Objetivou-se avaliar o uso de indicadores fecais e urinários para estimativas de consumo, digestibilidade e síntese de proteína microbiana. Para tal, foram testados níveis de oferta de forragem para ovinos alimentados com milheto (Pennisetum americanum L Leeke) em gaiolas metabólicas. As ofertas constituíram de quatro níveis de ofertas de laminas foliares: 1,5; 2; 2,5% do peso vivo de matéria seca e ad libitum. Com os dados desses mesmos ensaios, gerou-se equações de estimativa de consumo e digestibilidade da matéria orgânica, por meio de marcadores fecais (nitrogênio e fibra em detergente neutro) e de volume urinário através da creatinina urinária para animais em pastejo. Utilizando essas equações, estimou-se o consumo, digestibilidade e síntese de proteína microbiana com animais pastando milheto fertilizado com níveis de nitrogênio (50, 100, 200 e 400 kg/ha). Também fez-se medidas da pastagem (massa de forragem, altura), de desempenho animal (ganho médio de peso, ganho por hectare, carga animal) e balanço de nitrogênio (consumo, retenção e excreção de N). Pelo ensaio em gaiolas de metabolismo pode-se verificar que o consumo de matéria orgânica apresenta uma relação linear múltipla com a excreção de N fecal e fibra em detergente neutro com coeficiente de determinação de 0,94 e erro relativo da estimativa (ERE) de 9,25%, enquanto a digestibilidade apresenta uma relação hiperbólica, sendo melhor descrita por uma hiperbólica múltipla com o uso do N fecal e da fibra em detergente neutro fecal (ERE=3,90). A excreção média de creatinina foi de 0,22 mmol/kg PV0,75 e não foi afetada (P>0,05) pela oferta de forragem, nem pelo estádio fenológico da pastagem, porém apresentou baixa acurácia (R²=0,38; ERE= 48%) nas estimativas de volume urinário. Os dados de desempenho da pastagem e dos animais em pastejo, por sua vez, mostraram resposta crescentes para taxa de acúmulo de forragem e ganhos de peso por área, porém, as medidas nutricionais (consumo, digestibilidade, síntese de proteína microbiana e balanço de nitrogênio) não foram influenciadas (P>0,05) pelos níveis de fertilização nitrogenada, sugerindo a possibilidade de usar menores doses de fertilizante nitrogenado sem prejudicar o desempenho e a nutrição de cordeiros. / The objective of this study was to evaluate the use of urinary and fecal indicators for estimating intake, digestibility and microbial protein synthesis in sheep. Different levels of millet (Pennisetum americanum L Leeke) were fed sheep in metabolic cages, with four levels of leaf blade supply: 1.5, 2, 2.5% of dry matter weight and ad libitum. With the data from this trial, equations to determine intake and digestibility of organic matter through faecal markers (nitrogen and neutral detergent fiber) and urine volume using urine creatinine for grazing animals were determined. Using these equations, intake, digestibility and microbial protein synthesis in animals grazing millet fertilized with different nitrogen levels (50, 100, 200 and 400 kg / ha) were determined. Pasture measurements were also taken (forage mass, height), as well as animal performance (average daily weight gain, gain per hectare, stocking rate) and nitrogen balance (intake, retention and excretion of N). Testing in metabolism cages showed that organic matter intake has a multiple linear relationship with fecal excretion of N and neutral detergent fiber with a determination coefficient of 0.94 and relative error of estimate (RPE) of 9.25%, while the digestibility has a multiple hyperbolic relationship, using fecal N and fecal neutral detergent fiber (RPE= 3.90). Creatinine excretion (mmol/kg BW0,75) was not affected (P> 0.05) by forage supply or pasture developmental stage, but showed low accuracy (R²= 0.38, RPE= 48%) for urine volume estimates. Performance data for pasture and grazing animals, in turn, showed response to increasing forage accumulation rate and weight gain per unit area, however, nutritional measures (intake, digestibility, microbial protein synthesis and nitrogen balance ) were not affected (P>0,05) by nitrogen fertilization levels, suggesting the possibility of using lower doses of nitrogen fertilizer without sacrificing performance and nutrition of lambs.

Foram conduzidos dois ensaios de digestibilidade in vitro verdadeira (ensaios 1 e 2) e um de produção cumulativa de gás in vitro (ensaio 3) para avaliar a combinação da suplementação energética com a protéica, em dietas baseadas em um volumoso de baixa qualidade - feno de Tifton (Cynodon dactylon L.) (PB: 7,69 %; FDN: 70,34 %). Foram avaliados quatro níveis de grão de milho (M)(0, 20, 40 e 60 %) e quatro de PDR suplementar (0; 2,8; 5,6; 8,4 %), tendo como fonte uréia (ensaio 1) ou proteína isolada de soja (PIS)(ensaio 2). No experimento 3 foram avaliados os mesmos níveis de milho e de PDR tendo como fonte tanto a uréia quanto a PIS. Ensaio 1: houve um aumento linear da DIVVMO sem M em resposta à PDR. Foi observado um comportamento quadrático da DIVFDN em resposta à PDR, com 20 % de M. A taxa de degradação da MO aumentou linearmente em resposta ao M. A degradabilidade efetiva (DE) da MO a uma taxa de passagem de 2 %/h aumentou linearmente em resposta à PDR, com 20 % de M. A uma taxa de passagem de 5 %/h a DE da MO aumentou linearmente em resposta ao M. A mesma resposta foi observada no lag-time da FDN. Ensaio 2: a DIVVMO aumentou linearmente em resposta ao M. A taxa de degradação da MO foi afetada quadraticamente pelo M e a taxa de degradação da FDN respondeu linearmente à PDR com 20 ou 40 % de M. A DE da MO diminuiu linearmente com o acréscimo na PDR com 60 % de M. A concentração de N-NH3 aumentou linearmente em resposta à suplementação protéica nos experimentos 1 e 2. Ensaio 3: a produção de gás e a DIVVMO aumentaram linearmente em resposta à inclusão de M com uma inclinação maior utilizando PIS. Com 20 % de M, a produção de gás diminuiu linearmente com o aumento na PDR. O fator de partição foi superior com PIS e foi detectado um aumento linear em resposta ao incremento da PDR com 20 % de M. A produção máxima de gás da fração de rápida (A) e de lenta degradação (D) aumentaram linearmente em resposta à inclusão de M com PIS, e quadraticamente com uréia. A taxa de degradação de A foi afetada quadraticamente pelo nível de M e a taxa de degradação de D foi maior com uréia. O lag-time de A aumentou linearmente em resposta a inclusão de M e no lag-time de D, foi observada uma resposta quadrática. Não foi possível detectar, com exceção dos tempos de colonização, efeitos negativos da suplementação com M e, na maioria das vezes, sua utilização em níveis moderados foi positiva. A suplementação protéica associada à energética foi benéfica em alguns parâmetros estudados. A uréia foi melhor em níveis moderados de M e sobre a degradação da fibra do que a PIS. / Two in vitro digestibility experiments (trial 1 and 2) and one in vitro gas production (trial 3) were conducted to evaluate the combination between energy and protein supplementation in diets based on a low quality roughage - Tifton hay (Cynodon dactylon L.) (CP: 7,69 %; NDF: 70,34 %). It was evaluated four levels of ground corn grain (GC) (0, 20, 40 and 60 %) and four levels of supplemental RDP (0; 2,8; 5,6 e 8,4 %), using as protein source urea (trial 1) or isolated soybean protein (ISP)(trial 2). In trial 3 it was evaluated the same GC and RDP levels using as protein source urea and ISP. Trial 1: there was a linear increase on OMIVTD in response to GC. It was observed a quadratic behavior of the NDFIVD in response to RDP, with 20 % of GC. The OM rates (C) increased linearly with the GC inclusion. The OM effective degradability (ED) increased linearly in response to RDP with 20 % of GC with a 2 %/h passage rate. With a 5 %/h passage rate the OM ED increased linearly with the GC. The same response was observed with the NDF lag-time. Trial 2: the OMIVTD increased linearly in response to GC. The OM degradation rate was quadratic affected by the GC and the NDF degradation rate responded linearly to RDP with 20 or 40 % of GC. The OM ED decreased linearly with the increase in the RDP with 60 % of GC. The N-NH3 concentration increased linearly in response to protein supplementation in the trials 1 and 2. Trial 3: the gas production and the OMIVTD increased linearly in response to GC inclusion with a major slope using PIS. With 20 % of GC, the gas production decreased linearly with the increase in the RDP. The partitioning factor was greater with ISP and was detected a linear increase in response to RDP increase with 20 % of GC. The fast (A) and slow (D) degradation maximum gas production increased linearly in response to the GC inclusion, with ISP, and quadratic with urea. The A degradation rate responded in a quadratic manner by GC supplementation and the D degradation rate was greater with urea. The A lag-time increased linearly in response to GC inclusion and in the D lag-time, was observed a quadratic response. With the exception of lag-times, was not possible to detect negative effects of the GC supplementation and, in the majority of the times, its utilization in moderate levels was positive. The protein supplementation associated to the energy was benefit in some studied parameters. The urea was better in GC moderate levels and in the fiber degradation than the ISP.

Submitted by Emanoel Martins Filho (emanoelfilho@ufba.br) on 2016-09-12T18:21:07Z No. of bitstreams: 1 ClaudiaHorne.pdf: 655642 bytes, checksum: 3b6b68ea37677aeb536e98d1524d783e (MD5) / Approved for entry into archive by Patricia Barroso (pbarroso@ufba.br) on 2016-09-13T20:34:02Z (GMT) No. of bitstreams: 1 ClaudiaHorne.pdf: 655642 bytes, checksum: 3b6b68ea37677aeb536e98d1524d783e (MD5) / Made available in DSpace on 2016-09-13T20:34:02Z (GMT). No. of bitstreams: 1 ClaudiaHorne.pdf: 655642 bytes, checksum: 3b6b68ea37677aeb536e98d1524d783e (MD5) / Objetivou-se determinar o melhor nível de inclusão da torta de dendê na dieta de novilhos confinados com base no consumo, comportamento ingestivo, digestibilidade, desempenho e estudo econômico das dietas. Foram utilizados 32 novilhos, não-castrados, com média de 24 meses de idade e peso médio de 420 ± 25 kg. Os animais foram alimentados com feno de Tifton-85 e mistura concentrada composta de milho moído, farelo de soja, premix mineral e torta de dendê (0, 7, 14 e 21% de inclusão na MS total das dietas). Os animais foram confinados por 84 dias e a avaliação da digestibilidade foi realizada durante cinco dias consecutivos, quando foram quantificadas e coletadas amostras das sobras e fezes de cada animal. A cada 28 dias, os animais foram submetidos à observação visual para avaliação do comportamento ingestivo, efetuada através de registro das atividades de alimentação, ruminação e ócio, e posteriormente, mastigações merícicas. A avaliação de desempenho baseou-se nos parâmetros de consumo, GMD e CA. A avaliação econômica consistiu na estimativa das receitas (renda bruta e líquida) e demais características econômicas segundo Nogueira (2007).Os dados foram submetidos à análise de variância e regressão. A inclusão de torta de dendê na dieta dos animais proporcionou redução no consumo de MS, PB, CNF e NDT e aumento no consumo de EE. A digestibilidade da MO decresceu e a digestibilidade do EE aumentou com a inclusão da torta de dendê na dieta. O tempo de mastigação/bolo apresentou comportamento quadrático positivo com a inclusão da torta. A EIMS, ERUMS, ERUFDN diminuíram com o aumento dos níveis de dendê. O ganho médio diário diminuiu e a conversão alimentar não foi influenciada pelas dietas. Os custos com alimentação diminuíram com a inclusão da torta, assim como a renda bruta. Os parâmetros de lucratividade e relação benefício/custo aumentaram em função dos níveis de torta de dendê. O ponto de nivelamento decresceu à medida que os níveis de dendê aumentaram nas dietas. A taxa de retorno, rentabilidade e renda líquida apresentaram comportamento quadrático positivo para os dois primeiros e positivo para o último. Recomenda-se a inclusão da torta de dendê em até 21% da MS da dieta total de novilhos em terminação. / This experiment was conducted to determine the best inclusion level of palm kernel cake by analysis of feed intake, ingestive behavior, nutrient digestibility, performance and feed costs of young bulls finished in feedlot. 32 young bulls were used, with 420± 25 kg/LW. The animals were fed with Tifton-85 hay and concentrated mix with corn meal, soybean meal, mineral premix and palm kernel cake in 0.0; 7.0; 14.0 and 21.00% inclusion in total DM, those levels constituting the treatments. Feedlot lasted 84 days and digestibility trial took five consecutive days, when orts and feces of each animal were collected and quantified. Every 28 days ingestive behavior was assessed by observation and recording of daily time spent on eating, ruminating and resting. Performance evaluation was based on intake, ADG and feed:gain ratio. Economical evaluation was performed as follows: estimates of gross and net margin and economical characteristics accordingly to Nogueira (2007). CP, NFC and TDN intakes reduced with palm kernel cake inclusion and EE intake increased. Time of ruminating chews/boli had a quadratic behavior. The feeding efficiency, in kg of DM/min and the rumination efficiency, in kg of MS and NDF/min, decreased with the cake inclusion. ADG decreased and feed:gain ratio was not affected by the diets. Feed costs, gross margin and equalization point decreased as the cake was included. Profitability and cost benefit relation increased. Rate of return and net margin had quadratic behaviors, negative and positive, respectively. Palm kernel cake is recommended up to 21% inclusion in total DM of young bulls diets

Submitted by Emanoel Martins Filho (emanoelfilho@ufba.br) on 2016-12-12T15:28:48Z No. of bitstreams: 1 RibeiroRDX_M.pdf: 789270 bytes, checksum: 5172c6b3f9a7b84bc18f162b0f1e5891 (MD5) / Approved for entry into archive by Patricia Barroso (pbarroso@ufba.br) on 2017-02-01T18:44:45Z (GMT) No. of bitstreams: 1 RibeiroRDX_M.pdf: 789270 bytes, checksum: 5172c6b3f9a7b84bc18f162b0f1e5891 (MD5) / Made available in DSpace on 2017-02-01T18:44:45Z (GMT). No. of bitstreams: 1 RibeiroRDX_M.pdf: 789270 bytes, checksum: 5172c6b3f9a7b84bc18f162b0f1e5891 (MD5) / CAPES – Demanda Social CAPES - BOLSA DOUTORADO SANDWICH / Objetivou-se determinar o melhor nível de inclusão de glicerina bruta na dieta de cordeiros mestiços Santa Inês em terminação com base no consumo, digestibilidade, desempenho, comportamento ingestivo, metabólitos sanguíneos, características de carcaça e qualidade da carne dos animais. Foram utilizados 44 ovinos mestiços (SPRD x Santa Inês), não-castrados, vacinados e vermifugados, com média de cinco meses de idade e peso médio de 23,91 ± 3,42 Kg. Os ovinos foram alimentados com feno (Cynodon sp.) e mistura concentrada composta por farelo de milho, farelo de soja, premix mineral e a inclusão, com base na MS, de 0,0; 7,00; 14,00 e 21% de glicerina bruta, esses níveis constituíram os tratamentos. O delineamento estatístico utilizado foi o inteiramente casualizado com 11 repetições e 4 tratamentos. As dietas foram fornecidas duas vezes ao dia (9h e 16h) e ajustadas de modo a garantir 10% de sobras durante os 78 dias de confinamento. O ensaio de digestibilidade ocorreu entre o 42º e 49º dia experimental e, para tal, foram quantificadas e coletadas as sobras e fezes (coleta total) de cada animal durante esse período. A cada período de 26 dias foi realizada uma avaliação do comportamento ingestivo dos animais, por meio de observação constante durante período de 24h. No 60º dia do confinamento coletou-se sangue dos animais para dosagem de metabólitos sanguíneos (ureia, glicose, albumina, globulina, razão albumina:globulina, triglicérides, colesterol, alanina aminotransferase, aspartato aminotransferase e gama glutamil transferase). Ao final do período experimental, os animais foram submetidos a jejum por 24 horas, pesados e em seguida abatidos para determinação das características de carcaça. O músculo Longissimus lumborum foi coletado de cada antímero da carcaça e nele, posteriormente, foram avaliadas as características físico-químicas, instrumentais e sensoriais da carne. Os dados foram submetidos a análise de variância e regressão. A adição de glicerina bruta nas dietas causou redução do consumo e da digestibilidade da MS, do desempenho produtivo dos animais e das eficiências de ingestão e ruminação de MS e FDN. O nível máximo recomendado, com base nestas características, foi o de 4,7 ± 0,7 % e o uso em maior proporção fica condicionado à 15 avaliação econômica criteriosa. Em relação aos metabólitos sanguíneos e aos aspectos estudados de qualidade da carne, não houve efeito da inclusão de glicerina bruta nas dietas dos cordeiros. / This study was conducted to determine the optimal amount of crude glycerin to include in the finishing diet of Santa Inês lambs based on feed intake, performance, nutrient digestibility, serum metabolic profile, carcass characteristics and meat quality. Forty-four lambs, male, dewormed and vaccinated were used, with 23.91 ± 3.42 kg/LW and approximately five-month-old. The animals were fed twice per day with Cynodon sp. hay and concentrated mix with corn meal, soybean meal, mineral premix and crude glycerin in 0.0; 7.00; 14.00 and 21.00% of inclusion in DM basis, those levels constituting the treatments. The experimental design was completely randomized, with four treatments and 11 repetitions. The feedlot lasted 78 days and digestibility trial was between 42th and 49th days. During the digestibility trial, the orts and feces of each animal were quantified and collected. For the evaluation of feeding behavior, single animals were observed every five minutes for 24 h on three days. On the 60th day of the feedlot, blood was collected to quantify serum metabolites (glucose, serum urea, albumin, globulin, albumim:globulin ratio, cholesterol, triglycerides, alanine aminotransferase, aspartate aminotransferase, gamma-glutamyl transferase). In the last day of feedlot, the animals were submitted to feed fasting (24 hours), weighted and slaughtered to carcass characteristics measurement. The physical-chemical, instrumental and sensorial characteristics were evaluated on Longissimus lumborum muscle. Data were evaluated by analysis of regression. The inclusion of crude glycerin in lamb finishing diets caused a decrease in the DM intake and digestibility, and in the animals’ productive performance. The feed and rumination efficiency of DM and NDF were also affected by the inclusion of glycerin. Thus, based on those variables, crude glycerin can be added up to 4.7% ± 0.7 % DM basis. The use of glycerin in larger amounts must be conditioned on an economic evaluation. The serum metabolic profile and meat quality characteristics were not affected by the inclusion of glycerin in the finishing diets of lambs.

Submitted by Nathália Faria da Silva (nathaliafsilva.ufv@gmail.com) on 2017-07-04T19:19:36Z No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 529240 bytes, checksum: d6808f38f3cf0ce92b78e8599b087160 (MD5) / Made available in DSpace on 2017-07-04T19:19:36Z (GMT). No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 529240 bytes, checksum: d6808f38f3cf0ce92b78e8599b087160 (MD5) Previous issue date: 2000-11-03 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / Entre março e julho de 1999, 10 vacas com grau de sangue HPB foram submetidas a um ensaio em switch back de 3 períodos para avaliar o efeito da efetividade física de dietas sobre parâmetros nutricionais, fisiológicos, de desempenho e comportamentais. Os animais foram estabulados no Setor de Bovinocultura da UFV e alimentados com rações totais isonutricionais constituídas de feno de tifton (50,4%) e concentrado à base de milho e soja (49,6%). O feno foi moído em moinho com peneiras de malha 3,2, 4,8, 7,9, 15,9 e 25,4mm e amostras de cada moagem foram submetidas ao separador de partículas Penn State para determinação do perfil de distribuição das partículas da fibra. Foram constituídos 5 tratamentos: T1 – 100% das partículas abaixo de 8 mm; T2 – 76% abaixo de 8 mm e 24% entre 8 e 19 mm; T3 – 36,7% abaixo de 8 mm, 26,6% entre 8 e 19 mm e 36,7% acima de 19 mm; T4 – 32% abaixo de 8 mm, 28% entre 8 e 19 mm e 40% acima de 19 mm; T5 – 26% abaixo de 8 mm, 28% entre 8 e 19 mm e 46% acima de 19 mm. Digestibilidade e tempo médio de retenção foram determinados usando-se as técnicas do FDN indigerível e do cromo mordante, respectivamente. Acidez e ácidos graxos voláteis (AGV) foram determinados em líquido de rúmen coletado via sonda esofagiana. O comportamento alimentar foi avaliado para cada período experimental. Verificou-se que o consumo não foi afetado pela efetividade física da ração, embora tenham sido constatadas diferenças na digestibilidade e no trânsito da digesta, sugerindo que a concentração e a natureza química da fibra, mais do que a forma física, são as principais responsáveis na determinação da ingestão de alimentos. A efetividade física exerceu efeito no trânsito das partículas, observando-se que dietas com maior efetividade física promoveram maior tempo de permanência da digesta no trato gastrointestinal. Da forma como a efetividade física afetou os coeficientes de digestão da matéria seca, da matéria orgânica e da fibra neste trabalho percebe-se a necessidade de mais estudos para melhor compreensão das inter-relações entre processamento dos ingredientes, tamanho das partículas dietéticas e digestibilidade. Alterações constatadas nas concentrações molares e relativas dos AGV frente às diferenças nos níveis de efetividade física suportam a tese de que a natureza física das partículas dietéticas deve ser considerada na avaliação da efetividade das dietas ou de seus ingredientes. A efetividade física da dieta promoveu variações no comportamento alimentar dos animais, com conseqüências no desempenho e na composição do leite. Uma análise conjunta de todos os parâmetros sugere que o processamento dos ingredientes, com redução no tamanho da partícula, deve ser considerado criteriosamente, já que respostas mais positivas ocorreram quando os animais foram submetidos às dietas de efetividade física intermediária. Os resultados evidenciam que a efetividade física de dietas e de ingredientes, da forma como foram avaliados neste trabalho, é um processo relativamente fácil de ser determinado e pode ser empregado na análise de qualquer tipo de dieta utilizada para vacas leiteiras. / Between March and July of 1999, 10 Holstein cows with weight between 450 and 650 kg were submitted the an essay in switch back of three consecutive periods to evaluate the physical effectiveness of diets on the food ntake and feed conversion, medium time of retention and digestibility of the diets, ruminal physiologic parameters, production performance and intake behavior. The animals were individually in system tie stall, in the UFV’s Dairy Cattle Section and feeding twice a day with total mixed rations constituted equality nutritional of tifton hay (50.4%) and concentrated ration to the corn and soy based (49.6%). The hay to compose the total diets was ground in commercial miller with sieves mesh of 3.2, 4.8, 7.9, 15.9 and 25.4 mm and samples of each grinding were submitted to of Particles Separator Model Penn State for determination of distribution profile of the fiber particles. Than, were constituted five treatments: T1 – 100% of the particles below 8 mm; T2 – 76% below 8 mm and 24% between 8 and 19 mm; T3 – xvii36.7% below 8 mm, 26.6% between 8 and 19 mm and 36.7% above 19 mm; T4 – 32% below 8 mm, 28% between 8 and 19 mm and 40% above 19 mm; T5 – 26% below 8 mm, 28% between 8 and 19 mm and 46% above 19 mm. Digestibility of the diets was determined by using FDN unavailable and the medium time of retention, the chrome mordant as indicators, respectively. Acidity and analyses of volatile fat acids were certain in rumen fluid collected road with esophageal probes. Feeding behavior was evaluated by visual appreciation for 48 uninterrupted hours for each experimental period. When evaluating the results obtained in this work, it was possible to observe that feed intake was not affected by the physical effectiveness, even though differences have been verified in the digestibility and in the traffic of the digesta, supporting the thesis that the concentration and the chemical nature of the dietary fiber, more than the physical form is the primary responsible in the determination of the ingestion of victuals. The physical effectiveness exercised a preponderant effect in the speed of passage of food in the apparatus gastrointestinal of the animals and the magnitude of those effects was enough to affect the digestibility of food and of your components, suggesting that that parameter should be considered when making balanced rations for high production dairy cows. The alterations verified in the molar and relative concentrations of the principal volatile fat acids respect to differences in the levels of physical effectiveness of the diets, support the thesis that the physical nature of the dietary particles can and should be considered as criteria to evaluate the effectiveness of the diets or of your ingredients. The physical effectiveness of the diet promoted substantial variations in the feeding behavior on the animals in test, with consequences in the productive performance and in the milk composition, with economical implications. A global analysis of all the appraised parameters suggests that the food processing of diets reducing in particle size should be carefully considered, since, in a general way, the most positive answers, as the metabolic point of view as the dairy performance, they happened when the animals were submitted to the diets of intermediate physical effectiveness. Finally, the xviiiresults here observed evidence that the physical effectiveness of diets and ingredients, in the way how they were appraised in this work, it is relatively a easy process to be certain and it can be used in the analysis of any diet type used for dairy cows.

Submitted by Nathália Faria da Silva (nathaliafsilva.ufv@gmail.com) on 2017-07-05T14:15:12Z No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 375968 bytes, checksum: fe6ef035d0bba3ccdc8feec975bf147a (MD5) / Made available in DSpace on 2017-07-05T14:15:12Z (GMT). No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 375968 bytes, checksum: fe6ef035d0bba3ccdc8feec975bf147a (MD5) Previous issue date: 2001-12-20 / Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico / Foram conduzidos três experimentos, em áreas do Departamento de Zootecnia da Universidade Federal de Viçosa, objetivando-se avaliar as populações microbianas, a perda de matéria seca (PMS), o pH, a relação nitrogênio amoniacal/Ntotal, os teores de ácidos orgânicos, a composição bromatológica e a digestibilidade “in vitro” da matéria seca (DIVMS) de silagens de milho e sorgo, tratadas ou não com inoculantes microbianos, em diferentes períodos de armazenamento, no primeiro experimento; o consumo e as digestibilidades aparentes total e parcial dos nutrientes, a taxa de passagem, a concentração de amônia e o pH ruminais em bovinos Holandês x Zebu, recebendo dietas contendo silagens de milho e sorgo, tratadas ou não com inoculante microbiano, no segundo experimento; o consumo, o ganho de peso vivo, a conversão alimentar e o rendimento de carcaça, de bovinos Holandês x Zebu, usando-se as mesmas dietas do ensaio anterior, num terceiro experimento. No primeiro experimento, observou-se que os inoculantes microbianos não favoreceram a queda do pH e a relação de N-NH 3 /Ntotal. Contudo, verificaram-se maiores teores de ácido lático nas silagens de milho. Independente do inoculante usado, registraram-se maiores teores de ácido butírico na silagem de sorgo, em relação à de milho. As populações bacterianas quantificadas em plantas de milho e sorgo foram suficientes para garantir uma boa fermentação no silo. Os inoculantes microbianos promoveram reduções nos teores de fibra em detergente neutro (FDN), fibra em detergente ácido (FDA) e celulose, e aumentos na DIVMS das silagens de milho. Estimaram-se valores máximos de DIVMS de 71,14 e 71,67%, para silagens de milho tratadas com Silobac e Maize-All, respectivamente, aos 42,29 e 50,3 dias, após a ensilagem. No segundo experimento, observou-se efeito de silagem para o consumo de carboidratos não fibrosos (CNF), que apresentaram valores médios de 1,97 e 1,44 kg/dia, para bovinos recebendo silagens de milho e sorgo, respectivamente. O consumo dos demais nutrientes e as digestibilidades aparentes totais e ruminais dos nutrientes, o pH e a concentração de amônia ruminal, bem como a taxa de passagem da digesta, não foram influenciadas pelas dietas experimentais. As taxas de passagem foram de 5,12; 4,44; 5,05 e 4,29%h, para dietas contendo silagens de sorgo, sem e com inoculante microbiano e de milho, sem e com inoculante microbiano, respectivamente. No terceiro experimento, observou-se efeito de silagem para os consumos de matéria seca (MS), matéria orgânica (MO), proteína bruta (PB), carboidratos totais (CHOT) e nutrientes digestíveis totais (NDT), enquanto que o consumo de carboidratos não fibrosos (CNF) foi influenciado pela interação silagem x inoculante. Os consumos de extrato etéreo e FDN não foram influenciados pelas dietas. O ganho médio diário de peso vivo e o rendimento de carcaça, com valores médios de 1,1 kg/dia e 49,81%, respectivamente, também não foram influenciados pelas dietas experimentais. Por sua vez, observou-se efeito de silagem, para a conversão alimentar, registrando-se menor valor para a dieta a base de silagem de sorgo. Para a digestibilidade aparente dos nutrientes, detectou-se efeito da interação silagem x inoculante para MS, MO, CHOT e CNF, e de silagem, para PB e FDN. Para a taxa de passagem da digesta, estimou-se valor médio de 5,32%h. / Three experiments were developed in areas of the Animal Science Departament of the Universidade Federal de Viçosa, MG, Brazil with the objective to evaluate the microbial populations, dry matter losses (DML), pH, ammonia nitrogen/Total nitrogen, organic acids, chemical composition, and in vitro dry matter digestibility (IVDMD) of corn and sorghum silages treated or not with microbial inoculants in differents days of ensiling in the first experiment; the voluntary intake, total and partial apparent digestibilities of nutrients, passage rate, and ruminal N-ammonia and pH in of four rumen and abomasum fistulated Holstein x Zebu steers with 485 kg of live weigth fed diets containing corn or sorghum silages treated or not with microbial inoculant, in the second experiment; the voluntary intake, weight gain, feed conversion and carcass yield of Holstein x Zebu steers being used the same diets of the previous experiment, in the third experiment. In the first experiment it was observed that the microbial inoculants did not influence the dropping in pH and N-NH 3 /N-Total ratio. However, higher concentrations of lactic acid were verified in the corn xisilages. Independently of the used inoculants it was observed higher concentration of butiric acid in the sorghum silages than in corn silages. The bacterial populations quantified in corn and sorghum plants were enough to guarantee a good fermentation in the silos. The microbial inoculants promoted reductions in the neutral detergent fiber (NDF), acid detergent fiber (ADF), cellulose and increases in IVDMD of corn silages. Maximum values of IVDMD of 71.14 and 71.67% were quantified for corn silages treated with Silobac and Maize-All, respectively, at the 42.29 and 50.3 days of ensiling. In the second experiment it was observed the silage effect for intake of non fiber carbohydrates (NFC), with mean values of 1.97 and 1.44 kg/day, for bovines fed corn and sorghum silages, respectively. The intake of the all other nutrients and the total and ruminal apparent digestibilities of nutrients, the ruminal pH and ammonia concentration, as well as solids passage rate were not influenced by the experimental diets. The solids passage rates were of 5.12, 4.44, 5.05 and 4.09 %/hour for diets containing sorghum silage without and with microbial inoculant and corn silage without and with microbial inoculant, respectively. In the third experiment it was observed silage effect for dry matter (DM), organic matter (OM), crude protein (CP), total carbohydrates (TC) and total digestible nutrients (TDN) intakes, while non fiber carbohydrates (NFC) intake was influenced by the interaction silage vs inoculant the ethereal extract and NDF intakes were not influenced by the experimental diets. The weight gain and carcass yield showed mean values of 1.1 kg/day and 49.81%, respectively, without dietary effects. The feed conversion was higher for the diet with sorghum silage than with corn silage. For the apparent digestibility of the nutrients there was interaction between silage and inoculant for DM, OM, TC and NFC and silage main effect for CP and NDF. For the solids passage rate it was estimated a mean value of 5.32%/hour.

Submitted by Nathália Faria da Silva (nathaliafsilva.ufv@gmail.com) on 2017-07-10T14:25:31Z No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 1131473 bytes, checksum: f18ed7bd141211508a6832bb018e1380 (MD5) / Made available in DSpace on 2017-07-10T14:25:31Z (GMT). No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 1131473 bytes, checksum: f18ed7bd141211508a6832bb018e1380 (MD5) Previous issue date: 2003-07-31 / Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico / Dois experimentos foram realizados a fim de avaliar o efeito da adição de complexo multienzimático em dietas com diferentes sojas extrusadas sobre a digestibilidade aparente da matéria seca (MS), proteína bruta (PB), energia bruta (EB), gordura, Fibra em detergente ácido (FDA), Fibra em detergente neutro (FDN) e hemicelulose; valores de energia digestível ileal parente (EDIap), valores de energia metabolizável aparente (EMA) e o desempenho de pintos de corte. As dietas foram formuladas com 20,8% de PB e 3.150 Kcal de EMA. Com níveis sub ótimos de proteína, de lisina e de metionina + cistina para facilitar a detecção de diferenças no valor nutritivo dos tratamentos. O complexo multienzimático (Allzyme Vegpro) era composto de celulase, amilase e protease, sendo usado 500 mL/ton de dieta, de acordo com as recomendações da indústria. Os tratamentos foram: dieta com soja extrusada subprocessada (91% de solubilidade e 0,5 de urease) sem e com VEGPRO; dieta com soja extrusada processamento normal (88% de solubilidade e 0,05 de urease) sem e com VEGPRO; dieta com soja extrusada superprocessada (66% de solubilidade e 0,0005 de urease) sem e com VEGPRO. No primeiro experimento foram utilizados 960 pintos de corte, machos, Avian Farms, de 1 a 21 dias de idade. Em arranjo fatorial 3 x 2 (soja extrusada × complexo multienzimático - CM), num total de seis tratamentos e oito repetições de 20 aves por unidade experimental. As aves alimentadas com dietas contendo soja extrusada (SE), com processamento normal, apresentaram melhor desempenho quando comparadas com as aves que receberam SE sub e superprocessadas. No entanto, as aves alimentadas com dietas contendo SE sub ou superprocessada apresentaram desempenhos similares, demonstrando que o processamento recebido pela soja integral influencia no desempenho das aves. A adição de Vegpro nas dietas, independente do tipo de soja, melhorou o ganho e a conversão dos pintos de corte em 3,8% e 4,24%, respectivamente. Sendo o maior efeito no desempenho das aves alimentadas com SE subprocessada, com 4,64 e 5,0% no ganho e conversão, respectivamente. Indicando que os fatores antinutricionais foram reduzidos. No segundo experimento foram utilizados 288 pintos de corte, machos, Avian Farms, com oito dias de idade, em arranjo fatorial 3 x 2 (soja extrusada × complexo multienzimático), num total de seis tratamentos com oito repetições de 6 aves por unidade experimental. As excretas foram coletas durante cinco dias para determinação da EMA e no ultimo as aves foram abatidas para a obtenção da digesta. A adição de Vegpro promoveu aumento médio dos coeficientes de digestibilidade ileal aparente da MS, da PB, da EB e da gordura das dietas de 4,8%, 1,3%, 4,8% e 6%, respectivamente. Entretanto, os maiores aumentos da digestibilidade ileal, provocados pelo CM, foram obtidos com as dietas contendo SE subprocessada, 10,7% (MS), 4,2% (PB), 11,4%, (EB) e 17,55% (gordura). A adição de Vegpro melhorou a digestibilidade ileal do FDN, FDA e hemicelulose em média, 10,60; 23,05 e 6,39%, respectivamente e os valores da EDI ap em 4,95% e da EMA em 2,69%. / Two experiments were accomplished in order to evaluate the effect of the addition of multienzimatic complex in diets with different types of extruded soybeans on the apparent digestibility of dry matter (DM), crude protein (PB), gross energy (GE), fat, acid detergent fiber (ADF), neutral detergent fiber (NDF) and hemicellulose; ileal apparent digestible energy (IDEap), apparent metabolizable energy (MEap) and the performance of broiler chicks. Diets were formulated with 20.8% CP and 3.150 Kcal of MEap and with sub optimum levels of protein, of lysine and of methionine + cystine to facilitate the detection of differences in the nutritional value of the treatments. The multienzimatic complex (Allzyme Vegpro) was composed by cellulase, amylase and protease and it was used as 500 mL/ton of the diet, in agreement with the recommendations of the industry. Treatments was as following: diet with extruded soybean, sub processing, (91% of solubility and 0.5 of urease) with and without VEGPRO; diet with extruded soybean, standard processing, (88% of solubility and 0.05 of urease) with and without VEGPRO; diet with extruded soybean, super processing, (66% of solubility and 0.0005 of urease) with and without VEGPRO. In the first experiment, 960 Avian Farms male broiler chicks were used, from 01 to 21 days of age, in 3 x 2 factorial arrangement (extruded soybean, multienzimatic complex), in a total of six treatments and eight replications of 20 birds per experimental unit. Birds fed with diets of extruded soybean, with standard processing, showed better performance when compared with the birds that were fed with extruded soybean, sub and super processing. However, the birds fed with diets of xiextruded soybean, sub or super processing, showed similar performances, demonstrating that the processing of the whole soybean influenced on the performance of the birds. The addition of Vegpro in the diets, independent of the type of the extruded soybean, improved the weight gain and the feed: gain ratio of the broiler chicks by 3.8% and 4.24%, respectively. And, the largest effect on the performance of the birds fed with extruded soybean, sub processing, with improvement of 4.64 and 5.3% in the weight gain and feed: gain ratio, respectively. In the second experiment, 288 Avian Farms males broiler chicks were used, from with 01 to 19 days of age, in 3 x 2 factorial arrangement (extruded soybean, multienzimatic complex), in a total of six treatments with eight replications of 6 birds for experimental unit. Birds were ground rearing for eight days, battery rearing form ten days (five days of adaptation and five days for excretes collection) for the determination of MEap and in the last day the birds were slaughtered to obtain the digesta and posterior determination of ileal digestibility coefficients. Addition of multienzimatic complex Vegpro promoted an average increase of the ileal apparent digestibility coefficients of DM, CP, GE and fat of the diets by 4.8%, 1.3%, 4.8% and 6%, respectively. However, the largest increases of the ileal digestibility were obtained with the diets with extruded soybean, sub processing, 10.7% (DM), 4.2% (CP), 11.4%, (GE) and 17.55% (fat). Addition of multienzimatic complex Vegpro also improved the average of ileal digestibility of NDF, ADF and hemicellulose, 10.60; 23.05 and 6.39%, respectively and IDEap by 4.95% and MEap by 2.69%.

Submitted by Marco Antônio de Ramos Chagas (mchagas@ufv.br) on 2017-11-14T12:59:59Z No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 3045284 bytes, checksum: 75fae3d40e3e0a912a8276323170df28 (MD5) / Made available in DSpace on 2017-11-14T12:59:59Z (GMT). No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 3045284 bytes, checksum: 75fae3d40e3e0a912a8276323170df28 (MD5) Previous issue date: 2017-02-22 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / Ao nascimento, os bezerros exibem um trato gastrointestinal subdesenvolvido (TGI) cuja maturação é estritamente relacionada à colonização da microbiota. No entanto, pouco se sabe sobre os fatores que afetam o estabelecimento de comunidades de archaeas, bacterias e de fungos anaeróbicos no TGI dos bezerros, bem como as mudanças na estrutura e abundância desses grupos microbianos durante o período de transição da fase de pré-ruminante para verdadeiro ruminante. Para abordar essas lacunas no conhecimento, este trabalho empregou sequenciamento de próxima geração para caracterizar a microbiota do TGI de bezerros leiteiros mestiços (Holandês-Gir) durante o período pré-desmame. O primeiro estudo avaliou mudanças nas comunidades de archaeas metanogênicas, bacterias e fungos anaeróbicos no rúmen de bezerros leiteiros (n = 45) alimentados com duas dietas diferentes (M: somente leite cru (10% do peso vivo (PV)) e MC: leite cru (10% PV e concentrado ad libitum) e que foram abatidos aos 7, 28, 49, 63 dias de idade. No segundo estudo, caracterizamos as alterações nas comunidades bacterianas entre regiões GIT (rúmen, jejuno, ceco e cólon) de bezerros alimentados com MC (n = 17) que foram abatidos aos 7, 28, 49, 63 dias de idade. Os resultados do primeiro estudo revelaram que as comunidades de archaeas metanogênicas, bacterias e fungos coexistem no rúmen desde a primeira semana de vida, mas são afetadas diferentemente pela dieta e idade. A inclusão de concentrado na dieta de bezerros afetou significativamente a comunidade bacteriana do rúmen: observou-se um aumento na abundância de gêneros relacionados, direta e indiretamente, à degradação de amido (i.e. Megasphaera, Sharpea e Succinivribrio) e um decréscimo acentuado na abundancia de gêneros (i.e. Lactobacillus, Bacteroides e Parabacteroides) relacionados com a degradação de nutrientes do leite. Alterações na comunidade bacteriana, indiretamente afetaram a comunidade de metanogênicas: fermentação de carboidratos não fibrosos alterou padrões de fermentação (acetato:propionato) e disponibilidade de hidrogênio que por sua vez, favoreceu a colonização de Methanosphaera em vez de Methanobrevibacter. Na comunidade de fungos anaeróbicos, a abundância do genêro Caecomyces e família Neocallimastigaceae não variou significativamente com a dieta ou idade, provavelmente devido à alta variação inter-animal e baixo teor de fibra de concentrado usado em nosso estudo. In suma, este estudo mostrou que a manipulação da microbiota no rúmen em desenvolvimento é possível através da intervenção dietética. Nossos resultados podem ser úteis na elaboração de estratégias para promover a colonização de comunidades-alvo (isto é, produtores de butirato e utilizadoras de lactato) que estão ligadas ao desenvolvimento de papilas e equilíbrio do pH ruminal. Em relação ao segundo estudo, as comunidades bacterianas diferem qualitativa e quantitativamente entre os compartimentos (rúmen, jejuno, cécum e colón) do trato gastrointestinal e também respondem diferentemente ao avanço da idade que inclui a substituição progressiva da dieta líquida para a dieta sólida (i.e. aumento do consumo de concentrado). No rúmen, a comunidade bacteriana foi composta em sua maioria pelos gêneros Prevotella, Butyrivibrio e Ruminococcus cuja abundância aumentou proporcionalmente com a idade devido a maior disponibilidade de carboidratos não fibrosos no rúmen. No jejuno, o gênero Lactobacillus foi abundante desde a primeira semana de vida, mas sua dominância foi substituída por membros da família Clostridiaceae em bezerros mais velhos. As comunidades do ceco e do cólon foram compostas pelos gêneros Blautia, Paraprevotella, Prevotella Phascolarctobacterium and Succiniclasticum cuja abundância aumentou com a idade. Em resumo, nossos resultados mostraram que, embora comunidades bacterianas coexistam em regiões distintas do TGI, uma análise mais detalhada da estrutura, abundância e dinâmica dessas comunidades revela uma marcante segregação e sucessão ecológica no TGI de bezerros. Nosso estudo acrescenta novos insights sobre a colonização bacteriana no TGI de pré-ruminantes que podem servir como base para formulação de estratégias para promover a colonização de comunidades-alvo (i.e. bactérias probióticas) para melhorar a saúde e desempenho de bezerros leiteiros no período pré-desmame. / At birth, calves display an underdeveloped gastrointestinal tract (GIT) whose maturation is strictly related to microbiota colonization. However, little is known about the factors that affect the establishment of archaeal, bacterial and fungal communities in the GIT of calves, as well as the changes in their structure and abundance during calf development into a functional ruminant. To address these gaps in knowledge, this work employed next-generation sequencing to characterize the GIT microbiota of Holstein- Gyr crossbred dairy calves across pre-weaning development. The first study aimed to assess changes on the rumen archaeal, bacterial and fungal communities of crossbred dairy calves (n=45) across pre-weaning development (7, 28, 49, 63 days) on two different diets (M: only raw milk at 10% of body weight at birth (BW) and MC: raw milk (10% BW) plus starter concentrate ad libitum). In the second study, we characterized changes in the bacterial communities across GIT regions (rumen, jejunum, cecum and colon) of MC-fed calves (n=17) at 7, 28, 49, 63 days of age. The results of first study revealed that archaeal, bacterial and fungal communities co-occur in the rumen since early calf development but are impacted differently by pre-weaning diet and age. The inclusion of starter concentrate in the calf diet significantly affected rumen bacterial community by promoting increases of genera, direct and indirectly, related to degradation of readily fermentable carbohydrates (i.e. Megasphaera, Sharpea and Succinivribrio) and depressing those reliant on milk nutrients like lactose (i.e. Lactobacillus, Bacteroides and Parabacteroides). These bacterial changes resulted in apparent diet-driven archaeal differences due to altered fermentation patterns and availability of hydrogen in the rumen that favoured the colonization of members from genus Methanosphaera instead of Methanobrevibacter. No such differences were found for fungi community represented by members from genus Caecomyces and family Neocallimastigaceae, likely due to high inter-animal variation and low fibre content of concentrate used our study. Altogether, this study showed that manipulation of the microbiota in the developing rumen is possible through dietary intervention. Our results may be useful in designing strategies to promote colonization of target communities (i.e. butyrate- producers and lactate-utilizing) linked to functional development of the calf. In regards to second study, bacterial communities in the calf GIT differ qualitatively and quantitatively among compartments and respond differently to age advance that encompass the GIT development (i.e. rumen) and progressive replacement of milk- based to grain-diet (i.e. increase of starter concentrate intake). In the rumen, bacterial community was composed majority by members from genera Prevotella, Butyrivibrio and Ruminococcus whose abundance increased proportionally with age possibly due greater availability of readily fermentable carbohydrates in the rumen. Members from genus Lactobacillus were overrepresented in the jejunum but their predominance was replaced by members from Clostridiaceae family in older calves. The cecum and colon displayed similar abundance at taxa level and the abundance of genera Blautia, Paraprevotella, Prevotella, Phascolarctobacterium and Succiniclasticum increased significantly with age. In summary, our results showed that although there are bacterial communities “common” to distinct regions, a closer look at their structure, abundance and dynamic reveals marked segregation and ecological succession in the calf GIT. Our study adds new insights into bacterial colonization across GIT of pre-ruminant that may be considered in formulating strategies to promote the colonization of target communities aiming improve health (i.e. bacteria with probiotic capability) and performance of dairy calves in the pre-weaning period.

Submitted by Reginaldo Soares de Freitas (reginaldo.freitas@ufv.br) on 2017-11-17T11:32:42Z No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 789889 bytes, checksum: 39db07b357fd431efdb9fb78a2134f4f (MD5) / Made available in DSpace on 2017-11-17T11:32:42Z (GMT). No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 789889 bytes, checksum: 39db07b357fd431efdb9fb78a2134f4f (MD5) Previous issue date: 2017-07-20 / Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico / Objetivou-se avaliar a variabilidade entre animais com relação à taxa de degradação da fração insolúvel potencialmente degradável da matéria seca (MS), proteína bruta (PB) e fibra em detergente neutro (FDN) e estabelecer o número mínimo de animais e um perfil padronizado de tempos de incubação para ensaios de degradação ruminal in situ com bovinos para alimentos produzidos em condições tropicais. Foram avaliadas três forragens e quatro concentrados, respectivamente: cana-de-açúcar in natura, silagem de milho, feno de capim Tifton 85, farelo de soja, milho grão, casca de soja e farelo de algodão. Foram utilizadas cinco novilhas Nelore, com peso corporal inicial médio de 328±9,8 kg, fistuladas no rúmen, alimentadas ad libitum com dieta basal composta por feno de capim Tifton 85 e concentrado comercial, com relação volumoso:concentrado de 80:20 com base na MS. Foram conduzidas sequencialmente três baterias de incubação, nas quais foram avaliados os alimentos de acordo com a seguinte disposição: bateria 1 – cana-de-açúcar, silagem de milho e feno de Tifton 85; bateria 2 – farelo de soja e milho grão; e bateria 3 – farelo de algodão e casca de soja. Em cada bateria todos os alimentos foram incubados em todos os animais. Os sacos para incubação foram confeccionados em tecido náilon (porosidade 50 μm). Os alimentos foram processados em moinho de facas com peneira de porosidade 2 mm e acondicionados nos sacos na proporção de 20 mg de MS por cm 2 de superfície. Os tempos de incubação utilizados foram: 0, 3, 6, 9, 12, 18, 24, 30, 36, 48, 72, 96, 120, 144, 168 e 240 horas, para as amostras de forragem; e 0, 3, 6, 12, 18, 24, 30, 36, 48, 72, 96, 120 e 144 horas, para amostras de concentrado. Os resíduos da incubação das amostras de forragem foram analisados quanto aos teores de MS e FDN e os resíduos de incubação das amostras de concentrado foram analisados quanto teores de MS e PB. Os perfis de degradação foram interpretados por modelos não lineares fixos ou mistos, nos quais considerou-se a influência aleatória de animais sobre a taxa de degradação da fração insolúvel potencialmente degradável. Posteriormente, os modelos foram ajustados considerando- se todas as combinações possíveis dos animais experimentais em grupos de quatro, três e dois animais, buscando-se verificar qual o número mínimo de animais a serem utilizados para ensaios de incubação in situ. Os perfis foram comparados no tocante ao comportamento das estimativas das taxas de degradação e das variâncias entre animais sobre a taxa de degradação e variância residual, utilizando-se como referência o ajustamento com todos os animais (n = 5). Posteriormente, modelos foram ajustados aos dados de degradação para cada alimento e cada componente em sua forma completa (com todos os tempos de incubação) e sob diferentes formas reduzidas (diferentes combinações de tempos) de forma a definir o número mínimo e o posicionamento dos pontos para que os perfis sejam ajustados sem comprometimentos da exatidão e precisão das estimativas dos parâmetros dos modelos. As análises estatísticas foram realizadas por intermédio dos procedimentos NLIN e NLMIXED do SAS 9.4. O ajustamento por modelo fixo ou misto conduziu a estimativas similares (P>0,34) das taxas de degradação. Contudo com a consideração da variação aleatória entre animais sobre a taxa de degradação, verificou-se redução da variância residual sobre as frações degradadas da MS e PB ou frações não degradadas da FDN variando de 11,9 a 46,7%. A variação no número de animais não afetou drasticamente as estimativas médias de taxa de degradação, variância entre animais sobre a taxa de degradação e variância residual, porém o que se observou foi que com menor número de animais, ampliou-se a dispersão das estimativas das características avaliadas, com a observação de valores com grande afastamento das estimativas médias considerando-se todas as possíveis combinações entre animais. A utilização de três animais é recomendada pela minimização do risco da influência de efeitos aleatórios extremos de animal sobre a taxa de degradação. O esquema de mínimo de incubação sugerido para estudos de degradação da MS e da PB de concentrados deve se basear nos tempos: 0, 3, 6, 12, 24, 30, 48, 72 e 96 horas. Para o estudo da degradação da MS de forragens, os tempos de incubação sugeridos são: 0, 3, 6, 12, 24, 30, 48, 72 e 120 horas. A avaliação do perfil de degradação da FDN de forragens deve seguir os tempos de incubação obtidos para o estudo da degradação da MS, acrescido do tempo 240 horas. / The aim of this work was to evaluate the variability among animals with regard the degradation rate of the potentially degradable insoluble fraction of dry matter (DM), crude protein (CP), and neutral detergent fiber (NDF) and to establish the minimum number of animals as well as to provide a standardized profile of incubation times for ruminal in situ degradation assays with cattle for feeds produced in the tropics. Seven feeds were evaluated, being three forages – sugarcane, corn silage, and Tifton 85 hay – and four concentrates – soybean meal, ground corn, soybean hulls, and cottonseed meal. Five ruminally cannulated Nellore heifers, averaging 328±9.82 kg of with mean initial body weight, had ad libitum access to a basal diet composed by Tifton 85 hay and commercial concentrate in a ratio of 80:20 on DM basis. The samples were arranged into three sequential groups for incubation: group 1 – sugarcane, corn silage, and Tifton 85 hay; group 2 – soybean meal and ground corn; group 3 – soybean hulls and cottonseed meal. In each group, all samples were incubated into all animals. Nylon bags (50-μm porosity) were individually identified and used in this study. The feeds were ground in a knife mill to pass through a 2-mm screen sieve and placed into the nylon bags (20 mg DM per cm2 of surface). The incubation times were: 0, 3, 6, 9, 12, 18, 24, 30, 36, 48, 72, 96, 120, 144, 168, and 240 h for forage samples; and 0, 3, 6, 12, 18, 24, 30, 36, 48, 72, 96, 120, and 144 h for concentrates samples. The incubation residues of forages were analyzed with regard DM and NDF contents whereas the incubation residues of concentrates were analyzed regarding DM and CP contents. The degradation profiles were interpreted by using fixed or mixed nonlinear models, where the random influence of animals on the degradation rate of potentially degradable insoluble fraction was considered. Additionally, models were adjusted considering all possible combinations of experimental animals using groups of four, three, and two animals aiming to verify the minimal number of animals to be used for in situ incubation assays. The profiles were compared regarding the estimates of degradation rates, variances among animals on the degradation rate, and residual variance by using as reference the adjustment with all animals (n = 5). Moreover, models were adjusted to data of degradation for each feed and each component using all incubation time and different reduced schemes (different combination of incubation times) aiming to define the minimal number and disposition of incubation times to adjust profiles without compromising accuracy and precision of the estimates of the model parameters. Statistical analyses were performed by using the NLIN and NLMIXED procedures of SAS 9.4. The adjustment by fixed or mixed models led to similar estimates (P>0.34) of degradation rates. However, considering the random variation among animals on the degradation rate, there was a decreasing of the residual variance on the DM and CP degraded fractions or NDF undegraded fractions ranging from 11.9 to 46.7%. The variation in the number of animals did not drastically affect the average estimates of degradation rates, variance among animals on the degradation rate, and residual variance. However, it was observed that smaller number of animals increased the dispersion of the estimates of the characteristics, with the observation of values with great deviations from the average estimates obtained considering all possible combinations among animals. The use of three animals is recommended by minimizing the risk of the influence of extreme random animal effects on the degradation rate. The minimal incubation scheme suggested for the degradation studies of DM and CP of concentrates is based on the times: and 0, 3, 6, 12, 24, 30, 48, 72, and 96 h. For the degradations studies of forages, the suggested incubation times are: 0, 3, 6, 12, 24, 30, 48, 72, and 120 h. The evaluation of degradation profiles of the NDF of forage should follow the incubation times recommended for the study of DM degradation, including an incubation point at 240 hours.

AGUIAR, Valéria Cavalcanti de. Aspectos bioquímicos, toxicológicos e alergênicos do látex da planta Calotropis procera (Ait.) R. BR. 2006. 182 f. Tese (Doutorado em bioquímica)- Universidade Federal do Ceará, Fortaleza-CE, 2006. / Submitted by Elineudson Ribeiro (elineudsonr@gmail.com) on 2016-07-28T14:13:28Z No. of bitstreams: 1 2006_tese_vcaguiar.pdf: 2761351 bytes, checksum: d8feb2c818b400fccdafa1af61997ce7 (MD5) / Approved for entry into archive by José Jairo Viana de Sousa (jairo@ufc.br) on 2016-08-02T14:46:08Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2006_tese_vcaguiar.pdf: 2761351 bytes, checksum: d8feb2c818b400fccdafa1af61997ce7 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-08-02T14:46:08Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2006_tese_vcaguiar.pdf: 2761351 bytes, checksum: d8feb2c818b400fccdafa1af61997ce7 (MD5) Previous issue date: 2006 / The latex of the lactiferous plant Calotropis procera (Ait.) R. Br. is an important biologically active compound that displays relevant properties like antiinflammatory and antidiarrhea activities, although the latex has previously been shown to produce considerable toxic effects on animals. Another question is that it is not known yet whether the latex proteins from C. procera induce allergenic effects, just like the latex proteins from Hevea brasiliensis. The potential of the latex as a pharmaceutical, therefore, depends on separating the curative properties from the toxic and allergenic properties, but there has been a lack of scientific investigation in this area. The objective of the present study was to investigate biochemical, toxicological and allergenic aspects of the latex from the plant C. procera, through the study of in vitro and in vivo digestibility, evaluation of acute and subchronic toxicity by oral route, and analysis of immune response induction by subcutaneous and oral route of its fractions. The latex was fractionated into three distinct fractions according to their water solubility and molecular size. The fractions were named as: latex proteins (LP), corresponding to the major latex proteins; dialysis proteins (DP), representing low molecular size substances; and rubber latex (RL), which was highly insoluble in water. LP fraction was investigated in some biochemical aspects, like its protein profile by SDS-PAGE analysis and its amino acid composition determination. Latex proteins were also subjected to in vitro digestion with trypsin, chemotrypsin, pepsin and Streptomyces griseus protease and in vitro digestibility was evaluated by gel filtration and SDS-PAGE analysis. The in vivo digestibility of LP was analyzed when experimental animals ingested this fraction for 35 days. The volume uptake of LP was recorded daily and samples of fecal material from animals were collected, treated and submitted to SDS-PAGE analysis and radial double immunodifusion assays, with polyclonal antibodies raised against LP. In relation to toxicological aspects, LP fraction was orally administered to experimental animals for 35 days, to allow subchronic toxicity evaluation. Increases in body mass were recorded and blood samples were analyzed weekly. After the test period, the animals were sacrificed and a number of biochemical and physiological parameters determined. These included sera determinations of blood glucose, total cholesterol, HDL-cholesterol, triglycerides, hepatic function tests (total proteins, albumin, alanine aminotransferase – ALT and aspartate aminotransferase – AST), renal function tests (urea and creatinin), total and differential leukocyte counts in blood and peritoneal fluid and analysis of sera proteins by SDS-PAGE. Animals had internal key organs (liver, kidneys, spleen, small intestine, large intestine, pancreas and stomach) dissected and the relative fresh masses were determined. In the acute toxicity evaluation, LP fraction was administered by oral route to experimental animals and behavioral changes in animals were also monitored. With reference to allergenic aspects, immunological responses of latex from C. procera were investigated by oral and subcutaneous routes in mice. Anti-sera against LP, DP and RL fractions were assayed for IgG and IgA titration by ELISA, while IgE and IgG1 were accessed by passive cutaneous anaphylaxis (PCA) in rats and mice, respectively. Protein profiles of LP and RL fractions were analyzed by SDS-PAGE. Concerning biochemical aspects results, LP fraction possesses appreciable amount of protein, low content of sulphurated amino acids (methionine and cysteine) and a considerable number of amino acids (arginine, lysine, phenylalanine and tyrosine) that represent cleavage sites to animal proteolytic enzymes studied. LP fraction was digested by the action of pepsin, trypsin and chemotrypsin as revealed by gel filtration and SDS-PAGE analyses. The full LP digestion was easily achieved by S. griseus protease treatment. Rabbit polyclonal antibodies raised against LP failed to detect cross-reactive molecules in faeces of experimental rats. Similar patterns of electrophoresis were observed for the negligible amounts of protein observed in the fecal materials of control and test animals. With relation to subchronic toxicity evaluation results, no death was observed during the experiment. Experimental and control animals presented similar growth rate and key organs exhibited similar relative fresh masses. Hepatic and renal functions, sera glycemic and lipidemic parameters were determined to be at normal levels. Likewise, the electrophoretic protein patterns of sera from untreated and treated animals exhibited quite similar profiles. Uptake of latex proteins did not induce acute inflammation into peritoneal cavity of rats as determined by the total and differential leukocytes counts. The most relevant result discovered was an apparent proliferative effect of the latex proteins upon blood lymphocytes that tended to increase, whilst neutrophils remained at normal level. It should be emphasized that the experimental rats were normal in their behavior, morphological and biochemical aspects, indicating that it is unlikely that they were under any pathological or infectious condition. Therefore, the increment of lymphocytes population in the blood serum should be attributed to the staking effect of the latex proteins rather than any harmful event. LP fraction was unable of presenting acute toxicity in experimental animals, because no behavioral changes in animals were observed. Concerning allergenic aspects results, none of the fractions induced antibodies level increases when mice received latex fractions by oral route and thus, did not develop allergy. Nonetheless, anti-sera of mice sensitized with LP and RL by subcutaneous administration displayed considerable immunological response, while DP did not induce antibodies synthesis. IgG level augmented consistently against LP and RL, while IgA response was detected to LP solely. LP and RL induced very strong PCA reactions suggesting that both fractions would contain latex substances involved in allergenicity. Furthermore, protein analysis of LP and RL suggests that RL still retain residual proteins, co-precipitated with rubber, abundantly found in LP, that could explain its similar allergenicity. No IgG1 reaction was detected in any of the anti-sera tested. It can be concluded that latex proteins were partially susceptible to digestive proteolysis when accessed by in vitro assays, and were digested and absorbed, or were absorbed in its intact form, when ingested and analyzed by in vivo tests. Toxic events or lethality associated with latex, as described in the literature, are not related to LP fraction. Latex proteins produced partial proliferative effect upon mononuclear cells, mainly lymphocytes and did not induce an acute inflammatory response, when administered by oral route. Allergenic effects could be detected, by subcutaneous route, with LP and RL fractions, and were not observed by oral route. Evidences for an inducible tolerance acquired to latex proteins by oral route were provided. Latex proteins may act as immune stimulants. The proteins from the latex remain an interesting source of biologically active molecules that should be studied in detail for their structural, functional and applicative properties. / O látex da planta lactífera Calotropis procera (Ait.) R. Br. é um composto biologicamente ativo importante que apresenta propriedades relevantes como as atividades antiinflamatória e antidiarréica, embora já tenha sido previamente mostrado que esse látex produz efeitos tóxicos consideráveis em animais. Um outro fato é que não é sabido, ainda, se as proteínas do látex de C. procera produzem efeitos alergênicos, assim como as proteínas do látex de Hevea brasiliensis. O potencial do látex como um fármaco, por essa razão, depende da separação das propriedades curativas das propriedades tóxicas e alergênicas, mas não existe investigação científica nessa área. O presente estudo teve como objetivo investigar aspectos bioquímicos, toxicológicos e alergênicos do látex da planta C. procera, através do estudo da digestibilidade in vitro e in vivo, avaliação da toxicidade subcrônica e aguda por via oral e análise da indução de resposta imune pelas vias subcutânea e oral das suas frações. O látex foi fracionado em três frações distintas de acordo com a sua solubilidade em água e tamanho molecular. As frações foram assim denominadas: proteínas do látex (PL), correspondendo às principais proteínas do látex; proteínas da diálise (PD), representando as substâncias de baixa massa molecular; e borracha do látex (BL) que é altamente insolúvel em água. A fração PL foi investigada, com relação a alguns aspectos bioquímicos, como seu perfil protéico por PAGE-SDS e análise da composição de seus aminoácidos. As proteínas do látex também foram submetidas à digestão in vitro com as enzimas proteolíticas pepsina, tripsina, quimiotripsina e protease de Streptomyces griseus e a digestibilidade in vitro foi avaliada por cromatografia de filtração em gel ou PAGE-SDS. A digestibilidade in vivo de PL foi analisada quando animais experimentais ingeriram essa fração por 35 dias. O volume de PL consumido foi registrado diariamente e amostras das fezes dos animais coletadas, tratadas e submetidas à PAGE-SDS e ensaios de imunodifusão radial dupla de Ouchterlony, com anticorpos policlonais contra PL. Com relação aos aspectos toxicológicos, a fração PL foi oralmente administrada a animais experimentais por 35 dias, para a avaliação da toxicidade subcrônica. Aumentos na massa corpórea foram registrados e amostras sangüíneas foram analisadas semanalmente. Após o período experimental, os animais foram sacrificados e um número de parâmetros bioquímicos e fisiológicos foram determinados. Esses incluíram determinações séricas de glicose sangüínea, colesterol total, HDL-colesterol, triglicerídeos, testes da função hepática (proteínas totais, albumina, alanina aminotransferase – ALT e aspartato aminotransferase – AST), testes da função renal (uréia e creatinina), contagens total e diferencial de leucócitos sangüíneos e do fluido peritonial e análise das proteínas séricas por PAGE-SDS. Os animais tiveram seus órgãos vitais (fígado, rins, baço, intestino delgado, intestino grosso, pâncreas e estômago) dissecados e as massas frescas relativas foram determinadas. Na avaliação da toxicidade aguda, a fração PL foi administrada por via oral a animais experimentais e a monitoração de alterações comportamentais desses animais também foi realizada. Quanto aos aspectos alergênicos, respostas imunológicas do látex de C. procera foram investigadas pelas vias oral e subcutânea em camundongos. Anti-soros contra as frações PL, PD e BL foram analisados quanto a IgG e IgA por ELISA, enquanto IgE e IgG1 foram monitoradas por anafilaxia cutânea passiva (PCA) em ratos e camundongos, respectivamente. Os perfis protéicos das frações PL e BL foram analisados por PAGE-SDS. Com relação aos resultados dos aspectos bioquímicos, a fração PL possui uma quantidade apreciável de proteínas, baixo conteúdo de aminoácidos sulfurados (metionina e cisteína) e um número considerável de aminoácidos (arginina, lisina, fenilalanina e tirosina) que representam sítios de clivagem para as enzimas proteolíticas animais usadas. A fração PL foi digerida pela ação da pepsina, tripsina e quimiotripsina como revelado por análises de filtração em gel e PAGE-SDS. A digestão completa das proteínas do látex foi facilmente obtida pelo tratamento com a protease de S. griseus. Anticorpos policlonais de coelho produzidos contra PL não apresentaram reação cruzada com as moléculas presentes nas fezes dos ratos experimentais. Padrões semelhantes de eletroforese foram observados para as quantidades desprezíveis de proteína observadas nos materiais fecais dos animais controle e experimentais. Quanto aos resultados da avaliação da toxicidade subcrônica, nenhuma morte foi observada durante o experimento. Animais controle e experimentais apresentaram taxa de crescimento semelhante e os órgãos vitais exibiram massas frescas relativas similares. As funções hepática e renal, parâmetros glicêmicos e lipidêmicos séricos situaram-se em níveis normais. Os padrões protéicos eletroforéticos dos soros dos animais controle e experimental exibiram perfis muito similares. A fração PL não induziu inflamação aguda na cavidade peritonial dos ratos, como determinado pelas contagens total e diferencial de leucócitos. O resultado mais relevante detectado foi um aparente efeito proliferativo das proteínas do látex sobre os linfócitos sangüíneos que tenderam a aumentar, enquanto os neutrófilos permaneceram em nível normal. Deve ser enfatizado que os animais experimentais exibiram comportamento, aspectos morfológicos e bioquímicos normais, indicando ser improvável que os mesmos estivessem sob qualquer condição patológica ou infecciosa. Portanto, o incremento da população de linfócitos no soro sangüíneo deve ser atribuído a um efeito notável das proteínas do látex e não a qualquer evento prejudicial. A fração PL foi incapaz de induzir toxicidade aguda, pois nenhuma mudança comportamental foi observada nos animais experimentais. Com relação aos resultados dos aspectos alergênicos, nenhuma das frações induziu aumentos nos níveis de anticorpos, quando os camundongos receberam as frações do látex por via oral e, portanto, não desenvolveram alergia. Entretanto, anti-soros de camundongos sensibilizados com PL e BL por administração subcutânea apresentaram resposta imunológica considerável, e PD não induziu síntese de anticorpos. O nível de IgG aumentou consistentemente contra PL e BL, enquanto a resposta de IgA foi detectada unicamente contra PL. PL e BL induziram reações de PCA muito fortes, sugerindo que ambas as frações contêm substâncias do látex envolvidas na alergenicidade. Além disso, a análise protéica de PL e BL sugere que BL ainda retém proteínas residuais, co-precipitadas com a borracha, abundantemente encontradas na fração PL, que poderiam explicar as alergenicidades semelhantes. Nenhuma reação de IgG1 foi detectada em quaisquer dos anti-soros testados. Conclui-se que as proteínas do látex foram parcialmente susceptíveis à proteólise em ensaios in vitro e, ou foram digeridas e absorvidas, ou foram absorvidas íntegras, quando ingeridas em ensaios in vivo. Eventos tóxicos ou letalidade associados ao látex, como descritos na literatura, não estão relacionados com a fração PL. A fração PL produziu efeito proliferativo parcial sobre as células mononucleadas, principalmente linfócitos e não induziu resposta inflamatória aguda, quando administrada pela via oral. Efeitos alergênicos puderam ser detectados, por via subcutânea, com as frações PL e BL, e não foram observados por via oral. Evidências para uma possível tolerância sistêmica às proteínas do látex por via oral foram fornecidas. As proteínas do látex podem atuar como imunoestimulantes. As proteínas do látex permanecem uma fonte interessante de moléculas biologicamente ativas que devem ser estudadas em detalhe quanto às suas propriedades estruturais, funcionais e aplicativas.