Considerando a atividade antifúngica demonstrada, o óleo de Cymbopogon citratus apresenta-se como uma promissora matéria-prima no desenvolvimento de produtos farmacêuticos. Para a utilização em formulações, é necessário que se verifique a qualidade do óleo, determinada pelo teor de citral, seu componente majoritário. Além disso, cuidados relacionados à sua estabilidade devem ser considerados. Na busca por método alternativo à técnica de cromatografia a gás, comumente utilizada para óleos voláteis, um dos objetivos deste trabalho foi desenvolver e validar método analítico por cromatografia líquida de alta eficiência para quantificar o citral presente no óleo de C. citratus, na forma de seus isômeros geométricos, o neral e o geranial. Em virtude da volatilidade e suscetibilidade à degradação apresentadas pelo óleo de C. citratus, foram preparadas micropartículas contendo essa substância, a fim de melhorar sua estabilidade. Foram avaliadas duas técnicas de preparação, a secagem por aspersão e a precipitação, além de dois materiais encapsulantes, a beta-ciclodextrina e a hidroxipropil-beta-ciclodextrina. As micropartículas preparadas foram caracterizadas em relação ao teor de umidade, rendimento, porcentagem de inclusão, espectrofotometria na região do infravermelho e a morfologia foi avaliada por microscopia eletrônica de varreduta. Para determinar os teores de neral e geranial presentes nas micropartículas, método por CLAE foi validado. As micropartículas foram incorporadas em emulsões não-iônicas e géis hidrofílicos e estas formulações foram avaliadas quanto às suas propriedades físico-químicas e em relação a sua estabilidade. Os teores de neral e gernanial foram determinados utilizando-se método por CLAE adapatado do método descrito para as micropartículas. / Considering the antifungal activity demonstrated the oil of Cymbopogon citratus presents as a promising raw material for the development of pharmaceutical products. For use in pharmaceutical formulations, it is necessary to verify the quality of the oil, determined by the citral content, its major compound. Moreover, precautions related to its stability should be considered. In the search for alternative method to the technique of gas chromatography, commonly used for volatile oils, one of the purposes of this work was to develop and to validate analytical method by high performance liquid chromatography for quantitation of the citral contents in the C. citratus oil, as its geometric isomers, neral and geranial. Because of the volatility and susceptibility to degradation presented by C. citratus oil, microparticles containing this oil were prepared in order to improve its stability. Two techniques of preparations were evaluated; spraydrying and precipitation, and also two materials of encapsulation, betacyclodextrin and hydroxypropyl-beta-cyclodextrin were tested. The microparticles were characterized by their content of water, yielding, percentage of inclusion, infrared spectroscopy (IV), and the morphology was evaluated by scanning electronic microscopy (SEM). For the determination of neral and geranial contents present into microparticles an HPLC method was validated. The microparticles were incorporated in nonionic emulsions (NIE) and hydrophilic gels (HG), and physico-chemical properties as well as stability of these formulations were evaluated. The neral and geranial contents were determined using the HPLC method adapted from that described for the microparticles.

This research was aimed to evaluate in vivo effects of citronella oil on cattle ectoparasites. Two experiments with different levels of citronella oil (I) and the relationships with phytotherapic and the synthetic acaricide (II) were evaluated. In experiment I, twenty Holstein cows were allocated in four groups of five animals. The treatments were: negative control, amitraz at 0.025% and citronella oil at 3 and 4%. Engorged ticks and flies (horn fly, stably fly and domestic fly) were evaluated on animals before (mean of days -3, -2, -1) and at 3; 7 and 14 days after treatment. The efficacy of control ticks was 89.2; 36.5 and 35.8% for amitraz and citronella oil at 3 end 4% respectively, on 14th day post-treatment. Lower control of flies was observed for phytotherapic treatments. In experiment II, fifteen Holstein cows were allocated in three groups of five animals. The treatments were: negative control, amitraz at 0.025% and citronella oil at 4%. Engorged ticks and flies were evaluated on animals before (mean of days -3, -2, -1) and at 7; 14; 21 and 28 days after treatment. In 28 days there was need to reapply the amitraz to control engorged ticks. The relationship among the number of application was the 1:2.5 for amitraz and citronella oil, respectively. The efficacy in control ticks were 71.8 and 30.9% for amitraz and citronella oil at 4% respectively. Lower control of flies was observed for phytotherapic treatment. / O objetivo desta pesquisa foi avaliar in vivo diferentes níveis de óleo de citronela em ectoparasitas de bovinos. Foram conduzidos dois experimentos com diferentes níveis de óleo de citronela (I) e a relação de banho entre o produto fitoterápico e um acaricida sintético (II). No experimento I, foram utilizadas 20 vacas da raça Holandês, distribuídas em quatro grupos de cinco animais cada um. Os tratamentos foram constituídos pelo controle negativo, amitraz a 0,025%, óleo de citronela a 3 e 4%. Para avaliação foram contadas fêmeas ingurgitadas de carrapato e moscas (mosca-dos-chifres, mosca-dos-estábulos e mosca doméstica) antes (média dos dias -3, -2, -1) e após a aplicação dos produtos nos dias 3; 7 e 14. A eficácia no controle do carrapato foi de 89,2; 36,5 e 35,8% para o amitraz e óleo de citronela a 3 e 4%, respectivamente. Verificou-se baixo controle de moscas nos tratamentos constituídos pelo fitoterápico. No experimento II, foram utilizadas 15 vacas da raça Holandês, distribuídas em três grupos de cinco animais cada um. Os tratamentos foram constituídos pelo controle negativo, amitraz a 0,025% e óleo de citronela a 4%. Para avaliação foram contadas fêmeas ingurgitadas de carrapato e moscas antes (média dos dias -3, -2, -1) e após a aplicação dos produtos nos dias 7; 14; 21 e 28. Aos 28 dias, houve necessidade de se reaplicar o amitraz para controlar a infestação com carrapato. A relação entre o número de aplicações foi de 1:2,5 para amitraz e citronela, respectivamente. A eficácia no controle do carrapato foi de 71,8 e 30,9% para o amitraz e óleo de citronela a 4%, respectivamente na média pós-tratamento. Verificou-se baixo controle de moscas no tratamento constituído pelo fitoterápico.

Submitted by Maike Costa (maiksebas@gmail.com) on 2017-02-09T13:09:35Z No. of bitstreams: 1 arquivototal.pdf: 1300332 bytes, checksum: 1ecfc84b4e141901d87821311427147b (MD5) / Made available in DSpace on 2017-02-09T13:09:35Z (GMT). No. of bitstreams: 1 arquivototal.pdf: 1300332 bytes, checksum: 1ecfc84b4e141901d87821311427147b (MD5) Previous issue date: 2015-04-10 / Conselho Nacional de Pesquisa e Desenvolvimento Científico e Tecnológico - CNPq / The fruit production is very expressive in Brazil, especially the pineapple cultivation, Ananas comosus (L.) Merrill. Fruit that taste and intense aroma, used for industrialization juices, with a good acceptance for consumption. Although the fruit juice not be characterized as a means of frequent contamination of pathogenic microorganisms, the occurrence and the increase in cases of outbreaks bound by these foods is emerging. In this sense, the combination of antimicrobial properties of essential oils in different food matrices has led to investigation of these oils as food preservatives and their performance on the physicochemical properties and sensory product. Given this context, this study aimed to evaluate the potential of the essential oil of Cymbopogon citratus (OECC), compared to bacterial contaminants of pineapple juice (Listeria monocytogens (ATCC7644), Escherichia coli (UFPEDA224) and Salmonella enterica Enteritidis Serova Serova (UFPE414) in mixed inoculum, by determining the minimum inhibitory concentration (MIC) and the influence of the application of OECC on growth and survival of the mixed inoculums. Moreover, the effectiveness of OECC was verified against the indigenous microbiota in pineapple juice; and the evaluation of physical, chemical and sensory parameters of juice with OECC. The value of MIC found was 5μL / mL against the mixed inoculum. Concentrations lower than MIC (2.5 uL / mL -CIM / 2 and 1.25 uL/ mL -CIM / 4) were able to decrease the count of L. monocytogenes and E. coli in pineapple juice values ≥ 5 log (CFU / mL) after 15minutes of exposure in the juice. S. enteritidis, the same level of inhibition was detected after 15 minutes exposure to concentrations in 5μL OECC / ml, 2.5 uL / mL. When OECC was incorporated into juice at a concentration of 1.25 uL / mL, a 1 hour time interval to establish a ≥ 5 log reduction in S. enteritidis was necessary. At concentrations of 0.6 uL / mL - MIF / 8, 1 h 45 min intervals were required to achieve a ≥ 5 log-in E. coli and L. monocytogenes, respectively; while, 12 h were necessary to achieve similar reduction in S. Enteritidis. The OECC (5 uL / mL, 2.5 uL / mL and 1.25 uL / ml) was able to reduce in ≥ 5 log count of mesophilic bacteria, lactic acid bacteria, molds and yeasts that occur naturally in juice pineapple maximum time interval of 2 hr. A reduction of ≥ 5 log was not observed in microorganisms of the indigenous microbiota in the concentration of OECC (0.6 uL / mL). The physico-chemical properties (pH, titratable acidity and soluble solids) of pineapple juice containing the OECC (2.5 uL / mL-CIM / 2 and 1.25 uL / mL-CIM / 4) were kept in the control . The juice samples with OECC (2.5 uL / mL and 1.25 uL / mL) that passed through the sensory panel showed good acceptance for some sensory properties (appearance, odor, viscosity), but parameters of flavor, aftertaste and acceptance overall had unsatisfactory ratings of the panelists. The OECC proved to be an effective alternative in food safety and sensory attributes mentioned above when applied to pineapple juice. Therefore, further studies on the OECC pineapple juice with no additional thermal technology can be used to achieve a balance between the microbiological safety and sensory aspects of the product. / A produção frutífera é muito expressiva no Brasil, destacando-se o cultivo do abacaxi, Ananas comosus (L.) Merril. Fruta essa de sabor e aroma intenso, utilizada para industrialização de sucos, com uma boa aceitação para consumo. Apesar do suco de frutas não caracterizar-se como meio de contaminação frequente de micro-organismos patogênicos, a ocorrência e o aumento dos casos de surtos vinculados por esses alimentos vem surgindo. Nesse sentido, a combinação das propriedades antimicrobianas dos óleos essenciais em diferentes matrizes alimentares tem levado a investigação desses óleos como conservantes de alimento e sua atuação nas propriedades físico-químicas e sensoriais do produto. Diante deste contexto, este estudo objetivou avaliar o potencial antimicrobiano do óleo essencial de Cymbopogon citratus (OECC), frente a bactérias contaminantes de suco de abacaxi (Listeria monocytogens (ATCC7644), Escherichia coli (UFPEDA224) e Salmonella enterica Serova Enteritidis Serova (UFPE414) em inóculo misto, através da determinação da Concentração Inibitória Mínima (CIM), bem como a influência da aplicação desse OECC no crescimento e sobrevivência do inóculo misto. Além disso, foi verificado a eficácia do OECC frente a microbiota autóctone no suco de abacaxi; e a avaliação dos parâmetros físico-químicos e sensoriais do suco com OECC. O valor da CIM encontrado foi de 5μL/mL frente ao inóculo misto. Concentrações inferiores a CIM ( 2,5 μL/mL -CIM/2 e 1,25 μL/mL -CIM/4) foram capazes de diminuir a contagem de L. monocytogenes e E. coli no suco de abacaxi a valores ≥ a 5 log ( UFC/mL) após 15minutos de exposição no suco. Para S. Enteritidis , o mesmo nível de inibição foi detectado após 15 minuto de exposição ao OECC nas concentrações de 5μL/mL, 2,5 μL/mL. Quando o OECC foi incorporado no suco na concentração de 1,25 μL/mL, foi necessário um intervalo de tempo de 1 hora para o estabelecimento de uma redução ≥ a 5 log em S. Enteritidis. Em concentrações de 0,6 μL/mL – CIM/8, intervalos de 1h e 45 min foram necessários para alcançar uma redução ≥ 5-log em E. coli e L. monocytogenes, respectivamente; enquanto, 12 h foram necessárias para alcançar similar redução em S. Enteritidis. O OECC (5 μL/mL, 2,5 μL/mL e 1,25 μL/mL) foi capaz de reduzir em ≥ a 5 log a contagem de bactérias mesófilas, bactérias ácido láticas e bolores e leveduras que ocorrem naturalmente em suco de abacaxi em intervalo de tempo máximo de 2 h. Uma redução de ≥ 5 log não foi observada em micro-organismos da microbiota autóctone na concentração de OECC (0,6 μL/mL). As propriedades físico-químicas (pH, acidez titulável e sólidos solúveis) do suco de abacaxi contendo o OECC (2,5 μL/mL-CIM/2 e 1,25 μL/mL-CIM/4) foram mantidas em relação ao controle. As amostras de suco com OECC (2,5 μL/mL e 1,25 μL/mL) que passaram pelo painel sensorial apresentaram boa aceitação para algumas propriedades sensoriais (aparência, odor, viscosidade), mas parâmetros de sabor, sabor residual e aceitação global tiveram avaliações insatisfatórias dos painelistas. O OECC mostrou-se como uma alternativa eficaz na segurança alimentar e nos atributos sensoriais acima citados quando aplicado em suco de abacaxi. Assim, estudos complementares do OECC em suco de abacaxi com tecnológicas complementares não térmicas podem ser utilizadas para se obter um equilíbrio entre a segurança microbiológica e os aspectos sensoriais do produto.

Made available in DSpace on 2015-05-08T14:47:22Z (GMT). No. of bitstreams: 1 arquivototal.pdf: 5598900 bytes, checksum: c32ff6c73e89e1ebe6c75057b97f640c (MD5) Previous issue date: 2011-03-31 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPES / Introduction: The vascular ulcer is the most meaningful complication regarding venous or arterial insufficiency, which has recurrent character and affects different age groups with prevalence above 65 years old. It is chronic wound which results in financial burden and affects the life quality of its carriers. The research development, for the fulfillment of new products which aid the treatment of this kind of wound as well as others, aims to provide benefits for society that needs to have access to advanced technology and with low cost. Objectives: To compare the solution use, while in test, at 0,9% sodium chloride and essential oil of Cymbopogon citratus Stapf leaves with saline at 0,9% in the cleaning process of vasculogenic ulcers; to investigate whether the solution, being tested, is coadjuvant in the healing process of such lesions; to evaluate the odor reduction of the vasculogenic ulcers during the use of the solution being tested; and to identify complication signs in the healing process of vasculogenic ulcers during the use of the solution, being tested, and saline. Methodology: It is a clinical, prospective, randomized, double-blind trial developed in the dressing sector of the outpatient clinic of the Lauro Wanderley University Hospital (HULW). The research encompassed vasculogenic ulcer carriers, with the sample of eighteen lesions (n=18) distributed in two groups, the experimental group (n = 11), which used the solution in test, and the control one (n = 07), which used saline at 0,9%. For data collection, several instruments were used, such as: an instrument with sociodemographic data and health conditions, including anamnesis and other files for lesions evaluations, once a week, such as Pressure Ulcer Scale for Healing (PUSH), TELER indicator and self-evaluation for odor, numerical scale for pain and complication register (bleeding, increase of necrosis area, increase of infection signs) and file for the dressing accomplishment of each group. The research was approved under the CEP/HULW no. 054/10 protocol. The data collection phase occurred in the period from June 8th, 2010 to August 2nd, 2010. In the data analysis, the SPSS statistical package (Statistical Package for Social Sciences) version 17.0, with inferential statistic techniques was used. The significance level used concerning the decisions of the statistical tests was 5%. Results and Data Analysis: The results point out that there was no meaningful difference between the groups for none of the variables: wound size, exudate, kind of tissue, pain and odor (p > 0,05) in each evaluation. However, it could be perceived meaningful difference in regard to the following variables: lesion size, kind of tissue, pain and odor when the paired comparison tests were used in evaluations of the same group, with results favorable to solution in test. Final Comments: the solution in test aids the reepithelialization process; it did not present any effect on the reduction of lesion exudate; it provides comfort for the patient and the professional who carries out the dressing, neutralizing unpleasant odors originated from the wound bed; it is safe to be used in human beings once it does not cause either irritation or infection signs; it can easily remove dirt of the wound bed; and it helps cleaning the perilesional area. It is suggested that further research should be fulfilled with a greater number of participants. / Introdução: A úlcera vascular se apresenta como a complicação mais significativa da insuficiência venosa ou arterial, que tem caráter recidivante, acomete diferentes faixas etárias, com prevalência acima de 65 anos. É ferida crônica que traz ônus financeiro e afeta a qualidade de vida de seus portadores. O desenvolvimento de pesquisas, para a criação de novos produtos que auxiliem o tratamento desse tipo de ferida e de outras, visa trazer benefício à sociedade, que precisa ter acesso à tecnologia avançada e com menor custo. Objetivos: Comparar o uso da solução em teste à base de cloreto de sódio a 0,9% e do óleo essencial das folhas de Cymbopogon citratus Stapf com a solução salina a 0,9% no processo de limpeza de úlceras vasculogênicas; investigar se a solução em teste é coadjuvante no processo de cicatrização dessas lesões; avaliar a redução do odor de úlceras vasculogênicas durante o uso da solução em teste; e, identificar sinais de complicações no processo de cicatrização de úlceras vasculogênicas durante o uso da solução em teste e da solução salina. Metodologia: Trata-se de um ensaio clínico, prospectivo, randomizado, duplo-cego desenvolvida no setor de curativos do Ambulatório do Hospital Universitário Lauro Wanderley (HULW). A população do estudo foi constituída por clientes portadores de úlceras vasculogênicas, sendo a amostra de dezoito lesões (n=18) distribuída em dois grupos, experimental (n = 11), que usou a solução em teste, e o grupo controle (n = 07), que usou a solução salina a 0,9%. Para coleta de dados, utilizou-se um instrumento com dados sociodemográficos e condições de saúde, incluindo anamnese e outras fichas para avaliação das lesões, uma vez por semana, incluindo a Pressure Ulcer Scale for Healing (PUSH), indicador TELER e autoavaliação para o odor, escala numérica para dor e registro de complicações (sangramento, aumento da área de necrose, aumento de sinais de infecção) e ficha guia para realização do curativo de cada grupo. A pesquisa foi aprovada sob protocolo CEP/HULW nº 054/10. A fase de coleta de dados ocorreu no período de 08 de junho de 2010 a 02 de agosto de 2010. Na análise dos dados, utilizou-se pacote estatístico SPSS (Statistical Package for Social Sciences) versão 17.0, com técnicas de estatística inferencial. O nível de significância utilizado nas decisões dos testes estatísticos foi de 5%. Resultados e Análise dos Dados: Os resultados apontam que não se comprovou diferença significativa entre os grupos para nenhuma das variáveis: tamanho da ferida, exsudato, tipo de tecido, dor e odor (p > 0,05) em cada avaliação. Porém, percebeu-se diferença significativa nas variáveis: tamanho da lesão, tipo de tecido, dor e odor quando se utilizou os testes de comparação pareada nas avaliações dentro do mesmo grupo, com resultados favoráveis à solução em teste. Considerações Finais: a solução em teste auxilia no processo de reepitelização; não apresentou ação sobre a redução do exsudato das lesões; traz conforto ao cliente e ao profissional que realiza o curativo, neutralizando odores desagradáveis advindos do leito da lesão; é segura para ser usada em seres humanos, uma vez que não causa sinais de irritação nem infecção; remove com facilidade sujidades do leito da lesão; e, facilita a limpeza da área perilesional. Sugere-se que sejam realizadas outras pesquisas com maior número de sujeitos.

Made available in DSpace on 2014-12-17T15:01:16Z (GMT). No. of bitstreams: 1 ElisangelaLG.pdf: 1213496 bytes, checksum: e3e74efdf673a462ae5c31d512a5e17b (MD5) Previous issue date: 2004-09-02 / Conselho Nacional de Desenvolvimento Cient?fico e Tecnol?gico / The extraction with pressurized fluids has become an attractive process for the extraction of essential oils, mainly due the specific characteristics of the fluids near the critical region. This work presents results of the extraction process of the essential oil of Cymbopogon winterianus J. with CO2 under high pressures. The effect of the following variables was evaluated: solvent flow rate (from 0.37 to 1.5 g CO2/min), pressure (66.7 and 75 bar) and temperature (8, 10, 15, 20 and 25 ?C) on the extraction kinetics and the total yield of the process, as well as in the solubility and composition of the C. winterianus essential oil. The experimental apparatus consisted of an extractor of fixed bed and the dynamic method was adopted for the calculation of the oil solubility. Extractions were also accomplished by conventional techniques (steam and organic solvent extraction). The determination and identification of extract composition were done by gas chromatography coupled with a mass spectrometer (GC-MS). The extract composition varied in function of the studied operational conditions and also related to the used extraction method. The main components obtained in the CO2 extraction were elemol, geraniol, citronellol and citronellal. For the steam extraction were the citronellal, citronellol and geraniol and for the organic solvent extraction were the azulene and the hexadecane. The most yield values (2.76%) and oil solubility (2.49x10-2 g oil/ g CO2) were obtained through the CO2 extraction in the operational conditions of T = 10?C, P = 66.7 bar and solvent flow rate 0.85 g CO2/min / A extra??o com fluidos pressurizados tem-se tornado um processo de separa??o atrativo para a extra??o de ?leos essenciais, devido ?s caracter?sticas que estes fluidos apresentam quando se encontram pr?ximos da regi?o cr?tica. Este trabalho apresenta resultados do processo de extra??o do ?leo essencial de Cymbopogon winterianus J. com CO2 sob altas press?es. Foi avaliado o efeito das vari?veis: vaz?o de solvente (0,37 a 1,5 g CO2/min), press?o (66,7 e 75 bar) e temperatura (8, 10, 15, 20 e 25 ?C) sobre a cin?tica de extra??o e o rendimento total do processo, como tamb?m na solubilidade e composi??o do ?leo de C. winterianus. O aparato experimental consistiu de um extrator de leito fixo e foi adotado o m?todo din?mico para o c?lculo da solubilidade do ?leo. Tamb?m foram realizadas extra??es por t?cnicas convencionais (extra??o a vapor e com solvente org?nico). A determina??o da composi??o e identifica??o dos extratos foi feita atrav?s de cromatografia gasosa acoplada a espectrometria de massas (CG EM). A composi??o do extrato variou em fun??o das condi??es operacionais estudadas e tamb?m com rela??o ao m?todo de extra??o empregado. Os principais componentes obtidos na extra??o por CO2 foram: elemol, geraniol, citronelol e citronelal. Para a extra??o a vapor foram o citronelal, citronelol e geraniol, j? para a extra??o por solvente org?nico foram o azuleno e o hexadecano. Os maiores valores de rendimento (2,76%) e solubilidade do ?leo (2,49x10-2 g ?leo/ g CO2) foram obtidos para extra??o por CO2 nas condi??es operacionais de T = 10?C, P = 66,7 bar e vaz?o 0,85 g CO2/min

Considerando a atividade antifúngica demonstrada, o óleo de Cymbopogon citratus apresenta-se como uma promissora matéria-prima no desenvolvimento de produtos farmacêuticos. Para a utilização em formulações, é necessário que se verifique a qualidade do óleo, determinada pelo teor de citral, seu componente majoritário. Além disso, cuidados relacionados à sua estabilidade devem ser considerados. Na busca por método alternativo à técnica de cromatografia a gás, comumente utilizada para óleos voláteis, um dos objetivos deste trabalho foi desenvolver e validar método analítico por cromatografia líquida de alta eficiência para quantificar o citral presente no óleo de C. citratus, na forma de seus isômeros geométricos, o neral e o geranial. Em virtude da volatilidade e suscetibilidade à degradação apresentadas pelo óleo de C. citratus, foram preparadas micropartículas contendo essa substância, a fim de melhorar sua estabilidade. Foram avaliadas duas técnicas de preparação, a secagem por aspersão e a precipitação, além de dois materiais encapsulantes, a beta-ciclodextrina e a hidroxipropil-beta-ciclodextrina. As micropartículas preparadas foram caracterizadas em relação ao teor de umidade, rendimento, porcentagem de inclusão, espectrofotometria na região do infravermelho e a morfologia foi avaliada por microscopia eletrônica de varreduta. Para determinar os teores de neral e geranial presentes nas micropartículas, método por CLAE foi validado. As micropartículas foram incorporadas em emulsões não-iônicas e géis hidrofílicos e estas formulações foram avaliadas quanto às suas propriedades físico-químicas e em relação a sua estabilidade. Os teores de neral e gernanial foram determinados utilizando-se método por CLAE adapatado do método descrito para as micropartículas. / Considering the antifungal activity demonstrated the oil of Cymbopogon citratus presents as a promising raw material for the development of pharmaceutical products. For use in pharmaceutical formulations, it is necessary to verify the quality of the oil, determined by the citral content, its major compound. Moreover, precautions related to its stability should be considered. In the search for alternative method to the technique of gas chromatography, commonly used for volatile oils, one of the purposes of this work was to develop and to validate analytical method by high performance liquid chromatography for quantitation of the citral contents in the C. citratus oil, as its geometric isomers, neral and geranial. Because of the volatility and susceptibility to degradation presented by C. citratus oil, microparticles containing this oil were prepared in order to improve its stability. Two techniques of preparations were evaluated; spraydrying and precipitation, and also two materials of encapsulation, betacyclodextrin and hydroxypropyl-beta-cyclodextrin were tested. The microparticles were characterized by their content of water, yielding, percentage of inclusion, infrared spectroscopy (IV), and the morphology was evaluated by scanning electronic microscopy (SEM). For the determination of neral and geranial contents present into microparticles an HPLC method was validated. The microparticles were incorporated in nonionic emulsions (NIE) and hydrophilic gels (HG), and physico-chemical properties as well as stability of these formulations were evaluated. The neral and geranial contents were determined using the HPLC method adapted from that described for the microparticles.

Considerando a atividade antifúngica demonstrada, o óleo de Cymbopogon citratus apresenta-se como uma promissora matéria-prima no desenvolvimento de produtos farmacêuticos. Para a utilização em formulações, é necessário que se verifique a qualidade do óleo, determinada pelo teor de citral, seu componente majoritário. Além disso, cuidados relacionados à sua estabilidade devem ser considerados. Na busca por método alternativo à técnica de cromatografia a gás, comumente utilizada para óleos voláteis, um dos objetivos deste trabalho foi desenvolver e validar método analítico por cromatografia líquida de alta eficiência para quantificar o citral presente no óleo de C. citratus, na forma de seus isômeros geométricos, o neral e o geranial. Em virtude da volatilidade e suscetibilidade à degradação apresentadas pelo óleo de C. citratus, foram preparadas micropartículas contendo essa substância, a fim de melhorar sua estabilidade. Foram avaliadas duas técnicas de preparação, a secagem por aspersão e a precipitação, além de dois materiais encapsulantes, a beta-ciclodextrina e a hidroxipropil-beta-ciclodextrina. As micropartículas preparadas foram caracterizadas em relação ao teor de umidade, rendimento, porcentagem de inclusão, espectrofotometria na região do infravermelho e a morfologia foi avaliada por microscopia eletrônica de varreduta. Para determinar os teores de neral e geranial presentes nas micropartículas, método por CLAE foi validado. As micropartículas foram incorporadas em emulsões não-iônicas e géis hidrofílicos e estas formulações foram avaliadas quanto às suas propriedades físico-químicas e em relação a sua estabilidade. Os teores de neral e gernanial foram determinados utilizando-se método por CLAE adapatado do método descrito para as micropartículas. / Considering the antifungal activity demonstrated the oil of Cymbopogon citratus presents as a promising raw material for the development of pharmaceutical products. For use in pharmaceutical formulations, it is necessary to verify the quality of the oil, determined by the citral content, its major compound. Moreover, precautions related to its stability should be considered. In the search for alternative method to the technique of gas chromatography, commonly used for volatile oils, one of the purposes of this work was to develop and to validate analytical method by high performance liquid chromatography for quantitation of the citral contents in the C. citratus oil, as its geometric isomers, neral and geranial. Because of the volatility and susceptibility to degradation presented by C. citratus oil, microparticles containing this oil were prepared in order to improve its stability. Two techniques of preparations were evaluated; spraydrying and precipitation, and also two materials of encapsulation, betacyclodextrin and hydroxypropyl-beta-cyclodextrin were tested. The microparticles were characterized by their content of water, yielding, percentage of inclusion, infrared spectroscopy (IV), and the morphology was evaluated by scanning electronic microscopy (SEM). For the determination of neral and geranial contents present into microparticles an HPLC method was validated. The microparticles were incorporated in nonionic emulsions (NIE) and hydrophilic gels (HG), and physico-chemical properties as well as stability of these formulations were evaluated. The neral and geranial contents were determined using the HPLC method adapted from that described for the microparticles.

The genus Cymbopogon (Poaceae) is composed of more than 100 species found in tropical countries, and about 56 species have essential oils with aromatic characteristics and some ones have mediinal, pharmaceutical and industrial importance. The essential oils of the genus are rich in mono-and sesquiterpenes. Among the species of the genus Cymbopogon winterianus Jowitt, popularly known as |citronella|, |Java citronella| or |jacapé| is used in folk medicine as a repellent, antimicrobial, analgesic, anxiolytic and for the treatment of epilepsy. The aim of this study was to evaluate pharmacological and toxicological properties of the essential oil extracted from the leaves of Cymbopogon winterianus (EOC) in experimental protocols. Analysis by GC-MS showed the major components are citronellal, citronellol and geraniol. In pharmacological screening the main changes observed were: ptosis, sedation and decreased ability to raise. In the test of acute toxicity LD 50 was calculated in 1953.8 mg / kg (1580.9 to 2326.7) (p.o.) and in 567.3 mg / kg (395.8 to 758.2) (ip). The OEC decreased the number of crossings in the test of spontaneous movement and increased the sleep time induced by thiopental. In the the rota-rod task EOC did not interfere the motor coordination of the animals. Antinociceptive, anti-inflammatory and antioxidant effects were performed using the tests of writhing induced by acetic acid, nociception induced by formalin into the paw hot plate, the carrageenan-induced inflammation and sequestering activity of free radicals (DPPH). The results showed that the OEC reduced the response to pain, the migration of neutrophils to the abdominal cavity and is very efficient in sequestering the free radicals. In the evaluation of acute and subchronic toxicity, the animals were treated respectively with EOC in a single dose (900 mg / kg - po) and daily doses of 50mg/kg (po). In the acute test, the main behavioral changes were ptosis, sedation, decreased response to touch, decreased ability to raise and analgesia. No changes suggestive of toxicity in acute and subchronic tests were found in the assessment of body weight, water intake and feed and organ weights. In the evaluation of biochemical parameters, there were significant changes in the dosage of aspartate aminotransferase, alanine aminotransferase and alkaline phosphatase (p <0.05) in both acute and subchronic tests. The results together suggest that EOC possess depressant, antinociceptive, antiinflammatory and antioxidant properties without loss of motor coordination. In addition, EOC showed toxicity, since histological changes were found in kidney and liver in the acute assay and in liver in the subchronic assay. / O gênero Cymbopogon (Poaceae) é composto por mais de 100 espécies encontradas em países tropicais, e por volta de 56 espécies são aromáticas e algumas têm importância medicinal, farmacológica e industrial, sendo ricas em óleos essenciais. Os óleos essenciais extraídos do gênero são ricos em mono e sesquiterpenos. Dentre as espécies do gênero o Cymbopogon winterianus Jowitt, conhecido popularmente como citronela , citronela de Java ou jacapé , é utilizado na medicina popular como repelente, antimicrobiano, analgésico, ansiolítico e para o tratamento da epilepsia. O objetivo desse trabalho foi estudar aspectos farmacológicos e toxicológicos do óleo essencial extraído das folhas de Cymbopogon winterianus (OEC) em protocolos experimentais. Análise realizada através de GC-MS demonstrou como componentes majoritários o citronelal, citronelol e geraniol. Na triagem farmacológica as principais alterações registradas foram: ptose, sedação e levantar diminuído. No teste da toxicidade aguda a DL50 calculada foi de 1.953,8 mg/kg (1.580,9 2.326,7) (v.o.) e 567,3 mg/kg (395,8-758,2) (i.p.). O OEC promoveu redução no número de cruzamentos no teste da movimentação espontânea e aumento no tempo de sono induzido pelo tiopental. No teste do rota rod observou-se que o OEC não interfere a coordenação motora dos animais. Os testes para se determinar propriedades antinociceptiva, antiinflamatória e antioxidante foram realizados utilizando-se os testes de contorção abdominal induzido por ácido acético, de nocicepção na pata induzido por formalina, da placa quente, de inflamação induzido por carragenina e atividade de sequestro dos radicais livres (DPPH). Os resultados demonstraram que o OEC reduziu a resposta a dor, a migração de neutrófilos para a cavidade abdominal e foi muito eficiente no seqüestro dos radicais livres. Na avaliação da toxicidade aguda e subcrônica, os animais foram tratados respectivamente com o OEC em dose única (900 mg/kg - v.o.) e doses diárias de 50mg/kg (v.o.). No teste agudo, as principais alterações comportamentais apresentadas foram ptose palpebral, sedação, resposta ao toque diminuída, levantar diminuído e analgesia. Em relação à avaliação do peso corpóreo, ingesta de água e ração e peso dos órgãos não ocorreram alterações sugestivas de toxicidade nos ensaios agudo e subcrônico. Na avaliação dos parâmetros bioquímicos, observaram-se alterações significativas na dosagem de aspartato aminotransferase, alanina aminotransferase e fosfatase alcalina (p<0.05) em ambos os ensaios agudo e subcrônico. Os resultados em conjunto sugerem propriedades depressora, antinociceptiva, antiinflamatória e antioxidantes sem que esses efeitos promovam perda de coordenação motora. Além disso, o OEC possui toxicidade na dose e via testada, visto que alterações histológicas foram encontradas nos rins e no fígado no ensaio agudo e no fígado no ensaio subcrônico.

Submitted by MARCIA ROVADOSCHI (marciar@unifra.br) on 2018-08-17T19:08:32Z No. of bitstreams: 2 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Dissertacao_DarianeJornadaClerici.pdf: 1054628 bytes, checksum: 65a3b3fabb34be04965b9a0f42d8c8a9 (MD5) / Made available in DSpace on 2018-08-17T19:08:32Z (GMT). No. of bitstreams: 2 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Dissertacao_DarianeJornadaClerici.pdf: 1054628 bytes, checksum: 65a3b3fabb34be04965b9a0f42d8c8a9 (MD5) Previous issue date: 2017-03-24 / Termites represent a serious threat to the environment, to the agriculture and to the urban environment. Its control is done mainly by the use of chemical pesticides which, alt-hough effective, can cause serious damages to the environment and human beings. An alterna-tive to the use of these pesticides are natural products, such as essential oils with insecticidal action. Although effective, essential oils are unstable, not much soluble in water and degrade by the action of light, oxygen and even moderate temperatures. Thus, the nanostructure of essential oils could solve these problems and make sure they are effective. In this context, the objective of this work was to evaluate for the first time the effects of nanostructures of essen-tial oils on subterranean termites (Coptotermes gestroi). The nanoemulsions of Cymbopogon flexuosus and Eucalyptus globulus presented mean particle diameter of 94.9 and 79.8nm re-spectively, while the mean diameter of the solid lipid nanoparticles of Melaleuca alternifolia was 148.2nm. The value of PDI in all nanostructures was less than 0.3; zeta potential between -8.6 and -8.8 and pH between 4.0 and 5.9. The repellency test revealed that among the nanostructures tested, the solid lipid nanoparticles of M. alternifolia had the highest repellent index (71.6%). Regarding the termite bioassay, there was no significant difference among any of the groups tested in relation to wood consumption. When we evaluated the mortality of the termite mortality, there was a significant difference between control group (wood without treatment) and the wood treated with the solid lipid nanoparticles of M. alternifolia. In the scale of the American Association of Protection to Wood, the rate of the control group was 4 (very severe attack) and of the group treated by the nanoparticles was 9 (light attack). The present study showed that the nanostructure of essential oils with potential insecticidal action may represent a promising tool in fighting termites. / Os cupins representam uma grave ameaça para o meio ambiente, agricultura e meio urbano. Seu controle é realizado principalmente pelo emprego de pesticidas químicos, que apesar de eficazes, podem causar sérios danos ao meio ambiente e seres humanos. Uma alter-nativa ao uso desses pesticidas são os produtos naturais, como por exemplo, os óleos essenci-ais com ação inseticida. Apesar de eficazes, os óleos essenciais são instáveis, pouco solúveis em água e degradam-se pela ação da luz, oxigênio e até mesmo temperaturas moderadas. As-sim, a nanoestruturação de óleos essenciais poderia contornar esses problemas e garantir sua eficácia. Neste contexto, o objetivo do presente trabalho foi avaliar pela primeira vez, os efei-tos de nanoestruturas de óleos essenciais em cupins subterrâneos (Coptotermes gestroi). As nanoemulsões de Cymbopogon flexuosus e Eucalyptus globulus apresentaram diâmetro médio de partícula de 94,9 e 79,8nm respectivamente, enquanto que o diâmetro médio das nanopar-tículas lipídicas sólidas de Melaleuca alternifolia foi de 148,2nm. O valor de IPD em todas as nanoestruturas foi menor que 0,3; potencial zeta entre -8,6 e -8,8 e pH entre 4,0 e 5,9. O teste de repelência revelou que dentre as nanoestruturas testadas, as nanopartículas lipídicas sólidas de M. alternifolia obtiveram o índice repelente mais alto (71,6%). Em relação ao bioensaio com cupins, não houve diferença significativa entre nenhum dos grupos testados em relação ao consumo da madeira. Quando avaliada a mortalidade dos cupins, ocorreu diferença signifi-cativa entre grupo controle (madeira sem tratamento) e a madeira tratada com as nanopartícu-las lipídicas sólidas de M. alternifolia. Na escala da Associação Americana de Proteção à Ma-deira a taxa do grupo controle foi 4 (ataque muito severo) e do grupo tratado pelas nanopartí-culas foi 9 (ataque leve). O presente estudo mostrou que a nanoestruturação de óleos essenci-ais com potencial ação inseticida pode representar uma promissora ferramenta no combate aos cupins.

Submitted by Luciana Ferreira (lucgeral@gmail.com) on 2016-07-28T11:13:37Z No. of bitstreams: 2 Dissertação - Carolina Martins Treméa - 2015.pdf: 3039510 bytes, checksum: 5e06579e2f9fb745276cc6cc6cd1866e (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) / Approved for entry into archive by Luciana Ferreira (lucgeral@gmail.com) on 2016-07-28T11:15:34Z (GMT) No. of bitstreams: 2 Dissertação - Carolina Martins Treméa - 2015.pdf: 3039510 bytes, checksum: 5e06579e2f9fb745276cc6cc6cd1866e (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) / Made available in DSpace on 2016-07-28T11:15:34Z (GMT). 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The aims of this work were to determine the isolated or associated antifungal activity of EOs and major constituents with amphotericin B (AMB) or fluconazole (FLU) on 15 isolates and two standard strains of C. neoformans complex, evaluate the time-kill curve, the action on the biosynthesis of ergosterol and on cell membrane, in addition to verify the cytotoxicity of EOs and major constituents on human erythrocytes. By in vitro susceptibility testing and minimum fungicidal concentration (MFC), the best activities were to L. cubeba and citral. The EOs and major constituents exhibited minimum inhibitory concentration (MIC) between 16 and 512 μg/mL and 64 and 2048 μg/mL, with a MIC90 of 128 μg/mL for L. cubeba and citral, and 512 μg/mL for C. martini and geraniol. To evaluate the association of EOs and major constituents with antifungal agents was performed the Chequerboard method, that showed indifference in the association of AMB and L. cubeba (94.1%) or citral (70.6%). In association with FLU, L. cubeba was antagonistic (76.5%) and indifferent (94%) for citral. C. martini and geraniol showed synergism associated with AMB, respectively, in 52.9 and 70.6% of isolates, and showed indifference when associated with the FLU in 64.7% and 88.2%. C. gattii 24065 time-kill curve under the action of EOs and major constituents showed a rapid fungicidal activity, which occurred after one hour incubation for L. cubeba, C. martini and geraniol, and after two hours for citral. The amount of ergosterol was quantified after contact with the EOs and major constituents and showed that L. cubeba and citral inhibited 100% of sterol biosynthesis in MIC and 64% for C. martini. This is the probably mechanism of action of these agents, except for geraniol, which reduced only 12% in MIC. The major compounds of EOs showed no ability to injure the plasma membrane of C. gattii, since an average of 2.7% propidium iodide labeled cells were detected by flow cytometry. The in vitro cytotoxicity assay by hemolysis showed that EOs and major constituents were not toxic in the MIC and MFCs. Taken together, our results showed that the EOs of L. cubeba and C. martini and their major constituents, citral e geraniol are promising as candidates for new antifungal agents. / A criptococose é uma infecção fúngica causada por espécies do complexo Cryptococcus neoformans (C. neoformans e C. gattii) com alta incidência em indivíduos com a síndrome da imunodeficiência adquirida (aids). Os antifúngicos utilizados na terapia dessa infecção são escassos e, além disso, possuem toxicidade evidente e baixa eficácia, o que motiva a busca por novos candidatos a antifúngicos. Os óleos essenciais (OEs) extraídos do fruto de Litsea cubeba (Litsea cubeba (Lour.) Pers.) e das folhas de Palmarosa (Cymbopogon martini (Roxb.) Will. Watson) e seus constituintes majoritários, citral e geraniol, foram investigados como fontes de ação antifúngica. Os objetivos foram determinar a atividade antifúngica isolada e associada à anfotericina B (AMB) ou fluconazol (FLU) sobre 15 isolados e duas cepas padrão do complexo C. neoformans, além de avaliar a curva de morte, a ação sobre a biossíntese do ergosterol e sobre a membrana celular do fungo e a citotoxicidade dos OEs e constituintes majoritários sobre hemácias humanas. Por meio de testes de suscetibilidade in vitro e de concentração fungicida mínima (CFM), verificou-se melhor atividade para L. cubeba e citral. Os OEs e constituintes majoritários avaliados exibiram concentração inibitória mínima (CIM) entre 16 e 512 μg/mL e CFM entre 64 e 2048 μg/mL, com CIM90 de 128 μg/mL para L. cubeba e citral e de 512 μg/mL para C. martini e geraniol. Para avaliar a associação dos OEs com antifúngicos foi realizado o método de Chequerboard, onde houve indiferença na associação de AMB a L. cubeba (94,1%) e citral (70,6%), e na associação com FLU, L. cubeba foi antagônico (76,5%) e citral indiferente (94,%). C. martini e geraniol apresentaram sinergismo associados a AMB, respectivamente, em 52,9 e 70,6% dos isolados, e indiferença associado ao FLU em 64,7% e 88,2%. A curva de morte de C. gattii 24065 sob ação dos OEs e constituintes majoritários mostrou uma rápida ação fungicida, que ocorreu após uma hora de incubação para L. cubeba, C. martini e geraniol, e em duas horas para o citral. A quantificação do ergosterol após contato com os OEs e constituintes majoritários mostrou que L. cubeba e citral inibiram 100% da biossíntese desse esterol na CIM e 64% para C. martini, o que provavelmente é um mecanismo de ação destes agentes, exceto para o geraniol, que reduziu apenas 12% na CIM. Os OEs e compostos majoritários não apresentaram capacidade de lesionar a membrana plasmática de C. gattii, visto que em média de 2,7% das células foram marcadas com iodeto de propídio e detectadas por citometria de fluxo. O ensaio de citotoxicidade in vitro por hemólise mostrou que os OEs e constituintes majoritários não foram tóxicos nas CIMs e CFMs. Os resultados observados no presente trabalho mostram que os OEs de L. cubeba e C. martini e seus constituintes majoritários, citral e geraniol, são promissores candidatos a antifúngicos.