Submitted by Cristiane Chim (cristiane.chim@ucpel.edu.br) on 2018-10-08T12:04:48Z No. of bitstreams: 1 Felipe Simões Lopes Quintana.pdf: 77300691 bytes, checksum: ee08226cb6940ec6c50e71b9ec852ebe (MD5) / Made available in DSpace on 2018-10-08T12:04:48Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Felipe Simões Lopes Quintana.pdf: 77300691 bytes, checksum: ee08226cb6940ec6c50e71b9ec852ebe (MD5) Previous issue date: 2017-10-10 / . / Descrever dois dermatofibromas, analisando seus aspectos clínicos, histológicos e ultraestruturais. 3.2 ESPECÍFICOS a) Descrever os achados da microscopia óptica com a coloração com hematoxicilina e eosina. b) Descrever os achados da microscopia óptica com a coloração Weigert. c) Descrever aspectos ultraestruturais tridimensionais com microscopia eletrônica de varredura. d) Descrever os aspectos clínicos do dermatofibroma.

Orientador: Silmara Meneguin / Coorientador: Hélio Amante Miot / Resumo: Tratou-se de um estudo metodológico que utilizou análises quantitativa e qualitativa com o objetivo de construir e validar um questionário multidimensional para avaliar a qualidade de vida relacionada ao melasma (HRQ-Melasma). Considerando que existe apenas um instrumento específico disponível na literatura para avaliar a QV em melasma e que o mesmo não foi desenvolvido seguindo os passos clássicos da psicometria, esse trabalho tornou-se indispensável ao ser desenvolvido com base na percepção simbólica dos pacientes e especialistas da área. A amostra foi constituída por cinco especialistas titulados pela Sociedade Brasileira de Dermatologia e 154 portadores de melasma facial. O instrumento de coleta de dados foi composto por duas fases. A primeira, uma fase qualitativa, onde se realizou um grupo focal com os especialistas da área para a definição das dimensões e posteriormente um grupo focal com portadores de melasma facial, para a definição dos itens preliminares através da percepção simbólica dos mesmos frente às manchas. Na segunda fase, quantitativa, foi apresentado aos participantes o questionário teste (49 itens), MELASQoL-PB, DLQI-BRA, Escala Visual de Incômodo, escore MASI e dados sociodemográficos. Para a redução dos itens foi utilizado o modelo de Rasch pertencente a TRI, excluindo 30 itens que continham pouca informação. A análise da dimensionalidade foi realizada através do ajuste do modelo multidimensional, confirmando a multidimensionalidade do questionário. Par... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: This is a methodological study using qualitative and quantitative analyzes aimed to develop and validate a multidimensional questionnaire to evaluate the quality of life related to melasma (HRQ-Melasma). Considering that there is only one specific instrument available in the literature to assess the quality of life in patients with melasma and whose elaboration has not followed classic steps in psychometry, this study has become indispensable to be developed based on the symbolic perception of the patients and experts of the area. The sample consisted of five dermatologists titrated by the Brazilian Society of Dermatology and 154 patients with facial melasma. Data collection consisted of two phases: The first, qualitative phase, where they held a focus group with experts in the field to define the dimensions and then a focus group with people with facial melasma, to define the preliminary items through the symbolic perception of the same face of the spots. In the second phase, quantitative, was presented to the participants the questionnaire test (49 items), MELASQoL-PB, DLQI-BRA, visual scale of nuisance, MASI score and sociodemographic data. The reduction of the items we used the Rasch model belonging to TRI, excluding 30 items that contained little information. The analysis of dimensionality was performed by adjustment the multidimensional model, confirming the multi-dimensionality of the questionnaire. To analyze the reliability and stability over time, we used Cronbach's... (Complete abstract click electronic access below) / Mestre

Trichodysplasia spinulosa (TS) é uma doença proliferativa de pele observada em pacientes imunocomprometidos. Caracteriza-se pela formação de espinhas de queratina conhecidos como espículas, acantose epidérmica, dilatação do folículo piloso, queratose actínica, queda dos pelos, pápulas foliculares e, que normalmente, se manifestam na região facial do paciente e extremidades do corpo (constantemente confundida com danos por exposição prolongada ao sol). A TS resulta da infecção ativa com o poliomavírus TSassociado (TSPyV), onde observa-se alta carga viral, expressão de proteína do vírus e formação de partículas. Este estudo desenvolveu métodos moleculares de detecção e sequenciamento do genoma total e parcial de TSPyV e utilizou-se destes métodos para determinar padrões de excreção e viremia em indivíduos imunocompromentidos e imunocompetentes, bem como explorar possíveis vias de transmissão. Ainda, características genéticas e filogenéticas do TSPyV também foram determinadas. Apesar de observamos alta taxa de excreção urinaria em indivíduos imunocomprometidos (57,7%), o vírus não foi encontrado em amostras de água do meio ambiente. Ainda em termos de excreção urinária do TSPyV, apenas 1,4% dos indivíduos imunocompetentes apresentaram virúria (diferente do que se observa para os poliomavirus JCPyV e BKPyV), mas o vírus foi encontrado em leite materno, sugerindo assim a possibilidade de haver transmissão vertical do TSPyV. As análises filogenéticas revelaram a existência de 2 linhagens de vírus circulantes em nosso meio, com características distintas dos já descritos na literatura. As diferenças observadas foram suficientes para que os vírus sejam caracterizados como novos genótipos circulantes de TSPyV. / Trichodysplasia spinulosa (TS) is a proliferative skin disease seen in immunocompromised patients. It is characterized by the formation of keratin spines known as spicules, epidermal acanthosis, hair follicle dilatation, actinic keratosis, hair loss, follicular papules and, which usually manifest in the facial region and extremities of the body (constantly confounded with damage from prolonged exposure to the sun). TS results from active infection with TS-associated polyomavirus (TSPyV), where high viral load, virus protein expression and particle formation are observed. This study developed molecular methods for detection and sequencing the total and partial genome of TSPyV and, employing these methods, determined patterns of excretion and viremia in immunocompromised and immunocompetent individuals, as well as explored possible transmission pathways. Genetic and phylogenetic characteristics were also determined. Although we observed high rate of urinary shedding in immunocompromised individuals (57.7%), the virus was not found in environmental water samples. Also in terms of urinary excretion of TSPyV, only 1.4% of immunocompetent individuals presented viruria (different from what is observed for polyomaviruses JCPyV and BKPyV), but the virus was found in breast milk, thus suggesting the possibility of vertical transmission. Phylogenetic analyzes revealed the existence of 2 circulating virus strains in our country, with different characteristics from those already described in the literature. The differences seem to be sufficient to characterize the viruses as new genotypes of TSPyV.

Migraine is one of most disabling neurological disorders for which the genetic and molecular mechanisms are not fully resolved. This PhD thesis has focused on the functional characterization of two new missense mutations in CACNA1A, the pore forming subunit of the CaV2.1 channel, associated to migraine. The analysis of these mutations revealed that the functional interactions of CaV2.1 mutant channel with regulatory proteins implicated in synaptic transmission (i.e. G proteins and SNARE proteins) are altered and may be responsible for the observed clinical phenotype. Moreover, our studies also propose that mutations in CACNA1A can be not only causative of the disease but modifiers of the migraine symptoms as well. / La migranya és un dels trastorns neurològics més incapacitant les causes genètiques i moleculars del qual no estan del tot resoltes. Aquesta tesi doctoral s’ha centrat en la caracterització funcional de dues noves mutacions amb canvi de sentit en CACNA1A, la subunitat formadora del porus del canal CaV2.1, associades a migranya. L’anàlisi d’aquestes mutacions ha desvetllat que les interaccions funcionals del canal mutant CaV2.1 amb proteïnes reguladores implicades en la neurotransmissió (proteïnes G i proteïnes SNARE) estan alterades i poden ser responsables dels fenotips clínics observats. A més, els nostres estudis proposen que mutacions en CACNA1A poden no només ser causa de la malaltia sinó també modificar-ne els símptomes.

1) INTRODUCCIÓNConsideramos que aún no podemos hablar de Psicología de la Salud -o Medicina Conductual- aplicada a la Dermatología como un campo de estudio o de intervención claramente definido y delimitado. Pensamos que estamos en una etapa inicial, de aplicación de algunas técnicas y teorías propias de la Modificación de Conducta a un número limitado de trastornos dermatológicos. Falta, quizá, un cierto tiempo para que los psicólogos de la salud puedan integrar sus conocimientos con los profesionales de la dermatología, del mismo modo que esta integración ha sido posible en otros campos de la medicina, tales como la neurología, cardiología, pediatría, endocrinología, oncología, etc.Dentro de esta etapa inicial un equipo de psicólogos de la Unidad de Terapia de Conducta de la facultad de Psicología de la Universidad de Barcelona ha efectuado la investigación que a continuación se presenta. No era nuestra pretensión el superar el estado de la cuestión planteada en las líneas precedentes, superación esta que es tarea de todo un colectivo de profesionales y no sólo de un equipo de trabajo; tan sólo pretendíamos presentar un trabajo con un cierto rigor metodológico que permitiese afianzar nuestros conocimientos en esta área.2) INVESTIGACIÓNEscogimos el trastorno denominado "Acné Vulgaris"(AV) por diferentes motivos: a) Su prevalencia entre la población general es muy elevada: Fellowes, Billewicz y Thompson (1981) hallaron una prevalencia del 75-80% en mujeres de 15 a 16 años de edad y del 90-95% en varones de 17 a 18 años; b) Suele ser un trastorno refractario al abordaje medicamentoso (August, 1985); c) Es un trastorno cuya organicidad es indiscutible; y d) La escasez de trabajos conductuales sobre el mismo.El AV es una dermatosis inflamatoria que afecta a los folículos pilosebáceos y tejidos adyacentes. Suele seguir un curso crónico que requiere intervención profesional en la mayoría de los casos. Se localiza ahí donde hay mayor concentración de glándulas sebáceas, responsables en última instancia del trastorno, esto es, en la cara, el cuello y la espalda.3) MÉTODO. SUJETOSSe reclutaron un total de 32 mujeres de edades comprendidas entre los 15 y los 25 años (X = 19.28. D.E. = 3.29) con una historia de AV, entre leve y grave, de 5 años aproximadamente. Todos los sujetos participaron voluntariamente sin recibir ningún tipo de incentivo por ello. Los sujetos hablan efectuado un promedio de 2,1 tratamientos anteriores para su AV obteniendo en más del 55% de los casos un resultado nulo o un empeoramiento del trastorno.4) INVESTIGADORES Dos médicos dermatólogos y dos médicos generalistas efectuaron las labores médicas propias de la investigación. Seis psicólogos, en formación de post-grado en la Unidad de Terapia de Conducta de la facultad de Psicología de la Universidad de Barcelona, dos en tareas de evaluación y dos parejas en tareas de aplicación del BF EMG a los sujetos de la investigación. Todos los participantes recibieron entrenamiento adecuado en sus tareas por parte de los autores del presente trabajo.5) DISEÑOSe efectuó un diseño factorial 2 x 2. Los dos factores eran el tratamiento médico y el entrenamiento en BF EMG, los niveles de los factores fueron SI y NO. Se configuraron, de este modo, 4 grupos: 1) de tratamiento médico; 2) de entrenamiento en BY EMG; 3) de tratamiento médico más entrenamiento en BF EMG; y 4) control (lista de espera).6) MATERIALSe utilizó un equipo completo de registro de la actividad muscular frontal (EMG LE 900) y un canal de BF preparado para la retroalimentación auditiva de la actividad muscular (LE 1100). Para los registros fotográficos se utilizó una cámara OLYMPUS 1000.7) PROCEDIMIENTOA) Fase de línea base ("pre"). Tras el examen médico los sujetos eran derivados a la Unidad de Terapia de Conducta mencionada. Esta fase se prolongó durante dos semanas a razón de una sesión de evaluación por semana. Se obtuvieron los siguientes datos: a) contaje de lesiones por parte del psicólogo evaluador; b) contaje de lesiones mediante el autorregistro del propio sujeto; e) dos registros de línea base de la actividad EMG Frontal (15 minutos de adaptación y 5 minutos de registro): y d) Dos fotografías del rostro del sujeto. Se controlaron variables como el nivel de ansiedad, el locus de control y el nivel de expectativas.B) Fase de tratamiento. Los sujetos fueron asignados de modo rotatorio a uno de los cuatro grupos del estudio. Los sujetos del grupo 1 recibieron tratamiento mediante el medicamento llamado "Dalacín Tópico" (Upjohn) - un antibiótico tópico muy usado en el tratamiento del AV - durante 30 días. Los sujetos del grupo 2 recibieron ocho sesiones de entrenamiento en BF EMG, a razón de dos sesiones por semana, (5 minutos de adaptación. 5 min. de línea base preentrenamiento, 20 minutos de entrenamiento con BF auditivo y 5 minutos de línea base post-entrenamiento). El objetivo era la reducción de la activación del músculo frontal. Durante las tres primeras sesiones se les ayudó con instrucciones estándar de relajación. Los sujetos del grupo 3 recibieron los dos tratamientos anteriormente reseñados con una duración semejante a la de los anteriores. Los sujetos del grupo 4 esperaron durante unos 40 días aproximadamente sin efectuar tratamiento alguno. Todos los sujetos efectuaron autorregistros diarios y semanales sobre diferentes cuestiones relacionas con su AV y el cuidado del mismo.C) Fase de post-tratamiento ("post"). Una semana después de finalizada la fase anterior se efectuó una serie idéntica a la fase " pre".D) Fase de seguimiento. Por motivos éticos sólo se efectuaron seguimientos en los grupos 1, 2 y 3. Los sujetos del grupo de lista de espera recibieron tratamiento médico para su AV. Se establecieron seguimientos a los 30 ("seg. 1"), 90 ("seg. 2") y 360 ("seg. 3") días de finalizado el tratamiento.En cada sesión de seguimiento se efectuó un registro EMG, un contaje de lesiones y dos fotografías del rostro del sujeto.8) RESULTADOSDe los 32 sujetos iniciales, 12 abandonaron la investigación antes de su finalización. De estos 12. 10 pertenecían al grupo de tratamiento médico, por ello los resultados de este grupo deben ser considerados teniendo en cuenta que para lograrlos se necesitaron 15 sujetos.A nivel descriptivo destaca que el 37% de la muestra atribuye la causa de su AV a problemas de estrés o ansiedad, así como un 62% de la misma afirma que su AV empeora cuando se siente "nervioso" mientras que mejora para un 56% de los sujetos en situaciones de "tranquilidad y relajación". Los grupos eran homogéneos entre sí al inicio de la investigación en las tres variables mostradas. Se observa como los grupos 1, 2 y 3 pero no el 4 presentaron una mejoría estadísticamente significativa (T. de Wilcoxon) en el número de sus lesiones a lo largo de las diferentes fases de la investigación, incluyendo el seguimiento realizado al año de seguimiento.Asimismo sólo los grupos que recibieron entrenamiento en BF EMG (grupos 2 y 3) mostraron una disminución de la actividad del músculo frontal. El análisis multivariante (Manova) de las diferencias en el número de lesiones entre la fase "pre" y la "post" según los monitores-evaluadores muestra que los sujetos que recibieron tratamiento médico (grupos 1 y 3) difieren significativamente de aquellos que no lo recibieron (grupos 2 y 4) (F = 4.77, p = 0.044). A su vez, los sujetos que fueron entrenados en BF EMG (Grupos 2 y 3) muestran diferencias con respecto a los que no lo fueron (Grupos 1 y 4) (F =- 5.29, p = 0.035). Sin embargo, los sujetos que recibieron la interacción de ambos tratamientos (Grupo 3) no difieren significativamente de los que no fueron tratados con tal interacción (Grupos 1, 2 y 4) (F = 3.11, p = 0.097). Se confirma, pues, que los sujetos que reciben tratamiento obtienen mejores resultados que los que no lo reciben; sin embargo, no se confirma que la interacción entre los dos tratamientos provoque una mejoría mayor en el grupo que la recibe.9) DISCUSIÓNLos resultados nos llevan a considerar que la aplicación del entrenamiento en BF EMG es un tratamiento útil, aún en solitario, para aliviar el AV.Sin embargo, y aún teniendo en cuenta el elevado número de abandonos en el grupo de tratamiento médico, este último se mostró igualmente eficaz. De ello podemos concluir que no hay un tratamiento más eficaz que otro. Asimismo de la adición de ambos tipos de tratamiento no resulta una mayor mejoría del AV.Por otra parte, hemos constatado que los datos del número de lesiones del AV y los de la actividad EMG no covarían necesariamente. Así el tratamiento médico mejora el AV (disminuye el número de lesiones) sin provocar cambio alguno en la actividad EMG (grupo 1). La disminución de la actividad EMG (mediante entrenamiento BF EMG) se sigue de una disminución del número de lesiones del AV (grupo 2).Se puede concluir, entonces, que si bien no es necesaria la disminución de la actividad EMG para aliviar el AV si esta se efectúa, el AV mejora. La disminución de la actividad EMG es condición suficiente pero no necesaria y lo mismo se puede decir del tratamiento médico; es suficiente, pero tampoco necesario, tal y como demuestran los datos del grupo 2. / In the present work different studies carried out from a behavioural perspective on dermatological problems are revised. This revision allows confirm the practical absence of basic research about this topic and the fact that the application of behavioural strategies to Dermatology it is still very limited. Furthermore, we present a research work that has been done with a sample of 32 women with Acne Vulgaris (AV) assigned to 4 different treatment groups: 1) medical treatment; 2) electromyographic biofeedback training (EMG BF); 3) the combination of the two previous (medical plus EMG BF); and 4) control on waiting list of results showed that at post-treatment and the one year follow-up the EMG BF appeared as ca useful procedure for the AV treatment al though the effect was not greater than that of the medical treatment. This research states the applicability of behavioural strategies to dermatological problems, opening new ways of collaboration between dermatologist and health psychologists.

Los tensioactivos poseen una estructura química formada por una porción hidrófoba y otra hidrófila. El equilibrio entre ambas es el responsable de los fenómenos de actividad superficial, de agregación supramolecular y de sus múltiples aplicaciones en la industria. Los tensioactivos son muy utilizados en la vida cotidiana. La exposición de la piel y ojos a productos que los contienen puede comportar riesgos por su efecto irritante. También es importante asegurar la inocuidad frente al medio ambiente ya que muchos de ellos acabarán formando parte del ecosistema. La síntesis de tensioactivos derivados de aminoácidos supone una alternativa a los tensioactivos sintéticos convencionales debido a su multifuncionalidad y el uso de materias primas renovables. Se ha evaluado el perfil toxicológico de una familia de tensioactivos aniónicos derivados de la N-alfa,N-epsilon-dioctanoil lisina con diferentes contraiones en su estructura (orgánicos y voluminosos: lisina y tris; inorgánicos y pequeños: sodio, litio y potasio) mediante métodos "in vitro" y se ha estudiado su interacción con las membranas celulares utilizando como modelo el eritrocito. Se han abordado los siguientes objetivos y se han extraído las siguientes conclusiones de cada uno de ellos: 1) Se ha evaluado el potencial efecto irritante dérmico de los tensioactivos mediante citotoxicidad en 3 líneas celulares y determinación de la citocina proinflamatoria IL-1-alfa. Los tensioactivos derivados de lisina presentaban un potencial efecto irritante dérmico menor al de los comerciales utilizados, observándose una tendencia de los tensioactivos con contraiones orgánicos a ser menos citotóxicos y estimular en menor medida la síntesis y liberación de la citocina. 2) El potencial fotoirritante de los tensioactivos se ha evaluado mediante el ensayo de fotohemólisis. Los derivados de lisina no provocaron efecto fototóxico, cuya propiedad permite su aplicación en preparados cosméticos o farmacéuticos de aplicación tópica, incluidas las cremas solares protectoras. 3) El potencial efecto irritante ocular se ha determinado mediante el ensayo de hemólisis como alternativa al ensayo de Draize. Los derivados de lisina resultaron menos hemolíticos y presentaron menor capacidad de desnaturalizar la hemoglobina que los comerciales utilizados y se pueden clasificar como ligeramente irritantes a nivel ocular. Los tensioactivos con contraiones orgánicos presentaron una tendencia a ser menos hemolíticos. 4) La toxicidad acuática de los tensioactivos se ha valorado mediante el ensayo de inmovilización en Daphnia magna. Las sales de Tris y de litio fueron las menos tóxicas y no se encontraron diferencias según la naturaleza del contraión. 5) La actividad antimicrobiana se ha determinado mediante el ensayo de susceptibilidad antimicrobiana. Los derivados de lisina, independientemente de su contraión, mostraron una baja actividad antibacteriana pero fueron más activos frente a las levaduras. Estas propiedades les hacen buenos candidatos para aplicaciones tópicas dado que respetarían la flora bacteriana de la piel. 6) Se ha estudiado su interacción con la membrana celular mediante hemólisis hipotónica y fluidez de membrana. Todos los tensioactivos protegieron frente a la hemólisis hipotónica y únicamente las sales de lisina, tris y potasio incrementaron la fluidez de la región externa de la membrana. Por tanto, no parece existir ninguna relación entre la protección frente a la hemólisis hipotónica y los cambios de fluidez en la membrana. No se ha podido establecer una relación entre la naturaleza química del contraión y sus efectos sobre la membrana.La conclusión final ha sido que los derivados de lisina constituyen una alternativa prometedora a los tensioactivos aniónicos comerciales ya que han demostrado ser poco irritantes a nivel ocular y dérmico y no tener acción fotoirritante. Por tanto, estas propiedades les hacen buenos candidatos para ser incluidos en preparados de aplicación tópica, además de constituir una clase de tensioactivos respetuosos con el medio ambiente. / Surfactants are common constituents in many topical drugs and cosmetics. Application of active ingredients and pharmaceuticals additives may cause ocular and skin irritation; the majority of irritant responses to personal-care products are presumed to be caused by surfactants. Besides, some surfactants can pose toxicity problems for aquatic organisms due to their high polarity. As a result of increasing environmental and toxicological concerns, there is great industrial demand for high-performing surfactants with low toxicity. One interesting strategy to minimize environmental and irritant effects involves the synthesis of amino acid-based surfactants with analogues structures to natural compounds.The toxicological profile of anionic lysine-based surfactants with different counterions has been investigated: 1) Skin irritation potential has been evaluated by cytotoxicity in cell cultures and IL-1-alpha production as an inflammatory indicator. Surfactants were less irritant than commercial ones, with a light trend to surfactants with heavy counterions to be less cytotoxic and less potent in stimulating IL-1-alpha synthesis and release. 2) Surfactants were not phototoxic as evaluated by photohemolysis. Therefore, they can be used in topical formulations, including sun protectors. 3) Lysine derivatives were less hemolytic and less denaturing of hemoglobin than commercial surfactants by evaluating their ocular potential by hemolysis. Our surfactants can be classified as slight irritants. 4) Aquatic toxicity results by "Daphnia magna" immobilisation test revealed that 77KT and 77KL were the less toxic. 5) Antimicrobial activity by determining the minimal inhibitory concentration showed low antibacterial activity of lysine derivatives but high activity against yeasts, independently of the counterions. Therefore, they could respect skin bacterial flora in topical applications. 6) Surfactant-membrane interactions have been studied by hypotonic hemolysis and membrane fluidity. All surfactants protected against hypotonic hemolysis but solely 77KK, 77KT and 77KP increased membrane fluidity of the external region of the lipid bilayer. The counterion did not affect membrane fluidity. It could not be found a relationship between hypotonic protection and membrane fluidity. To sum up, lysine derivatives are a promising alternative to commercial surfactants due to their low ocular and dermal irritation potential and no phototoxic action. Therefore, they can be included in topical products without involving environmental risk.

En el año 1971 y atraída por la gran personalidad del Prof. J. Piñol Aguadé, inicié el estudio de la Especialidad de Dermatología en la Cátedra por él dirigida. De este modo, me encontré en una Escuela profundamente interesada en las enfermedades producidas por alteraciones en el metabolismo de las porfirinas. Esto era debido a que el profesor Piñol seguía con sumo interés a los pacientes porfíricos y mostraba constantemente su preocupación por los problemas clínicos y patogénicos que presentaban.Aunque los primeros artículos sobre la porfirina de dicha Cátedra se publicaron ya en 1952, el origen del estudio sistemático del tema se encuentra en 1957, cuando los profesores Vilanova y Piñol Aguadé publicaron "La Porfiria Crónica del adulto", monografía donde se recapitulaban los conocimientos que se tenían en aquella época sobre el tema. A partir de entonces se sucedieron periódicamente publicaciones de la Cátedra sobre diversos aspectos de estas enfermedades (incidencia en nuestro ambiente, peculiaridades clínicas e histológicas, tanto de las lesiones cutáneas como complicaciones oculares, hepáticas o articulares).En 1972, el interés del Prof. Piñol Aguadé se centraba en los estudios bioquímicos y genéticos de la Profiria Cutánea Tarda, y fue entonces cuando recibí el encargo de iniciar estos trabajos. Tras una presentación preliminar en el VIII Congreso Hispano Portugués de Dermatología (1973), los trabajos han proseguido con un incremento en el número de pacientes estudiados. Por otra parte, se ha establecido una conexión fluida con otros centros de Investigación de Porfirinas (como el "Welsh National School" de Cardiff) y se ha creado una infraestructura específica para el estudio de las alteraciones bioquímicas de estos pacientes, contando con la valiosa ayuda del Profesor J.M. Mascaró. Todos estos factores ha permitido que la tesis doctoral que presentamos a continuación tenga un gran número de elementos de trabajo; precisamente la combinación y profundización de dichos elementos, la aparición de nuevos problemas y la propuesta de posibles soluciones pueden considerarse nuestra principal aportación al estudio de las porfirias.

Made available in DSpace on 2014-08-13T14:50:32Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2013-08-22Bitstream added on 2014-08-13T18:01:17Z : No. of bitstreams: 1 000725296_20150101.pdf: 109418 bytes, checksum: cebf9f97c8e08074ee65a1e7f67f9863 (MD5) Bitstreams deleted on 2015-01-05T11:00:50Z: 000725296_20150101.pdf,Bitstream added on 2015-01-05T11:01:48Z : No. of bitstreams: 1 000725296.pdf: 956123 bytes, checksum: 50d72cefdb85fffba1d5001620776c3f (MD5) / Este estudo foi realizado para caracterizar os achados dermatológicos, oftalmológicos e morfológicos da pele de cavalos com Astenia Dérmica Regional Hereditária Equina (HERDA) e padronizar um ensaio de “High Resolution Melting” (HRM), para determinar a ocorrência de heterozigotos. As avaliações e a padronização do HRM foram realizadas em cinco cavalos afetados (GA) e cinco não afetados (GC). Adicionalmente, cinco animais heterozigotos (GH) foram utilizados para padronizar o HRM. A ocorrência de heterozigotos foi determinada em 690 animais. Diversas regiões da pele foram mensuradas com cutímetro no GA e GC. Biópsias de pele foram submetidas aos exames histopatológico e ultraestrutural. Avaliação histopatológica foi realizada por dois patologistas. O exame oftalmológico incluiu, além das avaliações rotineiras, aferição dos diâmetros da córnea, paquimetria e biometria. Foi extraído DNA do sangue colhido do GA, GC, GH e de 690 cavalos e o HRM foi validado. Observou-se menor espessura de pele no GA. A sensibilidade e especificidade do diagnóstico histopatológico da pele dependeram do avaliador e da região, respectivamente. Foram observados menor espessura e maior curvatura e diâmetros da córnea no GA. O HRM apresentou elevadas acurácia e precisão. A frequência de heterozigotos foi de 4,7%. Apesar do padrão regional dos sinais dermatológicos, a diminuição da espessura da pele não é regional. Para o diagnóstico histopatológico, recomenda-se realizar biópsia de pele no pescoço, garupa ou dorso. A relevância clínica dos achados oftalmológicos deve ser investigada. O ensaio de HRM padronizado será útil na seleção dos acasalamentos, visando minimizar a ocorrência da doença / The present study was conducted to characterize the dermatological, ophthalmological, and morphological findings from horses affected with Hereditary Equine Regional Dermal Asthenia (HERDA) and to standardize a High Resolution Melting (HRM) genotyping assay to determine the frequency of carriers. The evaluations and HRM standardization were performed in five affected (AG) and five non-affected (CG) horses. Additionally, five heterozygous (HG) horses were used to HRM standardization. The frequency of carriers was determined in 690 horses. Several skin regions of both groups were measured with a cutimeter Skin biopsies were submitted to histopathological and ultrastructural evaluations. Histopathological evaluation was performed by two pathologists. Ophthalmology included, besides the routine evaluations, corneal diameters measurement, pachymetry, and biometry. HRM was validated using purified DNA from blood samples of the AG, CG, HG and 690 horses. Skin thickness decrease was observed in the AG. Histopathological sensitivity and specificity to diagnose HERDA was dependent on the evaluator and region, respectively. HERDA horses exhibited decreased corneal thickness and increased corneal curvature and corneal diameters. The HRM assay resulted in high accuracy and precision. The estimated carrier frequency was 4.7%. Despite of the regional pattern of the dermatological signs, the decrease of skin thickness from HERDA horses is not regional. Skin samples of the neck, croup or back are recommended to diagnose HERDA. The relevance of the ocular findings should be further investigated. The standardized HRM assay will be useful in the management of breeding programs to minimize the occurrence of this disease

Made available in DSpace on 2013-08-07T19:03:33Z (GMT). No. of bitstreams: 1 000438172-Texto+Completo-0.pdf: 1191521 bytes, checksum: 237c9b927e3f38af88fb5e0c217da2cf (MD5) Previous issue date: 2012 / Wound healing represents a dynamic physiological process initiated and influenced by many factors. Nanocrystalline silver have been demonstrated to have antimicrobial and anti-inflammatory properties, whereas papain is a proteolytic enzyme, which has been used in different formulations for wound treatment in clinics. Objectives This study was conducted to further evaluate the wound healing activity of nanocrystalline silver dressings as compared to that obtained with 2% papain gel, for the treatment of acute wounds in rats and the impact on VEGF expression. Forty-eight male Wistar rats were randomly divided into four groups. Group 1: treated with saline solution (NaCl 0. 9%); group 2: treated with nanocrystalline silver; group 3: treated with the excipient gel; group 4: treated with 2% papain gel. A full-thickness wound of 1. 5 x 1. 5 cm² was excised from the back of the rats, under aseptic conditions and were anesthetized by a mixture of ketamine and xylazine. All the animals were evaluated on the 3rd, 6th, 9th, 12th and 15th days for wound-healing rating and histological evaluation and imunohistochemistry for VEGF.The statistical analysis was performed ANOVA, followed by Bonferroni’s test. The group treated with the nanocrystalline silver dressing, showed a healing ratio superior, in all periods, when compared to control group and was the unique showing complete wound healing at 15 days of evaluation. The 2% papain gel group, a significantly higher wound healing rate was observed only at the 3th and the 6th days, but the wound showed a bleeding and decrease of wound healing ratio from the 9th day on. Histological evaluation showed a fully matured and compact granulation tissue on the nanocristaline silver group. The others groups displayed thickned epidermis, with extensive areas of inflammation. Evident immunopositivity for VEGF was also seen in the granulation tissue layer at the 9th day, the nanocrystalline silver group showed a higher VEGF expression in blood vessels, epidermal cells and granulation tissue. In this work, based on both the qualitative and the quantitative analysis, the nanocrystalline silver group showed a better wound healing effect in view of a rapid contraction of wound, compared with the others groups. Furthermore, we show for the first time that pro-healing activities of nanocrystalline silver dressings are likely associated to the modulation of VEGF expression. / O processo de cicatrização representa uma cascata de eventos dinâmicos iniciados e influenciados por diversos fatores. A prata nanocristalina tem demonstrado uma ação antimicrobiana e anti-inflamatória em diversos estudos, enquanto a papaína, além da ação anti-inflamatória, é usada no desbridamento de feridas, por ser uma enzima proteolítica. A ação da papaína depende da sua concentração que varia de 1% a 10%. Esse estudo foi conduzido com o objetivo de avaliar a ação da prata nanocristalina e da papaína gel 2% sobre o processo de cicatrização em ratos e o impacto dessas substâncias sobre a expressão de VEGF. Foram randomizados 48 ratos Wistar em 4 grupos. Grupo 1: tratado com solução salina; grupo 2: tratado com prata nanocristalina; grupo 3: tratado com gel excipiente; grupo 4: tratado com papaína gel a 2%. Foi realizado uma excisão de espessura total no dorso do animal, medindo de 1,5 x 1,5 mm. Foi respeitada técnica asséptica rigorosa e o animal foi anestesiado com xilazina e quetamina por via intraperitoneal. Todos os animais foram avaliados no 3º, 6º, 9º, 12º e 15º dia. As lesões foram fotografadas e analisadas pelo Programa Image J para estimar a área. Foram recolhidas amostras das lesões nos diferentes períodos de avaliação para análise histológica e imuno-histoquimica para VEGF.A análise estatística foi feita pelo teste de análise de variância (ANOVA), seguido pelo Teste de Bonferroni, utilizando programa Graphped 4. O grupo tratado com a prata nanocristalina, apresentou cicatrização completa ao final de 15 dias, diferente dos outros grupos. O grupo tratado com papaína gel 2% apresentou uma maior taxa de cicatrização no 3º e 6º dia, que se manteve estável a partir do 9º dia. A avaliação histológica mostrou um tecido de granulação maduro no grupo da prata nanocristalina. Os outros grupos apresentaram uma epiderme espessa com extenso infliltrado inflamatório. Foi evidente a imunopositividade para VEGF no grupo da prata nanocristalina, principalmente no 9º dia de tratamento. Nesse trabalho, baseado tanto na análise quantitativa como qualitativa, o grupo tratado com prata nanocristalina mostrou uma melhor taxa de cicatrização, evidenciado por uma mais rápida contração da ferida, comparada com os outros grupos. Além disso, evidenciamos que a ação pró cicatrização da prata nanocristalina está associada com a modulação da expressão de VEGF.

Made available in DSpace on 2013-08-07T19:05:37Z (GMT). No. of bitstreams: 1 000439491-Texto+Completo-0.pdf: 1474767 bytes, checksum: 10387186b0cf97cad4d66c8947bfeb70 (MD5) Previous issue date: 2012 / Objective: To evaluate the evidence on the clinical efficacy of platelet-rich plasma (PRP) for aesthetic treatment of the skin. Material and Methods: a narrative review was conducted initially on skin aging, options for cosmetic treatment of the aged skin, growth factors from platelets and the use of platelet-rich plasma to tissue regeneration in the experimental setting. This was followed by a comprehensive systematic review of medical literature to evaluate the clinical efficacy of PRP in the aesthetic treatment of the skin, which aimed to answer the research question. The included databases were MEDLINE, Embase and Cochrane CENTRAL. Human clinical trials evaluating the effect of PRP as a dermal stimulator in the aesthetic treatment of the skin were included. Literature search, articles selection and data extraction were performed by two independent reviewers. Results: Only seven out of 2132 identified articles met the inclusion criteria of the systematic review. Of these, 5 evaluated the effect of application of PRP for facial skin and acne scars treatment, skin renewal, prominent nasolabial folds or as ajduvant for facial plastic surgery. Two other studies have evaluated histological changes resulting from the application of PRP in the skin of the arms. All evaluated studies have demonstrated beneficial result related to PRP application. However the studies had major limitations such as small sample size, non-uniform outcome evaluation criteria and lack of a control group. Conclusion: Current scientific evidence identified through systematic review suggests that PRP is a promising method for the cosmetic treatment of the skin. However, larger clinical studies are needed with better outcomes evaluation criteria to define the role of PRP in clinical practice. / Objetivo: Avaliar o conjunto das evidências sobre a eficácia clínica do plasma rico em plaquetas (PRP) para o tratamento dermatológico estético. Material e Métodos: Na fundamentação da presente tese, foi realizada uma revisão narrativa sobre envelhecimento cutâneo, opções para o tratamento dermatológico estético das alterações relacionadas ao envelhecimento cutâneo, fatores de crescimento teciduais encontrados nas plaquetas e uso do plasma rico em plaquetas para regeneração tecidual no contexto experimental. Para responder à questão de pesquisa, foi conduzida uma abrangente revisão sistemática da literatura médica visando avaliar a eficácia clínica do PRP para o tratamento dermatológico estético, compreendendo as bases de dados MEDLINE, Cochrane CENTRAL e Embase. Estudos clínicos em humanos avaliando o efeito do PRP como estimulador dérmico no tratamento estético da pele foram incluídos. A busca da literatura, a seleção de artigos e a extração de dados foram realizadas por dois revisores independentes. Resultados: Somente 7 de 2. 132 artigos identificados encontraram os critérios de inclusão da revisão sistemática. Desses, 5 avaliaram o efeito da aplicação do PRP na pele da face para tratamento de cicatrizes de acne, revitalização da pele, sulcos nasolabiais proeminentes ou como adjuvante à cirurgia plástica facial. Outros 2 estudos avaliaram alterações histológicas decorrentes da aplicação do PRP na pele dos braços. Todos estudos avaliados demonstraram resultados benéficos relacionados à aplicação do PRP. Entretanto os estudos apresentam limitações relevantes, como pequeno tamanho amostral, critérios não uniformes na aferição dos desfechos e ausência de grupo controle em sua maioria. Conclusão: O atual conjunto de evidência científica identificado através de revisão sistemática sugere que o PRP seja um método promissor para o tratamento cosmético da pele. Entretanto, ainda são necessários estudos clínicos de maior porte e com melhores critérios de aferição de desfechos para definir o papel do PRP na prática clínica.