers. MDPC-23 were seeded on the pulpal side of the disks and the occlusal surface was etched with phosphoric acid for 15s. The etched dentin was treated with (n=9): deionized water (control), 0.02%, 0.01%, 0.005% ACR, 5% glutaraldehyde (GD), or 3% hydrogen peroxide. After 60s, the surface was rinsed, and the chambers were incubated for 24h. The viability of MDPC-23 cells seeded on the disk was assessed (alamarBlue) and the extracts were applied on new MDPC-23 and HDPCs (human dental pulp cells) seeded in culture plates. After 24h, the viability of the cells was investigated as well as the activity of alkaline phosphatase, presence of mineralized nodules (Alizarin red) and ALPL, DSPP, MMP2, MMP9 and IL1b gene expression (qPCR). Additional twenty-five human molars were sectioned to obtain dentin specimens (n=50) which were completely demineralized in 10% phosphoric acid for 24h. The specimens were treated for 60s with: water, 0.02%, 0.01%, 0.005% ACR or 5% GD, and then submitted to a mechanical test to determine the UBS. Finally, flat dentin surfaces prepared in 40 human molars were etched with phosphoric acid and trea... (Complete abstract click electronic access below) / Mestre