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Avaliação morfoquantitativa das expressões do IGF-I, Insulina e de seus receptores na polpa dentária e no epitélio juncional de ratos wistar na fase púbere, submetidos à subnutrição proteica pré e pós-natal e à renutrição pós-natal / Morfoquantitative evaluation of the expressions of IGF-I, Insulin and their receptors on dental pulp and junctional ephitelium of pubescent wistar rats subjected to protein undernutrition and postnatal refeeding

Gonçalves, Aline 10 February 2012 (has links)
Fatores nutricionais e metabólicos são capazes de comprometer o desenvolvimento pleno dos tecidos dentários, especialmente quando impingidos em períodos críticos. Estudos revelam que condições derivadas da subnutrição precoce e também tardia, interferem na atividade da insulina e do sistema IGF, demonstrando possível envolvimento com algumas patologias e apontando, em sua maioria, caráter permanente em alto grau, se não imediato, prospectivo e comprometedor da performance morfológica e funcional dos tecidos. Desta maneira, o presente estudo teve o propósito de avaliar os efeitos da subnutrição proteica pré e pós-natal e da renutrição pós-natal sobre o desenvolvimento da polpa dentária e do epitélio juncional do periodonto de ratos wistar, visando encontrar possível correspondência entre as alterações metabólicas e morfofuncionais decorrentes da subnutrição proteica, previamente relacionadas em estudos relativos à ação desses hormônios. Para tanto, formou-se grupos de animais heterogênicos (n=3) que, de acordo com a ração oferecida, normoproteica ou hipoproteica, e as respectivas idades, foram divididos nos seguintes grupos experimentais: nutridos (N) e subnutridos (S) com 60 dias de vida (fase na qual o período púbere termina) e renutridos (R), recuperados a partir de 22 até alcançarem 60 dias de vida. Após a eutanásia, os espécimes foram submetidos às técnicas de microscopia de luz (coradas com Azo-Carmim, Hematoxilina-Eosina e Picro-Sirius, esta última para a avaliação do componente colágeno) e imunohistoquímica para a identificação da expressão do IGF-I, insulina e respectivos receptores. A polpa dentária apresentou-se debilitada sob subnutrição o que foi verificado através da desorganização da camada odontoblástica e da estagnação dos componentes colágenos nos animais subnutridos. A renutrição não foi capaz de promover a recuperação de nenhum dos dois parâmetros. O estudo morfométrico permitiu verificar que a porcentagem média do número de expressões ao IGF-I foi maior nos animais do grupo N e que houve diferenças estatísticas significantes entre estes e os animais dos grupos S e R. Da mesma forma, a maior expressão de seus receptores (IGF-IR) foi encontrada nos animais do grupo N com indicação de diferença estatística apenas entre este e o grupo de animais subnutridos. A maior porcentagem média das expressões de insulina ocorreu nos animais nutridos (N), mas estatisticamente não foi detectada diferença significativa entre os grupos. Já em relação ao receptor de insulina (IR), foram constatadas diferenças estatísticas significativas entre o grupo N em relação aos grupos S e R. No epitélio juncional, a subnutrição determinou modificações no padrão das células e camadas epiteliais nos animais subnutridos, além de uma maior quantidade de colágeno do tipo III no tecido conjuntivo que o sustenta, caracterizando um atraso no desenvolvimento desses tecidos. A renutrição não foi capaz de recuperar satisfatoriamente os seus componentes estruturais. Sobre as expressões imunohistoquímicas a todos os anticorpos utilizados (para IGF-I, IGF-IR, I e IR), a análise estatística demonstrou não haver diferenças significativas entre os valores encontrados nos diferentes grupos N, S e R no epitélio juncional. / Nutritional and metabolic factors can cause serious injury of the development of dental tissue, especially when occurred in critical periods. Several studies reveal that conditions derived from early and later under nutrition interfere in insulin and IGF system activities; in these studies has been demonstrated the possible involvement of some pathologies most of them pointing to permanent in high degree (if not immediate) prospective and \"possible dangerous\" morphological and functional performance of tissues. Thus, the present study aimed to evaluate the effects of the pre and post-natal protein under nutrition, and, post-natal refeeding on the development of the dental pulp and periodontal junctional ephitelium of wistar rats, in order to find possible correlation between the metabolic and morph-functional changes arising from protein under nutrition, previously associated with studies related to the effects of these hormones. For this purpose, heterogenic animal groups were formed (n=3) divided in accordance of their diets (protein or hypo protein) and their ages into the following experimental groups: nourished (N) under nourished (S) aged 60 days (final of pubescent l periods) and renourish (R), recovered from the 22nd to 60th day old. After euthanasia, the specimens were analyzed by light microscopy (stained with Azo-carmine, Hematoxylin-Eosin and Picro Sirius, the later for collagen component analysis) and immunohistochemistry examination for identification of IGF-I expression, Insulin and respective receptors. The dental pulp turned out to be impaired in the context of undernutrition. This phenomenom was seen through disorganization of the odontoblastic layer and the stagnation of collagen components in undernourished animals. The refeeding procedure was unable to promote the recovery from any of the two parameters. With the immunohistochemistry on the dental pulp, it was found that the number of IGF-I expression was higher in group N and that there were significant differences involving these animals and those from groups S and R. Similarly, the highest expression of their receptors (IGF-IR) was found in group N, demonstrating statistical difference between this one and the group of undernourished animals. The highest average percentage of the expressions of insulin occurred in nourished animals (N), but no statistically significant difference was detected among the groups. In regard to the insulin receptor (IR), statistically significant differences were found when the group N was compared to groups S and R. In the junctional ephitelium, the undernutrition determined changes in the pattern of epithelial cells in undernourished animals and the prevalence of type III collagen fibers in the connective tissue that supports it, featuring a delay in the development of these tissues. The refeeding was not able to satisfactorily recover their structural components. About immunohistochemical expressions of all antibodies used for IGF-I, IGF-IR, I e IR in the junctional ephitelium, the statistical analysis showed no significant differences among the values found in the groups N, S and R.
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Estrutura e ultraestrutura do epitélio epididimário de búfalos (Bubalus bubalis) em diferentes idades

SANTOS, Jeannie Nascimento dos 17 February 1995 (has links)
Submitted by Edisangela Bastos (edisangela@ufpa.br) on 2018-04-06T12:15:35Z No. of bitstreams: 3 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Dissertacao_EstruturaUltraestruturaEpitelio_V1.pdf: 17273231 bytes, checksum: db1635b53053bc3eebbf1894ffe67011 (MD5) Dissertacao_EstruturaUltraestruturaEpitelio_V2.pdf: 12684613 bytes, checksum: 826f4b5f08715b160395fa7341835d24 (MD5) / Approved for entry into archive by Edisangela Bastos (edisangela@ufpa.br) on 2018-04-09T11:45:21Z (GMT) No. of bitstreams: 3 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Dissertacao_EstruturaUltraestruturaEpitelio_V1.pdf: 17273231 bytes, checksum: db1635b53053bc3eebbf1894ffe67011 (MD5) Dissertacao_EstruturaUltraestruturaEpitelio_V2.pdf: 12684613 bytes, checksum: 826f4b5f08715b160395fa7341835d24 (MD5) / Made available in DSpace on 2018-04-09T11:45:21Z (GMT). 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A microscopia de luz inclui técnica de rotina para coloração com Hematoxilina e Eosina, histoquímica com P AS e análise morfométrica para diâmetros de túbulo e lúmen e alturas de epitélio e estereocílios. À microscopia eletrônica foram analisados os aspectos ultraestruturais dos tipos celulares do epitélio epididimário e duetos eferentes. Ao longo do epidídimo, à microscopia de luz, observou-se em ambas as faixas etárias, células Principais (P), Basais (B), Apicais (A) e leucócitos intraepiteliais (LI). Figuras mitóticas no terço apical do epitélio também estavam presentes, sendo mais numerosas nas sub-regiões B e C, principalmente em búfalos prépúberes. A análise histoquímica revelou a existência de atividade secretória a partir dos 5 meses de idade, principalmente na sub-região A, a qual contém os duetos eferentes e nestes a atividade se torna cada vez maior com o amadurecimento do animal. Através da análise morfométrica, observou-se que os búfalos em pré-puberdade já possuem bem definidas as variações dos diâmetros tubular e lurninal e das alturas de epitélio e estereoecílios, que se mostraram semelhantes ao observado nos animais pós-púberes. Os diâmetros tubular e lurninal são crescentes entre as sub-regiões A e G, enquanto as alturas de epitélio e estreocílios apresentam um comportamento contrário; mais, em ambos os aspectos morfométricos existe uma diferença significativa (p<O,O5), considerando-se as sub-regiões entre as faixas etárias. Os aspectos ultraestruturais do epitélio em pré e pós-púberes, não mostraram diferença entre A e P; as células B se assemelharam a células de reserva enquanto LI se assemelharam a linfócitos e macrófagos. As células P apresentaram características secretórias e absortivas que variaram de intensidade entre as sub-regiões, especialmente nos búfalos pó-spúberes. O animal de quatro meses de idade já apresentou grande atividade epitelial nas sub-regiões da cauda (F e G) e na sub-região G, possui volumosas estruturas paracristalinas intracitoplasmáticas e intranucleares, também observadas nas sub-regiões E, F e G dos animais pós-púberes. Estas estruturas estão associadas possivelmente ao armazenamento de proteínas / The zonation of the buffalo epididymis of Mediterranea (Me), Murrah (mu) breeds and croosbreed Me x Mu was studied in 4 to 36 month old animals. These buffalos were c1assified in two groups, the animals which have not reached puberty (sexually immature) and animals (mature animals) and their epididymis was divided in 7 subregions called A to G. each subregion was analysed with and transmission electron microscopy. Light microscopy inc1uded routine staining with Hematoxilin & Eosin (HE), histochemistry with P AS and morphometric analysis for tubular and luminal diameters and height of epithelium and stereocilia. Throughout the epididymary tubule it was observed with light microscopy that tubules of alI ages have Principal cell (P), basal cell (B), Apical ceeII (A) and intraepithelialleukocytes (LI). Mitotic figures in the apical region of the epithelium are also found and are more numerous in the B and C subregions, specially in buffalos between 5 and 9 months of age. Histochemical analysis revealed the existence of secretory activity from the 5th month of age, principally in the A subregion, where the activity increases with sexual maturation. Morphometric analysis supports the idea that the buffalos which have not reached puberty already havee weell determined diameters and height variations of the tubule, lumen, epithelium and stereocilia. These variations were similar to that observed in buffalos after puberty. Tubular and luminal diameters increase from the A to G subregions while the height of epithelium and stereocilia diminish. However, in both morphometric features a significant difference (p<O.O5) was verified between the subregions of the animals sexually immature and animals after puberty. Ultraestructural features of the epididymary epithelium in both age ranges reveal no differences among the A and P cells; B cells appear to be reserve cells, while LI are similar to lymphocytes and macrophages. In P cells Llltrastructural features suggestive of secretory and absorptive activities were found in varying intensities in alI subregion, specially in buffalos after puberty. The 4 month old mimal already had an accentuated epithelial activity in its caudal subregions (P and G). The G subregion had large cytoplasmic and intranuc1ear paracristalline structures, similar to that Jbserved in E, P and G subregions of buffalos after puberty. These structures are probably !lssociated protein storage.
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Metástases para a cavidade oral: estudo retrospectivo e análise crítica da literatura / Metastasis to the oral cavity: a retrospective study and review of literature

Machado, Breno Enrico Lemos 18 July 2016 (has links)
Metástases para a região oral podem ocorrer nos tecidos moles ou nos ossos maxilares. Tumores metastáticos para a cavidade oral são raros, compreendendo aproximadamente 1% das neoplasias encontradas na região oral. Devido à sua raridade, o diagnóstico de uma lesão metastática na região oral é difícil; tanto para o clínico como para o patologista, ao reconhecer que uma lesão é metastática e na determinação do local de origem. Foram revisados 9 casos sendo 5 mulheres e 4 homens com idades entre 57 e 80 anos e realizada uma crítica revisão da literatura. No presente estudo não foi possível determinar a prevalência das metástases para os ossos maxilares ou para os tecidos moles da cavidade oral; Entretanto, nosso estudo mostra que o exame das estruturas orais é absolutamente fundamental no acompanhamento desses pacientes, pois a presença de possíveis massas metastáticas pode indicar uma neoplasia oculta ou mesmo a falha terapêutica. / Metastasis to the oral region may occur in the soft tissue or jaw bone. Metastatic tumors to the oral cavity are rare, comprising about 1% of neoplasms found in the oral region. Because of its rarity, the diagnosis of a metastatic lesion in the oral region is difficult; both for the clinician and for the pathologist to recognize that an injury is metastatic and determination of the place of origin. 9 cases with 5 women and 4 men aged between 57 and 80 years and performed a critical review of the literature were reviewed. In the present study could not determine the prevalence of metastasis to the jaw bones or the soft tissues of the oral cavity; However, our study shows that the examination of oral structures is absolutely essential to monitor these patients, because the presence of possible metastatic masses may indicate a hidden cancer or treatment failure.
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Utilização de zinco, na forma de óxido de zinco nanoparticulado, em dietas para leitões recém-desmamados / Dietary zinc supplementation, as zinc oxide nanoparticles, in weanling pig diets

Milani, Natália Cristina 18 November 2016 (has links)
O objetivo deste estudo foi avaliar os efeitos da suplementação de Zn (na forma de ZnO nanoparticulado) em dietas para leitões recém-desmamados sobre o desempenho, a ocorrência de diarreia, a digestibilidade dos nutrientes, a excreção de Zn nas fezes, os parâmetros sanguíneos, a histologia do epitélio intestinal, a morfometria de órgãos e a contagem bacteriana no conteúdo intestinal em comparação ao uso de dose farmacológica de Zn (na forma de ZnO). Foram utilizados 192 leitões desmamados aos 21 dias, em um experimento em blocos casualizados, com 6 tratamentos, 8 repetições (blocos) e 4 animais por unidade experimental (baia). Os tratamentos foram: controle negativo - dieta basal com 100 mg de Zn/kg de ração (na forma de ZnO); controle positivo - dieta basal com 2400 mg de Zn/kg de ração (na forma de ZnO), e dieta basal com 12, 24, 48 ou 96 mg de Zn/kg de ração (na forma de ZnO-N). Os leitões foram alimentados com as dietas experimentais, durante os primeiros 21 dias de experimento. Dos 22 aos 35 dias, todos os animais foram alimentados com uma única dieta, com níveis basais de Zn. A ocorrência de diarreia foi registrada diariamente. Amostras de fezes foram coletadas para determinação da digestibilidade dos nutrientes da dieta e quantificação do Zn excretado. Amostras de sangue foram coletadas no 19° dia do experimento para análise dos parâmetros sanguíneos. No 21º dia, um animal de cada baia foi abatido para a realização da morfometria dos órgãos, histologia do epitélio intestinal e contagem bacteriana. Os dados foram submetidos à análise de variância e à regressão polinomial. Contrastes ortogonais foram utilizados para comparar o tratamento controle positivo com cada um dos níveis de Zn (na forma de ZnO-N). Não foram observados efeitos dos níveis de Zn (ZnO-N) sobre o desempenho, a excreção de Zn nas fezes, o hemograma, a morfometria de órgãos, a histologia do epitélio intestinal e a contagem bacteriana no conteúdo intestinal. O aumento dos níveis de Zn (ZnO-N) aumentou linearmente a digestibilidade aparente dos nutrientes da dieta. Foi observado efeito quadrático dos níveis de Zn (ZnO-N) sobre a frequência da ocorrência de diarreia entre os dias 1 e 7 e sobre a concentração plasmática de Zn. No período de 1 a 21 dias foi observado um menor consumo diário de ração para os níveis de Zn (ZnO-N) em comparação ao controle positivo. Não foram observados diferenças entre o controle positivo e os níveis de Zn (ZnO-N) para as variáveis de desempenho e a frequência da ocorrência de diarreia durante o período de 21 a 35 dias. Foi observada uma menor excreção de Zn nas fezes, e uma menor concentração plasmática de Zn para os níveis de Zn (ZnO-N) em comparação ao controle positivo. A suplementação de Zn, na forma de ZnO-N, não foi capaz de substituir a dose farmacológica de Zn (ZnO) no controle da diarreia após o desmame. Os níveis de Zn, na forma de ZnO-N, não ocasionaram toxicidade nos animais e propiciaram uma redução na excreção de Zn nas fezes. / The purpose of this study was to evaluate the effects of dietary Zn (as ZnO nanoparticles) on performance, diarrhea occurrence, nutrient digestibility, Zn excretion in the feces, blood parameters, histology of gut epithelium, organs morphometry and intestinal bacterial count of weanling pigs compared to the use of pharmacological doses of Zn (as ZnO). One hundred and ninety-two 21d-weaned pigs (5.90±0.83 kg BW) were used in a randomized complete block design experiment with 6 treatments, 8 replications per treatment, and 4 animals per experimental unit (pen). The treatments were: negative control (NC): basal diet (based on corn, soybean meal, dried whey and dried plasma) with 100 mg Zn (as ZnO)/kg diet; positive control (PC): basal diet with 2,400 mg Zn(as conventional ZnO, 150nm)/kg diet and basal diet with 12, 24, 48 or 96 mg Zn (as ZnO-N, 70nm)/kg diet. Pigs were fed dietary treatments from 1 to 21 d feeding period followed by a common diet (same diet for all treatments) from 22 to 35 d feeding period. Diarrhea occurrence was recorded daily. Feces samples were collected to determine the digestibility of the diet and to quantify the Zn excreted. Blood samples were collected on the 19th day of the experiment for analysis of blood parameters. On the 21th day one pig per pen was slaughtered for the analyses of organs morphometry, intestinal epithelium histology and bacterial count. ANOVA and polynomial regression analysis (for levels of Zn as ZnO-N) were performed. Orthogonal contrasts were used to compare positive control with each level of Zn (as ZnO-N). No effects of Zn levels (as ZnO-N) were observed on performance, Zn excretion on feces, blood count, organs morphometry, intestinal epithelium histology and intestinal bacterial count. Increased levels of Zn (as ZnO-N) linearly increased the apparent digestibility of nutrients. It was observed a quadratic effect of Zn levels (as ZnO-N) on the frequency of diarrhea occurrence between 1 and 7 d and on the Zn plasma concentration. From 1 to 21 d of experimental period, lower daily feed intake for Zn levels (as ZnO-N) was observed compared to positive control. No differences were observed among the positive control and levels of Zn (as ZnO-N) for performance and diarrhea occurrence during the period 21 to 35 d. Lower Zn excretion in feces and lower Zn plasma concentration were observed for Zn levels (as ZnO-N) compared to the positive control. Zn supplementation, as ZnO-N, could not to replace the pharmacological dose of Zn (ZnO) to control diarrhea after weaning. The levels of Zn, as ZnO-N, did not cause toxicity of weanling pigs and reduced Zn excretion in the feces.
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Efeito das diferentes frações do material particulado proveniente da emissão de motores movidos a óleo diesel sobre o epitélio do palato da rã / Effects of different fractions from diesel engines exhaust particles on the frog ciliated epithelium

Trindade, Sergio Henrique Kiemle 30 March 2011 (has links)
INTRODUÇÃO: A poluição atmosférica é reconhecida como fonte de possíveis agravos à saúde. Estudos tem demonstrado uma clara associação entre aumento da concentração dos poluentes atmosféricos, especialmente o material particulado proveniente de resíduos de exaustão de motores movidos a diesel, com morbidade e mortalidade respiratória e cardíaca na população geral. Até o presente momento, sabe-se que o material particulado possui ações deletérias sobre as vias aéreas superiores e inferiores; contudo, ainda não são completamente conhecidas as ações tóxicas isoladas das diferentes frações do material particulado do diesel. OBJETIVO: O presente estudo teve por finalidade avaliar o grau de toxicidade das frações orgânicas de baixa, média e alta polaridade e da fração inorgânica do material particulado proveniente da emissão de motores movidos a óleo diesel sobre o epitélio mucociliar. MÉTODOS: Para tanto, utilizou-se como modelo experimental a preparação do palato da rã, que possui um epitélio similar ao das vias aéreas de mamíferos. O estudo foi dividido em duas etapas: Fase I - Quarenta palatos foram utilizados com intuito de titular a concentração de material particulado bruto capaz de promover um aumento significante no tempo relativo de transporte mucociliar. Fase II - Uma vez definida a concentração efetiva, cinqüenta palatos foram expostos aos seguintes tratamentos: material particulado bruto do diesel (sem nenhum tipo de tratamento), material particulado do diesel tratado com hexano (solvente que reduz a quantidade dos compostos orgânicos de baixa polaridade), material particulado do diesel tratado metanol (solvente que reduz a quantidade de compostos orgânicos de polaridade intermediária, gerando aumento relativo da concentração de orgânicos de baixa e alta polaridade) e material particulado do diesel tratado ácido nítrico (solvente que reduz a concentração de compostos inorgânicos, gerando aumento relativo da fração orgânica como um todo). Para fins de controle utilizou-se um grupo com ringer-rã. As variáveis analisadas foram: tempo relativo de transporte mucociliar, freqüência de batimento ciliar e análise histológica, na qual foram avaliados o volume proporcional de muco ácido, muco neutro, muco misto, de cílios, vacúolos, dos núcleos celulares e interstício e espessura epitelial. RESULTADOS: Fase I: A concentração de material particulado bruto capaz de promover um aumento significativo no tempo relativo de transporte mucociliar, e também do volume proporcional de muco ácido (p<0,05), correspondeu a 12mg/L. Fase II: Observou-se: a) aumento significativo no tempo relativo de transporte mucociliar e redução significativa do volume proporcional de muco neutro no grupo ácido nítrico; b) maior volume proporcional de muco ácido no grupo metanol (p<0,05); c) ausência de diferenças entre o grupo controle e o grupo hexano, tanto na análise histológica quanto no tempo relativo de transporte mucociliar. CONCLUSÃO: Os dados obtidos sugerem que os compostos orgânicos de baixa polaridade do material particulado proveniente da emissão de motores movidos a óleo diesel desempenham um importante papel na toxicidade aguda ao epitélio ciliado / INTRODUCTION: Air pollution is recognized as a source of potential health problems. Studies have shown a clear association between increasing concentration of atmospheric pollutants, especially particulate matter from waste exhaust of diesel engines, and respiratory and cardiac morbidity and mortality in the general population. To date, it is well known that particulate matter from diesel exhaust has deleterious actions on upper and lower airways; however, the isolated toxic actions of different fractions of the particulate matter are not yet fully understood. OBJECTIVE: This study aimed at evaluating the degree of toxicity of the organic fractions of low, intermediate and high polarity and of the inorganic fraction of particulate matter from diesel engines on the ciliated epithelium. METHODS: The experimental model used was the frog palate preparation, which has a similar epithelium to that found in mammalian airways. The study was divided into two phases: Phase I - Forty palates were used in order to titrate the concentration of intact diesel particulate matter able to elicit a significant increase in the relative time of mucociliary transport. Phase II Once defined the optimal concentration, fifty palates were exposed to dilutions with the following treatments: intact diesel particulate material (without any treatment), particulate matter from diesel exhaust treated with hexane (solvent which reduces the amount of organic compounds of low polarity), particulate matter from diesel exhaust treated with methanol (solvent which reduces the amount of organic compounds with intermediate polarity, generating a relative increase in concentration of organic compounds with low and high polarity) and particulate matter from diesel exhaust treated with nitric acid (solvent which removes inorganic compounds, eliciting a relative increase of the organic fraction as a whole). For control purposes, a group of frog-ringer was used. The following variables were analyzed: relative time of mucociliary transport, ciliary beating frequency and histological analysis, which evaluated proportional volume of acid mucus, neutral and mixed mucus, cilia, vacuoles, cell nuclei and interstice, and epithelial thickness. RESULTS: Phase I: The effective concentration of intact diesel particulate matter in eliciting a significant increase in the relative time of mucociliary transport, and a proportional increase of acid mucus volume (p<0.05), corresponded to 12mg/L. Phase II: a) The nitric acid treatment caused a significant increase in the relative time of mucociliary transport, and decrease in the proportional volume of neutral mucus. b) A higher proportional volume of acid mucus was found in the methanol group (p<0.05). c) There were no differences between control and hexane groups regarding histological findings and relative time of mucociliary transport. CONCLUSION: The results suggest that organic compounds of low polarity from diesel engines exhaust particles play an important role in the acute toxicity on the ciliated epithelium
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Estabelecimento de cultura primária de células epiteliais de mucosa oral humana: modelo celular para o estudo de doenças genéticas / Establishment of primary culture from epithelial cells of the human oral mucosa: cellular model for the study of genetic diseases

Russo, Fabiele Baldino 14 December 2010 (has links)
Muitas doenças genéticas permanecem ainda sem sua causa definida. A dificuldade de estudar algumas dessas doenças remontam a problemática da obtenção de material clinico, sugerindo situações extremas para a coleta, dependendo da patologia. Além disso, é necessário que se obtenha material genético em quantidade adequada para os ensaios e que, de preferência, venha de uma fonte celular que não esteja diretamente exposta a mutações. Nesse trabalho estabelecemos o cultivo inédito das células epiteliais de mucosa oral como modelo celular para o estudo de doenças genéticas. As amostras foram coletadas através da raspagem da mucosa oral de voluntários saudáveis. Após estabelecimento do cultivo, as células foram caracterizadas em relação à sua morfologia através de técnica de colorações, ensaios para analisar a viabilidade celular, microscopia eletrônica de transmissão e varredura, analise da expressão de marcadores por imunocitoquímica e por RT-PCR. Os resultados revelaram a expressão de marcadores como citoquetaratinas 4, 13 e 18, conexinas e marcadores de ciclo celular, como PCNA3 e GAPDH. A expressão de marcadores de pluripotência foi negativa, já que essas células são adultas e totalmente diferenciadas. Com a realização deste trabalho, concluímos que essas células são um bom modelo para o estudo de doenças genéticas e futuras terapias gênicas. / Many genetic diseases are still without their cause defined. The difficulty in studying these diseases back to the problem of obtaining clinical material, suggesting extreme situations for the collection, depending on the pathology. Moreover, it is necessary to obtain genetic material in sufficient quantities for testing and preferably come from a cellular source that is not directly exposed to mutations. This work established for the first time, a protocol for culturing of epithelial cells from oral mucosa as a cellular model for studying genetic diseases. The samples were collected by scraping the oral mucosa of healthy volunteers. After the establishment of cultivation, cells were characterized for their morphology by staining technique, tests to analyze cell viability, transmission electron microscopy and scanning, analysis of expression of markers by immunocytochemistry and RT-PCR. The results revealed the expression of markers such as citoquetaratinas 4, 13 and 18, connexins and cell cycle markers, as PCNA3 and GAPDH. The expression of pluripotency markers were negative, as these cells are adult and fully differentiated. With this work, we conclude that these cells are a good model for studying genetic diseases and future gene therapies.
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Efeitos das drogas antiinflamatórias não-estereoidais sobre o epitélio bucal e a capacidade de cicatrização / Effects of non-steroidal anti-inflammatory drugs on oral epithelium and wound healing on skin of rats

Cristiano Nakao 29 August 2008 (has links)
Antiinflamatórios não-esteroidais (AINEs) são muito utilizados para o alívio da dor. Estudos indicam que 1 em 7 pacientes com doenças inflamatórias crônicas usam AINEs e que 1 em 5 pessoas usam AINEs para dores agudas. Os AINEs inibem a cicloxigenase (COX-1 e COX-2) ou seletivamente a COX-2, e apesar de sua excelente ação antiinflamatória e analgésica, muitos são os efeitos colaterais. Problemas gastrointestinais (GI) são a queixa mais comum para os AINEs convencionais, que também são associados a apoptose de diferentes tipos celulares. Os COX-2 seletivos apresentam menos problemas GI, mas seu uso tem sido questionado pelo risco de trombose e enfarto do miocárdio. Todos os AINEs parecem interferir no processo de cicatrização, embora os resultados dos estudos realizados apresentem-se conflitantes. Uma vez que os AINEs são utilizados por grande número de pessoas, o objetivo do nosso trabalho foi avaliar os efeitos dessa medicação sobre o tecido epitelial e durante o processo de cicatrização. Ratos Wistar foram tratados diariamente com AINEs convencional (diclofenaco, 3mg/Kg) ou um COX-2 seletivo (Celecoxibe, 1mg/Kg) por períodos de 7 e 14 dias. O controle foi feito com animais da mesma idade e peso não submetidos ao tratamento com AINEs. Após 7 dias, em todos os animais, controles e tratados, foram realizadas feridas cirúrgicas (4cm de diâmetro) no dorso depilado, sob anestesia com Tribromoetanol. Foram analisados, histológica e histometricamente, os epitélios da mucosa bucal, e a área de cicatrização (3 e 7 dias pós-cirurgia). Os resultados obtidos foram tabelados para avaliação estatística apropriada. No geral foi possível observar que todos os AINEs provocaram alterações com o seu uso agudo, no entanto para os inibidores seletivos da COX- 2 houve uma tendência à normalização com o uso crônico, não observada com o uso do AINE convencional. Na avaliação da cicatrização foi possível observar que os AINEs convencionais provocaram um pequeno atraso no processo de cicatrização, o que não foi observado com o uso de AINE seletivo para COX-2. Foi possível concluir que é necessário cautela em pacientes que fazem uso de AINEs, por provocarem alterações significativas no epitélio bucal, sendo os convencionais os que apresentam alterações mais significativas principalmente a longo prazo / Non-steroidal anti-inflammatory drugs (NSAIDs) are widely used for pain relief mostly in inflammatory chronic diseases. One in 7 patients with chronic inflammatory diseases uses NSAIDs, 1 in 5 uses NSAIDs for acute pain. NSAIDs may inhibit cyclooxygenase (COX-1 and COX-2) or COX-2 selectively, and despite their excellent anti-inflammatory and analgesic action, there are many side effects related. Gastrointestinal (GI) problems are the most commmon complaint for conventional NSAIDs, wich are also associated with different cell types apoptosis. The COX-2 selective NSAIDs have less GI problems, but may be associated to risks of cardiovascular events. All of NSAIDs seems to interfere with wound healing, although studies results may show conflicting results. Since NSAIDs are used by large numbers of people, the aim of this study was to evaluate the effects of this medication on the epithelial tissue and during wound healing process. Wistar rats were treated daily with conventional NSAIDs (diclofenac, 3mg/Kg) or selective COX-2 (celecoxib, 1mg/Kg) for a period of 7-14 days. The control group was animals of similar age and weight not treated with NSAIDs. After 7 days in all the animals, control and treated, were made surgical wounds (4cm in diameter) on the shaved back under anesthesia with Tribromoethanol. Oral mucosa and wound healing were histological and histometrically analyzed (3 and 7 days after surgery). The results received appropriated statistical evaluation. It was possible to observe that both NSAIDs lead to changes with acute use, but only selective COX-2 inhibitors tends to get back to normal parameters with long lasting use. Related to wound healing, it was possible to verify that conventional NSAIDs was associated to a slightly delay in wound healing process, which was not observed with selective COX-2 NSAIDs use. It was possible to conclude that caution is needed with the use of NSAIDs. They cause significant changes in oral epithelium and the convenional one causes most signifcant changes with long term use
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O desmame precoce aumenta e reprograma a diferenciação de células mucosas do colo em células zimogênicas na mucosa gástrica de ratos. / Early Weaning Induces and Reprograms Differentiation of Mucous Neck Cells into Zymogenic Cells in the Gastric Mucosa of Rats.

Silva, Melissa Teles 25 July 2018 (has links)
Na mucosa gástrica, cinco tipos compõe o epitélio gástrico: mucosas superficiais, parietais (CP), mucosas do colo (CMC), endócrinas e zimogênicas (CZ). As CMC originam as células CZ por transdiferenciação e a população de CP é importante para que o processo ocorra.Durante a transdiferenciação observamos células com características de CMCs e CZs, denominadas células em transição (CT) que ocupam o segmento entre o colo e a base da glândula. Essa transição entre células e a presença de CP são essenciais para a homeostase da base da glândula. Porém, estudos mostram que alterações no padrão alimentar influenciam a organização do epitélio gástrico de ratos, e o desmame precoce (DP) modifica a dinâmica de proliferação, migração e maturação das células. Nosso objetivo foi avaliar os efeitos imediatos do DP sobre as populações de CMC, CZ, CT e CP, e investigar se tais efeitos são mantidos até a vida adulta. Para isso, ratos Wistar (CEUA ICB USP 18/2015) foram divididos em dois grupos: amamentado controle (A) (permaneceram com a mãe até 21 dias), e DP (separados das mães aos 15 dias). O estômago foi coletado aos 18, 30 e 60 dias de vida pósnatal. Em cortes histológicos, verificamos que o índice de CP não foi alterado pelo DP, porém a distribuição dessa célula na glândula foi modificada aos 18 e 30 dias. Sob microscopia de fluorescência e confocal, observamos que o DP aumentou a população de CMC (GSIIFITC+) aos 18 dias (A vs DP; P<0,01), e de CZ (Mist1-Cy3+) aos 18 e 60 dias (A vs DP; P<0,05). O número de CT/campo (GSII-FITC+Mist1-Cy3) não se alterou após o DP, evidenciando que o segmento de transição entre o colo e a base da glândula representa um importante controle de tamanho populacional. Para avaliar o comportamento de CT em relação ao seu destino (CZ) e sua origem (CMC), analisamos o índice de CT sobre essas populações. Sobre o destino, devido à ausência de resposta no número de CT/campo e ao aumento de CZ nos animais DP, o índice CT/CZs variou aos 18 e 30 dias. No entanto, o índice de CT/CMC (origem) não foi alterado pelos tratamentos nas diferentes idades. Sob microscopia eletrônica de transmissão, avaliamos as características ultraestruturais das CMC, CT e CZ aos 18 dias, e observamos principalmente as organelas envolvidas na reorganização das células durante a transdiferenciação. Nosso estudo mostrou que o desmame precoce acelera a diferenciação celular e muda a distribuição de células mucosas do colo e zimogênicas na glândula gástrica, porém esse processo ocorre com preservação do tamanho compartimento de transição e do número de células parietais. Assim, podemos sugerir que o desmame precoce aumenta a população de células zimogênicas por meio de uma passagem mais rápida entre a região do colo e da base, na presença de células parietais, e esse mecanismo seria acionado logo após a transição da dieta, podendo manter-se ativo até a vida adulta. / Five epithelial cell types are found in the gastric mucosa: surface mucous, parietal (PC), mucous neck (MNC), endocrine, and zymogenic (ZC). The MNC originates ZC through transdifferentiation, and the presence of PC is important for the process. During transdifferentiation, we observe cells that present characteristics from MNC and ZC that are identified as transition cells (TC). They occupy the area between the neck and base of the gastric gland. The transition between these cells and the presence PC are essential for homeostasis at the base of the gland. However, studies show that changes in dietary pattern influence the organization of rat gastric epithelium, and early weaning (EW) modifies the proliferation, migration and maturation dynamics of these cells. Our aim was to evaluate the immediate effects of EW on the populations of MNC, ZC, TC and PC, and to investigate if such effects are maintained until adult life. To that, Wistar rats (CEUA ICB USP 18/2015) were divided into two groups: suckling control (S) (pups remained with the mother until 21 days), and EW (pups were separated from mother at 15 days). The stomach was collected at 18, 30 and 60 postnatal days. After analyses of histological sections, we verified that PC indices were not altered by EW, but the distribution of this cell was modified at the 18 and 30 days. By fluorescence and confocal microscopy, we determined that EW increased MNC population at 18 days (A vs PD, P <0.01), and ZC at 18 and 60 day (A vs DP; P <0.05). TC number/field did not change after EW, indicating that the transition between neck and gland base is under an important population control. In order to evaluate the behavior of TC regarding its final differentiation (ZC) and origin (MNC), we calculated TC index on these populations. In relation to ZC, we found a variation in TC index at 18 and 30 days, specially because TC number did not change, whereas ZC population increased. However, the TC index on GSII + cells (origin) was not altered by treatments throughout growth and ageing. Finally, under electron microscopy, we studied the ultra structure of MNC, TC and ZC and observed the reorganization of secretory apparatus during transdifferentiation at 18 days. Thus, we can suggest that EW increases ZC population through a rapid traffic through transition compartment between neck and base, in the presence of parietal cells, and such mechanism would be triggered soon after dietary transition and be kept activated until adult life.
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Fornecimento estratégico de leveduras vivas e monensina sódica no desempenho e saúde ruminal em bovinos Nelore terminados em confinamento / Strategic management of live yeasts and monensin sodium in the performance and ruminal health in Nelore bulls finished in feedlot

Miranda, Lucas Domingos Ferreira 04 December 2017 (has links)
Submitted by Lucas Domingos Ferreira Miranda null (lucas_f.miranda@hotmail.com) on 2017-12-06T17:08:53Z No. of bitstreams: 1 Dissertação final.pdf: 1348044 bytes, checksum: eeb10efea599f5584d89b047b4a2485c (MD5) / Approved for entry into archive by ROSANGELA APARECIDA LOBO null (rosangelalobo@btu.unesp.br) on 2017-12-11T12:05:13Z (GMT) No. of bitstreams: 1 miranda_ldf_me_bot.pdf: 1348044 bytes, checksum: eeb10efea599f5584d89b047b4a2485c (MD5) / Made available in DSpace on 2017-12-11T12:05:13Z (GMT). No. of bitstreams: 1 miranda_ldf_me_bot.pdf: 1348044 bytes, checksum: eeb10efea599f5584d89b047b4a2485c (MD5) Previous issue date: 2017-12-04 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP) / Objetivou-se com esse trabalho avaliar o efeito de leveduras vivas e monensina sódica, em associação ou não, no desempenho produtivo, características de carcaça, perfil sanguíneo, comportamento ingestivo, seletividade da partícula e saúde ruminal em bovinos Nelore terminados em confinamento. Foram utilizados 77 animais machos não castrados, com peso vivo médio inicial de 353,23 ± 34,89 kg e provenientes de recria em sistema de pastejo contínuo. O delineamento experimental foi em blocos casualizados em arranjo fatorial 2x2, sendo os fatores a inclusão de monensina ou leveduras vivas, e todos os tratamentos receberam a mesma dieta diferenciando apenas na inclusão dos aditivos. Cada tratamento foi composto por 6 baias (3 a 4 animais/baia), sendo estas consideradas as unidades experimentais para este estudo. O período experimental foi de 90 dias com adaptação em step up, aumentando o nível de concentrado da dieta de 67 até 87% na dieta de terminação. Os resultados foram avaliados por meio do procedimento MIXED do SAS, sendo considerado significativo P<0,05. Houve efeito significativo na ingestão de massa seca para os animais do tratamento monensina (P<0,01), assim como na conversão e eficiência alimentar (P=0,03 e P=0,02, respectivamente) quando comparados aos tratamentos sem monensina. A levedura por sua vez não proporcionou diferença nos parâmetros de desempenho produtivo e não houve interação entre os aditivos. Os animais que receberam monensina apresentaram menor flutuação de consumo (P<0,01) e maior energia líquida de ganho (P<0,01). O perfil sanguíneo dos animais tratados com monensina diferiu significativamente dos tratamentos sem monensina nos parâmetros pressão de O2 (P=0,01), total de CO2 (P=0,03) e bicarbonato (P=0,04), enquanto a levedura proporcionou menor lactato sanguíneo (P<0,01). Não houve interação entre aditivos ou entre aditivos e fases, no entanto houve diferença significativa entre as fases de adaptação e terminação para praticamente todos os parâmetros avaliados (P<0,01), exceto para pH, pressão de O2 e saturação de O2. Houve interação entre monensina e fase no comportamento ingestivo, para os parâmetros tempo de alimentação e tempo de ócio. Houve interação entre fornecimento de leveduras e fase nos parâmetros de seletividade de partículas, nas peneiras 1 e 2. Para os parâmetros de saúde ruminal, os animais dos tratamentos com monensina apresentaram maior índice de rumenites (P<0,01) e melhores resultados para área média das papilas (P=0,01), área de superfície absortiva (P<0,01), representatividade da participação das papilas na área de superfície absortiva (P<0,01) comparado com os tratamentos sem monensina. Não houve interações ou efeito do uso de levedura nos parâmetros de morfologia ruminal. Na avaliação da histologia ruminal, a monensina proporcionou maior largura das papilas (P=0,03), menor espessura de queratina (P<0,01) e maior índice mitótico (P=0,03) em comparação aos animais controle. Os tratamentos com levedura obtiveram maior largura de papilas (P=0,03) e menor índice mitótico (P<0,01). Houve interação para área média das papilas (P=0,01). Os resultados deste estudo demonstram que as leveduras vivas podem ser uma alternativa em confinamentos de bovinos Nelore quando mercados mais exigentes não permitirem a utilização de ionóforos. / The objective of this study was to evaluate the effect of live yeasts and monensina sodium, in association or not, on the productive performance, carcass characteristics, blood profile, ingestivo behavior, particle selectivity and ruminal health in Nellore cattle terminated in feedlot. A total of 77 uncastrated male animals were used, with initial average live weight of 353.23±34.89 kg and from rearing in a continuous grazing system. The experimental design was a randomized complete block design in a 2x2 factorial arrangemen, with the inclusion of monensin or living yeasts, all treatments received te same diet differing only in the inclusion of the additives. Each treatment consisted of 6 pen (3 to 4 animals/pen), these being considered the experimental units for this study. The experimental period was 90 days with step up adaptation, increasing the level of diet concentrate from 67 to 87% in the finishing diet. The results were evaluated through the SAS MIXED procedure, being considered significant P<0.05. There was a significant effect on dry matter intake for monensin (P<0.03 and P=0.02, respectively) when compared to treatments without monensin. The yeast did not provide any difference in the parameters of productive performance and there was no interaction between the additives. The animals receiving monensin showed lower consumption flutuation (P<0.01) and higher net gain energy (P<0.01). The blood profile of animals treated with monensin differed significantly from the treatments without monensin in the parameters O2 (P=0.01), total CO2 (P=0.03) and bicarbonate (P=0.04), while yeast lower blood lactate (P<0.01). There was no interaction between there was a significant difference between the adaptation and finishing phases for practically all the evaluated parameters (P<0.01), except for pH, O2 pressure and O2 saturation. There was interaction between monensin and phase in the ingestive behavior, for the parameters feeding time and leisure time. There was interaction between yeast supply and phase in the particle selectivity parameters in sieves 1 and 2. For the ruminal health parameters, the animals of the monensin treatments presented higher rumenites (P<0.01) and better results for the mean área of the papillae (P+0.01), the absorptive surfarce área (P<0.01), representativeness of the participation of the papillae in the absorptive surface área (P<0.01) compared to the treatments without monensin. There was no interaction or effect of yeast use on ruminal morphology. In the evaluation of ruminal histology, monensin provided greater papila width (P=0.03, lower keratin thickness (P<0.01) and higher mitotic index (P=0.03) compared to control animals. Yeast treatments obtained greater papila width (P=0.03) and lower mitotic index (P<0.01). There was interaction for the mean área of the papillae (P=0.01). The results of this study demonstrate that live yeasts may be na alternative in feedlots of Nellore cattle when more demanding markets don’t allow the use of ionophores. / FAPESP: 2016/02435-2
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Análise morfológica do epitélio respiratório e avaliação radiológica do trato respiratório de cobaias (Cavia porcellus) mantidas sob diferentes sistemas de ventilação.

Rodrigues, Rochana January 2007 (has links)
Na última década, o uso de sistemas microventilados (sistema VMA) em biotérios possibilitou alojar animais com melhor qualidade sanitária devido ao maior controle ambiental fornecido por esses sistemas. Contudo, ainda é necessária uma melhor avaliação, principalmente no que tange às respostas dos animais. Dessa forma, o objetivo deste trabalho foi avaliar a integridade do aparelho respiratório (pulmões e traquéia) de cobaias mantidas sob dois sistemas de ventilação diferentes: ventilação geral diluídora (VGD) ou ventilação para conforto e ventilação microambiental (VMA). Foram utilizados quatro grupos de animais que ficaram alojados por 180 dias no CREAL-UFRGS. Os animais foram acompanhados com exames radiológicos dos pulmões a cada 45 dias. A histopatologia foi realizada no último dia de acompanhamento dos animais.Os resultados da análise radiológica não demonstraram diferença significativa entre as lesões pulmonares de cobaias fêmeas e machos mantidas sob os dois sistemas de ventilação. A avaliação histopatológica evidenciou lesões descamativas e de metaplasia no epitélio da traquéia de animais de ambos os sexos e sistemas de ventilação. As lesões encontradas nos pulmões das cobaias machos e fêmeas de ambos os sistemas foram em sua maioria lesões inflamatórias, com intenso infiltrado de mononucleares. A presença e intensidade dessas lesões variaram de acordo com o sistema de ventilação sendo que no grupo VGD é que foram encontradas lesões mais severas. / During the last decade, the use of intracage ventilation systems (VMA) in animal facilities has improved the health status of animal by better environmental control supplied by these systems. Yet, here is little information upon use of VMA systems, mainly in that it referes to animal responses. Thus, the purpose in this investigation was to evaluate epithelial integrity in airways (trachea and lungs) of Guinea pigs kept in two different systems: general diluting ventilation system or comfort ventilation system (VGD) and intracage ventilation systems (VMA). Four groups of animals were kept for 180 days on CREAL- UFRGS. The animals were observed with radiological exam taked from lungs every 45 days. The histophatology was done in the last day of trial. The results show the radiological exams haven’t differences between lung injuries from males and females kept in two different ventilation systems. The histological examination showed lost and changes of trachea epithelium in both, male and female under two different ventilation. The injuries found in lung from Guinea pigs, male and female, under two different ventilation were in the most inflammatory injuries, predominantly mononuclear cells. Intensity of lesions varied according to the ventilation system wich animals were kept, the animals kept in VGD system have presented more intensity of injuries.

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