Made available in DSpace on 2014-06-11T19:32:51Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2008-02-22Bitstream added on 2014-06-13T20:08:32Z : No. of bitstreams: 1 nozaki_cn_dr_botfmvz.pdf: 892631 bytes, checksum: d126bb773f589d40efa4b01f8252ff3c (MD5) / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / O objetivo do presente estudo foi avaliar a patogenicidade e o potencial infectante da Brucella ovis REO 198 em carneiros inoculados experimentalmente, estudar o perfil sorológico destes animais e associa-los aos sinais clínicos, analisando o teste de imunodifusão em ágar gel e soroaglutinação rápida. Adicionalmente, adaptar e avaliar uma técnica de PCR frente ao cultivo bacteriano em diferentes materiais. Foram utilizados 36 carneiros, sendo 31 submetidos à inoculação via conjuntival e via intraprepucial de uma solução contendo 2x109 UFC/mL de B. ovis REO 198, simultaneamente e cinco submetidos a inoculação, pelas mesmas vias, de solução fisiológica, mantidos como grupo controle. Todos os animais inoculados foram submetidos, semanalmente, à avaliação clínica, colheita de sangue para diagnóstico sorológico, sêmen e urina para cultivo e realização da PCR. Sorologia positiva foi observada nos animais, por ambas as provas, a partir da 2ª semana, observando-se flutuações de títulos. Alterações clínicas se iniciaram a partir da 5ª semana pós-inoculação estando associada à sorologia positiva na fase aguda da enfermidade. Eliminação de B.ovis pode ser observado por cultivo e PCR nas amostras de sêmen e urina de modo intermitente. Infecção natural foi observada em três animais não inoculados e contactantes eventuais do grupo inoculado experimentalmente. Destaca-se o caráter patogênico e infectante da Brucella ovis REO 198, a importância das excreções destes animais como vias de eliminação e a condição destes como potenciais fontes de infecção. A IDGA demonstrou ser a mais favorável no uso como diagnóstico de rotina, enquanto a SAR diagnosticou apenas animais na fase aguda da doença. A PCR de sêmen ou urina dos animais associada ao cultivo microbiológico demonstrou melhor sensibilidade de detecção, sugerindo a associação das técnicas para um diagnóstico eficiente. / The objective of the present study was to evaluate the pathogenicity and infective potential of B. ovis REO 198 and to determine the serological profile of rams experimentally inoculated using immunodiffusion in agar gel and rapid serum agglutination test associated with clinical signs, as well as to adapt and evaluate PCR compared with microbiological culture in the different samples. Thirty one rams, 1-2 years old, were submitted to conjunctival and intrapreputial simultaneous inoculation with a solution containing 2x109 CFU/mL B. ovis REO 198. The other five animals constituted the control group and were inoculated by the same routes with sterile saline solution. All animals inoculated were weekly submitted to clinical evaluation, as well as collection of blood for serological diagnosis, and collection of semen and urine for culture and PCR. Positive serology was observed beginning in the third week, and decreasing soon after the fifth week after inoculation. Both tests detected fluctuations in titers. Clinical alterations began in the 5th week after inoculation and were associated with positive serology in the acute phase of the disease. B. ovis was observed in semen and in urine culture in an intermittent manner. Natural infection was observed in three non-inoculated animals that occasionally contacted animals of the infected group. The pathogenic and infective characteristics of B. ovis REO 198 were highlighted, as well as the importance of animal excretion as routes of elimination, and the condition of the animals as potential sources of infection. IDGA showed variable sensitivity in the different periods, detecting positive animals in the chronic phase of the disease, and was the preferred method to be used in routine diagnosis, whereas SAR just diagnosed animals in the acute phase of the disease. The semen or urine PCR associated to microbiological culture is recommended for an efficient diagnosis.

Orientador: Jane Megid / Banca: Luis Antônio Mathias / Banca: Carlos Robles / Banca: Renato de Lima Santos / Banca: Júlio César de Freiras / Resumo: O objetivo do presente estudo foi avaliar a patogenicidade e o potencial infectante da Brucella ovis REO 198 em carneiros inoculados experimentalmente, estudar o perfil sorológico destes animais e associa-los aos sinais clínicos, analisando o teste de imunodifusão em ágar gel e soroaglutinação rápida. Adicionalmente, adaptar e avaliar uma técnica de PCR frente ao cultivo bacteriano em diferentes materiais. Foram utilizados 36 carneiros, sendo 31 submetidos à inoculação via conjuntival e via intraprepucial de uma solução contendo 2x109 UFC/mL de B. ovis REO 198, simultaneamente e cinco submetidos a inoculação, pelas mesmas vias, de solução fisiológica, mantidos como grupo controle. Todos os animais inoculados foram submetidos, semanalmente, à avaliação clínica, colheita de sangue para diagnóstico sorológico, sêmen e urina para cultivo e realização da PCR. Sorologia positiva foi observada nos animais, por ambas as provas, a partir da 2ª semana, observando-se flutuações de títulos. Alterações clínicas se iniciaram a partir da 5ª semana pós-inoculação estando associada à sorologia positiva na fase aguda da enfermidade. Eliminação de B.ovis pode ser observado por cultivo e PCR nas amostras de sêmen e urina de modo intermitente. Infecção natural foi observada em três animais não inoculados e contactantes eventuais do grupo inoculado experimentalmente. Destaca-se o caráter patogênico e infectante da Brucella ovis REO 198, a importância das excreções destes animais como vias de eliminação e a condição destes como potenciais fontes de infecção. A IDGA demonstrou ser a mais favorável no uso como diagnóstico de rotina, enquanto a SAR diagnosticou apenas animais na fase aguda da doença. A PCR de sêmen ou urina dos animais associada ao cultivo microbiológico demonstrou melhor sensibilidade de detecção, sugerindo a associação das técnicas para um diagnóstico eficiente. / Abstract: The objective of the present study was to evaluate the pathogenicity and infective potential of B. ovis REO 198 and to determine the serological profile of rams experimentally inoculated using immunodiffusion in agar gel and rapid serum agglutination test associated with clinical signs, as well as to adapt and evaluate PCR compared with microbiological culture in the different samples. Thirty one rams, 1-2 years old, were submitted to conjunctival and intrapreputial simultaneous inoculation with a solution containing 2x109 CFU/mL B. ovis REO 198. The other five animals constituted the control group and were inoculated by the same routes with sterile saline solution. All animals inoculated were weekly submitted to clinical evaluation, as well as collection of blood for serological diagnosis, and collection of semen and urine for culture and PCR. Positive serology was observed beginning in the third week, and decreasing soon after the fifth week after inoculation. Both tests detected fluctuations in titers. Clinical alterations began in the 5th week after inoculation and were associated with positive serology in the acute phase of the disease. B. ovis was observed in semen and in urine culture in an intermittent manner. Natural infection was observed in three non-inoculated animals that occasionally contacted animals of the infected group. The pathogenic and infective characteristics of B. ovis REO 198 were highlighted, as well as the importance of animal excretion as routes of elimination, and the condition of the animals as potential sources of infection. IDGA showed variable sensitivity in the different periods, detecting positive animals in the chronic phase of the disease, and was the preferred method to be used in routine diagnosis, whereas SAR just diagnosed animals in the acute phase of the disease. The semen or urine PCR associated to microbiological culture is recommended for an efficient diagnosis. / Doutor

Submitted by Cássia Santos (cassia.bcufg@gmail.com) on 2015-02-27T12:50:00Z No. of bitstreams: 2 Dissertação - Greice Japolla - 2014.pdf: 735093 bytes, checksum: 4795f79b674744556e9029a8e9b99c2f (MD5) license_rdf: 23148 bytes, checksum: 9da0b6dfac957114c6a7714714b86306 (MD5) / Approved for entry into archive by Luciana Ferreira (lucgeral@gmail.com) on 2015-03-04T11:45:39Z (GMT) No. of bitstreams: 2 Dissertação - Greice Japolla - 2014.pdf: 735093 bytes, checksum: 4795f79b674744556e9029a8e9b99c2f (MD5) license_rdf: 23148 bytes, checksum: 9da0b6dfac957114c6a7714714b86306 (MD5) / Made available in DSpace on 2015-03-04T11:45:39Z (GMT). No. of bitstreams: 2 Dissertação - Greice Japolla - 2014.pdf: 735093 bytes, checksum: 4795f79b674744556e9029a8e9b99c2f (MD5) license_rdf: 23148 bytes, checksum: 9da0b6dfac957114c6a7714714b86306 (MD5) Previous issue date: 2014-02-11 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPES / Bovine herpesvirus type 1 ( BHV - 1 ) is recognized as an important pathogen of economic losses in cattle , these animals causing diseases known as infectious bovine rhinotracheitis ( IBR ) , infectious pustular vulvovaginitis , infectious balanoposthitis and neurological disorders . For effective control of these diseases, the correct diagnosis is necessary, but none of the available tests enables a quick result made the field. Considering this, the aim of this study was to construct a combinatorial antibody library, for it to be used in the future development of new diagnostic approaches . Two breed White Leghorn chickens were immunized with 105.5 TCID50/ml of BoHV - 1, birds were necropsied , their spleens removed for total RNA extraction , cDNA synthesis , amplification of gene fragments encoding the light chain ( VL ) and heavy ( VH ) and production of scFv ( v) fragments. These fragments were cloned into vectors fagomidiais expressed as fusion proteins on filamentous phage and amplified by infection of E. coli. Selection of viral particles ( fused scFv) binding to the BHV -1 ( biopanning ) by six cycles were performed. The affinity of the scFv antibody library BHV -1 observed in ELISA shows that the produced fragments are reactive to HIV, the use of such antibodies in the development of new diagnostic platforms is possible . The sequencing results showed a reduction of variability in comparison to the dot blot previously performed, and a desirable feature of this process , however, it was possible to sequence the clones efficiently, it has been found , therefore, a need to further analyze the shape of results / O herpesvírus bovino tipo 1 (BoHV-1) é reconhecido como um importante patógeno de perdas econômicas em bovinos, causando nestes animais enfermidades conhecidas como Rinotraqueite Infecciosa Bovina (IBR), vulvovaginite pustular infecciosa, balanopostite infecciosa e desordens neurológicas. Para um efetivo controle destas enfermidades, o diagnóstico correto se faz necessário, porém nenhuma dos testes disponíveis possibilita um resultado rápido feito a campo. Considerando isto, o objetivo deste estudo foi construir uma biblioteca combinatorial de anticorpos, para que esta seja futuramente utilizada no desenvolvimento de novas abordagens diagnósticas. Duas galinhas da raça White Leghorn foram imunizadas com 105,5 DICC50/mL de BoHV-1, as aves foram necropsiadas, seus baços retirados para extração de RNA total, síntese de cDNA, amplificação dos fragmentos gênicos codificantes das cadeias leve (VL) e pesada (VH) e produção de fragmentos scF(v). Estes fragmentos foram clonados em vetores fagomidiais, expressos como proteínas de fusão em bacteriófagos filamentosos e amplificados pela infecção de bactérias E.coli. Foi realizada a seleção de partículas virais (scFv fusionados) ligantes ao BoHV-1 (biopanning) através de seis ciclos. A afinidade da biblioteca de anticorpos scFv ao BoHV-1 observada no teste de ELISA mostra que os fragmentos produzidos são reativos ao vírus, sendo possível a utilização destes anticorpos no desenvolvimento de novas plataformas de diagnóstico. Os resultados de sequenciamento mostraram uma diminuição da variabilidade em comparação ao dot blot realizado anteriormente, sendo uma característica desejável neste processo, porém não foi possível sequenciar os clones de modo eficiente, verificando-se, portanto, a necessidade de analisar de forma mais aprofundada os resultados obtidos .

Submitted by Emanoel Martins Filho (emanoelfilho@ufba.br) on 2016-07-11T13:41:05Z No. of bitstreams: 1 Tese final_Jairo Torres_.pdf: 2470015 bytes, checksum: b0fd537776a686c0b25469acbe65ef15 (MD5) / Approved for entry into archive by Patricia Barroso (pbarroso@ufba.br) on 2016-07-13T01:15:54Z (GMT) No. of bitstreams: 1 Tese final_Jairo Torres_.pdf: 2470015 bytes, checksum: b0fd537776a686c0b25469acbe65ef15 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-07-13T01:15:54Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Tese final_Jairo Torres_.pdf: 2470015 bytes, checksum: b0fd537776a686c0b25469acbe65ef15 (MD5) / Fundação de Amparo a Pesquisa do Estado da Bahia (FAPESB) / Leishmaniose Visceral é uma zoonose causada pelo protozoário Leishmania infantum e transmitida pelo flebotomíneo Lutzomyia longipalpis. O controle da doença é bastante complexo, sendo que atualmente sugere-se a necessidade de redirecionamento nas medidas de controle, sobretudo no que se refere à identificação de cães verdadeiramente transmissores e à necessidade de um refinamento no controle vetorial. Neste trabalho foi avaliada a infectividade de cães naturalmente infectados com L. infantum para a L. longipalpis, bem como a capacidade atrativa de diferentes compostos orgânicos voláteis para o mesmo vetor. A partir de testes xenodiagnósticos, foi observado que cães com maior manifestação de sinais clínicos são mais infectivos ao vetor que cães com pouco ou nenhum sinal clínico, entretanto não houve diferença na taxa de transmissibilidade quando diferentes protocolos de xenodiagnóstico foram confrontados. Sendo que, para cães infectados com L. infantum e agrupados conforme a presença de anormalidades clínicas e patológicas, a taxa de infectividade nos flebotomíneos foi significativamente menor (p=0,0098) , quando estes se alimentaram de cães com doença moderada (0,01%), comparativamente aos cães com doença severa (38,2%).Demonstrou-se também que machos e fêmeas de L. longipalpis são atraídos por compostos aldeídos e alcanos (octanal, decanal e heptadecano) identificados no pelo canino e álcoois (heptanol, octanol, octenol e nonanol) encontrados em plantas. Esses compostos químicos podem ser utilizados como iscas em armadilhas para captura dos insetos ou ainda associados com inseticidas de efeito residual. Mais estudos são necessários sobre a biologia e comportamento da L. longipalpis e sua relação com cães infectados com L. infantum, buscando melhor entender essa interface e identificar novas alternativas de controle para a leishmaniose visceral. / Visceral leishmaniasis is a zoonosis caused by the protozoan Leishmania infantum and transmitted by the phlebotominae sand fly Lutzomyia longipalpis. The control of the disease is quite complex, being suggested presently the necessity to redirect the control measures, especially concerning the identification of dogs truly transmitters and the necessity of a refinement of the vector control. This work was evaluated the infectivity of dogs naturally infected with L. infantum to L. longipalpis as well as the attractive ability of different volatile organic compounds to same vector. It was observed, by xenodiagnosis, that dogs with higher manifestation of clinical signs are more infective to the vector that dogs with few or no clinical signs, however there was no difference in the transmission rate when different xenodiagnosis methodologies were compared. Therefore for dogs infected with L. infantum and grouped according to presence of clinical and pathological abnormalities in the infectivity rate sandflies was significantly lower (p = 0.0098), when these were fed dogs with moderate disease (0, 01%) compared to dogs with severe disease (38.2%). It was also demonstrated that males and females of L. longipalpis are attracted by aldehyde and alkane (octanal, decanal and heptadecane) compounds identified on the canine hair and alcohols found in plants (octenol, octanol, heptanol and nonanol). These chemical compounds can be used as bait in traps to capture insects and even be associated with insecticides with residual effect. More studies are necessary about the biology and behavior of L. longipalpis and its relationship to dogs infected with L. infantum, searching to better understand this interface and identify new alternatives to control visceral leishmaniasis.

No presente estudo, buscou-se avaliar quais seriam as cepas de herpesvírus bovinos tipos 1 (BoHV-1) e 5 (BoHV-5) seriam mais adequadas para uso como vírus de confrontação em testes de soroneurtralização (SN). Oitocentas e dez amostras de soros de duas regiões geograficamente distintas foram avaliadas à SN frente a seis diferentes cepas virais, incluindo tipos e subtipos diversos (BoHV-1.1: EVI123/98 e Los Angeles; BoHV-1.2a: SV265/96; BoHV-5a: EVI88/95; BoHV-5b: A663 e BoHV-5c: ISO95/97). A maior sensibilidade foi revelada pelo somatório de soropositivos identificados com as seis cepas utilizadas no estudo. Uma combinação de quatro vírus (BoHV-1.1: LA e EVI123/98, BoHV-5a: EVI88/95 e BoHV-5b: A663) foi capaz de detectar 99,1% das amostras soropositivas. Estes quatro vírus foram selecionados para serem utilizados em um levantamento soroepidemiológico com o intuito de estimar a prevalência das infecções causadas pelos BoHV-1 e BoHV-5 no Estado do Rio Grande do Sul. Para tanto, soros de 2200 fêmeas bovinas adultas (>24 meses), representativos da população bovina do Rio Grande do Sul, foram submetidos à SN frente às quatro cepas virais escolhidas. om esta combinação, a soroprevalência média das infecções por BoHV-1 e BoHV-5 encontrada foi de 29,2%. Além disso, analisando outros fatores que pudessem influenciar a prevalência das infecções, foram considerados fatores de risco o tipo de exploração corte, a ausência da prática de ordenha, o contato dos bovinos com ovinos/caprinos e animais silvestres, a venda de animais de reprodução, o uso de piquetes de parto/pós-parto, o uso de assistência veterinária privada e a criação de animais de raças européias de corte. Os resultados obtidos no presente trabalho demonstraram que, para que a SN seja capaz de detectar animais soropositivos ao BoHV-1 e BoHV-5 com a máxima sensibilidade, o teste deve ser realizado com várias amostras de BoHV-1 e BoHV-5, não necessariamente de tipos ou subtipos diferentes, pois amostras do mesmo tipo de vírus apresentarrm diferentes sensibilidades. Além disso, as amostras de confrontação podem variar de acordo com a região geográfica de origem dos soros. Os resultados obtidos nesse levantamento revelam que anticorpos anti-BoHV-1 e anti-BoHV-5 encontram-se amplamente distribuidos nos rebanhos gaúchos. No entanto, não foi possível determinar a prevalência tipo-específica destas infecções com os testes realizados. Assim, a proporção de animais que estão infectados com o BoHV-1 ou com o BoHV-5 (ou ambos) na região examinada permanece desconhecida. / In this study a search was carried out to determine which of a number of available strains/isolates of bovine herpesviruses types 1 (BoHV-1) and 5 (BoHV-5) would be more suitable for use as challenge virus in serum neutralization (SN) tests. Eight hundred and ten bovine serum samples collected from two geographically distinct regions were evaluated in SN tests against six BoHVs of different types and subtypes (BoHV-1.1: EVI123/98 and Los Angeles; BoHV-1.2a: SV265/96; BoHV-5a: EVI88/95; BoHV-5b: A663 and BoHV-5c: ISO95/97). The highest sensitivity was achieved when the SN-positive sera obtained with the six different viruses were added. A combination of four viruses (BoHV-1.1 LA, and EVI123/98, BoHV-5a EVI88/95 and BoHV-5b A663), was able to detect 99.1% of the seropositive samples. These four viruses were selected to carry out a seroepidemiological survey to estimate BoHV-1 and BoHV-5 prevalence in the state of Rio Grande do Sul. In order to achieve that, sera from 2,200 bovine female cows (>24 months-old), representative of the bovine population of Rio Grande do Sul state were tested on SN tests against the four selected viruses. With such combination, seroprevalence of BoHV-1 and BoHV-5 infections was 29.2%. After examining potential factors that might affect the prevalence of such infections, the following were considered as significant risk factors: the type of exploitation (beef cattle > dairy), use of milking procedures, concomitant presence of sheep, goats or wild animals in farm; sale of animals for reproductive purposes; use of pre and postparturition paddocks; use of private veterinary assistance and farming of European beef breeds. The results obtained here indicate that for the SN test to provide the highest sensitivity in detecting BoHV-1 and BoHV-5 seroposivive animals, it must be performed against a number of BoHV-1 and BoHV-5 strains, though not necessarily of different types and subtypes as viruses within a same subtype may display different sensitivities. Besides, challenge viruses may vary for geographically distinct areas. The serological survey performed with four distinct bovine herpesviruses reveal that antibodies to BoHV-1 and BoHV-5 are widely distributed among cattle flocks in Rio Grande do Sul. However, it was not possible to determine type-specific prevalence with the tests performed. Thus, the proportion of cattle actually infected with either BoHV-1 or BoHV-5 (or both) in the examined region remains undetermined.

No presente estudo, buscou-se avaliar quais seriam as cepas de herpesvírus bovinos tipos 1 (BoHV-1) e 5 (BoHV-5) seriam mais adequadas para uso como vírus de confrontação em testes de soroneurtralização (SN). Oitocentas e dez amostras de soros de duas regiões geograficamente distintas foram avaliadas à SN frente a seis diferentes cepas virais, incluindo tipos e subtipos diversos (BoHV-1.1: EVI123/98 e Los Angeles; BoHV-1.2a: SV265/96; BoHV-5a: EVI88/95; BoHV-5b: A663 e BoHV-5c: ISO95/97). A maior sensibilidade foi revelada pelo somatório de soropositivos identificados com as seis cepas utilizadas no estudo. Uma combinação de quatro vírus (BoHV-1.1: LA e EVI123/98, BoHV-5a: EVI88/95 e BoHV-5b: A663) foi capaz de detectar 99,1% das amostras soropositivas. Estes quatro vírus foram selecionados para serem utilizados em um levantamento soroepidemiológico com o intuito de estimar a prevalência das infecções causadas pelos BoHV-1 e BoHV-5 no Estado do Rio Grande do Sul. Para tanto, soros de 2200 fêmeas bovinas adultas (>24 meses), representativos da população bovina do Rio Grande do Sul, foram submetidos à SN frente às quatro cepas virais escolhidas. om esta combinação, a soroprevalência média das infecções por BoHV-1 e BoHV-5 encontrada foi de 29,2%. Além disso, analisando outros fatores que pudessem influenciar a prevalência das infecções, foram considerados fatores de risco o tipo de exploração corte, a ausência da prática de ordenha, o contato dos bovinos com ovinos/caprinos e animais silvestres, a venda de animais de reprodução, o uso de piquetes de parto/pós-parto, o uso de assistência veterinária privada e a criação de animais de raças européias de corte. Os resultados obtidos no presente trabalho demonstraram que, para que a SN seja capaz de detectar animais soropositivos ao BoHV-1 e BoHV-5 com a máxima sensibilidade, o teste deve ser realizado com várias amostras de BoHV-1 e BoHV-5, não necessariamente de tipos ou subtipos diferentes, pois amostras do mesmo tipo de vírus apresentarrm diferentes sensibilidades. Além disso, as amostras de confrontação podem variar de acordo com a região geográfica de origem dos soros. Os resultados obtidos nesse levantamento revelam que anticorpos anti-BoHV-1 e anti-BoHV-5 encontram-se amplamente distribuidos nos rebanhos gaúchos. No entanto, não foi possível determinar a prevalência tipo-específica destas infecções com os testes realizados. Assim, a proporção de animais que estão infectados com o BoHV-1 ou com o BoHV-5 (ou ambos) na região examinada permanece desconhecida. / In this study a search was carried out to determine which of a number of available strains/isolates of bovine herpesviruses types 1 (BoHV-1) and 5 (BoHV-5) would be more suitable for use as challenge virus in serum neutralization (SN) tests. Eight hundred and ten bovine serum samples collected from two geographically distinct regions were evaluated in SN tests against six BoHVs of different types and subtypes (BoHV-1.1: EVI123/98 and Los Angeles; BoHV-1.2a: SV265/96; BoHV-5a: EVI88/95; BoHV-5b: A663 and BoHV-5c: ISO95/97). The highest sensitivity was achieved when the SN-positive sera obtained with the six different viruses were added. A combination of four viruses (BoHV-1.1 LA, and EVI123/98, BoHV-5a EVI88/95 and BoHV-5b A663), was able to detect 99.1% of the seropositive samples. These four viruses were selected to carry out a seroepidemiological survey to estimate BoHV-1 and BoHV-5 prevalence in the state of Rio Grande do Sul. In order to achieve that, sera from 2,200 bovine female cows (>24 months-old), representative of the bovine population of Rio Grande do Sul state were tested on SN tests against the four selected viruses. With such combination, seroprevalence of BoHV-1 and BoHV-5 infections was 29.2%. After examining potential factors that might affect the prevalence of such infections, the following were considered as significant risk factors: the type of exploitation (beef cattle > dairy), use of milking procedures, concomitant presence of sheep, goats or wild animals in farm; sale of animals for reproductive purposes; use of pre and postparturition paddocks; use of private veterinary assistance and farming of European beef breeds. The results obtained here indicate that for the SN test to provide the highest sensitivity in detecting BoHV-1 and BoHV-5 seroposivive animals, it must be performed against a number of BoHV-1 and BoHV-5 strains, though not necessarily of different types and subtypes as viruses within a same subtype may display different sensitivities. Besides, challenge viruses may vary for geographically distinct areas. The serological survey performed with four distinct bovine herpesviruses reveal that antibodies to BoHV-1 and BoHV-5 are widely distributed among cattle flocks in Rio Grande do Sul. However, it was not possible to determine type-specific prevalence with the tests performed. Thus, the proportion of cattle actually infected with either BoHV-1 or BoHV-5 (or both) in the examined region remains undetermined.

Made available in DSpace on 2015-03-26T13:46:47Z (GMT). No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 644915 bytes, checksum: d059fb831fbd9168fde56d0f1948a13a (MD5) Previous issue date: 2005-05-25 / During the past ten years, the protozoan Neospora caninum has been described and associated as an ethyological agent of infected abortions in cattle. This disease in dogs also has an abortive character, but since dogs are definitive hosts, they have relevant importance in the life cycle of this parasite, acting as a source of the disease. Other diseases such as leptospirosis and brucelosis are also disseminated in Brazil and are associated to reproductive disturbances. The objective of this study was to evaluate the presence of infection for N. caninum in cattle and dogs of rural properties in two municipalities, Viçosa and Mercês, located in the macro-region of Zona da Mata in the state of Minas Gerais, as well as to analyze the existing risk factors for the infection. Serum samples of female cattle and dogs were collected for research of anti-N. caninum antibodies, using the indirect immunofluorescence technique; Brucella abortus selective test (Buffered Acidified Antigen - BAA) and corroborative tests (2-ME and SAT) and Leptospira sp., Microscopic Agglutination Technique (MAT) without and with sera dilution. The bovine sera were tested for the three pathogenic bioagents and the canine sera for N. caninum and Leptospira sp. In addition, information was collected by applying a structured questionnaire on type of exploration, production system and reproductive problem history in cattle and habits, type of food, demographic characteristics in dogs. The prevalence of positive properties was of 54.3% and 18.5% for N. caninum in cattle and dogs, respectively; 15.2% for Brucella abortus and 6.5% for Leptospira sp. in cattle and 7.4% for Leptospira sp.in dogs. The prevalence of positive animals presented lower results: 23.3% of N. caninum in cattle and dogs, respectively; 15.2% for Brucella abortus and 6.5% for Leptospira sp. in cattle and 7.4% for Leptospira. However, it should be emphasized that the prevalence for N. caninum in cattle was significantly higher, compared to Brucella abortus (p < 0.01) and Leptospira sp. (p < 0.01). Positive properties for bovine neosporosis were associated to the presence of reproductive disturbances in the animals (p < 0.01), when the analysis considered the type of disturbance, abortion (OR = 5.2; IC 95% = 1.32-20.54) and prenatal mortality (OR = 6.0; IC 95% = 1.22 - 29.95) presented significant association. The occurrence of positive serology for N. caninum in cattle was associated to the presence of positive dogs in the property (p<0.01); however, reproductive problem in cattle was not associated with canine neosporosis (p = 0.1046). Significant association was also verified between bovine osteoporosis and type of exploration, serum positive cattle having, approximately, three times more chance (OR = 2.82 and IC 95% = 1.05 - 9.52) of belonging to a milk production system rather than mixed. The characterization of canine neosporosis did not show significant association with the variables sex (p = 0.55), age (p = 0.34), animal habit (p = 0.03; OR = 0.00; IC 95% = 0.0-1.06) and type of food (p = 0.11). The results suggest that sanitation in neosporosis has become of utmost importance in bovine herds, especially when reproductive problems resulting from the infection are considered. Therefore, it becomes evident the need for animal health authorities and institutions to fight this disease. / Durante os últimos dez anos o protozoário Neospora caninum tem sido descrito e associado como agente etiológico de abortamentos infecciosos em bovinos. Esta doença em cães também tem caráter abortivo, mas como os caninos são hospedeiros definitivos, possuem relevante importância no ciclo de vida deste parasita, funcionando como reservatório da doença. Outras doenças como a leptospirose e a brucelose também são disseminadas em nosso país e também estão associadas a transtornos reprodutivos. O objetivo deste estudo foi avaliar a presença de infecção para N. caninum em bovinos e cães existentes em propriedades rurais de dois municípios, Viçosa e Mercês, pertencentes à Macrorregião Zona da Mata do Estado de Minas Gerais, bem como analisar a existência de fatores de risco para a infecção. Foram coletadas amostras de soro de bovinos fêmeas e cães para pesquisa de anticorpos anti-N. caninum, pela técnica de imunofluorescência indireta; Brucella abortus prova seletiva (Antígeno Acidificado Tamponado - AAT) e provas confirmatórias (2-ME e SAT) e Leptospira sp., Técnica de Aglutinação Microscópica (MAT) sem e com diluição dos soros. Os soros bovinos foram testados para os três bio-agentes patogênicos e os de cães para N. caninum e Leptospira sp. Adicionalmente, foram coletadas informações, utilizando-se questionário estruturado, relativas ao tipo de exploração, sistema de produção e histórico de problemas reprodutivos em bovinos e hábitos, tipo de alimentação, características demográficas dos cães. As prevalências de propriedades positivas foram de 54,3% e 18,5% para N. caninum em bovinos e cães, respectivamente; 15,2% para Brucella abortus e 6,5% para Leptospira sp. em bovinos e 7,4% para Leptospira sp. em cães. As prevalências de animais positivos apresentaram resultados menores: 23,3% de N. caninum em bovinos e cães, respectivamente; 15,2% para Brucella abortus e 6,5% para Leptospira sp. em bovinos e 7,4% para Leptospira, entretanto, é de se destacar que, para os bovinos, a prevalência para N. caninum, significativamente superior quando comparada a Brucella abortus (p < 0,01) e Leptospira sp. (p < 0,01). Propriedades positivas para neosporose bovina estiveram associadas à presença de distúrbios reprodutivos nos animais (p < 0,01), quando a análise considerou o tipo de distúrbio, abortamento (OR = 5,2; IC 95% = 1,32-20,54) e mortalidade perinatal (OR = 6,0; IC95% = 1,22 - 29,95) apresentaram associação significativa. A ocorrência de sorologia positiva para N. caninum em bovinos esteve associada à presença de cães positivos na propriedade (p < 0,01), entretanto, problema reprodutivo em bovinos não esteve associado à neosporose canina (p = 0,1046). Associação significativa também foi verificada entre a neosporose bovina e o tipo de exploração, sendo que os bovinos soropositivos tiveram, aproximadamente, três vezes mais chance (OR = 2,82 e IC 95% = 1,05 - 9,52) de pertencerem a sistema de produção tipo leite do que tipo misto. A caracterização da neosporose canina não revelou associação significativa com as variáveis sexo (p = 0,55), idade (p = 0,34), hábito do animal (p = 0,03; OR = 0,00; IC 95% = 0,0-1,06) e tipo de alimentação (p = 0,11). Os resultados sugerem o significado sanitário que a neosporose vem assumindo em rebanhos bovinos, notadamente quando se considera a ocorrência de problemas reprodutivos decorrentes da infecção. Nesse sentido, evidencia-se a atenção necessária das autoridades e instituições de saúde animal, no combate a esta enfermidade.

No presente estudo, buscou-se avaliar quais seriam as cepas de herpesvírus bovinos tipos 1 (BoHV-1) e 5 (BoHV-5) seriam mais adequadas para uso como vírus de confrontação em testes de soroneurtralização (SN). Oitocentas e dez amostras de soros de duas regiões geograficamente distintas foram avaliadas à SN frente a seis diferentes cepas virais, incluindo tipos e subtipos diversos (BoHV-1.1: EVI123/98 e Los Angeles; BoHV-1.2a: SV265/96; BoHV-5a: EVI88/95; BoHV-5b: A663 e BoHV-5c: ISO95/97). A maior sensibilidade foi revelada pelo somatório de soropositivos identificados com as seis cepas utilizadas no estudo. Uma combinação de quatro vírus (BoHV-1.1: LA e EVI123/98, BoHV-5a: EVI88/95 e BoHV-5b: A663) foi capaz de detectar 99,1% das amostras soropositivas. Estes quatro vírus foram selecionados para serem utilizados em um levantamento soroepidemiológico com o intuito de estimar a prevalência das infecções causadas pelos BoHV-1 e BoHV-5 no Estado do Rio Grande do Sul. Para tanto, soros de 2200 fêmeas bovinas adultas (>24 meses), representativos da população bovina do Rio Grande do Sul, foram submetidos à SN frente às quatro cepas virais escolhidas. om esta combinação, a soroprevalência média das infecções por BoHV-1 e BoHV-5 encontrada foi de 29,2%. Além disso, analisando outros fatores que pudessem influenciar a prevalência das infecções, foram considerados fatores de risco o tipo de exploração corte, a ausência da prática de ordenha, o contato dos bovinos com ovinos/caprinos e animais silvestres, a venda de animais de reprodução, o uso de piquetes de parto/pós-parto, o uso de assistência veterinária privada e a criação de animais de raças européias de corte. Os resultados obtidos no presente trabalho demonstraram que, para que a SN seja capaz de detectar animais soropositivos ao BoHV-1 e BoHV-5 com a máxima sensibilidade, o teste deve ser realizado com várias amostras de BoHV-1 e BoHV-5, não necessariamente de tipos ou subtipos diferentes, pois amostras do mesmo tipo de vírus apresentarrm diferentes sensibilidades. Além disso, as amostras de confrontação podem variar de acordo com a região geográfica de origem dos soros. Os resultados obtidos nesse levantamento revelam que anticorpos anti-BoHV-1 e anti-BoHV-5 encontram-se amplamente distribuidos nos rebanhos gaúchos. No entanto, não foi possível determinar a prevalência tipo-específica destas infecções com os testes realizados. Assim, a proporção de animais que estão infectados com o BoHV-1 ou com o BoHV-5 (ou ambos) na região examinada permanece desconhecida. / In this study a search was carried out to determine which of a number of available strains/isolates of bovine herpesviruses types 1 (BoHV-1) and 5 (BoHV-5) would be more suitable for use as challenge virus in serum neutralization (SN) tests. Eight hundred and ten bovine serum samples collected from two geographically distinct regions were evaluated in SN tests against six BoHVs of different types and subtypes (BoHV-1.1: EVI123/98 and Los Angeles; BoHV-1.2a: SV265/96; BoHV-5a: EVI88/95; BoHV-5b: A663 and BoHV-5c: ISO95/97). The highest sensitivity was achieved when the SN-positive sera obtained with the six different viruses were added. A combination of four viruses (BoHV-1.1 LA, and EVI123/98, BoHV-5a EVI88/95 and BoHV-5b A663), was able to detect 99.1% of the seropositive samples. These four viruses were selected to carry out a seroepidemiological survey to estimate BoHV-1 and BoHV-5 prevalence in the state of Rio Grande do Sul. In order to achieve that, sera from 2,200 bovine female cows (>24 months-old), representative of the bovine population of Rio Grande do Sul state were tested on SN tests against the four selected viruses. With such combination, seroprevalence of BoHV-1 and BoHV-5 infections was 29.2%. After examining potential factors that might affect the prevalence of such infections, the following were considered as significant risk factors: the type of exploitation (beef cattle > dairy), use of milking procedures, concomitant presence of sheep, goats or wild animals in farm; sale of animals for reproductive purposes; use of pre and postparturition paddocks; use of private veterinary assistance and farming of European beef breeds. The results obtained here indicate that for the SN test to provide the highest sensitivity in detecting BoHV-1 and BoHV-5 seroposivive animals, it must be performed against a number of BoHV-1 and BoHV-5 strains, though not necessarily of different types and subtypes as viruses within a same subtype may display different sensitivities. Besides, challenge viruses may vary for geographically distinct areas. The serological survey performed with four distinct bovine herpesviruses reveal that antibodies to BoHV-1 and BoHV-5 are widely distributed among cattle flocks in Rio Grande do Sul. However, it was not possible to determine type-specific prevalence with the tests performed. Thus, the proportion of cattle actually infected with either BoHV-1 or BoHV-5 (or both) in the examined region remains undetermined.

Made available in DSpace on 2016-04-28T20:16:31Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2006-Alziro Vasconcelos Carneiro.pdf: 455403 bytes, checksum: 96b519d909bc30f30ddc42546978acfb (MD5) Previous issue date: 2006-07-31 / There are several pathogens causing bovine mastitis, but only Streptococcus agalactiae is feasible to be eradicated from a herd. Two herd data ( A and B ) were used to evaluate the economic and technical viability of the eradication of this pathogen, based on this pathogen attack program. It was used a 24 month period data from production; somatic cells count (SCC), clinical mastitis and expenditures. A cost-benefit analysis was carried out through mathematical models. It was identified 16 infected cows with S. agalactiae in herd A , and in herd B , there were 42, from which 31 associated with Staphylococcus aureus. The therapy effectiveness in eliminating S. agalactiae was about 100% in both herds. However, 18 cows kept the infection of S. aureus after the therapy (42% of effectiveness). The number of cases and cows with mastitis decrease was about 18% and 21%, respectively. For herd B it was found a SCC growing tendency on infected group and on total milk, 12 months before the therapy (980x10P 3 P and 968x10P 3 P cells/ml averages, respectively) and stabilization after treatment (577x10P 3 P cells/ml and 563x10P 3 P cells/ml averages, respectively). Treatment cost was about R$ 175.95 per cow considering the following higher cost items: laboratory exams (39%); milk discard (31%); veterinary medicaments and labor for additional operations (20%); and veterinary fees (10%). Payment due to quality and to the decrease in clinical mastitis cases represented about 55% e 34% of total benefit. However, it was not found significant milk production increase for treatment program (p>0.05), in treated group, nor in herd B . It was estimated about 11.67; 6.45 and 2.61 monetary unit return for each unit invested. Prophylactic procedures were important to eradicate and maintain the herd free from S. agalactiae, they have also contributed for lower incidence of clinical mastitis, decreasing SCC and discard/precocious mortality, so its adoption is recommended. Considering Brazilian requirements relative to somatic cells and milk total bacterial as well as S. agalactiae role in increasing these parameters, it is suggested an eradication program of this pathogen, which may help farmers to maintain production under standard requirements, as well as the consumers reducing risk and Government income loss due to taxes collection. / Entre os v?rios pat?genos causadores de mastite, o ?nico que pode ser erradicado do rebanho ? Streptococcus agalactiae. Dados de dois rebanhos, 'A' e 'B', foram utilizados para avaliar a viabilidade t?cnica e econ?mica de um programa de erradica??o deste pat?geno. Foram utilizados dados de produ??o, contagem de c?lulas som?ticas (CCS), mastite cl?nica e financeiros, de 24 meses. An?lise custo/benef?cio foi realizada com aux?lio de modelos matem?ticos. Identificaram-se 16 vacas infectadas com S. agalactiae no rebanho 'A' e 42 no rebanho 'B', sendo que destas ?ltimas, 31 apresentaram infec??o associada com Staphylococcus aureus. A efic?cia da terapia de ataque foi de 100% nos dois rebanhos. Entretanto, 18 vacas no rebanho B mantiveram a infec??o por S. aureus ap?s a terapia (42% de efic?cia). No rebanho 'B', a redu??o do n?mero de casos e de vacas com mastite cl?nica foi de 18 e 21%, respectivamente. A CCS apresentou tend?ncia crescente no grupo infectado e no leite total, nos 12 meses antecedentes ? terapia, com as m?dias de 980x103 e 968x103 c?l/ml, respectivamente. Ap?s o tratamento, as m?dias estabilizaram-se em 541x103 e 563x103 c?l/ml, respectivamente. O custo do tratamento foi de R$ 175,95 por vaca/tratada, sendo 39% deste com exames laboratoriais, 31% descarte de leite, 20% medicamentos e m?o-de-obra devido a opera??es adicionais e 10% honor?rios do m?dico veterin?rio. O pagamento por qualidade e a redu??o dos custos com a mastite cl?nica representaram 55% e 34% do benef?cio. Aumento significativo n?o foi observado (p>0,05) na produ??o m?dia de leite dos grupos tratados e do rebanho 'B'. Estimaram-se retornos de 11,67, 6,45 e 2,63 unidades monet?rias para cada unidade investida no programa de erradica??o de S. agalactiae. As medidas terap?uticas e profil?ticas foram eficazes para erradicar e manter o rebanho livre de S. agalactiae, al?m de contribu?rem para reduzir a CCS do leite, a incid?ncia de mastite cl?nica, o descarte/mortalidade precoce e proporcionou ganhos em programa de pagamento por qualidade, sendo sua ado??o recomend?vel. Considerando as exig?ncias brasileiras com rela??o ao limite de c?lulas som?ticas e de bact?rias totais no leite e o papel de S. agalactiae no aumento desses par?metros, o programa de erradica??o deste pat?geno pode significar a perman?ncia do produtor na atividade formal, al?m de reduzir risco para os consumidores e perdas de receitas do Governo com recolhimento de impostos.

O vírus da diarreia viral bovina (BVDV) causa uma das doenças mais importantes de bovinos em termos de custos econômicos e sociais, uma vez que é largamente disseminado na população de gado leiteiro. Os objetivos do trabalho foram estimar a prevalência em nível de rebanho e investigar fatores associados aos níveis de anticorpos em leite de tanque através de um estudo de caso-controle pareado, bem como discutir estratégias de construção de modelos. Para estimar a prevalência de rebanho, amostras de tanque de leite foram selecionadas aleatoriamente (n = 314) de uma população (N = 1604). A prevalência real de BVDV foi de 24,3% (IC95% = 20,1-29,3%). Para o estudo de caso-controle, rebanhos positivos para BVDV (altos níveis de anticorpos) foram classificados como casos (n = 21) e pareados (n = 63) por produção de leite com rebanhos que apresentaram baixos títulos de anticorpos (razão 1:3). Para análise, três modelos multivariáveis foram construídos: 1) modelo completo, onde todas as 21 variáveis independentes foram oferecidas, e dois modelos foram criados de acordo com conhecimento empírico e similaridades entre as variáveis independentes, 2) modelo de fatores animais e 3) modelo de biossegurança. Um questionário foi aplicado (n = 84) para obtenção de informações a respeito de possíveis fatores de risco para BVDV. O modelo completo (Modelo 1) identificou as seguintes variáveis: idade com critério de eliminação (OR = 0,10; IC95% = 0,02 – 0,39; P < 0,01); propriedades que forneceram leite a outras cooperativas anteriormente (OR = 4,13; IC95% = 1,17 - 14,49; P = 0,02) e a presença de piquete de isolamento para animais doentes (OR = 0,14; IC95% = 0,01 – 0,26; P = 0,02). O modelo de biossegurança (Modelo 3) revelou uma associação significativa com o uso de monta natural (OR = 9,03; IC95% = 2,14 – 38,03; P < 0,01); presença de piquete de isolamento para animais doentes (OR = 0,06; IC95% = 0,05 – 0,83; P = 0,03); anos fornecendo leite para a mesma cooperativa (OR = 0,94; IC95% = 0,91 – 0,97; P < 0,01) e contato direto pela cerca entre bovinos de propriedades vizinhas (OR = 5,78; IC95% = 1,41 – 23,67; P = 0,04). O modelo de biossegurança pode ser considerado o “melhor”, pois obteve AIC = 43,880 e BIC = 48,058 menores quando comparado com o modelo completo que obteve AIC = 50,445 e BIC = 53,779. Esta dissertação tem a intenção de promover a discussão sobre as estratégias de construção de modelos especialmente quando se trata de saúde animal. Recomenda-se a aplicação de agrupamento de variáveis independentes como uma boa alternativa na construção de modelos, uma vez que este processo pode levar a uma melhor compreensão a respeito da associação entre cause e efeito de doenças. / Bovine viral diarrhea virus (BVDV) causes one of the most important diseases of cattle in terms of economic costs and welfare, since it is widespread in the dairy cattle population. The aims were to estimate herd prevalence and investigate factors associated with antibodies in bulk tank milk (BTM) in dairy herds through a matched case-control design as well as discuss model-building strategies. To estimate herd prevalence, BTM samples were randomly selected (n = 314) from a population (N = 1604). The true prevalence of BVDV was 24.3% (CI95% = 20.1 - 29.3%). For the case-control study, BVDV antibody-positive herds (high antibody titers) were classified as cases (n = 21) and matched (n = 63) by milk production with herds presenting low antibody titers (ratio of 1:3). For analysis, three multivariable models were built: 1) full model, holding all 21 independent variables; and two models divided according to empirical knowledge and similarity among independent variables, i.e., 2) animal factor model and 3) biosecurity model. A questionnaire was applied (n = 84) to get information about possible BVDV risk factors. The full model (model 1) identified the following variables: age as a culling criteria (OR = 0.10; IC95% = 0.02 – 0.39; P < 0.01); farms that provided milk to other industries previously (OR = 4.13; IC95% = 1.17 – 14.49; P = 0.02); and isolation paddocks for ill animals (OR = 0.14; IC95% = 0.01 – 0.26; P = 0.02). The biosecurity model (model 3) revealed a significant association with the use of natural mating (OR = 9.03; IC95% = 2.14 – 38.03; P < 0.01); isolation paddocks for ill animals (OR = 0.06; IC95% = 0.05 – 0.83; P = 0.03); years providing milk for the same industry (OR = 0.94; CI95% = 0.89 - 0.99; P = 0.02); and direct contact over fences among cattle of neighboring farms (OR = 5.78; IC95% = 1.41 – 23.67; P = 0.04). The biosecurity model could be considered the “best” since AIC = 43,880 and BIC = 48,058 when compared with the full model where AIC = 50,445 and BIC = 53,579. This paper intends to promote discussion about the model-building strategy when animal-health-modeling is on the line. We recommend the application of grouping predictors as a good choice for model building since it could lead to a better understanding of disease-exposure associations.