Made available in DSpace on 2014-06-12T15:04:09Z (GMT). No. of bitstreams: 2 arquivo4589_1.pdf: 2802965 bytes, checksum: 6b6af5faadbc7f8cfc816b8f4c0935c7 (MD5) license.txt: 1748 bytes, checksum: 8a4605be74aa9ea9d79846c1fba20a33 (MD5) Previous issue date: 2006 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / RESUMO GERAL Foram avaliados os efeitos do cobre sobre fungos micorrízicos arbusculares (FMA) e ectomicorrízicos (FEM) e sobre a simbiose entre FMA e plantas de trevo. Diversidade de espécies, densidade de esporos, número mais provável (NMP) de propágulos e produção de glomalina por FMA foram estimados em área de mineração de cobre (rejeito, margem e reflorestada com eucaliptos) em Camaquã, RS. A simbiose trevo vermelho (Trifolium pratense L.) com o FMA Glomus etunicatum Becker & Gerd. foi observada em areia recebendo solução nutritiva. Os FEM Pisolithus microcarpus UFSC Pt116, Chondrogaster angustisporus UFSC Ch163 e Suillus sp. UFSC Su168 foram cultivados em meio acrescido de Cu (31 a 7869 μM) e dois níveis de P (0,1 e 1,9 mM). A atividade de fosfatases produzidas por Suillus sp. em meio com adição de Cu e de P foi igualmente estimada. Este fungo foi mais tolerante que os demais FEM em meio com concentração 123 μM Cu. A adição de P diminuiu significativamente a toxicidade do Cu sobre os FEM. O crescimento micelial, em meio líquido, foi fortemente inibido pelo fósforo (1,9 mM) e pelo Cu (123 μM). No entanto, houve aumento de 50% na atividade de fosfatases produzidas por Suillus sp. Para este fungo, as concentrações de Cu inibitórias de 50% do crescimento (CI50) foram 40 e 160 μM Cu, respectivamente em meios sólido e líquido. Doze táxons de FMA foram identificados nas áreas estudadas. Glomus foi o gênero mais comum e Paraglomus brasilianum (Spain & Miranda) Morton & Redecker a única espécie encontrada nas três áreas. Menor diversidade de FMA ocorreu na área de interface entre a bacia de rejeito e a reflorestada. Maior número de esporos, NMP de propágulos e produção de glomalina foram registrados na área reflorestada. Efeito deletério do Cu foi observado nas plantas de trevo mantidas em substrato com 1967 μM de Cu. A micorrização, traduzida pela colonização radicular, foi inibida em substrato com 123 μM Cu; porém, neste mesmo nível, a adição de fosfato diminuiu a toxicidade do metal. No tratamento inoculado com G. etunicatum e com 1,9 mM P a toxicidade do Cu sobre o crescimento e acúmulo de nutrientes (P, K, Cu e Fe) nas plantas de trevo também diminuiu. Os resultados indicam que a inoculação com FMA e a adição de fosfato podem aumentar a tolerância do hospedeiro a níveis elevados de Cu no substrato. Nesse contexto, a aplicação conjunta de fungos micorrízicos e P podem constituir uma prática favorável no reflorestamento de áreas de mineração

Dissertação (Mestrado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciências Biológicas. / Made available in DSpace on 2012-10-17T05:38:39Z (GMT). No. of bitstreams: 0Bitstream added on 2016-01-09T00:40:51Z : No. of bitstreams: 1 142408.pdf: 16224321 bytes, checksum: fcd5876223664b04f33872246c37a375 (MD5)

Submitted by Jos? Henrique Henrique (jose.neves@ufvjm.edu.br) on 2017-10-02T20:42:54Z No. of bitstreams: 2 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) angela_lais_fernandes_gomes.pdf: 1004005 bytes, checksum: 971c90aeba361b9e02c0d4ce971cfb63 (MD5) / Approved for entry into archive by Rodrigo Martins Cruz (rodrigo.cruz@ufvjm.edu.br) on 2017-10-09T14:09:05Z (GMT) No. of bitstreams: 2 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) angela_lais_fernandes_gomes.pdf: 1004005 bytes, checksum: 971c90aeba361b9e02c0d4ce971cfb63 (MD5) / Made available in DSpace on 2017-10-09T14:09:05Z (GMT). No. of bitstreams: 2 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) angela_lais_fernandes_gomes.pdf: 1004005 bytes, checksum: 971c90aeba361b9e02c0d4ce971cfb63 (MD5) Previous issue date: 2016 / Universidade Federal dos Vales do Jequitinhonha e Mucuri (UFVJM) / Coordena??o de Aperfei?oamento de Pessoal de N?vel Superior (CAPES) / Os benef?cios das associa??es ectomicorr?zicas s?o dependentes da planta hospedeira, do isolado f?ngico e do ambiente. O objetivo deste trabalho foi selecionar isolados de Pisolithus sp. que colonizem mudas clonais de eucalipto propagados por miniestaquia e que promovam maior sobreviv?ncia, crescimento e nutri??o das mudas em viveiro comercial. Os clones PT3335 e PT3336 foram inoculados com 18 isolados de Pisolithus sp. e crescidos em substrato com aduba??o fosfatada reduzida, mais os controles n?o inoculados com (Controle) e sem (Comercial) redu??o da aduba??o fosfatada de substrato. A inocula??o dos fungos ectomicorr?zicos aumentou a sobreviv?ncia, enraizamento, coloniza??o, crescimento e teores de Fe em rela??o aos controles, por?m estes efeitos foram dependentes de isolados e clones. Para o PT3335, alguns isolados dobraram a sobreviv?ncia das mini-estacas em rela??o ao Controle e ao Comercial, sendo os melhores o D29, D62, D63, D118 e D216. Para o PT3336 os melhores isolados foram D5, D29 e D88, com aumento da sobreviv?ncia de at? 25 %. Os maiores aumentos de altura foram observados nas mudas do clone PT3335 inoculadas com D15, D16, D95, D184, D198, D206 e D216, sendo de 27 % a 32 % em rela??o ?s mudas do Comercial. Os isolados D63 e D216 aumentaram a massa seca (MS) da parte a?rea dos dois clones em rela??o ao Comercial, sendo os maiores aumentos de 140 % nas mudas inoculadas com o D216 e de 87,5 % naquelas inoculadas com o D63. As mudas do PT3336 inoculadas com o D216 apresentaram maiores MS total (31,6 %) e teores de clorofila (39,9 %) em rela??o ?s mudas do Comercial. Os isolados que mais colonizaram as ra?zes foram D5 (19,5 %), D10 (11,7 %), D216 (10,5 %) e D63 (8,8 %) para o PT3335 e D118 (15,6 %), D206 (11,7 %), D216 (11,1 %) e D63 (10,0 %) para o PT3336. Os teores de Fe nas mudas do PT3336 inoculadas com D5, D10, D58, D85, D106, D118, D170, D184 e D216 foram de 21 a 79,3 % maiores do que os das mudas do Comercial e de 38,6 % a 110 % maior que os das do Controle. A coloniza??o se correlacionou positivamente com a MS da parte a?rea, das ra?zes e total para o PT3335 e com a sobreviv?ncia e teores de P para o PT3336. A inocula??o com isolados de Pisolithus sp. aumenta a coloniza??o ectomicorr?zica e o crescimento de mudas eucalipto em viveiro comercial, mas isto ? dependente do clone e do isolado. Os isolados D63 e D216 s?o os mais promissores para utiliza??o em programas de inocula??o em viveiro comercial de mudas clonais de eucalipto. / Disserta??o (Mestrado) ? Programa de P?s-Gradua??o em Produ??o Vegetal, Universidade Federal dos Vales do Jequitinhonha e Mucuri, 2016. / The benefits of ectomycorrhizal associations are dependent on the host plant, the fungal isolate and environment. The objective of this work was to select Pisolithus sp. isolates that colonize eucalypt cuttings propagated by minicutting and that promote higher survival, growth and nutrition of cuttings on commercial nursery. The PT3335 and PT3336 clones were inoculated with 18 isolates of Pisolithus sp. and grown in substrate with reduced phosphate fertilization, in addition to non inoculated controls with (Control) and without (Commercial) reduction of the substrate phosphate fertilization. The inoculation of ectomycorrhizal fungi increased the survival, rooting, colonization, growth and Fe contents in relation to controls, but these effects were dependent on isolates and clones. For PT3335, some isolates doubled the survival of minicuttings in relation to Control and Commercial, having D29, D62, D63, D118 and D216 as the best ones. For PT3336 the best isolates were D5, D29 and D88, with survival increased to 25 %. The greatest height increases were observed in the PT3335 cuttings inoculated with D15, D16, D95, D184, D198, D206 and D216, which were from 27 to 32 % in relation to the Commercial cuttings. The D63 and D216 isolates increased the dry mass (DM) of the aerial part of both clones in relation to Commercial, which the largest increases were 140 % times in the cuttings inoculated with D216 and 87.5 % in those inoculated with D63. The PT3336 cuttings inoculated with D216 presented higher total DM (31.6 %) and chlorophyll contents (39.9 %) in relation to the Commercial cuttings. The isolates that most colonized the roots were D5 (19.5 %), D10 (11.7 %), D216 (10.5 %) and D63 (8.8 %) for PT3335 and D118 (15.6 %), D206 (11.7 %), D216 (11.1 %) and D63 (10.0 %) for PT3336. The Fe contents in the PT3336 cuttings inoculated with D5, D10, D58, D85, D106, D118, D170, D184 and D216 were from 21 % to 79.3 % higher than those of Commercial cuttings and from 38.6 % to 110 % higher than those of the Control. The colonization was positively correlated with the DM of the aerial part, of the roots and total for the PT3335 and with the survival and P contents for the PT3336. The inoculation with Pisolithus sp. isolates increases ectomycorrhizal colonization and growth of eucalypt cuttings in commercial nursery, but this is dependent on the clone and isolate. The D63 and D216 isolates are the most promising for usage in inoculation programs in commercial nursery of eucalypt cuttings.

Submitted by Nathália Faria da Silva (nathaliafsilva.ufv@gmail.com) on 2017-06-12T11:15:41Z No. of bitstreams: 1 resumo.pdf: 151322 bytes, checksum: 3eefcd9eeadd69fdcb468d564667b9f2 (MD5) / Made available in DSpace on 2017-06-12T11:15:41Z (GMT). No. of bitstreams: 1 resumo.pdf: 151322 bytes, checksum: 3eefcd9eeadd69fdcb468d564667b9f2 (MD5) Previous issue date: 2001-03-12 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / Com o objetivo de caracterizar as ectomicorrizas da nogueira pecã, Carya illinoinensis, foram realizadas coletas de basidiocarpos e dos sistemas radiculares em dois plantios experimentais localizados no Campus da UFV e na Fazenda Experimental de Araponga, MG. Basidiocarpos foram encontrados e coletados somente na área do Campus da UFV, provavelmente devido à época de coleta. A partir dos basidiocarpos, foram obtidos 4 isolados de características culturais similares. Estes basidiocarpos foram caraterizados e identificados como pertencentes a Scleroderma verrucosum. Nas duas áreas de plantio de C. illinoinensis, um único morfotipo de ectomicorriza foi observado com as seguintes características: cor branca amarelada, 00-20-00 %CYM; ramificação pinada irregular; hifas da superfície do manto organizados em “net prosenchyma” e as internas organizadas em “net sinenchyma”; rede de Hartig presente viiformando-se intercelularmente a epiderme da raiz e a primeira camada de células do córtex e, eventualmente, a segunda; rizomorfos presentes em grande quantidade apresentando hifas com anastomoses. As ectomicorrizas coletadas no Campus da UFV foram formadas pelo S. verrucosum. Esta identificação foi possível após a constatação da união das ectomicorrizas encontradas, por meio de rizomorfos, a basidiocarpos coletados no local. As ectomicorrizas coletadas na fazenda de Araponga possivelmente foram formadas por S. verrucosum, dado o alto grau de similaridade nas características avaliadas. A porcentagem de micorrização em C. illinoinensis variou de 15 a 32,5 %. O DNA extraído de 3 isolados de S. verrucosum foi amplificado utilizando-se 16 oligonucleotídeos iniciadores e por eletroforese em gel de agarose 1,2%. Foram identificados 84 fragmentos polimórficos e, com base na presença ou ausência destes fragmentos, as distancias genéticas calculadas variaram de 16,8 % a 67 %, demonstrando existir uma grande variabilidade genética entre os isolados fúngicos de uma mesma área. / Aiming at the characterization of C. illinoinensis ectomycorrhizae, fungal basidiocarps and the root system of C. illinonensis were collected in two orchards in the region of Viçosa, one at the campus of Universidade Federal de Viçosa and another at Araponga. Basidiocarps could only be found and collected in the campus orchard probably because of the sampling time (February and July). Four isolates with similar cultural characteristics were obtained from basidiocarps which were characterized and identified as Scleroderma verrucosum. In the two orchards planted with C. illinonensis, a single ectomycorrhizal morphotype was observed that presented the following characteristics: yellowish white color 00-20-00 %CYM; irregular pinate branching; outer mantle hyphae forming a net prosenchyma and inner hyphae a net synenchyma; Hartig net present, penetrating root epidermis, the first, and, ixeventually, the second cell layer of the root cortex; rhizomorphs present in abundance and containing anastomosing hyphae. The ectomycorrhizae found in the campus orchard were formed by S. verrucosum. This was established by examining the connection between the basidiomes present in the sampling site and the ectomycorrhizae, by means of rhizomorphs. Considering the high degree of similarity of the morphological characteristics studied, the ectomycorrhizae sampled at Araponga were probably formed by S. verrucosum. Ectomycorrhizal colonization percentages for 16 cultivars of C. illinonensis varied from 15 to 32.5%, being not statistically different. DNA extracted from 3 isolates of S. verrucosum was amplified using 16 different oligonucleotide primers and were analyzed by electrophoresis in a 1.2% agarose gel. Eighty-four polymorphic amplified fragments were identified and the pairwise genetic distances calculated. The genetic distances varied from 16.8 to 67%, demonstrating the existence of high genetic variability among isolates from a single area.

Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico / Mining areas and constantly receiving addition of industrial waste are subject to increased levels of copper in the soil. Copper when in high amounts in the soil can adversely affect vegetation preventing the cultivation of contaminated areas. The aim of this study was to allow the formation of ectomycorrhiza and assess their influence on the development of native tree in soil contaminated with copper. Accordingly, an experiment was established to evaluate the behavior of mimosa, grapia and bracatinga seedlings in copper contaminated soil. Following, another experiment was conducted to evaluate in vitro the influence of eucalyptus essential oil in the establishment of ectomycorrhizal association in bracatinga and grapia seedlings. We evaluated also the influence of eucalyptus essential oil and Pisolithus microcarpus inoculation on growth of bracatinga seedlings in soil contaminated with copper. The results indicate that grápia was less affected by increasing doses of copper applied to the soil and angico that showed lower translocation to leaf area. The bracatinga ectomycorrhizal association formed without the addition of essential oil, however, the presence of oil increased the percentage of ectomycorrhizal colonization, grápia required stimulus eucalyptus essential oil to form ectomycorrhizal association. No effect of inoculating Pisolithus microcarpus was observed in seedling growth bracatinga in soil contaminated with copper, however, we observed a higher altitude at a dose of 180 mg kg - 1 with the application of 40 l L- 1 essential oil eucalyptus . Copper doses from 180 mg kg - 1 inhibit the formation of ectomycorrhiza on seedlings bracatinga . / Áreas de mineração e as que recebem constantemente adição de resíduos industriais estão sujeitas ao aumento dos teores de cobre no solo. O cobre quando em quantidades elevadas no solo pode interferir negativamente na produção vegetal. O objetivo desse trabalho foi possibilitar a formação de ectomicorriza e avaliar a sua influência no desenvolvimento de arbóreas nativas em solo contaminado com cobre. Nesse sentido, foi estabelecido um experimento para avaliar o comportamento de mudas de angico, bracatinga e grápia em solo contaminado por cobre. Na sequência foi conduzido outro experimento IN VITRO avaliando a influência de óleo essencial de eucalipto no estabelecimento de associação ectomicorrízica em mudas de bracatinga e grápia. E avaliou-se a influência do óleo essencial de eucalipto e da inoculação de Pisolithus microcarpus no crescimento de mudas de bracatinga em solo contaminado com cobre. Os resultados indicam que a grápia foi menos influenciada pelas doses crescentes de cobre aplicadas ao solo e o angico foi a espécie que teve menor translocação de cobre para a parte aérea. A bracatinga apresentou manto fúngico ao redor das raízes sem a adição de óleo essencial, no entanto, na presença do óleo, aumentou o percentual de pelos colonizados. A grápia necessitou de estímulo do óleo essencial de eucalipto para formar associação ectomicorrízica. Não foi observado efeito da inoculação de Pisolithus microcarpus no crescimento das mudas de bracatinga em solo contaminado com cobre, no entanto, observou-se maior altura na dose de 180 mg kg-1 com a aplicação de 40 μL L-1 de óleo essencial de eucalipto. Doses de cobre a partir de 180 mg kg-1 inibem a formação de ectomicorriza nas mudas de bracatinga.

Os fungos representam cerca de 75% da biomassa microbiana em áreas florestais, desempenhando funções importantes, desde a mineralização dos resíduos orgânicos até a disponibilização de nutrientes para plantas por meio das associações micorrízicas, o que influencia a ciclagem de nutrientes e, consequentemente, o crescimento das árvores. O objetivo desse trabalho foi avaliar a comunidade de fungos do solo, da rizosfera e do sistema radicular de Eucalyptus grandis e Acacia mangium plantados em monocultivos e em consórcio, e encontrar respostas para os padrões observados por meio da correlação com os atributos físicos, químicos, biológicos e a profundidade do solo. A coleta das amostras foi realizada na Estação Experimental de Ciências Florestais de Itatinga, em 2016, quando as plantas estavam com 2 anos de idade. Foram coletadas amostras em quatro tratamentos: monoculturas de E. grandis e de A. mangium e consórcios de E. grandis e de A. mangium, nos quais foram construídas trincheiras para coleta das amostras nas camadas de 0-10, 10-20, 20-50 e 50-100 cm de profundidade. Foram caracterizados os atributos físicos e biológicos do solo e os atributos químicos do solo, da rizosfera e das raízes. Para a avaliação micorrízica, foi quantificado o número de esporos de fungos micorrízicos arbusculares (FMA) e as taxas de colonização radicular por FMA e por fungos ectomicorrízicos. Foi avaliada a morfologia das estruturas das micorrizas arbusculares e ectomicorriza (ECM). A estrutura da comunidade de fungos do solo e da rizosfera foi avaliada por meio da técnica de Terminal restriction fragment length polymorphism (T-RFLP). Para isso, o DNA foi amplificado utilizando os primers ITS1f-FAM e ITS4 e a restrição dos fragmentos foi realizada com a enzima HaeIII. A abundância de cópias do gene ITS do solo e da rizosfera foi quantificada por PCR quantitativo (qPCR), utilizando os primers ITS1f e 5.8s. Os atributos físicos, químicos e biológicos tiveram poucas variações entre os tratamentos avaliados, sendo as maiores diferenças encontradas entre as profundidades. O número de esporos (<29) e as taxas de colonização micorrízica (<48%) foram baixos em todos os tratamentos, e se reduziram com o aumento da profundidade. As plantas de A. mangium não formaram micorrizas arbusculares. Nas raízes de E. grandis, não houve a formação de arbúsculos, mas foi verificada a presença de hifas enroladas (hyphal coils), estrutura de micorriza do tipo Paris. A anatomia das ECM confirmou a colonização destes fungos nas raízes das plantas estudadas. O qPCR mostrou maior abundância de genes ITS na rizosfera em relação ao solo, assim como nas camadas superficiais (0-10 cm) em relação às mais profundas (10 cm abaixo). A Análise de Coordenadas Principais revelou diferenças na estrutura das comunidades de fungos nos tratamentos estudados, principalmente para a região da rizosfera, diferenciando o perfil de fungos do monocultivo de E. grandis dos demais tratamentos, assim como a influência da A. mangium na estruturação da comunidade. A análise de redundância mostrou a influência de alguns atributos químicos nas taxas de colonização e estruturação da comunidade. Dessa forma, conclui-se que em sistema de consórcio, uma espécie de planta parece ser mais influente do que a outra na estruturação da comunidade de fungos e essa influência é mais evidente na rizosfera. Além disso, os atributos químicos são fatores importantes na organização da comunidade fúngica. / The fungi represent about 75% of the microbial biomass in forest areas, performing important functions, from the mineralization of the organic residues to the availability of nutrients to plants through mycorrhizal associations, which influences the nutrient cycling and, consequently, the growth of trees. The objective of this work was to evaluate the community of fungi of the soil, rhizosphere and root system of Eucalyptus grandis and Acacia mangium planted in monocultures and consortium, and to find explanations for the observed patterns through the correlation with physical and chemical soil attributes and soil depth. The samples were collected at the Experimental Station of Forest Sciences of Itatinga in 2016, when the plants were 2 years old. Samples were collected in four treatments: monocultures of E. grandis and A. mangium and consortia of E. grandis and A. mangium, in which trenches were constructed to collect samples in the 0-10, 10-20, 20 -50 and 50-100 cm deep. The physical and biological attributes of the soil and the chemical attributes of soil, rhizosphere and roots were characterized. For the mycorrhizal evaluation, the number of spores of arbuscular mycorrhizal fungi (AMF) and the rates of root colonization by AMF and ectomycorrhizal fungi were quantified. The morphology of arbuscular mycorrhizal and ectomycorrhizal (ECM) structures was evaluated. The structure of the soil and rhizosphere fungi community by was evaluated by the technique of Terminal restriction fragment length polymorphism (T-RFLP). For this, the DNA was amplified using primers ITS1f-FAM and ITS4 and restriction of the fragments was performed with the enzyme HaeIII. The abundance of ITS gene copies of soil and rhizosphere was quantified by quantitative PCR (qPCR), using primers ITS1f and 5.8s. The physical, chemical and biological attributes had few variations among the evaluated treatments, being the greatest differences found between the depths. The number of spores (<29) and mycorrhizal colonization rates (<48%) were low in all treatments, and reduced with increasing depth. A. mangium plants did not form FMA. In the roots of E. grandis, there was no formation of arbuscules, but we found the presence of hyphal coils, mycorrhizal structures of the Paris type. The anatomy of the ECM confirmed the colonization of these fungi in the roots of the studied plants. The qPCR showed higher abundance of ITS genes in the rhizosphere in relation to the soil, as well as in the superficial layers (0-10 cm) in relation to the deeper ones (10 cm below). The Principal Coordinates Analysis revealed differences in the structure of the fungal communities in the treatments studied, especially for the rhizosphere region, differentiating the fungal profile of the E. grandis monoculture from the other treatments, as well as the influence of A. mangium on the structure of the community. The redundancy analysis showed the influence of some chemical soil attributes on the rates of colonization and community structuring. Thus, it is concluded that in a consortium system, one plant species seems to be more influential than the other in structuring the fungal community, and this influence is more evident in the rhizosphere. In addition, chemical attributes are important factors in the organization of the fungal community.

Made available in DSpace on 2015-03-26T13:51:51Z (GMT). No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 528396 bytes, checksum: 2b516aa2ea3ea48bfb173971c8b65f4c (MD5) Previous issue date: 2010-08-18 / Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico / The low germination percentages of P. microcarpus basidiospores represents a major drawback for obtaining monokaryotic strains for quantitative genetic studies on the mycorrhizal associations, the use of spores in mutagenesis experiments aiming at the identification of genes important to the symbiosis, and the use of these propagules as inoculants in forest nurseries. The characterization of the mRNA present within the fungal basidiospores may provide information on the level of preparedness of the spores to germinate and sustain initial hyphal growth. The aim of this work was to characterize the mRNA present in the basidiospores of the ectomycorrhizal fungus P. microcarpus after basidiosporogenesis. Total RNA was extracted from the mature basidiospores and mycelium and mRNA was used for cDNA synthesis. An analysis of the presence of 14 gene transcripts involved in lipid metabolism, glycogen mobilization, trehalose mobilization, nitrogen assimilation, glycolysis, pentose phosphate pathway and glucan degradation using cDNA from the fungal basidiospores and dikaryotic mycelium was done. qPCR analysis was performed to compare the amount of transcripts of the genes d15fa, ntrh, and ag13 which code respectively, for &#916;15 fatty acid desaturase, neutral &#945;-trehalase, and &#945;-1,3-glucosidase in the dikaryotic mycelium and basidiospores. The 14 transcripts studied were present both in the dikaryotic mycelium and in the basidiospores, indicating a preparedness of these propagules to initiate and sustain germination. qPCR analysis indicated a higher amount of transcripts of genes the d15fa, ntrh, and ag13 inside the basidiospores when compared to the dikaryotic mycelium. These results suggest a higher need for enzymes involved in the synthesis of unsaturated fatty acids, trehalose mobilization, and glucan degradation during basidiospore germination. A cDNA library was constructed from basidiospore mRNAs and 288 clones were sequenced. One hundred and nineteen sequences were obtained, resulting in a total of 12 ESTs (expressed sequence tags). The amino acid sequence deduced from the EST corresponding to clone 277 showed significant similarity to a protein involved in respiratory metabolism and may be important during the germination process. Other ESTs showed significant identity to unknown ESTs deposited in the NCBI database. These ESTs may code for proteins that are specific of the basidiospores of P. microcarpus. However, to confirm this hypothesis, other clones must be sequenced to better characterize the cDNA library. / As baixas percentagens de germinação dos basidiósporos do fungo ectomicorrízico Pisolithus microcarpus dificultam a obtenção de estirpes monocarióticas, material para estudos de genética quantitativa da associação micorrízica, inviabilizam a utilização de esporos em experimentos de mutagênese visando à identificação de genes importantes para a simbiose, além de dificultar a utilização desses propágulos como inoculantes em viveiros florestais. A caracterização do mRNA presente no interior desses basidiósporos poderá fornecer informações sobre o nível de preparação que têm para iniciar o processo de germinação e sustentar o crescimento inicial das hifas. O objetivo deste trabalho foi o de caracterizar os mRNA presentes nos basidiósporos do fungo ectomicorrízico P. microcarpus após a basidiosporogênese. O RNA total foi extraído de basidiósporos maduros e micélio, procedendo posteriormente a obtenção mRNA para a síntese de cDNA. Determinou-se a presença de transcritos de 14 genes envolvidos no metabolismo de lipídeos, na mobilização de glicogênio, na mobilização de trealose, na assimilação de nitrogênio, na via glicolítica, na via das pentoses fosfato e na degradação de glicanas. A análise por qPCR foi realizada visando comparar a quantidade de transcritos dos genes d15fa, ntrh e ag13 que codificam respectivamente as enzimas ácido graxo-&#916;15 desaturase, &#945;- trealase neutra e 1,3-&#945;-glicosidase, nos basidiósporos e no micélio dicariótico. Os 14 x transcritos avaliados foram encontrados tanto no micélio dicariótico quanto nos basidiósporos, sugerindo a preparação desses propágulos para iniciar e sustentar o processo de germinação. A análise por qPCR indicou maior quantidade de transcritos dos genes d15fa, ntrh e ag13 no interior dos basidiósporos quando comparado ao micélio dicariótico. Esse resultado sugere a participação de enzimas responsáveis pela síntese de ácidos graxos insaturados, mobilização de trealose e degradação de glicanas durante o processo de germinação. Uma biblioteca de cDNA foi construída a partir dos fragmentos de cDNA dos basidiósporos, sendo caracterizada por meio do sequenciamento de 288 clones. Foram obtidas 119 sequências que, ao serem agrupadas, resultaram em 12 ESTs (expressed sequence tags). A sequência de aminoácidos deduzida da EST referente ao clone 277 apresentou similaridade significativa com proteína envolvida no metabolismo respiratório, podendo ser importante durante o processo de germinação. Outras ESTs apresentaram identidade significativa com ESTs depositadas no banco de dados do NCBI ainda não identificadas. Alternativamente, sugere-se que essas ESTs possam ser codificadoras de proteínas específicas dos basidiósporos de P. microcarpus, importantes para a etapa de germinação desses propágulos.

Os fungos representam cerca de 75% da biomassa microbiana em áreas florestais, desempenhando funções importantes, desde a mineralização dos resíduos orgânicos até a disponibilização de nutrientes para plantas por meio das associações micorrízicas, o que influencia a ciclagem de nutrientes e, consequentemente, o crescimento das árvores. O objetivo desse trabalho foi avaliar a comunidade de fungos do solo, da rizosfera e do sistema radicular de Eucalyptus grandis e Acacia mangium plantados em monocultivos e em consórcio, e encontrar respostas para os padrões observados por meio da correlação com os atributos físicos, químicos, biológicos e a profundidade do solo. A coleta das amostras foi realizada na Estação Experimental de Ciências Florestais de Itatinga, em 2016, quando as plantas estavam com 2 anos de idade. Foram coletadas amostras em quatro tratamentos: monoculturas de E. grandis e de A. mangium e consórcios de E. grandis e de A. mangium, nos quais foram construídas trincheiras para coleta das amostras nas camadas de 0-10, 10-20, 20-50 e 50-100 cm de profundidade. Foram caracterizados os atributos físicos e biológicos do solo e os atributos químicos do solo, da rizosfera e das raízes. Para a avaliação micorrízica, foi quantificado o número de esporos de fungos micorrízicos arbusculares (FMA) e as taxas de colonização radicular por FMA e por fungos ectomicorrízicos. Foi avaliada a morfologia das estruturas das micorrizas arbusculares e ectomicorriza (ECM). A estrutura da comunidade de fungos do solo e da rizosfera foi avaliada por meio da técnica de Terminal restriction fragment length polymorphism (T-RFLP). Para isso, o DNA foi amplificado utilizando os primers ITS1f-FAM e ITS4 e a restrição dos fragmentos foi realizada com a enzima HaeIII. A abundância de cópias do gene ITS do solo e da rizosfera foi quantificada por PCR quantitativo (qPCR), utilizando os primers ITS1f e 5.8s. Os atributos físicos, químicos e biológicos tiveram poucas variações entre os tratamentos avaliados, sendo as maiores diferenças encontradas entre as profundidades. O número de esporos (<29) e as taxas de colonização micorrízica (<48%) foram baixos em todos os tratamentos, e se reduziram com o aumento da profundidade. As plantas de A. mangium não formaram micorrizas arbusculares. Nas raízes de E. grandis, não houve a formação de arbúsculos, mas foi verificada a presença de hifas enroladas (hyphal coils), estrutura de micorriza do tipo Paris. A anatomia das ECM confirmou a colonização destes fungos nas raízes das plantas estudadas. O qPCR mostrou maior abundância de genes ITS na rizosfera em relação ao solo, assim como nas camadas superficiais (0-10 cm) em relação às mais profundas (10 cm abaixo). A Análise de Coordenadas Principais revelou diferenças na estrutura das comunidades de fungos nos tratamentos estudados, principalmente para a região da rizosfera, diferenciando o perfil de fungos do monocultivo de E. grandis dos demais tratamentos, assim como a influência da A. mangium na estruturação da comunidade. A análise de redundância mostrou a influência de alguns atributos químicos nas taxas de colonização e estruturação da comunidade. Dessa forma, conclui-se que em sistema de consórcio, uma espécie de planta parece ser mais influente do que a outra na estruturação da comunidade de fungos e essa influência é mais evidente na rizosfera. Além disso, os atributos químicos são fatores importantes na organização da comunidade fúngica. / The fungi represent about 75% of the microbial biomass in forest areas, performing important functions, from the mineralization of the organic residues to the availability of nutrients to plants through mycorrhizal associations, which influences the nutrient cycling and, consequently, the growth of trees. The objective of this work was to evaluate the community of fungi of the soil, rhizosphere and root system of Eucalyptus grandis and Acacia mangium planted in monocultures and consortium, and to find explanations for the observed patterns through the correlation with physical and chemical soil attributes and soil depth. The samples were collected at the Experimental Station of Forest Sciences of Itatinga in 2016, when the plants were 2 years old. Samples were collected in four treatments: monocultures of E. grandis and A. mangium and consortia of E. grandis and A. mangium, in which trenches were constructed to collect samples in the 0-10, 10-20, 20 -50 and 50-100 cm deep. The physical and biological attributes of the soil and the chemical attributes of soil, rhizosphere and roots were characterized. For the mycorrhizal evaluation, the number of spores of arbuscular mycorrhizal fungi (AMF) and the rates of root colonization by AMF and ectomycorrhizal fungi were quantified. The morphology of arbuscular mycorrhizal and ectomycorrhizal (ECM) structures was evaluated. The structure of the soil and rhizosphere fungi community by was evaluated by the technique of Terminal restriction fragment length polymorphism (T-RFLP). For this, the DNA was amplified using primers ITS1f-FAM and ITS4 and restriction of the fragments was performed with the enzyme HaeIII. The abundance of ITS gene copies of soil and rhizosphere was quantified by quantitative PCR (qPCR), using primers ITS1f and 5.8s. The physical, chemical and biological attributes had few variations among the evaluated treatments, being the greatest differences found between the depths. The number of spores (<29) and mycorrhizal colonization rates (<48%) were low in all treatments, and reduced with increasing depth. A. mangium plants did not form FMA. In the roots of E. grandis, there was no formation of arbuscules, but we found the presence of hyphal coils, mycorrhizal structures of the Paris type. The anatomy of the ECM confirmed the colonization of these fungi in the roots of the studied plants. The qPCR showed higher abundance of ITS genes in the rhizosphere in relation to the soil, as well as in the superficial layers (0-10 cm) in relation to the deeper ones (10 cm below). The Principal Coordinates Analysis revealed differences in the structure of the fungal communities in the treatments studied, especially for the rhizosphere region, differentiating the fungal profile of the E. grandis monoculture from the other treatments, as well as the influence of A. mangium on the structure of the community. The redundancy analysis showed the influence of some chemical soil attributes on the rates of colonization and community structuring. Thus, it is concluded that in a consortium system, one plant species seems to be more influential than the other in structuring the fungal community, and this influence is more evident in the rhizosphere. In addition, chemical attributes are important factors in the organization of the fungal community.

A fertilização promove incrementos de 30 a 50 % na produtividade de eucaliptos, com especial resposta ao P. O manejo adequado da fertilização fosfatada contribui para a otimização dos custos no primeiro ano. Existem no mercado diversas opções de fornecimento de P às plantas. Em geral, as fontes fosfatadas distinguem-se pela concentração, forma e solubilidade do P. O alto teor de oxihidróxidos de Fe e Al nos solos tropicais diminuem a eficiência desse nutriente devido ao processo de adsorção. Novas tecnologias de fertilizantes fosfatados estão sendo desenvolvidas visando aumentar esta eficiência de utilização, as quais necessitam de validação e comprovação dos seus efeitos em condições reais de crescimento do povoamento. Uma alternativa para aumentar a eficiência do P é a complexação deste com substâncias húmicas (complexo P-metal- SH), pois podem diminuir os processos de adsorção e possibilitar o maior aproveitamento do nutriente. O uso de técnicas de fracionamento do P no solo são amplamente utilizadas para identificar os reservatórios de P no solo e, consequentemente, sua disponibilidade à planta. A dinâmica das frações de P no solo é influenciada diretamente pela planta e pela microbiota do solo por meio de adaptações físicas e químicas do sistema radicular e ou remobilização interna de ácidos orgânicos. Objetivando compreender a dinâmica do P na interface planta- solo em um plantio de Eucalyptus grandis, foram propostos dois estudos: i) caracterização dos reservatórios de P a longo prazo e as adaptações desenvolvidas pelas plantas para aumentar a absorção de P, ii) identificação dos reservatórios de P inorgânico (Pi) lábil e a remobilização dos ácidos orgânicos nos tecidos vegetais ao longo de um ano. Constatou-se que o uso de fontes minerais de P alteram as frações lábeis e moderadamente lábeis do P no solo, não influenciando a fração não-lábil. As frações orgânicas lábeis e moderadamente lábeis contribuem consideravelmente para a nutrição da planta, em especial quando não há fertilização com P. O uso do complexo P-metal-SH incrementou a fração orgânica moderadamente lábil nos primeiros 12 meses com posterior redução. Houve equilíbrio entre as frações de P no solo e após o esgotamento das frações lábeis, as frações não lábeis foram reduzidas. O P-residual diminuiu em todos os tratamentos, em especial, no tratamento Controle. A produção de raízes finas na camada de 0-100 cm ultrapassou 6 Mg ha-1, sem diferenças entre os tratamentos. Todavia, notou-se claramente o efeito da aplicação localizada do fertilizante na densidade do sistema radicular, que apresentou maiores concentrações na linha de plantio. O comprimento específico das raízes finas na camada superficial apresentou distribuição oposta à atividade da fosfatase ácida e da ectomicorrização nos tratamentos Controle e fosfato reativo (FNR), exceto para o P solúvel convencional (PSC) que apresentou distribuição homogênea ao redor da árvore. O uso do P solúvel convencional estimulou a simbiose com micorrizas, e estas contribuíram para os processos de mineralização das frações orgânicas de P no solo por meio da exsudação de fosfatase ácida. Analisando a dinâmica das frações inorgânicas lábeis em curto período, nos primeiros 120 dias pós-plantio foi observado equilíbrio dinâmico entre as frações de Pi lábil no solo, exceto para o Controle que apresentou reduções constantes em todas as frações. Em períodos de excedente hídrico, as plantas absorveram altas quantidades de P, acumulando altos teores de ácidos orgânicos no tronco e, em períodos de estresse hídrico, houve remobilização dos ácidos orgânicos do tronco para as folhas, a fim de manter os processos metabólicos. / Fertilization promotes 30 to 50% increments in forest productivity, with a special response to P input. The adequate management of phosphate fertilization contributes to cost optimization in the first year. There are several options on the market for supplying P to plants. In general, phosphate sources are distinguished by the concentration, form and solubility of P. The high content of Fe and Al oxyhydroxides in tropical soils reduces the efficiency of this nutrient due to adsorption processes. New phosphate fertilizer technologies are being developed aiming to increase this efficiency of use, which need validation and proof of their effects under real conditions of population growth. An alternative to increase the efficiency of the P is the complexation of this with humics substances (AH- CA-P complex), since they can decrease the adsorption processes and allow the greater use of the nutrient. The use of P fractionation techniques in soil are widely used to identify P reservoirs in the soil and consequently their availability to the plant. The dynamics of P fractions in soil are directly influenced by the plant and soil microbiota through physical and chemical adaptations of the root system and / or internal remobilization of organic acids. Two experiments were carried out: i) long-term characterization of P reservoirs and adaptations developed by plants to increase P uptake; and ii) identification of labile Pi reservoirs and remobilization of organic acids in plant tissues over a year. It was found that the mineral source use of P changes the labile and moderately labile fractions of P in the soil, not influencing the non-labile fraction. The labile and moderately labile organic fractions contribute considerably to plant nutrition, especially when not fertilized with P. The use of the P- metal-SH complex increased the moderately labile organic fraction in the first 12 months with subsequent reduction. We observed the equilibrium between the fractions of P in the soil and after the exhaustion of the labile fractions, the non-labile fractions were reduced. The P-residual decreased for all treatments, especially for the control treatment. The yield of fine roots in the 0- 100 cm layer exceeded 6 Mg ha-1, with no differences between treatments. However, the effect of the localized application of the fertilizer on the density of the root system, which presented higher concentrations in the planting line, was clearly noticed. The specific length of the roots in the superficial deep presented opposite distribution to the activity of the acid phosphatase and ectomycorrhizal colonization for all the treatments, except for the PSC that presented homogenous distribution around the tree. The use of conventional soluble phosphorus stimulated the symbiosis with mycorrhizae, and this contributed to the processes of mineralization of the organic fractions of P in the soil through the exudation of acid phosphatase. Analyzing the dynamics ofthe inorganic fractions in a short period, in the first 120 days post-planting, equilibrium was observed between the fractions of labile Pi in the soil, except for the control treatment that showed constant reductions in all fractions. In periods of water supply, the plants absorbed high amounts of P, accumulating high levels of organic acids in the stem and during periods of water stress, it was observed the remobilization of the AOs from the stem to the leaves, to maintain the metabolic processes.

A fertilização promove incrementos de 30 a 50 % na produtividade de eucaliptos, com especial resposta ao P. O manejo adequado da fertilização fosfatada contribui para a otimização dos custos no primeiro ano. Existem no mercado diversas opções de fornecimento de P às plantas. Em geral, as fontes fosfatadas distinguem-se pela concentração, forma e solubilidade do P. O alto teor de oxihidróxidos de Fe e Al nos solos tropicais diminuem a eficiência desse nutriente devido ao processo de adsorção. Novas tecnologias de fertilizantes fosfatados estão sendo desenvolvidas visando aumentar esta eficiência de utilização, as quais necessitam de validação e comprovação dos seus efeitos em condições reais de crescimento do povoamento. Uma alternativa para aumentar a eficiência do P é a complexação deste com substâncias húmicas (complexo P-metal- SH), pois podem diminuir os processos de adsorção e possibilitar o maior aproveitamento do nutriente. O uso de técnicas de fracionamento do P no solo são amplamente utilizadas para identificar os reservatórios de P no solo e, consequentemente, sua disponibilidade à planta. A dinâmica das frações de P no solo é influenciada diretamente pela planta e pela microbiota do solo por meio de adaptações físicas e químicas do sistema radicular e ou remobilização interna de ácidos orgânicos. Objetivando compreender a dinâmica do P na interface planta- solo em um plantio de Eucalyptus grandis, foram propostos dois estudos: i) caracterização dos reservatórios de P a longo prazo e as adaptações desenvolvidas pelas plantas para aumentar a absorção de P, ii) identificação dos reservatórios de P inorgânico (Pi) lábil e a remobilização dos ácidos orgânicos nos tecidos vegetais ao longo de um ano. Constatou-se que o uso de fontes minerais de P alteram as frações lábeis e moderadamente lábeis do P no solo, não influenciando a fração não-lábil. As frações orgânicas lábeis e moderadamente lábeis contribuem consideravelmente para a nutrição da planta, em especial quando não há fertilização com P. O uso do complexo P-metal-SH incrementou a fração orgânica moderadamente lábil nos primeiros 12 meses com posterior redução. Houve equilíbrio entre as frações de P no solo e após o esgotamento das frações lábeis, as frações não lábeis foram reduzidas. O P-residual diminuiu em todos os tratamentos, em especial, no tratamento Controle. A produção de raízes finas na camada de 0-100 cm ultrapassou 6 Mg ha-1, sem diferenças entre os tratamentos. Todavia, notou-se claramente o efeito da aplicação localizada do fertilizante na densidade do sistema radicular, que apresentou maiores concentrações na linha de plantio. O comprimento específico das raízes finas na camada superficial apresentou distribuição oposta à atividade da fosfatase ácida e da ectomicorrização nos tratamentos Controle e fosfato reativo (FNR), exceto para o P solúvel convencional (PSC) que apresentou distribuição homogênea ao redor da árvore. O uso do P solúvel convencional estimulou a simbiose com micorrizas, e estas contribuíram para os processos de mineralização das frações orgânicas de P no solo por meio da exsudação de fosfatase ácida. Analisando a dinâmica das frações inorgânicas lábeis em curto período, nos primeiros 120 dias pós-plantio foi observado equilíbrio dinâmico entre as frações de Pi lábil no solo, exceto para o Controle que apresentou reduções constantes em todas as frações. Em períodos de excedente hídrico, as plantas absorveram altas quantidades de P, acumulando altos teores de ácidos orgânicos no tronco e, em períodos de estresse hídrico, houve remobilização dos ácidos orgânicos do tronco para as folhas, a fim de manter os processos metabólicos. / Fertilization promotes 30 to 50% increments in forest productivity, with a special response to P input. The adequate management of phosphate fertilization contributes to cost optimization in the first year. There are several options on the market for supplying P to plants. In general, phosphate sources are distinguished by the concentration, form and solubility of P. The high content of Fe and Al oxyhydroxides in tropical soils reduces the efficiency of this nutrient due to adsorption processes. New phosphate fertilizer technologies are being developed aiming to increase this efficiency of use, which need validation and proof of their effects under real conditions of population growth. An alternative to increase the efficiency of the P is the complexation of this with humics substances (AH- CA-P complex), since they can decrease the adsorption processes and allow the greater use of the nutrient. The use of P fractionation techniques in soil are widely used to identify P reservoirs in the soil and consequently their availability to the plant. The dynamics of P fractions in soil are directly influenced by the plant and soil microbiota through physical and chemical adaptations of the root system and / or internal remobilization of organic acids. Two experiments were carried out: i) long-term characterization of P reservoirs and adaptations developed by plants to increase P uptake; and ii) identification of labile Pi reservoirs and remobilization of organic acids in plant tissues over a year. It was found that the mineral source use of P changes the labile and moderately labile fractions of P in the soil, not influencing the non-labile fraction. The labile and moderately labile organic fractions contribute considerably to plant nutrition, especially when not fertilized with P. The use of the P- metal-SH complex increased the moderately labile organic fraction in the first 12 months with subsequent reduction. We observed the equilibrium between the fractions of P in the soil and after the exhaustion of the labile fractions, the non-labile fractions were reduced. The P-residual decreased for all treatments, especially for the control treatment. The yield of fine roots in the 0- 100 cm layer exceeded 6 Mg ha-1, with no differences between treatments. However, the effect of the localized application of the fertilizer on the density of the root system, which presented higher concentrations in the planting line, was clearly noticed. The specific length of the roots in the superficial deep presented opposite distribution to the activity of the acid phosphatase and ectomycorrhizal colonization for all the treatments, except for the PSC that presented homogenous distribution around the tree. The use of conventional soluble phosphorus stimulated the symbiosis with mycorrhizae, and this contributed to the processes of mineralization of the organic fractions of P in the soil through the exudation of acid phosphatase. Analyzing the dynamics ofthe inorganic fractions in a short period, in the first 120 days post-planting, equilibrium was observed between the fractions of labile Pi in the soil, except for the control treatment that showed constant reductions in all fractions. In periods of water supply, the plants absorbed high amounts of P, accumulating high levels of organic acids in the stem and during periods of water stress, it was observed the remobilization of the AOs from the stem to the leaves, to maintain the metabolic processes.