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Preparação e caracterização de compósitos magnéticos contendo Azocaseína para purificação de tripsina

ALVES, Maria Helena Menezes Estevam 21 February 2017 (has links)
Submitted by Fernanda Rodrigues de Lima (fernanda.rlima@ufpe.br) on 2018-07-25T20:10:26Z No. of bitstreams: 2 license_rdf: 811 bytes, checksum: e39d27027a6cc9cb039ad269a5db8e34 (MD5) TESE Maria Helena Menezes Estevam Alves.pdf: 6983006 bytes, checksum: 85aa90c9abe94339acd77b4d9115bfd0 (MD5) / Approved for entry into archive by Alice Araujo (alice.caraujo@ufpe.br) on 2018-07-27T22:22:29Z (GMT) No. of bitstreams: 2 license_rdf: 811 bytes, checksum: e39d27027a6cc9cb039ad269a5db8e34 (MD5) TESE Maria Helena Menezes Estevam Alves.pdf: 6983006 bytes, checksum: 85aa90c9abe94339acd77b4d9115bfd0 (MD5) / Made available in DSpace on 2018-07-27T22:22:29Z (GMT). No. of bitstreams: 2 license_rdf: 811 bytes, checksum: e39d27027a6cc9cb039ad269a5db8e34 (MD5) TESE Maria Helena Menezes Estevam Alves.pdf: 6983006 bytes, checksum: 85aa90c9abe94339acd77b4d9115bfd0 (MD5) Previous issue date: 2017-02-21 / CAPES / Proteases estão entre as mais produzidas no mundo. Dentre elas a tripsina é a mais utilizada em diversas áreas da biotecnologia. A purificação de biomoléculas por partículas magnéticas baseia-se na interação dos ligantes, componentes químicos presentes na superfície das partículas, com a molécula alvo. Neste trabalho, foram preparados dois compósitos magnéticos: o primeiro a partir de azocaseína e óxido de ferro (mAzo) e o segundo, a partir de partículas de óxido de ferro revestidas com polianilina tratadas com azocaseína (mPANI-Azo). Os novos compósitos foram avaliados como matriz para a purificação de tripsina de extrato bruto de Tilapia (Oreochromis niloticus). Uma caracterização físico-química do compósito magnético (mAzo) foi também realizada para descrever as principais características do material sintetizado. Os resultados da purificação mostraram que as partículas mAzo e mPANI-Azo permitiram purificar o extrato bruto de peixe, sem nenhum pré tratamento, 61 vezes e 43 vezes, respectivamente. A eletroforese (SDS-PAGE) da alíquota purificada revelou uma banda a 24 kDa, valor compatível com tripsina obtida de vísceras de tilapia. As analises das técnicas de caracterização (MEV-EDX, DRX, FTIR e medidas de magnetização) evidenciaram o sucesso da síntese do compósito magnético (mAzo). Além disso, foi observado que as partículas mAzo são heterogêneas e apresentam rápida resposta magnética. Por fim, ao purificar a tripsina com precipitação, dialise e mAzo obteve-se um aumento da purificação de até 220 vezes. Concluímos que o compósito magnético mAzo mostrou ser uma matriz eficiente para a purificação de e o reuso do manteve a qualidade da purificação. Nesta pesquisa desenvolvemos uma técnica de purificação simples, eficaz e econômica que pode ser utilizada para a purificação de proteases utilizando as partículas mAzo como matriz. / Proteases are among the most produced in the world. Among them trypsin is the most used in several areas of biotechnology. The purification of biomolecules by magnetic particles is based on the interaction of the binders, chemical components present on the surface of the particles, with the target molecule. In this work, two magnetic composites were prepared: the first from azocasein and iron oxide (mAzo) and the second from iron oxide particles coated with azacasein-treated polyaniline (mPANI-Azo). The new composites were evaluated as a matrix for the purification of trypsin from Tilapia (Oreochromis niloticus) crude extract. A physical-chemical characterization of the magnetic composite (mAzo) was also performed to describe the main characteristics of the synthesized material. The results of the purification showed that the mAzo and mPANI-Azo particles allowed to purify the fish crude extract, without any pretreatment, 61 times and 43 times, respectively. Electrophoresis (SDS-PAGE) of the purified aliquot revealed a band at 24 kDa, trypsin compatible value obtained from tilapia viscera. The analysis of the characterization techniques (SEM-EDX, XRD, FTIR and measurements of magnetization) evidenced the success of the synthesis of the magnetic composite (mAzo). In addition, it was observed that the mAzo particles are heterogeneous and have a fast magnetic response. Finally, after precipitation, dialysis and mAzo treatment, a purification increase up to 220 times was obtained. We conclude that the magnetic composite mAzo has proved to be an efficient matrix for the purification and reuse of the quality of the purification. In this research we have developed a simple, efficient and economical purification technique that can be used for the purification of proteases using the mAzo particles as matrix.
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Otimização da produção, caracterização enzimática e purificação de queratinases de fungos procedentes do solo, estocados na Micoteca URM

SOUSA, Minelli Albuquerque 20 December 2011 (has links)
Submitted by Pedro Barros (pedro.silvabarros@ufpe.br) on 2018-09-03T21:24:02Z No. of bitstreams: 2 license_rdf: 811 bytes, checksum: e39d27027a6cc9cb039ad269a5db8e34 (MD5) TESE Minelli Albuquerque Sousa.pdf: 1685422 bytes, checksum: aa0b6a25cf3fdcb5be14a26639ecfd22 (MD5) / Approved for entry into archive by Alice Araujo (alice.caraujo@ufpe.br) on 2018-09-17T22:19:53Z (GMT) No. of bitstreams: 2 license_rdf: 811 bytes, checksum: e39d27027a6cc9cb039ad269a5db8e34 (MD5) TESE Minelli Albuquerque Sousa.pdf: 1685422 bytes, checksum: aa0b6a25cf3fdcb5be14a26639ecfd22 (MD5) / Made available in DSpace on 2018-09-17T22:19:53Z (GMT). No. of bitstreams: 2 license_rdf: 811 bytes, checksum: e39d27027a6cc9cb039ad269a5db8e34 (MD5) TESE Minelli Albuquerque Sousa.pdf: 1685422 bytes, checksum: aa0b6a25cf3fdcb5be14a26639ecfd22 (MD5) Previous issue date: 2011-12-20 / CAPES / Materiais queratinosos são insolúveis e resistentes à degradação por enzimas proteolíticas comuns, tornando-se importante o estudo de microrganismos produtores de queratinases para ser usado na indústria biotecnológica. O objetivo deste estudo foi selecionar fungos isolados do solo armazenados na Micoteca URM, para ser empregado na síntese de queratinases extracelular, caracterizar as cepas quanto a capacidade queratinolítica, efeito de diferentes substratos, da composição do meio e das condições de cultivo na produção de queratinase em cultivo submerso, otimizara aprodução, caracterizar e purificar a enzima. Para a determinação da capacidade de utilizar substratos queratinosos, 50 cepas fúngicas foram utilizadas. Elas foram cultivadas em fermentação submersa em meio contendo sais e penas durante 10 dias a 30 °C em agitador orbital a 120 rpm. Para avaliar a capacidade queratinolítica e o efeito de diferentes substratos na produção da queratinase foram utilizadas as seguintes cepas: Aspergillus sulphureus URM 5029, A. avenaceus URM5051, A. sclerotiorum URM5586 e Trichoderma aureoviride URM5574. Com a linhagem que apresentou a melhor produção e o melhor substrato, foi realizado estudos do efeito da composição do meio, condições de cultivo na produção da queratinase, otimização da produção, caracterização e purificação da enzima. Aspergillus sulphureus, Trichoderma aureoviride, Aspergillus avenaceus e A. sclerotiorum mostraram os melhores resultados com 7,35 U /ml, 7,2 U/ml, 6,7 U/ml e 6,05 U/ml de atividade queratinolítica, respectivamente. As espécies testadas se destacaram na colonização dos diferentes substratos queratinosos e o melhor substrato para a produção de queratinase foi a pena de frango. A produção de queratinase por A. sulphureus foi incrementada nas seguintes condições: 2 g/50 ml de pena de frango, 0,1 g/50 ml de NaNo₃, 0,001 g/50 ml de CaCl₂, pH 7,8, 35ºC, 160 rpm e 10⁶ esporos/ml em cultivo líquido submerso em 10 dias de incubação. A partir desses resultados foi realizado um planejamento fatorial completo 2⁴, para otimizar a produção da queartinase, e as melhores condições de produção foram: pH 8,0, 36 °C, 120 rpm, 2,5% (p/v) de penas de frango em 10 dias, com a máxima atividade de 10,06 U/ml, mostrando um aumento de 1,44 vezes. A queratinase de A. sulphureus apresentou melhor atividade em pH 10,0 e 35 ºC e é pouco inibida na presença de íons metais (Co²⁺, Mg²⁺, Cu²⁺, Zn²⁺, Mn²⁺, Ca²⁺) e PMSF e fortemente inibida por EDTA, sugerindo ser uma metaloprotease. As melhores condições para purificação da queratinase de Aspergillus sulphureus, após análise estatística, foram: massa molecular do PEG, 8000; concentração do PEG, 20% e concentração de citrato 15%, apresentando aumento de pureza e recuperação queratinolítica de 25,04 e 184,9%, respectivamente. Com base nos resultados, concluímos que a preservação, sob óleo mineral é satisfatório para manter a viabilidade e a taxonomia das culturas por longos períodos de tempo e os microorganismos do solo podem ser uma interessante fonte de fungos produtores de queratinases. Além disso a capacidade da queratinase de A. sulphureus ser estável em uma ampla faixa de pH (6,5–9,0) e temperatura (25–60 °C) sugere o uso desta cepa em processos biotecnológicos industriais. / Keratinous materials are insoluble and resistant to degradation by common proteolytic enzymes, making it important to study keratinases producing microorganisms for use in the biotechnology industry. The aim of this study was to select fungi isolated from soil stored in the URM Culture Collection, to be employed in the synthesis of extracellular keratinases, characterize the strains and the ability queratinolítica, effect of different substrates, the medium composition and cultivation conditions in the production of keratinase in submerged culture, aprodução optimize, characterize and purify the enzyme. To determine the ability to use keratinous substrates, 50 fungal strains were used. They were grown in submerged fermentation in medium containing salts and penalties for 10 days at 30 ° C on an orbital shaker at 120 rpm. To assess the ability queratinolítica and the effect of different substrates on keratinase production we used the following strains: Aspergillus sulphureus URM 5029, A. avenaceus URM5051, A. sclerotiorum URM5586 and Trichoderma aureoviride URM5574. With a lineage that had the best production and best substrate, was carried out studies of the effect of medium composition, cultivation conditions on keratinase production, production optimization, characterization and purification of the enzyme. Aspergillus sulphureus, Trichoderma aureoviride, Aspergillus avenaceus and A. sclerotiorum showed the best results with 7.35 U / ml, 7.2 U / ml, 6.7 U / ml and 6.05 U / ml keratinolytic activity, respectively. The species tested stood out in the colonization of different keratinous substrates and the best substrate for the production of keratinase was the poultry feathers. Keratinase production by A. sulphureus was increased in the following conditions: 2 g/50 ml of poultry feathers, 0.1 g/50 ml of NaNO3, CaCl2 0.001 g/50 ml, pH 7.8, 35 ° C, 160 rpm and 106 spore/ml in submerged in liquid culture 10 days of incubation. From these results we carried out a full 2⁴ factorial design to optimize the production of queartinase, and the best production conditions were: pH 8.0, 36 ° C, 120 rpm, 2.5% (w/v) feather chicken in 10 days, with maximum activity of 10.06 U/ml, showing an increase of 1.44 times. The keratinase of A. sulphureus showed better activity at pH 10.0 and 35 ° C and is slightly inhibited in the presence of metal ions (Co²⁺, Mg²⁺, Cu²⁺, Zn²⁺, Mn²⁺, Ca²⁺) and PMSF and strongly inhibited by EDTA, suggesting that a metalloprotease. The best conditions for purification of keratinase from Aspergillus sulphureus, after statistical analysis were: molecular weight of PEG 8000, PEG concentration, 20% and 15% concentration of citrate, an increase of purity and keratinolytic recovery of 25.04 and 184.9%, respectively. Based on the results, we conclude that the preservation under mineral oil is satisfactory to maintain the viability and taxonomy of cultures for long periods of time and soil microorganisms may be an interesting source of keratinases producing fungi. Furthermore the ability of keratinase of A. sulphureus be stable over a wide pH range (6.5 to 9.0) and temperature (25-60 ° C) suggests the use of this strain in industrial biotechnology processes.
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Metabolismo fotossintético em genótipos de Jatropha curcas L. submetidos à deficiência hídrica

SILVA, L. D. 12 December 2016 (has links)
Made available in DSpace on 2018-08-01T22:35:02Z (GMT). No. of bitstreams: 1 tese_8385_Leandro Dias.pdf: 2753443 bytes, checksum: 0185c5d0ffbf0c4cc09248757b0f4488 (MD5) Previous issue date: 2016-12-12 / Jatropha curcas L. pertencente à família Euphorbiacae, tem recebido atenção no cenário mundial pela sua aplicabilidade nos setores ambiental e econômico, por meio da utilização em programas de recuperação de áreas degradadas, como cerca-viva e na produção de biocombustível em substituição aos combustíveis fósseis. Parte do interesse pelo cultivo dessa espécie está relacionada ao uso de sua semente que apresenta teor de óleo entre 35 e 40%. Com o objetivo de compreender as alterações no metabolismo fotossintético de genótipos de Jatropha curcas L. submetidos ao déficit hídrico, realizou-se um experimento em casa de vegetação utilizando nove genótipos de distintas regiões do Brasil: CNPAE121 (Bom Jesus-RJ), 124 (Maranhão-MA), 148 (Candeias-BA), 168 (Minas Gerais-MG), 222 (Paraná-PR), 215 (São Francisco do Glória-MG), 226 (Água de Santa Bárbara-SP), 298 (Sidrolândia-MS) e 299 (Rio Grande do Sul-RS), oriundos do Banco de Germoplasma da Embrapa Agroenergia. Sementes desses materiais foram colocadas para germinar em vasos com capacidade para 12 dm³, contendo solo classificado como latossolo amarelo distrófico. Após 20 dias da germinação realizou-se o desbaste, deixando apenas uma planta por vaso. Imediatamente os vasos foram cobertos com papel alumínio para evitar a evaporação e o aquecimento do solo, iniciando assim, o tratamento de deficiência hídrica por um período de 42 dias. Os tratamentos consistiram em dois regimes hídricos medidos em percentagem de capacidade de campo (CC): plantas controle (100% da CC) e deficiência hídrica (50% da CC). O primeiro capítulo aborda os estudos relacionados à amplitude da mudança C3-MAC induzida pela deficiência hídrica (DH) em J. curcas através de avaliações da acidificação durante a noite de tecidos foliar e caulinar, bem como da atividade da fosfoenolpiruvato carboxilase (PEPC) e composição isotópica de carbono (&#948;13C). A área foliar específica (AFE) diferiu significativamente (p<0.05) para os genótipos e entre os tratamentos de DH aos 42 DAT. A atividade da fosfoenolpiruvato carboxilase (PEPC) nas folhas plantas sob DH aumentou significativamente em relação às plantas controle, tanto em amostras coletadas às 4 h (167%) quanto às 16 h (187%). O acúmulo de ácidos orgânicos (malato e citrato) diferenciou entre os genótipos e os tratamentos de DH para todas as quantificações. O acúmulo de malato ocorreu entre os regimes hídricos apenas para os genótipos 148, 222, 215 e 298. Entretanto, o acúmulo de citrato somente ocorreu para o genótipo 215, que se diferenciou dos demais, com valores médios entre 59 e 73 &#956;mol H+/g MF para as plantas controle e sob DH, respectivamente. A DH levou a aumento significativo no teor de açúcares solúveis totais (AST) média de 62% quando comparadas às plantas controle. O teor de amido teve aumento nas plantas controle em 78% em média ao comparadas com as plantas sob DH. Houve diferenças significativas (p<0.05) entre os genótipos, bem como entre os tratamentos de DH, na composição isotópica de carbono (&#948;13C). Contudo, o 121 foi o único a diferenciar estatisticamente entre os regimes hídricos, com diminuição dos valores (-34.7) de &#948;13C sob DH. O segundo capítulo relata os resultados ao estresse oxidativo induzido por deficiência hídrica. Não foram verificadas diferenças significativas (p<0.05) entre os genótipos e entre os tratamentos de deficiência hídrica (DH) para o potencial hídrico foliar (&#936;w). No entanto, diferenças significativas foram observadas entre os genótipos, bem como entre os tratamentos de DH para o potencial osmótico (&#936;s). Os genótipos 222 e 215 se destacaram em relação aos vii demais, apresentando uma amplitude de -0.53 (plantas controle) e -0.73 MPa (plantas sob DH), respectivamente. Diferenças significativas foram encontradas para o conteúdo de prolina entre os genótipos e tratamentos de DH. As plantas submetidas à DH apresentaram um aumento de 56% quando comparadas às plantas controle. Aos 42 dias após tratamento (DAT) houve diferença significativa nas trocas gasosas foliares, tanto os genótipos quanto os tratamentos de DH. Nesse momento foram observadas reduções nos valores da taxa fotossintética (PN), condutância estomática (gs), taxa transpiratória (E) e relação Ci/Ca de 62, 112, 78 e 23% respectivamente, em relação às plantas controle. Em relação às eficiências intrínseca (PN/gs) e instantânea (PN/E) do uso da água, verificou-se que os genótipos apresentaram diferenças significativas (p<0.05), bem como entre os regimes hídricos não houve diferença significativa (p<0.05) entre os tratamentos de DH para o teor de clorofila a (Chl a), com exceção do genótipo 121, onde as plantas de DH apresentaram um aumento (24%) em relação as plantas controle. As enzimas antioxidantes dismutase do superóxido (SOD), peroxidase do guaiacol (GPX) e catalase (CAT) apresentaram diferenças significativas (p<0.05) para os genótipos e tratamentos de DH. Aumento da SOD foi de 35%, da GPX de 44% e da CAT de 35%, quando comparadas as plantas sob DH em relação às plantas controle.). Em geral, os genótipos apresentaram um eficiente mecanismo de defesa contra o estresse oxidativo induzido pela seca. Tal estratégia, observado em todos os genótipos, é sugerido para ser um componente importante de tolerância à seca em J. curcas. Embora J. curcas seja considerada uma planta que tolera a seca, ela é capaz de aumentar a eficiência do uso da água mudando de C3 para metabolismo MAC sob baixa disponibilidade de água. Níveis primários dessa alteração foram encontrados nesta pesquisa, o que sugere ser esse um potencial mecanismo de tolerância a ser investigado futuramente. Palavras-chave: ácidos orgânicos, enzimas antioxidantes, Euphorbiaceae, estresse abiótico, trocas gasosas
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Redução da viscosidade em suco de laranja concentrado com tratamento enzimatico

Onofre, Patricia Maria 25 January 1996 (has links)
Orientadores: Jose Gilberto Jardine, Javier Teles Romero / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Engenharia de Alimentos / Made available in DSpace on 2018-07-20T21:57:32Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Onofre_PatriciaMaria_M.pdf: 2445420 bytes, checksum: d87712d06fe909ad186b25967fea9cab (MD5) Previous issue date: 1995 / Resumo: Foi objetivo dessa pesquisa, o desenvolvimento de uma tecnologia que permitisse obter índices de concentração de sólidos solúveis do suco de laranja superiores à 65 °Brix sem elevar os valores da viscosidade. Conseguiu-se a hidrólise das macromoléculas responsáveis pelo aumento da viscosidade do suco de laranja com a utilização do complexo enzimático Citrozym 100L, produzido pela Novo Nordisk, favorecendo a etapa de concentração e satisfazendo plenamente o objetivo do trabalho. As amostras de suco de laranja tratadas com o complexo enzimático Citrozym 100L apresentaram uma acentuada redução na viscosidade quando comparadas com o suco não tratado, sendo em tomo de 60% para as concentrações de sólidos solúveis de 73 °Brix . A avaliação sensorial mostrou não haver diferenças significativas quanto ao sabor, aroma e cor entre o suco de laranja tratado com o complexo enzimático e o suco não tratado / Abstract: The objective of this research was to develop a new technology aimed at obtaining a concentration index of soluble solids in orange juice, greates than 65°Brix, without raising the viscosity of the fluid. The hydrolysis of the macromolecules which are responsible for the increase of viscosity of orange juice, was attained by using the enzyme complex Citrozym 100L, produced by Novo Nordisk, which allowed for the concentration stage to be carried out as planned in the objectives of this research. The orange juice samples treated with the enzyme complex Citrozym 100L showed a remarkable viscosity redution when compared with untreated orange juice, namely 60% for the 73°Brix soluble solids concentrations. The sensorial evaluation showed no significant diferences with respect to odor, flavor and color between the enzyme treated and untreated juices / Mestrado / Mestre em Tecnologia de Alimentos
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Oxido de titanio (IV) hidratado disperso na superficie da x-celulose : preparação, caracterização e aplicações

Silva, Lindomar Roberto Damasceno da 21 July 2018 (has links)
Orientador: Yoshitaka Gushikem / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Quimica / Made available in DSpace on 2018-07-21T05:17:15Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Silva_LindomarRobertoDamascenoda_D.pdf: 5768749 bytes, checksum: 67a64b0a88d333382549c6f45748d037 (MD5) Previous issue date: 1996 / Doutorado
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Utilização de reator de mistura com enzima livre para obtenção de xaropes de açucar invertido

Steckelberg, Cláudia, 1967- 17 December 1996 (has links)
Orientador: Silvio Roberto Andrietta / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Engenharia Quimica / Made available in DSpace on 2018-07-21T21:30:40Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Steckelberg_Claudia_M.pdf: 2870440 bytes, checksum: 92525c78dcfb603910f634d256b9fd03 (MD5) Previous issue date: 1996 / Resumo: No Brasil os adoçantes líquidos obtidos a partir da sacarose são uma alternativa viável, tendo em vista ser este país um grande produtor de cana-de-açúcar, matéria-prima a qual tem a sacarose como seu maior componente. Como no Brasil, a maioria das indústrias consumidoras de açúcar não possuem estrutura de recebimento deste, à granel, toma-se propício a criação de uma estrutura para a recepção e estocagem de adoçantes líquidos, pois seu custo de instalação é significativamente menor em relação aos sistemas de armazenagem de açúcar cristal a granel. A grande vantagem associada a utilização de adoçantes líquidos é que o produto chega à fábrica pronto para ser utilizado, não sendo necessário que a indústria possua uma unidade de dissolução de açúcar e tratamento de calda. Os objetivos deste trabalho envolvem a otimização do processo de hidrólise da sacarose por via enzimática e avaliação preliminar da sua viabilidade técnica e econômica. Para o desenvolvimento deste trabalho utilizou-se duas enzimas produzidas comercialmente, a Invertina (invertase) e a Novozym 230 (inulinase). Inicialmente foi feita a caracterização das enzimas invertase e inulinase no que se refere ao pH e temperatura para determinação do ponto de maior atividade de cada uma. Estes resultados foram obtidos por dois métodos de otimização (única variável e múltiplas variáveis), para se obter os pontos de máximo. Estudou-se também a meia vida para essas duas enzimas. A partir das condições de máxima atividade (pH e temperatura) e meia vida de cada enzima, otimizou-se o reator de hidrólise da sacarose, levando-se em conta as limitações industrias incluindo a viabilidade econômica. Levou-se em consideração a temperatura de operação, a concentração inicial de sacarose e a massa de enzima utilizada. Para tanto, foi utilizado o planejamento experimental fatorial de dois níveis e o método de superfície de resposta para a análise dos dados. Através dos resultados pode-se observar que o método de uma única variável levou ao ponto de máxima atividade falso (pH = 4,5 e temperatura 60°C, para invertase e pH = 4,5 e temperatura 70°C, para inulinase) quando comparado com os resultados de múltiplas variáveis (pH = 4,9 e temperatura 57°C, para invertase e pH = 4,6 e temperatura 65°C, para inulinase). Nas condições de máxima atividade destas enzimas a meia vida foi de 1,79 horas para invertase e 1,11 horas para inulinase. Pôde-se concluir pelos resultados obtidos, que o processo de produção de xarope invertido utilizando reator de mistura com enzima livre, apesar de apresentar vantagens na qualidade do produto final, mostrou-se ser inviável economicamente, pois aumenta o custo de insumos utilizados de U$7,56 por tonelada de produto na inversão ácida para U$32,79 quando a enzima mais barata (invertase) é utilizada. O custo da enzima corresponde a 6,1 % do custo final do produto, enquanto que para a inversão ácida, este custo não ultrapassa 1% / Abstract: Not informed. / Mestrado / Desenvolvimento de Processos Químicos / Mestre em Engenharia Química
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Estudo da ultrafiltração por membranas minerais de leite coagulado enzimaticamente

Peres, Leila, 1957- 07 April 1997 (has links)
Orientador: Salvador Massaguer Roig / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Engenharia de Alimentos / Made available in DSpace on 2018-07-22T01:33:22Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Peres_Leila_D.pdf: 4586693 bytes, checksum: 5ffea26c2967998036402c83c1c9e7a3 (MD5) Previous issue date: 1997 / Resumo: Neste trabalho efetuou-se um estudo da ultrafiltração de leite integral coagulado enzimaticamente com renina, onde foram utilizadas membranas minerais CARBOSEP para microfiltração (MF ) e para ultrafiltração (DF ). Membranas para MF CARBOSEP M45, 14 e M6, com diâmetros médios de poro respectivamente de 0,45 , 0,14 e 0,08 µm e embranas para DF CARBOSEP com pesos moleculares médios de corte respectivamente de 300000, 150000 e 50000 Daltons, foram usadas. Os processamentos de concentração de leite coagulado por DF, foram realizados em uma unidade piloto de ultrafiltração CARBOSEP 2S 37 (com 1,6 m2 de área de membrana) e em uma unidade de bancada MICROCARBOSEP 40 (com 75 cm2 de área de membrana). Foram também efetuados, para efeito de comparação, processamentos com leite na unidade piloto CARBOSEP 2S 37. Os processamentos foram conduzidos às pressões de 3, 4 e 5 bar, temperatura de 35°C para leite coagulado e 55°C para leite e velocidade de escoamento tangencial de 4,0 m/s para a unidade piloto e de 1,2 m/s para a unidade de bancada. A DF de leite já pré-coagulado oferece como principal vantagem, em relação à do leite, um elevado aumento do fluxo de permeado, devido às características de maior porosidade da camada de polarização por concentração formada pelo leite coagulado. Na ultrafiltração de leite na unidade piloto CARBOSEP 2S 37, realizada a 4 bar, obteve-se para os dois tipos de membrana CARBOSEP utilizadas ( M4 e M6 ) um fluxo de permeado inicial em tomo 60 1/h.m2 e coeficientes de retenção de proteína de 99% para a membrana M4 e de 96% para a membrana M6. Já para o leite coagulado, o melhor desempenho foi da membrana de microfiltração M6, para a qual obtiveram-se um fluxo de permeado inicial de 300 1/h.m2 e um coeficiente de retenção de proteína de 94%, que embora seja inferior ao obtido para o leite, mostra também uma boa eficiência de separação para a membrana M6. Os processamentos de concentração com leite coagulado realizados na unidade de bancada MICROCARBOSEP 40, mostraram também um melhor desempenho em termos de fluxo para as membranas de microfiltração CARBOSEP Ml4 e M45. A possibilidade do uso de membranas de microfiltração CARBOSEP, para realizar a ultrafiltração de leite coagulado, obtendo-se inclusive um maior fluxo que o obtido para as membranas de DF, é conseqüência das características da camada de polarização por concentração formada dinamicamente sobre a membrana, que se comporta durante o processo como uma membrana secundária, de menor porosidade que a membrana primária. Os processamentos de concentração realizados com as membranas M4, na unidade piloto CARBOSEP 2S 37 e M6 e M8 na unidade de bancada, mostraram um aumento de fluxo de permeado com o aumento da pressão de 4 para 5 bar para o leite, enquanto para o leite coagulado o uso de uma pressão maior não resultou em um melhor desempenho da membrana. Os processamentos realizados com leite coagulado na unidade piloto CARBOSEP 2S 37, demonstraram a viabilidade do uso do processo na fabricação de um queijo semelhante ao queijo petit suisse ou outro queijo de massa mole, desde que sua produção não envolva coagulação ácida, já que em todos os processamentos realizados, o pH natural do leite ( 6,6 ¬ 6,7 ) foi mantido constante. Foram estudadas as influências das características da camada de polarização por concentração formada sobre a membrana e da incrustação (fouling ) da membrana, na transferência de massa e capacidade de permeação da membrana / Abstract: In the present work a study of the rennetted curd milk (obtained from whole milk ) ultrafiltration was conducted by using microfiltration (MF) and ultrafiltration (DF) CARBOSEP mineral membranes. (MF) CARBOSEP M45, M14 and M6 membranes, with average pore diameter of 0.45, 0.14 and 0.08 µm, respectively and (DF) CARBOSEP M9, M3 and M8 membranes, with average molecular weight cut-off of 300000, 150000 and 50000 Daltons, respective1y, have been used. The DF concentration experiments have been performed in a CARBOSEP 2S 37 ultrafiltration pilot unit ( 1.6m2 of membrane area ) and in a MICROCARBOSEP 40 bench ultrafiltration unit ( 75 cm2 of membrane area ). In order to compare the results, whole milk DF concentration experiments were also performed in the pilot unit. The DF concentration experiments were conducted at transmembrane pressures of 3, 4 and 5 bar , at a temperature of 35°C for coagulated whole milk and 55°C for whole milk. The tangential velocity was 4,0m/s for the pilot unit and 1,2 m/s for the bench unit. The major advantage in performing the DF of pre-coagulated milk, is the great improvement in the permeate flow obtained (10 times in some cases ), due to the high porosity characteristics of the concentration polarization layer formed by the coagulum on the membrane. An initial permeate flow of 60 l/h.m2 for the two used membranes ( M4 and M6 ) and protein retention coefficients of 97% for M6 membrane and 99% for M4 membrane, have been obtained in the milk DF experiments performed in the CARBOSEP 2S 37 unit, at 4 bar. When using the coagulated milk, the microfiltration M6 membrane showed the best performance, since an initial permeate flow of 300 1/h.m2 and a protein retention coefficient of 94% have been obtained. In spite being this retention coefficient lower than that obtained for milk, this value however represents, a good separation efficiency for M6 membrane Coagulated milk concentration experiments, carried out in the MICROCARBOSEP 40 bench unit, have also showed better performance for microfiltration membranes Ml4 and M45. The possibility of using microfiltration CARBOSEP membranes to perform coagulated milk DF, obtaining indusively a higher permeate flow than that obtained for ultrafiltration CARBOSEP membranes, is a consequence of the concentration polarization layer characteristics, formed dynamically over the membrane, that acts during the process as a secondary membrane with a lower porosity than the primary membrane porosity. The experiments conducted in the pilot unit with M4 membrane and in the bench unit with M6 and M8 membranes have showed, for milk, an improvement in the permeate flow, when the pressure was changed from 4 to 5 bar. For coagulated milk, however, the higher pressure has not resulted in better membrane performance. The experiments conducted in the pilot unit with coagulated milk, have showed the viability in using this process in the manufacturing of a cream cheese, like petit suisse cheese or other soft cheese, not involving acid coagulation, since the natural milk pH ( 6.6 to 6.7 ) was maintained constant throughout all the performed experiments. The influences of the concentration polarization layer characteristics and of the membrane fouling, on the membrane mass transfer and permeation capacity, have been studied / Doutorado / Doutor em Tecnologia de Alimentos
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Estudo dos sistemas celulolitico e fermentativo de fungos microaerobios facultativos

Pavarina, Erika Cristina 25 February 1997 (has links)
Orientador: Lucia Regina Durrant / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Engenharia de Alimentos / Made available in DSpace on 2018-07-22T08:53:58Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Pavarina_ErikaCristina_M.pdf: 5888570 bytes, checksum: 9bb8a3c72dae3271547cae3cd3568695 (MD5) Previous issue date: 1997 / Resumo: A celulose é o principal constituinte da parede celular das plantas terrestres e é uma das maiores fonte de carbono renováveis. O sistema enzimático que desintegra a celulose compreende, as endoglucanases (CMCase), exoglucanases e f3-glicosidases. Neste trabalho foram utilizados 10 microrganismos isolados de amostras de solo, sendo que após análise das atividades enzimáticas (celulolíticas e ligninolíticas), 5linhagens foram selecionadas e utilizadas em estudos de produção de enzimas que promovem a degradação de materiais celulósicos e provável fermentação destes materiais a etanol. Celulose microcristalina, xilana, papel de filtro e resíduos agroindustriais foram utilizados como fonte de carbono em um meio específico contendo sais minerais, vitaminas e como agente redutor cisteína. A maior atividade de avicelase foi obtida com o microrganismo H2 após crescimento em meio contendo xilana sob condição microaerofilica. A linhagem H2 também apresentou alta atividade de carboximetilcelulase, quando crescido em meio bagaço de cana sob condição microaerofilica, e o máximo de atividade xilanase foi obtido quando a linhagem F.20 foi crescida em meio xilana sob condição microaerofilica. A maior produção de ß-glicosidase foi obtida pelo microrganismo LH5 após crescimento em meia serragem sob condição microaerofilica. Os microrganismos F.20, Geotrichum sp (LD) e LH5 produziram etanol sob condição de agitação e posterior microaerofilia quando crescidos nos meios contendo papel de filtro, bagaço de cana e serragem. Enquanto que os microrganismos H2 e Trichocladium canadense (Q10) apresentaram produção de etanol após crescimento em meio contendo xilana sob condição microaerofilica. Os monômeros de celulose e hemicelulose foram utilizados como fonte de carbono para verificar a capacidade de utilização destes microrganismos selecionados. A linhagem F.20 apresentou desenvolvimento ótimo da massa micelial para a maioria dos substratos utilizados / Abstract: Cellulose is the main constituent of the cell walls of terrestrial plants and is one of the biggest renewable carbon sources. The enzymatic system that degrades cellulose comprises the endoglucanases (CMCase), exoglucanases and ß-glucosidases. In this work were used ten microorganisms isolated from soil samples and after the analysis of enzymatic activities (cellulolytic and lignicellulolytic), 5 microorganisms were selected and used in studies of the production of enzymes that promote the degradation of cellulosic materials and the production of ethanol. Avicel, xylan, Whatman nº1 paper and agro industrial wastes were used as carbon sources in a specific medium containing mineral salts, vitamins and cystein as a reducing agent. The best activity of avicelase was achieved with the microorganism H2 after growth in a medium containing xylan under microaerophylic conditions. The microorganism H2 also presented higher carboximethylcellulase activity when incubated in sugar-cane bagasse medium under microaerophylic conditions, and a maximum value of xylanase activity was achieved with the microorganism F.20 when grown in xylan medium under microaerophylic conditions. The higher production of ß-glucosidase was achieved with the strain LH5 after growing in a sawdust medium under microaerophylic conditions. The microorganisms F.20, LH5 and Geotrichum sp (LD) produced ethanol under the combined shaking followed by microaerophylic conditions when grown in Whatman n°1, sugar-cane bagasse and sawdust media. On the other hand, the strains H2 and Trichocladium canadense (Q10) presented ethanol production when grown in xylan medium under microaerophylic conditions. Cellulose and hemicellulose monomers were used as the carbon sources. The strain F.20 showed optimum development of mycelial mass for almost all the substrates utilized / Mestrado / Mestre em Ciência de Alimentos
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Avaliação de estresse por resfriamento em raizes de cafe : identificação dos danos oxidativos por microcalorimetria, espectroscopia EPR e atividade de enzimas antioxidantes

Queiroz, Cristina Generosa de Senna 10 March 1997 (has links)
Orientador: Antonio Celso Novaes de Magalhães / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-07-22T08:06:30Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Queiroz_CristinaGenerosadeSenna_D.pdf: 3391258 bytes, checksum: d106a23d5559119daaba27aa242b39f7 (MD5) Previous issue date: 1997 / Resumo: Em várias espécies de plantas superiores tropicais esubtropicais, tais como o café (Coffea arabica L.), a exposição a baixas temperaturas pode causar grandes danos aos tecidos. Estas condições geralmente induzem inibição do crescimento, alterações nas taxas metabólicas e alterações funcionais em membranas. Esta pesquisa buscou identificar as alterações no crescimento da raiz, em plântulas de café de 30 dias de idade, as quais foram submetidas ao estresse por resfriamento por 6 dias, nas temperaturas de 5, 10, 15, 20 e 25°C, no escuro. O protocolo experimental incluiu medidas das taxas de calor metabólico, peroxidação de lipídios e fluidez de membranas, em adição às atividades de algumas enzimas antioxidantes. Foram utilizadas basicamente técnicas não invasivas, tais como microcalorimetria, medidas de liberação de eletrólitos e EPR espectroscopia. Os resultados mostraram que o crescimento da raiz foi completamente inibido após exposição a 5 e 10°C, e o processo foi irreversível após o retorno das plantas à temperatura controle (25°C). Os tecidos de raiz submetidos a temperaturas abaixo de 15°C, apresentaram taxas de calor metabólico sensivelmente mais baixas em comparação com o controle e os valores mostraram-se estreitamente correlacionados com a inibição do crescimento da raiz. Em paralelo, a liberação de eletrólitos pelas raízes aumentou significativamente nas plântulas expostas a 5 e 10°C, as quais também exibiram irreversibilidade quando as plantas retornaram à temperatura de 25°C. o tratamento a10°C induziu ainda aumento significativo na peroxidação de lipídios de membrana, quando comparado com 15 e 25°C. Os espectros de EPR mostraram que os marcadores de spin 5-, 12 e16-DAS (ácido doxil esteárico), foram capazes de intercalar com os lipídios de membrana celular de tecidos de raiz em segmentos apicais intactos. À profundidade do 5° e 16° átomos de carbono da cadeia acílica, radical nitróxido do marcador de spin detectou membranas mais rígidas em plântulas submetidas à temperatura de 10°C, comparado com as amostras tratadas a 15 e 25°C. Na posição do C-12 da cadeia a sonda apresentou um movimento muito restrito e foi insensível às alterações induzidas pelo resfriamento nas membranas. As atividades de algumas enzimas antioxidantes, tais como ascorbato peroxidase, guaiacol peroxidase e catalase, mostraram respostas variadas em tecidos submetidos à baixa temperatura (10°C). Ascorbato peroxidase ecatalase não apresentaram alterações significativas em condições de resfriamento, enquanto aatividade da guaiacol peroxidase aumentou 55%, comparado ao controle, a 25°C. Por outro lado, a atividade de glutationa redutase diminuiu, paralelamente àcapacidade de redução de TTC (cloreto de trifeniltetrazólio) . Nossos resultados mostraram que o estresse por resfriamento em plântulas de café expostas a lOoe por 6 dias pode ser interpretado como um estresse oxidativo, que resultou em peroxidação de lipídios, aumento na rigidez de membranas, vazamento de eletrólitos e redução na atividade metabólica / Abstract: In several tropical and sub-tropical higher plant species, such as coffee (Coffea arabica L.), exposure to low temperature can cause extensive tissue damage. These conditions usually induce growth inhibition, changes in metabolic rates, and functional membrane alterations. The present research attempted to nvestigate the changes in root growth, in 30 days old coffee seedlings which were subjected to chilling stress for 6 days, at temperatures of 5, 10, 15, 20, and 25°C, in darkness. The experimental protocol included measurements of metabolic heat rates, lipid peroxidation, membrane fluidity, in addi tion to the activities ok selected antioxidative enzymes. The investigation utilized basically non invasive techniques such as microcalorimetry, electrolyte leakage and EPR sprectroscopy. The results showed that root growth was completely inhibited after exposure to 5and 10°C, the process being irreversible after 6 days of incubation at these temperatures. Root tissues subjected to temperatures below 15°C presented significant lower rates of metabolic heat compared with controls at 25 ºC, and the values wereclosely correlated with the observed root growth inhibition. In parallel, figures on electrolyte loss significantely increased in root samples of 5 and 10°C incubated plants, which also exhibited irreversibility upon being transferred to the control temperature. In addition, the 10°C treatment induced a significant increase in the leveI of lipid peroxidation of root cell membranes. In root tip tissues the electron paramagnetic resonance spectra showed that the spin probes 5-, 12- and 16-doxylstearic acid were capable to intercalate within the cellular membrane lipids. Indeed, at the depth of the 5th and 16th carbon atoms of the alkyl chains the nitroxide radical detected more rigid membranes in seedlings exposed to 10°C compared with 15 and 25°C treated samples. At C-12 position of the chains the probe showed very restrict motion and was insensi tive to chilling induced membrane alterations. The activities of some antioxidative enzymes, such as ascorbate peroxidase, guaiacol peroxidase and catalase showed varied responses in tissues subjected to low temperatures (10°C) for 6 days. Actually, ascorbate peroxidase and catalase did not show any appreciable change under chilling conditions, while guaiacol peroxidase acti vi ty increased 55% compared te the control, at 25°C. On the other hand, glutathione reductase activity decreased, in parallel to a significant reduction in reduced TTC values. Our results showed that the chilling stress in seedlings of coffee exposed to 10°C for 6 days, might be interpreted as an oxidative stress, which resulted in lipid peroxidation, increase ln membrane rigidity, electrolyte leakage ane reduction in metabolic activity / Doutorado / Doutor em Ciências
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Uso da tecnologia de barreiras na obtenção da polpa de açai e sua caracterização reologica / Use the technology of barriers in getting the pulp of açaí and his characterization reológica

Carneiro, Fernanda Ribeiro Burgel Dias 27 July 2018 (has links)
Orientadores: Miriam Dupas Hubinger, Rosiane Lopes da Cunha / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Engenharia de Alimentos / Made available in DSpace on 2018-07-27T06:08:16Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Carneiro_FernandaRibeiroBurgelDias_M.pdf: 26418483 bytes, checksum: 6a13272960c36e76e841d2155085ffd1 (MD5) Previous issue date: 2000 / Resumo: O presente estudo teve por finalidade desenvolver um processo de conservação da polpa de açaí através da utilização de Métodos Combinados como alternativa ao processo de congelamento da polpa. Além disso foram analisadas as sua características reológicas através de curvas de escoamento obtidas em estado estacionário. Foram formuladas cinco diferentes produtos, a partir da polpa de açaí 3,5° Brix, utilizando os seguintes fatores de preservação: tratamento térmico brando (70°C por 3 min); redução da atividade de água (aw)(adição de sacarose à 25,35,45 e 55% p/p); redução do pH (ácido cítrico a 0,5% p/p) e agente preservante (sorbato de potássio a 0,2% p/p). As condições de estocagem foram a 25°C por 5 meses, em recipientes de vidro não hermeticamente fechados. Todos os tratamentos atingiram o tempo de vida-de-prateleira de 5 meses, exceto a polpa não tratada que atingiu apenas dois dias de armazenamento. Contudo, os resultados indicaram que há um grande potencial do uso dessa tecnologia de preservação para a polpa de açaí. Pata o estudo do comportamento reológico da polpa de açaí usou-se um reômetro de tensão controlada da marca Carri-Med CSL2 500, com geometria de cilindro concêntrico. A polpa de açaí não tratada foi estudada no intervalo de temperatura de 10 a 70°C, sendo a polpa de açaí tratada por métodos combinados apenas avaliada à 25°C. Dos modelos ajustados aos dados experimentais (Lei da Potência, Casson, plástico de Bingham e Herschel-Bulkley) o de Herschel-Bulkley foi o que melhor descreveu o comportamento do produto (R2 > 0,9952). Todas as amostras tratadas apresentaram comportamento pseudoplástico à 25°C com uma pequena tensão residual (1,02 ::;;ao ::;;4,89Pa). A polpa de açaí não tratada apresentou comportamento reopéctico à 10°C e tixotrópico a partir de 55°C. Além disso verificou-se a presença de escorregamento para tensões de cisalhamento abaixo de 7,O Pa e taxas de deformação inferiores a 20s-1 / Abstract: The objective ofthis study was to develop a conservation process to the assai pulp through the utilization of combined methods as an alternative to fteezing. Besides, its rheological characteristics were analyzed through the obtained stationary state flow curves. Five different products were generated using the following preservation factors: low temperature thermal treatment (70°C for 3 min), reduction of the water activity (aw) (addition ofsucrose by 25,35,45 and 55% w/w), reduction ofpH (citric acid at 0.5% w/w) and preservative agent (potassium sorbate at 0.2% w/w). The storage conditions were at 25°C for 5 months, in glass flasks not closed hermetically. AlI products reached a shelf life time of 5 months, while the untreated assai pulp, stored at the same conditions, showed deterioration signs by the second day of storage. Though, the results showed the great potential ofthis technology when applied to preserve the assai pulp. To study the rheological behavior of the assai pulp a controlled stress rheometer ftom Carri-Med, model CSL2 500, with cylindricalgeometry was used. The untreated assai pulp was studied in the temperature interval between 10 and 70°C, while the pulp treated by combined methods was studied only at 25°C. Of all mathematical models adjusted to the experimental data (Power Law, Bingham's plastic, Casson and Herschel-Bulkley's) the Herschel-Bulkley best described the pulp's behavior (R2 ~ 0.9952). At 25°C, all treated samples showed a pseudoplastic behavior with a small residual stress (1.02 ::;;0"0::;;4.89Pa). The untreated assai pulp showed a rheopectic at 10°C and thixotropic ftom 55°C. Besides, the presence of slipness for shear stresses under 7.0Pa and deformation rates under 20S-1 was verified / Mestrado / Mestre em Engenharia de Alimentos

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