Submitted by Reginaldo Soares de Freitas (reginaldo.freitas@ufv.br) on 2016-12-20T11:49:38Z No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 1906265 bytes, checksum: d03123d89fdf5db4a6099443668ff7ec (MD5) / Made available in DSpace on 2016-12-20T11:49:38Z (GMT). No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 1906265 bytes, checksum: d03123d89fdf5db4a6099443668ff7ec (MD5) Previous issue date: 2016-06-28 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / A dengue é a mais importante arbovirose que afeta o homem e o aumento crescente de casos nas áreas endêmicas bem como a possível expansão da área de risco de infecção tem causado preocupação em todo o mundo. Atualmente, as medidas de controle da doença são baseadas no controle do vetor, mosquitos do gênero Aedes sendo que estas não se mostraram eficientes, uma vez que o número de infecções aumentaram cerca de 30 vezes nos últimos 50 anos. Os vírus dengue possuem quatro sorotipos DENV-1, DENV-2, DENV-3 e DENV-4 e uma infecção com um sorotipo promove imunidade protetora contra infecções com o mesmo sorotipo. Numa segunda infecção com um sorotipo heterólogo, os anticorpos não-neutralizantes produzidos na primeira infecção podem aumentar o número de células infectadas e assim, exacerbar a resposta imune. Esse fenômeno, conhecido por ADE (antibody dependent enhancement) está relacionado com as formas graves da doença e por essa razão, uma vacina eficiente contra dengue deve ser tetravalente. Este trabalho tem o objetivo de construir uma vacina de DNA tetravalente contra a dengue e, adicionalmente desenvolver adjuvantes genéticos para aprimorar a imunogenicidade dessa vacina. Para isso, as sequências de DNA correspondentes ao domínio III da proteína E dos quatro sorotipos dos vírus da dengue foram clonadas num mesmo vetor de expressão. Para o desenvolvimento de adjuvantes genéticos, genes das citocinas GM-CSF, IL-7 e IL-15 foram clonados separadamente em plasmídeo de expressão de modo que diferentes associações dos adjuvantes genéticos pudessem ser avaliadas com o plasmídeo vacinal. A avaliação da imunogenicidade da vacina de DNA tetravalente e sua associação com os diferentes adjuvantes mostrou que houve uma resposta linfoproliferativa contra as proteínas prM e E recombinantes de DENV-3, sendo os esplenócitos oriundos dos grupos que receberam pVAX-EDIII1-4 e pVAX-IL15, pVAX-EDIII1-4 e pVAX-GMCSF e pVAX-EDIII1-4, pVAX-GMCSF e pVAX-IL7 apresentaram maior resposta quando re-estimulados in vitro. Também foi observado um aumento no número de células B nos grupos vacinados com pVAX-EDIII1-4 e pVAX-GMCSF e pVAX-EDIII1-4, pVAX-GMCSF e pVAX- IL15. Na subpopulação de células T CD4 houve incremento no grupo imunizado com pVAX-EDIII1-4 e GMCSF e as células T CD8, no grupo imunizado com pVAX- EDIII1-4 e pVAX-IL7. Observou-se um aumento na subpopulação de linfócitos T CD8 CD44+ CD62L- (TEM-memória efetora) nos grupos imunizados com pVAX-EDIII1-4 e pVAX-IL7 e pVAX-EDIII1-4, pVAX-GMCSF e pVAX-IL7. Em relação à memória central (TCM - CD44+ CD62L+) T CD4 e T CD8 o maior aumento se deu no grupo imunizado com pVAX-EDIII1-4, pVAX-GMCSF e pVAX-IL15. As células naïve T CD4 e T CD8 também estão aumentadas no grupo imunizado com pVAX-EDIII1-4, pVAX-GMCSF e pVAX-IL15. No ensaio de neutralização in vivo com DENV-2, observou-se 60% de proteção nos animais que tiveram o vírus neutralizado com o soro dos animais vacinados com o pVAX-EDIII1-4 e pVAX-IL7; 40% de proteção nos animais que tiveram o vírus neutralizado pelo soro dos animais vacinados com o pVAX- EDIII1-4; pVAX-EDIII1-4, pVAX-GMCSF e pVAX-IL7; pVAX-EDIII1-4, pVAX- GMCSF e pVAX-IL15. No mesmo ensaio utilizando DENV-1, podemos observar que o grupo cujo vírus foi neutralizado com o soro dos animais vacinados com pVAX-EDIII1- 4 e pVAX-IL7 a sobrevivência foi de 80% e de 60% nos grupos que receberam o vírus neutralizado com o soro dos animais vacinados com apenas o pVAX-EDIII1-4, pVAX- EDIII1-4 e pVAX-GMCSF, pVAX-EDIII1-4, pVAX-GMCSF e pVAX-IL7 e pVAX- EDIII1-4, pVAX-GMCSF e pVAX-IL15. Esses resultados mostram que a vacina foi capaz de induzir uma resposta imune e que os adjuvantes testados auxiliaram essa resposta. / Dengue is the most important arboviral disease that affects humans and the increasing number of cases in endemic areas and the possible expansion of the infection risk area has caused concern around the world. Currently, the disease control measures are based on the vector control, the genus Aedes mosquitoes and these were not effective, since the infection numbers have increased about 30 times in the last 50 years. Dengue viruses have four serotypes DENV-1, DENV-2, DENV-3 and DENV-4 and infection with one serotype promote protective immunity against infection with the same serotype. In a second infection with a heterologous serotype, non-neutralizing antibodies produced in the first infection may increase the number of infected cells and thus exacerbate immune response. This phenomenon, known as ADE (antibody dependent enhancement) is related to the severe forms of the disease and for this reason, an effective vaccine against dengue should be tetravalent. This work aims to build a tetravalent DNA vaccine against dengue and additionally develop genetic adjuvants to enhance the immunogenicity of the vaccine. For this, DNA sequences corresponding to the domain III of the E protein of all four serotypes of dengue virus were cloned into the same expression vector. For the development of genetic adjuvants, genes of cytokines GM-CSF, IL-7 and IL-15 were separately cloned into the expression plasmid so that different associations of genetic adjuvants could be evaluated with the plasmid vaccine. The evaluation of the immunogenicity of the tetravalent vaccine DNA and its association with different adjuvants showed that there was a lymphoproliferative response against the proteins prM and E of DENV-3, and the splenocytes coming from the groups that received pVAX-EDIII1-4 and pVAX-IL15, pVAX-EDIII1-4 and pVAX- GMCSF and pVAX-EDIII1-4, pVAX-GMCSF and pVAX-IL7 showed higher response when re-stimulated in vitro. It can also be seen that B cells were increased in the groups vaccinated with pVAX-EDIII1-4 and pVAX-GMCSF and pVAX-EDIII1-4, pVAX-IL15 and pVAX-GMCSF. CD4+ T cell subpopulation was increased in the group immunized with pVAX-EDIII1-4 and pVAX-GMCSF while CD8 + T cells, in the group immunized with pVAX-EDIII1-4 and pVAX-IL7. We observed an increase in lymphocyte subpopulation of CD8 CD44+ CD62L- (effector memory-TEM) in the groups immunized with pVAX-EDIII1-4 and pVAX-IL7 and pVAX-EDIII1-4, pVAX-GMCSF and pVAX- IL7. Regarding the central memory (T CM - CD44+ CD62L+) CD4 and CD8 T cells the largest increase was in the group immunized with pVAX-EDIII1-4, pVAX-GMCSF and pVAX-IL15. The naïve CD4 and CD8 T cells are also increased in the group immunized with pVAX-EDIII1-4, pVAX-GMCSF and pVAX-IL15. In the neutralization test in vivo with DENV-2, there was 60% protection in animals that had neutralized the virus with the serum of animals immunized with pVAX-EDIII1-4 and pVAX-IL7; 40% protection in animals in which the virus neutralized by the serum of animals immunized with pVAX-EDIII1-4; pVAX-EDIII1-4, pVAX-GMCSF and pVAX-IL7; pVAX-EDIII1-4, pVAX-GMCSF and pVAX-IL15. In the same assay using DENV-1, we can observe that the group which virus was neutralized with serum from animals vaccinated with pVAX- EDIII1-4 and pVAX-IL7 survival was 80% and 60% in the groups receiving the neutralized virus with serum from animals vaccinated with pVAX-EDIII1-4, pVAX- EDIII1-4 and pVAX-GMCSF, pVAX-EDIII1-4, pVAX-GMCSF and pVAX-IL7 and pVAX-EDIII1-4, pVAX-GMCSF and pVAX -IL15. These results showed that DNA vaccine was able to induce an immune response and this response was aided by adjuvants tested.

Título: Serotipos circulantes del virus del dengue y características clínicas en pacientes con síndrome febril agudo del departamento de Piura, Perú. Antecedentes: Las infecciones por dengue son un importante problema de salud y existe una creciente necesidad de fortalecer su vigilancia epidemiológica en el Perú debido a la baja tasa de confirmación de laboratorio (<50%). Objetivo: Evaluar la frecuencia de los serotipos del virus Dengue (DENV) y describir su presentación clínica en pacientes de Piura, una zona endémica del norte de Perú. Metodología: En un total de 213 muestras de suero de ocho centros de salud se estudió la presencia de DENV mediante RT-PCR, antígeno NS1 y anticuerpos IgM de marzo a agosto de 2016. A las muestras positivas para PCR se les realizó secuenciación e identificación de serotipo 1 a 4. Los médicos usaron un cuestionario estandarizado para recolectar la información demográfica y de síntomas clínicos. Resultados: Se detectó ARN del virus del dengue en 28,64% (61/213) de las muestras a través de RT-PCR. Para las pruebas de anticuerpos anti-dengue, el antígeno NS1 se detectó en 30,52% (65/213) y los anticuerpos IgM se encontraron en 9,39% (20/213) de los pacientes. DENV-2 fue el serotipo más predominante en 60,65% (37/61) de los casos; DENV-3 se encontró sólo en una muestra y 37,70% (23/61) no se pudo caracterizar para ningún serotipo; No se encontraron serotipos DENV-1 o DENV-4. Los síntomas más comunes asociados con la fiebre fueron: dolor de cabeza (96,72%), dolor muscular (86,89%), dolor en las articulaciones (83,61%), falta de apetito (73,77%) y dolor retro-orbital (72,13%). Conclusiones: El DENV-2 es actualmente el serotipo predominante en Piura, Perú. En pacientes con muestras positivas para PCR sólo el dolor lumbar (p = 0,008) es estadísticamente significativo. Se deben realizar más investigaciones para evaluar el uso de RT-PCR como un método confiable para la detección de DENV, así como para la vigilancia de serotipos en el Perú. / ABSTRACT Background: Dengue infections are a major health problem and there is an increasing necessity to strength its epidemiological surveillance in Peru due to the low laboratory-confirmation rate (<50%). Aim: To assess the frequency of Dengue virus (DENV) serotypes and describe its clinical and epidemiological presentation in patients from Piura, an endemic area in northern Peru. Methodology: A total of 213 serum samples from eight health care centers were studied for the presence of DENV via RT-PCR, NS1 antigen and IgM antibodies from March to August 2016. PCR positive samples were sent for commercial sequencing and serotype 1 to 4 identification. Physicians used a standardized questionnaire to collect the demographic and clinical symptoms information. Results: Dengue virus RNA was detected in 28.64% (61/213) of the samples via qPCR. For the anti-Dengue antibody tests, the NS1 antigen was detected in 30.52% (65/213) and IgM antibodies were found in 9.39% (20/213) of patients. DENV-2 was the most predominant serotype in 60.65% (37/61) of cases; DENV-3 was found only found in one sample and 37.70% (23/61) could not be characterized for any serotype; no DENV-1 or DENV-4 serotypes were found. The most common symptoms associated with fever were: Headache (96.72%), muscle pain (86.89%), joint pain (83.61%), low appetite (73.77%) and retro-orbital pain (72.13%). Conclusions: DENV-2 is currently a predominant serotype in Piura, Peru. In patients with PCR positive samples only low back pain (p=0.008) is statistically significant. Further investigations should be conducted to assess the use of RT-PCR as a reliable method for DENV detection as well as for serotype surveillance in Peru. / Tesis

Dengue virus infection affects the heart structurally and functionally. Clinical manifestations of cardiac complications secondary to dengue virus infection vary from self-limiting arrhythmias to severe myocardial infarction, leading to hypotension, pulmonary edema, and cardiogenic shock. However, we report a case of dengue hemorrhagic fever (DHF) complicated by a complete heart block. A female with DHF due to dengue virus serotype 2, presented to the emergency department with fever, headache, rash, and fatigue followed by an episode of syncope. She was found to have a third-degree atrioventricular block, with pulseless polymorphic ventricular tachycardia. Patient was resuscitated and a temporary trans-venous pacemaker was placed. She reverted back to normal sinus rhythm after 4 days of syncope and was subsequently discharged from the hospital after complete resolution of symptoms, without the need for a permanent pacemaker. Physicians are warranted to have high index of suspicion for dengue virus infection as an etiology in patients with acute cardiovascular compromise, especially in tropical areas.

Objective: To describe and molecularly characterize an outbreak of dengue virus (DENV) infection in Cajamarca, an Andean region in Peru. Methods: A total of 359 serum samples from patients with acute febrile illness were assessed for the presence of DENV via RT-PCR, ELISA NS1, IgM and IgG in Cajamarca, Peru from January 2017 to June 2017. The evaluation of the different diagnostic tests and their applicability was performed. Results: Dengue virus was detected in 24.7% of samples by RTPCR. Meanwhile, serological analysis detected 30.3% positive cases via ELISA NS1 antigen, 16.7% via ELISA IgG and 9.7% via ELISA IgM. Most of the cases corresponded to DENV-3 (77.5%). The use of RT-PCR performed better in primary infections (P<0.01), while detection of ELISA IgM performed better in secondary infections (P<0.01). The combination of NS1 and IgM performed better than the other assays in detecting primary (92.5%) and secondary infections (96.6%). The most frequent symptoms associated with fever were headaches, myalgias, and arthralgias across all groups. Conclusions: We report an important outbreak of dengue infection caused by DENV-3 in Cajamarca, Peru. Our findings encourage the use of NS1 antigen and IgM co-detection. These findings demonstrate an increasing expansion of DENV-3 in Peru and highlight the importance of molecular diagnosis and serotype characterization among the clinically defined dengue cases to strengthen the Peruvian epidemiological surveillance. / Ministry of Health and Welfare / Revisión por pares

Made available in DSpace on 2015-05-19T13:30:28Z (GMT). No. of bitstreams: 2 414.pdf: 7133398 bytes, checksum: f3c34dbc03132f760978a32309a5b7ce (MD5) license.txt: 1748 bytes, checksum: 8a4605be74aa9ea9d79846c1fba20a33 (MD5) Previous issue date: 2012 / Fundação Oswaldo Cruz. Centro de Pesquisas Aggeu Magalhães. Recife, PE, Brasil / A dengue é uma doença causada por um flavivírus, representado por quatro sorotipos distintos (DENV1-4). Entre as proteínas virais, ENV e NS1 contribuem fortemente com o processo de resposta imune desencadeado pelo vírus. Os principais sistemas de diagnóstico utilizam a detecção de anticorpos através da técnica Enzyme Linked Immuno Sorbent Assay - ELISA, a qual, embora útil, apresenta inúmeras limitações (custo, tempo de processamento, entre outros). Neste trabalho, nós desenvolvemos ensaios multiplex de microarranjos líquidos para ENV e NS1. Sequências de aminoácidos codificantes das proteínas, provenientes de cepas isoladas da América Latina foram selecionadas em bancos de dados públicos, alinhadas para a geração das respectivas sequências consenso e construção dos antígenos recombinantes. As sequências obtidas foram otimizadas para expressão bacteriana, submetidas à síntese comercial e clonadas em vetores de expressão procarióticos. Os antígenos foram expressos e validados através de ensaios de microarranjos líquidos, com obtenção de promissores resultados, especialmente para as proteínas ENV (domínios I/II) sorotipo 1 e 2, com potencial aplicação comercial. Este trabalho desenvolveu ainda metodologia para renaturação de NS1 com excelente rendimento. Os resultados das proteínas produzidas neste trabalho foram de forma geral superiores aos obtidos por antígenos comercialmente disponíveis para a proteína ENV de dengue vírus, utilizando a mesma metodologia. As proteínas NS1 foram ainda utilizadas para imunização de coelhos e produção de anticorpos policlonais, que se mostraram bem sucedidos para aplicações em ensaios de imunofluorescência, western blot, citometria de fluxo e como anticorpo de detecção para ensaios quantitativos para a proteína NS1 por ELISA de captura. Os resultados obtidos neste projeto foram considerados extremamente promissores, com potencial aproveitamento no desenvolvimento de testes diagnósticos comerciais com alta precisão, rápidos e com baixo custo

Dissertação (mestrado)—Universidade de Brasília, Faculdade de Medicina, Núcleo de Medicina Tropical, 2015. / Submitted by Fernanda Percia França (fernandafranca@bce.unb.br) on 2016-01-25T19:21:26Z No. of bitstreams: 1 2015_PauloSousaPrado.pdf: 1415514 bytes, checksum: c1ffd17848f8b9d8e1ca6ac5e1e24791 (MD5) / Approved for entry into archive by Patrícia Nunes da Silva(patricia@bce.unb.br) on 2016-01-26T14:05:35Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2015_PauloSousaPrado.pdf: 1415514 bytes, checksum: c1ffd17848f8b9d8e1ca6ac5e1e24791 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-01-26T14:05:35Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2015_PauloSousaPrado.pdf: 1415514 bytes, checksum: c1ffd17848f8b9d8e1ca6ac5e1e24791 (MD5) / Introdução: Atualmente a gestão do diagnóstico da dengue continua sendo um dos maiores desafios para os governos da maioria dos países da América Latina. O diagnóstico é complexo e até recentemente, apenas laboratórios especializados eram capazes de confirmar definitivamente uma infecção por dengue. No entanto, esta realidade tem sido alterada gradualmente com a disponibilização de testes rápidos imunocromatográficos capazes de detectar uma infecção por dengue rapidamente e podem ser aplicados até mesmo na atenção primária. O diagnóstico precoce é de grande interesse para uma gestão clínica eficiente, porque impede a progressão da doença para os casos mais graves, reduzindo a mortalidade para menos de 1%. Entre as várias técnicas disponíveis para o diagnóstico de dengue, os testes rápidos imunocromatográficos estão sendo usados cada vez mais no Brasil. Entretanto, a maioria desses testes não foram submetidos a uma validação científica na população brasileira. Neste contexto, o Distrito Federal, com a participação do Laboratório Central de Saúde Pública decidiu validar o teste rápido SD Bioeasy Dengue Duo recentemente introduzido no sistema público de saúde do Distrito Federal. Objetivos: Avaliar a acurácia (sensibilidade e especificidade) e a confiabilidade do teste rápido SD Bioeasy Dengue Duo (Standard Diagnostics Inc., República da Coreia) para os componentes do teste. A avaliação foi feita no ambiente onde o teste foi aplicado no sistema público de saúde do Distrito Federal. Metodologia: Foram coletadas 1353 amostras de sangue venoso entre julho de 2013 a julho de 2014. O tamanho da amostra foi calculado assumindo-se um α = 0,05, precisão desejada = +/- 4%, sensibilidade esperada = 92,9%, especificidade esperada = 88,8%. Após os cálculos, 160 amostras positivas (casos) e 240 amostras negativas (controles), classificadas pelos testes padrão de referência, foram necessárias para a estimativa da sensibilidade e especificidade respectivamente, e para a avaliação de reprodutibilidade utilizou-se 401 amostras. O padrão de referência utilizado foi composto pelo teste MAC-ELISA, isolamento viral e PCR em Tempo Real. As amostras foram consideradas como verdadeiras positivas quando, pelo menos, um dos testes de referência obteve um resultado positivo, e verdadeiro negativo quando, todos os três testes de referência foram negativos. As amostras foram obtidas dos Hospitais Regionais de Taguatinga, Ceilândia, Guará, Planaltina, Sobradinho e do LACEN-DF. A estimativa do intervalo de confiança de 95% foi calculada tanto para a acurácia dos componentes do teste rápido como também para o estudo de confiabilidade, utilizando o Epi Info v. 6.04. Resultados: Os resultados para a acurácia global do teste rápido SD Bioeasy Dengue Duo, revelaram uma melhor sensibilidade para o componente NS1 (67%) do que para o componente IgM (35%). Há uma melhora substancial da sensibilidade do teste quando analisamos os componentes NS1/IgM em conjunto (76%). O teste apresentou uma alta especificidade, e não apresentou nenhuma reação cruzada com o painel de amostras positivas para outras doenças utilizadas no estudo. Em relação ao estudo de reprodutibilidade, desenvolvido entre as unidades de saúde selecionadas e o laboratório de referência LACEN-DF, os resultados foram satisfatórios, com um Kappa de 0,97 para NS1/IgM. Conclusões: Por ser o primeiro estudo de validação de um teste rápido imunocromatográfico de dengue no Brasil, a ser realizado prospectivamente e em larga escala, nossos resultados demonstraram a importância da avaliação da acurácia e reprodutibilidade na introdução de uma nova metodologia diagnóstica para o exame da dengue. O teste rápido SD Bioeasy Dengue Duo, apresentou uma alta especificidade e uma sensibilidade moderada. Portanto, sendo útil para confirmar o diagnóstico de dengue, mas não sendo suficiente para descartar o diagnóstico, e deve ser aprimorado em relação à sensibilidade. Nossos resultados sugeriram também que as condições imunológicas do paciente, resultantes do processo de infecção pelo vírus da dengue, podem influenciar diretamente a acurácia do teste. / Introduction: Currently the management of dengue diagnosis remains a major challenge for governments of most countries in Latin America. The diagnosis is complex and until recently only specialized laboratories were able to definitely confirm dengue infection. However, this reality has been changed gradually with the available of immunochromatographic rapid tests can detect dengue infection quickly and can be applied even in point-of-care. Early diagnosis is of great interest for efficient clinical management, because it prevents the disease progression to more severe cases, reducing the mortality to less than 1%. Among several techniques available for the diagnosis of dengue, immunochromatographic rapid tests have been increasingly used in Brazil. However most of those tests have not undergone scientific validation in the Brazilian population. In this context the Federal District with the participation of the Central Public Health Laboratory decided to evaluate the rapid test SD Bioeasy Dengue Duo recently introduced in the public health system of the Federal District. Aims: To evaluate the accuracy (sensitivity and specificity) and the concordance of the rapid test SD Bioeasy Dengue Duo (Standard Diagnostics Inc., Korea) for NS1 and IgM components test. The evaluation was made prospectively in the field conditions in the public health system of the Federal District. Methodology: 1353 venous blood samples were collected between July 2013 and July 2014. Sample size was calculated with the following assumptions: α=0.05, desired precision=+4%, expected sensitivity= 92.9%, expected specificity= 88.8%. Then, 160 positive samples (cases) and 240 negative samples (controls), as being classified by the reference standard, were required for sensitivity and specificity estimation respectively, and for concordance evaluation we used 400 samples. The Reference standard used was composed by MAC-ELISA, Virus Isolation and Real Time PCR. Samples were considered as true-positive when, at least one of the reference tests had a positive result, and true-negative when, all the three reference tests were negative. Samples were obtained at the Regional Hospitals of Taguatinga, Ceilândia, Guará, Planaltina, Sobradinho and LACEN-DF. Point and 95% confidence interval estimates were calculated for accuracy measures of the Index test in each of its two components and for concordance, using Epi Info v. 6.04. Results: The results for the overall accuracy of the SD Bioeasy Dengue Duo test, showed better sensitivity for the NS1 component (67%) than for the IgM component (35%). There is a substantial improvement in test sensitivity when analyzing the NS1 / IgM components together (76%). The test showed high specificity and showed no cross-reactivity with the panel of positive samples for other diseases used in the study. Regarding the reliability study, developed between health facilities selected and reference laboratory LACEN-DF, the results were satisfactory, with a kappa of 0.97 for NS1 / IgM. Conclusions: For being the first validation study of dengue immunochromatographic rapid tests in Brazil, to be carried out prospectively and in large-scale, our results demonstrate the importance of evaluating the accuracy and reliability of a test before introduction a new diagnostic methodology for the examination of dengue. The rapid test SD Bioeasy Dengue Duo had a high specificity and moderate sensitivity. Therefore, it is useful to confirm the diagnosis of dengue, but not enough to rule out the diagnosis, and should be improved in sensitivity. Our results also suggested that the immunological conditions of the patient, resulting from the infection by the dengue virus process can directly influences the accuracy of the test.

Submitted by Marlene Santos (marlene.bc.ufg@gmail.com) on 2016-04-05T19:44:38Z No. of bitstreams: 2 Dissertação - Ivaneusa Gomes de Ávila Maciel - 2015.pdf: 1756633 bytes, checksum: 75e68e889364469e8132461b5cf1be85 (MD5) license_rdf: 19874 bytes, checksum: 38cb62ef53e6f513db2fb7e337df6485 (MD5) / Approved for entry into archive by Luciana Ferreira (lucgeral@gmail.com) on 2016-04-06T13:25:52Z (GMT) No. of bitstreams: 2 Dissertação - Ivaneusa Gomes de Ávila Maciel - 2015.pdf: 1756633 bytes, checksum: 75e68e889364469e8132461b5cf1be85 (MD5) license_rdf: 19874 bytes, checksum: 38cb62ef53e6f513db2fb7e337df6485 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-04-06T13:25:52Z (GMT). No. of bitstreams: 2 Dissertação - Ivaneusa Gomes de Ávila Maciel - 2015.pdf: 1756633 bytes, checksum: 75e68e889364469e8132461b5cf1be85 (MD5) license_rdf: 19874 bytes, checksum: 38cb62ef53e6f513db2fb7e337df6485 (MD5) Previous issue date: 2015-11-16 / Introduction: the ineffectiveness of control measures, the lack of an effective vaccine against dengue and the increase of deaths from severe forms is a challenge to global public health. In Goiania, since 1994, realize an increase of dengue´s mortality rates, especially in young adults, which is the driving force economic development. Objectives: evaluate the epidemiological profile of dengue´s deaths in Goiania, the factors that contributed to the severity and importance of the State Committee of the Serious Case Assessment Technical and Deaths Suspected Dengue to reduce the fatality rate. Methodology: descriptive and retrospective study from 2011 to 2013. We investigated 73 dengue´s deaths confirmed by laboratory and epidemiological criteria, which were assessed by the Committee. Data were collected on sheets Dengue Research (SINAN / MS), Medical records and deaths Assessment Worksheet. The database was analyzed in SPSS Statistics 22.0 and Open Epi. Results: from the 73 deaths, 60.3% were male and 74% were aged between 15-59 years. In 57.5% of the deaths were classified as dengue with complications (DCC) and 42.5% as Dengue Hemorrhagic Fever (DHF). As you increase the clinical symptoms, greater the risk of death is. In 56.2% of the deaths were observed fever and more 4 clinical symptoms of the disease. Haemorrhagic manifestations occurred in 72.6% of the deaths. Examination of the tourniquet test showed effectiveness in the diagnosis of dengue, with a positivity of 80%. The warning signs were important indicators for the evolution of the disease because they were present in 98.6% of deaths and comorbidities in 67.1% of the patients. Regarding care, 50.7% sought for health care only in the public sector and 24.6% in both sectors. About 52.1% of patients sought treatment early, within 2 days from the start date of symptoms. Of the total, who sought treatment after two days, noticed that 71.2% had a fatal outcome. The public health sector registered 60.3% of deaths. The average attendance of patients was about 2 times. Clinical management was considered inappropriate in 42.5% of deaths. All the deaths were assessed by the Committee. Most of the deaths were reported by the Death Verification Service (69.9%). Conclusion: study showed underreporting of dengue´s deaths in the public and private sector. The majority of reports were late. The Coroner's system constituted an important source of funding dengue´s deaths. The Case of the Evaluation Technical Committee Graves and Deaths Suspected Dengue proved to be of low utility for the implementation of measures to reduce dengue´s mortality. / Introdução: a ineficácia das medidas de controle, a falta de uma vacina eficaz contra a dengue e o aumento dos óbitos pelas formas graves constituem desafio para a saúde pública mundial. Em Goiânia, desde 1994, observa-se o aumento crescente das taxas de letalidade de dengue, principalmente nos adultos jovens, o que constitui a força motriz do desenvolvimento econômico. Objetivos: avaliar o perfil epidemiológico dos óbitos de dengue em Goiânia, os fatores que contribuíram para a gravidade e a importância do Comitê Técnico Estadual de Avaliação dos Casos Graves e Óbitos Suspeitos de Dengue para a redução da taxa de letalidade. Metodologia: estudo descritivo e retrospectivo de 2011 a 2013. Foram investigados 73 óbitos de dengue confirmados por critério laboratorial e epidemiológico, os quais foram avaliados pelo Comitê. Os dados foram coletados nas Fichas de Investigação de Dengue (Sinan/MS), Prontuários e Planilha de Avaliação dos Óbitos. O banco de dados foi analisado no pacote estatístico SPSS Statistics 22.0 e Open Epi. Resultados: dos 73 óbitos, 60,3% desses foram do sexo masculino e 74% estavam na faixa etária entre 15 a 59 anos. Dos óbitos, 57,5% foram classificados como Dengue com Complicações (DCC) e 42,5% como Febre Hemorrágica da Dengue (FHD). À medida que aumentam os sintomas clínicos, maior o risco de óbito. Em 56,2% dos óbitos foram observados febre e mais 4 sintomas clínicos da doença. As manifestações hemorrágicas ocorreram em 72,6% dos óbitos. O exame da prova do laço apresentou-se eficaz no diagnóstico da dengue, com uma positividade de 80%. Os sinais de alarme constituíram indicadores importantes para a evolução da doença, pois foram presentes em 98,6% dos óbitos e as comorbidades em 67,1% dos pacientes. Em relação à assistência, 50,7% procuraram somente o setor público e 24,6% ambos os setores. Cerca de 52,1% dos pacientes buscaram atendimento precocemente, até 2 dias da data de início dos sintomas. Do total que buscou atendimento após 2 dias, observou-se que 71,2% evoluíram para o óbito. O setor público de saúde registrou 60,3% dos óbitos. A média de atendimentos dos pacientes foi de cerca de 2 vezes. O manejo clínico foi considerado inadequado em 42,5% dos óbitos. Todos os óbitos foram avaliados pelo Comitê. A maioria deles foi notificada pelo Serviço de Verificação de Óbitos – SVO (69.9%). Conclusão: o estudo mostrou subnotificação dos óbitos de dengue tanto no setor público quanto no privado. A maioria das notificações foi tardia. O Sistema de Verificação de Óbitos constituiu uma importante fonte de captação dos óbitos de dengue. O Comitê Técnico de Avaliação dos Casos Graves e Óbitos Suspeitos de Dengue mostrou-se de baixa utilidade para a implementação das medidas de redução da letalidade de dengue.

Source: Masters Abstracts International, Volume: 47-06, page: 3395. Advisers: Kristy O. Murray; George L. Delclos. Includes bibliographical references.

Made available in DSpace on 2011-05-04T12:42:02Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2009 / O presente estudo teve por objetivo analisar a distribuição temporal e espacial da dengue, no período de 1998 a 2006, utilizando a análise espacialaliada ao estudo de indicadores sócio-econômicos e ambientais como ferramenta para identificação de áreas prioritárias para o controle da dengue e contribuir para o aprimoramento dos métodos epidemiológicos para a identificação de características ambientais de risco de adoecer pela doença. O trabalho está apresentado em três artigos. No primeiro artigo, realizou-se análise da literatura sobre dengue procurando identificar fatores associados a ocorrência da doença levando-se em conta a unidade geográfica de agregação e o tipo de dados utilizados nos estudos. No segundo artigo, analisou-se a distribuição espaço-temporal da dengue em localidade da cidade de Niterói,Rio de Janeiro, buscando associação com a heterogeneidade de características do ambiente urbano. No terceiro artigo, discutiram-se os indicadores sócio-ambientais e risco para ocorrência da dengue, levando em consideração as particularidades da dinâmica da doença em nível local.Concluiu-se que a heterogeneidade espacial das condições de vida e da incidência foi um achado presente em estudos com dados secundários,situação esta, verificada no estudo realizado em estudo local, onde percebeu-se a variação na distribuição da morbidade por áreas e que esta variação esteve influenciada por contextos específicos de cada localidade. Os dados secundários utilizados para análise mostraram-se deveras amplos, não permitindo uma análise mais fidedigna da realidade. Percebeu-se a necessidade de estudos baseados níveis locais e de construção de indicadores próprios para estes níveis. A metodologia de análise espacial utilizada permitiu a determinação de áreas prioritárias que contemplam a dinâmica da epidemia / endemia para além dos limites estritos dos setores censitários. O uso da análise espacial mostrou-se um recurso importante para estratificação de áreas prioritárias e úteis para instrumentalização dos níveis central e regional do planejamento das ações de controle, monitoramento e avaliação. / This study aimed to analyze the space-time dengue distribution between 1998 and 2006, using the spatial analysis combined the study of socioeconomic and environmental indicators as a tool for identifying priority areas for the dengue control and contribute for the improvement of epidemiological methods to identify environmental characteristics of dengue risk. The work is presented in three papers. In the first one, there was a literature review on dengue, seeking to identify associated factors with occurrence of the disease taking into account the geographic unit of aggregation and the type of data used in the studies. In the second article analyzes the spatial-temporal distribution of dengue in the locality of the city of Niterói, Rio de Janeiro, seeking association with a variety of characteristics of the urban environment. In the third one, we discuss the socio-environmental indicators and risk for dengue occurrence, taking into account the dynamics particularities of disease at the local level. We concluded that spatial heterogeneity in living conditions and the incidence was found in the studies with secondary data. This aspect was confirmed in an ecological study, where was associated the changes in the dengue distribution in areas and that this distribution was influenced by specific contexts of each locality. The secondary data used for analysis proved to be rather large, not allowing a more accurate analysis of reality. Realized the need for studies based on local level and construction of indicators suitable for these level. The methodology of spatial analysis used enabled the determination of priority areas that include the dynamics of epidemic / endemic beyond the strict limits of the census tracts. The use of spatial analysis showed to be an important resource for stratification of priority areas and useful tool for the government levels to planning actions of control, surveillance and evaluation.

Made available in DSpace on 2015-06-12T13:55:08Z (GMT). No. of bitstreams: 2 378.pdf: 2569017 bytes, checksum: a251ac616bcce584ad81bcd947e3562a (MD5) license.txt: 1748 bytes, checksum: 8a4605be74aa9ea9d79846c1fba20a33 (MD5) Previous issue date: 2012 / Os mosquitos Aedes aegypti e Aedes albopictus são considerados os principais vetores da dengue, doença que afeta mais de 100 países e atinge, a cada ano, mais de 50 milhões de pessoas. Para que uma espécie seja incriminada como vetor de uma doença, ela deve ser capaz de se infectar com um determinado patógeno via oral, resistir à replicação deste no seu interior e transmiti-lo a um hospedeiro susceptível. Esta habilidade é denominada competência vetorial. Os rápidos avanços da biologia molecular têm facilitado o surgimento de novas abordagens que podem ser utilizadas para avaliar quantitativamente alguns aspectos da competência vetorial. Neste sentido, a RT-PCR quantitativa (qRT-PCR) tem sido amplamente usada em estudos sobre a interação vírus-vetor. O presente estudo visou avaliar o processo de infecção do vírus Dengue (DENV) em amostras de intestinos e glândulas salivares Ae. aegypti e Ae. albopictus, através da quantificação de partículas virais de três sorotipos de DENV via PCR em tempo real. Os resultados mostraram que as três populações de Ae. aegypti (RecLab, Recife e Petrolina) analisadas no presente estudo foram suscetíveis à infecção com DENV-1, DENV-2 e DENV-3. De uma maneira geral, as populações de Ae. aegypti de campo (Recife e Petrolina) foram mais competentes para a infecção do que a colônia de laboratório (RecLab). Considerando a espécie Ae. albopictus, as duas populações (laboratório e campo) também foram suscetíveis à infecção com os três sorotipos, porém a colônia de laboratório foi mais suscetível à infecção do que a população de campo. Os dados obtidos no presente estudo indicam que diferenças na carga viral usada durante a alimentação artificial podem influenciar nas taxas de infecção do vírus no intestino, porém não influenciam a disseminação dos vírus para as glândulas salivares. Outro aspecto importante foi o curto período de incubação extrínseco (PIE) apresentado pelas duas espécies, exceto na população de Ae.aegypti de Petrolina, diferente do que é descrito na literatura. Este resultado tem uma grande importância epidemiológica, pois quanto menor o PIE, maior será o tempo que a espécie vai ser capaz de transmitir o vírus para um hospedeiro sadio, aumentando assim as chances de transmissão de dengue. Além disso, revela a necessidade da implementação de estratégias mais rápidas para bloquear a transmissão da doença. Estas informações serão necessárias para os estudos de avaliação de risco de transmissão da dengue