Made available in DSpace on 2016-02-05T18:29:29Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2015-05-15. Added 1 bitstream(s) on 2016-02-05T18:33:31Z : No. of bitstreams: 1 000856541.pdf: 3227041 bytes, checksum: 02d3397d61c39c2d1bf1683ca0213c26 (MD5) / Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico (CNPq) / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP) / Ninhos de formigas Attini são conhecidos por abrigar uma diversa e complexa microbiota. Esses insetos possuem uma relação de mutualismo com seu fungo simbionte, utilizado como fonte de alimento. Porém, muitos micro-organismos também são encontrados nos ninho dessas formigas. Dentre eles, destacam-se fungos do gênero Escovopsis, considerados parasitas específicos do fungo cultivado por esses insetos. Somente encontrado associado aos ninhos de formigas Attini, Escovopsis coevoluiu com as formigas e seus fungos mutualistas em uma relação tripartida. Apesar dos diversos estudos voltados para entender a variedade genética de Escovopsis realizados na América Central (especialmente Panamá), não há relatos de grandes amostragens do parasita presente na América do Sul. São também escassos trabalhos taxonômicos para esse grupo de fungo; como resultado, após mais de duas décadas da descrição da primeira espécie do gênero, até o presente trabalho, apenas seis espécies foram formalmente descritas. Nesse contexto, estudamos a filogenia e evolução de Escovopsis e separamos nossos resultados em dois capítulos. No primeiro deles, descrevemos uma nova espécie, E. kreiselii, primeira a ser descrita pertencente ao clado das formigas Attini basais. Discutimos também a evolução do fungo, indicando que parece haver correlação entre filogenia e características morfológias, com linhagens menos derivadas apresentando ausência de vesícula (célula que suporta as fiálides, produtoras de conídios). Já no segundo capítulo, exploramos a diversidade filogenética de Escovopsis associados às formigas Attini derivadas, em diferentes países do continente Americano, especialmente o Brasil. Contrariamente ao que foi previamente proposto, nossos resultados sugerem que as formigas Attini derivadas podem compartilhar linhagens de Escovopsis, indicando ausência de co-cladogênese estrita entre formiga-Escovopsis-fungo mutualista. A... / Attine ant nests harbor a diverse and complex microbiota. Such insects have a mutualistic relationship with mutualistic fungus, cultured as food source. However, several microorganisms are also present in attine nests. Within this microbiota, fungi in the genus Escovopsis are considered specific parasites of the mutualistic fungus. Escovopsis is only reported associated with attine ant nests. Furthermore, this parasite coevolved with attine ants and their mutualistic fungi in a tripartite relationship (tripartite coevolution model). Although several studies aimed to understand the genetic diversity of Escovopsis in Central America (mostly Panama), no comprehensive reports considering large Escovopsis samples are known from South America. There is also few taxonomic work onr this fungus; as a result, after two decades of the description of the first species, up to the present work, only six Escovopsis species have been formally described. In this study, we investigated the systematics, phylogeny and evolution of Escovopsis and separated our results in two chapters. In the first part, we describe a new species, E. kreiselii, first species belonging to basal attine ants. We also discuss the evolution of Escovopsis, indicating a correlation between phylogeny and morphological characters, where less derived strains shows absence of vesicles (structures supporting spore bearing-cells). In the second chapter, we exploit the phylogenetic diversity of Escovopsis associated with higher-attine ants in different countries of the American continent, especially Brazil. Contrary to previous resports, we show that higher attine ants share Escovopsis infections, indicating no strict co-cladogenesis between ant-cultivar-Escovopsis. The description of a new species and the extensive Escovopsis phylogeny presented here provide a first step towards a better understanding of the evolution and taxonomy of this group of fungi, which has potential for biological ...

Made available in DSpace on 2014-11-10T11:09:43Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2014-03-14Bitstream added on 2014-11-10T11:58:41Z : No. of bitstreams: 1 000789492.pdf: 16176874 bytes, checksum: 41d3a6024e39a69778dbb45c39193f1a (MD5) / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / As formigas cortadeiras, ao longo da evolução, desenvolveram o hábito de cultivar fungos e utilizá-los como fonte de alimento. Esses insetos utilizam folhas e flores frescas como substrato para o cultivo do mutualista fúngico (Leucoagaricus gongylophorus). As culturas desses insetos são continuamente ameaçadas por fungos do gênero Escovopsis, considerados parasitas do fungo cultivado pelas formigas. Embora sejam conhecidos os efeitos danosos sobre L. gongylophorus, o mecanismo de ação do parasitismo de Escovopsis sp. ainda é pouco compreendido. Nesse contexto, avaliamos a natureza do antagonismo de várias linhagens de Escovopsis sp. frente ao fungo cultivado pelas formigas cortadeiras. Adicionalmente, avaliamos o potencial antagonista de Escovopsioides sp., um fungo recentemente descrito e para o qual desconhece-se o papel nos ninhos desses insetos. Primeiramente, foram realizados ensaios clássicos de culturas pareadas in vitro para avaliar a interação entre L. gongylophorus e os dois fungos filamentosos teste. Posteriormente, a ação antifúngica de compostos secretados pelos fungos filamentosos frente a L. gongylophorus foi avaliada. Para tanto, foram obtidos extratos brutos utilizando os cultivos de Escovopsis sp. e Escovopsioides sp. na (i) ausência (EBA) e na (ii) presença do fungo mutualista (EBP), além da (iii) fração acetato e (iv) butanol. Esses extratos foram incorporados em meio de cultivo e o crescimento micelial de L. gongylophorus foi avaliado. A interação física entre os fungos filamentosos e o fungo cultivado pelas formigas foi avaliada através de ensaios de antagonismo aliados a microscopia eletrônica de varredura. Nos ensaios de culturas pareadas, todos os fungos filamentosos (Escovopsis sp. e Escovopsioides sp.) afetaram negativamente o crescimento de L. gongylophorus. No geral, a maioria dos extratos brutos EBA e EBP de Escovopsis sp. e Escovopsioides sp. inibiu significativamente o crescimento do... / The leaf-cutting ants, across the evolution, developed the ability to grow fungi and use them as food resource. These insects use fresh leaves and flowers as substrate to grow the mutualistic fungus (Leucoagaricus gongylophorus). The farming of these insects are continuously threatened by fungi of the genus Escovopsis, considered parasites of the fungus reared by the ants. Although the harmful effects on L. gongylophorus are known, the mechanism of action of the parasitism of Escovopsis sp. is still poorly understood. In this context, we evaluated the nature of the antagonism of various strains of Escovopsis sp. towards the fungus cultivated by the leaf-cutting ants. In addition, we evaluated the potential antagonistic role of Escovopsioides sp., a recently described fungus for which its role in the ant nests is unknown. First, in vitro co-culture assays were carried out to evaluate the interaction between L. gongylophorus and the two filamentous fungi. Then, the antifungal activities of compounds secreted by the filamentous fungi against L. gongylophorus were evaluated. Crude extracts were obtained using grows of Escovopsis sp. and Escovopsioides sp. (i) in the absence (EBA) and (ii) in the presence (EBP) of the mutualistic fungus, in addition to (iii) acetate and (iv) butanol fractions. These extracts were incorporated in the culture medium and the micelial growth of L. gongylophorus was evaluated. The physical interaction between the filamentous fungi and the fungus cultivated by the ants was evaluated using antagonism assays associated with scanning electron microscopy. In the co-culture assays, all the Escovopsis sp. and Escovopsioides sp. filamentous fungi negatively affected the growth of L. gongylophorus. In general, the majority of the EBA and EBP crude extracts from Escovopsis sp. and Escovopsioides sp. significantly inhibited the growth of the mutualistic fungus. The results indicate that both Escovopsis sp. and Escovopsioides sp

Orientador: André Rodrigues / Banca: Sérgio Florentino Pascholati / Banca: Sandra Verza da Silva / Resumo: As formigas cortadeiras, ao longo da evolução, desenvolveram o hábito de cultivar fungos e utilizá-los como fonte de alimento. Esses insetos utilizam folhas e flores frescas como substrato para o cultivo do mutualista fúngico (Leucoagaricus gongylophorus). As culturas desses insetos são continuamente ameaçadas por fungos do gênero Escovopsis, considerados parasitas do fungo cultivado pelas formigas. Embora sejam conhecidos os efeitos danosos sobre L. gongylophorus, o mecanismo de ação do parasitismo de Escovopsis sp. ainda é pouco compreendido. Nesse contexto, avaliamos a natureza do antagonismo de várias linhagens de Escovopsis sp. frente ao fungo cultivado pelas formigas cortadeiras. Adicionalmente, avaliamos o potencial antagonista de Escovopsioides sp., um fungo recentemente descrito e para o qual desconhece-se o papel nos ninhos desses insetos. Primeiramente, foram realizados ensaios clássicos de culturas pareadas in vitro para avaliar a interação entre L. gongylophorus e os dois fungos filamentosos teste. Posteriormente, a ação antifúngica de compostos secretados pelos fungos filamentosos frente a L. gongylophorus foi avaliada. Para tanto, foram obtidos extratos brutos utilizando os cultivos de Escovopsis sp. e Escovopsioides sp. na (i) ausência (EBA) e na (ii) presença do fungo mutualista (EBP), além da (iii) fração acetato e (iv) butanol. Esses extratos foram incorporados em meio de cultivo e o crescimento micelial de L. gongylophorus foi avaliado. A interação física entre os fungos filamentosos e o fungo cultivado pelas formigas foi avaliada através de ensaios de antagonismo aliados a microscopia eletrônica de varredura. Nos ensaios de culturas pareadas, todos os fungos filamentosos (Escovopsis sp. e Escovopsioides sp.) afetaram negativamente o crescimento de L. gongylophorus. No geral, a maioria dos extratos brutos EBA e EBP de Escovopsis sp. e Escovopsioides sp. inibiu significativamente o crescimento do... / Abstract: The leaf-cutting ants, across the evolution, developed the ability to grow fungi and use them as food resource. These insects use fresh leaves and flowers as substrate to grow the mutualistic fungus (Leucoagaricus gongylophorus). The farming of these insects are continuously threatened by fungi of the genus Escovopsis, considered parasites of the fungus reared by the ants. Although the harmful effects on L. gongylophorus are known, the mechanism of action of the parasitism of Escovopsis sp. is still poorly understood. In this context, we evaluated the nature of the antagonism of various strains of Escovopsis sp. towards the fungus cultivated by the leaf-cutting ants. In addition, we evaluated the potential antagonistic role of Escovopsioides sp., a recently described fungus for which its role in the ant nests is unknown. First, in vitro co-culture assays were carried out to evaluate the interaction between L. gongylophorus and the two filamentous fungi. Then, the antifungal activities of compounds secreted by the filamentous fungi against L. gongylophorus were evaluated. Crude extracts were obtained using grows of Escovopsis sp. and Escovopsioides sp. (i) in the absence (EBA) and (ii) in the presence (EBP) of the mutualistic fungus, in addition to (iii) acetate and (iv) butanol fractions. These extracts were incorporated in the culture medium and the micelial growth of L. gongylophorus was evaluated. The physical interaction between the filamentous fungi and the fungus cultivated by the ants was evaluated using antagonism assays associated with scanning electron microscopy. In the co-culture assays, all the Escovopsis sp. and Escovopsioides sp. filamentous fungi negatively affected the growth of L. gongylophorus. In general, the majority of the EBA and EBP crude extracts from Escovopsis sp. and Escovopsioides sp. significantly inhibited the growth of the mutualistic fungus. The results indicate that both Escovopsis sp. and Escovopsioides sp / Mestre

Orientador: André Rodrigues / Coorientador: Maurício Bacci Junior / Banca: Juliana de Oliveira Augustin / Banca: Fernando Carlos Pagnocca / Resumo: Ninhos de formigas Attini são conhecidos por abrigar uma diversa e complexa microbiota. Esses insetos possuem uma relação de mutualismo com seu fungo simbionte, utilizado como fonte de alimento. Porém, muitos micro-organismos também são encontrados nos ninho dessas formigas. Dentre eles, destacam-se fungos do gênero Escovopsis, considerados parasitas específicos do fungo cultivado por esses insetos. Somente encontrado associado aos ninhos de formigas Attini, Escovopsis coevoluiu com as formigas e seus fungos mutualistas em uma relação tripartida. Apesar dos diversos estudos voltados para entender a variedade genética de Escovopsis realizados na América Central (especialmente Panamá), não há relatos de grandes amostragens do parasita presente na América do Sul. São também escassos trabalhos taxonômicos para esse grupo de fungo; como resultado, após mais de duas décadas da descrição da primeira espécie do gênero, até o presente trabalho, apenas seis espécies foram formalmente descritas. Nesse contexto, estudamos a filogenia e evolução de Escovopsis e separamos nossos resultados em dois capítulos. No primeiro deles, descrevemos uma nova espécie, E. kreiselii, primeira a ser descrita pertencente ao clado das formigas Attini basais. Discutimos também a evolução do fungo, indicando que parece haver correlação entre filogenia e características morfológias, com linhagens menos derivadas apresentando ausência de vesícula (célula que suporta as fiálides, produtoras de conídios). Já no segundo capítulo, exploramos a diversidade filogenética de Escovopsis associados às formigas Attini derivadas, em diferentes países do continente Americano, especialmente o Brasil. Contrariamente ao que foi previamente proposto, nossos resultados sugerem que as formigas Attini derivadas podem compartilhar linhagens de Escovopsis, indicando ausência de co-cladogênese estrita entre formiga-Escovopsis-fungo mutualista. A... / Abstract: Attine ant nests harbor a diverse and complex microbiota. Such insects have a mutualistic relationship with mutualistic fungus, cultured as food source. However, several microorganisms are also present in attine nests. Within this microbiota, fungi in the genus Escovopsis are considered specific parasites of the mutualistic fungus. Escovopsis is only reported associated with attine ant nests. Furthermore, this parasite coevolved with attine ants and their mutualistic fungi in a tripartite relationship (tripartite coevolution model). Although several studies aimed to understand the genetic diversity of Escovopsis in Central America (mostly Panama), no comprehensive reports considering large Escovopsis samples are known from South America. There is also few taxonomic work onr this fungus; as a result, after two decades of the description of the first species, up to the present work, only six Escovopsis species have been formally described. In this study, we investigated the systematics, phylogeny and evolution of Escovopsis and separated our results in two chapters. In the first part, we describe a new species, E. kreiselii, first species belonging to basal attine ants. We also discuss the evolution of Escovopsis, indicating a correlation between phylogeny and morphological characters, where less derived strains shows absence of vesicles (structures supporting spore bearing-cells). In the second chapter, we exploit the phylogenetic diversity of Escovopsis associated with higher-attine ants in different countries of the American continent, especially Brazil. Contrary to previous resports, we show that higher attine ants share Escovopsis infections, indicating no strict co-cladogenesis between ant-cultivar-Escovopsis. The description of a new species and the extensive Escovopsis phylogeny presented here provide a first step towards a better understanding of the evolution and taxonomy of this group of fungi, which has potential for biological ... / Mestre

Há uma simbiose quadripartida no ecossistema das formigas cultivadoras de fungos entre três mutualistas (Formiga da tribo Attini, jardim fúngico e actinomicetos simbiontes) e um parasita (fungo patogênico especializado Escovopsis sp). As actinobactérias associadas à formiga hospedeira produzem metabólitos secundários para inibir este patógeno, mas não o fungo mutualista. Produtos naturais interessantes foram relatados a partir destas bactérias com um amplo espectro de atividades biológicas. Portanto, várias actinobactérias foram isoladas do exoesqueleto e do jardim das formigas agricultoras para isolar compostos ativos contra diferentes alvos como Leishmania donovani e Escovopsis. Os antibióticos e compostos citotóxicos conhecidos griseorhodina A (1), griseorhodina C (2), griseorhodina G (3) e a dinactina (4) foram produzidos em cultivo sólido de ISP-2 por Streptomyces puniceus AB10, que foi isolada da formiga cortadeira Acromyrmex rugosus rugosus. As configurações absolutas de 1 e 2 foram inequivocamente estabelecidas como 6S,6aS,7S,8S e 6R,6aS,7S,8R, respectivamente, usando dicroísmo circular vibracional (VCD) e cálculos da Teoria do Funcional de Densidade (DFT). A bactéria Streptomyces puniceus AB10 produziu em meio-A líquido apenas uma familia de antibióticos como a dinactina (4). O composto 4 mostrou inibição contra Escovopsis e uma atividade maior contra L. donovani em promastigota e amastigota intracelular que a miltefosina. Dois estereoisômeros, strepchazolina A (5) e strepchazolina B (6), os antibióticos streptazolina (7), seu isômero-E (8), e o composto inorgânico octa-enxofre (9) foram produzidos em cultivo sólido de ISP-2 por Streptomyces chartreusis AC70, que foi isolada do jardim fúngico da formiga cortadeira Acromyrmex subterraneus brunneus. O composto 9 mostrou atividade antagonista contra o fungo patogênico especializado Escovopsis sp. Este é o primeiro relato de 8 como produto natural. As configurações absolutas de 5 e 6 foram inequivocamente estabelecida como 5S,6S,9R e 5S,6S,9S, respectivamente, usando dicroísmo circular vibracional (VCD) e cálculos da Teoria do Funcional de Densidade (DFT). A bactéria Candidatus Streptomyces philanthi ICBG292, isolada do exoesqueleto de operária de colônia de formiga Cyphomyrmex, produziu os antibióticos Mer-A2026B (10), piericidina-A1 (11) e nigericina (12). Os compostos 10-12 mostraram atividade contra Escovopsis sp e contra L. donovani. O composto 12 mostrou uma atividade maior contra L. donovani em promastigota e amastigota intracelular que a miltefosina. O composto 10 também foi ativo contra o fungo Trichoderma sp. Streptomyces sioyaensis ICBG311, isolada de machos alados de colônia de formiga Cyphomyrmex, produziu uma nova naftoquinona chamada cyphoquinona (13), dois novos compostos antifúngicos denominados cyphomycina (14) e epoxicyphomycina (15), e o antifúngico conhecido GT-35 (16). Os compostos 14-16 mostraram atividade contra diferentes linhagens de Escovopsis sp e Candida albicans K1 com MIC de 1.0, 0.5 e 0.25 ?g/mL, e uma atividade maior contra L. donovani em promastigota e amastigota intracelular que a miltefosina, enquanto 13 apresentou atividade baixa contra L. donovani. A cyphomycina (14) também mostrou uma potente atividade in vitro contra os patógenos humanos resistentes Aspergillus fumigatus 11628 (resistente à equinocandina), C. glabrata 4720 (resistente ao triazol), e C. auris B11211 (resistente à echinocandina, ao triazol, e à anfotericina B), com MIC de 0.5, 0.5 e 4 ?g/mL, respectivamente. Um estudo de dose única de cyphomycina (14) no modelo de camundongos neutropênicos de candidíase disseminada exibiu uma dose-resposta iv com um log de redução de 0.56 e 0.66 do carga infecciosa quando é tratado com 20 e 40 mg/kg da cyphomycina (14), respectivamente, e epoxicyphomycina (15) exibiu um log de redução de 0.53 com 40 mg/kg, demonstrando relevância clínica e eficácia de 14 e 15 neste modelo padrão da indústria de infecção por Candida. Por outro lado, GT-35 (16) matou os ratos 1 hora após a dose de 40 mg/kg. / There is a quadripartite symbiosis in the fungus-growing ant ecosystem between three mutualist (Attine ant, fungal garden and symbiotic actinomycetes) and one parasite (specialized pathogenic fungus Escovopsis sp). The actinobacteria associated to the ant host produce secondary metabolites to inhibit this pathogen but not the crop fungus. Interesting natural products have been reported from these bacteria with a wide spectrum of biological activities. In this thesis, several actinobacteria were isolated from the exoskeleton and garden of fungus-growing ants to isolate active compounds against different targets such as Leishmania donovani and Escovopsis. The known antibiotic and cytotoxic compounds griseorhodin A (1), griseorhodin C (2), griseorhodin G (3) and dinactin (4) were produced in solid ISP-2 culture by Streptomyces puniceus AB10, which was isolated from the leaf-cutter ant Acromyrmex rugosus rugosus. The absolute configurations of 1 and 2 were unambiguously established as 6S,6aS,7S,8S and 6R,6aS,7S,8R, respectively, using vibrational circular dichroism (VCD) and density functional theory (DFT) calculations. The bacterium Streptomyces puniceus AB10 produced in broth A-medium only one family of antibiotics as dinactin (4). Compound 4 showed inhibition against Escovopsis and a higher activity against L. donovani promastigotes and intracellular amastigotes than miltefosine. Two stereoisomers strepchazolin A (5) and strepchazolin B (6), the antibiotic streptazolin (7), its E-isomer (8), and the inorganic compound cyclooctasulfur (9) were produced in solid ISP-2 culture by Streptomyces chartreusis AC70, which was isolated from the fungal garden of the leaf-cutter ant Acromyrmex subterraneus brunneus. Compound 9 showed antagonist activity against the specialized pathogenic fungus Escovopsis sp. This is the first report of 8 as natural product. The absolute configurations of 5 and 6 were unambiguously established as 5S,6S,9R and 5S,6S,9S, respectively, using vibrational circular dichroism (VCD) and density functional theory (DFT) calculations. The bacterium Candidatus Streptomyces philanthi ICBG292, isolated from the exoskeleton of a worker of a Cyphomyrmex colony, produced the antibiotics Mer-A2026B (10), piericidin-A1 (11) and nigericin (12). Compounds 10-12 showed activity against Escovopsis sp and against L. donovani. Compound 12 showed higher activity against L. donovani promastigotes and intracellular amastigotes than miltefosine. Compound 10 was also active against the fungus Trichoderma sp. Streptomyces sioyaensis ICBG311, isolated from winged male ants of Cyphomyrmex colonies, produced a new naphtoquinone named cyphoquinone (13), two new antifungal compounds named cyphomycin (14) and epoxycyphomycin (15), and the known antifungal GT-35 (16). Compounds 14-16 displayed activity against several strains of Escovopsis sp and Candida albicans K1 with a MIC of 1.0, 0.5 and 0.25 ?g/mL, and a higher activity against L. donovani promastigotes and intracellular amastigotes than miltefosine, while 13 a weak activity against L. donovani. Cyphomycin (14) also showed potent in vitro activity against the resistant human pathogens Aspergillus fumigatus 11628 (echinocandin resistance), C. glabrata 4720 (triazole resistance), and C. auris B11211 (echinocandin, triazole, and amphotericin B resistance), with MIC of 0.5, 0.5 and 4 ?g/mL, respectively. A single-dose study of cyphomycin (14) in a neutropenic mouse disseminated candidiasis model exhibited a dose-like response with 0.56 and 0.66 log reduction of infectious burden when treated with 20 and 40 mg/kg cyphomycin (14), respectively, and epoxycyphomycin (15) exhibited 0.53 log ii reduction with 40 mg/kg, demonstrating clinical relevance and effectiveness of 14 and 15 in this industry-standard model of Candida infection. On the other hand, GT-35 (16) killed the mice 1 hr post dose at 40 mg/kg.

Diversos estudos evidenciam dezenas de espécies de fungos de diferentes gêneros nas colônias de formigas-cortadeiras. No entanto, a procedência desses microrganismos ainda é incerta. Alguns desses podem ser endofíticos oriundos do material vegetal transportado para o ninho. Assim sendo, determinados fungos endofíticos possuem a capacidade de contaminar a colônia das cortadeiras ou influenciar no seu microbioma simbiótico. Com isso, os endófitos fúngicos têm potencial no controle de formigas-cortadeiras como parceiros mutualistas das plantas. Esse sistema simbiótico pode se tornar uma estratégia no manejo dessa importante praga dentro do ecossistema florestal. O objetivo deste trabalho foi avaliar o potencial de colonização endofítica de mudas de Eucalyptus urophylla pelos fungos Escovopsis sp., Metarhizium anisopliae e Trichoderma strigosellum, e analisar, por meio da avaliação de características biométricas, a influência da inoculação desses microrganismos sobre o desenvolvimento das plantas. O delineamento adotado foi o inteiramente casualizado, usandose o esquema fatorial 4 x 3, com 15 repetições, sendo cada parcela constituída por uma muda. Os fatores foram: três espécies de fungos (Escovopsis sp., M. anisopliae, T. strigosellum) mais um controle e três métodos de inoculação (inoculação via foliar, inoculação via solo e inoculação via plântula). Para avaliação da colonização endofítica, utilizaram-se dez mudas, sendo cinco destinadas para avaliação das características biométricas. No método de inoculação via plântula, o fungo T. strigosellum foi isolado apenas nas raízes. Contudo, no método de inoculação via solo, além das raízes, esse fungo colonizou também o caule. As plantas de E. urophylla não foram colonizadas endofiticamente quando inoculadas pelo método de inoculação via foliar. As plantas inoculadas com o fungo T. strigosellum, pelo método de inoculação via plântula, apresentaram maiores valores nas características altura de plantas, número de folhas, massa seca da parte aérea e massa seca total quando comparado com os outros métodos de inoculação. Houve incremento também, por esse método, para a variável altura de plantas, quando comparadas às plantas controle e às inoculadas pelos fungos Escovopsis sp. e M. anisopliae. Dentre os fungos estudados, o isolado T. strigosellum colonizou endofiticamente o E. urophylla e influenciou positivamente no seu desenvolvimento, quando inoculado via plântula. / Several studies evidenced dozens of fungus species of different genera in the colonies of leafcutting ants. However, the origin of these microorganisms is still uncertain. Some of these may be endophytes from plant material transported to the nest. Thus, certain endophytic fungi have the ability to contaminate the leaf-cutting ant colony or influence its symbiotic microbiome. Thus, fungal endophytes have the potential to control leaf-cutting ants as mutual plant partners. This symbiotic system could become a strategy in the management of this important forest pest. The objective of this work was to evaluate the potential of endophytic colonization of Eucalyptus urophylla plants by fungi Escovopsis sp., Metarhizium anisopliae e Trichoderma strigosellum, and to analyze, by means of the evaluation of biometric characteristics, the influence of the inoculation of these microorganisms on the plant development. Experimental design was completely randomized, using the factorial scheme 4 x 3, with 15 replicates, each plot consisting of one plant. The factors were: three fungi species (Escovopsis sp., M. anisopliae, T. strigosellum) plus one control and three methods of inoculation (foliar inoculation, inoculation via soil and seedling inoculation). For the evaluation of endophytic colonization, ten plants were used; five of them were destined to evaluate the biometric characteristics. In the seedling inoculation method, the T. strigosellum fungus was isolated only in the roots. However, in the soil inoculation method, besides the roots, this fungus also colonized the stem. E. urophylla plants were not colonized endophiatically when inoculated by foliar inoculation method. The plants inoculated with T. strigosellum by the seedling inoculation method had higher values in the characteristics of plant height, number of leaves, root dry mass and total dry mass when compared to the other inoculation methods. There was also an increase, by this method, for the plant height variable, when compared to the control plants and those inoculated by the fungi Escovopsis sp. and M. anisopliae. Among the fungi studied, the isolate T. strigosellum endofitically colonized E. urophylla and positively influenced its development when inoculated via seedling.

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:35:42Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2013-02-14Bitstream added on 2014-06-13T21:07:56Z : No. of bitstreams: 1 moreira_sm_dr_botib.pdf: 1026050 bytes, checksum: 28669ac144b0398026d844cf5f111e68 (MD5) / As modificações nas características morfológicas e morfométricas das diferentes partes do corpo das formigas cortadeiras são muitas vezes, diferenças na forma ou no tamanho corpo (cabeça, tórax e abdômen). Porém estas diferenças que ocorrem durante o crescimento dos individuos, estão relacionadas com as mudanças nas estruturas homólogas no decorrer da evolução das espécies. O objetivo deste capítulo foi diferenciar as quatro espécies de rainhas do gênero Atta, presentes do estado de São Paulo, através de técnicas morfométricas e geométricas, para auxiliar na identificação de ninhos iniciais. As rainhas foram coletadas manualmente com o auxílio de uma pinça, diretamente dos ninhos das espécies pré-determinadas logo antes delas saírem para o vôo nupcial, durante a revoada que aconteceu no dia 31/10/2010. Posteriormente estas foram acondicionadas em frascos com álcool 70% e levadas para o laboratório. No laboratório as rainhas foram dissecadas com o auxílio de um estéreo microscópio óptico da marca Motic, utilizando duas pinças de pontas finas para a separação das partes do corpo como cabeça, tórax, abdômen e as asas. As partes dos indivíduos foram fixadas individualmente nas placas de vidro cobertas por um papel milimetrado, para padronizar as estruturas na mesma posição a fim de possibilitar uma melhor captura das imagens e posterior medição. Para as medidas da morfometria da cabeça, do tórax e do abdômen utilizou-se o programa ImageJ. No entanto para as medidas atribuídas à morfometria geométrica das asas utilizou-se inicialmente os programas TpsUtil e TpsDig2 versão 1.4 e em seguida o software MorphoJ. Os dados foram submetidos a uma Análise de Variância (one-way, ANOVA). Os resultados obtidos demonstram que existem diferenças significativas entre as espécies estudas (p<0,01), tanto para as análises de... / The changes in morphological and morphometric characteristics of the different body parts of ants are often differences in the shape or size body (head, thorax and abdomen). However these differences that occur during growth of the individuals are related to changes in the homologous structures in the course of evolution of species. The aim of this chapter was to differentiate the queens of the four species of the genus Atta, present in the São Paulo state, through geometric and morphometric techniques, to assist in the identification of initial nests. The queens were collected manually with the aid of forceps, directly from the nests of the pre-determined species shortly before them leaving for the nuptial flight, during mating flight that happened on 31/10/2010. Later they were placed in vials with 70% alcohol and taken to the laboratory. In the laboratory the queens were dissected with the aid of a optical stereomicroscope of the brand Motic, using two fine-tipped tweezers to separate the parts of the body such as the head, thorax, abdomen and wings. The parts of individuals were fixed individually in glass plates covered with a graph paper, to standardize the structures in the same position in order to provide a better capture images and the subsequent measurement. For morphometric measurements of the head, thorax and abdomen, the software ImageJ used. However for the measures assigned to the geometric morphometry of wings it was initially used the programs TpsUtil and TpsDig2 version 1.4 and then the software MorphoJ. The data were subjected to an Analysis of Variance (one-way ANOVA). The results show that there are significant differences between the species studied (p <0.01) for both morphometric analysis and for the analysis of geometric morphometrics. For the discrimination of species using morphometry, we found that species of A. sexdens ...(Complete abstract click electronic access below)

Orientador: Luiz Carlos Forti / Coorientador: Nilson Satoru Nagamoto / Banca: André Rodrigues / Banca: Aldenise Alves Moreira / Banca: Roberto da Silva Camargo / Banca: Ana Paula Protti de Andrade Cruciol / Resumo: As modificações nas características morfológicas e morfométricas das diferentes partes do corpo das formigas cortadeiras são muitas vezes, diferenças na forma ou no tamanho corpo (cabeça, tórax e abdômen). Porém estas diferenças que ocorrem durante o crescimento dos individuos, estão relacionadas com as mudanças nas estruturas homólogas no decorrer da evolução das espécies. O objetivo deste capítulo foi diferenciar as quatro espécies de rainhas do gênero Atta, presentes do estado de São Paulo, através de técnicas morfométricas e geométricas, para auxiliar na identificação de ninhos iniciais. As rainhas foram coletadas manualmente com o auxílio de uma pinça, diretamente dos ninhos das espécies pré-determinadas logo antes delas saírem para o vôo nupcial, durante a revoada que aconteceu no dia 31/10/2010. Posteriormente estas foram acondicionadas em frascos com álcool 70% e levadas para o laboratório. No laboratório as rainhas foram dissecadas com o auxílio de um estéreo microscópio óptico da marca Motic, utilizando duas pinças de pontas finas para a separação das partes do corpo como cabeça, tórax, abdômen e as asas. As partes dos indivíduos foram fixadas individualmente nas placas de vidro cobertas por um papel milimetrado, para padronizar as estruturas na mesma posição a fim de possibilitar uma melhor captura das imagens e posterior medição. Para as medidas da morfometria da cabeça, do tórax e do abdômen utilizou-se o programa ImageJ. No entanto para as medidas atribuídas à morfometria geométrica das asas utilizou-se inicialmente os programas TpsUtil e TpsDig2 versão 1.4 e em seguida o software MorphoJ. Os dados foram submetidos a uma Análise de Variância (one-way, ANOVA). Os resultados obtidos demonstram que existem diferenças significativas entre as espécies estudas (p<0,01), tanto para as análises de ...(Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: The changes in morphological and morphometric characteristics of the different body parts of ants are often differences in the shape or size body (head, thorax and abdomen). However these differences that occur during growth of the individuals are related to changes in the homologous structures in the course of evolution of species. The aim of this chapter was to differentiate the queens of the four species of the genus Atta, present in the São Paulo state, through geometric and morphometric techniques, to assist in the identification of initial nests. The queens were collected manually with the aid of forceps, directly from the nests of the pre-determined species shortly before them leaving for the nuptial flight, during mating flight that happened on 31/10/2010. Later they were placed in vials with 70% alcohol and taken to the laboratory. In the laboratory the queens were dissected with the aid of a optical stereomicroscope of the brand Motic, using two fine-tipped tweezers to separate the parts of the body such as the head, thorax, abdomen and wings. The parts of individuals were fixed individually in glass plates covered with a graph paper, to standardize the structures in the same position in order to provide a better capture images and the subsequent measurement. For morphometric measurements of the head, thorax and abdomen, the software ImageJ used. However for the measures assigned to the geometric morphometry of wings it was initially used the programs TpsUtil and TpsDig2 version 1.4 and then the software MorphoJ. The data were subjected to an Analysis of Variance (one-way ANOVA). The results show that there are significant differences between the species studied (p <0.01) for both morphometric analysis and for the analysis of geometric morphometrics. For the discrimination of species using morphometry, we found that species of A. sexdens ...(Complete abstract click electronic access below) / Doutor