Mémoire numérisé par la Division de la gestion de documents et des archives de l'Université de Montréal

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Le neutrophile est un type cellulaire de l'immunité innée essentiel à la gestion de perturbations homéostatiques impliquant des agents pathogènes. Il nettoie le site d'une réaction inflammatoire de ses débris et y combat les agents infectieux via la phagocytose, la dégranulation et l'explosion oxydative. De plus, il peut produire et relâcher une quantité importante de médiateurs lipidiques et peptidiques. Ces molécules ont pour rôle la génération d'un environnement inflammatoire propice à la résolution d'une perturbation homéostatique, ce qui inclut l'activation et le recrutement d'autres types cellulaires du système immunitaire. Parmi les médiateurs lipidiques que le neutrophile peut produire, on retrouve les prostanoïdes, qui sont issus d'une cascade de synthèse initiée par une enzyme appelée cyclooxygénase (COX). Récemment, un partenaire d'interaction fut trouvé pour la COX. À l'aide du test de levures à double hybride, il fut démontré qu'une protéine appelée nucléobindine (Nue) pouvait interagir avec les deux isoformes de cyclooxygénase existants (la COX-1 et la COX-2). La Nue est une protéine potentiellement multifonctionnelle dont le rôle n'est pas encore établi. La présente étude vise à déterminer si une interaction COX2/Nuc est possible en milieu intracellulaire et, advenant le cas, à en préciser la fonction. / The neutrophil is a cell type of innate immunity that is essential in the management of homeostatic imbalances involving pathogens. It cleans the site of an inflammatory reaction of its debris and gets rid of infectious material via phagocytosis, degranulation and oxydative burst. Moreover, it can release an important quantity of bioactive lipids and peptide mediators which ail have for common objective the creation of an inflammatory environment conducive to the resolution of a homeostatic perturbation. In fulfilling their duty, these molecules will, amongst other things, recruit and activate other cell types of the immune System. The bioactive lipid class of mediators includes the prostanoïd family generated from an enzymatic cascade initiated by an enzyme called cyclooxygenase (COX). Recently, an interaction partner was found for COX. The yeast two-hybrid assay, revealed that a protein named nucleobindin (Nue) could interact with both isoforms of cyclooxygenase (COX-1 and COX-2). Nue is a potentially multifunctional protein that has yet to be assigned a definitive role. Using the human neutrophil as an experimental model, the present study assesses the possibility and consequences of a COX-2/Nuc interaction in the intracellular environment.

La cyclooxygénase-2 (COX-2) a été associée à un mauvais pronostic dans plusieurs cancers. L'objectif de cette étude est d'évaluer si la COX-2 est un facteur pronostique dans le cancer glottique. Cette étude a été effectuée sur des tissus de patients ayant participé à un essai clinique qui évaluait l'efficacité de l'alpha-tocophérol pour réduire la survenue de . seconds cancers primaires (SCP) chez des patients avec un cancer de la tête et du cou. Des analyses immunohistochimiques ont été effectuées sur les biopsies pré-traitement de 301 patients avec un cancer glottique de stade précoce traité par radiothérapie. Les rapports d'incidence (RI) et leurs intervalles de confiance à 95% (le) associés à une surexpression de COX-2 sont de 0,94 (le: 0,55-1,62) pour la récidive et de 1,57 (le: 1,01-2,45) pour la mortalité globale. Pour les SCP, les RI sont de 2,63 (IC : 1,32-5,23) pour les premières 3,5 années de suivi et de 0,55 (IC : 0,22-1,32) pour les 3,5 années subséquentes. En conclusion, la surexpresssion de laCOX-2 dans le cancer du larynx glottique est associée à une augmentation de .la mortalité globale et confère une augmentation du risque de SCP durant les 3,5 premières années de suivi. Des études subséquentes sont nécessaires pour expliquer les effets observés au niveau des SCP. L'expression de la COX-2 pourrait s'avérer utile pour prédire le pronostic d'un patient sur une base individuelle.

L' étiologie du cancer de l'endomètre est méconnue. Pourtant, la LH et les prostaglandines activent via- leurs récepteurs spécifiques exprimés dans le cancer de l'endomètre, un second messager commun, soit l'AMPc impliquée dans la prolifération et l'invasion du cancer de l'endomètre. Les gènes STAR, HSD3β32 et COX-2 sont surexprimés dans le cancer de l'endomètre et leur expression est connue pour répondre à la voie de l'AMPc via une stimulation par la LH et les prostaglandines. Les facteurs de transcription NUR 77 et C/EBPβ sont impliqués dans différents cancers et sont activés par la voie AMPc/PK.A, d'où notre hypothèse qu' ils pourraient activer la transcription des gènes STAR, HSD3β32 et COX-2 dans le cancer de l'endomètre. L'objectif de l 'étude est de déterminer si les facteurs NUR77 et C/EBPβ sont présents dans des lignées cellulaires du cancer de l'endomètre et s' ils pourraient être impliqués dans l'expression des gènes STAR, HSD3β32 et COX-2 dans ces cellules. J' ai pu démontrer la présence des deux facteurs dans différentes lignées cellulaires du cancer de l'endomètre. Cependant, mes résultats de transfections transitoires démontrent que NUR 77 et C/EBPβ activent faiblement les trois promoteurs à l'étude d'où l'intérêt de chercher d'autres collaborateurs impliqués dans l'expression des gènes STAR, HSD3β32 et COX-2 ou encore d' autres gènes régulés cibles par NUR77 et C/EBPβ dans le cancer de l'endomètre.

Le virus Epstein-Barr (EBV) est un virus herpès oncogène qui a développé au cours de son évolution un arsenal de contre-mesures lui permettant de déjouer les différentes facettes de la réponse immunitaire de l'hôte. Une partie importante de cette réponse est assurée par les monocytes, qui constituent une composante majeure de la première ligne de défense contre les infections virales. Cependant, le rôle des monocytes dans la pathogenèse du virus EBV ainsi que les tactiques utilisées par celui-ci pour déjouer cet aspect de la réponse immunitaire restent encore largement méconnus. La présente étude démontre que l'EBV peut infecter et se répliquer dans les monocytes humains. En effet, la pénétration et la translocation des particules virales aux noyaux ont pu être mises en évidence par microscopie électronique. De plus, l'expression de gènes viraux associés au cycle lytique, ainsi que la libération de particules virales infectieuses par les monocytes infectés confirment la capacité du virus à se répliquer dans ces cellules. Nos résultats ont également démontré que d'importantes fonctions du monocyte sont affectées suite à l'infection. C'est notamment le cas de la phagocytose, dont l'activité est réduite de plus de 50% dans les cellules infectées. De plus, EBV inhibe également la génération de prostaglandine (PG) E2 par les monocytes en interférant avec l'expression de la COX-2, principale enzyme impliquée dans la biosynthèse des PGs. Des études plus approfondies ont démontré que la protéine virale ZEBRA, laquelle est rapidement exprimée dans les monocytes infectés, inhibe la transactivation du promoteur de la COX-2 par les facteurs de transcription NF-KB et CREB. Cette inhibition est causée par l'interaction physique de ZEBRA avec la TATA-binding protein (TBP), une composante clé du complexe d'initiation de transcription. En résumé, nos résultats suggèrent que l'infection des monocytes par EBV et l'altération de leurs fonctions biologiques pourraient constituer un nouveau mécanisme visant à affaiblir la réponse immunitaire et ainsi favoriser la propagation virale dans les premiers stades de l'infection.

Mémoire numérisé par la Direction des bibliothèques de l'Université de Montréal.

Thèse numérisée par la Direction des bibliothèques de l'Université de Montréal.

Mémoire numérisé par la Direction des bibliothèques de l'Université de Montréal.

Deux systèmes enzymatiques clés dans l'inflammation se sont révélés être impliqués dans de nombreux cancers (côlon, pancréas, sein, poumon) et notamment dans le cancer <br />de la prostate (CaP). La 5-lipoxygénase (5-LO) contrôle la formation des leucotriènes, médiateurs de l'inflammation de l'allergie. La cyclooxygénase existe sous deux isoformes : COX1 et COX2. COX1 est exprimée de manière constitutive et COX2 est exprimée de manière inductible. <br />La voie des cyclooxygénases contrôle la formation des prostaglandines, médiateurs de la réponse inflammatoire. En regard des similitudes de leurs surexpressions dans le cancer humain, <br />il est possible d'envisager un nouveau traitement du cancer ciblé sur la dérégulation <br />du métabolisme de l'acide arachidonique. L'objet de cette étude est de participer à la recherche sur le cancer de la prostate par la conception puis la synthèse en parallèle de <br />N-benzoyltétrahydro-γ-carbolines, inhibiteurs potentiels mixtes 5-LO / COXs. Dans ce but, <br />une stratégie de synthèse de type convergente fut développée à partir de chlorhydrates <br />de phénylhydrazine substitués en position para et de dérivés de pipéridin-4-one qui se cyclisent <br />en tétrahydro-γ-carbolines par catalyse acide (méthode de Fischer). Parallèlement à cette voie de synthèse, un composé inhibiteur de la 5-LO, le méthoxytétrahydropyranne (MTHP) du ZD-2138, est alkylé par une chaîne polyméthylénique à trois carbones. La condensation de la tétrahydro-γ-carboline et du MTHP alkylé en milieu basique fournit un composé dont l'azote indolique libre est ensuite benzoylé ou benzylé. Les activités 5-LO et COX1/COX2 ont été obtenues ex vivo <br />sur sang total humain. Les tests concernant l'inhibition de la prolifération cellulaire sont effectués sur différentes lignées cellulaires (de type L-1210, MCF7 et PC-3) afin de mettre en évidence <br />le pouvoir cytotoxique des composés.