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Acessos de tomateiro resistentes à Helicoverpa armigera (Hübner) (Lepidoptera: Noctuidae) e seus compostos químicos / Accesses of tomatoes resistant to Helicoverpa armigera (Hübner) (Lepidoptera: Noctuidae) and their chemicals compounds

Costa, Nayara Cecília Rodrigues 25 January 2017 (has links)
Submitted by Reginaldo Soares de Freitas (reginaldo.freitas@ufv.br) on 2017-05-05T13:52:05Z No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 394603 bytes, checksum: 3137a1a4eb224c391a32aef69b624ebf (MD5) / Made available in DSpace on 2017-05-05T13:52:05Z (GMT). No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 394603 bytes, checksum: 3137a1a4eb224c391a32aef69b624ebf (MD5) Previous issue date: 2017-01-25 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / Lagartas broqueadoras de frutos do tomate causam prejuízos econômicos, sendo Helicoverpa armigera a mais recente relatada. Objetivou-se selecionar acessos de tomateiro resistentes à H. armigera, identificar e quantificar seus compostos químicos. O experimento em delineamento inteiramente casualizado foi constituído por 9 tratamentos (8 acessos BGH - UFV e ‘Santa Clara’), com quatro repetições. Aos 70 dias após o transplantio, os frutos foram colhidos e submetidos a três avaliações: antibiose, teores nutricionais e metabólitos secundários. Foram avaliados para a antibiose: razão sexual, número e porcentagem de deformações, duração em dias por estádio, ganho de peso diário e total, sobrevivência-mortalidade. A análise nutricional foi feita para cálcio, enxofre, potássio e nitrogênio (N), e com os resultados de N procedeu-se a conversão em proteína. Os metabólitos secundários foram identificados e quantificados através de cromatografia gasosa acoplada a espectrometria de massa (CG/MS). Na antibiose, houve uma variação nos níveis de resistência dos BGH 985, 2029, 2030, 2100 e 2121 à H. armigera que apresentaram efeitos adversos sob a biologia do inseto. Observou-se que os acessos resistentes à praga apresentaram desbalanço dos nutrientes analisados. A presença de 2- undecanona foi identificada em sete acessos e ‘Santa Clara’, em que o BGH 2100 apresentou a maior concentração. Houve toxicidade de 2-undecanona às lagartas, sendo que a dose de 12,3 μL 10 mL-1 causou a mortalidade de 50% da população. Portanto, as características de resistência dos acessos testados mostram que os mesmos podem ser utilizados em programas de melhoramento. / Tomato fruit borer caterpillars cause economic damage, with Helicoverpa armigera being the most recent discovery. The objective was to select tomato accessions resistant to H. armigera, to identify and quantify their chemicals compounds. The experiment in a completely randomized design consisted of 9 treatments (8 accessions BGH - UFV and ‘Santa Clara’), with four replications. At 70 days after transplanting, the fruits were harvested and submitted to three evaluations: antibiosis, nutritional contents and secondary metabolites. The antibiosis was evaluated: sexual ratio, number and percentage of deformations, duration by stage, weight gain daily and total, survival and mortality. The nutritional analysis was done for calcium, sulfur, potassium and nitrogen (N), and with the N results the protein was converted. The secondary metabolites were identified and quantified by gas chromatography coupled to mass spectrometry (GC/MS). In antibiosis, there was a variation in resistance levels of BGH 985, 2029, 2030, 2100 and 2121 to H. armigera that had adverse effects under insect biology. It was observed that the pest resistant accesses showed an imbalance of the analyzed nutrients. The presence of 2-undecanone was identified in seven accessions and ‘Santa Clara’, in which BGH 2100 presented the highest concentration. There was 2-undecanone toxicity to the caterpillars, and the dose of 12,3 μL 10 mL-1 caused the mortality of 50% of the population. Therefore, the resistance characteristics of the accesses tested show that they can be used in breeding programs.
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Consequências ecológicas do ataque de plantas de tomate por Tetranychus evansi

Tschoeke, Marcela Cristina Agustini Carneiro da Silveira 20 August 2015 (has links)
Os ácaros Tetranychus evansi e Tetranychus urticae são pragas conhecidas de tomateiros. O ácaro T. urticae induz as defesas diretas e indiretas das plantas de tomate. Já a espécie T. evansi suprime as defesas diretas e indiretas e protege seu sitio de alimentação com a produção de teia densa. Não se conhece o desempenho de insetos pragas em plantas infestadas por ácaros T. evansi. O objetivo deste trabalho foi avaliar, em campo, a colonização de plantas por outros artrópodes após serem infestadas por T. evansi ou por T. urticae. No primeiro capítulo da tese foram feitos experimentos em campo para avaliar o desempenho de fêmeas de T. evansi em plantas de tomate limpas (controle) ou infestadas por T. evansi ou infestadas por T. urticae. Foi observado que a oviposição de fêmeas de T. evansi em plantas infestadas anteriormente por T. urticae foi significativamente menor do que observada em plantas limpas ou infestadas antes por T. evansi. Também foi avaliada a preferência de artrópodes em cada tratamento. As plantas foram separadas em três tratamentos (planta limpa, infestada com 400 ácaros T. urticae ou T. evansi) e após 4 dias foram posicionadas em um hexágono, em campo. A maior quantidade de herbívoros foi encontrada em plantas limpas do que em plantas infestadas com T. urticae ou com T. evansi. Dentre os herbívoros com maior abundância e frequência estavam as moscas brancas Bemisia tabaci (Biotipo B). No segundo capítulo foi estudada a preferência das moscas brancas (B. tabaci) em plantas limpas ou infestadas por T. evansi ou T. urticae com e sem teia. As moscas brancas foram encontradas em maior quantidade em plantas limpas ou infestadas por T. urticae. No terceiro capítulo foi avaliada a oviposição e desempenho de moscas brancas B. tabaci em plantas limpas ou infestadas com ácaros T. evansi ou T. urticae. As moscas brancas ovipositaram mais em plantas infestadas por T. evansi e em plantas limpas. Não houve diferença significativa na taxa de mortalidade de ninfas de moscas brancas entre os tratamentos. Nessa tese foi comprovado que artrópodes em campo evitam plantas infestadas por T. evansi. / The spider mites Tetranychus evansi and Tetranychus urticae are pests of tomato plants. The species T. urticae induces direct and indirect defenses of tomato plants. The species T. evansi suppresses direct defenses of tomato plants and protects its feeding site with dense web. The performance of insect pests on plants infested by T. evansi mites is not known. The objective of this study was to evaluate the colonization of plants infested by T. evansi and T. urticae by other arthropods in the field. In the first chapter of this thesis I evaluated the performance of females of T. evansi in clean or infested tomato plants by T. evansi or T. urticae. I observed that the oviposition of T. evansi females was significantly lower on plants previously infested by T. urticae than on clean or infested plants by T. evansi. In another experiment, I evaluated the preference of arthropods in each treatment. Plants were divided into three treatments (clean plant, infested with 400 T. urticae or 400 T. evansi) and after 4 days they were positioned in a hexagon in the field. The largest amount of herbivores were found on clean plants, than on plants infested by T. urticae or T. evansi. The whitefly Bemisia tabaci (byotipe B) was the most abundant herbivore found on the plants. In the second chapter, I studied the preference of whitefly (B. tabaci) for clean plants or plants infested by T. evansi or T. urticae with and without web. The whiteflies were found in greater quantities in clean plants or plants infested by T. urticae. In the third chapter, I assessed the oviposition and performance of whitefly B. tabaci in clean plants or infested plants with T. evansi or T. urticae. The whiteflies laid more eggs on plants infested by T. evansi and clean plants. There was no significant difference in mortality of whiteflies nynphs between treatments. This thesis has been proved that arthropods in the field avoid plants infested by T. evansi, in the field.
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Análise comparativa de parâmetros bioquímicos e fisiológicos de um genótipo de feijão-de-corda (Vigna unguiculata L. Walp.) suscetível e seu mutante derivado, resistente, infectados com o vírus do mosaico severo do caupi (CPSMV) / Comparative Analysis of Physiological and Biochemical Parameters from a Susceptible Cowpea (Vigna unguiculata L. Walp.) genotype and its derivative mutagenized-Resistant both infected with Cowpea Severe Mosaic Virus

Souza, Pedro Filho Noronha de January 2016 (has links)
SOUZA, Pedro Filho Noronha de. Análise comparativa de parâmetros bioquímicos e fisiológicos de um genótipo de feijão-de-corda (Vigna unguiculata L. Walp.) suscetível e seu mutante derivado, resistente, infectados com o vírus do mosaico severo do caupi (CPSMV). 2016. 180 f. Tese (Doutorado em bioquímica)- Universidade Federal do Ceará, Fortaleza-CE, 2016. / Submitted by Elineudson Ribeiro (elineudsonr@gmail.com) on 2016-07-28T15:30:39Z No. of bitstreams: 1 2016_tese_pfnsouza.pdf: 6363124 bytes, checksum: a74bcc0c69df39e0286b864e93babb1a (MD5) / Approved for entry into archive by José Jairo Viana de Sousa (jairo@ufc.br) on 2016-08-02T14:43:45Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2016_tese_pfnsouza.pdf: 6363124 bytes, checksum: a74bcc0c69df39e0286b864e93babb1a (MD5) / Made available in DSpace on 2016-08-02T14:43:45Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2016_tese_pfnsouza.pdf: 6363124 bytes, checksum: a74bcc0c69df39e0286b864e93babb1a (MD5) Previous issue date: 2016 / Cowpea is an important crop that makes major nutritional contributions as a source of proteins and carbohydrates in the diet of many people worldwide. However, its production is impaired due to various stresses including those of biotic origins. Cowpea Severe Mosaic Virus (CPSMV) infects cowpeas leading to severe symptoms and low productivity. Several studies of plant-virus interaction show that seed treatment with Ethyl methanesulfonate (EMS, chemical mutagen), results in a resistant phenotype in plants, which was previously susceptibility, to virus infection of the Potyvirus genus. The aim of this study was to investigate some physiological and biochemical parameters of a susceptible cowpea cultivar (CPI) (CE-31, sin. Pitiuba) in comparison with its derived resistant mutagenized (MCPI), both infected with CPSMV. MCPI plantlets were obtained after treatment of CE-31 seeds with 0.04% EMS. Two different approaches were used in this study: 1) biochemical (antioxidant enzymes and H2O2 content, PR-proteins and secondary metabolites) and physiological analysis (photosynthetic parameters and chlorophyll content); and 2) Label free quantitative proteomic approach (LC-ESI-MS / MS) to identify proteins responsive to viral infection. Our results showed that MCPI had no symptoms of CPSMV infection and biochemical (high H2O2, PR-proteins and secondary compounds [phenolic and lignin]) and physiological responses (High photosynthesis index and chlorophyll content) is activated in MCPI plantlets after CPSMV inoculation. With regard to proteomic analysis, 99 proteins were differentially represented, where these 68 are up- and 31 down represented in MCPI compared to CPI. Regardless whether to CPI (susceptible) or MCPI (mutagenized resistant) plantlets, CPSMV induce changes in proteome profile that involve several biological process (energy and metabolism, photosynthesis, response to stress, oxidative burst, and scavenging). Moreover, these results suggest that the CPSMV responsive proteins in the MCPI represent a complex network involving in resistant mechanisms to CPSMV. Treatment of the susceptible CE-31 genotype seeds with the mutagenic agent EMS induced genomic alterations generating a cowpea mutagenized resistant to CPSMV by apparently inducing classical biochemical and physiological responses against infection. / O feijão-de-corda tem grande importância socioeconômica no Nordeste brasileiro. Entretanto, sua produção é baixa devido a diversos fatores bióticos, como, por exemplo, o vírus do mosaico severo do caupí (CPSMV, gênero Comovirus), que apresenta grande destaque, por causar a virose que mais acomete essa cultura no país. No estudo da interação planta-vírus, diversos trabalhos mostram que o tratamento de sementes com o etil metanosulfonato (EMS, mutagênico químico) resulta no fenótipo de resistência em plantas que, anteriormente, apresentavam susceptibilidade à infecção por vírus do gênero Potyvirus. Por essa razão, o presente estudo teve como objetivo investigar as respostas de defesa bioquímicas e fisiológicas das plantas de feijão-de-corda do genótipo (CE-31) susceptível ao CPSMV (CPI) a partir de sementes tratadas com EMS (0,04% v/v), e avaliar se as plantas mutagenizadas (MCPI), produzidas a partir dessas sementes se tornaram resistentes ao CPSMV. Duas diferentes abordagens foram utilizadas neste trabalho: 1) análises bioquímicas (enzimas antioxidantes e conteúdo de H2O2, PR-proteínas e compostos secundários) e fisiológicas (parâmetros fotossintéticos e teor de clorofila); 2) abordagem proteômica quantitativa (LC-ESI-MS/MS), livre de marcação, para identificar proteínas responsivas à infecção viral. Os resultados obtidos demonstram que as plantas MCPI são capazes de induzir respostas bioquímicas (aumento de H2O2, indução de PR-proteínas e aumento no conteúdo de compostos secundários) e alterações nos parâmetros fisiológicos (alta taxa fotossintética e teor de clorofila) que, aparentemente, têm relação com o fenótipo de resistência das plantas mutagenizadas ao CPSMV. Na análise proteômica, 99 proteínas foram identificadas como sendo diferenciais, das quais 68 aumentaram e 31 diminuíram em abundância nas plantas MCPI em relação as plantas CPI. A análise proteômica, mostrou diversas vias metabólicas (Metabolismo Redox, Energia e Metabolismo, Fotossíntese, Metabolismo de RNA e Defesa) envolvidas nas respostas de defesa das plantas MCPI frente a infecção viral. O tratamento das sementes com o EMS, resultou em plantas de feijão-de-corda com fenótipo de resistência capazes de acionar mecanismos de defesa para impedir a infeção viral.
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AnÃlise proteÃmica de raÃzes de feijÃo-de-corda (Vigna unguiculata), CV. CE-31, inoculadas com o nematÃide das galhas (Meloydogine incognita) / Proteomics analysis of cowpea roots (Vigna unguiculata), CV. CE-31, inoculated with root-knot nematode (Meloydogine incognita)

Josà HÃlio de AraÃjo Filho 15 September 2011 (has links)
CoordenaÃÃo de AperfeÃoamento de Pessoal de NÃvel Superior / O feijÃo-de-corda [Vigna unguiculata (L.) Walp.] à uma importante leguminosa usada como alimento, sendo cultivada, primariamente, nas savanas secas do Continente Africano, na Ãsia e na AmÃrica do Sul, cobrindo mais de 12 milhÃes de hectares, com produÃÃo anual de cerca de 3 milhÃes de toneladas. O feijÃo-de-corda se constitui numa cultura de extrema importÃncia em zonas semi-Ãridas dos trÃpicos, caracterizadas por baixa precipitaÃÃo pluviomÃtrica, altas temperaturas, solos arenosos e de baixa fertilidade. Dentre os organismos que causam doenÃas nos vegetais, os nematÃides geram prejuÃzos anuais de, aproximadamente, vÃrios bilhÃes de dÃlares na agricultura mundial e as espÃcies Meloidogyne incognita e Meloidogyne javanica sÃo as mais danosas. Uma das principais culturas atacadas pelos nematÃides à o feijÃo-de-corda. Em funÃÃo disso, existe sempre demanda para se buscar melhorar a compreensÃo dessa relaÃÃo entre hospedeiros e patÃgenos objetivando criar novas estratÃgias para minimizar eventuais perdas. O presente trabalho teve como objetivo identificar as proteÃnas que tÃm sua expressÃo diferenciada em raÃzes de feijÃo-de-corda resistente ao Meloidogyne incognita (inoculadas e nÃo inoculadas) usando eletroforese bidimensional (2D) associada à espectrometria de massas de proteÃnas extraÃdas da raiz total e de mitocÃndrias de raiz do cv PitiÃba (CE-31), resistente ao nematÃide, inoculada com este patÃgeno, em comparaÃÃo com plantas nÃo-inoculadas (controle) em conjunto com anÃlise de expressÃo gÃnica semi-quantitativa (PCR semi-quantitativa). Os resultados aqui obtidos demonstraram que houve alteraÃÃo de pelo menos 22 proteÃnas nas amostras de raÃzes inoculadas e mais 22 proteÃnas de mitocÃndrias de raÃzes, quando comparados com seus respectivos controles e que o Ãpice das suas alteraÃÃes ocorriam por volta do 6 dia apÃs a inoculaÃÃo do patÃgeno. As proteÃnas de mitocÃndrias nÃo puderam ser identificadas com confiabilidade. Dentre as proteÃnas de raÃzes totais identificadas podemos destacar as PR-1, 2 e 3, que sÃo reconhecidamente proteÃnas de defesa, ascorbato peroxidase e superÃxido dismutase (enzimas anti-estresse oxidativo) e uma leghemoglobina, que pode ser o primeiro relato dessa proteÃna nesse patossistema. As anÃlises de expressÃo gÃnica concordaram perfeitamente com os achados proteÃmicos. / The cowpea [Vigna unguiculata (L.) Walp.] is an important leguminous used as food, being cultivated, mostly in arid African savannas , Asia and south of America, covering more over 12 millions of hectares, with annual production about 3 millions of tons. The cowpea itâs a culture greatly important in tropics zones characterized by low pluviometric precipitation, high temperature , gravely soils and poor fertility. Among the pathogenic organism that cause plant disease, the nematode, mainly Meloydogine sp. generate annual losses about several billions of dollars all over the world and the Meloidogyne incognita and Meloidogyne javanica species be the most damagers. One of the main cultures attacked by nematodes is the cowpea. Regard it, there is always needs to improve the knowledge about the relationship between host and pathogens aimed develop novels strategies to diminish eventual losses. The present work aimed identify the differential expression of proteins in Meloidogyne incognita resistant cowpea total roots and mitochondria roots cv PitiÃba (CE-31), inoculated and mock inoculated, using 2D electrophoresis assay associated with MS identification and gene expression analyses by semi-quantitative PCR. The results obtained showed at least 22 altered proteins in inoculated total roots and more 22 proteins of mitochondria roots, when compared with their respective controls and the top of alterations occurred next to 6 day after inoculation with pathogen. Mitochondria proteins cannot be identified reliability. Among the total roots proteins we can emphasize PR-1, 2 and 3, recognized as defense proteins, ascorbate peroxidase and superoxide dismutase (anti-oxidative brush enzymes) and a leghemoglobin, which can be the first report about this protein in this pathosystem. The gene expression analyses coincided with proteomics finds.
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The interaction of cashew (Anacardium occidentale L.) with the fungus Lasiodiplodia theobromae reprograms the expression of proteins in the stem, the site of pathogen infection / A interaÃÃo do cajueiro (Anacardium occidentale L.) com o fungo Lasiodiplodia theobromae reprograma a expressÃo de proteÃnas no caule, sÃtio de infecÃÃo do patÃgeno

Aline Kelly de Aquino Lima Cipriano 21 March 2014 (has links)
CoordenaÃÃo de AperfeiÃoamento de Pessoal de NÃvel Superior / No Brasil, a indÃstria do caju à uma das principais fontes de renda e trabalho no campo e representa a maior parcela da economia na regiÃo nordeste, que concentra 94% da produÃÃo, destacando-se os estados do CearÃ, Piauà e Rio Grande do Norte, respectivamente. Neste contexto, para otimizar o setor produtivo, estratÃgias de melhoramento genÃtico de cultivares tÃm focado na seleÃÃo e desenvolvimento de clones anÃos. Entretanto, essa prÃtica tem contribuÃdo para diminuiÃÃo da variabilidade genÃtica e, consequentemente, para maior vulnerabilidade ao ataque de patÃgenos. A resinose, causada pelo fungo Lasiodiplodia theobromae (Pat.) Griff & Maubl. à considerada a principal doenÃa do cajueiro nas condiÃÃes semiÃridas. MÃtodos eficientes de controle da doenÃa ainda nÃo foram estabelecidos. Baseado na ausÃncia de dados publicados com relaÃÃo Ãs respostas bioquÃmicas e fisiolÃgicas do cajueiro infectado com L. theobromae, associado ao fato de que as plantas, para se defenderem do ataque de patÃgenos, acionam/alteram vias metabÃlicas controladas por diversas proteÃnas, o estudo da identidade dessas proteÃnas fornecem informaÃÃes sobre os mecanismos relacionados à interaÃÃo de compatibilidade/incompatibilidade entre o cajueiro e L. theobromae. Dessa forma, nesse estudo, foi realizada anÃlise proteÃmica diferencial de caules de cajueiro (Anacardium occidentale), clone BRS 226 (resistente), mantido em condiÃÃes controladas, em tempos iniciais pÃs-infecÃÃo com o L. theobromae, assim como, de plantas de cajueiro resultantes da polinizaÃÃo aberta do BRS 226, classificadas como resistentes e suscetÃveis à resinose, em condiÃÃes de campo, onde hà alta pressÃo do patÃgeno. ProteÃnas diferencialmente expressas foram identificadas por eletroforese bidimensional (2D-PAGE) combinada com espectrometria de massas ESI-Q-TOF MS/MS. Plantas de cajueiro infectadas com L. theobromae acionam respostas fisiolÃgicas associadas à reprogramaÃÃo da expressÃo de um total de 73 proteÃnas, nos cenÃrios investigados. Destas, 36 foram identificadas no clone BRS 226, artificialmente inoculado, e 37 nas plantas de cajueiro, cultivadas em condiÃÃes de campo. Portanto, um nÃmero equivalente de proteÃnas à responsivo dentro dos cenÃrios analisados e compartilham funÃÃes celulares em rotas metabÃlicas e de produÃÃo de energia, estresse/defesa, sinalizaÃÃo celular e enovelamento/metabolismo de proteÃnas. ProteÃnas responsivas a hormÃnios e envolvidas com estrutura celular foram diferencialmente expressas somente em plantas crescidas em condiÃÃo de campo, enquanto proteÃnas de transporte foram reprogramadas no clone BRS 226. Plantas de cajueiro, cultivadas em campo, e inoculadas do clone BRS 226 compartilharam a expressÃo reprogramada de 6 proteÃnas idÃnticas, dentre as quais, proteÃnas 14-3-3 e anexinas, envolvidas com a sinalizaÃÃo celular, foram influenciadas ao mesmo tempo, aparentemente, pelos estresses abiÃtico e biÃtico. A reprogramaÃÃo de funÃÃes celulares comuns somado a alteraÃÃo na expressÃo de 6 proteÃnas idÃnticas, nas condiÃÃes estudadas, mostrou sobreposiÃÃo de respostas, que parece ser indicativo da infecÃÃo pelo L. theobromae no tecido caulinar. Essas observaÃÃes revelam proteÃnas que sÃo alvos dos mecanismos celulares acionados em plantas de cajueiro desafiadas com L. theobromae e constituem uma base inicial de resultados que podem ser, futuramente, integrados a programas de melhoramento genÃtico do cajueiro, visando resistÃncia, particularmente, à resinose. / Recent studies demonstrated the efficacy of mangrove retaining nutrients and, in particular, the ability of the mineral component of the buffer in its high soil phosphorus levels. In general, the mangroves have been considered as important sinks of nutrients due to its high capacity purification of effluents. However, depending on the geochemical conditions exist, these soils can act as a source of phosphorus to other environments and / or coastal waters. Given that the geochemical behavior of phosphorus and its role in eutrophication of water bodies, is best measured by the behavior of its different fractions, this paper aims at a fractionation of the different forms of phosphorus in wetlands impacted by different effluent. The objective of this project is to study three areas in order to assess how activities impacting interfere in the process of nutrient cycling (with special emphasis on the dynamics of phosphorus forms) and, as the marsh supports the stress caused by these activities. Also, if you evaluate the potential for eutrophication of each human activities. Taking into consideration the impact that these environments suffer as a result of separate activities, were established the following areas of study: a marsh impacted by effluents from shrimp, a marsh impacted by effluents, and a control area located in a preserved area that still finds is little affected by human impacts. The samples were determined pH, Eh, salinity, grain size and the total content of C and P. In addition, extraction was performed sequentially phosphorus which allows differentiation of fractions 7: P exchangeable (NaClP), P associated with iron oxides (Fe-P); organic P (AH-P), the bound phosphorus hydroxides Al (Al-P), P associated with compounds of calcium (Ca-P); phosphorus associated refracting matter (P-RES) and unreacted phosphorus (P-NR). The results indicate that the discharge of effluents in mangrove increases the amount of phosphorus in these environments, especially in organic form, the phosphorus bound to carbonate is the major inorganic fraction in these environments.
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AnÃlise comparativa de parÃmetros bioquÃmicos e fisiolÃgicos de um genÃtipo de feijÃo-de-corda (Vigna unguiculata L. Walp.) suscetÃvel e seu mutante derivado, resistente, infectados com o vÃrus do mosaico severo do caupi (CPSMV) / Comparative Analysis of Physiological and Biochemical Parameters from a Susceptible Cowpea (Vigna unguiculata L. Walp.) genotype and its derivative mutagenized-Resistant both infected with Cowpea Severe Mosaic Virus

Pedro Filho Noronha de Souza 05 April 2016 (has links)
CoordenaÃÃo de AperfeiÃoamento de Pessoal de NÃvel Superior / O feijÃo-de-corda tem grande importÃncia socioeconÃmica no Nordeste brasileiro. Entretanto, sua produÃÃo à baixa devido a diversos fatores biÃticos, como, por exemplo, o vÃrus do mosaico severo do caupà (CPSMV, gÃnero Comovirus), que apresenta grande destaque, por causar a virose que mais acomete essa cultura no paÃs. No estudo da interaÃÃo planta-vÃrus, diversos trabalhos mostram que o tratamento de sementes com o etil metanosulfonato (EMS, mutagÃnico quÃmico) resulta no fenÃtipo de resistÃncia em plantas que, anteriormente, apresentavam susceptibilidade à infecÃÃo por vÃrus do gÃnero Potyvirus. Por essa razÃo, o presente estudo teve como objetivo investigar as respostas de defesa bioquÃmicas e fisiolÃgicas das plantas de feijÃo-de-corda do genÃtipo (CE-31) susceptÃvel ao CPSMV (CPI) a partir de sementes tratadas com EMS (0,04% v/v), e avaliar se as plantas mutagenizadas (MCPI), produzidas a partir dessas sementes se tornaram resistentes ao CPSMV. Duas diferentes abordagens foram utilizadas neste trabalho: 1) anÃlises bioquÃmicas (enzimas antioxidantes e conteÃdo de H2O2, PR-proteÃnas e compostos secundÃrios) e fisiolÃgicas (parÃmetros fotossintÃticos e teor de clorofila); 2) abordagem proteÃmica quantitativa (LC-ESI-MS/MS), livre de marcaÃÃo, para identificar proteÃnas responsivas à infecÃÃo viral. Os resultados obtidos demonstram que as plantas MCPI sÃo capazes de induzir respostas bioquÃmicas (aumento de H2O2, induÃÃo de PR-proteÃnas e aumento no conteÃdo de compostos secundÃrios) e alteraÃÃes nos parÃmetros fisiolÃgicos (alta taxa fotossintÃtica e teor de clorofila) que, aparentemente, tÃm relaÃÃo com o fenÃtipo de resistÃncia das plantas mutagenizadas ao CPSMV. Na anÃlise proteÃmica, 99 proteÃnas foram identificadas como sendo diferenciais, das quais 68 aumentaram e 31 diminuÃram em abundÃncia nas plantas MCPI em relaÃÃo as plantas CPI. A anÃlise proteÃmica, mostrou diversas vias metabÃlicas (Metabolismo Redox, Energia e Metabolismo, FotossÃntese, Metabolismo de RNA e Defesa) envolvidas nas respostas de defesa das plantas MCPI frente a infecÃÃo viral. O tratamento das sementes com o EMS, resultou em plantas de feijÃo-de-corda com fenÃtipo de resistÃncia capazes de acionar mecanismos de defesa para impedir a infeÃÃo viral / Cowpea is an important crop that makes major nutritional contributions as a source of proteins and carbohydrates in the diet of many people worldwide. However, its production is impaired due to various stresses including those of biotic origins. Cowpea Severe Mosaic Virus (CPSMV) infects cowpeas leading to severe symptoms and low productivity. Several studies of plant-virus interaction show that seed treatment with Ethyl methanesulfonate (EMS, chemical mutagen), results in a resistant phenotype in plants, which was previously susceptibility, to virus infection of the Potyvirus genus. The aim of this study was to investigate some physiological and biochemical parameters of a susceptible cowpea cultivar (CPI) (CE-31, sin. Pitiuba) in comparison with its derived resistant mutagenized (MCPI), both infected with CPSMV. MCPI plantlets were obtained after treatment of CE-31 seeds with 0.04% EMS. Two different approaches were used in this study: 1) biochemical (antioxidant enzymes and H2O2 content, PR-proteins and secondary metabolites) and physiological analysis (photosynthetic parameters and chlorophyll content); and 2) Label free quantitative proteomic approach (LC-ESI-MS / MS) to identify proteins responsive to viral infection. Our results showed that MCPI had no symptoms of CPSMV infection and biochemical (high H2O2, PR-proteins and secondary compounds [phenolic and lignin]) and physiological responses (High photosynthesis index and chlorophyll content) is activated in MCPI plantlets after CPSMV inoculation. With regard to proteomic analysis, 99 proteins were differentially represented, where these 68 are up- and 31 down represented in MCPI compared to CPI. Regardless whether to CPI (susceptible) or MCPI (mutagenized resistant) plantlets, CPSMV induce changes in proteome profile that involve several biological process (energy and metabolism, photosynthesis, response to stress, oxidative burst, and scavenging). Moreover, these results suggest that the CPSMV responsive proteins in the MCPI represent a complex network involving in resistant mechanisms to CPSMV. Treatment of the susceptible CE-31 genotype seeds with the mutagenic agent EMS induced genomic alterations generating a cowpea mutagenized resistant to CPSMV by apparently inducing classical biochemical and physiological responses against infection

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