A multifatoriedade da causa da doença periodontal dificulta sobremaneira o diagnóstico, prognóstico e plano de tratamento. Com o desenvolvimento da biotecnologia dos materiais, acreditamos que a solução para o tratamento das sequelas da doença periodontal esteja próxima de um desfecho favorável ao clínico e ao paciente. Os métodos de controle da doença periodontal ainda são limitados e o surgimento de equipamentos de alta sensibilidade se faz necessário para viabilizar a detecção prévia da perda de inserção. Os parâmetros das distâncias biológicas preconizadas por Gargiulo e colaboradores, atualmente ditam os protocolos dos procedimentos protéticos, estéticos, cirúrgicos e de manutenção dos pacientes periodontalmente tratados, com a finalidade de garantir a homeostasia dos periodontos de sustentação e proteção. Foram realizados por um único operador 396 medidas em 66 dentes adjacentes de 32 pacientes que se submeteriam à tratamento de fixação de implantes osseointegrados, sem distinção de raça ou sexo, com idade compreendida entre 15 e 68 anos, 13 do sexo masculino e 19 do sexo feminino, 4 fumantes e 28 não fumantes. O objetivo da investigação foi analisar a espessura dos tecidos moles com o uso do equipamento SDM - (técnica não invasiva), correlacionando-o com parâmetros já conhecidos para análise das distâncias biológicas como: profundidade de sondagem clínica manual, espessura da crista óssea, distância da margem gengival até o nível ósseo e índice dicotômico de sangramento à sondagem, na tentativa de determinar uma correlação mais acurada entre os parâmetros já conhecidos das distâncias biológicas dos periodontos de proteção e sustentação. Pelos resultados obtidos, concluiu-se neste trabalho que uma crista óssea fina suporta tecido com conteúdo de colágeno mais frágil e condição homeostática pior; a distância da margem gengival à crista óssea apresentou uma média ligeiramente inferior a 2.73mm encontrada por GARGIULO e colaboradores13, ficando na casa dos 2,507mm; as distâncias biológicas nos dentes anteriores são maiores do que nos dentes posteriores; a largura da mucosa ceratinizada é maior nos incisivos e caninos em relação a pré-molares e molares. Existem fortes correlações entre: a profundidade de sondagem e a espessura da mucosa ceratinizada; a profundidade de sondagem e a distância da margem gengival até a crista óssea; a largura e a espessura da mucosa ceratinizada; a profundidade de sondagem (PS) e a distância da margem gengival à crista óssea para os incisivos e caninos. Nos sítios com espessura óssea normal existe uma forte correlação entre a profundidade de sondagem e a distância da margem gengival-crista óssea, assim como entre a largura da mucosa ceratinizada e distância da margem gengival-crista óssea. Nos sítios com espessura óssea grossa, quanto maior a profundidade de sondagem, maior a espessura da mucosa ceratinizada.Quando o índice gengival=0, a espessura da mucosa ceratinizada apresenta também uma forte correlação com a profundidade de sondagem e com a largura da mucosa ceratinizada. / The multiple causes for periodontal disease makes very difficult the diagnosis, prognostic and the treatment planning. With the development of material biotechnology, we believe that the solution to the sequelae from periodontal disease is close to have a favourable outcome both to the clinician and to the patient. The methods to control periodontal disease are still limited and the appearance of high sensitive equipment is necessary to make feasible the previous detection of attachment loss. The parameters of the periodontal spaces advocated by Gargiulo and cols determine the prosthetic, esthetic, and surgical current protocols as well as the maintenance of the treated patients in order to garantee the homeostasis of both protection and supporting periodontium. Three hundred ninety-six measures in adjacent teeth of 32 patients were made by only one clinician, these patients would undergo osseointegrated implants, and they were not distinguished by race or gender, the age group was from 15 to 68 years old, 13 males and 19 females, 4 smokers and 28 non-smokers. The objective of this investigation was to analyse the effectiveness of a sonar to evaluate the soft tissues thickness – SDM – (non-invasive technique), making a relationship with the known parameters of the periodontal spaces such as manual probing depth, the alveolar bone thickness, the distance between the gingival margin to the bone crest and the dichotomic bleeding following probing; trying to determine a more accurated relationship among the parameters of the periodontal spaces already known. According to the obtained results, we concluded that a thin bone crest support a tissue with a more fragile collagen and with worse homeostasis, the distance between the gingival margin to the bone crest showed an average of 2,507 mm, slightly smaller than the one found by Gargiulo and cols, which was 2,73mm; the periodontal spaces in the anterior teeth are bigger than in the posterior ones; the keratinized mucosa width is bigger in incisives and canines than in premolars and molars. There are strong relationships between probing depth and keratinized mucosa thickness; probing depth and distance from gingival margin to bone crest, width and thickness of keratinized mucosa; probing depth and the distance from the gingival margin to the bone crest for incisives and canines. Where there is normal bone thickness, there is a strong relashionship between probing depth and the distance from the gingival margin to the bone crest, as well as between the keratinized mucosa width and the distance from the gingival margin to the bone crest. Where the bone thickness is dense, the bigger is the probing depth, the bigger is the keratinized mucosa thickness. When the gingival index is 0, the keratinized mucosa thickness shows a strong relationship with the probing depth and with the keratinized width.

Orientador: Carlos Rossa Junior / Co-orientador: Morgana Rodrigues Guimarães Stabili / Banca: Márcio Mateus Beloti / Banca: Maria José Hitomi Nagata / Resumo: Curcumin (diferuloylmethane) é um composto polifenólico com efeito antiinflamatório e capacidade de prevenir a atividade osteolítica verificados em modelos in vitro e in vivo. No entanto, uma importante limitação no uso do curcumin são suas pobres propriedades farmacológicas, incluindo absorção e biodisponibilidade. Assim, é de grande interesse a síntese de análogos do curcumin com características bioquímicas que favoreçam suas propriedades farmacológicas, mantendo as características de segurança e efetividade. O objetivo foi avaliar o efeito de composto sintético análogo ao curcumin (CMC 2.24) sobre o processo inflamatório e osteoclastogênese em modelo de doença periodontal in vivo. A doença periodontal foi induzida em ratos por meio de injeção de 30 ug de LPS de Escherichia coli, realizadas 3x/semana durante 2 semanas. Os controles, contralaterais, receberam injeções do mesmo volume do veículo de diluição do LPS (PBS). A administração de CMC (30mg/kg) e curcumin (100mg/kg) foram feitas via intragástrica (gavagem oral) diariamente, durante 15 dias. A expressão de fosfatase ácida tartarato resistente (TRAP), indicativa de diferenciação osteoclástica, foi avaliada por meio de imunohistoquímica, a proporção de células inflamatórias e conteúdo de colágeno, em cortes corados com H/E, por estereometria, a fragmentação do DNA celular indicativa de apoptose foi avaliada por método TUNEL e a reabsorção óssea por análise de microtomografia computadorizada. Nos experimentos in vitro, células derivadas da medula óssea de camundongos C57BL/6, foram estimuladas com RANKL e tratadas com curcumin e CMC em concentração de 10μM, em diferentes períodos. O número de osteoclastos foi avaliado pela visualização do anel de actina, e a expressão gênica de MMP-9, indicativa de atividade osteoclástica, foi avaliada por RT-qPCR. De acordo com os resultados, tanto CMC quanto curcumin reduziram... / Abstract: Curcumin (diferuloylmethane) is a polyphenolic compound with anti-inflammatory properties and the ability to prevent the osteolytic activity both in vitro and in vivo models. The clinical use of curcumin is limited by its poor pharmacological properties, including absorption and bioavailability. This justifies the interest on the synthesis of curcumin analogues with improved pharmacological properties that retain both safety and biological properties of the natural compound. The aim was to evaluate the effect of a curcumin synthetic analogue (CMC 2.24) on RANKL-induced osteoclastogenesis in vitro and on inflammatory-driven bone resorption in a periodontal disease model in vivo. Periodontal disease was induced in rats by injections of LPS from Escherichia coli (30 ug/injection) directly on the gingival tissues, performed 3x/week during 2 weeks. The opposite site (controls) received injections of the same volume of vehicle (PBS). CMC (30 mg/kg) and curcumin (100 mg/kg) were administered by oral gavage daily, during this 2 week experimental period. Tartrate resistant acid phosphatase (TRAP) expression, which is indicative of osteoclast differentiation was assessed by immunohistochemistry, bone resorption was measured by microCT and the proportion of inflammatory cells and collagen was assessed by stereometry on H/E-stained section. Apoptosis was assessed in the gingival tissues and alveolar bone by TUNEL staining. Bone marrow stromal cells from C56Bl/7 mice were stimulated with RANKL in the presence of M-CSF and treated with 10 μM of curcumin or CMC 2.24 at different time points over a 6- day period. The number of the osteoclasts identified by actin-ring formation was counted and gene expression of MMP-9, indicative of osteoclast activity, was assessed by RT-qPCR. Both curcumin and CMC significantly reduced the inflammatory infiltrate (p<0.05 vs vehicle control); however only CMC significantly increased the proportion of collagen fibers in... / Mestre

Orientador: Carlos Rossa Junior / Banca: Karina Gonzales Silverio Ruiz / Banca: Marcia Pinto Alves Mayer / Banca: Alexandra Ivo de Medeiros / Banca: Luis Carlos Spolidorio / Resumo: As interações microrganismo-hospedeiro se iniciam pela detecção de padrões moleculares associados a microrganismos (MAMPs) por receptores semelhantes à Toll (TLR) e por proteínas com domínio de ligação à nucleotídeos e oligomerização (Nod) na resposta imune inata. No entanto, como a cavidade bucal saudável é continuamente colonizada por microrganismos não patogênicos que também apresentam MAMPs, deve haver um mecanismo endógeno de regulação negativa da resposta do hospedeiro para evitar uma resposta exagerada e desnecessária com consequências negativas ao hospedeiro. Os mecanismos associados à distinção de microrganismos comensais e patogênicos na mucosa bucal são ainda pouco compreendidos. As proteínas Nod foram inicialmente descritas como 'TLRs intracelulares' capazes de reconhecer MAMPs no citosol; no entanto, estudos in vitro indicam que Nod têm papel relevante na regulação da expressão de RANKL e OPG induzidas por antígenos microbianos, bem como na modulação da atividade de vias de sinalização intracelular associadas à expressão de citocinas diretamente relacionadas à regulação do turnover do tecido ósseo. Devido à escassez de informações sobre o papel das proteínas Nod na modulação das interações microrganismo-hospedeiro na mucosa oral e com base nestas informações, nossa hipótese é que as proteínas Nod tem um papel relevante na modulação da reação inflamatória e suas consequências, incluindo a reabsorção do osso alveolar. Para testar esta hipótese, os objetivos específicos propostos foram: avaliar em camundongos knockout para Nod1, Nod2 ou Rip2, através de microtomografia computadorizada e avaliações histológicas descritivas, estereométricas e imunohistoquímicas (TRAP), o papel das proteínas Nod na inflamação e reabsorção óssea associadas à doença periodontal experimental induzida por bactérias inativadas por calor... / Abstract: Recognition of pathogenic bacteria by the host is initially mediated by the innate immune response through detection of microbe-associated molecular pattern (MAMPs) by Toll-like receptors (TLR) and Nucleotide-oligomerization domain (Nod) proteins. Since the oral cavity, as well as other mucosal surfaces, is continuously colonized with non-pathogenic bacteria that also present MAMPs, there has to be an endogenous negative regulatory mechanism in place to prevent an overt host response with deleterious consequences. Specifically in the oral mucosa, it is not clear how the immune system is able to quickly distinguish between commensal and pathogenic bacteria and tailor the host response. Nod proteins were initially described as 'intracellular TLRs' that recognize MAMPs associated with bacteria invading the cytosol; however these proteins have been shown to modulate the activation of various signaling pathways involved in the expression of inflammatory genes, including p38 MAPK and NF-κB in concert with TLR stimulation. There is paucity of information on the in vivo role of Nod proteins in the modulation of host-microbe interactions in the oral mucosa. Based on this information, our hypothesis is that Nod proteins play an important role in the modulation of the inflammatory reaction associated with periodontal diseases and its consequences, including alveolar bone resorption. To test this hypothesis, we propose the following specific aims: Assess the role of Nod proteins in the inflammation and bone resorption in experimentally-induced periodontal disease Describe the influence of Nod proteins on the cytokine and signaling networks associated with periodontal disease. / Doutor

Orientador: Luiz Carlos Spolidorio / Banca: Marcelo Nicola Muscará / Banca: Ana Paula de Souza Falloni / Banca: Joni Augusto Cirelli / Banca: Pedro Chaves de Souza / Resumo: As plaquetas são um reservatório natural de diversos mediadores biológicos e, uma vez ativadas, expressam fatores de crescimento pró e anti-angiogênicos, quimiocinas e monoaminas, modulando a ativação e manutenção dos processos inflamatório e de reparo. Os objetivos deste trabalho foram avaliar o impacto do tratamento com drogas antiplaquetárias, aspirina (Asp) e clopidogrel (Clop), sobre a doença periodontal e o processo de reparação dos tecidos periodontais após indução de periodontite experimental em ratos. Para a avaliação do processo inflamatório foram realizadas análise microscópica, análise da expressão das quimiocinas CXCL4 e CCL5 por ELISA e da atividade de mieloperoxidase (MPO). Para avaliação do reparo dos tecidos periodontais, foram realizadas análise microscópica, análise da expressão de CXCL12, CXCL4, CCL5 e PDGF por ELISA, contagem de osteoclastos e vasos sanguíneos através de reações de imunohistoquímica e caracterização das células mesenquimais indiferenciadas por imunohistoquímica para CD 271 e imunofluorescência de dupla marcação utilizando CD 271 associado ao CD45, KI67 e TUNEL. Células mesenquimais indiferenciadas derivadas da medula óssea de humanos foram utilizadas in vitro para avaliação da proliferação celular por imunocitofluorescência. Três dias após a instalação da ligadura, verificou-se que o tratamento com as drogas antiplaquetárias abreviou o processo inflamatório, observado através dos aspectos microscópicos, da redução da atividade da enzima mieloperoxidase (p<0.001), e queda da expressão de CXCL4 (p<0.05), entretanto o tratamento com Clop de forma mais acentuada que o da Asp. Após retirada da ligadura, o tratamento com Clop acelerou o processo de reparo através da redução significativa da expressão de CXCL12, CXCL4, PDGF, número de vasos sanguíneos e osteoclastos; por outro lado, o tratamento com Asp... / Abstract: Platelets are a natural reservoir of several biological mediators and once activated, express growth factors, pro- and anti-angiogenic factors, chemokines and monoamines modulating the activation and maintenance of the inflammatory and repair process. The aim of this study was to evaluate the impact of antiplatelet drugs, aspirin (Asp) and clopidogrel (Clop) on periodontal disease and the repair of periodontal tissues after induction of experimental periodontitis in rats. For the evaluation of the inflammatory process, microscopic evaluation, analysis of the expression of the chemokines CXCL4 and CCL5 by ELISA and myeloperoxidase activity (MPO) were realized. To evaluate periodontal tissue repair we performed microscopic examination, analysis of the expression of CXCL12, CXCL4, CCL5 and PDGF by ELISA, and blood vessels and osteoclast count by immunohistochemistry. Also, characterization of undifferentiated mesenchymal stem cells by immunohistochemical staining for CD 271 (stem cell marker) and immunofluorescence double labeling using CD 271 associated with CD45, Ki67 and TUNEL were realized. Undifferentiated mesenchymal stem cells derived from human bone marrow were used for in vitro evaluation of cell proliferation by immunocitofluorescence. Three days after ligature placement, we found that treatment with antiplatelet drugs abbreviated the inflammatory process observed by the microscopic analysis, reduction of myeloperoxidase activity (p <0.001) and decreased the expression of CXCL4 (p <0.05), but treatment with Clop more pronounced than Asp. After removal of the ligature, Clop treatment accelerated the repair process by significantly reducing the expression of CXCL12, CXCL4, PDGF number of blood vessels and osteoclasts, on the other hand, treatment with Asp only showed significant effects in reducing the expression of CXCL12 and CXCL4. In turn, Clop treatment increased the number of osteoblasts... / Doutor

A multifatoriedade da causa da doença periodontal dificulta sobremaneira o diagnóstico, prognóstico e plano de tratamento. Com o desenvolvimento da biotecnologia dos materiais, acreditamos que a solução para o tratamento das sequelas da doença periodontal esteja próxima de um desfecho favorável ao clínico e ao paciente. Os métodos de controle da doença periodontal ainda são limitados e o surgimento de equipamentos de alta sensibilidade se faz necessário para viabilizar a detecção prévia da perda de inserção. Os parâmetros das distâncias biológicas preconizadas por Gargiulo e colaboradores, atualmente ditam os protocolos dos procedimentos protéticos, estéticos, cirúrgicos e de manutenção dos pacientes periodontalmente tratados, com a finalidade de garantir a homeostasia dos periodontos de sustentação e proteção. Foram realizados por um único operador 396 medidas em 66 dentes adjacentes de 32 pacientes que se submeteriam à tratamento de fixação de implantes osseointegrados, sem distinção de raça ou sexo, com idade compreendida entre 15 e 68 anos, 13 do sexo masculino e 19 do sexo feminino, 4 fumantes e 28 não fumantes. O objetivo da investigação foi analisar a espessura dos tecidos moles com o uso do equipamento SDM - (técnica não invasiva), correlacionando-o com parâmetros já conhecidos para análise das distâncias biológicas como: profundidade de sondagem clínica manual, espessura da crista óssea, distância da margem gengival até o nível ósseo e índice dicotômico de sangramento à sondagem, na tentativa de determinar uma correlação mais acurada entre os parâmetros já conhecidos das distâncias biológicas dos periodontos de proteção e sustentação. Pelos resultados obtidos, concluiu-se neste trabalho que uma crista óssea fina suporta tecido com conteúdo de colágeno mais frágil e condição homeostática pior; a distância da margem gengival à crista óssea apresentou uma média ligeiramente inferior a 2.73mm encontrada por GARGIULO e colaboradores13, ficando na casa dos 2,507mm; as distâncias biológicas nos dentes anteriores são maiores do que nos dentes posteriores; a largura da mucosa ceratinizada é maior nos incisivos e caninos em relação a pré-molares e molares. Existem fortes correlações entre: a profundidade de sondagem e a espessura da mucosa ceratinizada; a profundidade de sondagem e a distância da margem gengival até a crista óssea; a largura e a espessura da mucosa ceratinizada; a profundidade de sondagem (PS) e a distância da margem gengival à crista óssea para os incisivos e caninos. Nos sítios com espessura óssea normal existe uma forte correlação entre a profundidade de sondagem e a distância da margem gengival-crista óssea, assim como entre a largura da mucosa ceratinizada e distância da margem gengival-crista óssea. Nos sítios com espessura óssea grossa, quanto maior a profundidade de sondagem, maior a espessura da mucosa ceratinizada.Quando o índice gengival=0, a espessura da mucosa ceratinizada apresenta também uma forte correlação com a profundidade de sondagem e com a largura da mucosa ceratinizada. / The multiple causes for periodontal disease makes very difficult the diagnosis, prognostic and the treatment planning. With the development of material biotechnology, we believe that the solution to the sequelae from periodontal disease is close to have a favourable outcome both to the clinician and to the patient. The methods to control periodontal disease are still limited and the appearance of high sensitive equipment is necessary to make feasible the previous detection of attachment loss. The parameters of the periodontal spaces advocated by Gargiulo and cols determine the prosthetic, esthetic, and surgical current protocols as well as the maintenance of the treated patients in order to garantee the homeostasis of both protection and supporting periodontium. Three hundred ninety-six measures in adjacent teeth of 32 patients were made by only one clinician, these patients would undergo osseointegrated implants, and they were not distinguished by race or gender, the age group was from 15 to 68 years old, 13 males and 19 females, 4 smokers and 28 non-smokers. The objective of this investigation was to analyse the effectiveness of a sonar to evaluate the soft tissues thickness – SDM – (non-invasive technique), making a relationship with the known parameters of the periodontal spaces such as manual probing depth, the alveolar bone thickness, the distance between the gingival margin to the bone crest and the dichotomic bleeding following probing; trying to determine a more accurated relationship among the parameters of the periodontal spaces already known. According to the obtained results, we concluded that a thin bone crest support a tissue with a more fragile collagen and with worse homeostasis, the distance between the gingival margin to the bone crest showed an average of 2,507 mm, slightly smaller than the one found by Gargiulo and cols, which was 2,73mm; the periodontal spaces in the anterior teeth are bigger than in the posterior ones; the keratinized mucosa width is bigger in incisives and canines than in premolars and molars. There are strong relationships between probing depth and keratinized mucosa thickness; probing depth and distance from gingival margin to bone crest, width and thickness of keratinized mucosa; probing depth and the distance from the gingival margin to the bone crest for incisives and canines. Where there is normal bone thickness, there is a strong relashionship between probing depth and the distance from the gingival margin to the bone crest, as well as between the keratinized mucosa width and the distance from the gingival margin to the bone crest. Where the bone thickness is dense, the bigger is the probing depth, the bigger is the keratinized mucosa thickness. When the gingival index is 0, the keratinized mucosa thickness shows a strong relationship with the probing depth and with the keratinized width.

Made available in DSpace on 2014-08-13T14:50:34Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2013-07-26Bitstream added on 2014-08-13T18:01:14Z : No. of bitstreams: 1 000734413.pdf: 1931480 bytes, checksum: 03ac87da72efc421641409ff157d3184 (MD5) / As plaquetas são um reservatório natural de diversos mediadores biológicos e, uma vez ativadas, expressam fatores de crescimento pró e anti-angiogênicos, quimiocinas e monoaminas, modulando a ativação e manutenção dos processos inflamatório e de reparo. Os objetivos deste trabalho foram avaliar o impacto do tratamento com drogas antiplaquetárias, aspirina (Asp) e clopidogrel (Clop), sobre a doença periodontal e o processo de reparação dos tecidos periodontais após indução de periodontite experimental em ratos. Para a avaliação do processo inflamatório foram realizadas análise microscópica, análise da expressão das quimiocinas CXCL4 e CCL5 por ELISA e da atividade de mieloperoxidase (MPO). Para avaliação do reparo dos tecidos periodontais, foram realizadas análise microscópica, análise da expressão de CXCL12, CXCL4, CCL5 e PDGF por ELISA, contagem de osteoclastos e vasos sanguíneos através de reações de imunohistoquímica e caracterização das células mesenquimais indiferenciadas por imunohistoquímica para CD 271 e imunofluorescência de dupla marcação utilizando CD 271 associado ao CD45, KI67 e TUNEL. Células mesenquimais indiferenciadas derivadas da medula óssea de humanos foram utilizadas in vitro para avaliação da proliferação celular por imunocitofluorescência. Três dias após a instalação da ligadura, verificou-se que o tratamento com as drogas antiplaquetárias abreviou o processo inflamatório, observado através dos aspectos microscópicos, da redução da atividade da enzima mieloperoxidase (p<0.001), e queda da expressão de CXCL4 (p<0.05), entretanto o tratamento com Clop de forma mais acentuada que o da Asp. Após retirada da ligadura, o tratamento com Clop acelerou o processo de reparo através da redução significativa da expressão de CXCL12, CXCL4, PDGF, número de vasos sanguíneos e osteoclastos; por outro lado, o tratamento com Asp... / Platelets are a natural reservoir of several biological mediators and once activated, express growth factors, pro- and anti-angiogenic factors, chemokines and monoamines modulating the activation and maintenance of the inflammatory and repair process. The aim of this study was to evaluate the impact of antiplatelet drugs, aspirin (Asp) and clopidogrel (Clop) on periodontal disease and the repair of periodontal tissues after induction of experimental periodontitis in rats. For the evaluation of the inflammatory process, microscopic evaluation, analysis of the expression of the chemokines CXCL4 and CCL5 by ELISA and myeloperoxidase activity (MPO) were realized. To evaluate periodontal tissue repair we performed microscopic examination, analysis of the expression of CXCL12, CXCL4, CCL5 and PDGF by ELISA, and blood vessels and osteoclast count by immunohistochemistry. Also, characterization of undifferentiated mesenchymal stem cells by immunohistochemical staining for CD 271 (stem cell marker) and immunofluorescence double labeling using CD 271 associated with CD45, Ki67 and TUNEL were realized. Undifferentiated mesenchymal stem cells derived from human bone marrow were used for in vitro evaluation of cell proliferation by immunocitofluorescence. Three days after ligature placement, we found that treatment with antiplatelet drugs abbreviated the inflammatory process observed by the microscopic analysis, reduction of myeloperoxidase activity (p <0.001) and decreased the expression of CXCL4 (p <0.05), but treatment with Clop more pronounced than Asp. After removal of the ligature, Clop treatment accelerated the repair process by significantly reducing the expression of CXCL12, CXCL4, PDGF number of blood vessels and osteoclasts, on the other hand, treatment with Asp only showed significant effects in reducing the expression of CXCL12 and CXCL4. In turn, Clop treatment increased the number of osteoblasts...

Made available in DSpace on 2014-08-13T14:50:34Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2013-09-20Bitstream added on 2014-08-13T18:01:13Z : No. of bitstreams: 1 000734624_20150920.pdf: 150475 bytes, checksum: 8dbec8de00e101f635a8f53e65dbd329 (MD5) Bitstreams deleted on 2015-09-21T13:18:50Z: 000734624_20150920.pdf,. Added 1 bitstream(s) on 2015-09-21T13:19:50Z : No. of bitstreams: 1 000734624.pdf: 3715563 bytes, checksum: 0b1fb2f56cd46b26072d41d3ac6fc793 (MD5) / A hipótese deste trabalho é que hormônios sexuais participam da etiopatogenia da doença periodontal (DP). Diferentes níveis de evidência científica testaram esta hipótese, avaliando: i. associação entre hormônios sexuais e DP em homens; ii. a influência de níveis sub- e suprafisiológicos de testosterona (T) sobre a DP em ratos; iii. se este mecanismo de ação envolve respostas de osteoblastos e osteoclastos in vitro. Dados do III NHANES relacionados com diagnóstico de DP e mensuração hormonal em homens com 30+ anos foram analisados para correlacionar estas duas variáveis. Em ratos, níveis subfisiológicos foram alcançados através da orquiectomia e níveis suprafisiológicos pelo tratamento com T. Metade dos animais em cada grupo foi submetida à DP utilizando–se modelo de ligadura. In vitro, células RAW264.7 foram diferenciadas em osteoclastos na presença de T (1nM-1μM) e identificados por TRAP. Cultura primária de osteoblastos murinos foi utilizada para avaliar a expressão de osteocalcina, RANKL e OPG na presença de T. Em homens, altos níveis de T biodisponível e baixa razão estradiol:T se correlacionaram significativamente com DP. Em idosos, baixos níveis de AAG, metabólito da dihidrotestosterona, também apresentaram correlação significativa. Em ratos, níveis sub- e suprafisiológicos de T aumentaram significativamente a perda óssea e modularam a expressão de citocinas inflamatórias. In vitro, doses fisiológicas de testosterona preveniram a osteoclastogênese e diminuíram a expressão de osteocalcina, RANKL e razão RANKL:OPG por osteoblastos. Concluiu-se que a T modula a resposta do hospedeiro à DP no sexo masculino, regulando a diferenciação de osteoclastos direta e indiretamente (via osteoblastos). / The hypothesis of this work is that sex hormones participate in the etiopathogenesis of periodontal disease (PD). Different levels of scientific evidence tested that hypothesis, evaluating: i. The association between sex hormones and PD in men; ii. The influence of sub- and supraphysiologic testosterone (T) levels on PD in rats; iii. If that mechanism of action involves osteoblast and osteoclast responses in vitro. Data from NHANES III related to diagnosis of PD and hormones measurement in 30+- year-old men were assessed to correlate those two variables. In rats, subphysiologic levels were obtained by orchiectomy and supraphysiolgic levels by T treatment. Half of the animals in each group received PD using a ligature model. In vitro, RAW264.7 cells were differentiated into osteoclastos in the presence of T (1nM-1μM) and identified by TRAP-staining. Murine osteoblast primary culture was used to evaluate the expression of osteocalcin, RANKL and OPG in the presence of T. In men, high levels of bioavailable T and low estradiol:T ratio significantly correlated with PD. In older men, low levels of AAG, a metabolite of dihydrotestosterone, also presented a significant correlation. In rats, low and high T levels significantly increased bone loss and modulated the expression of inflammatory cytokines. In vitro, physiologic T doses prevented osteoclastogenesis and decreased the expression of osteocalcin, RANKL and RANKL:OPG ratio produced by osteoblasts. We concluded that T modulates host response to PD in males, regulating osteoclast differentiation direct and indirectly (through osteoblasts).

Made available in DSpace on 2014-08-13T14:50:38Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2013-07-30Bitstream added on 2014-08-13T18:01:36Z : No. of bitstreams: 1 000741596_20151231.pdf: 128176 bytes, checksum: bb8faabce5cb612e7108f388c4069a92 (MD5) Bitstreams deleted on 2016-01-04T10:26:44Z: 000741596_20151231.pdf,. Added 1 bitstream(s) on 2016-01-04T10:28:35Z : No. of bitstreams: 1 000741596.pdf: 1788749 bytes, checksum: 850a2b026a9bca705e9c6bb1c2600555 (MD5) / As interações microrganismo-hospedeiro se iniciam pela detecção de padrões moleculares associados a microrganismos (MAMPs) por receptores semelhantes à Toll (TLR) e por proteínas com domínio de ligação à nucleotídeos e oligomerização (Nod) na resposta imune inata. No entanto, como a cavidade bucal saudável é continuamente colonizada por microrganismos não patogênicos que também apresentam MAMPs, deve haver um mecanismo endógeno de regulação negativa da resposta do hospedeiro para evitar uma resposta exagerada e desnecessária com consequências negativas ao hospedeiro. Os mecanismos associados à distinção de microrganismos comensais e patogênicos na mucosa bucal são ainda pouco compreendidos. As proteínas Nod foram inicialmente descritas como ‘TLRs intracelulares’ capazes de reconhecer MAMPs no citosol; no entanto, estudos in vitro indicam que Nod têm papel relevante na regulação da expressão de RANKL e OPG induzidas por antígenos microbianos, bem como na modulação da atividade de vias de sinalização intracelular associadas à expressão de citocinas diretamente relacionadas à regulação do turnover do tecido ósseo. Devido à escassez de informações sobre o papel das proteínas Nod na modulação das interações microrganismo-hospedeiro na mucosa oral e com base nestas informações, nossa hipótese é que as proteínas Nod tem um papel relevante na modulação da reação inflamatória e suas consequências, incluindo a reabsorção do osso alveolar. Para testar esta hipótese, os objetivos específicos propostos foram: avaliar em camundongos knockout para Nod1, Nod2 ou Rip2, através de microtomografia computadorizada e avaliações histológicas descritivas, estereométricas e imunohistoquímicas (TRAP), o papel das proteínas Nod na inflamação e reabsorção óssea associadas à doença periodontal experimental induzida por bactérias inativadas por calor... / Recognition of pathogenic bacteria by the host is initially mediated by the innate immune response through detection of microbe-associated molecular pattern (MAMPs) by Toll-like receptors (TLR) and Nucleotide-oligomerization domain (Nod) proteins. Since the oral cavity, as well as other mucosal surfaces, is continuously colonized with non-pathogenic bacteria that also present MAMPs, there has to be an endogenous negative regulatory mechanism in place to prevent an overt host response with deleterious consequences. Specifically in the oral mucosa, it is not clear how the immune system is able to quickly distinguish between commensal and pathogenic bacteria and tailor the host response. Nod proteins were initially described as ‘intracellular TLRs’ that recognize MAMPs associated with bacteria invading the cytosol; however these proteins have been shown to modulate the activation of various signaling pathways involved in the expression of inflammatory genes, including p38 MAPK and NF-κB in concert with TLR stimulation. There is paucity of information on the in vivo role of Nod proteins in the modulation of host-microbe interactions in the oral mucosa. Based on this information, our hypothesis is that Nod proteins play an important role in the modulation of the inflammatory reaction associated with periodontal diseases and its consequences, including alveolar bone resorption. To test this hypothesis, we propose the following specific aims: Assess the role of Nod proteins in the inflammation and bone resorption in experimentally-induced periodontal disease Describe the influence of Nod proteins on the cytokine and signaling networks associated with periodontal disease.

Orientador: Doris Hissako Sumida / Banca: Marília Afonso Rabelo Buzalaf / Banca: Suzely Adas Saliba Moimaz / Resumo: Nos dias atuais, a crescente incidência de diabetes mellitus no mundo torna fundamental a idéia de se identificar fatores de risco que levam ao desenvolvimento da doença e proporcionar sua prevenção. Diversos estudos têm levado a considerar as condições bucais não mais de maneira isolada, mas em suas relações com o corpo humano. Este posicionamento também é válido para as periodontopatias, que têm sido apontadas por diversos estudos como fator de risco para o desenvolvimento de doenças, entre elas o parto prematuro de bebês com baixo peso e o diabetes mellitus. O nascimento prematuro sobressai‐se como o maior problema peri‐natal em muitos países, contribuindo substancialmente para a mortalidade infantil e para o desenvolvimento de uma infância repleta de problemas. Há ainda estudos que apontam que adultos que nasceram com baixo peso tem um maior risco de desenvolver diabetes mellitus na vida adulta. A revisão destes estudos demonstra a inter‐relação entre estas doenças e alguns dos mecanismos biológicos envolvidos, buscando alertar quanto ao estilo de vida propício ao desenvolvimento de periodontopatias e a busca por hábitos preventivos, além da necessidade de mais estudos para elucidar os mecanismos envolvidos nesta inter‐relação. / Abstract: Currently, the increasing incidence of diabetes mellitus in the world makes the idea of identifying risk factors which can lead to the development of the disease and ways to prevent it as an important matter. Several studies have considered oral conditions in an integrated approach with the general health conditions. This approach is also valid for periodontal diseases, which have been pointed as a risk factor for the development of some diseases, like preterm birth, low weight babies and diabetes mellitus. Premature birth has been pointed out as the major prenatal problem in several countries, contributing substantially with infant mortality and the development of other infant problems. There are also studies showing that adults with a preterm birth history have a higher risk of developing diabetes mellitus. The review of these researches demonstrate the inter‐relation between these diseases and some of the involved biological mechanisms, aiming to alert population about life style conditions which can lead to periodontal diseases and also to promote preventive measures, as well as the need of more studies to elucidate the involved mechanisms of this inter‐relation. / Mestre

Orientador: Valdir Gouveia Garcia / Coorientador: Letícia Helena Theodoro / Banca: Maria José Hitomi Nagata / Banca: Álvaro Francisco Bosco / Banca: Enilson Antônio Sallum / Banca: Martha Simões Ribeiro / Resumo: O objetivo do presente estudo foi avaliar histológica e histometricamente a influência da terapia fotodinâmica (PDT) no tratamento coadjuvante da doença periodontal (DP) experimental induzida em ratos diabéticos e não-diabéticos. Foram utilizados 180 ratos divididos em 2 grupos: Grupo A: 90 animais não-diabéticos e Grupo B: 90 animais diabéticos induzidos pela aloxana a 2% (42 mg/Kg). Nos Grupos A e B a DP foi induzida no primeiro molar inferior. Após 7 dias de evolução da DP, em todos animais de ambos os Grupos, a ligadura foi removida seguida de raspagem e alisamento radicular (RAR) e divididos conforme os tratamentos: I (RAR) - RAR e irrigação com 1 ml de soro fisiológico; II (TBO) - RAR e irrigação com 1 ml de azul de toluidina O (TBO 100 μg/ml); III (PDT) - RAR, irrigação com 1 ml de TBO e após 1 minuto irradiação com o laser em baixa intensidade. O laser (AsGaAl, 660 nm) foi aplicado na vestibular e lingual em 3 pontos eqüidistantes em cada região, com dose energética de 4 J/ponto. Dez animais de cada grupo experimental e tratamento foram sacrificados nos períodos de 7, 15 e 30 dias para a análise histológica e histométrica. Os dados histométricos foram submetidos à análise estatística (p<0,05). Os animais tratados com a PDT (Grupo A e B), apresentaram histologicamente tecido conjuntivo (TC) bem organizado e trabéculas ósseas presentes em toda a extensão da furca. Nos animais tratados com RAR nos dois grupos, o TC estava desorganizado, com intenso infiltrado inflamatório e áreas de reabsorções ósseas e cementárias. As alterações mais severas foram observadas no Grupo B. Histometricamente, no Grupo A, o tratamento com a PDT (0,33±0,05 mm2; 0,35±0,06 mm2; 0,27±0,07 mm2), promoveu menor perda óssea (p<0,05) na região de furca quando comparado com os animais tratados... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: The aim of this study was to evaluate histological and histometrically the influence of photodynamic therapy (PDT) as an adjuvant treatment on the experimentally induced periodontitis in diabetic and non-diabetic rats. One-hundred eighty rats were assigned to 2 groups: Group A: Ninety non-diabetic and Group B: Ninety alloxan-diabetic. In Group B, after 7 days of alloxan-diabetic induction (42 mg/Kg), the periodontal disease (PD) was induced at the first mandibular molar. Seven days after the establishment of PD, the ligatures were removed. Thereafter, all animals were submitted to scaling and root planing (SRP) and then divided according with the following protocols treatment: I (SRP) - SRP and irrigation with saline solution (1 mL); II (TBO) - SRP and irrigation with 1 mL of Toluidine Blue (TBO) (100 μg/mL); III (PDT) - SRP, irrigation with 1mL of TBO and after 1 minute, low-level laser therapy (LLLT). The LLLT GaAlAs (4 J) was performed in 3 equidistant points at the each buccal and lingual aspect of the first mandibular molar. Ten animals in each experimental group and treatment were sacrificed at 7, 15 and 30 days. Histologic and histometric analyses were performed. The histometric values were statistical analyzed ( p<0.05). The animals treated by PDT in Group A and B showed the furcation area fulfilled with a well-organized connective tissue (CT) and with bone trabeculae in all extension of furcation. In animals treated with SRP, the CT was poorly organized, showing an intense inflammatory infiltrate and areas with bone and cement resorption. The worst tissue response was found in Group B. Histometrically, in Group A, the animals treated by PDT (0.33±0.05 mm2; 0.35±0.06 mm2; 0.27±0.07 mm2) showed a lesser bone loss (p<0.05) in all experimental... (Complete abstract click electronic access below) / Doutor