We report the case of a 10 year old girl, born and raised in the city of Iquitos in Peru who presented with headache, fever, chills, musculoskeletal pain, mild epigastric pain, epistaxis and hematemesis. On physical examination, the patient was afebrile and in good general condition. Serological tests confirmed infection of dengue and leptospirosis. The patient received intravenous hydration with sodium chloride 0.9% and penicillin G sodium, achieving a favorable clinical course such that she was discharged a few days after admission to the hospital. Although these diseases are common in the Peruvian Amazon, the simultaneous presence of both in the pediatric population is little documented; therefore, a good clinical history and laboratory tests are important for diagnosis and treatment. / alexandrang@gmail.com / Se reporta el caso de una niña de 10 años, natural y procedente de la ciudad de Iquitos en Perú que presentó cefalea, fiebre, escalofríos, dolor osteomuscular, leve dolor en epigastrio, epistaxis y hematemesis. Al examen físico la paciente se encontraba afebril y en regular estado general. Por medio de pruebas serológicas se confirmó la infección por dengue y leptospirosis. La paciente recibió hidratación endovenosa con cloruro de sodio al 0,9% y penicilina G sódica, logrando una evolución clínica favorable por lo que fue dada de alta a los pocos días de su ingreso al hospital. Aunque estas dos enfermedades son comunes en la Amazonía peruana, la presencia simultánea de ambas en la población pediátrica es poco documentada; por ello, una buena historia clínica y exámenes de laboratorio son importantes para el diagnóstico y tratamiento oportuno.

During 2010 and 2011, the Loreto region of Peru experienced a dengue outbreak of unprecedented magnitude and severity for the region. This outbreak coincided with the reappearance of dengue virus-2 (DENV-2) in Loreto after almost 8 years. Whole-genome sequence indicated that DENV-2 from the outbreak belonged to lineage II of the southeast Asian/American genotype and was most closely related to viruses circulating in Brazil during 2007 and 2008, whereas DENV-2 previously circulating in Loreto grouped with lineage I (DENV-2 strains circulating in South America since 1990). One amino acid substitution (NS5 A811V) in the 2010 and 2011 isolates resulted from positive selection. However, the 2010 and 2011 DENV-2 did not replicate to higher titers in monocyte-derived dendritic cells and did not infect or disseminate in a higher proportion of Aedes aegypti than DENV-2 isolates previously circulating in Loreto. These results suggest that factors other than enhanced viral replication played a role in the severity of this outbreak.

La investigación tiene como objetivo identificar los factores de riesgo intrínsecos y extrínsecos que predisponen a los pobladores del Asentamiento Humano San Francisco a contraer Dengue. El Asentamiento Humano San Francisco pertenece a la jurisdicción sanitaria del Centro de Salud Santiago Apóstol, de la Red de Salud VI Tupac Amaru de la Dirección de Salud Lima Ciudad. El estudio es aplicativo de enfoque cuantitativo, tipo descriptivo, de corte transversal; la población estuvo compuesta por los pobladores del Asentamiento Humano San Francisco, contando con un total de 121 personas. Los instrumentos que se aplicaron fueron el formulario y la lista de chequeo. En relación a los factores de riesgo, se obtuvo que las características físicas de la comunidad y de las viviendas, el inadecuado abastecimiento de agua intradomiciliaria, así como el desconocimiento de la mayoría de los pobladores sobre aspectos importantes de la enfermedad como el hábitat, los criaderos del mosquito y alguna de sus medidas preventivas; y las inadecuadas prácticas de éstas, predispone al poblador a contraer dengue con el consecuente rebrote de la enfermedad. La presencia de factores extrínsecos e intrínsecos que limitan el control vectorial favorece la presencia del mosquito y su permanencia en la comunidad. / The investigation has as aim identify the intrinsic and extrinsic factors of risk that predispose to the settlers of the Human Accession San Francisco to contract Fastidiousness. The Human Accession San Francisco Apostle belongs(concerns) to the sanitary jurisdiction of the Center of Health Santiago, of the Network(Net) of Health the VIth Tupac Amaru of the Direction of Health Lima City The study is aplicativo of quantitative approach, descriptive type, of transverse court; the population was composed by the settlers of the Human Accession San Francisco, possessing (relying on) a whole of 121 persons. The instruments that were applied were the form and the list of checkup. In relation to the factors of risk, there was obtained that the physical characteristics of the community and of the housings, the inadequate supply of water intradomiciliaria, as well as the ignorance of the majority of the settlers on important aspects of the disease like the habitat, the breeding-places of the mosquito and someone of his(her,your) preventive measures; and the inadequate practices of these, it(he,she) predisposes the settler to contract fastidiousness with the consistent new shoot of the disease. The presence of extrinsic and intrinsic factors that limit the vectorial control favors the presence of the mosquito and his permanency in the community.

El dengue es una enfermedad febril aguda viral causada por la infección con uno de los cuatro serotipos del virus del dengue (DENV-1, 2, 3 y 4) que se trasmite al hombre a través del mosquito del género Aedes aegypti. En el presente estudio se identificaron los genotipos y linajes de los cuatro serotipos del virus dengue a partir de los aislamientos obtenidos en muestras procedentes de diferentes regiones geográficas de Perú durante los años 1998 - 2012. El diseño del estudio fue descriptivo - retrospectivo de las características genéticas, 109 cepas que pertenecen a uno de los cuatro serotipos del virus dengue fueron procesadas por la RT-Nested PCR para amplificar la región del gen E/NS1 y se secuenció el genoma completo de una cepa de DENV-2. Las secuencias fueron alineadas con el programa CLUSTAL X y analizadas con el programa MEGA 5.0 con el algoritmo de distancia Neighbor Joining para E/NS1 y el método de Maximum Likelihood para el genoma completo. Se identificó el serotipo DENV-1, genotipo V, con tres linajes; respecto al serotipo DENV-2, se estableció dos genotipos: el genotipo América con dos linajes y genotipo América/Asia con cinco linajes. El serotipo DENV-3, presentó el genotipo III con cinco linajes y finalmente se halló el serotipo DENV-4 con dos linajes. Se concluye que los cuatro serotipos de los virus dengue aislados en diferentes áreas geográficas de Perú durante los años 1998 - 2012 presentaron variabilidad genética a nivel de genotipos y linajes, siendo el DENV-3 más divergente con cinco linajes y el DENV-4 menos divergente con dos linajes, respecto a los otros serotipos estudiados. Palabras clave: virus dengue, serotipo s virus dengue, genotipo viral, linaje viral, genoma viral / Dengue is an acute febrile viral disease caused by infection with one of the four dengue virus serotypes (DENV-1, 2, 3 and 4) that is transmitted to humans by the mosquito Aedes aegypti. In the present study identified genotypes and line ages of the four dengue virus serotypes from isolates from different geographic regions of Peru from 1998 - 2012. Design of the study was descriptive – retrospective of the genetic features, 109 strains belonging to one of the four dengue virus serotypes were processed by RT-Nested PCR to amplify the gene region E/NS1 and sequenced the full genome of a strain of DENV-2. Sequences were aligned with the program CLUSTAL X and analyzed with the software MEGA 5.0 with the Neighbor-Joining distance algorithm for E/NS1 and Maximum Likelihood method for full genome. Was identified serotype DENV-1, genotype V, with three lineages; respect to serotype DENV-2, were described two genotypes: genotype America with two lineages and genotype Americas/Asia with five lineages. DENV-3 genotype III presented the five lineages and ultimately was found DENV-4 with two lineages. We conclude that the four serotypes of dengue viruses isolated in different geographical areas of Peru during 1998 - 2012 showed genetic variation at the level of genotypes and lineages, DENV-3 remains the most divergent with five lineages and least divergent DENV-4 with two lineages, compared to the other serotypes examined. Keywords: dengue virus, dengue virus serotype, viral genotype, viral lineage, viral genome.

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A dengue é uma arbovirose que tem se destacado nos últimos anos como um grave problema de saúde pública no Brasil. O Dengue virus (DENV) pertence à família Flaviviridae, gênero Flavivirus e seu genoma é composto de uma fita RNA, com polaridade positiva. Atualmente são conhecidos cinco sorotipos de DENV, os quais são geneticamente e antigenicamente distintos. O desenvolvimento de uma vacina que confira imunidade simultânea, eficiente e duradoura, contra os cinco sorotipos do DENV é considerado prioritário diante a magnitude do problema. Desta forma, neste estudo foi avaliado o potencial vacinal de três peptídeos (PEP01, PEP02 e PEP03) tetravalentes, sintéticos e conservados derivados da proteína do envelope do DENV. Um ensaio de ELISA indireto revelou a reatividade de amostras de soros humanos IgM/IgG positivos para dengue contra os peptídeos sintéticos. Ensaios de imunização em modelo murino mostraram que estes peptídeos foram capazes de induzir a produção de anticorpos específicos. Entretanto, os ensaios de neutralização mostraram ausência ou um baixo título de anticorpos neutralizantes. As células do baço derivadas de camundongos imunizados com os peptídeos mostraram uma alta produção de IL-10 e uma redução da produção do TNF-α e IFN-γ após a infecção com todos os sorotipos DENV quando comparado ao controle positivo. Em adição, células provenientes de camundongos imunizados com os peptídeos PEP02 e PEP03 apresentaram in vitro uma redução significativa da viabilidade celular após a infecção com os quatro sorotipos de DENV. A fim de se buscar um candidato vacinal para a dengue, foi expressa em sistema procarioto uma proteína recombinante (PEPDENV) que contém as sequências de PEP01, PEP02 e PEP03 fusionadas a uma sequência específica capaz de induzir de anticorpos neutralizantes. A imunização com a proteína PEPDENV revelou a imunogenicidade desta proteína ao induzir alta produção de anticorpos IgG1 em modelo murino, porém os soros não apresentaram atividade de neutralização da partícula viral. Ensaios imunoenzimáticos utilizando os peptídeos como substratos mostraram que os soros dos animais imunizados com PEPDENV tem capacidade de reconhecer os peptídeos, apresentando especialmente uma alta reatividade com o PEP03. Esses resultados sugerem que a ausência de atividade neutralizante dos anticorpos ocorreu pelo fato de que a resposta imune à proteína PEPDENV está mais direcionada para PEP03 do que para outras regiões da molécula, confirmando a imunogenicidade deste peptídeo. No entanto, mais estudos que visam modificar a sequência peptídica serão necessários para induzirem a produção de uma resposta imune eficaz contra todos os quatro sorotipos de DENV e também para melhorar a imunogenicidade deste canditatos vacinais. / Dengue is an arbovirus that has distinguished itself in recent years as a serious public health problem in Brazil. The Dengue virus (DENV) belongs to the family Flaviviridae, genus Flavivirus and its genome is composed of a single stranded RNA with positive polarity. Currently, there are five serotypes of DENV, which are genetically and antigenically distinct. The development of a vaccine that confers simultaneous, efficient and lasting immunity against the five serotypes of DENV is a priority given the magnitude of the problem. In this study, we evaluated the vaccine potential of three synthetic, conserved and tetravalent peptides (PEP01, PEP02 and PEP03) derived from the envelope protein. An indirect ELISA assay showed the reactivity of Dengue IgM/IgG human positive serum samples against the synthetic peptides. Immunization assays in mice have shown that these peptides were able to induce the production of specific antibodies. However, the neutralization assays showed absence or lower titers of neutralizing antibodies. The spleen cells derived from mice immunized with the peptides showed a high IL-10 expression and reduced expression of TNF-α and IFN-γ after infection for all DENV serotypes when compared with the positive control. In addition, cells from mice immunized with the PEP02 and PEP03 peptides present, in vitro, a significant reduction of cell viability after infection with the four DENV serotypes. To continue the evaluation of this vaccine candidate for dengue, it was expressed in prokaryote system a recombinant protein (PEPDENV) containing sequences of the PEP01, PEP02 and PEP03 fused to a specific sequence able to induce neutralizing antibodies. Immunization with PEPDENV protein showed the immunogenicity of this protein in inducing high production of IgG1 antibodies in mice, however the sera of immunized animals showed no neutralizing activity of the viral particle. Immunoenzymatics assay using the peptides as the substrates showed that the sera of immunized animals with PEPDENV were able to recognize the peptides, with a high reactivity to PEP03. These results suggest that the lack of neutralizing activity of the antibodies may be due to an immune response more directed to the PEP03 than to the other regions of the molecule, confirming the immunogenicity of this peptide. However, further studies aimed at modifying the peptide sequence will be required to induce the production of an effective immune response against all four serotypes of DENV and also to enhance the immunogenicity of these vaccine candidates. / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de Minas Gerais - FAPEMIG

Submitted by Gizele Lima (gizele.lima@inpa.gov.br) on 2016-11-23T12:52:52Z No. of bitstreams: 2 Juliana Bruning Azevedo.pdf: 2565810 bytes, checksum: 1751c9233813fc98d009c5515f8a7e46 (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) / Made available in DSpace on 2016-11-23T12:52:52Z (GMT). No. of bitstreams: 2 Juliana Bruning Azevedo.pdf: 2565810 bytes, checksum: 1751c9233813fc98d009c5515f8a7e46 (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Previous issue date: 2015-04-28 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPES / The Aedes aegypti is considered the main vector of dengue virus, urban yellow fever and Chikungunya fever. Insects are susceptible to changes in environmental factors such as rainfall and temperature. Responsible for regulating population size and aspects of mosquito biology, such as larval growth, development time, body size, longevity, fertility and blood supply. The Intergovernmental Panel on Climate Change (IPCC) predicts an increase of 2° to 4° C in average global temperature over the next century. These climatic changes may result in significant changes in landscapes and ecological patterns of infectious diseases, and interfere directly in the development and behavior of A. aegypti. This study evaluated different aspects of vector biology as amount amount of ingested blood, fertility, egg laying and hatching of eggs and longevity, climate change scenarios, planned for the year 2100, intermediate and extreme scenarios. Among the predicted variables to undergo changes due to climate change, the temperature is primarily responsible for changing the biology and vector behavior. Concentrations of CO2, even three times the current concentration does not significantly affect the results obtained in this study. The amount of blood ingested by females raised in higher temperature was higher compared to females who lived at lower temperatures, longevity is low at temperatures above 32° C, living approximately 40 days and no longevity difference between sex. The fertility is greatly affected by temperature, being reduced by half in higher temperatures. The oviposition is impaired in temperatures above 32° C, but this effect was not observed in the outbreak. Mathematical models project an increase in the number of dengue cases and geographic expansion in vector distribution. However, our data indicate that, in future scenarios of climate change, some aspects of the biology of A. aegypti will be affected. With the above information, it was possible to better understand the biology of the vector and taking also into account climate change, serving as a basis for other studies. / O Aedes aegyptié considerado o principal vetor do vírus da Dengue, Febre amarela urbana e da Febre Chikungunya. São insetos suscetíveis à variação de fatores ambientaiscomo, quantidade de chuva e temperatura. Responsáveis porregular o tamanho populacional e aspectos da biologia do mosquito, como o crescimento larval, tempo de desenvolvimento, tamanho corporal,longevidade, fecundidade e alimentação sanguínea. O Painel Intergovernamental sobre Mudança do Clima (IPCC) prevê um aumento de 2° a 4° C na temperatura média global, durante o próximo século. Essas alterações climaticas poderão resultar em mudanças significativas nas paisagens e nos padrões ecológicos das doenças infecciosas, e interferir diretamente no desenvolvimento e comportamento do A. aegypti. Neste trabalho foram avaliados diferentes aspectos da biologia do vetor como, ingestão de sague, fecundidade, oviposição e eclosão de ovos e longevidade, sobre cenários de mudanças climáticas, previstas para o ano de 2100, cenários intermediários e extremos.Dentre as variáveis preditas para sofrem alterações devido a mudanças do clima, a temperatura é principal responsável por alterar a biologia e o comportamento do vetor. As concentrações de CO2, mesmo três vezes maior que a concentração atual, não influenciou significativamente os resultados obtidos neste estudo.A quantidade de sangue ingerida por fêmeas criadas em temperatura mais elevada foi maior quando comparadas com as fêmeas que viviam em temperaturas menores, a longevidade é menor em temperaturas superiores a 32°C, vivendo aproximadamente 40 dias e não houve diferença de longevidade entre os sexos. A fecundidade é extremamente afetada pela temperatura, sendo reduzida pela metade em temperaturas maiores. A oviposição é prejudicada em temperaturas superiores a 32°C, porém esse efeito não foi observado na eclosão.Modelos matemáticos projetam um aumento no número de casos de dengue, além de uma expansão geográfica na distribuição do vetor. No entanto, nossos dados indicam que, em cenários futuros de mudanças climáticas, alguns aspectos da biologia do A. aegypti serão afetados. Com as informações acima mencionadas, foi possível conhecer melhor a biologia do vetor e levando também em consideração as mudanças climáticas, servindo como base para outros estudos.

Made available in DSpace on 2019-03-30T00:00:24Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2014-12-09 / Dengue is an acute febrile infectious disease caused by a virus (DENV) of the genus Flavivirus from family Flaviviridae and it has four serotypes: dengue 1 (DENV-1), dengue 2 (DENV-2), dengue 3 (DENV-3) and dengue 4 (DENV-4). The disease may present mild or severe clinical manifestations, its signs and symptoms are very similar to other acute febrile conditions. The laboratory diagnostic methods should be used not only for an adequate treatment but also to contain a possible epidemic. Therefore, this study has as objective to characterize the clinical and laboratory profile of dengue suspected cases, treated in two Primary Health Care Units (PHCU), in the city of Fortaleza: the PHCU Francisco Pereira de Almeida and the PHCU Mattos Dourado, during the period March 2013 to June 2014. The sample showed patients with clinical suspicion of dengue investigated by clinical and laboratory characteristics, following a criteria for inclusion and exclusion in this research. Among the participants, the tourniquet test and the collection of blood samples for diagnosis of dengue were conducted using the immunochromatography NS1 test and IgM ELISA/IgG test. In this study, we contacted 75 clinical patients suspected of having dengue in the PHCU, including 62 (83%) that agreed to participate. 05 (8.1%) of these patients returned to the health unit to collect the 2nd sample needed to perform the IgM ELISA test, 02 (40%) with positive results. In relation to patients analyzed in the study, 26 (42%) were positive for dengue, 20 negative and 16 with inconclusive results. The most common symptoms of patients in this study were headache (93.5%), myalgia (80.4%) and retro-orbital pain (80.4%). We also observed in this study patients with cough (68.4%), nausea (59.3%) and diarrhea (56.3%). The tourniquet test was performed in 46 patients and 06 had positive results. The study showed that IgM ELISA assay, performed in the early days of disease fever, can also be used as early diagnosis and we should be aware for virological tests, such as NS1 because of the possibility of low sensitivity. / Dengue é uma doença infecciosa febril aguda, causada pelo vírus (DENV) pertencente ao gênero Flavivirus da família Flaviviridae e possui quatro sorotipos: dengue 1 (DENV-1), dengue 2 (DENV-2), dengue 3 (DENV-3) e dengue 4 (DENV-4). A doença pode se apresentar em manifestações clínicas brandas ou graves, seus sinais e sintomas são muito semelhantes aos de outras doenças febris agudas. Os métodos de diagnóstico laboratorial devem ser usados não só para um tratamento adequado, mas também para conter uma possível epidemia. Portanto, este estudo apresentou como objetivo caracterizar o perfil clínico e laboratorial dos casos suspeitos de dengue, atendidos em duas Unidades de Atenção Primária à Saúde (UAPS) do Município de Fortaleza-CE, a UAPS Francisco Pereira de Almeida e a UAPS Mattos Dourado, durante o período de Março de 2013 a Junho de 2014. A amostragem foi constituída por pacientes com suspeita clínica de dengue, investigados em características clínicas e laboratoriais, seguindo critérios de inclusão e exclusão do estudo. Nos participantes do estudo foram realizadas a prova do laço e a coleta de amostras de sangue para diagnóstico de dengue, através do ensaio de imunocromatografia NS1 e ensaio ELISA IgM/IgG. Neste estudo, foram recrutados 75 pacientes suspeitos clínicos de dengue nas UAPS, dos quais 62 (83%) aceitaram participar da pesquisa. Destes, 05 (8,1%) pacientes retornaram a unidade de saúde a fim de coletar a 2ª amostra necessária para realização do teste sorológico ELISA IgM, sendo 02 (40%) com resultado positivo. Em relação aos pacientes analisados no estudo, 26 (42%) pacientes foram positivos para dengue, 20 com resultado negativo e 16 com resultado inconclusivo. Os sintomas mais frequentes dos pacientes deste estudo foram cefaleia (93,5%), mialgia (80,4%) e dor retrorbitária (80,4%). Também observamos neste estudo pacientes com tosse (68,4%), náuseas (59,3%) e diarreia (56,3%). A prova do laço foi realizada em 46 pacientes e, destes, 06 obtiveram resultado positivo. O estudo demonstrou que o teste sorológico ELISA IgM, realizado nos primeiros dias de febre da doença, também pode ser utilizado como diagnóstico precoce e devemos estar atentos quanto aos testes virológicos, como o NS1, pela possibilidade de baixa sensibilidade.

Orientador: Valber de Albuquerque Pedrosa / Resumo: Doenças tropicais são aquelas causadas por agentes infecciosos ou parasitas e consideradas endêmicas em populações na sua maioria de baixa renda, residente em países tropicais e subtropicais. Dentre essas doenças temos a dengue, que acomete milhares de pessoas levando a mortes todos os anos. A dengue é transmitida através da picada do mosquito contaminado e a movimentação populacional a torna de fácil disseminação em todo o território nacional. Atualmente, os exames para diagnóstico desta doença são realizados em laboratórios, principalmente testes sorológicos. Porém, esta metodologia apresenta como limitação o custo elevado além dos resultados levarem dias para que fiquem prontos. Por isso, se faz necessário o desenvolvimento de uma nova metodologia confiável e de baixo custo para um rápido diagnóstico. Atualmente, nanobiossensores vem se destacando como uma ferramenta analítica que pode identificar a presença de patógenos utilizando como base nanoestruturas. Logo, o objetivo do presente projeto foi desenvolver e padronizar uma nova metodologia para o diagnóstico rápido e eficaz do vírus da dengue, utilizando diferentes nanoestruturas modificadas com a deposição de anticorpos específicos e aptâmeros. As metodologias foram comparadas mediante as técnicas de ressonância plasmônica de superfície localizada, ressonância plasmônica de superfície, microscopia eletrônica de transmissão, espectroscopia de impedância eletroquímica, espalhamento dinâmico de luz e análise do software I... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: Tropical diseases are those caused by infectious agents or parasites and are considered endemic in mostly low-income populations residing in tropical and subtropical countries. Among these diseases we have the dengue that causes thousands of deaths each year. Dengue is transmitted through the bite of the contaminated mosquito and the population movement makes it easily spread throughout the national territory. Currently, the diagnostic test of this disease is performed in laboratories, being serological tests. However this methodology presents as a limitation the higher cost and the delay for the result come out. Therefore, it is necessary to develop a new, reliable and low-cost methodology for rapid diagnosis. Nowadays, nanobiosensors have been highlighted with analytical tool that can identify the presence of pathogens using as base nanostructures. The objective of the present project was to develop and standardize a new methodology for a fast and effective diagnosis of dengue virus using using different nanostructures modified with the deposition of specific antibodies and aptamers. The methodology was compared by localized surface plasmon resonance, surface plasmon resonance, transmission electron microscopy, electrochemical impedance spectroscopy, dynamic light scattering techniques and ImageJ software analysis. The results obtained with the techniques presented some advantages over the traditional methods of detection, such as fast analysis and low cost, showing to be h... (Complete abstract click electronic access below) / Doutor

The presence of El Niño Southern Oscillation (ENSO) implies the presence of fluctuating rains in coastal areas and these changes influence the occurrence of febrile syndromes outbreaks. In Peru, Aedes aegypti is the vector responsible for various viruses such as the dengue, Zika, chikungunya, which is distributed in 18 Peruvian departments. These viruses cause similar clinical characteristics in the host and for this reason rapid, sensitive and specific diagnostic tests are needed so that the patient can receive timely treatment. / Revisión por pares