Tese de Doutorado Apresentada ao Programa de Pós-Graduação em Ciências da Saúde da Universidade do Extremo Sul Catarinense - UNESC, para obtenção do título de Doutor em Ciências da Saúde. / Conhecimento: A dieta hiperlipidica induz a obesidade e com isso um aumento no estresse oxidativo e resistência à insulina em vários tecidos, por meio das lipasses como, por exemplo, o lípase hormônio sensitivo, triglicerol lípase do tecido adiposo (ATGL), os receptores de adiponectina (AdipoR1 e AdipoR2) e proteína de adaptação endosomal (APPL1). Por outro lado o treinamento físico reduz o tecido adiposo, aumenta o status oxidante, previne progressão da resistência a insulina. Objetivo: Verificar a contribuição do treinamento físico nos parâmetros de estresse oxidativo e resistência a insulina em tecidos periféricos de animais expostos a dieta hiperlipidica. Método: Foram utilizados 24 camundongos divididos em 4 grupos (n=6); Controle (C); Controle e Exercício (C+Ex); Obeso (DHL) e Obeso + exercício (DHL+Ex). Os animais foram submetidos a uma dieta hiperlipidica por 90 dias e a um protocolo de treinamento físico, crônico, na modalidade de natação e sua intensidade controlada pela analise de lactato. Os animais mortos após 48 horas depois da última sessão de exercício e foram retirados cirurgicamente amostras de tecido adiposo, fígado e músculo esquelético para avaliar a via da sinalização molecular e parâmetros de estresse oxidativo. Resultados: houve ganho de peso corporal após 90 dias de dieta hiperlipidica e o treinamento físico preveniu o ganho excessivo. No tecido adiposo aumentou a peroxidação lipídica e carbonilação das proteínas e diminuiu significativamente após o treinamento físico, níveis de proteína CGI-58 foi reduzida e FAS foi aumentada no obeso, e no treinado houve aumento de ATGL. A fosforilação do receptor da insulina e substrato do receptor da insulina e Akt foram diminuídas em todos nos tecidos avaliados quando comparados DHL com C, o mesmo ocorreu com AdipoR1 (adiposo e músculo esquelético) e AdipoR2 (fígado) e a APPL1, no entanto o treinamento físico demonstrou capacidade de melhorar a fosforilação nestes tecidos. Conclusão: O exercício físico tem um importante papel da redução de estresse oxidativo e na regulação das proteínas que envolvem a lipólise em obesos. Resultados semelhantes foram observados na ação da insulina que também apresentou melhoras por meio dos receptores de adiponectina e APLL1 em todos os tecidos avaliados (adiposo, músculo e fígado) de camundongos obesos.

Orientadora : Maria Suely Soares Leonart / Co-orientadores : Aguinaldo José do Nascimento e Tomoe Nakashima / Dissertaçao (mestrado) - Universidade Federal do Paraná, Setor de Ciencias da Saúde / Resumo: O eritrócito humano maduro, quando submetido à sobrecarga oxidativa por condições patológicas do eritrócito ou por agentes oxidantes pode apresentar depleção de glutationa reduzida (GSH), um dos responsáveis pelo sistema de defesa antioxidante do eritrócito; oxidação da molécula de hemoglobina; e agregação de complexos de ferro junto à membrana. Tais conseqüências podem ocasionar anormalidades na membrana eritrocitária e hemólise. Este trabalho tem por objetivo, estudar a ação antioxidante dos flavonóides quercetina e rutina, e de extrato hidroalcoólico de Vitis virtifera (EHV), em eritrócitos humanos normais, submetidos à sobrecarga oxidativa, in vitro, induzida por agentes oxidantes como terc-butilhidroperóxido (TBH) ou cloridrato de fenil-hidrazina (CF). Coletou-se sangue venoso de 12 indivíduos com idades entre 18 e 40 anos e considerados saudáveis, em EDTAK3. Lavou-se os eritrócitos em tampão fosfato 28 mM, NaCl 123 mM, pH 7,4 três vezes por centrifugação a 1220 x g, ressuspendendo-os até volume globular de cerca de 40 %. Submeteu-se os eritrócitos, pré incubados ou não com quercetina 100 (xM, à ação oxidante de CF 0,5 mM durante 15 minutos e; pré-incubados ou não com quercetina, rutina ou extrato hidroalcoólico de Vitis virtifera, à ação oxidante de TBH (0,5 - 5 mM), durante 0 a 30 minutos. Realizou-se a determinação da concentração de GSH [BEUTLER, Red cell metabolism, 1984], da formação de metahemoglobina (MetHb) [EVELYN; MALLOY, JJBioLChem., 126: 655, 1938], modificado por BEUTLER (1995) e realizou-se a contagem de corpos de Heinz (CH) segundo técnica preconizada por BEUTLER et ai [J.Lab.&Clin.Méd., 45: 40, 1955], modificado por CLARO (2002). Observou-se uma diminuição da concentração de GSH (4,0-0,1 nmoles/ g Hb) proporcional ao aumento da concentração de TBH (0,5 - 1,0 mM). A formação de MetHb aumentou (8 - 35 %) assim como a de CH (2 -16 %), em função da concentração de TBH (0,5 - 5 mM). A incubação com quercetina 100 pM (10 - 30 minutos) preveniu parcialmente a formação de GSH (0,25 -1,3 junoles/g Hb) induzida por TBH 1 mM. Quercetina (2 - 20 JIM) preveniu parcialmente a formação de CH (7,5 - 6,7 %) induzida por TBH 3 mM. Em amostras oxidadas por CF 0,5 mM, a quercetina 10 - 120 pM preveniu parcialmente a formação de MetHb (4 - 3,6 %). A rutina 100 (xM preveniu parcialmente a depleção de GSH (0,4 pmoles/g Hb) por TBH (0 pmoles/g Hb). A rutina (40 - 140 jiM) preveniu parcialmente a formação de CH (7,6 - 4,9 %) induzida por TBH 3 mM (9,0 %). O EHV (0,1 mg/ml) preveniu parcialmente a depleção de GSH (4,4 ±0,1 jimoles/g Hb) induzida por TBH 0,5 mM enquanto que EHV (0,5 - 1,0 mg/ml) preveniu quase que na totalidade a depleção de GSH (7,4 ± 0,4 e 7,3 ±0,1 (imoles/ g Hb, respectivamente) induzida por TBH 0,5 mM. O EHV (1,0 - 5,0 mg/ml) preveniu parcialmente a formação de CH (6,4 - 4,0 %) induzida por TBH 3 mM. A associação entre quercetina 100 pM e mesilato de desferrioxamina 4 mM, inibiu parcialmente a formação de MetHb (30 ± 1,2 %) induzida por TBH 5 mM. Os resultados sugerem que, nas concentrações testadas, a quercetina é parcialmente eficaz contra a sobrecarga oxidativa promovida por CF. O estresse oxidativo promovido por TBH foi parcialmente prevenido na presença de quercetina, rutina ou EHV. / Abstract: The mature human erythocytes, submitted to oxidative stress under pathological conditions or by oxidizer agents can present: depletion of reduced glutatione (GSH), responsible for the antioxidant defense system of the erythocytes, oxidation of the hemoglobin molecule, or aggregation of complexes of iron close to the membrane. These can cause abnormalities in the membrane and hemolysis. The aim of this work was to study the antioxidative action of the flavonoids quercetin and rutin, and of hydroalchoolic extract of Vitis vinifera (HEV), in human erythocytes submitted to the oxidative stress, induced by oxidizer agents fert-butylhydroperoxide (TBH) or phenylhydrazine hydrochloride (PH), in vitro. Venous blood was collected in EDTAK3 from 12 healthy individuals with ages between 18 and 40 years. The erythocytes was washed three times under centrifugation at 1220 x g, in 28 mM phosphate buffer, pH 7.4, and 123 mM NaCL, and ressuspended at a final globular volume of 40%. The erythocytes was then preincubated with 100 jiM quercetine and then submitted to the oxidizer action of 0.5 mM PH for 15 min and, preincubated with quercetin, rutin and hydroalchoolic extract of Vitis vinifera, to the oxidizer action of TBH (0.5 - 5 mM), for up to 30 min. The concentration of GSH was determinate [BEUTLER, Red cell metabolism, 1984], the methemoglobin (MetHb) was monitored [EVELYN; MALLOY, J.BioI.Chem., 126: 655, 1938], modified by BEUTLER et at. (1995) and tiie Heinz bodies (HB) was evaluated acording to BEUTLER et al. [J.Lab.&CIin.Med,, 45: 40, 1955], modified by CLARO (2002). A concentration decrease of GSH was observed (4.0 - 0.1 jimoles /g Hb) as a function of the increase of the concentration of TBH (0.5 - 1.0 mM). The formation of MetHb (8 - 35 %) and HB (2 -16 %), increased as a function of the TBH concentration (0.5 - 5 mM). The incubation with 100 (iM quercetin (10 - 30 min) partially prevented the GSH formation (0.25 - 1.3 jimoles/g Hb) induced by 1 mM TBH. Quercetin (2 - 20 pM) partially prevented HB formation (7.5 - 6.7 %) induced by 3 mM TBH. Erythrocyte samples oxidized by 0.5 mM PH and treated with 10 - 120 jiM quercetin had the formation of MetHb (4 - 3.6%) partially prevented. The 100 pM rutin partially prevented the depletion of GSH (0.4 junoles/g Hb) in the absence of TBH. The rutin (40 - 140 pM) partially prevented the formation of HB (7.6 - 4.9 %) induced by 3 mM TBH (9.0 %). HEV (0.1 mg/ml) partially prevented the depletion of GSH (4.4 ± 0.1 jimoles/g Hb) induced by 0.5 mM TBH while HEV (0.5 - 1.0 mg/ml) almost prevented the totally depletion of GSH (7.4 ± 0.4 and 7.3 ± 0 . 1 junoles/g Hb, respectively) induced by 0.5 mM TBH. HEV (1.0 - 5.0 mg/ml) partially prevented the formation of HB (6.4 - 4.0 %) induced by 3 mM TBH. The association of 100 JIM quercetin and 4 mM deferrioxamine mesilate, partially inhibited the formation of MetHb (30 ± 1.2 %) induced by 5 mM TBH. The results suggest that quercetin, at the used concentrations was partially effective against the oxidative stress promoted by PH. The erythrocyte oxidative stress promoted by TBH was partially prevented in the presence of quercetin, rutin and HEV.

Made available in DSpace on 2016-11-30T14:53:34Z (GMT). No. of bitstreams: 2 109335_Morgana.pdf: 1728230 bytes, checksum: bb2fa292aaa64281ce4bab316ecb4c8f (MD5) license.txt: 214 bytes, checksum: a5b8d016460874115603ed481bad9c47 (MD5) Previous issue date: 2014 / A obesidade é caracterizada pelo acúmulo anormal ou excessivo de gordura, e está associada a diversas comorbidades. Devido a limitados tratamentos para obesidade, buscam-se novas alternativas. E além de obesos, indivíduos com peso adequado, na busca por um estereótipo de beleza, fazem uso de medicamentos para perda de peso, estando o Brasil entre os países com alto consumo destas medicações. A liraglutida é um medicamento indicado para diabéticos, e tem apresentado um efeito na redução do peso e devido a isso gerou um uso off label. Portanto, o nosso objetivo foi avaliar parâmetros bioquímicos no hipotálamo de ratos machos jovens e adultos após única e repetidas administrações de liraglutida. Foi realizado única e repetidas administrações de salina ou liraglutida (25, 50, 100 ou 300µg/kg). Foi avaliado no hipotálamo a atividade dos complexos I, II e IV, creatina quinase (CK), superóxido dismutase (SOD), catalase (CAT), equivalentes de malondialdeído (MDA), e proteínas carboniladas. A análise estatística foi realizada usando ANOVA seguido pelo teste post hoc de Tuckey. Foi demostraram que em ratos jovens após única administração de liraglutida houve redução dos equivalentes de MDA, e após repetidas administrações aumento da atividade do complexo IV, CAT e redução de equivalentes de MDA. No experimento envolvendo ratos adultos, após única administração encontramos aumento da atividade da CK e CAT, aumento dos equivalentes de MDA e redução da atividade da SOD. Após repetidas administrações de liraglutida em ratos adultos houve redução da atividade do complexo II e aumento da atividade da CAT. Tanto a atividade do complexo I como a quantidade de proteínas carboniladas não foram alterados após uso de liraglutida. Em suma, este estudo corrobora com outros achados que mostram disfunção mitocondrial, alteração na atividade da CK, bem como presença de dano oxidativo e desequilíbrio na atividade antioxidante após administração de fármacos anorexígenos. Portanto, sugere-se com estes resultados que a liraglutida apresentou menos efeitos nocivos, nos parâmetros avaliados, quando comparado a outros fármacos utilizados para tratar a obesidade. / The obesity is characterized by abnormal or excessive fat accumulation and is associated with several comorbidities. Due limited treatments for obesity, new alternatives are sought. And besides obeses, people with normal weight seek the beauty stereotype, by making use weight loss medications, being Brazil among the countries with high consumption of these medications. Liraglutide is a drug indicated for diabetics, and it has shown effect in reducing weight and because of that generated an off label use. Therefore, our objective was to evaluate biochemical parameters in the hypothalamus of male rats and young adults after single and repeated administration of liraglutide. Single and repeated administration of saline or liraglutide (25, 50, 100 or 300µg/kg) were performed. Was evaluated the activity of the complexes I, II and IV, creatine kinase (CK), superoxide dismutase (SOD), catalase (CAT), as well as malondialdehyde equivalents (MDA) and protein carbonyls in hypothalamus of young and adult rats after administration of liraglutide. Statistical analysis was performed using ANOVA, following by post hoc Tukey tests. Was demosntrated that in young rats after a single administration of liraglutide decreased the MDA equivalents, and after repeated administrations increased the activity of complex IV, CAT and reduced MDA equivalents. In the experiment involving adult rats, after single administration we found increased CK and CAT activity, increased MDA equivalents, and decreased SOD activity. After repeated administration of liraglutide in adult rats the activity of complex II was reduced and the activity of CAT was increased. Both, activity of complex I and protein carbonyls were not altered after the use of liraglutide. In summary, this study confirms other findings that show mitochondrial dysfunction, alteration in the CK activity as well as the presence of oxidative damage and antioxidant imbalance after administration of anorectic drugs. Therefore, we suggest that this results with liraglutide had fewer adverse effects on the evaluated parameters, when compared to other drugs used to treat obesity.

Introduction: Obesity is a chronic disease whose pathophysiology involves changes in peripheral tissues and in the central nervous system (CNS). In this context, many researchers seek to understand the influence of saturated fat intake on the hypothalamus, a key structure in the food control. Objective: Assess inflammatory parameters of oxidative stress and energy metabolism in the hypothalamus of mice led to an animal model of obesity. Methodology: Swiss mice were divided into two study groups: control group and obese group. The control animals were fed with a diet with adequate amounts of macronutrients (standard diet), while the animals in the obese group were induced to obesity through the consumption of a diet high in saturated fat (high fat diet). Obesity induction had a duration of 10 weeks, and at the end of this period, the disease model was validated in animals. Shortly thereafter, the mice were euthanized; tissues of interest were dissected and taken for biochemical analysis. Results: Animals in the obese group had higher calorie consumption and, allied to this, had higher body weight and higher weight of mesenteric fat, compared to the control group. Obesity presented an increase in the levels of interleukin 1β (IL-1β) and decreased levels of interleukin 10 (IL-10) in the hypothalamus of animals. In addition, there was increased lipid peroxidation and protein carbonylation, coupled with the lower level of GSH in the hypothalamus of obese animals. However, there was no statistically significant difference in the activity of antioxidant enzymes superoxide dismutase (SOD) and catalase (CAT) in the hypothalamus of both groups. The obese group had lower activity of complex I, II and IV of the mitochondrial respiratory chain, as well as lower activity of creatine kinase (CK) in the hypothalamus. Conclusion: Obesity presented inflammation, oxidative stress and mitochondrial dysfunction in the hypothalamus, a key structure in the food control. / Submitted by Alexandre Pedron Martins (alexandre.martins8@unisul.br) on 2017-05-05T18:51:50Z No. of bitstreams: 2 Dissertação de Ciências da Saúde - Rosiane de Bona Schraiber.pdf: 2138146 bytes, checksum: bdf08a9747c471f9fd3b96612d37e96e (MD5) Contrato de cessão de direitos autorais - Rosiane de Bona Schraiber.pdf: 602914 bytes, checksum: 37e44d0c7bde7fdee52943f30c470140 (MD5) / Approved for entry into archive by Alexandre Pedron Martins (alexandre.martins8@unisul.br) on 2017-05-05T18:52:02Z (GMT) No. of bitstreams: 2 Dissertação de Ciências da Saúde - Rosiane de Bona Schraiber.pdf: 2138146 bytes, checksum: bdf08a9747c471f9fd3b96612d37e96e (MD5) Contrato de cessão de direitos autorais - Rosiane de Bona Schraiber.pdf: 602914 bytes, checksum: 37e44d0c7bde7fdee52943f30c470140 (MD5) / Made available in DSpace on 2017-05-05T18:52:02Z (GMT). No. of bitstreams: 2 Dissertação de Ciências da Saúde - Rosiane de Bona Schraiber.pdf: 2138146 bytes, checksum: bdf08a9747c471f9fd3b96612d37e96e (MD5) Contrato de cessão de direitos autorais - Rosiane de Bona Schraiber.pdf: 602914 bytes, checksum: 37e44d0c7bde7fdee52943f30c470140 (MD5) Previous issue date: 2016-06-24 / Introdução: A obesidade é uma doença crônica, cuja fisiopatologia envolve alterações nos tecidos periféricos e no Sistema Nervoso Central (SNC). Nesse contexto, diversos pesquisadores buscam compreender qual a influência do consumo de gordura saturada sobre o hipotálamo, estrutura chave no controle alimentar. Objetivo: Avaliar parâmetros inflamatórios, de estresse oxidativo e de metabolismo energético no hipotálamo de camundongos induzidos a um modelo animal de obesidade. Metodologia: Camundongos Swiss machos foram divididos em dois grupos de estudos: grupo controle e grupo obeso. Os animais do grupo controle foram alimentados com uma dieta com quantidades adequadas de macronutrientes (ração normolipídica), enquanto que os animais do grupo obeso foram induzidos a obesidade por meio do consumo de uma dieta rica em gordura saturada (ração hiperlipídica). A indução da obesidade teve uma duração de 10 semanas, e ao término desse período, o modelo da doença foi validado nos animais. Logo em seguida, os camundongos foram mortos, os tecidos de interesse foram dissecados e encaminhados para as análises bioquímicas. Resultados: Os animais do grupo obeso apresentaram maior consumo de calorias e, aliado a isso, apresentaram maior peso corporal, bem como maior peso de gordura mesentérica que os animais do grupo controle. A obesidade cursou com aumento nos níveis de interleucina 1β (IL-1β) e diminuição dos níveis de interleucina 10 (IL-10) no hipotálamo dos animais. Além disso, houve aumento da peroxidação lipídica e carbonilação de proteínas, aliada ao menor nível de glutationa (GSH) no hipotálamo dos animais obesos. No entanto, não houve diferença estatisticamente significativa quanto a atividade das enzimas antioxidantes superóxido dismutase (SOD) e catalase (CAT) no hipotálamo de ambos os grupos. O grupo obeso apresentou menor atividade dos complexos I, II e IV da cadeia respiratória mitocondrial, bem como menor atividade da creatina quinase (CK) no hipotálamo. Conclusão: A obesidade cursou com inflamação, estresse oxidativo e disfunção mitocondrial no hipotálamo, estrutura chave no controle alimentar.

Introduction: Sepsis is determined as a sistemic inflamatory response syndrome (SIRS) followed by an infecction, evidenced or not. Even after discharge, sepsis survivors have high mortality index and may develop long term cognitive impairment. Articles show that exercise act positively on cognitive behavior considering angiogenesis, neurogenesis and sinaptogenesis as well as like atennuation on memory dammage by depleted or downregulation of MDA and carbonils in hipocampos and córtex préfrontal córtex. Objetive: The aim of this study was analise the effects of moderate physical exercise treadmill program on preventions of alterations on CNS in an sepsis animal model. Methodology: This study use black male mice C57BL/6 (28 days, between 20-25 g). The animals were submitted to moderate physical exercise treadmill program during 8 weeks. Completing 88 days before sepsis induccion by LPS were aleatorally distribueted in groups(n = 10): 1) PBS + not exercitaded; 2) PBS + exercitaded; 3) LPS + not exercitaded; 4) LPS + exercitaded. After 10 days mice did the memory tests and after executed, and having samples of córtex pré-frontal, estriatum, hipocampus, cerebellum and córtex to avaliations based on levels of MDA, carbonils and free-thios. Results: The LPS + exercited didn’t show long term cognitive impairmentand and show smaller MDA concentrations on córtex total, hipocampus, estriatum e cerebellum; downregulated carbonils in córtex total and hipocampus and upregulated levels of free thiois in córtex pré-frontal e córtex total, when compared to LPS + not exercited group. Conclusions: Beyond performance of this training program was observed that memory and learning were preserved was partially explain for the bioquimics results when compared to not exercised group. We suggest new researches to verify how exercise effects may influence other patterns to better understand the power of this intervention Sugerem-se novas pesquisas para verificar a atuação do exercício em outras vias e cascatas metabólicas e compreender melhor o alcance desta intervenção. / Submitted by Tatyane Barbosa Philippi (tatyane.barbosa@unisul.br) on 2017-10-23T18:55:06Z No. of bitstreams: 2 Dissertação Regina.pdf: 1679084 bytes, checksum: 16dfcc0bf0b5564bcf13b2b8442eb9c2 (MD5) Regina_Maldonado_Bussmann.pdf: 775206 bytes, checksum: 7c2b149b3ff90e8991c8fa1067a4a5c5 (MD5) / Approved for entry into archive by Ana Barreiros (ana.barreiros@unisul.br) on 2017-10-23T19:24:54Z (GMT) No. of bitstreams: 2 Dissertação Regina.pdf: 1679084 bytes, checksum: 16dfcc0bf0b5564bcf13b2b8442eb9c2 (MD5) Regina_Maldonado_Bussmann.pdf: 775206 bytes, checksum: 7c2b149b3ff90e8991c8fa1067a4a5c5 (MD5) / Made available in DSpace on 2017-10-23T19:24:54Z (GMT). No. of bitstreams: 2 Dissertação Regina.pdf: 1679084 bytes, checksum: 16dfcc0bf0b5564bcf13b2b8442eb9c2 (MD5) Regina_Maldonado_Bussmann.pdf: 775206 bytes, checksum: 7c2b149b3ff90e8991c8fa1067a4a5c5 (MD5) Previous issue date: 2016-07 / Introdução: Sepse é conceituada como uma síndrome da resposta inflamatória sistêmica (SIRS) decorrente de infecção, sendo esta comprovada ou não. Mesmo após a alta, os pacientes sobreviventes a sepse apresentam elevada taxa de mortalidade e comprometimento de algumas funções cognitivas. Estudos demonstram a influência positiva do exercício regular no funcionamento cognitivo cerebral favorecendo angiogênese, neurogenese e sinaptogenese assim como atenuação do prejuízo sobre a memória de memória de longo e curto prazo pela erradicação ou diminuição de peroxidação lipídica em hipocampo e córtex pré-frontal. Objetivo: Avaliar os efeitos de um protocolo de exercício físico aeróbio na prevenção de alterações no SNC em um modelo animal de sepse. Métodos: Foram utilizados camundongos machos C57BL/6 com 28 dias, entre 20-25 g. Os animais foram submetidos a um protocolo de exercício físico aeróbio moderado por oito semanas. Aos 88 dias após a indução de sepse por LPS, os animais foram distribuídos nos seguintes grupos (n = 10): 1) PBS + não exercitado; 2) PBS + exercitado; 3) LPS + não exercitado; 4) LPS + exercitado. Depois de 10 dias os camundongos foram submetidos aos testes de memória e aprendizado. Após os testes comportamentais, os animais foram sacrificados sendo o córtex pré-frontal, estriado, hipocampo, cerebelo e córtex removidos e armazenados para análises posteriores de peroxidação lipídica e carbonilação de proteínas e tióis livres. Resultados: O grupo LPS + exercitado não apresentou comprometimento da memória e do aprendizado e apresentou menores concentrações de MDA no córtex total, hipocampo, estriado e cerebelo; proteínas carboniladas diminuídas em córtex total e hipocampo e aumentadas concentrações de tióis livres em córtex pré-frontal e córtex total, quando comparados com LPS + não exercitados. Conclusão: A realização do exercício aeróbio moderado preserva a função cognitiva (memória e aprendizado) em insultos sépticos, e a redução do dano oxidativo, parece mediar pelo menos em parte o efeito do exercício físico.

Submitted by Bianca Paola Santarosa null (biancasantarosavet@gmail.com) on 2018-03-23T12:47:46Z No. of bitstreams: 1 Tese Doutorado - Bianca formato publicação VERSAO IMPRESSA.pdf: 1688848 bytes, checksum: 9ba42ff52ac447e65e5f7fc9e8e369a2 (MD5) / Approved for entry into archive by Maria Lucia Martins Frederico null (mlucia@fca.unesp.br) on 2018-03-23T13:51:16Z (GMT) No. of bitstreams: 1 santarosa_bp_dr_botfca.pdf: 1552183 bytes, checksum: b984cb637f44b1eeb23bae194ba61c1e (MD5) / Made available in DSpace on 2018-03-23T13:51:16Z (GMT). No. of bitstreams: 1 santarosa_bp_dr_botfca.pdf: 1552183 bytes, checksum: b984cb637f44b1eeb23bae194ba61c1e (MD5) Previous issue date: 2018-01-26 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP) / Durante a gestação ocorrem modificações no metabolismo de ovelhas que podem predispor a ocorrência de transtornos metabólicos, dos quais se destaca a toxemia da prenhez (TP), especialmente no terço final de¬vido ao maior crescimento dos fetos. Os objetivos deste estudo foram avaliar o perfil metabólico de ovelhas durante a gestação e no periparto imediato (até 48 horas pós-parto), comparando-se gestação única com gemelar. Foram utilizadas 60 ovelhas criadas em manejo semi-intensivo, hígidas, da raça Dorper, com dois a cinco anos de idade. Foram constituídos dois grupos experimentais: Grupo 1: 30 ovelhas, com diagnóstico ultrassonográfico de gestação de feto único; Grupo 2: 30 ovelhas, com diagnóstico ultrassonográfico de gestação gemelar. Os momentos experimentais foram definidos como: MI – imediatamente após a inseminação artificial (controle); MG30 – 30 dias de gestação; MG90 – 90 dias de gestação; MG120 – 120 dias de gestação; MG130 – 130 dias de gestação; MG140 – 140 dias de gestação; MP - dia do parto; MPP1 - 24 horas após o parto; MPP2 - 48 horas após o parto. Em todos os momentos foram realizados pesagem; ultrassonografia transabdominal para confirmação da viabilidade fetal; e colheita de amostra de sangue venoso para as diversas análises laboratoriais: exames bioquímicos (ureia, creatinina, AST, FA, GGT, PT, albumina, globulina, colesterol e triglicérides); dosagens hormonais (insulina, glucagon, cortisol, T3, T4) e glicemia; dosagens dos marcadores de estresse oxidativo (concentrações do TBARS e grupo tióis reduzidos; atividades enzimáticas da SOD, GSH-Px e catalase); equilíbrios ácido-básico e eletrolítico obtidos por exame hemogasométrico (pH, PCO2, HCO3-, TCO2, EB, Na+, K+, Cl-, iCa+2, lactato, ânion gap e diferença de íons fortes). Não houve manifestação de TP no presente estudo, provavelmente pelo manejo geral adequado da propriedade, no que se diz respeito ao plano nutricional, boas instalações e sanidade do rebanho. Portanto, não foi possível predizer a ocorrência da doença a partir das análises laboratoriais realizadas. No entanto, estabeleceu-se panorama geral metabólico da ovelha prenhe da raça Dorper em condições de criação semi-intensiva, além de ter a comparação entre gestação única e gemelar. Foi possível também concluir que o metabolismo da ovelha com gestação gemelar não apresenta maior predisposição aos transtornos metabólicos e ao desenvolvimento da TP em relação à ovelha com gestação simples. Isso porque o metabolismo depende muito mais da condição nutricional e escore corporal do que simplesmente pelo tamanho ou número de fetos. Neste trabalho, as ovelhas com gestação gemelar tiveram melhor adaptação às mudanças fisiológicas provocadas pela prenhez, visto os resultados do sistema antioxidante frente aos agentes oxidantes, bem como para manter o equilíbrio ácido-básico. / During pregnancy there are changes in the metabolism of sheep that may predispose to the occurrence of metabolic disorders, including pregnancy toxaemia (PT), especially the final third of the development of fetal growth. The objectives of this study were to evaluate the metabolic profile of ewes during gestation, lambing and immediate postpartum (up to 48 hours), comparing single gestation with twins. Sixty ewes were raised in a semi-intensive, healthy, Dorper breed, two to five years old. Two experimental groups were formed: Group 1: 30 ewes with ultrasonographic diagnosis of single fetus gestation; Group 2: 30 ewes with ultrasonographic diagnosis of twin pregnancy. The experimental moments were defined as: MI - after artificial insemination (control); MG30 - 30 days of gestation; MG90 - 90 days of gestation; MG120 - 120 days of gestation; MG130 - 130 days of gestation; MG140 - 140 days of gestation; MP - lambing day; MPP1 - 24 hours postpartum; MPP2 - 48 hours postpartum. At all times weights were performed; transabdominal ultrasonography to confirm fetal viability, and blood samples were coleted to: biochemical tests (urea, creatinine, AST, FA, GGT, PT, albumin, globulin, cholesterol and triglycerides); hormonal dosages (insulin, glucagon, cortisol, T3, T4) and glycemia; oxidative stress markers (TBARS and reduced thiol group concentrations, enzymatic activities of SOD, GSH-Px and catalase); and blood gas evalution (pH, PCO2, HCO3-, TCO2, EB, Na+, K+, Cl-, iCa+2, lactate, anion gap and strong ions difference). There was no manifestation of PT in the present study, probably due to the adequate general management of the property, regarding the nutritional plan, good facilities and herd sanity. Therefore, it was not possible to predict the occurrence of the disease from the laboratory analyzes performed. However, a metabolic overview of the Dorper pregnant ewes was established in conditions of semi-intensive breeding, in addition to having a comparison between single and twin gestation. It was also possible to conclude that the metabolism of sheep with twin pregnancy does not present a greater predisposition to metabolic disorders and to the development of PT in relationto sheep with simple gestation. This is because metabolism depends much more on nutritional status and body score than simply on the size or number of fetuses. In this work, sheep with twin pregnancy had better adaptation to the physiological changes caused by pregnancy, considering the results of the antioxidant system against the oxidizing agents, as well as maintaining the acid-base balance. / FAPESP 2015/08714-8

Submitted by MARIA ANGÉLICA MARTINS LOURENÇO null (angelyca.lourenco@gmail.com) on 2017-04-05T17:52:17Z No. of bitstreams: 1 TESE VERSÃO FINAL MARIA ANGÉLICA M. LOURENÇO.pdf: 2254690 bytes, checksum: 8a7147ad507f7cf6f9ac233ee996207a (MD5) / Approved for entry into archive by Luiz Galeffi (luizgaleffi@gmail.com) on 2017-04-12T17:52:18Z (GMT) No. of bitstreams: 1 lourenco_mam_me_bot.pdf: 2254690 bytes, checksum: 8a7147ad507f7cf6f9ac233ee996207a (MD5) / Made available in DSpace on 2017-04-12T17:52:18Z (GMT). No. of bitstreams: 1 lourenco_mam_me_bot.pdf: 2254690 bytes, checksum: 8a7147ad507f7cf6f9ac233ee996207a (MD5) Previous issue date: 2017-02-14 / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP) / Introdução: Os efeitos da exposição à fumaça do cigarro (EFC) sobre o sistema vascular são amplamente conhecidos, entretanto, estudos recentes mostram que esta exposição resulta em efeitos maléficos diretos ao miocárdio levando à remodelação cardíaca (RC). Devido ao grande impacto sócio econômico e às altas taxas de mortalidade, torna-se relevante a identificação de fatores que modulem o processo de RC e podemos destacar a suplementação de alimentos com propriedades antioxidantes, como o cajá (Spondias mombin). Objetivo: Avaliar a influência da suplementação de cajá no processo de remodelação cardíaca induzido pela exposição à fumaça do cigarro em ratos. Materiais e métodos: O estudo foi realizado em duas etapas. Na primeira etapa foram estudados três grupos não expostos à fumaça do cigarro: C0 (controle + ração padrão); C100 (controle + cajá 100 mg/kg de peso/dia); C250 (controle + cajá 250 mg/kg de peso/dia). Após dois meses de suplementação os animais foram submetidos a um ecocardiograma. Na segunda etapa, considerando não haver diferença na comparação entre C0, C100 e C250, as análises foram realizadas com os seguintes grupos: C0 (controle + ração padrão); F0 (fumo + ração padrão); F100 (fumo + ração padrão acrescida de cajá a 100 mg/kg de peso/dia) e F250 (fumo + ração padrão acrescida de cajá a 250 mg/kg de peso/dia). A suplementação de cajá foi realizada por meio da casca e polpa da fruta homogeneizadas e acrescidas na ração padrão. Após a suplementação por 2 meses foi realizado estudo funcional, morfométrico e bioquímico. Para as variáveis paramétricas, foi realizado o teste ANOVA de 1 (pós-teste de Tukey) e os valores obtidos foram apresentados em média ± desvio padrão. Para as variáveis não paramétricas, foi realizado o teste de Kruskal-Wallis (pós-teste de Dunn) e os valores obtidos foram apresentados em mediana e intervalo interquartil. As variáveis foram consideradas não paramétricas quando não passaram pelo teste de normalidade Kolmogorov-Smirnov. O nível de significância adotado foi de 5%. Resultados: Os animais fumantes (F0, F100 e F250) apresentaram consumo de ração e peso corporal final (PC) inferior aos animais controle (C0). Considerando a dosagem de cotinina sérica, os animais fumantes apresentaram maior concentração em comparação com os animais controle. Entretanto, na comparação entre os grupos fumantes não houve diferença estatisticamente significante. A EFC induziu alterações morfológicas e morfométricas no ventrículo esquerdo (VE), visto pelos valores maiores de diâmetro diastólico e sistólico do VE ajustados pelo PC (DDVE/PC e DSVE/PC, respectivamente), área e diâmetro do átrio esquerdo ajustado pelo PC (ÁREA AE e AE/PC, respectivamente), índice de massa do VE (IMVE), peso do VE ajustado pelo PC (VE/PC) e área seccional do miócito (ASM) em relação aos animais controle. Já os animais suplementados com cajá a 250 mg/kg de peso/dia apresentaram menores valores de DDVE/PC, ÁREA AE e ASM em comparação com o grupo F0. Não houve diferença estatisticamente significante para as variáveis do estudo do coração isolado. Em relação ao estresse oxidativo, o grupo F0 apresentou maior concentração de hidroperóxido de lipídico (HL) em comparação com o grupo C0 e os animais suplementados com cajá a 100 e 250 mg/kg de peso/dia apresentaram menores valores em comparação com o grupo F0. Os animais fumantes apresentaram menor valor de atividade de catalase (CAT) em comparação com animais controle. O grupo F0 apresentou menor valor de atividade de superóxido dismutase (SOD) em comparação com o grupo C0 e os animais suplementados com cajá a 100 e 250 mg/kg de peso/dia apresentaram maiores valores de atividade de SOD em comparação com o grupo F0. Os animais fumantes apresentaram menor valor de atividade de glutationa peroxidase (GSHPx) em comparação com o grupo C0, sendo que os animais suplementados com cajá a 100 e 250 mg/kg de peso/dia apresentaram maior valor de atividade de GSH-Px em comparação com o grupo F0. Não foram observadas diferenças estatisticamente significantes na concentração de proteína carbonila e no teste do cometa tanto em relação ao efeito da EFC quanto da suplementação de cajá. Em relação ao metabolismo energético, o grupo F0 apresentou menor valor de atividade da enzima ß-hidroxiacil Coenzima A desidrogenase (ß-OH Acil CoA-DH) quando comparado ao grupo C0. Já o grupo F100 apresentou valores maiores de ß-OH AcilCoA-DH em comparação com o grupo F0. Considerando a atividade da fosfofrutoquinase (PFK) e lactato desidrogenase (LDH), os grupos F0 e F100 apresentaram maior atividade destas enzimas em comparação com o grupo C0. O grupo F250, por sua vez, apresentou menor atividade de PFK e LDH em comparação ao grupo F0 e F100. Não foram observadas diferenças estatisticamente significantes em relação à atividade da piruvato desidrogenase (PDH). Os grupos fumantes apresentaram valores inferiores referentes à atividade da citrato sintase (CS) em comparação com o grupo C0. E o grupo F250 apresentou valores superiores de CS em comparação ao grupo F0. Em relação ao complexo I, os grupos fumantes obtiveram valores inferiores quando comparados ao grupo C0 e o grupo F250 apresentou maiores valores em relação ao grupo F0 e ao grupo F100. Considerando a análise da atividade do complexo II, os grupos F0 e F100 apresentaram menores valores quando comparados ao grupo C0 e o grupo F250 apresentou maiores valores em relação aos grupos F0 e F100. Já em relação à atividade da ATP sintase, os grupos fumantes apresentaram menores valores em comparação ao grupo C0. Não foram observadas diferenças estatisticamente significantes na expressão proteica de fator nuclear derivado de eritróide-2 (NRF- 2), sirtuina 1 (SIRT-1), fator nuclear-kB total (NFkB), fator nuclear-kB fosforilado (pNFkB), relação NFkB/pNFkB, interleucina 10 (IL-10), intérferon gamma (IFN-γ), colágeno tipo I e tipo III. Conclusão: A EFC resultou em RC, piorou o estresse oxidativo e alterou o metabolismo energético cardíaco. A suplementação de cajá atenuou o processo de RC, melhorou o estresse oxidativo e as alterações no metabolismo energético induzidos pela EFC em ratos. / Introduction: The effects of exposure to tobacco smoke (ETS) on the vascular system are widely known, however, recent studies showed that this exposure results in direct myocardial effects leading to cardiac remodeling (CR). Due to the high socioeconomic impact and the high mortality rates, it is relevant to identify factors that modulate the CR process and we can highlight the supplementation of foods with antioxidant properties, such as cajá (Spondias mombin). Objective: The objective of this study is to evaluate the influence of cajá supplementation on the cardiac remodeling process induced by ETS in rats. Materials and methods: The study was carried out in two stages. In the first stage, three groups not exposed to tobacco smoke were studied: C0 (control + standard chow); C100 (control + cajá 100 mg / kg of body weight / day); C250 (control + cajá 250 mg / kg of body weight / day). After two months of supplementation the animals were submitted to an echocardiogram. In the second step, considering that there was no difference in the comparison between C0, C100 and C250, the analyzes were performed with the following groups: C0 (control + standard chow); F0 (smoke + standard chow); F100 (smoke + cajá 100 mg / kg body weight / day) and F250 (smoke + cajá 250 mg / kg body weight / day). The cajá supplementation was carried out with the peel and pulp of the fruit homogenized and added in the standard chow. After 2 months of supplementation, a functional, morphometric and biochemical study was performed. For the parametric variables, we used one-way ANOVA test followed by Tukey's post-test and the values obtained were presented as mean ± standard deviation. For the nonparametric variables, the Kruskal-Wallis test followed by Dunn´s post-test was performed and the values obtained were presented as median and interquartile range. The variables were considered non-parametric when they did not pass the Kolmogorov-Smirnov normality test. The level of significance was 5%. Results: Smokers (F0, F100 and F250) presented lower chow intake and final body weight (BW) than control animals (C0). Considering the serum cotinine dosage, the smoked animals presented higher concentration in comparison to the control animals. However, in the comparison between smoking groups there was no statistically significant difference. The ETS induced morphological and morphometric changes in the left ventricle (LV), as seen by the higher values of left ventricular diastolic and systolic diameter adjusted by BW (LVDD/BW and LVSD/BW, respectively), area and diameter of the left atrium adjusted by BW (area AL and AL/BW, respectively) LV mass index, LV weight adjusted by BW and myocardial sectional area (MSA) in relation to control animals. On the other hand, animals supplemented with cajá at 250 mg / kg of body weight / day presented lower values of, LVDD/BW, area AL and MSA compared to group F0. There was no statistically significant difference for the variables of the isolated heart study. In relation to oxidative stress, the F0 group had a higher lipid hydroperoxide (LH) concentration compared to the C0 group, and animals supplemented with 100 and 250 mg / kg body weight / day presented lower values when compared to the group F0. Smokers had lower values of catalase activity (CAT) compared to control animals. The F0 group had a lower value of superoxide dismutase activity (SOD) compared to the C0 group and the animals supplemented with cajá at 100 and 250 mg / kg of body weight / day had higher values of SOD activity compared to the group F0 . Smokers had a lower value of glutathione peroxidase (GSH-Px) activity compared to the C0 group, and animals supplemented with cajá at 100 and 250 mg / kg of body weight / day showed higher values of GSH-Px activity in comparison with the F0 group. No statistically significant differences were observed in the carbonyl protein concentration and in the comet test both in relation to the effect of the ETS and the supplementation of cajá. In relation to the energetic metabolism, the F0 group had lower activity value of the enzyme ß-hydroxyacyl Coenzyme A dehydrogenase (ß-OH Acyl CoA-DH) when compared to the C0 group. The F100 group presented higher values of ß-OH Acyl CoA-DH compared to the F0 group. Considering the activity of phosphofructokinase (PFK) and lactate dehydrogenase (LDH), the F0 and F100 groups showed higher activity of these enzymes compared to the C0 group. The F250 group, on the other hand, had lower PFK and LDH activity compared to the F0 and F100 groups. No statistically significant differences were observed in relation to pyruvate dehydrogenase (PDH) activity. The smoking groups had lower values regarding citrate synthase activity (CS) compared to the C0 group. In addition, the F250 group had higher CS values than the F0 group. In relation to the complex I, the smoking groups obtained lower values when compared to the group C0 and the group F250 presented highervalues in relation to the group F0 and the group F100. Considering the analysis of the activity of the complex II, the groups F0 and F100 presented smaller values when compared to the group C0 and the group F250 presented higher values in relation to the groups F0 and F100. Regarding ATP synthase activity, the smoking groups had lower values in comparison to the C0 group. No significant differences were observed in protein expression of erythroid-2 nuclear factor (NRF-2), sirtuin 1 (SIRT-1), total nuclear-kB factor (NFkB), nuclear kB factor phosphorylated (pNFkB), NFkB / pNFkB, interleukin 10 (IL-10), gamma interferon (IFN-γ), type I and type III collagen. Conclusion: ETS resulted in CR, worsening oxidative stress, and altered cardiac metabolism. Cajá supplementation attenuated the cardiac remodeling process, improved oxidative stress, and changes in energetic metabolism induced by ETS in rats. / FAPESP: 2014/21310-0

Submitted by LIVIA MARIA BERALDO SIMÕES MATHIAS null (livia_beraldo@hotmail.com) on 2017-04-14T15:34:07Z No. of bitstreams: 1 MESTRADO Versao Final 13 abril 2017 pdf.pdf: 1211026 bytes, checksum: 6061dee1717bd06a4a45e7d018267638 (MD5) / Approved for entry into archive by Luiz Galeffi (luizgaleffi@gmail.com) on 2017-04-17T12:54:03Z (GMT) No. of bitstreams: 1 mathias_lmbs_me_bot.pdf: 1211026 bytes, checksum: 6061dee1717bd06a4a45e7d018267638 (MD5) / Made available in DSpace on 2017-04-17T12:54:03Z (GMT). No. of bitstreams: 1 mathias_lmbs_me_bot.pdf: 1211026 bytes, checksum: 6061dee1717bd06a4a45e7d018267638 (MD5) Previous issue date: 2017-02-17 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / Introdução: a doxorubicina é um quimioterápico amplamente utilizado, mas apresenta a cardiotoxicidade como mais grave efeito colateral. A lesão miocárdica se inicia imediatamente após a infusão da droga e é mediada por lesão oxidativa, aumento de apoptose e ativação de metaloproteinases. O açaí é um fruto rico em antocianinas, que apresenta elevado efeito antioxidativo e anti-inflamatório. O objetivo do estudo foi avaliar o efeito do açaí na prevenção da disfunção ventricular e a influência no estresse oxidativo, na apoptose e na atividade das metaloproteinases de matriz no modelo experimental de cardiotoxicidade aguda induzida pela doxorrubicina em ratos. Material e métodos: Foram utilizados 64 ratos Wistar machos, alocados em 4 grupos: controle (C), açaí (A), doxorrubicina (D) e açaí-doxorrubicina (DA). Os ratos receberam dieta padrão (grupos C e D) ou dieta padrão suplementada com açaí a 5% (grupos A e DA) por 4 semanas. Após esse período receberam injeção de doxorrubicina 20mg/kg (grupos D e DA) ou salina (grupos C e A). Quarenta e oito horas após a injeção, foi realizado ecocardiograma e estudo do coração isolado e em seguida foi realizada eutanásia. Foi coletado tecido cardíaco para realização de zimografia, Western blot, avaliação do estresse oxidativo e metabolismo energético, além da dosagem da concentração dos metabólitos de oxido nítrico (NO) no soro. Os resultados foram analisados por ANOVA de duas vias e foi considerada significância estatística de 5%. Resultados: Os animais que receberam doxorrubicina apresentaram diminuição do peso corporal e diminuição da ingestão de água e ração após a injeção da droga e o açaí não interferiu nesses resultados. Quarenta e oito horas após a injeção da doxorrubicina, os animais que receberam apresentaram aumento do átrio esquerdo, aumento do diâmetro sistólico do ventrículo esquerdo, diminuição da fração de encurtamento do ventrículo esquerdo e diminuição da onda E’ septal ao doppler tissular. Quando os ratos receberam doxorrubicina e foram suplementados com açaí, houve melhora da fração de encurtamento e do E’ septal. A doxorrubicina reduziu a +dP/dt, a –dP/dt e a pressão sistólica máxima, sugerindo piora tanto na função sistólica, quanto diastólica, no entanto o açaí não foi capaz de prevenir a disfunção ventricular no estudo do coração isolado. A doxorrubicina também ativou MMP-2, aumentou o estresse oxidativo, provocou alterações no metabolismo energético, com predomínio do metabolismo glicídico e causou aumento na apoptose, evidenciado por aumento na expressão proteica da caspase-3 ativa. Quando o açaí foi administrado conjuntamente, observamos melhora do metabolismo energético cardíaco, porém sem efeito na atividade de metaloproteinases de matriz, no estresse oxidativo ou na apoptose. Não observamos diferenças nas dosagens séricas dos metabólitos do NO entre os grupos. Conclusão: A doxorrubicina induziu alterações na estrutura e função cardíaca, além de aumento do estresse oxidativo, mudanças no metabolismo energético, ativação de MMP-2 e aumento da apoptose. O açaí preveniu o aparecimento de disfunção cardíaca e atenuou as mudanças no metabolismo energético. / Introduction: the doxorubicin is a widely used chemotherapeutic, but it presents cardiotoxicity as a most severe side effect. The myocardial injury immediately begins after the infusion of the drug and is mediated by oxidative injury, increased apoptosis and Metalloproteinases activation. The açaí berry is a fruit rich in anthocyanins, which provides high antirust and antiinflammatory effect. The goal of this study is to evaluate the effect of the açaí berry in the prevention of ventricular dysfunction and the influence on oxidative stress, in the apoptosis and in the of matrix Metalloproteinases activity in the experimental model of acute cardiotoxicity induced by doxorubicin in rats. Material and methods: 64 male Wistar rats were used, allocated in four (4) groups: control (C), açaí (A), doxorubicin (D) and açaí-doxorubicin (AD). The rats received standard diet (groups C and D) or standard diet supplemented with açaí berry to 5% (groups A and AD) for 4 weeks. After this period the rats received doxorubicin injection 20 mg/kg (groups D and AD) or saline (groups C and A). Forty-eight hours after the injection, an Echocardiogram was performed and a study of the isolated heart, and the following procedure was the euthanasia performance. The cardiac tissue of the rats were collected for zymography, Western blot, oxidative stress and energy metabolism evaluation, as well as the metabolic concentration dosage determination of nitric oxide (NO) in the blood serum. The results were analyzed by a two-way ANOVA and there was a statistical significance of 5%. Results: the rats who received doxorubicin showed decreased body weight and decreased water intake and feed after the drug injection and also the açaí berry did not interfere in the results. Forty-eight hours after the doxorubicin injection, the animals which were injected presented an increased left atrium, increased left ventricle systolic diameter, left ventricle systolic diameter decrease, left ventricle shortening and E’ wave to doppler tissular decrease. When the rats received doxorubicin and were supplemented with açaí berry, there was an improvement of the shortening fraction an the E’. The doxorubicin reduced the + dP/dt,-dP/dt and the maximum systolic pressure, suggesting a worsening in both systolic and diastolic function, however the açaí berry was not capable of preventing de ventricular 10 dysfunction on the study of the isolated heart. We did not observe any differences in the NO metabolites dosage between the groups. The doxorubicin also activated MMP-2, increased oxidative stress, caused changes in energetic metabolism, with predominance of the glycidic metabolism and caused an increase in the apoptosis, evidenced by the increase in the active caspase 3 expression. When the açai berry was administered jointly, we observed an improvement of the cardiac energetic metabolism, with no effect in the metalloproteinases of matrix or in the apoptosis. Conclusion: The doxorubicin induced alterations in the structure and cardiac functions, besides the increase of the oxidative stress, energetic metabolism changes, MMP-2 activation and increase in apoptosis. The açaí berry prevented cardiac dysfunction and attenuated the energetic metabolism changes.

Submitted by MEIRIELE MAZZO null (meiriele.mazzo01@etec.sp.gov.br) on 2017-04-20T22:08:30Z No. of bitstreams: 1 mazzo_m_me_dra.pdf: 1614379 bytes, checksum: 8636b12167680e3d5e0c7f98f5feadd0 (MD5) / Approved for entry into archive by Luiz Galeffi (luizgaleffi@gmail.com) on 2017-04-25T18:29:19Z (GMT) No. of bitstreams: 1 mazzo_m_me_ilha.pdf: 1614379 bytes, checksum: 8636b12167680e3d5e0c7f98f5feadd0 (MD5) / Made available in DSpace on 2017-04-25T18:29:19Z (GMT). No. of bitstreams: 1 mazzo_m_me_ilha.pdf: 1614379 bytes, checksum: 8636b12167680e3d5e0c7f98f5feadd0 (MD5) Previous issue date: 2017-02-21 / Fipronil é um inseticida de amplo-espectro de ação, utilizado para o controle de pragas nas lavouras e de ectoparasitas na medicina veterinária. O objetivo do trabalho foi avaliar os efeitos tóxicos do fipronil sobre a fertilidade de ratos machos por meio da avaliação da produção de espermatozoides e de danos oxidativos causados no homogenato de testículos, além de avaliar a ação protetora da vitamina E. Ratos Wistar machos pesando aproximadamente 200 g foram divididos em três grupos (n = 6): controle: DMSO (60%) mais salina (40%) por via intraperitoneal (i.p.); fipronil 5: fipronil dissolvido em DMSO (60%) mais salina (40%) (5 mg/kg de peso corporal i.p.); fipronil 5 + vitamina E: fipronil dissolvido em DMSO (60%) mais salina (40%) (5 mg/kg de peso corporal i.p.) e vitamina E (100 mg/kg de peso vivo via oral).Durante 14 dias os animais foram pesados e cada grupo recebeu seu respectivo tratamento conforme citado, sendo que no 15º dia os animais foram eutanasiados e os testículos e epidídimos foram isolados para realização das seguintes análises: concentração de espermatozoides nos epidídimos, atividade das enzimas glutationa peroxidase (GPx) e catalase (CAT), determinação das concentrações de glutationa reduzida (GSH), grupos tióis de proteínas e malondialdeído (MDA) no homogenato dos testículos. Os dados foram analisados por ANOVA seguido pelo teste de Tukey. O fipronil reduziu significantemente a produção de espermatozoides (P < 0,01) e a vitamina E apresentou efeito protetor sobre esse parâmetro. A atividade da enzima GPx aumentou e a da CAT foi significantemente reduzida pelo fipronil (P < 0,001 e P < 0,05, respectivamente) e a vitamina E reestabeleceu as atividades das enzimas para níveis similares aos do grupo controle. Observou-se uma redução significante na concentração de GSH nos testículos dos ratos tratados com fipronil (P < 0,001) em relação ao grupo controle e a vitamina E apresentou uma proteção parcial deste efeito. Não houve alteração na concentração de grupos tióis de proteínas. Houve um aumento significante na concentração de MDA (P < 0,05), indicador de lipoperoxidação, nos animais tratados com fipronil e esse efeito foi diminuído pela vitamina E. Conclui-se que o fipronil afetou a produção de espermatozoides em ratos por apresentar atividade oxidante e que este efeito foi revertido pela vitamina E. / Fipronil is an insecticide with a broad-spectrum of action, used largely in both agricultural crops and veterinary medicine to control pests and ectoparasites. The objective of this study was to evaluate the toxic effects of fipronil on the fertility of male rats by evaluating sperm production and oxidative damage caused in the testis homogenate, as well as the protective action of vitamin E. Male Wistar rats weighing approximately 200 g were divided into three groups (n = 6): control: corn oil orally and DMSO (60%) plus saline (40%) intraperitoneally (i.p.); fipronil 5: fipronil dissolved in DMSO (60%) plus saline (40%) (5 mg/kg body weight i.p.); fipronil 5 + vitamin E: fipronil dissolved in DMSO (60%) plus saline (40%) (5 mg/kg body weight i.p.) and vitamin E dissolved in corn oil (100 mg/kg body weight orally). During 14 days the animals were weighed and each group received its respective treatment as mentioned, and on the 15th day the animals were euthanized and the testicles and epididymis were isolated for the following analysis: sperm concentration in the epididymis, activity of the glutathione peroxidase (GPx) and catalase (CAT) enzymes, concentrations of reduced glutathione (GSH), protein thiol groups and malondialdehyde (MDA) in the homogenate of testicles. Data were analyzed by ANOVA followed by the Tukey test. Fipronil significantly reduced sperm production (P < 0.01) and vitamin E had a protective effect on this parameter. The activity of the GPx enzyme increased and that of CAT was significantly reduced by fipronil (P < 0.001 and P < 0.05, respectively) but the vitamin E reestablished the enzyme activities to levels similar to those of the control group. A significant reduction in GSH concentration was observed in the testis of rats treated with fipronil (P < 0.001) compared to the control group and vitamin E showed partial protection against this effect. There was no change in the concentration of thiol groups of proteins. There was a significant increase in the concentration of MDA (P < 0.05), indicative of lipoperoxidation, in the animals treated with fipronil and this effect was reduced by vitamin E. It was concluded that fipronil declined the sperm production of the rats because its oxidant activity and that this effect was reversed by vitamin E.

Made available in DSpace on 2015-05-22T12:39:28Z (GMT). No. of bitstreams: 1 000469226-Texto+Completo-0.pdf: 1935172 bytes, checksum: ed87439b55bcfab4db835f100fcb8202 (MD5) Previous issue date: 2015 / Agrochemicals are water contaminants, resulting from anthropogenic activities, having as main objective the elimination of some form of life and, therefore, being harmful even to non-target species. It is utmost importance the standardization and the use of bioindicators, especially of native organisms, besides the development of toxicity tests or bioassays to assess the impacts of the agroindustrial activities. Thus, it was sought to identify possible biochemical changes, to evaluate the oxidative balance and the survival of individuals of catfish Rhamdia quelen, in two aged groups, facing acute toxicity tests with different concentrations of Roundup® (glyphosate: 18, 36, 72 and 144μg/L), Primoleo® (atrazine: 2. 5, 5, 10 and 15μg/L) and Facet® (quinclorac: 1. 75, 3. 5, 7 and 14μg/L). The procedures were performed with fingerlings (individuals with total length between 6 and 8 cm) and sexually newly matured individuals, called young-adult (with total length of more than 18 cm). All the animals were purchased from a farm and were kept for 7 days in a period called Acclimatization. After, agrochemicals were applied individually, at concentrations similar to those reported for the natural environment and allowed by law in our country. After 7 days of exposuring to the agrochemical, the animals were euthanized by cervical spinal cord section and the gill, liver, kidney and muscle tissues were separated and frozen at -20ºC.In fingerlings, pools were performed, grouping the tissue from three individuals, due to their low weight; the tissues from young-adult were analyzed individually. It was estimated the effect of this agrochemicals on intermidiate metabolism, by determining the glycogen levels, total proteins, total lipids and triacylglycerols, on the two length ranges. It was also evaluated the effect of this agrochemicals on the oxidative status determining the activity of superoxide dismutase (SOD) and catalase (CAT), and levels of lipid peroxidation (TBARS) in all the tissues from the animals on the two length ranges. The experimental procedures and the biochemical readings were performed in triplicate. It was also observed the effect of this agrochemicals on the survival of the individuals in experimental culture conditions, in both aged groups, searching for confirmation of sublethallity of determined concentrations for testing. The results are organized into three articles. The first is entitled Metabolic parameters and oxidative balance Rhamdia quelen changed after exposure to herbicides of rice crops (Roundup®, Primoleo® and Facet®), for submission to the journal Archives of Environmental Contamination and Toxicology, which presents the results obtained for the metabolism and the oxidative balance of fingerlings, which seem to have been able to modulate their enzymes as not to suffer oxidative damage front to Roundup® herbicide (by increasing CAT) and Primoleo® (without changes in SOD and CAT). The Facet® led to the increase of lipid peroxidation, especially in the gill, kidney and muscle tissues, despite the higher SOD, prejudicing the species significantly.The biochemical composition tissue of juveniles of R. quelen changed significantly, which may cause damages, mainly in the gill tissue, leading to a loss of homeostasis and it may result the death of the animals and/or the decrease of the reproductive success, when chronically exposed to these substances and concentrations. The second article entitled Metabolic changes in silver catfish exposed to herbicide of rice crop Roundup®, Primoleo® and Facet®, is concerned to the young-adult metabolism, for submission to the journal Environmental Pollution. There were changes in the metabolic profile of all sampled tissues, showing a differentiated tissue responsiveness, being the gills and the kidneys the most affected organs by the exposure to agrochemicals. The herbicide Facet® changed the gill tissue significantly, and it was suggested that the relevant Brazilian agencies regulate its use in protective standards for the environment. Finally, the third manuscript Article Oxidative status and lipid peroxidation determined by the exposure to agrochemicals Roundup®, Primoleo® and Facet® in Rhamdia quelen approaches the oxidative stress suffered by young-adults to be submitted to the journal Ecotoxicology and Environmental Safety. In this work the liver and kidney tissues were the most affected, and it can be infered that the Facet® (quinclorac) was the most toxic herbicide to the sexually newly matured individuals, followed by Primoleo® (atrazine) and after by Roundup® (glyphosate). One can suggest, from this set of results, a review of the current legislation in our country, to include products with the quinclorac active principle into the toxic list to be controlled in the natural environment. / Os agroquímicos são contaminantes aquáticos decorrentes das atividades antropogênicas, tendo como principal objetivo a eliminação de alguma forma de vida, sendo, portanto, lesivos inclusive à espécies não-alvo. É de extrema importância a padronização e a utilização de espécies bioindicadoras, em especial de organismos autóctones, além do desenvolvimento de testes de toxicidade ou bioensaios para avaliação dos impactos decorrentes das atividades agroindustriais. Assim, buscou-se verificar possíveis alterações bioquímicas, avaliar o balanço oxidativo e a sobrevivência de indivíduos do jundiá Rhamdia quelen, em duas faixas etárias, frente a testes de toxicidade aguda com diferentes concentrações de Roundup® (glifosato: 18, 36, 72 e 144μg/L), Primoleo® (atrazina: 2,5, 5, 10 e 15μg/L) e Facet® (quinclorac: 1,75, 3,5, 7 e 14μg/L). Foram realizados os procedimentos com alevinos (indivíduos com comprimento total entre 6 e 8 cm) e indivíduos recém-maturados sexualmente, chamados alevinões (com comprimento total superior a 18 cm). Todos os animais foram comprados de uma piscicultura e permaneceram por 7 dias em um período denominado Aclimatação. Após, os agroquímicos foram aplicados individualmente, em concentrações semelhantes às relatadas para o ambiente natural e permitido pela legislação vigente em nosso país. Após 7 dias de exposição ao agroquímico, os animais foram eutanasiados por secção de medula cervical, e foram separados os tecidos branquial, hepático, renal e muscular, sendo congelados a -20ºC.Nos alevinos, foram realizados agrupamentos dos tecidos de três indivíduos, devido seu baixo peso; os tecidos dos alevinões foram analisados individualmente. Estimou-se o efeito destes agroquímicos sobre o metabolismo intermediário, através da determinação dos níveis de glicogênio, proteínas totais, lipídeos totais e triacilgliceróis, nas duas faixas de comprimento. Avaliouse também o efeito destes agroquímicos sobre o status oxidativo determinando a atividade das enzimas superóxido dismutase (SOD) e catalase (CAT), além dos níveis de lipoperoxidação (TBARS) nos quatro tecidos dos animais, das duas faixas de comprimento. Os procedimentos experimentais e as leituras biquímicas foram realizados em triplicata. Ainda observou-se o efeito destes sobre a sobrevivência dos indivíduos em condições de cultivo experimental, nas duas faixas etárias, buscando a confirmação da subletalidade das concentrações determinadas para os testes. Os resultados estão organizados em três artigos, sendo o primeiro intitulado Parâmetros metabólicos e balanço oxidativo de Rhamdia quelen alterado frente à exposição a herbicidas de lavoura de arroz (Roundup®, Primoleo® e Facet®), para a submissão à Revista Archives of Environmental Contamination and Toxicology, onde são apresentados os resultados obtidos para o metabolismo e o balanço oxidativo dos alevinos, que parecem ter conseguido modular suas enzimas a ponto de não sofrerem dano oxidativo frente aos herbicidas Roundup® (pelo aumento da CAT) e Primoleo® (sem alterações nas enzimas SOD e CAT). O Facet® provocou o aumento da lipoperoxidação, principalmente nos tecidos branquial, renal e muscular, apesar da elevação da SOD, agredindo significativamente a espécie.A composição bioquímica tecidual dos juvenis de R. quelen sofreu alterações significativas, podendo acarretar a danos principalmente no tecido branquial, conduzindo à perda da homeostase e podendo acarretar na morte dos animais e/ou a diminuição do sucesso reprodutivo, quando expostos cronicamente a estas substâncias e nestas concentrações. O 2º artigo, intitulado Alterações metabólicas em jundiás expostos aos herbicidas de lavoura de arroz Roundup®, Primoleo® e Facet®, versa sobre o metabolismo de alevinões, para submissão à Revista Environmental Pollution. Houve alterações no perfil metabólico de todos os tecidos amostrados, evidenciando uma responsividade tecidual diferenciada, sendo as brânquias e os rins os órgãos mais afetados com a exposição aos agroquímicos. O herbicida Facet® alterou significativamente o tecido branquial, sendo sugerido que os órgãos brasileiros competentes regulamentem o seu uso em normas protetivas ao meio ambiente. Por fim, o manuscrito do artigo Status oxidativo e lipoperoxidação determinados pela exposição aos agroquímicos Roundup®, Primoleo® e Facet® em Rhamdia quelen, aborda o estresse oxidativo sofrido pelos alevinões, a ser submetido à Revista Ecotoxicology and Environmental Safety. Neste trabalho os tecidos hepático e renal foram os mais afetados, e podemos inferir que o Facet® (quinclorac) foi o agroquímico mais tóxico aos indivíduos recém-maturados sexualmente, seguido do Primoleo® (atrazina) e após o Roundup® (glifosato). Podese, a partir deste conjunto de resultados, sugerir uma revisão na legislação vigente em nosso país, a fim de incluir produtos com o princípio ativo quinclorac na lista de tóxicos a serem controlados no ambiente natural.