Un daño agudo al sistema nervioso central (SNC) desencadena una serie de eventos complejos e interrelacionados, entre los cuales encontramos tres especialmente importantes: excitotoxicidad, estrés oxidativo e inflamación. En particular, el cerebro inmaduro muestra varias características que lo hacen especial en cuanto a sus reacciones frente a lesioned agudas. En este contexto, la presente Tesis contribuye al conocimiento básico de los procesos de estrés oxidativo e inflamación que ocurren luego de una lesión excitotoxica mediada por inyección de NMDA en el cerebro inmaduro. Asimismo, desarrolla estrategias neuroprotectoras mediante la utilización de nuevos vectores de terapia génica combinados con la sobreexpresión de enzimas antioxidantes. Esta Tesis muestra que la expresión de una de las enzimas antioxidantes más importantes, la Cu/Zn superoxide dismutase (SOD), en el cerebro inmaduro normal se observa principalmente en neuronas, pero también en la glia limitans y la pared de los ventrículos cerebrales. Sin embrago, 4 horas después de una lesión excitotóxica, la enzima muestra una importante reducción en las neuronas afectadas por la lesión aguda inicial, ocurriendo esto antes de que estas neuronas iniciaran un proceso de muerte neuronal. A partir del primer día postlesión la expresión de SOD comienza a aumentar en astrocitos reactivos. La nitrotirosina, un producto del peroxinitrito, en el cerebro inmaduro luego de la lesión mostró un incremento en neuronas del núcleo de la lesión, y al día 1 postlesión también se observó en astocitos. Es interesante destacar que los astrocitos nitrados a partir de los 3 días postlesión delimitaban una subpoblación celular mostrando como características principales un alto grado de hipertrófia, elevados niveles de GFAP, expresión de novo de vimentina y SOD, y expresando metalotiooneina I/II, siendo siempre los astrocitos más reactivos. Asimismo, a pesar de encontrarse altamente nitrados y expresar la caspasa 3 activa en su núcleo, estos astrocitos no mostraron ningun signo morfológico de muerte celular ni tinción para TUNEL, lo cual sugiere que estas células no mueren al menos hasta los 7 días postlesión. Esta Tesis se centró seguidamente en el desarrollo de nuevas estrategias de terapia génica basadas en vectores proteicos modulares recombinantes. Cuando estos vectores fueron inyectados intracerebralmente 4 horas luego de la lesión, fueron capaces de transfectar células en toda la zona lesionada del cerebro inmaduro. Asimismo, fueron capaces de transfectar tanto neuronas como astrocitos y microglía, sin generar inflamación adicional. Con estos resultados prometedores, una de estos vectores se utilizó para sobreexpresar la SOD 2 horas luego de la lesión. Esta sobreexpresión indujo una disminución en los niveles de nitrotirosina, una disminución en el volúmen de lesión, un aumento en la supervivencia neuronal, y una recuperación funcional significativa cuando se compararon con animales lesionados e inyectados con solución salina control. Sorprendentemente, esta Tesis muestra que estos vectores poseen un potencial neuroprotector endógeno, que es mediado por sus dominios de interacción con integrinas Arg-Gly-Asp (RGD), ya que la inyección in vivo de un pequeño péptido ciclico con la secuencia RGD también resultó neuroprotector a niveles similares. En cultivos celulares mixtos de corteza cerebral, tanto los vectores como el péptido RGD fueron protectores frente a un daño inducido por NMDA, pero no lo fueron en cultivos purificados de neuronas corticales, sugiriendo que el efecto neuroprotector es dependiente de células gliales.Esta Tesis concluye que el estrés oxidativo, y en particular la vía del superóxido/peroxinitrito, contribuyen de manera fundamental al desarrollo de una lesión aguda en el cerebro inmaduro. Asimismo, la sobreepresión de SOD puede ser una interesante estrategia neuroprotectora. Finalmente, concluye que los vectores proteicos recombinantes modulares pueden actuar eficientemente in vivo luego de una lesión aguda al cerebro inmaduro, produciendo niveles terapéuticos de proteinas neuroprotectoras. / Acute central nervous system (CNS) damage consists of a multitude of inter-related and complex events, playing excitotoxicity, oxidative stress and inflammation important roles in the initial and secondary injury. In particular, the immature brain displays several characteristics that make it special in its reactions against acute injuries. In this context, this Thesis contributes to the basic understanding of the oxidative stress and inflammation occurring after an NMDA-mediated excitotoxic lesion to the immature brain, and to the development of neuroprotective gene therapy strategies for reducing immature brain damage by inhibiting oxidative stress. This Thesis shows the in vivo expression and cell localization of one of the most important antioxidant proteins, Cu/Zn superoxide dismutase (SOD), whose expression was observed mainly in neuronal cells, glia limitans and ependyma in the normal immature brain. However, after an excitotoxic lesion, the expression of this enzyme rapidly disappeared (at 4 hours) from the acutely affected neurons before they underwent cell death. One day after, expression of SOD begun to increase in reactive astrocytes, present in the lesion for up to 7 days, the last time studied. Moreover, in the normal brain, the peroxynitrite product nitrotyrosine was observed in neurons and scattered astrocytes, however, after the excitotoxic lesion it was early increased in neurons of the lesion core, and after at 1 day post-lesion it increased also in astrocytes. Interestingly, the nitrated hypertrophied astrocytes from 3 days post-lesion onward represented a separated population of cells sharing several markers such as vimentin, metallothionein, SOD, and high GFAP content and hypertrophy, being always phenotypically the most reactive astrocytes. In addition, although being heavily nitrated and showing activated caspase 3 in their nuclei, nitrated astrocytes did not display any morphological sign of cell death nor TUNEL staining at any time-point studied. The next step of this Thesis was to explore the putative beneficial effects of the overexpression of SOD after the NMDA excitotoxic lesion. This Thesis focused on the development of a new gene therapy strategy based on a non-viral modular recombinant protein vector. These vectors could deliver a transgene to the whole excitotoxically lesioned zone of the immature brain when injected 4 hours after the lesion. Moreover, they could transfect neurons, astrocytes and microglial cells, without generating additional inflammation. With these promising results, one of these protein vectors was used for overexpressing SOD 2 hours after the excitotoxic lesion. SOD overexpressing animals displayed decreased nitrotyrosine formation, reduced lesion volume, increased neuronal survival, and a complete functional recovery after 3 days in relation to NMDA+saline injected animals. Surprisingly control lesioned animals injected with the protein vector overexpressing the transgene for the green fluorescent protein or with the naked protein vector without any DNA, showed also a reduced lesion volume. Finally this Thesis showed that the neuroprotective potential of the protein vectors was mediated by the vectors integrin-interacting Arg-Gly-Asp (RGD) motif, as a cyclic RGD peptide was sufficient to induce this neuroprotection. Accordingly, both the protein vector and the cyclic RGD peptide were neuroprotective against a NMDA mediated injury to mixed cortical cultures. However, none of these molecules were neuroprotective under the same treatment conditions in cortical neuron purified cultures, suggesting that the neuroprotective mechanisms include triggering of a glial derived neurotrophic phenotype. This Thesis concludes that oxidative stress, and in particular the O2-./ONOO- pathway is a mayor contributor to lesion expansion in the acutely injured immature brain, and that the overexpression of SOD is an interesting neuroprotective strategy. In addition, it shows that modular recombinant protein vectors are efficient gene therapy vectors that can be applied to therapeutic interventions to the acutely lesioned immature brain.

?rea de concentra??o: Farmacologia. / Submitted by Nivaldo Melo (nivaldo.melo@ufvjm.edu.br) on 2015-11-30T16:02:46Z No. of bitstreams: 2 amine_becheleni_pimenta.pdf: 1766840 bytes, checksum: 6c26ee2619fece6619b42bf5cce87cb9 (MD5) license_rdf: 23898 bytes, checksum: e363e809996cf46ada20da1accfcd9c7 (MD5) / Approved for entry into archive by Rodrigo Martins Cruz (rodrigo.cruz@ufvjm.edu.br) on 2015-12-02T16:37:33Z (GMT) No. of bitstreams: 2 amine_becheleni_pimenta.pdf: 1766840 bytes, checksum: 6c26ee2619fece6619b42bf5cce87cb9 (MD5) license_rdf: 23898 bytes, checksum: e363e809996cf46ada20da1accfcd9c7 (MD5) / Made available in DSpace on 2015-12-02T16:37:34Z (GMT). No. of bitstreams: 2 amine_becheleni_pimenta.pdf: 1766840 bytes, checksum: 6c26ee2619fece6619b42bf5cce87cb9 (MD5) license_rdf: 23898 bytes, checksum: e363e809996cf46ada20da1accfcd9c7 (MD5) Previous issue date: 2014 / As plantas do g?nero Kielmeyera, cujos efeitos farmacol?gicos j? foram demonstrados, s?o plantas nativas da regi?o do Vale do Jequitinhonha e conhecidas como Pau Santo. A Kielmeyera rubriflora ? utilizada na medicina caseira, entretanto, at? o momento n?o existem dados dispon?veis na literatura de estudos farmacol?gicos a seu respeito. O objetivo do trabalho foi avaliar os efeitos ansiol?ticos e antidepressivos do extrato bruto das partes a?reas da K. rubriflora sobre a atividade do sistema nervoso central (SNC) de camundongos su??os albinos machos. O extrato bruto das partes a?reas foi administrado via oral nas doses de 100 mg/Kg, 250 mg/Kg e 500 mg/Kg em camundongos albinos, su??os, machos, com idade entre 9 e 13 semanas, com peso entre 25 e 40 g. Foram utilizados os testes de triagem farmacol?gica comportamental (agudo), movimenta??o espont?nea (agudo), potencializa??o do tempo de sono induzido por tiopental s?dico (agudo), placa perfurada (agudo), labirinto em cruz elevado (agudo), nado for?ado (cr?nico) e suspens?o da cauda (cr?nico). Na de triagem farmacol?gica comportamental, foram detectados efeitos de depress?o do SNC pela dose de 100mg/Kg e de est?mulo do SNC nas doses de 250 e 500 mg/Kg. O tempo de sono que foi reduzido pelo extrato em 20 e 26% nas doses de 100 e 500 mg/Kg respectivamente. A ambula??o foi significativamente aumentada nas doses de 100 e 500 mg/Kg sugerindo efeito ansiol?tico e significativamente diminu?da na dose de 250 mg sugerindo efeito sedativo. As propriedades ansiol?ticas foram investigadas nos testes da placa perfurada e do labirinto em cruz elevado, onde houve diminui??o do tempo de perman?ncia nos bra?os fechados com a doses de 100mg/Kg e aumento significativo de entradas no bra?o aberto na doses de 250mg/Kg sugerindo atividade ansiol?tica nestas doses. No teste da placa perfurada houve diminui??o significativa de mergulhos de cabe?a na dose de 250mg/Kg e 500mg/Kg sugerindo a??o sedativa e aumento significativo de mergulhos de cabe?a na dose de 100 mg/Kg sugerindo a??o ansiol?tica. A atividade antidepressiva foi investigada com os testes de suspens?o da cauda e nado for?ado. No teste da suspens?o da cauda houve diminui??o dose-dependente, por?m n?o significativa do tempo de imobilidade. No teste de nado for?ado houve diminui??o significativa do tempo de imobilidade em todas as doses investigadas sugerindo atividade antidepressiva, principalmente na dose de 100 mg/Kg. Sendo assim os dados encontrados sugerem a??o sedativa, ansiol?tica e antidepressiva dose-dependente do extrato bruto da Kielmeyera rubriflora. / Disserta??o (Mestrado) ? Programa de P?s-gradua??o em Ci?ncias Farmac?uticas, Universidade Federal dos Vales do Jequitinhonha e Mucuri, 2014. / ABSTRACT The plants of the genus Kielmeyera, whose pharmacological effects have been reported, are native to the Vale do Jequitinhonha region and are known as ?Pau Santo?. The Kielmeyera rubriflora is used in folk medicine; however, no data are available in the literature on pharmacological studies regarding this species. The aim of the study was to evaluate the anxiolytics and antidepressants effects of the crude extract from the aerial parts of K. rubriflora activity on the central nervous system (CNS) of Swiss albino male mice. The crude extract of the aerial parts was administered orally at doses of 100 mg/kg, 250 mg/kg and 500 mg/kg to albino Swiss, male mice, between 9 and 13 weeks of age, weighing between 25 and 40 g. Behavioral pharmacological screening (acute), spontaneous movement (acute), potentiation of sleeping time induced by sodium thiopental (acute), elevated plus maze (acute), hole board (acute), forced swimming (chronic) and tail suspension (chronic) tests were performed. In the behavioral pharmacological screening of CNS depression, effects were detected with the 100 mg/kg dose, and CNS stimulation was detected with the doses of 250 and 500 mg/kg. The duration of sleep was reduced by the extract at 20 and 26% with doses 100 and 500 mg/kg, respectively. The ambulation was significantly higher at doses of 100 and 500 mg/kg, suggesting an anxiolytic effect, and significantly lower at a dose of 250 mg, suggesting a sedative effect. Anxiolytic properties were investigated in the tests of the hole board and the elevated plus maze, where there is less time spent in the closed arms with doses of 100 mg/kg and a significant increase in open arms entries with doses of 250 mg/kg, suggesting an anxiolytic activity with these doses. In the hole board test, head dipping decreased significantly with doses of 250 mg/kg and 500 mg/kg, suggesting a sedative action. A significant increase in head dipping was observed with the doses of 100 mg/Kg, suggesting na anxiolytic action. The antidepressant activity was investigated with the tail suspension and forced swim tests. In the tail suspension test, a dose-dependent, but not significant, decrease in the immobility time, was observed. In the forced swim test, a significantly lower immobility time was observed at all the doses, suggesting an antidepressant activity, especially at a dose of 100 mg / kg. Thus, the data suggests a sedative, anxiolytic and antidepressant dose-dependent action of the crude extract of Kielmeyera rubriflora.

Introduction: Sepsis is determined as a sistemic inflamatory response syndrome (SIRS) followed by an infecction, evidenced or not. Even after discharge, sepsis survivors have high mortality index and may develop long term cognitive impairment. Articles show that exercise act positively on cognitive behavior considering angiogenesis, neurogenesis and sinaptogenesis as well as like atennuation on memory dammage by depleted or downregulation of MDA and carbonils in hipocampos and córtex préfrontal córtex. Objetive: The aim of this study was analise the effects of moderate physical exercise treadmill program on preventions of alterations on CNS in an sepsis animal model. Methodology: This study use black male mice C57BL/6 (28 days, between 20-25 g). The animals were submitted to moderate physical exercise treadmill program during 8 weeks. Completing 88 days before sepsis induccion by LPS were aleatorally distribueted in groups(n = 10): 1) PBS + not exercitaded; 2) PBS + exercitaded; 3) LPS + not exercitaded; 4) LPS + exercitaded. After 10 days mice did the memory tests and after executed, and having samples of córtex pré-frontal, estriatum, hipocampus, cerebellum and córtex to avaliations based on levels of MDA, carbonils and free-thios. Results: The LPS + exercited didn’t show long term cognitive impairmentand and show smaller MDA concentrations on córtex total, hipocampus, estriatum e cerebellum; downregulated carbonils in córtex total and hipocampus and upregulated levels of free thiois in córtex pré-frontal e córtex total, when compared to LPS + not exercited group. Conclusions: Beyond performance of this training program was observed that memory and learning were preserved was partially explain for the bioquimics results when compared to not exercised group. We suggest new researches to verify how exercise effects may influence other patterns to better understand the power of this intervention Sugerem-se novas pesquisas para verificar a atuação do exercício em outras vias e cascatas metabólicas e compreender melhor o alcance desta intervenção. / Submitted by Tatyane Barbosa Philippi (tatyane.barbosa@unisul.br) on 2017-10-23T18:55:06Z No. of bitstreams: 2 Dissertação Regina.pdf: 1679084 bytes, checksum: 16dfcc0bf0b5564bcf13b2b8442eb9c2 (MD5) Regina_Maldonado_Bussmann.pdf: 775206 bytes, checksum: 7c2b149b3ff90e8991c8fa1067a4a5c5 (MD5) / Approved for entry into archive by Ana Barreiros (ana.barreiros@unisul.br) on 2017-10-23T19:24:54Z (GMT) No. of bitstreams: 2 Dissertação Regina.pdf: 1679084 bytes, checksum: 16dfcc0bf0b5564bcf13b2b8442eb9c2 (MD5) Regina_Maldonado_Bussmann.pdf: 775206 bytes, checksum: 7c2b149b3ff90e8991c8fa1067a4a5c5 (MD5) / Made available in DSpace on 2017-10-23T19:24:54Z (GMT). No. of bitstreams: 2 Dissertação Regina.pdf: 1679084 bytes, checksum: 16dfcc0bf0b5564bcf13b2b8442eb9c2 (MD5) Regina_Maldonado_Bussmann.pdf: 775206 bytes, checksum: 7c2b149b3ff90e8991c8fa1067a4a5c5 (MD5) Previous issue date: 2016-07 / Introdução: Sepse é conceituada como uma síndrome da resposta inflamatória sistêmica (SIRS) decorrente de infecção, sendo esta comprovada ou não. Mesmo após a alta, os pacientes sobreviventes a sepse apresentam elevada taxa de mortalidade e comprometimento de algumas funções cognitivas. Estudos demonstram a influência positiva do exercício regular no funcionamento cognitivo cerebral favorecendo angiogênese, neurogenese e sinaptogenese assim como atenuação do prejuízo sobre a memória de memória de longo e curto prazo pela erradicação ou diminuição de peroxidação lipídica em hipocampo e córtex pré-frontal. Objetivo: Avaliar os efeitos de um protocolo de exercício físico aeróbio na prevenção de alterações no SNC em um modelo animal de sepse. Métodos: Foram utilizados camundongos machos C57BL/6 com 28 dias, entre 20-25 g. Os animais foram submetidos a um protocolo de exercício físico aeróbio moderado por oito semanas. Aos 88 dias após a indução de sepse por LPS, os animais foram distribuídos nos seguintes grupos (n = 10): 1) PBS + não exercitado; 2) PBS + exercitado; 3) LPS + não exercitado; 4) LPS + exercitado. Depois de 10 dias os camundongos foram submetidos aos testes de memória e aprendizado. Após os testes comportamentais, os animais foram sacrificados sendo o córtex pré-frontal, estriado, hipocampo, cerebelo e córtex removidos e armazenados para análises posteriores de peroxidação lipídica e carbonilação de proteínas e tióis livres. Resultados: O grupo LPS + exercitado não apresentou comprometimento da memória e do aprendizado e apresentou menores concentrações de MDA no córtex total, hipocampo, estriado e cerebelo; proteínas carboniladas diminuídas em córtex total e hipocampo e aumentadas concentrações de tióis livres em córtex pré-frontal e córtex total, quando comparados com LPS + não exercitados. Conclusão: A realização do exercício aeróbio moderado preserva a função cognitiva (memória e aprendizado) em insultos sépticos, e a redução do dano oxidativo, parece mediar pelo menos em parte o efeito do exercício físico.

Thèse numérisée par la Direction des bibliothèques de l'Université de Montréal.

Os receptores para mineralocorticoides (MR) e glicocorticoides (GR) representam importantes sítios de ligação para os glicocorticoides. Enquanto a ativação crônica e excessiva de GR leva à atrofia do hipocampo, a ativação do MR é neuroprotetora. Considerando as alterações no giro denteado (GD), decorrentes do envelhecimento, e a possível participação do MR e GR neste processo, o objetivo deste trabalho foi correlacionar o desbalanço de tais receptores com a degeneração neuronal nesta região do hipocampo de cães idosos. Para isso, utilizaram-se cortes histológicos do hipocampo de 6 cadáveres caninos jovens/adultos (até 8 anos de idade) e 12 idosos (idade igual ou superior a 10 anos), de ambos os sexos e de qualquer raça, os quais foram submetidos à: coloração de Nissl, para a identificação de células nervosas; imuno-histoquímica, para o estudo da expressão do MR e GR; e marcação fluorescente (fluoro-jade B), para detecção de neurônios em degeneração. A camada polimórfica do GD de cães idosos apresentou redução (em 16%) na contagem de neurônios e maior número de neurônios em degeneração. Em conjunto com estas alterações celulares, a menor marcação/expressão do MR e a menor relação MR:GR foram correlacionadas com a degeneração neuronal na camada polimórfica do GD de cães idosos. Além disso, cadelas idosas apresentaram menor densidade celular na camada granular, quando comparadas aos machos idosos, sugerindo uma ação diferencial dos esteroides sexuais nas alterações do GD. Os resultados indicam que o desbalanço na relação MR:GR pode interferir na sobrevivência neuronal no GD de cães idosos. / The mineralocorticoid (MR) and glucocorticoid (GR) receptors bind the glucocorticoid hormones. The chronic and excessive GR activation leads to hippocampus atrophy. By contrast, MR activation is neuroprotective. Considering the aging changes in the dentate gyrus (DG) and the possible participation of MR and GR in this process, the objective of this study was to correlate the unbalance of these receptors with the neuronal degeneration in this hippocampal region of aged dogs. For that purpose, cadaveric histologic sections of hippocampus of 6 young/adult dogs (until 8 years old) and 12 aged dogs (more than 10 years old), of both sex and any breed, were included. The Nissl staining and imunochemistry were performed to identify nerve cells and to study the MR and GR expression, respectively. Moreover, fluorescent labeling (fluoro- Jade B) was used to detect degenerating neurons. The polimorfic layer of the DG of aged dogs showed reduction (of 16%) on the neurons counting and more degenerating neurons. Together with this cells changes, the less MR expression and MR:GR relation were correlated with the neuronal degeneration in the polimorfic layer of DG of aged dogs. Besides that, aged females presented lower cell density in the granular layer, when compared to aged males, suggesting a differential sex steroid action on changes in the GD. Our results indicate that unbalance on the MR:GR relation may interfere with neuronal survival in the DG of aged dogs.

Made available in DSpace on 2015-04-11T13:38:24Z (GMT). No. of bitstreams: 1 karla.pdf: 1853502 bytes, checksum: 17ad3c01eb4702fcf74f49cac2307780 (MD5) Previous issue date: 2010-11-29 / In Amazonian region, Ampelozizyphus amazonicus Ducke, known as saracura-mirá or cerveja de índio , is used to treat gastrointestinal disorders, as an antidote to snake venoms and to prevent malaria. Chemical studies report the triterpenic saponins as the main constituents, however, chemical standardization of the extracts are not described. The anti-plasmodium effect of the aqueous and ethanolic extracts was not observed neither in vitro in cultured P. falciparum, nor in vivo in mice infected with P. berghei and chickens infected with P. gallinaceum. The isolated compounds were not tried in these experiments. Studies on systemic effects of the extracts and dose-effect correlation are scarce. For these reasons, this work proposes the chemical standardization of the extract and the evaluation of the secondary pharmacology, mainly in the cardiovascular system. The plant was collected in Manacapuru (AM). Due to the high concentration of saponins in stems, the extraction was performed in ethanol 50 % and latter partitioned with n-butanol for the separation of the chemical compounds in preparative HPLC. Six majoritary compounds, identified by the peaks retention time and concentration in sample were used as references. The hydroalcoholic extract and its butanolic fraction have shown a slight CNS depressant effect demonstrated by the potentiation of the sleeping time induced by pentobarbital and ethylic ether. The extracts also produced anxiolytic-like effect in the plus maze test and depression in the tail suspension test in mice. Antinociceptive and anti-inflammatory effects were detected in paw edema induced by formalin and carrageenan in rats. FBut protected the gastric mucosa against cold stress or ethanol induced gastric damage, but not against indomethacin-induced gastric damage. FBut inhibited the gastric secretion in vivo in mice and the H+-K+-ATPase in vitro, suggesting an anti-secretory effect. FBut showed hypotensive effect in rats chronically treated per os and in anesthetized rats after e.v. injection. The atrial automatism was not altered, but negative inotropic effect was observed in rat myocardium in vitro. In rat aorta, FBut relaxed the adrenergic tonus. This effect was partially blocked by L-NAME pre-incubation or mechanical destruction of the endothelium. In rat isolated jejunum, the EC50 of the ACh was increased, however, the maximum contraction was not altered. In rat isolated vas deferens adrenergic contraction, the FBut showed non-competitive antagonistic effect. In depolarized vas deferens, the FBut decreased the contraction induced by CaCl2, suggesting a calcium influx blockade. In rat isolated diaphragm, the directly or indirectly contractions induced by electrical stimulation of the muscle was not altered. In mammalian P-type ATPases, FBut inhibited the gastric H+,K+-ATPase, but did not inhibit the Ca2+-ATPase in vitro. The results indicate that hypotension produced by FBut seems to be related to the relaxation of the adrenergic vascular tonus, possibly due to the activation of the NO synthesis in the endothelial cells. The FBut effects in rat aorta and smooth muscles indicate that other vasodilatory mechanism(s) may be involved, probably calcium channel blockade in vascular smooth muscle. / Na região Amazônica, a Ampelozizyphus amazonicus Ducke, conhecida como saracura-mirá ou cerveja de índio, é utilizada no tratamento de distúrbios gastrintestinais, como anti-inflamatória, antídoto para veneno de cobra e na prevenção da malária. Estudos químicos descrevem o isolamento e identificação de saponinas triterpênicas como as principais substâncias. Não há relatos da padronização de extratos de A. amazonicus. A atividade antiplasmódio dos extratos aquoso e etanólico não foi comprovada in vitro em cultura de P. falciparum e nem in vivo em camundongos e galinhas infectados com P. berghei e P. gallinaceum, respectivamente. A atividade dos compostos isolados não foi testada. Estudos sistêmicos dos extratos correlacionando dose-efeito são raros. Considerando essas informações, este trabalho propõe a padronização química do extrato a ser estudado e a avaliação da farmacodinâmica secundária, principalmente na atividade cardiovascular. Exemplares da planta nativa foram colhidos em Manacapuru, AM. A alta concentração de saponinas dificultou a extração aquosa do pó do caule, optando-se pela extração hidroalcoólica com etanol a 50%, de melhor rendimento, permitindo a partição em n-butanol para a separação dos componentes químicos em cromatografia líquida preparativa. Como referência, foram utilizados os seis componentes majoritários, identificados pelo tempo de retenção e concentração de cada pico. O extrato hidroalcoólico e a fração butanólica, testados com protocolos padronizados para a triagem farmacológica, mostraram efeito depressor leve do SNC comprovado com a potenciação do sono barbitúrico e etéreo. Os extratos produziram também efeitos do tipo ansiolítico no labirinto em cruz elevado e efeito depressor no teste de suspensão pela cauda. Atividades antinociceptiva e anti-inflamatória foram detectadas nos testes da formalina e do edema de pata induzido por carragenina. A fração butanólica (Fbut) protegeu a mucosa gástrica das lesões induzidas por estresse a frio ou por etanol, mas não as induzidas por indometacina, indicando que a atividade anti-úlcera não está relacionada à síntese de prostaglandina. A FBut, inibiu a secreção gástrica in vivo e a H+-K+-ATPase in vitro, sugerindo que esse mecanismo pode ser o responsável pelo efeito antissecretor ácido. A FBut provocou hipotensão quando administrada cronicamente por via oral e quando injetada e.v. em ratos anestesiados. O automatismo atrial não foi alterado, mas em miocárdio de ratos foi observado efeito inotrópico negativo. Em aorta de rato, a FBut relaxou o tônus adrenérgico. Esse efeito foi parcialmente bloqueado pela incubação prévia com L-NAME ou destruição mecânica do endotélio. Na musculatura lisa, a CE50 da ACh foi aumentada sem alteração do efeito máximo em jejuno de rato; em ducto deferente de rato contraído à adição de noradrenalina, a FBut teve efeito antagonista do tipo não- competitivo. Em ducto deferente despolarizado, a FBut diminuiu a contração induzida pela adição de CaCl2, indicando bloqueio do influxo de cálcio. A capacidade contrátil do músculo diafragma de rato estimulado direta ou indiretamente não foi alterada. Em ATPases tipo-P isoladas de mamíferos, a FBut inibiu a atividade da H+,K+-ATPase da mucosa gástrica de porco, mas não a Ca2+-ATPase da coxa de coelho. Os resultados indicam que a FBut produz hipotensão que parece estar relacionada com o relaxamento do tônus vascular adrenérgico, possivelmente decorrente da ativação da via do NO na célula endotelial. A ação da FBut na aorta de rato e na musculatura lisa, indica que outros mecanismos vasodilatadores podem estar envolvidos, como o bloqueio canais de cálcio na musculatura lisa vascular.

Diversos estudos relatam os efeitos da exposição à nicotina nos períodos pré e pós-natal, contudo, pouco se sabe a respeito dos efeitos da fumaça do cigarro na cascata de eventos que caracteriza o desenvolvimento do sistema nervoso central (SNC). Neste contexto, o objetivo deste trabalho foi esclarecer se a exposição à fumaça do cigarro no início do período pós-natal induz prejuízo ao desenvolvimento do SNC na infância, e as possíveis consequências na adolescência e na fase adulta. Camundongos BALB/c foram expostos a uma mistura de fumaça central e lateral do cigarro referência 3R4F (Universidade de Kentucky, EUA), desde o 3° dia de vida pós-natal (P) até P14 por duas horas diárias. Nossos resultados indicam que a exposição à fumaça do cigarro no início do período pós-natal induz prejuízo ao processo de aprendizado e memória e aumento na ansiedade em todas as idades avaliadas, além de induzir diminuição da atividade locomotora na infância e na adolescência. Ainda, observamos diminuição dos níveis de BDNF e das proteínas sinápticas sinapsina e sinaptofisina no hipocampo, cerebelo, córtex pré-frontal e estriado. A fumaça do cigarro também induz diminuição na porcentagem de fibras mielinizadas no nervo óptico e aumento da proteína básica de mielina (PBM) no cerebelo na infância, além de diminuição da PBM no telencéfalo e tronco encefálico na adolescência e no cerebelo na fase adulta. Nossos resultados sugerem que a exposição à fumaça do cigarro no início do período pós-natal causa prejuízo ao desenvolvimento do SNC, sendo que não há reversão dos efeitos observados no aprendizado e memória ou mesmo nos níveis de proteína pré-sináptica na adolescência e na fase adulta. / Several studies show the effects of nicotine exposure during pre- and postnatal period. However, little is known about the effects of environmental tobacco smoke (ETS) in the cascade of events that characterizes the brain development. Thus, the aim of this study was to evaluate the effects of ETS in early brain development. BALB/c mice were exposed to a mixture of mainstream and sidestream of tobacco smoke of reference cigarettes 3R4F (University of Kentucky, EUA) from the 3rd (P3) to the 14th (P14) day of life, during 2h/day. Our results showed that ETS induced impairment in learning and memory and increased anxiety in all the ages evaluated. In addition, there was a decrease in locomotor activity during childhood and adolescence. ETS also induced impairment in synaptic transmission, by a decrease in synapsin, synaptophysin and BDNF in hippocampus, cerebellum and prefrontal cortex as compared to the control group. The percentage of myelinated fibers in the optic nerve in childhood and in myelin basic protein (MBP) in the telencephalon and brainstem were lower in adolescents mice exposed to ETS when compared to the control group. In cerebellum, there was an increase in MBP in infants and a decrease in adults compared to the control group. Taken all together, our results suggest that the exposure to ETS in the early postnatal period induces impairment to the brain development. It is noteworthy that the effects on learning and memory or even in the presynaptic protein levels were not reversed in adolescence and adulthood.

Diversos estudos relatam os efeitos da exposição à nicotina nos períodos pré e pós-natal, contudo, pouco se sabe a respeito dos efeitos da fumaça do cigarro na cascata de eventos que caracteriza o desenvolvimento do sistema nervoso central (SNC). Neste contexto, o objetivo deste trabalho foi esclarecer se a exposição à fumaça do cigarro no início do período pós-natal induz prejuízo ao desenvolvimento do SNC na infância, e as possíveis consequências na adolescência e na fase adulta. Camundongos BALB/c foram expostos a uma mistura de fumaça central e lateral do cigarro referência 3R4F (Universidade de Kentucky, EUA), desde o 3° dia de vida pós-natal (P) até P14 por duas horas diárias. Nossos resultados indicam que a exposição à fumaça do cigarro no início do período pós-natal induz prejuízo ao processo de aprendizado e memória e aumento na ansiedade em todas as idades avaliadas, além de induzir diminuição da atividade locomotora na infância e na adolescência. Ainda, observamos diminuição dos níveis de BDNF e das proteínas sinápticas sinapsina e sinaptofisina no hipocampo, cerebelo, córtex pré-frontal e estriado. A fumaça do cigarro também induz diminuição na porcentagem de fibras mielinizadas no nervo óptico e aumento da proteína básica de mielina (PBM) no cerebelo na infância, além de diminuição da PBM no telencéfalo e tronco encefálico na adolescência e no cerebelo na fase adulta. Nossos resultados sugerem que a exposição à fumaça do cigarro no início do período pós-natal causa prejuízo ao desenvolvimento do SNC, sendo que não há reversão dos efeitos observados no aprendizado e memória ou mesmo nos níveis de proteína pré-sináptica na adolescência e na fase adulta. / Several studies show the effects of nicotine exposure during pre- and postnatal period. However, little is known about the effects of environmental tobacco smoke (ETS) in the cascade of events that characterizes the brain development. Thus, the aim of this study was to evaluate the effects of ETS in early brain development. BALB/c mice were exposed to a mixture of mainstream and sidestream of tobacco smoke of reference cigarettes 3R4F (University of Kentucky, EUA) from the 3rd (P3) to the 14th (P14) day of life, during 2h/day. Our results showed that ETS induced impairment in learning and memory and increased anxiety in all the ages evaluated. In addition, there was a decrease in locomotor activity during childhood and adolescence. ETS also induced impairment in synaptic transmission, by a decrease in synapsin, synaptophysin and BDNF in hippocampus, cerebellum and prefrontal cortex as compared to the control group. The percentage of myelinated fibers in the optic nerve in childhood and in myelin basic protein (MBP) in the telencephalon and brainstem were lower in adolescents mice exposed to ETS when compared to the control group. In cerebellum, there was an increase in MBP in infants and a decrease in adults compared to the control group. Taken all together, our results suggest that the exposure to ETS in the early postnatal period induces impairment to the brain development. It is noteworthy that the effects on learning and memory or even in the presynaptic protein levels were not reversed in adolescence and adulthood.

傳統上，派屈網路分類的方式是依照區域結構分成"簡單網"、"非對稱選擇網"， "擴充自由選擇網"，"自由選擇網"，"標記圖形網"，"狀態機"。最近我們將派屈網路依照全域結構的分類方式分成兩類：同步選擇網及非同步選擇網。 同步選擇網的結構不同於其它的分類方式，不但可以作派屈網的分類，而且可以因此決定網路的性質如：boundedness、liveness、reversibility等。 在一個同步選擇網中，任何一個沒有bridge的handle必定是一個TT-或PP-路徑；同步選擇網也可以分解成許多T-components或P-components；同步選擇網是非常值得研究的題目，如果一個派屈網不屬於同步選擇網，這個派屈網很可能有設計上的錯誤如unbounded或deadlock。 / Traditionally Petri nets (PN) are classified, based on local structures (input and output set of transitions or places), into simple nets, asymmetric choice nets, extended free choice nets, free choice nets, mark graphs and state machines. We categorize ordinary Petri nets into two lasses: SNC and non-SNC based on global structure. Unlike other class of Petri nets, the structure of SNC nets not only classify the nets, but also determine the properties of the nets such as boundedness, liveness, reversibility, …etc. In an SNC, any prime handle must be either a TT-or PP-path. SNC nets is declared to be largest (than Free Choice) set of nets that are covered by both T-components and P-components. SNC nets is interesting because if a designed PN is not an SNC, then most likely it suffers from design errors of deadlocks or unbounded. SNC nets is both structurally live and bounded. However, it may not be live or reversible. This thesis presents the conditions of liveness and rsibility. An algorithm is developed to detect SNC nets which based on a useful mechanism called S-Matrix to records the structure relationship between any two PSP's. Further, we will also provide algorithms to check the SNC nets to be live and irreversible.

C'est le recueil de 3 documents distincts; le premier «Des chiffres à l'image», décrit exhaustivement et chronologiquement les réalisations qui ont accompagné cette recherche. Le second «Un système informatique au service de la communication», présente dans le détail les motivations profondes qui ont conduit, au concept d'enseignement Multimedia assisté par ordinateur, ainsi que l'architecture du système SNC qui en est résulté. Enfin le troisième «Expérimentation numérique et visualisation», est une vision prospective du rôle que joue l'ordinateur dans le monde de la recherche