Thesis (Ph.D.)--University of California, San Francisco, 2004. / Includes bibliographical references. Also available online.

Thesis (MSc (Paraclinical Sciences))--University of Pretoria, 2007. / Includes bibliographical references. Also available in print format.

Submitted by PAULA MASETTI null (paulamasetti@foar.unesp.br) on 2016-05-19T20:53:43Z No. of bitstreams: 1 Tese Corrigida Paula.pdf: 1034060 bytes, checksum: f68e39b40f15f384b00f2c850a864a26 (MD5) / Approved for entry into archive by Felipe Augusto Arakaki (arakaki@reitoria.unesp.br) on 2016-05-23T18:59:36Z (GMT) No. of bitstreams: 1 masetti_p_me_arafo.pdf: 1034060 bytes, checksum: f68e39b40f15f384b00f2c850a864a26 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-05-23T18:59:36Z (GMT). No. of bitstreams: 1 masetti_p_me_arafo.pdf: 1034060 bytes, checksum: f68e39b40f15f384b00f2c850a864a26 (MD5) Previous issue date: 2016-04-05 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / O objetivo deste estudo foi avaliar o efeito cumulativo das soluções desinfetantes na citotoxicidade de resinas acrílicas para base (Vipi Wave) e reembasamento (Tokuyama Rebase II) de próteses. Corpos de prova com 14 mm de diâmetro e 1,2 mm de espessura foram distribuídos em grupos (n=3) de acordo com o tipo de solução: água destilada, digluconato de clorexidina a 2%, perborato de sódio a 3,8%, hipoclorito de sódio a 0,5% e vinagre de maçã, e de acordo com o tempo de imersão: 0, 1, 3 e 6 meses. Os corpos de prova, tanto de base quanto de reembasamento, ficaram 8 horas imersos nas soluções e 16 horas em água destilada, simulando desinfecção noturna das próteses. As soluções foram trocadas diariamente. Após os diferentes períodos de imersão, as amostras foram colocadas em meio de cultura por 24 horas para obtenção de extratos para análise da citotoxicidade sobre queratinócitos humanos (HaCaT: 0341). O metabolismo celular foi avaliado pelo teste Alamar Blue ®. Empregou-se análise de variância (ANOVA) e teste de Tukey, com significância de 5%. Os resultados demonstraram que o tipo de resina não teve influência sobre o metabolismo celular. Além disso, a imersão das amostras de resina acrílica para base e reembasamento de próteses em água destilada, perborato de sódio a 3,8% e hipoclorito de sódio a 0,5% não influenciou o metabolismo celular dos queratinócitos, independentemente do tempo de imersão. Os extratos obtidos a partir da imersão das amostras em digluconato de clorexidina a 2% ou em vinagre de maçã durante 3 e 6 meses foram considerados intensamente citotóxicos. Pôde-se concluir que o digluconato de clorexidina a 2% e o vinagre de maça aumentaram citotoxicidade de resinas acrílicas para base e reembasamento de próteses. / The objective of this study was to evaluate the cumulative effect of disinfectant solutions in cytotoxicity base acrylic resins (Vipi Wave) and reline (Tokuyama Rebase II) of dentures. Samples of 14 mm diameter and 1.2 mm thick were distributed in groups (n = 3) according to the type of disinfectant solution: distilled water, 2% chlorhexidine digluconate, 3.8 % sodium perborate, 0.5% sodium hypochlorite and apple vinegar and in accordance with the immersion time: 0, 1, 3 and 6 months. The samples of both base and of reline, eight hours were immersed in solutions and 16 hours in distilled water, simulating night disinfection of prostheses. The solutions were changed daily. After different periods of immersion, the samples were placed in culture medium for 24 hours to obtain extracts for analysis of cytotoxicity on human keratinocyte (HaCaT: 0341). The cellular metabolism was assessed by Alamar Blue ® test. It used analysis of variance (ANOVA) and Tukey test, with 5% significance. The results demonstrated that the resin type had no influence on cellular metabolism. Furthermore, the immersion of the samples in acrylic resin base and reline dentures in distilled water, 3.8% sodium perborate and 0.5% sodium hypochlorite did not influence the cellular metabolism of keratinocytes, regardless of the time of immersion. The extracts obtained from immersing the samples 2% chlorhexidine digluconate or apple vinegar for 3 and 6 months were considered strongly cytotoxic. It was concluded that chlorhexidine digluconate 2% and apple vinegar increased cytotoxicity of denture base and reline acrylic resins.

Submitted by CARLA CAROLINE DE OLIVEIRA DUQUE null (carlacoduque@hotmail.com) on 2016-05-19T21:24:16Z No. of bitstreams: 1 Carla corr final 19.05.26 Repositorio Unesp.pdf: 6964321 bytes, checksum: 22480753de2d82fb176b13a6a33d913e (MD5) / Approved for entry into archive by Felipe Augusto Arakaki (arakaki@reitoria.unesp.br) on 2016-05-23T20:16:17Z (GMT) No. of bitstreams: 1 duque_cco_me_arafo.pdf: 6964321 bytes, checksum: 22480753de2d82fb176b13a6a33d913e (MD5) / Made available in DSpace on 2016-05-23T20:16:17Z (GMT). No. of bitstreams: 1 duque_cco_me_arafo.pdf: 6964321 bytes, checksum: 22480753de2d82fb176b13a6a33d913e (MD5) Previous issue date: 2016-03-23 / Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico (CNPq) / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP) / Tem sido demonstrado que a susceptibilidade do complexo dentino-pulpar aos efeitos adversos do clareamento dental apresenta uma relação direta com a espessura de esmalte/dentina do substrato dental. Desta forma, o objetivo do presente estudo foi avaliar o efeito estético e biológico de um gel clareador contendo 10% de peróxido de hidrogênio (H2O2) aplicado por diferentes períodos sobre a superfície de discos simulando a espessura de incisivos inferiores (ICI) e pré-molares superiores (PMS). Discos de esmalte/dentina, provenientes de incisivos bovinos, com 2,3 e 4,0 mm de espessura foram adaptados a câmaras pulpares artificiais e distribuídos nos Grupos ICI e PMS, respectivamente. O gel clareador com 10% de H2O2 foi aplicado na superfície de esmalte por 3x15, 1x15 ou 1x5 minutos. Como controle positivo, um gel com 35% de H2O2 aplicado por 3x15 minutos (protocolo tradicional) foi empregado. Nenhum tratamento foi realizado na superfície de esmalte no grupo controle negativo. O meio de cultura em contato com a dentina imediatamente após o clareamento (extrato) foi coletado e aplicado por 1 hora sobre células pulpares humanas. A viabilidade e morfologia celular foram avaliados imediatamente após exposição aos extratos (T1), bem como 72 horas pós-tratamento (T2). O estresse oxidativo e a quantificação do H2O2 nos extratos também foram analisados em T1. A atividade de ALP (atividade de fosfatase alcalina) e deposição de nódulos de mineralização (NM) foram avaliados em períodos de 14 e 21 dias pós-clareamento, respectivamente. De forma a avaliar a eficácia estética dos protocolos testados nas diferentes condições experimentais, mensurou-se ainda a alteração de cor (ΔE) durante seis sessões clareadoras. De uma forma geral, observou-se que todos os protocolos experimentais com gel a 10% de H2O2 promoveram diminuição dos efeitos deletérios promovidos pelo protocolo tradicional. O protocolo 10% 3x15 causou redução significativa na viabilidade celular em relação ao controle negativo no período T1, em ambos os Grupos ICI e PMS, sendo que as células expostas a este protocolo no Grupo ICI não demonstraram capacidade proliferativa em T2. As alterações morfológicas, a intensidade do estresse oxidativo e a redução nos marcadores fenotípicos (ALP e NM) também foram mais intensos para este protocolo nos Grupos ICI e PMS. Para os protocolos 10% 1x15 ou 1x5 minutos, ausência de redução significante na viabilidade celular foi observada, independente da espessura. No entanto, estresse oxidativo significativo foi observado nas células do Grupo ICI. Estes protocolos promoveram redução na atividade de ALP, a qual foi proporcional ao tempo de contato e espessura do substrato dental; entretanto não se observou redução na deposição de NM aos 21 dias. Valores de ΔE similares ao protocolo tradicional foram observados para os protocolos 10% 3x15 e 10% 1x15 no Grupo ICI após 4 e 6 sessões, respectivamente. Para o Grupo PMS, este parâmetro foi atingido apenas para o protocolo 10% 3x15 após 6 sessões clareadoras. Concluiu-se que a espessura do substrato dental influenciou significativamente na citotoxicidade trans-amelodentinária do gel com 10% de H2O2. A aplicação deste gel por períodos de 45 ou 15 minutos sobre discos simulando a espessura de incisivos inferiores minimizou significativamente a toxicidade celular e promoveu clareamento tão efetivo quanto o protocolo tradicionalmente empregado. / The susceptibility of pulp-dentin complex to the adverse effects of tooth bleaching therapies has a direct relationship with the thickness of dental substrate. Therefore, the aim of this study was to assess the biologic and esthetic effect of a 10% hydrogen peroxide (H2O2) bleaching gel applied for different periods onto enamel/dentin discs simulating the thickness of low incisors (LI) and upper pre-molars (PM). Enamel/dentin discs from bovine incisors measuring 2.3 and 4.0 mm were adapted to artificial pulp chambers and distributed into the IC Group (low incisors) and PM Group (upper premolars), respectively. The enamel surface was bleached with a 10% H2O2 gel for 3x15, 1x15 or 1x5 minutes. The 35% H2O2 gel applied for 3x15 minutes was used as positive control (traditional therapy) and no treatment was performed on negative control group. The culture medium immediately after bleaching (extract) was applied for 1 hour on human dental pulp cells. Cell viability and morphology were evaluated immediately after bleaching (T1) and 72 h thereafter (T2). Oxidative stress and the amount of H2O2 in culture medium were also quantified at T1. The ALP activity and mineralized nodule (MN) deposition were assessed 14 and 21 days after bleaching, respectively. The color change (ΔE) of enamel was analyzed throughout six bleaching sessions. Overall, the experimental protocols with the 10% H2O2 gel minimized significantly the negative effects of traditional therapy to cultured pulp cells. The protocol 10% 3x15 promoted significant cell viability reduction in comparison with negative control at T1, in both, IC and PM Groups; however, the cells of IC Group did not feature proliferative capability at T2. The morphologic alterations, oxidative stress intensity and reduction on phenotype markers (ALP and NM) expression were also more intense on IC Group for this bleaching protocol. Regarding the protocols 10% 1x15 and 1x5, no significant cell viability reduction related to negative control was observed regardless of the thickness of dental substrate. Nevertheless, significant oxidative stress was observed on cells from IC Group. These protocols caused significant reduction of ALP activity in comparison to negative control, which intensity being proportional to enamel/dentin thickness; however, no reduction on NM was detected at 21 days post-bleaching. Similar ΔE values as positive control were found for the 10% 3x15 and 1x15 protocol on IC Group after 4 and 6 sessions, respectively. For PM Group, this feature was reached out after 6 bleaching sessions for the 10% 3x15 protocol. It was concluded that the enamel/dentin thickness of dental substrate played a significant role on the trans-enamel and trans-dentinal cytotoxicity of a 10% H2O2 bleaching gel on human dental pulp cells in vitro. Application of gel during 45 or 15 minutes onto thin dental substrate minimizes significantly the cell toxicity in comparison to high concentrated gels (35%) associated with similar esthetic outcome by increasing the number of bleaching sessions. / FAPESP: 2014/07229-6 / CNPq: 442336/2014-4

Submitted by Lara Oliveira (lara@ufersa.edu.br) on 2017-08-09T21:59:31Z No. of bitstreams: 1 NaamaJAM_DISSERT.pdf: 599336 bytes, checksum: 04da1dc529b48d474733360a8a76b477 (MD5) / Approved for entry into archive by Vanessa Christiane (referencia@ufersa.edu.br) on 2017-08-17T22:39:28Z (GMT) No. of bitstreams: 1 NaamaJAM_DISSERT.pdf: 599336 bytes, checksum: 04da1dc529b48d474733360a8a76b477 (MD5) / Approved for entry into archive by Vanessa Christiane (referencia@ufersa.edu.br) on 2017-08-17T22:41:33Z (GMT) No. of bitstreams: 1 NaamaJAM_DISSERT.pdf: 599336 bytes, checksum: 04da1dc529b48d474733360a8a76b477 (MD5) / Made available in DSpace on 2017-08-17T22:41:40Z (GMT). No. of bitstreams: 1 NaamaJAM_DISSERT.pdf: 599336 bytes, checksum: 04da1dc529b48d474733360a8a76b477 (MD5) Previous issue date: 2015-02-11 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / The species Allium cepa is widely used in studies such as biological indicator of toxicity and can be affected by other plant extracts through allelopathy. Many toxic plants of livestock interest have allelopathic compounds and cause damage to animal health. Among these plants is Licania rigida (oiticica). The objective of this study was to evaluate the toxic and cytotoxic effects of L. rigida extracts in bulbs of A. cepa. The bulbs were incubated in distilled water (negative control) and at concentration 5 mg/L, 50 mg/L and 300 mg/L of aqueous extracts of dried and fresh leaves. It was evaluated the root growth and relative inibition. With the bulbs blades were made of meristematic root cells for the evaluation of cytotoxicity. The extracts of the dry and fresh leaves in bulbs caused inhibition at concentrations of 5 mg/L and 300 mg/L, while the concentration of 50 mg/L stimulated. It was not observed cytotoxic activity of the aqueous extracts of dried and fresh leaves, because there were no statistically significant differences / Plantas tóxicas de interesse pecuário ocasionam prejuízos relevantes aos produtores. No Nordeste brasileiro, essas plantas causam perdas econômicas diretas e indiretas por prejudicarem a saúde dos animais. Entre estas plantas está incluída a espécie Licania rigida, popularmente denominada oiticica. É encontrada na maioria dos estados do Nordeste e suas folhas podem ser utilizadas na alimentação de caprinos e ovinos na região do semiárido. Foram avaliados os efeitos tóxico, citotóxico e mutagênico de extratos aquosos de folhas de L. rigida em Allium cepa (cebola) e em camundongos Swiss (Mus musculus). Para avaliações em bulbos de cebola (crescimento de raízes e índice mitótico) foram utilizados folhas secas e frescas, no seguinte delineamento experimental: controle negativo: (água destilada); concentração de 5 mg/L, 50 mg/L e 300 mg/L do extrato. E para camundongos foram utilizadas apenas o extrato de folhas secas para avaliação comportamental, de mortalidade (DL50), mutagenicidade (teste do micronúcleo) e citotoxicidade (células binucleadas). Não houve citotoxicidade, mas sim efeito subletal na concentração de 300 mg/L do estrato de folhas frescas e pode ter ocorrido efeito alelopático dos dois tipos de extratos sobre os bulbos de cebola. Em camundongos, o extrato de folhas secas ocasionou mudanças comportamentais e apresentou toxicidade (DL50=502,76 mg/kg). Não foram evidenciadas mutagenicidade e citotoxicidade, pois os resultados entre os tratamentos não apresentaram diferenças estatisticamente significativas (α=0,05) / 2017-08-09

Introdução: O objetivo do presente estudo foi analisar a citotoxicidade e biocompatibilidade de soluções de hipoclorito de cálcio (Ca(OCl)2) comparadas a soluções de hipoclorito de sódio (NaOCl) in vitro em cultura de fibroblastos 3T3 e in vivo em ratos. Metodologia: Culturas de fibroblastos 3T3 foram expostas a diferentes concentrações de hipoclorito de cálcio e sódio e foi realizado um ensaio de “scratch”. Além disso, a taxa de viabilidade foi analisada utilizando o teste Azul de Trypan. As soluções a 1 e 2,5% foram, também, injetadas no tecido conjuntivo de 18 ratos Wistar de 18 semanas de idade. A reação inflamatória tecidual foi avaliada em 2h, 24h e 14 dias após as injeções e as amostras foram qualitativamente analisadas em microscópio óptico. Análise estatística foi realizada utilizando teste ANOVA e post hoc de Tukey para testes in vitro e Kruskal‐Wallis e post hoc de Dunn para o teste in vivo (α=.05). Resultados: No ensaio de “scratch”, Ca(OCl)2 não apresentou diferença estatística em relação ao controle no período de 24h (p<0.05). NaOCl e Ca(OCl)2 a 0.0075% e 0.005% apresentaram resultados de viabilidade similar ao grupo controle positivo (p > 0.05) no ensaio Azul de Trypan. No teste in vivo, Ca(OCl)2 1% mostrou uma diminuição significativa de neutrófilos entre 2h e 24h (p=0.041) e entre 2h e 14d (p=0.017). Não houve diferença estatística entre os grupos para linfócitos/plasmócitos e macrófagos. Conclusão: Ca(OCl)2 mostrou resultados favoráveis de viabilidade e induziu um baixo nível de resposta inflamatória tecidual, apresentando, assim, citotoxicidade e biocompatibilidade aceitáveis para uma solução irrigadora. / Introduction: The aim of the present study was to analyze cytotoxicity in vitro on cultured 3T3 fibroblasts and inflammatory tissue reaction in vivo on rats to calcium hypochlorite (Ca(OCl)2) solutions compared with sodium hypochlorite (NaOCl) solutions. Methods: Cultured 3T3 fibroblasts were exposed to different concentrations of calcium and sodium hypochlorite and a scratch assay was performed. The viability rate was analyzed with Trypan Blue assay. A. The 1 and 2.5% solutions were still injected into the subcutaneous tissues of eighteen male Wistar rats aged 18 weeks. Inflammatory tissue reaction was evaluated at 2h, 24h and 14 days after the injections and the samples were qualitatively analyzed through a light microscope. Statistical analysis was assessed by ANOVA and Tukey post hoc test for in vitro assays and by Kruskal-­‐Wallis and Dunn post hoc test for in vivo assay (α=.05). Results: In scratch assay, Ca(OCl)2 showed no statistically significant difference to control group at 24h (p<0.05). 0.0075% and 0.005% NaOCl and Ca(OCl)2 presented results similar to positive control group (p > 0.05) on Trypan Blue assay. In in vivo assay, 1% calcium hypochlorite group showed a significant decrease of neutrophils at 2h and 24h (p=0.041) and 2h and 14d (p=0.017). There was no statistically significant difference for lymphocytes/plasmocytes and macrophages among groups. Conclusions: Ca(OCl)2 showed favorable results of viability and induced an low level of inflammatory response, thus presenting an acceptable cytotoxicity and biocompatibility for an irrigant solution.

Submitted by Ana Maria Fiscina Sampaio (fiscina@bahia.fiocruz.br) on 2012-09-04T17:32:14Z No. of bitstreams: 1 Vanessa Investigacao do efeito cititóxico....pdf: 1637760 bytes, checksum: 53a0a5f0c495bc04a29d54e8f4415870 (MD5) / Made available in DSpace on 2012-09-04T17:32:14Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Vanessa Investigacao do efeito cititóxico....pdf: 1637760 bytes, checksum: 53a0a5f0c495bc04a29d54e8f4415870 (MD5) Previous issue date: 2011 / Fundação Oswaldo Cruz. Centro de Pesquisas Gonçalo Moniz. Salvador, Bahia, Brasil / Investigar a capacidade antitumoral do extrato metanólico de Bixa orellana em células neoplásicas de Glioblastoma multiforme (GL-15) e Glioma murino (C6), sem toxicidadade para as células astrocitárias normais in vitro. Métodos e resultados: Caracterização do extrato por espectrofotometria por absorção de luz visível apresentou picos em 286, 363 e 435 nm. Determinou-se os teores de bixina e compostos fenólicos – 0,17 mg/mg e 0,05 mg por equivalência de pirogalol/mg de extrato seco, respectivamente. A citoxicidade foi investigada pelo teste de Brometo de 3-(4,5-dimetiltiazol-2-il)-2,5-difeniltetrazolium. A Mínima Concentração Citotóxica (MCC) para GL-15 foi 180 e 80 μg/mL para C6, para astrócitos foi 240 μg/mL, após 48 horas de tratamento. O teste de exclusão com azul tripan confirmou a EC50 para GL-15 após 24 horas. A análise morfológica foi realizada por microscopia de contrataste de fase e fluorescência. Comprovou-se a diminuição de células neoplásicas e alterações celulares na MCC em astrócitos. A capacidade de fluorescência foi comprovada em GL-15. A citotoxicidade não depletou GSH. Investigou-se alterações de ciclo celular e morte celular por citometria de fluxo. Alterações de ciclo celular não foram evidenciadas. O tipo de morte celular foi investigado com marcação para anexina V e Iodeto de Propídio comprovou morte por necrose em GL-15 e por apoptose tardia em C6, os astrócitos apresentaram valores pequenos de morte por apoptose tardia e necrose. Conclusão: Os dados indicam um potencial antitumoral das substâncias presentes neste extrato para células neoplásicas sem ser tóxico para células normais. / This work investigated the hypothesis that the methanol extract of Bixa orellana decreases the viability of GL-15 and C6 cells, without being toxic to normal astrocytes in vitro. Methods: The methanol extract of B. orellana seeds was obtained and characterized by UV-Vis spectrophotometry. The cytotoxic effects were assayed in vitro using the 3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)- 2,5-diphenyltetrazolium bromide method. The cell morphology was investigated by phase contrast and fluorescence microscopy. The depletion of reduced glutathione (GSH) was observed by fluorescence microscopy. The effects on cell cycle and the mode of cell death was studied by flow cytometry. Results: The contents of bixin and phenol were 0.17 mg/mg of extract and 0.05 mg of pyrogallol equivalent/mg of extract, respectively. Three peaks were observed at 286, 363, and 435 nm. The extract killed cells in a dose-dependent manner. The minimum cytotoxic concentrations in the two tumoral cells (GL-15 and C6) were respectively: 180 μg/mL and 80 μg/mL, meanwhile in astrocytes it was 240 μg/mL after 48 hours. The trypan blue assay confirmed the cytotoxic effect to GL-15 cells. Morphological degeneration of treated glioma cells was observed. The same was observed with astrocytes, but at a higher concentration. Treated cells became fluorescent, probably due to incorporation of bixin. The treatment neither depleted GSH, nor interfered on the cell cycle. The main kind of cell death was necrosis. Conclusions: Compounds present in B. orellana seeds are potentially cytotoxic to glioma cells, meanwhile primary astrocytes are more resistant.

Tricomoníase é a doença sexualmente transmissível não-viral mais comum no mundo e pode gerar sérias consequências na saúde reprodutiva, câncer e transmissão e aquisição do HIV. Por esta razão, esta infecção resulta em um pesado fardo para os sistemas de saúde pública. O único tratamento aprovado para esta infecção, que consiste nos 5-nitromidazois metronidazol e tinidazol, apresenta efeitos adversos e há uma subestimada taxa de resistência da infecção, atualmente considerada uma doença negligenciada, a estes fármacos. Portanto, há uma necessidade urgente de novas alternativas terapêuticas para a tricomoníase. Chalconas são uma família de moléculas que apresenta várias aplicações biológicas, como atividade contra diversos patógenos, incluindo protozoários patogênicos. Este trabalho apresenta o potencial anti-Trichomonas vaginalis de derivados de chalcona sintetizados e seus efeitos sobre os trofozoítos. Os valores de IC50 dos compostos mais ativos variaram de 27,5 a 76,4 μM, e as moléculas 4’-hidroxichalcona e 3’-aminochalcona apresentaram os valores mais baixos (27,5 e 28,9 μM). Estes dois compostos foram citotóxicos contra a linhagem de células epiteliais vaginais HMVII, consequentemente apresentaram baixos Índices de Seletividade; contudo, ao se utilizar larvas de Galleria mellonella, como modelo de toxicidade in vivo, não foi observada diminuição da viabilidade após o tratamento. As moléculas também não provocaram hemólise em eritrócitos humanos em 1 e 24 horas. Os compostos não induziram significativa produção de espécies reativas de oxigênio (EROs) nos trofozoítos. Neutrófilos humanos apresentaram aumento na produção de EROs quando coincubados com trofozoítos tratados com os compostos. Os resultados indicam que as chalconas são uma família de moléculas com potencial atividade contra T. vaginalis. / Trichomoniasis is the most common non-viral sexually transmitted disease worldwide and can lead to serious consequences in reproductive health, cancer and HIV acquisition. For this reason, this infection results in a heavy burden for public health systems. Current approved treatment, which consists in 5-nitromidazole drugs, metronidazole and tinidazole, present adverse effects and there is underestimate drug resistance data on this parasitic infection, currently considered a neglected disease. Therefore, there is an urgent need for new alternatives for trichomoniasis treatment. Chalcones are a family of molecules that present various biological applications, such as activity against many pathogenic organisms including protozoan pathogens. This study presents the anti-Trichomonas vaginalis potential of synthetized chalcone derivatives and their effects on the trophozoites. IC50 values of the most active compounds ranged from 27.5 to 76.4 μM, and 4’-hydroxychalcone and 3’- aminochalcone presented the lowest values of IC50 (27.5 and 28.9 μM). These two compounds showed cytotoxicity against HMVII vaginal epithelial cells, thus presenting a low Selectivyty Index; however, when Galleria mellonella larvae were used as model for in vivo toxicity no significant decrease in viability after treatment was observed. The chalcones also did not induce hemolysis in human erythrocytes The compounds did not induce significant reactive oxygen species (ROS) production in the trophozoites. Human neutrophils have increased ROS production when exposed to treated trophozoites. Results indicate that chalcones are a family of molecules with potential activity against T. vaginalis.

Made available in DSpace on 2015-09-17T15:26:41Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2015-06-19. Added 1 bitstream(s) on 2015-09-17T15:45:21Z : No. of bitstreams: 1 000846545_20160619.pdf: 570368 bytes, checksum: 359b7619b228700f4adb6cdcb47ce67e (MD5) Bitstreams deleted on 2016-06-20T12:14:09Z: 000846545_20160619.pdf,. Added 1 bitstream(s) on 2016-06-20T12:14:48Z : No. of bitstreams: 1 000846545.pdf: 1592978 bytes, checksum: c27d71a38bf3f6a65e31951c06bb5e3b (MD5) / carcinoma hepatocelular (CHC) é um tumor primário mais frequente do fígado, sendo a terceira causa de mortalidade por câncer. Dentre os tumores hepáticos primários o CHC é responsável por quase 90% dos casos. Frente a busca para o desenvolvimento da produção de novos fármacos derivados de produtos naturais, os fungos endofíticos apresentam-se como fontes promissoras. Estudos recentes mostraram que os extratos de fungos endofíticos tem várias atividades, como propriedades anti-tumorais. O objetivo do presente estudo foi avaliar a capacidade de citotóxica dos extratos brutos produzidos pelos fungos endofíticos isolados de Eugenia jambolana nas linhagens hepatocarcinoma murinho (Hepa 1c1c7), linhagem humana de hepatocarcinoma (Hep G2) e queratinócito normal de pele (HaCat) e verificar a indução de apoptose, atividade de caspase, genotoxicidade, mutagenicidade e identificar a distribuição no ciclo celular. Nossos resultados indicam que ambos os extratos apresentaram atividade inibidoras. O extrato bruto do fungo Pseudofusicoccum stromaticum (Ej-fm1) apresentou maior seletividade para Hepa1c1c7, apresentando CI50 de 58 μg/mL, com uma inibição celular de 63,4% e 38,4% para as concentrações de 100 μg/mL e 50 μg/mL. Enquanto HepG2 e HaCat não apresentaram morte celular significativa. O extrato de Neofusicoccum sp. (Ej-fv1) induziu alta citotoxicidade, apresentando inibição celular 67,83% apenas na concentração de 100 μg/mL com um valor de CI50 de 89 μg/mL. HepG2 e HaCaT demonstraram inibição celular significativa (38,4% e 43,5%, respectivamente), mas também apenas na maior concentração (100 μg/mL). Na avaliação de apoptose usando o método Hoechst/Iodeto de propídeo em Hepa1c1c7, o extrato (Ej-fm1) apresentou diferença estatística para a presença de apoptose tardia, bem como necrose. Mas para o extrato (Ej-fv1) houve morte celular significativa apenas na concentração de 100 μg/mL para a apoptose precoce e... / Hepatocellular carcinoma (HCC) is more frequent primary liver cancer, and third most commum cause of cancer mortality. Among primary liver tumors HCC is responsible for nearly 90% of cases. Compared to search for the development of production of novel drugs from natural products, the endophytic fungi have been presented as promising sources. Recent studies showed that extracts of endophytic fungi have various activities, such as, properties antitumor. The aim of this study was to evaluate cytotoxicity capacity of the crude extract isolated endophytic fungus ripe fruit, Ej-fm1 and unripe fruit, Ej-FV1 Eugenia jambolana in Murine hepatoma cell (Hepa 1c1c7), Human hepatocarcinoma cell line (Hep G2) and spontaneously immortalized human keratinocytes (HaCaT) and check the induction of apoptosis, caspase activity, genotoxic activity, mutagenic and distribution of cell cycle. Our findings indicate that demonstrated that both extracts showed inhibitory activities. The crude extract from Pseudofusicoccum stromaticum (Ej-fm1) possessed more selectivity against Hepa1c1c7 showed IC50, value of 58 μg/mL, having a cellular inhibition 63.4% and 38.4% for the concentration 100μg / ml and 50μg/ml. While for HepG2 and HaCat, no significant cell death. The extract of Neofusicoccum sp.(Ej-fv1) induced high cytotoxicity, showed cellular inhibition 67.83% just at concentration 100μg/ml with IC50 value of 89 μg/mL. HepG2 and HaCaT cell also showed significant inhibition (38.4% and 43.5%, respectively) also only at the highest concentration. To evaluate apoptosis using Hoechst/ Propidium iodide method in Hepa1c1c7 cells, the extract (Ej-fm1) showed statistical difference for presence of late apoptosis, as well as necrosis. But the extract (Ej-fv1) there are significant cell death only in the concentration of 100μg / mL for early apoptosis and necrosis, noting a concentration-response for early apoptosis. About the analyses of cell death mechanisms, we ...

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:32:41Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2007-11-22Bitstream added on 2014-06-13T20:04:04Z : No. of bitstreams: 1 monnazzi_lgs_dr_arafcf.pdf: 1628105 bytes, checksum: 439e61c2131f392d13c659297a95020d (MD5) / Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico (CNPq) / Universidade Estadual Paulista (UNESP) / As três espécies patogênicas do gênero Yersinia, Y. pestis, Y. enterocolitica e Y. pseudotuberculosis, compartilham um tropismo pelos tecidos linfóides e um plasmídeo de 70-kb que é essencial para a virulência. O plasmídeo codifica um sistema de secreção do tipo III e proteínas efetoras chamadas Yops (Yersinia outer proteins). Este sistema de secreção é responsável por translocar as Yops para dentro das células do hospedeiro, onde elas interagem com alvos específicos e alteram as funções destas células. As Yops são capazes de modular a resposta imune do hospedeiro, permitindo à bactéria se replicar extracelularmente nos tecidos e órgãos linfóides. Embora haja muita informação sobre os mecanismos usados pela Yersinia para evadir do sistema imune inato de defesa, pouco se sabe sobre como ela afeta a resposta imune adaptativa in vivo. O objetivo deste trabalho foi analisar a influência das Yops E, H e M, translocadas pela Y. pseudotuberculosis, na colonização e persistência da bactéria no baço e fígado dos animais infectados, nas quantidades de LT-CD4 e LT-CD8 durante a infecção e na produção das principais citocinas Th1 e Th2 por estas subpopulações de linfócitos. Além disso, foi verificado o papel destas Yops sobre a ativação do fator nuclear κB (NF-κB) e sobre a atividade citotóxica dos LT-CD8. Para isso, camundongos BALB/c fêmeas foram infectados intravenosamente com a amostra selvagem de Y. pseudotuberculosis (WT), ou com amostras mutantes incapazes de secretar as Yops E, H e M (YopE-, YopH- e YopM-), ou ainda com a amostra curada do plasmídeo de virulência (YpIII). No 5°, 7°, 14° e 21° dia pós-infecção (pi), os animais foram sacrificados e as células esplênicas foram obtidas de camundongos infectados e de camundongos não infectados (grupo controle). Os níveis de colonização no baço e no fígado foram determinados por... / The three pathogenic species of the genus Yersinia, Y. pestis, Y. enterocolitica and Y. pseudotuberculosis, share a tropism for lymphoid tissues and a 70-kb plasmid essential for virulence. The plasmid encodes a type III secretion system and effector proteins called Yops (Yersinia outer proteins). This secretion system is responsible for translocating the Yops into the host cells, where they interact with specific host targets and alter the functions of these cells. Yops are able to modulate the host immune defenses allowing the bacteria to replicate extracellularly in lymphoid tissues and organs. Although there is ample information on the mechanisms used by Yersinia to evade the innate immune system, very little is known about how it affects the adaptive immune response in vivo. The aim of this research was to analyze the influence of translocated Yops E, H and M of Y. pseudotuberculosis on the colonization and persistence of the bacterium in the spleen and liver of infected animals, on the quantities of CD4 and CD8 T cells during the infection and on the production of the main Th1 and Th2 cytokines by these lymphocyte subpopulations. In addition, it was verified the role of these same Yops on the activation of nuclear factor κB (NF- κB) and on the CD8 T cells cytotoxic activity. To this end, female BALB/c mice were infected intravenously with the wild type Y. pseudotuberculosis (WT), or with the mutant strains unable to secrete the Yops E, H and M (YopE-, YopH- and YopM-) or with the plasmid-cured strain (YpIII). On the 5th, 7th, 14th and 21st days post-infection (pi), the animals were sacrificed and the spleen cells were isolated from infected and uninfected mice (control group). The levels of colonization in the spleen and liver were determined by counting the number of colony-forming units. Both the phenotypic analysis of lymphocytes and the intracellular... (Complete abstract click electronic access below)