Orientadores: Luis Otávio Zanatta Sarian, Sophie Françoise Mauricette Derchain / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciências Médicas / Made available in DSpace on 2018-11-07T13:36:45Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Toledo_MariaCarolinaSzymanski_M.pdf: 838964 bytes, checksum: 3c546db1a656989db9f433b93287b2d2 (MD5) Previous issue date: 2012 / Resumo: Introdução: o câncer de ovário é comumente diagnosticado em estágios avançados, sendo atualmente a neoplasia ginecológica de maior letalidade. As pesquisas têm direcionado esforços na tentativa de descobrir novos fatores prognósticos e métodos terapêuticos. Muitos trabalhos estudam a expressão dos receptores de esteróides (dentre eles, estrógeno (RE), progesterona (RP) e andrógeno (RA)) e HER2 (receptor estimulador de crescimento epitelial - subtipo 2) como fatores prognósticos e associados à resposta terapêutica, apresentando; entretanto, resultados conflitantes. Até onde conhecemos, não há estudos desta natureza no Brasil. Objetivo: Correlacionar à expressão dos RE, RP, RA e HER2 aos fatores clínico patológicos, ao intervalo livre de doença e à sobrevida nos cânceres epiteliais de ovário. Material e métodos: Este é um estudo observacional de coorte retrospectiva. Foram incluídas 152 mulheres com tumores epiteliais malignos, selecionados através dos prontuários no período de 1993 a 2008, no Centro de Atenção Integral à Saúde da Mulher (CAISM) da Universidade Estadual de Campinas - UNICAMP, São Paulo, Brasil. A avaliação da expressão dos RE [subtipos alfa (RE?) e beta (RE?)], RP, RA e HER2 foram realizadas por imunoistoquímica através da construção de microarranjos de tecidos (TMA). Inicialmente, foi realizada análise uni variada da expressão dos receptores acima quanto à idade, estado menopausal, índice de massa corpórea (IMC), tipo histológico, grau histológico, estadiamento inicial de acordo com a classificação proposta pela FIGO e presença de doença residual pós-tratamento cirúrgico. Em seguida, as pacientes foram divididas em dois grupos: ausência da expressão de RE?, RP e HER2 (triplo negativo) e positividade para pelo menos um desses receptores (não triplo negativo); e, avaliadas em relação aos critérios clínicos e epidemiológicos acima. Foram, então, realizadas análises multivariadas dos padrões de expressão de RE ? e ?, RP, RA, HER2 e triplo negativo em relação a estes mesmos critérios. Por fim, análise de sobrevida multivariada foi realizada utilizando-se todos os padrões de expressão e os fatores clínicos epidemiológicos estudados. Resultados: Nas análises multivariadas, mostraram-se significativas as seguintes associações: do receptor de estrógeno alfa (ER?) com tumores de grau histológico menos diferenciado (p=0.01); do receptor de progesterona (RP) à obesidade (p= 0.01); do receptor de andrógeno (RA) com tumores do subtipo seroso (p= 0.01); do receptor de HER2 com tumores dos graus histológicos II-III (p=0.02); do subgrupo triplo negativo com tumores de grau histológico menos diferenciado (II-III) (p<0.01). Não houve associação do RE? com nenhum dos fatores estudados. Quanto à análise multivariada de sobrevida livre de doença e sobrevida global; dentre os padrões de expressão de receptores, apenas o RE? esteve associado com melhor sobrevida livre de doença (RR=0.39; 95%CI 0.17 -0.90). Conclusões: A expressão do RE? esteve mais significativamente associada a fatores clínicos de pior prognóstico. O RP esteve associado à obesidade. O RA esteve significativamente mais presente nos tumores serosos. A expressão do HER2 e a presença de tumores triplo negativo foram maiores em tumores menos diferenciados. Paradoxalmente; o RE? foi o único receptor a apresentar associação com maior sobrevida livre de doença apesar de sua relação significativa com fatores reconhecidos de pior evolução clínica. Não houve diferença estatística significativa na análise multivariada de sobrevida total e sobrevida livre de doença quanto ao grupo de tumores triplo negativo / Abstract: Introduction: Ovarian cancer is commonly diagnosed in advanced stages and currently is the most lethal gynecological malignancy. Surveys have focused efforts in an attempt to discover new prognostic and therapeutic methods. A plenty of studies investigates the expression of steroid receptors (among them, estrogen (ER), progesterone (PR) and androgen AR)) and HER2 (epidermal growth receptor stimulator - subtype 2) as prognostic factors and associated to therapeutic response, presenting, however, conflicting results. As far as we know, there are no studies of this nature in Brazil. Objective: The aim of this study was to correlate the expression of ER (subtypes ? (ER ?) and ? (ER ?), PR, AR and HER2 to clinical pathological factors, the disease-free survival and overall survival of epithelial ovarian cancers. Methods: This is a retrospective observational cohort study. The study included 152 women with malignant epithelial tumors, selected through the records from 1993 to 2008, in the Centro de Atenção Integral à Saúde da Mulher (CAISM) at the State University of Campinas - UNICAMP, São Paulo, Brazil. The expression of ER (? and ?), PR, AR and HER2 was evaluated by immuno histochemistry through tissue microarray (TMA) technique. Initially, univariate analyses were performed, evaluating the expression of each receptor mentioned above to age, menopausal status, body mass index (BMI), histological type, histological grade, initial staging as preconized by FIGO staging of ovarian tumors and presence of residual disease after surgical treatment. Then, the patients were divided into two groups: absence of the expression of ER?, PR and HER2 (triple negative) and positive for at least one of these receptors (not triple negative), and evaluated in relation to the clinical and epidemiological criteria mentioned above. Multivariate analyzes were performed with ER ?, ER?, PR, AR, HER2 and triple negative towards these same criteria. At last, multivariate survival analyses were conducted using all the patterns of receptors' expression, epidemiological and clinical factors studied. Results: In multivariate analyzes, there were the following significant associations: of the estrogen receptor alpha (ER?) with less differentiated histological grade tumors (p = 0.01); of the progesterone receptor (PR) to obesity (p = 0.01); of the androgen receptor (AR) with the serous tumors (p = 0.01); of the HER2 receptor with tumors of histological grades II-III ( p = 0.02); of the triple negative subgroup with less differentiated histological grade tumors (II-III) (p <0.01). There was no association of the ER? with any of the factors studied. In the multivariate analysis of disease-free survival and overall survival; considering the patterns of receptors' expression, only the ER? expression was associated with better disease-free survival (RR= 0.39, 95% CI 0.17 to 0.90). Conclusions: The expression of ER? was more significantly associated with clinical factors of poor prognosis. The PR was associated with obesity. The AR was significantly more prevalent in serous tumors. The HER2 expression and the presence of triple negative epithelial ovarian cancer tumors were higher in less differentiated tumors. Paradoxically, the ER? was the only receptor which showed association with better disease-free survival despite its significant relationship with recognized factors of worse clinical outcome. There was no statistically significant difference in multivariate analysis of overall survival and disease-free survival regarding to the triple negative group / Mestrado / Oncologia Ginecológica e Mamária / Mestra em Ciências da Saúde

Este trabalho trata do estudo de complexos de rutênio contendo antiinflamatórios não-esteróides, com o objetivo de contribuir para ampliar as pesquisas na área de potenciais metalofármacos antitumorais. A partir de reações do precursor dimetálico [Ru2(O2CCH3)4Cl] com os fármacos carboxílicos sulindaco (HSulin) e diclofenaco de sódio (NaDiclofen) foram isolados, respectivamente, os correspondentes complexos [Ru2(Sulin)4Cl] e [Ru2(Diclofen)4Cl]. A reação entre o monômero [RuCl2(dmso)4] e o meloxicam (H2Melox) deu origem ao derivado misto [Ru(dmso)2(HMelox)2]. Os compostos foram caracterizados por meio de análise elementar, medidas de condutância molar, medidas de susceptibilidade magnética, espectroscopia de absorção eletrônica UV-VIS-IR, espectroscopia vibracional FTIR e Raman, e estudos de análise térmica (TG/DSC/MS). As interações da albumina de soro humana HSA, importante proteína do plasma, com os complexos obtidos, com o análogo [Ru2(IBP)4Cl] (HIBP = ibuprofeno) e também com os fármacos orgânicos não-complexados foram investigadas empregando-se dicroísmo circular, SDS-Page e fluorescência. A atividade antitumoral dos metalofármacos foi avaliada, através de ensaios com MTT, com base nos seus efeitos citotóxicos para a linhagem celular de leucemia humana K562. / This work describes the study of ruthenium complexes containing non-steroidal antiinflammatory drugs with the aim of helping to expand the research in the field of potential anticancer metallodrugs. Reactions of the [Ru2(O2CCH3)4Cl] dimetal complex with sulindac (HSulin) and sodium diclofenac (NaDiclofen) carboxylic drugs gave the correspondent complexes [Ru2(Sulin)4Cl] and [Ru2(Diclofen)4Cl], respectively. The reaction between the [RuCl2(dmso)4] monomer and the meloxicam drug (H2Melox) led to the mixed derivative [Ru(dmso)2(HMelox)2]. The compounds were characterized by elemental analysis, molar conductance measurements, magnetic susceptibility, UV-VIS-IR electronic absorption spectroscopy, Raman and FTIR vibrational spectroscopies and by studies of thermal analysis (TG / DSC / MS). The interactions of human serum albumin (HSA), the major plasma protein, with the obtained complexes, the analogous [Ru2(IBP)4Cl] (= HIBP ibuprofen) and also with the noncoordinated organic drugs have been investigated by circular dichroism, SDS-Page and fluorescence. The antitumor activity of the metallodrugs has been evaluated by MTT assays, on the basis of their cytotoxic effects on K562 human leukemia cell line.

Este trabalho teve por objetivo descrever os perfis hormonais do ciclo ovariano de cinco exemplares adultos de C. penicillata, mantidas no Parque Municipal Quinzinho de Barros em Sorocaba, SP. As amostras de fezes foram colhidas diariamente, sempre pela manhã, durante três meses e mantidas congeladas até o processamento laboratorial. Após a extração com solventes orgânicos, as mensurações foram efetuadas com o uso da técnica de radioimunoensaio (RIE). Para as mensurações dos metabólitos hormonais foram utilizados conjuntos comerciais validados para o uso em matriz fecal de C.penicilatta. Os resultados mostraram que duas fêmeas estavam ciclando e três estavam gestantes. Para as fêmeas que apresentaram ciclicidade ovariana o ciclo teve duração média de 23.5 ±9, 9 dias, sendo que as durações das fases lúteas e foliculares foram de 13,25 dias ± 9,46 dias e de 10,25 ±7,2 dias, respectivamente. Entre as outras três fêmeas, duas tiveram suas gestações confirmadas, parindo filhotes e uma teve suspeita de ter sofrido abortamento .Para as que tiveram suas gestações confirmadas, a média das concentrações dos metabólitos fecais de progesterona foi de 4527,19 ± 3667,8 ng/g para o terço medio enquanto a média do terço final foi de 2974±2471,9 ng/g. As médias obtidas para as concentrações de metabólitos de estrógenos nos terços medio e final foram respectivamente de 1401,41± 1034,4 ng/g e 1546,67± 1227,2 ng/g. Para a fêmea que teve suspeita de abortamento foram confeccionados gráficos dos valôres obtidos das concentrações de ambos os metabólitos hormonais para o período anterior e posterior a data presumida do evento e comparadas as suas médias . A média da concentração dos metabólitos fecais de progesterona antes do suposto abortamento foi de 1466,22± 784,36 ng/g e para o período posterior ao suposto evento foi de 813 ± 614,66 ng/g Para as médias das concentrações de metabólitos fecais de estrógenos, os resultados obtidos foram de 745,65± 747,39 ng/g antes e 212,42 ±331,84 ng/g depois do suposto evento. As analises das concentrações de metabóltios fecais dos hormonios esteroides, mostrou-se uma ferramenta efficiente e adequada para estudos sobre a ciclicidade ovariana e gestação do C. penicillata. / This study had as objective to describe the hormonal profiles of the ovarian cycle of five adult females of C.penicillata, from the Parque Municipal Quinzinho de Barros in Sorocaba, SP. The fecal samples were collected on a daily basis, always in the morning, during three months and then frozen until their processing. After extraction with organic solvents, the measurements were conducted with radioimmunoassay (RIA) .For the measurements of the hormonal metabolites comercial kits were used and validated for C.penicillata. The results showed two females with ovarian cyclicity and three females that were pregnant. For the females that presented ovarian cyclicity the duration of the ovarian cycle had an average of 23.5 ± 9.9 days , where the duration of the luteal and follicular phases were of 13.25 ±9.46 days and 10.25±7.2 days, respectively. Of the other three females, two had their pregnancys confirmed by the birth of their young and one was suspected to have suffered abortion. For the females that had their pregnancys confirmed , the mean of the fecal progesterone metabolites concentration was of 4527.19 ± 3667.8 ng/g for the second trimester, as where for the third trimester it was of 2974 ±2471.9 ng/g. The means for the estrogen fecal metabolites concentrations for the second and third trimester were of 1401.41 ± 1034.4 ng/g and 1546.67 ± 1227.2 ng/g. For the female that was suspected to have had an abortion graphs were used with values obtained from both fecal metabolites concentrations from before and after the presumed date of the event and the means were compared. The mean of progesterone fecal metabolites concentrations before the abortion was of 1466.22 ± 784.36 ng/g and for the period after the abortion it was of 813 ± 614.66 ng/g. For the estrogen fecal metabolites concentration mean, the results obtained were of 745.65 ± 747.39 ng/g for the before period and 212.42 ±331.84 for the after period. The analysis of the fecal metabolites steroids hormone concentration, showed to be an efficient tool for the studies of the ovarian cycle and gestation period in the C.penicillata.

Made available in DSpace on 2015-04-22T22:01:58Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Banny Silva Barbosa.pdf: 3257736 bytes, checksum: aa77c1eca753a92a01d30a721f2da598 (MD5) Previous issue date: 2013-01-30 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / Seeing the importance of fish for amazonian people, it potential in the market, it nutritive value, and information shortages relative to the lipid composition of amazonian fish, it was aimed to determinate the lipid composition attendant in dorsal muscle of six amazonia fish species, jaraqui, curimatã, pacu, sardinha, pescada and surubim, through fatty acids analyses constituent of their diferent classes of lipids and attendant steroids in their unsaponifiable lipids. This study involved the development and methodology application for extraction of total lipids, separation of lipid class, extraction of unsaponifiable lipids, derivatization of fatty acids and steroids, analyses of gas chromotagraphy with detector of flames ionization and with mass spectrometry for quantitative and qualitative evaluation of steroids and fatty acids of lipids in class. And also approached the determination of lipids nutritional quality through atherogenicity, thrombogenicity index and quantity of hypercholesterolemic fatty acids. The results indicated the fish in study have interesting lipids, having bigger quantity of total lipids the fishes curimatã and pacu, with bigger participation of neutral lipids, and cholesterol as majority steroid for all fishes. The unsaturated fatty acids, essentials for human health, it was found in bigger quantity in fishes sardinha and pacu in phospholipids class and in pescada (whitefish), curimatã, jaraqui and surubim in neutral lipids class. Besides pacu fish has shown bigger quantity of omega 3 and 6 fatty acids, the fish pescada (whitefish) highlighted for nutritional quality. / Considerando a importância do pescado para o povo amazônico, o seu potencial no mercado, a sua valorização nutritiva, e à escassez de informações referentes à composição lipídica dos peixes amazônicos objetivou-se determinar a composição lipídica presente no músculo dorsal de seis espécies de peixes amazônicos, jaraqui, curimatã, pacu, sardinha, pescada e surubim, através das análises dos ácidos graxos constituintes de suas diferentes classes de lipídeos e dos esteróides presentes em seus lipídeos insaponificáveis. O estudo envolveu o desenvolvimento e a aplicação de metodologias para extração dos lipídeos totais, separação de classes de lipídeos, extração de lipídeos insaponificáveis, derivatização de ácidos graxos e esteróides, análises por cromatografia gasosa com detector de ionização de chamas e com espectrometria de massas para avaliação quanti e qualitativa de esteróides e de ácidos graxos dos lipídeos em classes. E ainda abordou a determinação da qualidade nutricional dos lipídeos através dos índices de aterogenecidade, de trombogenecidade e pela quantidade de ácidos graxos hipocolesterolêmicos. Os resultados indicaram que os peixes em estudo contêm lipídeos interessantes, possuindo maior quantidade de lipídeos totais os peixes curimatã e pacu, com maior participação dos lipídeos neutros, e colesterol como esteróide marjoritário para todos os peixes. Os ácidos graxos insaturados, essenciais para a saúde humana, foi encontrado em maior quantidade nos peixes sardinha e pacu na classe dos fosfolipídeos e nos peixes peixes curimatã, pescada, jaraqui e surubim na classe dos lipídeos neutros. Apesar de o peixe pacu ter mostrado maior quantidade de ácidos graxos de ômega 3 e 6 o peixe pescada se destacou pela qualidade nutricional.

Este trabalho teve por objetivo descrever os perfis hormonais do ciclo ovariano de cinco exemplares adultos de C. penicillata, mantidas no Parque Municipal Quinzinho de Barros em Sorocaba, SP. As amostras de fezes foram colhidas diariamente, sempre pela manhã, durante três meses e mantidas congeladas até o processamento laboratorial. Após a extração com solventes orgânicos, as mensurações foram efetuadas com o uso da técnica de radioimunoensaio (RIE). Para as mensurações dos metabólitos hormonais foram utilizados conjuntos comerciais validados para o uso em matriz fecal de C.penicilatta. Os resultados mostraram que duas fêmeas estavam ciclando e três estavam gestantes. Para as fêmeas que apresentaram ciclicidade ovariana o ciclo teve duração média de 23.5 ±9, 9 dias, sendo que as durações das fases lúteas e foliculares foram de 13,25 dias ± 9,46 dias e de 10,25 ±7,2 dias, respectivamente. Entre as outras três fêmeas, duas tiveram suas gestações confirmadas, parindo filhotes e uma teve suspeita de ter sofrido abortamento .Para as que tiveram suas gestações confirmadas, a média das concentrações dos metabólitos fecais de progesterona foi de 4527,19 ± 3667,8 ng/g para o terço medio enquanto a média do terço final foi de 2974±2471,9 ng/g. As médias obtidas para as concentrações de metabólitos de estrógenos nos terços medio e final foram respectivamente de 1401,41± 1034,4 ng/g e 1546,67± 1227,2 ng/g. Para a fêmea que teve suspeita de abortamento foram confeccionados gráficos dos valôres obtidos das concentrações de ambos os metabólitos hormonais para o período anterior e posterior a data presumida do evento e comparadas as suas médias . A média da concentração dos metabólitos fecais de progesterona antes do suposto abortamento foi de 1466,22± 784,36 ng/g e para o período posterior ao suposto evento foi de 813 ± 614,66 ng/g Para as médias das concentrações de metabólitos fecais de estrógenos, os resultados obtidos foram de 745,65± 747,39 ng/g antes e 212,42 ±331,84 ng/g depois do suposto evento. As analises das concentrações de metabóltios fecais dos hormonios esteroides, mostrou-se uma ferramenta efficiente e adequada para estudos sobre a ciclicidade ovariana e gestação do C. penicillata. / This study had as objective to describe the hormonal profiles of the ovarian cycle of five adult females of C.penicillata, from the Parque Municipal Quinzinho de Barros in Sorocaba, SP. The fecal samples were collected on a daily basis, always in the morning, during three months and then frozen until their processing. After extraction with organic solvents, the measurements were conducted with radioimmunoassay (RIA) .For the measurements of the hormonal metabolites comercial kits were used and validated for C.penicillata. The results showed two females with ovarian cyclicity and three females that were pregnant. For the females that presented ovarian cyclicity the duration of the ovarian cycle had an average of 23.5 ± 9.9 days , where the duration of the luteal and follicular phases were of 13.25 ±9.46 days and 10.25±7.2 days, respectively. Of the other three females, two had their pregnancys confirmed by the birth of their young and one was suspected to have suffered abortion. For the females that had their pregnancys confirmed , the mean of the fecal progesterone metabolites concentration was of 4527.19 ± 3667.8 ng/g for the second trimester, as where for the third trimester it was of 2974 ±2471.9 ng/g. The means for the estrogen fecal metabolites concentrations for the second and third trimester were of 1401.41 ± 1034.4 ng/g and 1546.67 ± 1227.2 ng/g. For the female that was suspected to have had an abortion graphs were used with values obtained from both fecal metabolites concentrations from before and after the presumed date of the event and the means were compared. The mean of progesterone fecal metabolites concentrations before the abortion was of 1466.22 ± 784.36 ng/g and for the period after the abortion it was of 813 ± 614.66 ng/g. For the estrogen fecal metabolites concentration mean, the results obtained were of 745.65 ± 747.39 ng/g for the before period and 212.42 ±331.84 for the after period. The analysis of the fecal metabolites steroids hormone concentration, showed to be an efficient tool for the studies of the ovarian cycle and gestation period in the C.penicillata.

No primeiro capitulo deste trabalho, é apresentada a classificação e a importância dos esteróides sexuais para manutenção da vida humana. Na seqüência, o próximo capítulo mostra aspectos gerais sobre eletroforese capilar, tais como modo de operação, terminologia utilizada e considerações sobre o fluxo eletrosmótico e mobilidade eletroforética. O terceiro capítulo exibe um estudo da interação solvente/micela de SDS/soluto, baseado na otimização da geometria da molécula, análise conformacional, com descritores moleculares e modelos de regressão, baseados no coeficiente de partição. Foram realizadas medidas experimentais dos tempos de retenção, de onze esteróides, a partir da MEKC, em eletrólitos modificados por solvente, conforme suas propriedades de seletividade. O efeito do solvente na modulação da retenção do soluto foi discutido em termos da LSER, a qual indicou a concentração total de solvente no meio como o principal fator de controle do tempo de retenção. A separação dos compostos selecionados, na melhor condição, foi testada em um extrato de uma amostra de urina obtida de um voluntário humano - sexo feminino - em fase de puberdade. A composição do eletrólito (20 mmol L-1 SDS, 20% EtOH e 20 mmol L-1 tetraborato de sódio a pH 9,4) proposta pode ser aplicada potencialmente para a determinação de estrógenos em estudos clínicos (0.80% C.V. para tempo de migração e 2.5% C.V. para área do pico, n = 5). Posteriormente, já no quarto capítulo, o uso do planejamento fatorial foi uma forma rápida de otimizar a composição do eletrólito para separar uma mistura-teste com onze esteróides. Uma triagem das variáveis indicou que as concentrações de ACN, SDS e &#946;-CD mais influenciavam a resolução e o tempo de análise. O estudo dos efeitos mostrou que a interação ACN/ &#946;-CD e a ACN mais contribuía para resolução dos pares críticos. O sistema micelar constituído por 20 mmol L-1 SDS, 10% ACN, 5 mmolL-1 &#946;-CD e 20 mmolL-1 TBS, pH 9.2, foi o meio no qual se obteve a melhor resposta em relação à resolução dos pares críticos e tempo de análise Este método foi usado avaliar a presença dos esteróides em extrato etanólico de excrementos de Pantera onca. Em outra etapa um método MEEKC foi desenvolvido e validado para a determinação de 17 &#946;-estradiol em adesivo transdérmico usando uma microemulsão contendo 0.5% (m/m) acetato de etila, 1.2% (m/m) butan-1-ol, 0.6% (m/m) SDS, 15% (v/v) ACN e 82.7% (m/m) TBS 12 mmol L-1 , pH 9.4. Foi obtida aceitável precisão (<1.2% RSD), linearidade, sensibilidade (LOD=0.89 &#181;g/mL; LOQ=2.68 &#181;g/mL) e recuperação (100.4 &#177;0.9 %). Por fim, o ultimo capítulo traz o desenvolvimento e validação de um método via MEKC para determinação etinilestradiol em comprimidos usando um eletrólito constituído por 20 mmol L-1 SDS, 22,5 % (v/v) ACN e 10 mmol L-1 TBS, pH 9,2. Apresentando valores de precisão (<1.0% RSD), linearidade, sensibilidade (LOD=0.84 &#181;g/mL; LOQ=2.55 &#181;g/mL) e recuperação (99.4&#177; 0.7 %) aceitáveis. E ainda, via MEEKC, para determinação simultânea de etinilestradiol e levonorgestrel usando uma microemulsão contendo: 0.5% (m/m) acetato de etila, 1.2% (m/m) butan-1-ol, 0.6% (m/m) de SDS, 15% (v/v) etanol e 82.7% (m/m) TBS 12 mmol L-1 , pH 9.2. Injeção: pelo outlet 3s/0.5 psi. Com alta precisão (<0.8% RSD), linearidade, sensibilidade (LOD=1.04 &#181;g/mL; LOQ=3.15 &#181;g/mL para etinilestradiol e LOD=1.35 &#181;g/mL; LOQ=4.10 &#181;g/mL para o levonorgestrel) e recuperação (98.6&#177; 0.8 % para etinilestradiol), os métodos mostraram-se sensíveis e precisos para serem utilizados no controle de qualidade de formulações farmacêuticas. / In the first chapter of this work, the classification and importance of the sexual steroids for maintenance of the life human is presented. The next chapter presents general aspects on capillary electrophoresis, such as operation, terminology and considerations on the electroosmotic flow and electroforetic mobility. The third chapter shows a study of interaction solvent/ SDS micelle /solute, based on the optimization of molecule geometry, conformational analysis, with molecular descriptors and regression models, based in the partition coefficient. The retention times were measured experimentally for eleven steroids, in MEKC electrolytes modified by solvents. The solvent effect in modulating the retention of solute was explaned in terms of LSER, which indicated the total organic solvent percentage in the electrolyte as the main factor controlling retention. The separation of selected compounds, in the best condition, was tested in urine extract sample from a human volunteer - feminine -1 sex - in puberty phase. The composition of the proposed electrolyte (20 mmol L-1 SDS, 20% (v/v) EtOH and 20 mmol L-1 sodium tetraborate, pH 9.4) can potentially be applied for determination of estrogens in clinical studies (0.80% C.V. for migration time and 2.5% C.V. for peak area, n = five consecutive injections). Later, in fourth chapter, the use of factorial design was introduced to optimize the composition of the electrolyte to separate a mixture-test with eleven steroids. The selection of variable indicated that the concentrations of ACN, SDS and &#946;-CD influenced the most resolution and analysis time. The study of the effect showed that interaction ACN/ &#946;-CD and ACN were important for resolution of the critical pairs. The micelle system constituted of 20 mmol L-1 SDS, 10% (v/v) ACN, 5 mmolL-1 &#946;-CD and 20 mmolL-1 TBS, pH 9.2, was composition to achieve resolution of the critical pairs and analysis time. This method was used to evaluate the presence of the steroids in fecal ethanolic extract of Pantera onca. In another work a MEEKC method was developed and validated for determination of 17 &#946;-estradiol in transdermical adhesive using a microemulsion containing 0.5% (w/w) ethyl acetate, 1.2% (w/w) butan-1-ol, 0.6% (w/w) sodium dodecyl sulfate, 15% (v/v) ACN and 82.7% (w/w) 12 mmol L-1 sodium tetraborate aqueous buffer at pH 9.4. Acceptable precision (<1.2% RSD), linearity, sensitivity (LOD=0.89 &#181;g/mL; LOQ=2.68 &#181;g/mL) and recovery (100.4&#177; 0.9 % at three concentration levels) were obtained. The last chaper, the development and validation of MEKC method for determination of ethynylestradiol in a commercial tablet formulation using a micellar medium containing, 25 mmol L-1 sodium dodecyl sulfate, 22,5% (v/v) ACN and 10 mmol L-1 sodium tetraborate aqueous buffer at pH 9.2 was presented. Acceptable precision (<1.0% RSD), linearity, sensitivity (LOD=0.84 &#181;g/mL; LOQ=2.55 &#181;g/mL) and recovery (99.8&#177; 1.8 % at three concentration levels) were obtained. A MEEKC method for the simultaneous determination of ethynylestradiol and levonorgestrel using microemulsion containing 0.5% (w/w) ethyl acetate, 1.2% (w/w) butan-1-ol, 0.6% (w/w) sodium dodecyl sulfate, 15% (v/v) ethanol and 82.7% (w/w) 12 mmol L-1 sodium III tetraborate aqueous buffer at pH 9.2 was developed. High precision (<0.8% RSD), linearity, sensitivity (LOD=1.04 &#181;g/mL; LOQ=3.15 &#181;g/mL to ethynylestradiol and LOD=1.35 &#181;g/mL; LOQ=4.10 &#181;g/mL to levonorgestrel) and recovery (98.6&#177; 0.8 % at three concentration levels of ethynylestradiol) were obtained.

O aumento da expectativa de vida vem elevando a ocorrência das alterações degenerativas comuns à terceira idade, como a osteoporose. Essa doença sistêmica também freqüente no hipogonadismo, afeta o metabolismo ósseo comprometendo inclusive a mandíbula. O objetivo deste estudo foi avaliar de que forma a deficiência de esteróides sexuais, induzida por orquiectomia ou ovariectomia, influencia o processo de remodelação óssea da mandíbula de ratos por períodos experimentais crônicos. Ratos Wistar, com 3 meses, foram divididos em três grupos experimentais: controles (C), castrados (ORQ; OVX) e castrados com tratamento hormonal (ORQ + PT - propionato de testosterona, 0,4 mg/100g PC/dia; OVX + BE - benzoato de estradiol, 0,7 g/100g PC/dia). As fêmeas foram previamente avaliadas por citologia vaginal e somente as que apresentaram o ciclo estral regular foram utilizadas. A massa corporal foi verificada semanalmente e ao final dos períodos experimentais (90, 120 e 150 dias) os animais foram sacrificados. O sangue foi coletado e o soro armazenado para posterior análise. As mandíbulas, fêmures e colunas foram excisados, medidos e preparados para análises da densidade mineral óssea e das propriedades físicas e biomecânicas. Observamos que com a castração, machos apresentaram baixo ganho de massa corporal (90d: 12%, 120d: 24% e 150d: 13% a menos que C, p< 0,05), ao contrário das fêmeas (90d: 38% e 120d: 41% a mais que C, p< 0,05). As medidas de todos os ossos foram menores tanto em machos como em fêmeas (&#9794; - 90d: vértebra 11.8%, fêmur 4.4%, côndilo MD 9.4%, côndilo VL 16.6%; 120d: vértebra 13.6%, fêmur 4%, côndilo mandibular MD 9%, côndilo mandibular VL 22.2%; 150d: vértebra 16.8%, fêmur 6% , côndilo mandibular MD 21.6%, côndilo mandibular VL 29.1% e &#9792; - 90d: vértebra 7.7%, fêmur 5.6%, côndilo mandibular MD 29.1 %, côndilo mandibular VL 11.8%; 120d: vértebra 15.9 %, fêmur 6.1%, côndilo mandibular MD 33.6%, côndilo mandibular VL 14.8%; 150d: vértebra 21.6%, fêmur 5.42%, côndilo mandibular MD 29.1%, côndilo mandibular VL 15.1% a menos que C, p< 0,05), em todos os períodos experimentais. Em ambos os sexos as concentrações séricas de esteróides sexuais, fósforo e fosfatase alcalina foram menores em relação ao grupo controle, p<0,05 (Testosterona - 90d: 87%,120d: 87.5%,150d: 90.4%; Estradiol - 90d: 85.8%, 120d: 80.8%, 150d: 71.5%; Fósforo - ORQ - 120d: 7.5%, 150d: 9.2% e OVX 90d: 17.2%, 120d: 16%, 150d: 24%; Fosfatase alcalina - ORQ - 90d: 7%, 120d: 6.8%, 150d: 9.5% e OVX 90d: 21.2%, 120d: 26.1%, 150d: 43.3%). As concentrações séricas de cálcio não diferiram significativamente entre machos, mas foram menores em fêmeas castradas (90d: 13.1%, 120d: 11.7%, 150d: 26.2%, p< 0,05). As análises da densidade mineral óssea (DMO) e das propriedades biomecânicas de vértebras e fêmures apresentaram diminuição mais precoce em fêmeas do que em machos (&#9792; - vértebras a partir de 90d e fêmures a partir de 120d; &#9794; - vértebras a partir de 120d e fêmures a partir de 150, p< 0,05). No entanto, as mandíbulas apenas foram afetadas nos machos aos 150 dias. As propriedades físicas não apresentaram alterações significativas. Concluímos que a perda da função gonadal provoca redução de massa óssea, preferencialmente do osso trabecular, atingindo fêmeas mais precocemente do que machos e acentuando-se com o avançar da idade. O osso mandibular é acometido em períodos crônicos principalmente se estiver associada a um comprometimento da atividade mastigatória. Os efeitos ósseos decorrentes do hipogonadismo foram minimizados pelo tratamento com benzoato de estradiol ou propionato de testosterona, em fêmeas e machos, respectivamente. / The increase in the life expectancy has been raising the occurrence of common degenerative alterations in aging population, as osteoporosis. This systemic disease is also frequent in hypogonadism and affects the bone metabolism, included mandibular bone. The aim of this study was to evaluate how sex steroid deficiency, induced by orchiectomy (ORX) or ovariectomy (OVX), influences on mandible bone remodeling of rats, in groups of chronic experimental periods. Wistar rats, 3 mouths, had been divided in three groups: controls (C), castrated (ORX; OVX) and castrated with hormonal treatment (ORX+TP testosterone propionate, 0,4 mg/100g BW/day; OVX+EB - estradiol benzoate, 0.7 g/100g BW/day). Females were previously evaluated by vaginal cytology and only rats with regular estrous cycle were used. The corporal mass was weekly verified and after experimental periods (90, 120 and 150 days), the animals were sacrificed. The blood was collected and serum stored for posterior analysis. Mandibles, femurs and columns were excised, measured and prepared to analyses of bone mineral density and physical and biomechanical properties. After castration, males presented low gain in body mass (90d: 12%, 120d: 24% and 150d: 13% lower than C, p< 0,05), in contrast of females (90d: 38% and 120d: 41% upper than C, p< 0,05). The measures of all bones were lower in males and in females (&#9794; - 90d: vertebrae 11.8%, femur 4.4%, mandibular condyle MD 9.4%, mandibular condyle VL 16.6%; 120d: vertebrae 13.6%, femur 4%, mandibular condyle MD 9%, mandibular condyle VL 22.2%; 150d: vertebrae 16.8%, femur 6% , mandibular condyle MD 21.6%, mandibular condyle VL 29.1% and &#9792; - 90d: vertebrae 7.7%, femur 5.6%, mandibular condyle MD 29.1 %, mandibular condyle VL 11.8%; 120d: vertebrae 15.9 %, femur 6.1%, mandibular condyle MD 33.6%, mandibular condyle VL 14.8% and 150d: vertebrae 21.6%, femur 5.42%, mandibular condyle MD 29.1%, mandibular condyle VL 15.1% lower than C, p< 0,05), in all experimental periods. Males and females presented serum concentration of sex steroid hormones, phosphate and alkaline phosphatase lower than control group, p< 0,05 (Testosterone - 90d: 87%,120d: 87.5%,150d: 90.4%; Estradiol - 90d: 85.8%, 120d: 80.8%, 150d: 71.5%; Phosphate - ORX - 120d: 7.5%, 150d: 9.2% and OVX 90d: 17.2%, 120d: 16%, 150d: 24%; Alkaline phosphatase - ORX - 90d: 7%, 120d: 6.8%, 150d: 9.5% and OVX 90d: 21.2%, 120d: 26.1%, 150d: 43.3%). No significant differences were found in the males calcium concentration, but it was lower in castrated females (90d: 13.1%, 120d: 11.7%, 150d: 26.2%, p< 0,05).The bone mineral density and biomechanical properties of vertebrae and femur were reduced earlier in females than in males (&#9792; - vertebrae from 90d and femur from 120d; &#9794; - vertebrae from 120d and femur from 150d, p< 0,05). However, mandibles were affected only in 150d males. There werent significant alterations on the physical properties. In conclusion, gonadal function loss caused low bone mass, preferentially in trabecular bone, affected females earliest than males and its decreases more with aging. Mandibular bone is affected in chronic periods principally when associated with masticatory activities alterations. Bones alterations resulted from Hypogonadism were minimized, by estradiol benzoate or testosterone propionate treatment, in female and male, respectively.

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:35:11Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2008-07-22Bitstream added on 2014-06-13T18:46:32Z : No. of bitstreams: 1 pereira_rjg_dr_jabo.pdf: 242711 bytes, checksum: 723f7381e49b4cd2159897db271a8b96 (MD5) / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP) / Apesar da radiotelemetria ser considerada uma ferramenta valiosa em estudos ornitológicos, algumas teorias relativas ao impacto de radiotransmissores sobre a estimativa de parâmetros comportamentais, ecológicos e reprodutivos podem ser encontradas em literatura. Com o intuito de avaliar os potenciais efeitos fisiológicos de radiotransmissores do tipo mochila em falcões quiri-quiri (Falco sparverius) de vida livre, oito machos desta espécie foram capturados e divididos em dois grupos: indivíduos marcados com radiotransmissores (aproximadamente 5% do peso vivo, n = 6) e indivíduos controle (anilhados, n = 2). Em seguida, amostras fecais foram coletadas duas horas após a captura (dia −1) e durante os dias 0 (definido como o dia de soltura dos animais), 4, 7, 15, 30, 40 e 55. Previamente às análises laboratoriais, o ensaio imunoenzimático para dosagem de glucocorticóides fecais foi testado empregando procedimentos padrões de validação hormonal (paralelismo, curva de dose-resposta, validação fisiológica e coeficientes de variação inter- e intra-ensaio). Em relação aos machos monitorados, ambos os grupos apresentaram um aumento significativo nos níveis de glucocorticóides fecais durante o dia 0 (P < 0,001), mas as concentrações retornaram aos níveis pré-equipagem após 4 dias da soltura. Além disso, os níveis de glucocorticóides fecais não diferiram significativamente entre os falcões radiomarcados e os anilhados durante os 55 dias de monitoramento (P > 0,05). Embora o número de indivíduos neste estudo seja reduzido, estes resultados sugerem que radiotransmissores do tipo mochila não induzem efeitos persistentes sobre a atividade adrenal de machos de falcões quiri-quiri de vida livre. Considerando a literatura consultada, esta é a primeira pesquisa a analisar os efeitos de radiotransmissores sobre a resposta adrecortical de aves de vida livre. / Although radiotelemetry is considered a valuable technique for ornithological field studies, several assumptions have been made about the impact that transmitters may cause on the estimation of behavioral, ecological and reproductive parameters. To assess potential effects of backpack radiotransmitters, we captured and assigned 8 male American kestrels (Falco sparverius) in 2 groups: radio-tagged (n = 6) and control individuals (leg-banded, n = 2). Thereafter, we collected feces two hr after capture (day −1), and subsequently during days 0 (releasing day), 1, 4, 7, 15, 30, 40 and 55. Prior to fecal analysis, EIA corticosterone assay was validated using standard procedures (e.g. parallelism, dose-response curve), and physiological significance of fecal glucocorticoid metabolites was confirmed through adrenocorticotropin (ACTH) challenge, which induce an increase of 4-fold (446.10 ± 60.73 ng/ g) above baseline (114.27 ± 15.23 ng/ g) within 4 hr (P < 0.001). Both groups exhibited a significant increase in fecal glucocorticoids during day 0 (P < 0.001), but concentrations returned to pre-attachment values within 4 days. Fecal glucocorticoid concentrations did not differ between samples of radio-tagged and leg-banded kestrels (P > 0.05). In spite of the small number of monitored subjects, these findings suggested that radiotransmitters did not affect adrenocortical activity in male American kestrel. To our knowledge, this is the first research to evaluate the effects of transmitters on stress responses in free-ranging birds.

Este trabalho tem como objetivo estudar as fontes de matéria orgânica em sedimentos ao longo do Sistema Estuarino-Lagunar de Cananéia-Iguape, por meio de diferentes indicadores geoquímicos. Foram coletados 12 testemunhos. Os 10 centímetros superficiais foram fatiados de 2 em 2 centímetros, totalizando 60 amostras. Análises granulométricas, de razão C/N, 13C/12C e a datação de alguns dos testemunhos, foram feitos pelo grupo de Oceanografia Geológica do IOUSP. Os marcadores orgânicos moleculares utilizados foram os hidrocarbonetos alifáticos, álcoois graxos e esteróides, analisados por GCFID. O total de hidrocarbonetos alifáticos variou entre 0,571 a 9,932 g g-1. Os álcoois totais variaram de 0,318 a 35,291 g g-1. Os esteróides totais variaram de 0,241 a 11,054 g g-1. Para interpretação dos dados foram utilizadas as razões entre n-alcanos ímpares e pares leves (C21) e pesados (C22), somatório de álcoois graxos leves e pesados, relação entre a soma de coprostanol e epicoprostanol sobre o total de esteróides e relação entre epicoprostanol e coprostanol. Os resultados das razões indicam uma origem terrestre dos compostos orgânicos analisados com uma clara predominância da contribuição da vegetação de manguezal da região. Entretanto, existe uma discreta introdução de hidrocarbonetos de petróleo e esgoto domésticos nãotratados em alguns pontos isolados do Sistema Estuarino-Lagunar de Cananéia-Iguape. / This work has the objective in evaluate the sources of organic matter in sediments of the Cananéia-Iguape Estuarine-Lagunar System, using several geochemical markers. For the study area, 12 sample points were chosen, where the corers were obtained. For each point, the superficial 10 centimeters, sliced in each 2 centimeters, totalizing 60 samples. Granulometric analysis, C/N and 13C/12C ratios and dating of some cores, were realized by the Geological Oceanography group of IOUSP. The molecular organic markers used were the aliphatic hydrocarbons, fatty alcohols and steroids, analyzed by GC-FID. The total hydrocarbons varied from 0.571 to 9.932 g g-1. The total fatty alcohols ranged from 0.318 to 35.291 g g-1. The total steroids varied from 0.241 to 11.054 g g-1. For interpretation of data, some relations were used such as odd/even hydrocarbons C21 and C22, total short and long chain fatty alcohols, the coprostanol + epicoprostanol divided by total sterols and epicoprostanol/coprostanol. The results of the ratios showed a terrestrial origin of the organic matter with a clear predominance of the contribution of the mangrove higher plants of the region. However, there is a discrete introduction of petroleum hydrocarbons and untreated domestic sewage in isolated points of the Estuarine-Lagunar System of Cananéia-Iguape.

Made available in DSpace on 2016-08-17T18:39:50Z (GMT). No. of bitstreams: 1 6068.pdf: 11514210 bytes, checksum: 8c9214a7a0368fd3be3320eb3e04318d (MD5) Previous issue date: 2013-08-13 / The non steroidal anti-inflammatory drugs have been known for over 100 years and has been widely used by mankind. However cause adverse effects, since gastrointestinal complications to cardiac diseases many of these symptoms related to its nonspecific action in biological systems. Thus, the proposal of a drug delivery system for loading these drugs to the site of inflammation, could reduce these unwanted effects in the body due to the limitation of more targeted effects beyond its site of action.In this study, the graphene and graphite plates were used as carriers, since studies demonstrate the usefulness of other conformational structures of carbon as drug carriers for the treatment of cancer, for example. Two models were studied for the plates by softwares of molecular docking: template sandwich, which comprises two carbon plates, with ligant between them, and the model surfing with one carbon plate comprising the ligant. The compounds were obtained from data banks, such as CSD, PDB and SD, the plates were obtained by molecular modeling. The analysis of intermolecular interactions, essential knowledge for understanding the structures obtained was done using molecular imaging with high resolution. The experimental results showed that the in silico model sandwich was the most favorable for this system, providing stability and protection for the ligand that this does not become detached from the plates during the path taken in the body to the desired location. / Os anti-inflamatórios não esteroidais são conhecidos há mais de 100 anos e vem sendo amplamente utilizados pela humanidade. No entanto, causam efeitos adversos, desde problemas gastrointestinais até complicações cardíacas, muitos desses sintomas relacionados com sua ação inespecífica nos sistemas biológicos. Dessa forma, a proposta de um sistema de drug delivery para o carreamento desses fármacos até o local da inflamação, poderia reduzir esses efeitos indesejados no organismo devido a limitação de alvos mais específicos além do seu local de ação. No presente estudo, foram utilizadas placas de grafeno e grafite como carreadores, uma vez que estudos demonstram a utilidade de outras estruturas conformacionais do carbono como carreadores de fármaco para o tratamento de câncer, por exemplo. Foram estudados dois modelos para as placas por meio de software de docking molecular: modelo sandwich, o qual engloba duas placas de carbono, com os ligantes entre elas, e o modelo surf, com uma placa de carbono comportando o ligante. Os compostos estudados foram obtidos dos bancos de dados como CSD, SD e PDB e as placas foram obtidas por modelagem molecular. A análise das interações intermoleculares, conhecimento essencial para o entendimento das estruturas obtidas, foi feita utilizando visualização molecular de alta resolução. Os resultados dos experimentos in silico mostraram que o modelo sandwich foi o mais favorável para esse sistema, posto que confere estabilidade e proteção ao ligante para que este não se desprenda das placas durante o caminho percorrido pelo organismo até o local desejado.