Made available in DSpace on 2014-06-11T19:29:43Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2010-02-22Bitstream added on 2014-06-13T20:39:17Z : No. of bitstreams: 1 veloso_es_me_ilha.pdf: 587377 bytes, checksum: 02d1ac9b887db84948ccfd89680d2d0e (MD5) / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / A cultura da soja representa um dos elementos mais fortes da economia brasileira. Entre os fatores que limitam o potencial de produtividade da soja estão às pragas. Dentre as diferentes espécies, Spodoptera frugiperda poderá tornar-se praga importante, devido à intensa exposição da cultura à pressão populacional desse inseto. Desse modo, o presente trabalho teve por objetivo estudar a resistência de cultivares de soja a lagarta-do-cartucho, Spodoptera frugiperda (J. E. SMITH). O trabalho foi dividido em duas partes, sendo que na primeira avaliou-se a atratividade e a não-preferência alimentar, com e sem chance de escolha, de lagartas recém-eclodidas em folhas de dez cultivares de soja. os cultivares BRS Sambaíba, MG/BR-46 Conquista, BRSMT Pintado, FT Cristalina, FMT Tucunaré, MSOY 8001, M-SOY 6001, M-SOY 8400, EMGOPA 313 e BRSMT Uirapuru. No teste de atratividade utilizou-se um sistema de arena em placas de Petri com 20 cm de diâmetro e com dez repetições. Para cada repetição (arena) foram liberadas 05 lagartas recém-eclodidas de S. frugiperda, avaliando a número total de lagartas atraídas pelos discos foliares dos cultivares aos 5, 10, 15, 20, 25, 30 e 60 minutos. Para avaliação de não-preferência alimentar, no teste com chance de escolha, os procedimentos e os materiais utilizados foram os mesmos adotados no teste de atratividade. No teste, sem chance de escolha, os materiais foram individualizados em placas de Petri de 6,0 cm de diâmetro e seu interior foram liberadas 05 lagartas recém-eclodidas por repetição, com 10 repetições. Para avaliação, contou-se o número total de lagartas que estavam se alimentando nos discos foliares dos cultivares após 24 horas da liberação. Na segunda parte foi realizado estudos da biologia da S. frugiperda em cinco cultivares de soja. As lagartas recém-eclodidas foram alimentadas com folhas dos seguintes cultivares de soja... / Soybean is one of the strongest elements in Brazilian economy. Pests are among the factors that limit the productivity potential of soybean. Among pest species, Spodoptera frugiperda may become an important pest due to intense crop exposure to the population pressure by this insect. The objective of this investigation was therefore to study the resistance of soybean cultivars to the fall armyworm, Spodoptera frugiperda (J. E. SMITH). The study was divided into two parts: in the first we evaluated, in free-choice and no-choice tests, the attractiveness and nonpreference for feeding of newly-hatched caterpillars on leaves of ten soybean cultivars: BRS Sambaíba, MG/BR-46 Conquista, BRSMT Pintado, FT Cristalina, FMT Tucunaré, M-SOY 8001, M-SOY 6001, M-SOY 8400, EMGOPA 313, and BRSMT Uirapuru. An arena system was used in the attractiveness test, consisting of Petri dishes (20 cm diameter), with ten replicates. Five newly-hatched S. frugiperda caterpillars were released for each replicate (arena); counts were obtained for the total number of caterpillars attracted to the leaf discs of the various cultivars at 5, 10, 15, 20, 25, 30, and 60 minutes. In the free-choice test to evaluate non-preference for feeding, the same procedures and materials used in the attractiveness test were adopted. In the no-choice test the materials were individualized in Petri dishes (6.0 cm diameter); five newly-hatched caterpillars per replicate were released into the dishes, with 10 replicates. The test was evaluated by counting the total number of caterpillars feeding on the leaf discs of the various cultivars 24 hours after release. In the second part of the investigation we conducted studies on the biology of S. frugiperda on five soybean cultivars. Newly-hatched caterpillars were fed leaves of the following soybean cultivars: BRSMT Uirapuru, MG/BR 46 (Conquista), M-SOY 8400, M-SOY 6101, and FMT Tucunaré... (Complete abstract click electronic access below)

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:29:48Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2013-07-29Bitstream added on 2014-06-13T20:39:33Z : No. of bitstreams: 1 000738903.pdf: 701856 bytes, checksum: 8c9854198e0ed122cf47297bde82b2ea (MD5) / A tecnologia de aplicação de produtos fitossanitários é a ciência que busca à correta colocação do produto no alvo, se necessário, na quantidade requerida, de forma econômica e com a mínima contaminação humana e ambiental, consequentemente reduzindo custos de produção e mantendo uma relação sustentável entre agricultura e ambiente. O presente trabalho teve como objetivo avaliar o controle da lagarta-do-cartucho Spodoptera frugiperda (J. E. Smith, 1797) (Lepidoptera: Noctuidae) com a aplicação localizada de inseticida em operação conjugada à fertilização na cultura do milho (Zea mays L.), em função de modelos de pontas de pulverização, volumes de calda, híbridos de milho e inseticidas. Foram conduzidos experimentos com plantas de milho transgênicas (Bt) e isogênicas (não Bt) em cultivo de safra (verão) e safrinha (inverno). Quando se fez necessário o controle, os tratamentos foram pulverizados em sistema de aplicação dirigida ao cartucho das plantas de milho em equipamento acoplado à máquina de adubação de cobertura, em que o comprimento da barra de pulverização é congruente a faixa utilizada para a fertilização e, para efeito de comparação, com a aplicação do inseticida em área total. Foram realizadas avaliações quanto à eficácia no controle da lagarta-do-cartucho aos 3, 6 e 10 dias após a aplicação de inseticida (DAA). Os dados obtidos foram submetidos ao teste F da análise de variância (ANOVA) e as médias das parcelas foram comparadas entre si, utilizando-se o teste de Tukey a 5% de probabilidade. A aplicação localizada do inseticida em operação conjugada à fertilização foi eficaz no controle de S. frugiperda e pode diminuir a quantidade de inseticida aplicado fora do alvo em relação à aplicação em área total. Modelos de pontas de pulverização, volumes de calda e inseticidas, no geral, não diferenciaram estatisticamente... / The technology of pesticides application seeks the correct placement of the target product, when needed, at quantity required, cost effectively and with minimal contamination, thus reducing production costs and maintaining a sustainable in relation of agriculture and environment. This study aimed to evaluate the control of fall armyworm Spodoptera frugiperda (Smith) with localized application of insecticide in associated operation of fertilization due spray nozzles, spray volumes, hybrid corn, insecticides and quantities of application in maize (Zea mays L.). Experiments were conducted with conventional and transgenic (Bt) maize plants in growing season (Summer) and off-season (Winter). When it was necessary, the insecticide were sprayed on the targeted application system device coupled to the machine cover fertilization, wherein the length of the spray boom is congruent to the range used for fertilization. Were evaluated the efficacy in the control of fall armyworm at 3, 6 and 10 days after spraying (DAS). The data were submitted to the F test of analysis of variance and mean plots were compared using the Tukey test at 5% probability. The localized application of insecticide in associated operation of fertilization promoted greater control of S. frugiperda and can reduce the amount of pesticide applied on the soil compared with total area application. Spray nozzles, spray volumes, insecticides and quantities of application did not differ statistically in insect control. Bt hybrids reduce the infestation of fall armyworm compared with non-Bt hybrids. The corn yield was directly related to the effectiveness of controlling fall armyworm

Lufenuron é um novo inseticida do grupo dos inibidores da biossíntese de quitina utilizado para o controle de Spodoptera frugiperda J. E. Smith (Lepidoptera: Noctuidae) na cultura do milho. O uso deste inseticida para o controle de S. frugiperda tem aumentado muito nos últimos anos. Este incremento pode ser atribuído à sua alta eficiência e devido ao desenvolvimento da resistência desta praga aos produtos tradicionalmente recomendados para o seu controle (por exemplo, fosforados e piretróides). Neste trabalho, a linha básica de suscetibilidade de S. frugiperda foi obtida com o intuito de implementar um programa proativo de manejo da resistência. Para a caracterização da suscetibilidade de populações de S. frugiperda ao lufenuron, utilizou-se o bioensaio que consistiu no tratamento superficial de dieta artificial. Lagartas de 2° e 3° instar foram expostas à dieta tratada por um período de até 5 dias (120 h). A partir deste estudo concluiu-se que a utilização de lagartas de 3° instar expostas por um período de 4 dias (96 h) foi o procedimento de bioensaio mais adequado. Baseado na curva de concentração-resposta da população suscetível de referência, as concentrações de 3,2 e 10,0 mg de lufenuron / mL de água destilada foram escolhidas para o monitoramento da suscetibilidade. Resultados do monitoramento da suscetibilidade de populações de S. frugiperda provenientes dos principais Estados produtores de milho do Brasil (Rio Grande do Sul, Paraná, São Paulo, Goiás e Minas Gerais) mostraram diferenças significativas quanto à suscetibilidade ao lufenuron. Esses resultados sugerem a necessidade da implementação de estratégias de manejo da resistência para preservar a vida útil do lufenuron no controle de S. frugiperda no Brasil. / Lufenuron is a newly benzoylphenyl urea chitin synthesis inhibitor insecticide. The use of this compound to control Spodoptera frugiperda J. E. Smith (Lepidoptera: Noctuidae) has increased significantly in the past years. This increase can be attributed to its high activity against S. frugiperda and to the reduction of efficacy due to resistance to some traditional insecticides (such as phosphates, carbamates and pyrethroids) recommended for controlling this pest. In this study, a baseline susceptibility data of S. frugiperda populations to lufenuron were obtained for implementing a proactive resistance management program. An artificial diet treatment surface bioassay was used to characterize the response to lufenuron in a susceptible strain. Second and third instar larvae were exposed to the treated diet up to 5 days (120 h). A period of 4 days (96 h) and third instar larvae were defined as standard procedures for bioassays. After the characterization of the susceptible population, diagnostic concentrations of 3.2 and 10.0 mg of lufenuron / mL of distilled water were chosen for monitoring the susceptibility. A survey of susceptibility to lufenuron was conducted in field populations of S. frugiperda collected from major corn-growing regio ns located in the States of Rio Grande do Sul, Paraná, São Paulo, Goiás and Minas Gerais. Significant differences in susceptibility to lufenuron were detected among S. frugiperda populations. These results suggest the need to implement resistance management strategies to preserve the lifetime of lufenuron for controlling S. frugiperda in Brazil.

Visando explorar o potencial bioativo de plantas da família Solanaceae como fonte alternativa para o manejo de Spodoptera frugiperda (Lepidoptera: Noctuidae), a lagarta-do-cartucho-do-milho, realizou-se, primeiramente, uma triagem de extratos etanólicos preparados de diferentes partes de 25 espécies vegetais. Após sete dias de exposição das lagartas em dietas tratadas, constatou-se que os extratos etanólicos de folhas de Acnistus arborscens e de Datura stramonium, na concentração de 4.000 mg kg -1, foram os mais promissores causando inibição do ganho de peso de 97,85 e 95,72%, respectivamente. A seguir, foi realizado um fracionamento biomonitorado, a partir do qual, a fração diclorometânica foi selecionada como a mais ativa para essas duas espécies, causando efeito subletal (inibição do ganho do peso) e letal (mortalidade), porém este inferior ao causado pela formulação comercial Azamax® 1,2 EC (controle positivo). Em sequencia, foi possível estimar as concentrações letais para as frações diclorometânicas durante o período de 168 horas. Em relação ao efeito sobre o desenvolvimento do inseto, os extratos etanólicos foram testados na concentração de 4.000 mg kg -1 e as frações diclorometânicas na concentração letal mediana (4.088 e 3.694 mg kg -1 para D. stramonium e A. arborescens, respectivamente). Na fase larval, os extratos etanólicos de D. stramonium e A. arborescens ocasionaram 77,50 e 62,50% de mortalidade, respectivamente, e, além disso, ambos os tratamentos causaram alongamento dessa fase, e mortalidade, deformidade e redução do peso pupal. A fração diclorometânica de A. arborescens proporcionou 100% de mortalidade das lagartas expostas, enquanto a mortalidade em D. stramonium foi 83,19% e, as lagartas necessitaram de 41,75 dias para atingir a fase pupa, que apresentou baixo peso (158,60 mg) e altas deformidades (40%) em comparação ao controle (255,90 mg e 8,26%, respectivamente). Além disso, as frações diclorometânicas ocasionaram atividade fagodeterrente nas CL25, CL50 e CL90. Novamente, utilizando-se a fração diclorometânica, foi realizado novo fracionamento, e após sete dias de exposição das lagartas neonatas, todas as subfrações ocasionaram efeitos subletais. Com isso, tornaram-se necessárias novas investigações químicas a fim de se compreender o (s) composto (os) responsável (is) pela bioatividade, porém a complexidade de algumas subfrações não permitiu uma caracterização química. Ainda assim, foi constatada nas subfrações acetato de etila e metanólica de D. stramonium a presença de compostos pertencentes à classe dos vitanolidos. Dessa forma, os derivados de Solanaceae apresentam potencial bioativo passíveis de serem estudados mais profundamente visando ao emprego dos mesmos no manejo de S. frugiperda. / Aiming to explore the bioactive potential of Solanaceae plants as alternative resources for the management of Spodoptera frugiperda (Lepitoptera: Noctuidae), the fall armyworm, it was performed, firstly, a screening of ethanolic extracts prepared from different parts of 25 plant species. After seven days of exposure of caterpillars to treated diets, it was verified that ethanolic extracts of Acnistus arborscens and Datura stramonium leaves in the concentration of 4,000 mg kg-1 were the most promising, causing an inhibition of 97.85% and 95.72%, respectively, in weight gain. After this, a bioguided fractionation was performed, from which the dichloromethane fraction was selected as the most active in both species, causing sublethal (inhibition of weight gain) and lethal (mortality) effects, although both were less effective than the Azamax® 1,2 EC commercial formulation (positive control). Following the previous step, it was possible to estimate the lethal concentrations for dichloromethane fraction during the period of 168 hours. In relation to the effect on the insect development, the ethanolic extracts were tested in the concentration of 4,000 mg kg-1 and the dichloromethane fractions in their median lethal concentrations (4,088 and 3,694 mg kg-1 for D. stramonium and A. arborescens, respectively). In the larval phase, ethanolic extracts of D. stramonium and A. arborescens lead to 77.50% and 62.50% of mortality, respectively, and both treatments lead to the elongation of this phase, mortality, deformity and pupal weight reduction. The dichloromethane fraction of A. arborescens lead to 100% of mortality of the exposed caterpillars, while mortality of D. stramonium was 83.19%, and the caterpillars needed 41.75 days to reach the pupal stage, which presented low weight (158.60 mg) and were highly deformed (40%) in comparison with the negative control (255.90 mg and 8.26%, respectively). Furthermore, the dichloromethane lead to antifeedant activity in CL25, CL50 and CL90. Once again, using the dichloromethane fraction, another fractionation was performed, and after seven days of exposure of neonates caterpillars, all subfractions lead to sublethal effects. Therefore, new chemical evaluations are necessary to understand the compounds responsible for bioactivity, however, the complexity of some subfractions did not permit chemical characterization. Nevertheless, it was verified in the ethyl acetate and methanolic subfractions of D. stramonium the presence of withanolides compounds. Therefore, derivatives of Solanaceae present bioactive potential that may be liable for further evaluation aiming their employment in the management of S. frugiperda.

Spodoptera frugiperda (J.E. Smith) é uma das pragas mais importantes da cultura do milho no Brasil. Vários casos de resistência de S. frugiperda a inseticidas de grupos químicos distintos já foram documentados. A busca contínua de alternativas para o controle de S. frugiperda tem possibilitado o desenvolvimento de novas tecnologias como plantas de milho geneticamente modificadas, e até mesmo a introdução de inseticidas que aliam segurança ambiental e alta atividade inseticida, como o recente grupo das diamidas. Estudos de caracterização e monitoramento da suscetibilidade de S. frugiperda são fundamentais para a implementação de programas de Manejo da Resistência de Insetos (MRI) no Brasil. Com o intuito de se prolongar a vida útil das diamidas, os objetivos deste trabalho foram: (a) caracterizar a suscetibilidade a diamidas em populações de S. frugiperda nas principais regiões produtoras de milho no Brasil na safra 2011/12; (b) monitorar a suscetibilidade de populações de S. frugiperda a chlorantraniliprole e flubendiamide coletadas na cultura do milho em oito estados do Brasil nas safras 2011/12, 2012/13 e 2013/14; (c) estimar a frequência inicial do alelo de resistência a chlorantraniliprole em populações de S. frugiperda. O método de bioensaio para a caracterização da suscetibilidade de populações de S. frugiperda a chlorantraniliprole e flubendiamide foi o de aplicação superficial do inseticida sobre a dieta. As linhas-básicas de suscetibilidade foram definidas para uma população suscetível de referência e cinco populações de campo de S. frugiperda. Posteriormente, foram definidas concentrações diagnósticas para o monitoramento da suscetibilidade para ambos inseticidas em populações de S. frugiperda. As CLs50 estimadas para as populações de S. frugiperda avaliadas variaram de 1,15 a 2,55 ?g de chlorantraniliprole/mL de água [I.A. (ppm)] (variação de 1,4 vezes), e de 1,75 a 4,17 ?g de flubendiamide/mL de água [I.A. (ppm)] (variação de 2,4 vezes). As concentrações diagnósticas de 10 e 32 ?g de chlorantraniliprole/mL e de 100 e 180?g de flubendiamide/mL foram definidas para o monitoramento da resistência. As populações de S. frugiperda apresentaram alta suscetibilidade nas concentrações diagnósticas de chlorantraniliprole e flubendiamide na safra 2011/12. No entanto, foram observadas variações na sobrevivência de 0 a 12,7% para chlorantraniliprole e de 1 a 6% para flubendiamide de acordo com a safra agrícola e localidade. A frequência do alelo resistente a chlorantraniliprole em S. frugiperda estimado pelo método de \"F2 Screen\" foi baixa para a safra 2011/12 (<0,0033). No entanto, aumento significativo na frequência do alelo resistente foi observado nas safras 2012/13 [0,0134 (0,0082 - 0,0198)] e 2013/14 [0,0176 (0,0084 - 0,0277)] em populações testadas, indicando alto risco de evolução da resistência a chlorantraniliprole no Brasil. / Spodoptera frugiperda (J.E. Smith) is one of the most important maize pests in Brazil. Several cases of S. frugiperda resistance to insecticides of different chemical class have been documented. The continuous search for alternatives to control S. frugiperda has enabled the development of new technologies such as genetically modified corn plants, and even the introduction of insecticides that combine environmental safety and high insecticidal activity, such as the recent class of diamides. Baseline studies and monitoring the susceptibility of S. frugiperda to insecticides are fundamental to the implementation of Insect Resistance Management (IRM) programs in Brazil. In order to prolong the lifetime of diamides, the objectives of this work were: (a) characterize the susceptibility to diamides in populations of S. frugiperda collected from major corn-producing regions in Brazil in 2011/12 season; (b) monitor the susceptibility of S. frugiperda populations to chlorantraniliprole and flubendiamide collected in maize in eight states of Brazil in the 2011/12, 2012/13 and 2013/14 growing seasons; (c) estimate the initial frequency of the allele for resistance to chlorantraniliprole in S. frugiperda populations. The baseline susceptibility of S. frugiperda populations to chlorantraniliprole and flubendiamide was determined using the diet surface treatment bioassays. Baselines were defined for a susceptible population and five field populations of S. frugiperda. Subsequently, diagnostic concentrations for monitoring susceptibility to both insecticides were defined. LCs50 estimated for populations of S. frugiperda ranged from 1.15 to 2.55 mg of chlorantraniliprole / mL of water [IA (ppm)] (1.4-fold variation) and 1.75 to 4.17 mg of flubendiamide / ml water [IA (ppm)] (2.4-fold variation). The diagnostic concentrations of 10 and 32 mg of chlorantraniliprole / mL and 100 and 180?g of flubendiamide / mL were defined for the resistance monitoring. The populations of S. frugiperda showed high susceptibility to chlorantraniliprole and flubendiamide in 2011/12 growing season at diagnostic concentrations. However, variations in survival from 0 to 12.7% for chlorantraniliprole and 1 to 6% for flubendiamide were observed based on growing season and location. The frequency of the resistant allele to chlorantraniliprole in S. frugiperda estimated by using \"F2 Screen\" method was low during 2011/12 growing season (<0.0033). However, significant increase in the frequency of the resistant allele was observed in 2012/13 [0.0134 (0.0082 to 0.0198)] and 2013-14 [0.0176 (0.0084 to 0.0277)] growing seasons, indicating a high risk of resistance evolution to chlorantraniliprole in Brazil.

S. frugiperda é uma praga chave no cultivo de milho. A espécie é polífaga e apresenta variações intraespecíficas, sendo caracterizada em dois grupos em função do seu hospedeiro - raça \'Milho\' e raça \'Arroz\' - onde indivíduos morfologicamente idênticos apresentam cargas genéticas distintas. Essas variações podem ser observadas na formação de subgrupos, os quais podem ser compostos por indivíduos geograficamente distintos ou pela forma como se distribuem dentro das populações refletindo diretamente nos padrões de acasalamento da espécie. Em razão disso, este trabalho teve por objetivo compreender a variabilidade genética de populações brasileiras de S. frugiperda e como ela está associada com a produção de diferentes compostos feromonais ou à variação na taxa desses compostos. Para tal, foram coletadas lagartas de S. frugiperda em 6 localidades brasileiras (Santo Augusto-RS, São Raimundo das Mangabeiras-MA, Dourados-MS, Sinop-MT, Assis-SP, e Santa Helena de Goiás-GO). As populações foram avaliadas quanto a sua diversidade genética, perfil cromatográfico das repostas em eletroantenografia (CG-EAG), produção do feromônio e respostas comportamentais em túnel de vento. Os resultados demonstraram uma frequência variável entre as raças de \'Milho\' e \'Arroz\' nas populações brasileiras de S. frugiperda de acordo com o local e época de amostragem. Foram constatados um elevado número de haplótipos nas populações brasileiras, e aparentemente, isto foi resultado da presença de um alta diversidade haplotípica e das pressões do ambiente. Os machos de S. frugiperda responderam para até 4 compostos químicos presentes nas amostras de feromônio sexual e houve uma diferença na abundância do composto majoritário, o acetato de (Z)-9 Tetradecenila, entre as populações das diferentes localidades avaliadas. Em túnel de vento, os machos apresentaram diferentes níveis de atração para as fêmeas de S. frugiperda tanto para uma mesma localidade quanto para localidades distintas. / S. frugiperda is a key pest in corn cultivation. This species is polyphagous and has intraspecific variation, which can be distinguished into two groups according to their host - races \'Corn\' and \'Rice\'. Individuals of both races are morphologically identical, but have distinct genetic loads. These variations can be observed in subgroups formation, which may consist of geographically distinct individuals or by the way they are distributed within populations reflecting directly on mating patterns of the species. For this reason, this work aims at understanding the genetic variability of Brazilian populations of S. frugiperda and how it is associated with the production of different pheromonal compounds or the variation in the rate of these compounds. For this, fall armyworms were collected at 6 locations in Brazil (Santo Augusto-RS, São Raimundo das Mangabeiras-MA, Dourados-MS, Sinop-MT, Assis-SP, and Santa Helena de Goiás-GO). The populations were evaluated for genetic diversity, chromatographic profile of the responses in electroantennography (GC-EAD), pheromone production and behavioral responses in a wind tunnel. Results showed a variable frequency between races \'Corn\' and \'Rice\' in Brazilian populations of S. frugiperda according to the locality and period of sampling. A large number of haplotypes in Brazilian populations were identified, and apparently, this is caused by the presence of a haplotype diversity and environmental selection pressure. Males of S. frugiperda responded to up to 4 chemical compounds from samples of sex pheromone and there was a difference in the abundance of the major compound, the acetate (Z)-9 Tetradecenila between populations of different localities evaluated. In the wind tunnel, males showed different levels of attraction to females of S. frugiperda to both the same site and for different site.

O objetivo deste estudo foi produzir plantas transgênicas de soja resistentes à Anticarsia gemmatalis. Embriões somáticos da cultivar comercial IAS 5 [Glycine max (L.)] foram cotransformados, por bombardeamento de partículas, com o gene modificado cry1Ac de Bacillus thuringiensis, e com os genes gusA e hpt. A expressão do gene cry1Ac em soja foi controlada pelo promotor da ubiquitina-1 de milho. O co-bombardeamento resultou em uma eficiência de co-transformação de 44%. A integração e expressão dos transgenes gusA/hpt e cry1Ac nos genomas de uma amostra de embriões transformados e de todas as plantas T0, T1, T2 ,T3 e T4 foram confirmadas por atividade de GUS, PCR, Southern blot, Western blot e/ou ELISA. Duas das sete plantas T0 co-transformadas produziram sementes e foram analisadas quanto ao padrão de integração e herança até a geração T4. As progênies T1 de ambas as plantas T0 segregaram para menos plantas cry1Ac/gusA-positivas do que o predito pelos princípios Mendelianos para um único loco dominante (3:1). As famílias T2 e T3 continuaram a segregar de maneira excepcional, com uma vasta deficiência de plantas transgênicas. Além disso, a taxa de segregação indicou que as plantas T2 eram uniformemente heterozigotas para os traços transformados. No entanto, a condição homozigota foi obtida na geração T3 e 11 isolinhas transgênicas foram estabelecidas. As isolinhas transgênicas homozigotas foram avaliadas em relação aos possíveis efeitos do transgene na performance agronômica. Não foi detectada redução significativa de produtividade nas plantas transgênicas. A análise citogenética mostrou que as plantas transformadas apresentam cariótipo normal (2n=40). As plantas transgênicas também foram avaliadas em ensaios in vitro e in vivo para resistência à Anticarsia gemmatalis (lagarta-da-soja). Dois controles negativos (IAS 5 não transgênica e isolinha homozigota gusA) foram utilizados. Em um bioensaio com folhas destacadas, as plantas cry1Ac exibiram completa eficácia contra A. gemmatalis, enquanto os controles negativos sofreram significante dano. Dados do ensaio com plantas inteiras demonstraram uma elevada proteção das plantas cry1Ac contra a lagarta-da-soja, enquanto as plantas não transgênicas e a isolinha homozigota gusA exibiram 56,5 e 71,5% de desfolhação, respectivamente. Os bioensaios indicaram que as plantas transgênicas foram altamente tóxicas à A. gemmatalis, oferecendo um efetivo potencial para resistência a insetos em soja. / The objective of this study was to produce soybean transgenic plants resistant to Anticarsia gemmatalis. Somatic embryos of IAS 5, a Glycine max (L.) commercial cultivar, were cotransformed using particle bombardment with the modified Bacillus thuringiensis cry1Ac, gusA and hpt genes. The expression of cry1Ac gene in the soybean was controlled by the ubiquitin-1 promoter from maize. The co-bombardment resulted in a co-transformation efficiency of 44%. The integration and expression of the gusA/hpt and cry1Ac transgenes into the genomes of a sample of transformed embryos and all T0, T1, T2, T3 and T4 plants were confirmed by GUS activity, PCR, Southern blot, Western blot and/or ELISA. Two T0 plants out of the seven co-transformed produced seeds and were analyzed for patterns of integration and inheritance until the T4 generation. The T1 progenies of both T0 plants segregated for fewer cry1Ac/gusA-positive plants than predicted by Mendelian principles for a single dominant locus (3:1). The T2 and T3 families continued to segregate in an exceptional manner, with a vast deficiency of transgenic plants. Moreover, the segregation ratios indicated that T2 plants were uniformly heterozygous for the transformed traits. However, the homozygous condition was obtained in the T3 generation and 11 transgenic isolines were established. The homozygous transgenic isolines were evaluated to test for possible effects the transgene might have on agronomic performance. No significant yield reduction was observed in transgenic plants. The cytogenetical analysis showed that transgenic plants present normal karyotype (2n=40). The transgenic plants were also evaluated by in vitro and in vivo assays for resistance to Anticarsia gemmatalis (velvetbean caterpillar). Two negative controls (non-transgenic IAS 5 and homozygous gusA isoline) were used. In a detached-leaf bioassay, cry1Ac plants exhibited complete efficacy against A. gemmatalis, whereas negative controls suffered significant damage. Whole plantfeeding assay data confirmed very high protection of cry1Ac plants against velvetbean caterpillar while non-transgenic IAS 5 and homozygous gusA isoline exhibited 56.5 and 71.5% defoliation, respectively. The bioassays indicated that the transgenic plants were highly toxic to A. gemmatalis, offering a potential for effective insect resistance in soybean.

Submitted by (edna.saturno@ufrpe.br) on 2016-11-21T16:34:48Z No. of bitstreams: 1 Alicely Araujo Correia.pdf: 855643 bytes, checksum: 24d919a750b0f3a0eea3a19c45fac7da (MD5) / Made available in DSpace on 2016-11-21T16:34:48Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Alicely Araujo Correia.pdf: 855643 bytes, checksum: 24d919a750b0f3a0eea3a19c45fac7da (MD5) Previous issue date: 2012-02-21 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPES / In search for efficient and low environmental impact alternatives for control of Spodoptera frugiperda (J.E. Smith) (Lepidoptera: Noctuidae), major corn insect pest, the use of botanical insecticides and insect growth regulators combined or not with biological control have been standing out. Therefore, this study tested different concentrations of the insecticides lufenuron (Match®), methoxyfenozide (Intrepid®), azadirachtin (AzaMax®), spinosad (Tracer®) and deltamethrin (Decis®), in order to evaluate the effects on S. frugiperda biology and embryology and on the egg parasitoid, Trichogramma pretiosum Riley (Hymenoptera: Trichogrammatidae). All insecticides were promising for controlling S. frugiperda. Since, in general, caused mortality; reduction in larval period, pupal period, pupal weight, longevity, fecundity and fertility. In addition, S. frugiperda larvaes have presented deformities and morphological abnormalities, such as retention of larval morphological characters and constrictions of abdominal segments. Azadirachtin, lufenuron and deltamethrin, even at low concentrations, showed effect on embryo development of S. frugiperda and on egg parasitoid T. pretiosum. They have reduced the number of S. frugiperda parasited eggs, parasitism percentage and parasitoid emergence and longevity. But, the period of development from egg to adult and sex ratio of T. pretiosum were not affected. The light and scanning electron microscopy evaluation showed S. frugiperda eggs spherically shaped, slightly flattened at the poles, with chorion, yolk, vitelline membrane and embryo formation. Nevertheless, in both the microscopic analysis, after treatment with azadirachtin, lufenurom and deltamethrin, the eggs showed up deformed and unviable, preventing embryo formation. Azadirachtin, lufenuron, methoxyfenozide and spinosad at concentrations below the recommeded may be alternative to the use of pyrethroids in the control of S. frugiperda. However, azadirachtin and lufenuron are not selective to the parasitoid T. pretiosum. / Na busca de alternativas eficientes e de baixo impacto ambiental para controle de Spodoptera frugiperda (J.E. Smith) (Lepidoptera: Noctuidae), principal praga do milho, o uso de inseticidas botânicos e reguladores de crescimento associados ou não ao controle biológico vêm se destacando. Assim, a presente pesquisa testou diferentes concentrações dos inseticidas lufenurom (Match®), metoxifenozide (Intrepid®), azadiractina (AzaMax®), espinosade (Tracer®) e deltametrina (Decis®), visando avaliar os efeitos sobre a biologia e embriologia de S. frugiperda e no parasitóide de ovos, Trichogramma pretiosum Riley (Hymenoptera: Trichogrammatidae). Todos os inseticidas apresentaram-se promissores no controle de S. frugiperda. Uma vez que, em geral, ocasionaram mortalidade; redução no período larval, período pupal, peso das pupas, longevidade, fecundidade e fertilidade. Além disso, as lagartas de S. frugiperda apresentaram deformidades e anormalidades morfológicas, como retenção dos caracteres morfológicos larvais e constricções dos segmentos abdominais. Azadiractina, lufenurom e deltametrina, mesmo em baixas concentrações, apresentaram efeito sobre o desenvolvimento embrionário de S. frugiperda e no parasitóide de ovos T. pretiosum. Eles reduziram a quantidade de ovos de S. frugiperda parasitados, porcentagem de parasitismo, emergência e longevidade dos parasitóides. Porém, a duração do ciclo ovo-adulto e a razão sexual de T. pretiosum não foram afetadas. A avaliação em microscopia de luz e eletrônica de varredura mostrou ovos de S. frugiperda com formato esférico, ligeiramente achatado nos polos, com córion, vitelo, membrana vitelínica e formação do embrião. No entanto, em ambas as análises microscópicas, após tratamento com azadiractina, lufenurom e deltametrina, os ovos apresentaram-se deformados e inviáveis, impedindo a formação do embrião. Azadiractina, lufenurom, metoxifenozide e espinosade, mesmo em concentrações abaixo do recomendado, podem ser alternativas ao uso dos piretróides, no controle de S. frugiperda. Todavia, azadiractina e lufenurom não são seletivos ao parasitóide T. pretiosum.

Made available in DSpace on 2016-12-23T14:37:27Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Thiago Gechel Kloss.pdf: 874754 bytes, checksum: ef2f39dcbc8d4a2efd94b7fd9f513851 (MD5) Previous issue date: 2011-09-02 / Among the biological control agents, Bacillus thuringiensis Berliner (1911) stands out the most and the egg parasitoid of Trichogramma Westwood (1833). Diverse factors can interfere with the effectiveness of these agents and investigations are necessary to succeed in the utilization of these agents isolated or together. In this case, the objective of this study was to select the populations of Trichogramma and the isolated or formulated of B. thuringiensis the most adequate for the management of populations of Helicoverpa zea (BODDIE, 1850) and to evaluate the influence of variation in the populations of H. zea in these agents. Moreover, the effects of interaction between them in host populations were also evaluated. In the evaluation of the Trichogramma agents, ten females population, individually received a piece of cardboard containing eggs with a determined population of H. zea. The characteristics analyzed were parasitism (%), emergence of individuals (%), sex ratio and number of adults per host egg. In the analysis of B. thuringiensis, 34 isolates and the formulated commercial Agree® and Dipel® were used and also inoculated on a diet, in a concentration 3 x 108 spores mL-1. Furthermore, lethal concentration of the isolates and more virulent formulates were estimated. In the assessment of the interaction between these agents, the cardboard with the eggs of population of H. zea were sprayed with different isolates and formulated B. thuringiensis and were offered the females of population of Trichogramma. The characteristics evaluated where the same previously described for the populations of Trichogramma, except the female longevity. The biological control agents Trichogramma and B. thuringiensis showed adequate for the management of the populations of H. zea. In addition, the use of the agents together generated few negative effects and in some cases even strengthened the parasites of Trichogramma sp., showing the use of them together which can increase the efficiency of the control of populations of H. zea. Alterations caused by the difference population of the biological characteristics of Trichogramma and in the levels of virulence of the isolates and formulated of B. thuringiensis were registered, but these variations weren t sufficient to generate undesirable levels of these characteristics in the management of the insect populations / Entre os agentes de controle biológico destacam-se a bactéria Bacillus thuringiensis Berliner (1911) e o parasitoide de ovos Trichogramma Westwood (1833). Diversos fatores podem interferir na eficiência desses agentes e investigações são necessárias para se obter sucesso na utilização deles de forma isolada ou em conjunto. Sendo assim, o objetivo deste estudo foi selecionar as populações de Trichogramma e os isolados ou formulados de B. thuringiensis mais adequados para o manejo de populações de Helicoverpa zea (BODDIE, 1850) e avaliar a influência da variação populacional de H. zea nesses agentes. Além disso, foram avaliados os efeitos da interação entre eles nas populações hospedeiras. Na avaliação do agente Trichogramma, fêmeas de dez populações receberam individualmente cartelas contendo ovos de uma determinada população de H. zea. As características analisadas foram parasitismo (%), emergência dos indivíduos (%), razão sexual e número de adultos por ovo do hospedeiro. Na análise de B. thuringiensis, foram utilizados 34 isolados e os formulados comerciais Dipel® e Agree®, que foram inoculados sobre a dieta, na concentração 3 x 108 esporos mL-1. Além disso, foi realizada a estimativa da concentração letal (CL50) para os isolados e formulados mais virulentos. Na avaliação da interação entre os agentes, cartelas com ovos das populações de H. zea foram pulverizados com diferentes isolados e formulados de B. thuringiensis e oferecidas para fêmeas de uma população de Trichogramma. As características avaliadas foram as mesmas descritas acima para as populações de Trichogramma, com exceção da longevidade das fêmeas. Os agentes de controle biológico Trichogramma e B. thuringiensis se mostraram adequados para o manejo de populações de H. zea. Além disso, o uso conjunto desses agentes gerou poucos efeitos negativos e em alguns casos até potencializou o parasitismo de Trichogramma sp., evidenciando que o uso deles em conjunto pode aumentar a eficiência de controle das populações de H. zea. Alterações ocasionadas pela diferença populacional nas características biológicas de Trichogramma e nos níveis de virulência dos isolados e formulados de B. thuringiensis foram registradas, porém essas variações não foram suficientes para gerar níveis indesejáveis dessas características no manejo das populações de insetos

A macieira é depreciada por muitos insetos, principalmente pela lagarta-enroladeira-da-macieira Bonagota salubricola (Lepidoptera: Tortricidae). Até o momento seu controle nos pomares comerciais é feito quase exclusivamente com inseticidas químicos. Alternativamente, este trabalho teve por objetivo verificar a mortalidade in vitro de larvas de segundo instar de B. salubricola frente a ação de isolados dos fungos Nomuraea, Beauveria e Metarhizium. Cada grupo foi tratado com suspensões de 2x105 a 2x109 con/mL, exceto para o grupo controle, tratado com solução Tween-80 0,1%. Também avaliou-se a sobrevivência pupal, expressão de proteases e a compatibilidade com inseticidas químicos. Uma das linhagens de Beauveria e as três de Metarhizium foram patogênicas a B. salubricola, sendo que os níveis de virulência aumentaram em função da concentração de conídios. A linhagem E6 de M. anisopliae destacou-se por proporcionar um controle de até 88% com TL50 de 1,66 dias; a maior virulência relacionou-se positivamente com o aumento da produção enzimática, sendo esta linhagem também compatível com tebufenozide. Esses resultados evidenciam o potencial dos fungos entomopatogênicos no controle de B. salubricola, visando sua aplicação principalmente nos pomares MIP. / The apple tree is deprecated by many insects, especially by leaf-roller-apple Bonagota salubricola (Lepidoptera: Tortricidae). Its control in commercial orchards is done almost exclusively with chemical insecticides. Alternatively, this work aimed at the evaluation of the in vitro susceptibility of larvae of the second ínstar of Bonagota salubricola to isolates of Nomuraea, Beauveria and Metarhizium fungus. Each group was treated with suspensions ranged of 2x105 con/mL a 2x109 con/mL, except for the control group, treated with solution Tween-80 0.1%. Also was evaluated the pupal survival, expression of proteases and compatibility with chemical insecticides. One strain of Beauveria and three strain of Metarhizium were pathogenic to B. salubricola, and the levels of virulence increased depending of conidia concentration. The strain E6 of M. anisopliae stood out for marking a control up to 88% with LT50 of 1.66 days, the largest virulence related positively to the increased production enzyme, and this strain was also compatible with tebufenozide. Those results demonstrate the potential of entomopathogenic fungi in control of B. salubricola, principally on the orchards IPM.