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Obtenção de derivados da Primina : avaliaçãodo perfil de atividade biológicaRicardo Melo do Nascimento, Célio January 2004 (has links)
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Previous issue date: 2004 / Há alguns milhares de anos a humanidade faz uso sistematicamente de produtos naturais no tratamento de doenças e enfermidades. Desde então, a natureza tem contribuído de forma fantástica para obtenção de novas substâncias. A prospecção e testes biológicos de produtos naturais podem revelar substâncias candidatas a novos fármacos que poderão ser usadas como uma matriz adequada em um projeto de química medicinal. É neste universo de prospecção que surge a primina (2-metoxi-6-pentil 1,4-benzoquinona), um forte alergênico isolado pela primeira vez por Bloch & Karrer em 1927 da Prímula obconica (Primulaceae). Atualmente há métodos simples, diretos e generalizáveis para a preparação de análogos da primina. Esses análogos tem mostrado atividade biológica, mas ainda com pronunciada toxicidade. A proposta deste trabalho foi a otimização do fármaco protótipo a primina através da síntese de derivados, potencializando seus efeitos farmacológicos e minimizando seus efeitos tóxicos. Os compostos 2-metoxi-hidroquinona bis(2 -tetrahidropiranil)-eter (MHQ-THP) e 2-metoxi-6-pentil-hidroquinona bis(2 -tetrahidropiranil)-eter (P-MHQ-THP) foram sintetizados partindo da 2-metoxi-hidroquinona, a primeira etapa foi à proteção das hidroxilas com o dihidropirano (DHP), obtendo o intermediário (MHQ-THP). A segunda etapa consistiu na litiação do MHQ-THP e subseqüente alquilação regioseletiva, obtendo o P-MHQ-THP. Os produtos tiveram suas estruturas confirmadas através de espectroscopia de infravermelho e de ressonância magnética nuclear de próton. A atividade biológica dos compostos sintetizados foi avaliada através dos testes de toxicidade aguda, atividade antitumoral frente ao sarcoma 180 (S-180) e carcinoma de Ehrlich (ES) e atividade antiinflamtória através do ensaio edema de pata induzido por carragenina. Os resultados da toxicidade aguda indicaram, tanto para o precursor MHQ-THP como para o P-MHQ-THP, que não houve efeitos tóxicos significantes em doses de 1000 mg/kg e 2000 mg/kg. Na avaliação da atividade antitumoral os dois compostos apresentaram boa resposta inibitória quando comparados à primina, com inibição variando entre 60,83% e 79,81%. Os resultados para atividade antiinflamatória do composto MHQ-THP, demonstraram boas taxas de inibição, de 69,05%. Estes resultados animadores nos levaram a planejar novas modificações no composto protótipo com o objetivo de minimizar custos e facilitar a obtenção de novos derivados. Baseados nos resultados anteriores escolhemos para a proteção das hidroxilas o grupamento acetoxi, introduzido através da reação de Thiele. A avaliação qualitativa preliminar da atividade antimicrobiana para esses compostos, mostrou que as modificações implementadas não contribuíram para a atividade antimicrobiana
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Simulação computacional de carreador lipídico nanoestruturado contendo gordura de cupuaçu (Theobroma Grandiflorum)VIEIRA, Ana Paula Bastos Ferreira 19 October 2017 (has links)
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Previous issue date: 2017-10-19 / CNPq - Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico / A constante evolução dos sistemas de liberação controlada de fármacos impulsionou a busca de novas estratégias, para a obtenção de formulações potencialmente promissoras. A simulação computacional e a modelagem molecular podem fornecer efetivas contribuições para um design e avaliação de sistemas complexos, como nanocarreadores lipídicos contendo insumos naturais. Neste trabalho, um carreador lipídico nanoestruturado (CLN) foi proposto utilizando triacilgliceróis da gordura de cupuaçu e do ácido cáprico/caprílico, a cera de carnaúba, o tween 80®, o pluronic® e um enantiômero do cetoconazol. Ensaios experimentais foram realizados para avaliar a cristalinidade e os eventos térmicos das misturas lipídicas, que demonstraram que a mistura M03 apresentou menor valor de entalpia (-15,17 J/g) e maior alargamento nos picos do difratograma, sugerindo estrutura de menor cristalinidade. Simulações computacionais foram realizadas para elucidar as estruturas 3D, estudar as propriedades moleculares e eletrostáticas, bem como as interações intermoleculares com o fármaco. A docagem molecular da M03 com o cetoconazol mostrou interação do tipo ligações de hidrogênio, com distância de ligação de 2,62 a 3,50Å e energia de afinidade -5,3 Kcal/mol. O modelo tridimensional do CLN mostrou boa distribuição das moléculas e após simulação de dinâmica molecular, o sistema se manteve estável (energia de -1895,47 KJ/mol), com interações do tipo ligação de hidrogênio moderada a fraca e distância de 2,45 a 3,50Å. Perfis RDF estabelecidos demonstram interações de forte intensidade entre o cetoconazol e o tween 80, entre a água e o pluronic, entre o pluronic e o SOO e entre o tween 80 e o SOO, todos com interações ocorridas no raio ≥2Å de distância. Estes resultados podem ser utilizados como suporte para direcionar o desenvolvimento futuro de uma formulação de CLN, antecipando os testes experimentais e auxiliando na obtenção de formulações prósperas. / The constant evolution of the drug delivery systems boosted the search for new strategies, to obtain potentially promising formulations. Computational simulation and molecular modeling can provide effective contributions to the design and evaluation of complex systems, such as lipid nanocarriers containing natural inputs. In this work, a nanostructured lipid carrier (NLC) was proposed using triacylglycerols of cupuaçu fat and capric/caprylic acid, carnauba wax, tween 80®, pluronic® and an enantiomer of ketoconazole. Experimental tests were carried out to evaluate the crystallinity and thermal events of the lipid mixtures, which demonstrated that the M03 mixture had a lower enthalpy value (-15,17 J/g) and greater widening of the diffractogram peaks, suggesting a lower crystallinity structure. Computational simulations were performed to elucidate 3D structures, to study molecular and electrostatic properties, as well as intermolecular interactions with the drug. The molecular docking of M03 with ketoconazole showed interaction of the hydrogen bond type, with bond distance of 2,62 to 3,50Å and affinity energy of -5,3 Kcal/mol. The three-dimensional CLN model showed good molecular distribution and after simulation of molecular dynamics, the system remained stable (energy -1895,47 KJ / mol), with moderate to weak hydrogen bonding interactions and a distance of 2,45 to 3,50Å. RDF profiles established demonstrate strong interactions between ketoconazole and tween 80, between water and pluronic, between pluronic and SOO, and between tween 80 and SOO, all interactions occurring within the radius ≥2Å of distance. These results can be used as support to guide the future development of a CLN formulation, anticipating the experimental tests and helping to obtain thriving formulations.
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Petiveria alliacea L.: etnobotânica, fitoquímica efeitos neurofarmacológicos e cognitivosLUZ, Diandra Araújo da 16 October 2016 (has links)
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Previous issue date: 2016-10-16 / CAPES - Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / Petiveria alliacea L., é uma planta arbustiva, nativa de regiões tropicas, utilizada para tratar memória fraca e melhorar a aprendizagem. No presente estudo avaliou-se os efeitos do extrato hidroalcoólico das folhas de P. alliacea (EHFPa, 900 mg/Kg) sobre a memória e aprendizado de ratos adultos, submetidos aos testes comportamentais esquiva inibitória e labirinto aquático de Morris. Adicionalmente, foi feita uma cromatografia em camada delgada (CCD) para a detecção de compostos de enxofre, a fim de tentar correlacioná-los com as respostas investigadas. Frações diclorometano, obtidas a partir de extratos aquosos de Alllium sativum e Allium cepa serviram como padrões de detecção. P. alliacea apresenta também ações controversas sobre o sistema nervoso central (SNC). Por esta razão, foi feita uma revisão bibliográfica sobre a etnobotânica, fitoquímica e efeitos neurofarmacológicos desta planta em bases indexadas, livros, dissertações, teses e fontes científicas similares. De acordo com os resultados o EHFPa promoveu melhora da memória de curta e de longa duração, memória espacial e aprendizagem. Na CCD, o EHFPa produziu pontos de retenção semelhantes as amostras padrão, indicando que há compostos de enxofre no extrato, sendo possível que eles participem das respostas observadas. Quanto a revisão, P. alliacea é utilizada popularmente no tratamento da epilepsia, ansiedade, memória fraca, como sedativo, etc. Tais propriedades foram demonstradas experimentalmente e variam em função da dose, parte da planta e preparação utilizada. Estudos fitoquímicos detectaram diversos metabólitos na P. alliacea, dos quais os compostos de enxofre, flavonóides e derivados são as classes com maior número de compostos isolados. / Petiveria alliacea L. is a shrubby plant, native from tropic regions, used to treat poor memory and improve learning. In the present study, it was evaluated the effects of hydroalcoholic extract of the leaves of P. alliacea (PaLHE, 900 mg/kg) on learning and memory of adult rats, subjected to behavioral tests inhibitory avoidance and Morris Water Maze. In addition, it was performed a thin layer chromatography (TLC) to detect sulphur compound, to correlate them with the investigated responses. Dichloromethane fractions, obtained from aqueous extracts of Alllium sativum and Allium Cepa served as detection patterns. P. alliacea is also present controversial activities on central nervous system (CNS). For this reason, it was realized a bibliographic review of ethnobotanical, phytochemical and neuropharmacological activities of this plant in indexed databases, books, dissertations, thesis and similar scientific sources. According to the results, EHFPa improved short and long term memory, spatial memory and learning. In TLC, the EHFPa produced retention points similar to the standard samples, indicating that there are sulfur compounds in the extract, being possible that they contribute to observed responses. About the review, P. alliacea is popularly used to treat epilepsy, anxiety, poor memory, as a sedative, etc. Such properties have been demonstrated experimentally, varying depending on the dose, preparation, and part of plant used. Phytochemical studies detected several metabolites in P. alliacea, among which sulfur compounds, flavonoids and derivatives classes the most isolated compounds.
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Obtenção e caracterização de nanoemulsão óleo em água a partir de óleo de açaí (Euterpe oleracea M.)CONTENTE, Denise Maria Loureiro 13 May 2015 (has links)
Submitted by Cássio da Cruz Nogueira (cassionogueirakk@gmail.com) on 2017-06-26T15:09:51Z
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Previous issue date: 2015-05-13 / CNPq - Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico / Nanoemulsões têm sido propostas como uma opção de sistemas de liberação de fármacos de atual e crescente interesse, devido a uma série de vantagens quando comparadas a formulações tradicionais. Os óleos vegetais são considerados insumos farmacêuticos de grande valor como matriz lipídica desses sistemas, como o óleo de açaí, óleo de origem amazônica, que possui uma série de benefícios medicinais, como atividade antioxidante e hidratante, além de biocompatibilidade, aumenta a elasticidade da pele e atua como barreira física. O objetivo do presente trabalho foi obter nanoemulsão O/A, a partir de óleo de açaí, tensoativo e água, por meio do método de temperatura de inversão de fase, para uso tópico. O óleo de açaí foi caracterizado por ensaios físico-químicos, bem como quanto ao perfil de ácidos graxos por Cromatografia gasosa (CG), espectrometria na região do infravermelho (FT-IR) e análise térmica por termogravimetria (TG) e calorimetria diferencial exploratória (DSC). O tensoativo, o cetoconazol e suas misturas binárias com o óleo de açaí foram avaliados por DSC. Obteve-se nanoemulsões fazendo uso do óleo de açaí, BrijTM CS20, água e o cetoconazol. A caracterização das nanoemulsões foi realizada quanto ao tamanho das gotículas, índice de polidispersidade (IP), potencial zeta (PZ), morfologia e eficiência de encapsulação (EE). O óleo de açaí apresentou índice de acidez (3,78 mg KOH/g), índice de iodo (71 gl2/100g), índice de saponificação (1λλ mg KOH/g), índice de refração (1,470) e densidade (0,λ50g/ml). Na análise por CG apresentou 68,05% de ácidos graxos insaturados, sendo 47,58% de ácido oleico. A estabilidade oxidativa do óleo de açaí em Rancimat foi cerca de 11,7λ horas. A análise espectrométrica FT-IR confirmou bandas sugestivas dos ácidos graxos insaturados e por análises térmicas observou-se que a degradação térmica ocorre acima de 200°C. As combinações das matérias-primas analisadas por DSC foi possível observar que a incorporação do cetoconazol com o óleo de açaí. A nanoemulsão B10 com cetoconazol a 0,5 % apresentou 98,31 % de EE. A microscopia eletrônica de transmissão mostrou gotículas com formato esférico e após estudo de PZ (-25,53 mV ± 10,04), IP (0,37 ± 0,04) e tamanho (128,53 nm ± 10,04) por 30 dias, a nanoemulsão apresentou pouca variação. Assim, pode-se afirmar que o óleo de açaí tem potencial para ser empregado como insumo farmacêutico podendo ser usado como fase oleosa de nanoemulsões carreadoras de substancias lipossolúveis. / Nanoemulsions have been proposed as an option for drug delivery current systems and increasing interest due to several advantages when compared with traditional formulations. Vegetable oils are considered pharmaceutical ingredients of great value as lipid matrix of these systems, such as oil açaí, of Amazonian origin oil, which has a number of medicinal benefits such as antioxidant and moisturizing activity, and biocompatibility, increases skin elasticity and acts as a physical barrier. The objective of this study was to obtain nanoemulsion O / W, from açaí oil, surfactant and water, through the phase inversion temperature method for topical use. Açaí oil was characterized by physical-chemical tests and on the profile of fatty acids by gas chromatography (GC), spectrometry in the infrared (FT-IR) and thermal analysis by thermogravimetry (TG) and differential scanning calorimetry (DSC). The surfactant, ketoconazole and their binary mixtures with oil açaí were evaluated by DSC. Obtained nanoemulsions making use of açaí oil, BrijTM CS20, water and ketoconazole. The characterization of nanoemulsions was performed on the droplet size, polydispersity index (PI), the zeta potential (PZ), morphology and encapsulation efficiency (EE). The açaí oil showed acid value (3.78 mg KOH / g), iodine value (71 gl2 / 100g), saponification number (199 mg KOH / g), refractive index (1.470) and density (0,950g / ml). In GC analysis showed 68.05% of unsaturated fatty acids, being 47.58% oleic acid. Oxidative stability of açaí oil Rancimat was about 11.79 hours. The FT-IR spectrometric analysis confirmed bands suggestive of unsaturated fatty acids and thermal analysis it was observed that the thermal degradation occurs above 200 ° C. The combinations of raw materials analyzed by DSC was observed that the incorporation of ketoconazole with açaí oil. The nanoemulsion B10 with 0.5% ketoconazole showed 98.31% EE. The transmission electron microscopy showed droplets with spherical shape and after study of PZ (-25.53 ± 10.04 mV), PI (0.37 ± 0.04) and size (128.53 nm ± 10.04) by 30 days, nanoemulsion showed little variation. Thus, it can be said that açaí oil has the potential to be used as a pharmaceutical ingredient can be used as oil phase nanoemulsions loaders of fat-soluble substances.
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Estudos farmacognósticos, fitoquímicos e atividade antileishmania de espécies Geissospermum (Apocynaceae)SILVA, João Victor da Silva e 07 November 2016 (has links)
Submitted by Cássio da Cruz Nogueira (cassionogueirakk@gmail.com) on 2017-06-26T15:16:33Z
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Previous issue date: 2016-11-07 / CAPES - Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / CNPq - Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico / O objetivo deste trabalho foi realizar estudos farmacognósticos, fitoquímicos, atividade antileishmania e citotoxicidade de Geissospermum vellosii Allemão e Geissospermum sericeum Miers. Os estudos farmacognósticos foram realizados de acordo com a Farmacopeia Brasileira, V ed. (2010). Os extratos (EEGV e EEGS) foram obtidos através da maceração exaustiva com etanol (96° GL), seguido de concentração em rotaevaporador. O extrato etanólico foi fracionado por dois métodos: extração sob refluxo (frações de diferentes polaridades) e partição ácidobase (fração de neutro e fração acaloídica). As frações alcaloídicas (FAGV e FAGS) foram fracionadas em coluna cromatográfica contendo gel de Sephadex LH-20, e as subfrações resultantes foram analisadas em CCD e reveladas com reagente de Dragendorff e ultravioleta (365 nm). As subfrações F6FAGV e F6FAGS, onde se detectou alcaloides e bom rendimento, foram submetidas a novos fracionamentos em CLAE-DAD semipreparativa e a métodos espectrofotométricos. Na avaliação antileishmania utilizou-se formas promastigotas da espécie de Leishmania amazonensis (5 x 106 parasitas/100μL) tratada com diferentes concentrações das amostras por 24, 48 e 72h. A analise foi feita adicionando-se brometo de [3-(4,5- dimetiltiazol-2-il)-2,5-difeniltetrazólio] (MTT) em leitor de ELISA, em 490nm. A citotoxicidade foi avaliada através do ensaio de viabilidade celular com o MTT em células THP-1 diferenciadas e HepG2. Como critério de seleção foi utilizado o cálculo do índice de seletividade (IS), descrito como a razão entre a concentração citotóxica 50% em linhagens celulares e a Concentração inibitória 50% encontrado para protozoários, considerando-se pormissores valores ≥ 10. Os pós das plantas foram classificados como grosso (G. vellosii) e muito grosso (G. sericeum), de baixa densidade, com pH de 4,94 (G. vellosii) e 6,47 (G. sericeum), negativos para saponinas, com teor de cinzas e umidade dentro dos parâmetros estabelecidos pela Farmacopeia Brasileira, V ed. O estudo fitoquímico levou ao isolamento de um alcaloide indólico (F3F6FAGV) e um β-carbolínico (flavopereirina) de ambas as espécies. O fracionamento de EEGV e EEGS resultou em subfrações mais citotóxicas, porém o tempo de exposição e o refracionamento reduziram esta toxicidade. Na avaliação antripromastigota todas as amostras foram ativas e o fracionamento aumentou a atividade. A flavopereirina apresentou atividade tempo dependente e superior a anfotericina B. Entretanto, a associação da flavopereirina com alcaloide indólico e/ou a anfotericina B reduziu a seletividade desse metabólito. O fracionamento dos extratos contribui para elevação do índice de seletividade, sendo a seletividade da flavopereirina elevada (IS= 4893,3). Logo, o isolamento da flavopereirina contribui para redução da citotoxicidade e aumento da seletividade, caracterizando-se como um agente antileishmania promissor. / This study aimed to perform pharmacognostic and phytochemical studies, and assess antileishmanial activity and cytotoxicity of Geissospermum vellosii Allemão and Geissospermum sericeum Miers. The pharmacognostic study was carried out as described in the Brazilian Pharmacopoeia, 2010. The ethanol extracts (GVEE and GSEE) were obtained by exhaustive maceration with ethanol (96 ° GL), followed by concentration in rotaevaporator. The ethanol extract was fractionated using two methods: extraction under reflux (fractions of different polarities) and acid-base partition (neutral and alkaloid fractions). The alkaloid fractions (GVAF and GSAF) were fractionated on a chromatographic column with Sephadex LH-20 gel, and the resulting subfractions were analyzed on TLC, and reveled through Dragendorff reagent and ultraviolet (365 nm). The F6GVAF and F6GSAF subfractions, with alkaloids detected and good yield, were subjected to semi-preparative HPLC-DAD, and spectrophotometric methods. For evaluating the antileishmanial activity, promastigote forms of Leishmania amazonensis at a concentration of 5 x 106 parasites/100μL were treated with the samples at different concentrations for 24, 48 and 72h. The analysis was done adding [3- (4,5-dimethylthiazol-2-yl) -2,5- diphenyltetrazolium bromide (MTT) to the samples in an ELISA reader at 490 nm. Cytotoxicity was assessed through cell viability assay with MTT in differentiated THP- 1 cells and HepG2. As a selection criteria, the selectivity index (IS) was calculated as the ratio between the cytotoxic concentration 50% in cell lines, and the inhibitory concentration 50% found for protozoa, considering as promising values ≥ 10. The plant powder was classified as thick (G. vellosii), and very thick (G. sericeum), low density, with pH 4.94 (G. vellosii) and 6.47 (G. sericeum), negative to saponins, with ash and moisture within the parameters established by the Brazilian Pharmacopoeia V. In the phytochemical study, we suggest the isolation of an indole alkaloid (F3F6FAGV) and a β-carbolinic (flavopereirine) from both species. The fractionation of GVEE and GSEE resulted in more cytotoxic subfractions, but the exposure time and refractionation reduced this effect. In the antipromatigota assay, all samples were active, and the fractionation increased the activity. The flavopereirine presented time-dependent activity greater than amphotericin B. However, the flavopereirine in association with indole alkaloid and/or amphotericin B reduced the selectivity of this metabolite. The extracts fractionation increases the selectivity index, and the selectivity of flavopereirin is high (SI = 4893.3). Therefore, the isolation of flavopereirine contributes to reduce cytotoxicity and increase selectivity, showing itself as a promising antileishmanial agent.
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Efeitos citoprotetor e citotóxico de Annona glabra (Annonaceae)SARMENTO, Rosana Moura 03 October 2016 (has links)
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Previous issue date: 2016-10-03 / CAPES - Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / O presente estudo avaliou a o potencial citotóxico e citoprotetor de extrato etanólico obtido de cascas de Annona glabra, suas frações e substâncias isoladas. O pó obtido das cascas de A. glabra foi submetido a maceração com etanol por 7 dias, sendo a solução concentrada em rotaevaporador até resíduo. Com o extrato etanólico de A.glabra foi realizado a partição entre hexano:metanol aquoso (9:1). A Fração metanólica foi fracionada em coluna cromatográfica utilizando como fase estacionária Sephadex e fase móvel o metanol. A citotoxicidade do extrato etanólico e frações foi avaliada através do ensaio de viabilidade celular com o MTT (brometo de [3-(4,5-dimetiltiazol-2-il)-2,5-difeniltetrazólio]). A concentração citotóxica 50% (CI50) foi determinada por regressão linear. O extrato, frações e subfrações foram submetidas a análise em cromatografia em camada delgada (CCD), e reunidas de acordo com características semelhantes. Frações do extrato com CI50 ≤ 30 μg/mL e substância isolada com CI50 ≤ 4 μg/mL são considerados citotóxicos. As frações que apresentaram citotoxicidade moderada a baixa foram submetidas aos ensaios de indução de apoptose e fragmentação de DNA por citometria de fluxo. Também, estas amostras foram submetidas a avaliação de estresse oxidativo pelo método TEAC e DPPH. O extrato de A. glabra (rendimento de 8,39%) foi particionado obtendo-se a fração metanólica (rendimento de 88,14%) e fração hexânica (rendimento de 8,08%). O extrato etanólico, sua fração metanólica e rutina apresentaram baixa citotoxicidade (CI50=137,7; 139,4; > 200 μg/mL, respectivamente). Fração hexânica e subfrações 17 e 19 apresentaram citotoxicidade moderada não significativa (CI50= 45,07; 53,45; 80,65 μg/mL, respectivamente). Todas as amostras avaliadas não induziram células a apoptose, entretanto, extrato etanólico, fração hexânica e rutina promoveram alterações na morfologia das células. Entretanto, fração hexânica, subfrações 6 e 7 apresentaram capacidade de fragmentar DNA das células. O fracionamento do extrato etanólico favoreceu o potencial citotóxico, tendo a fração hexânica como a mais promissora, e a capacidade antioxidantes também foi favorecida tendo o grupo 5 como o mais promissor. Estes resultados sugerem que as amostras de A. glabra apresentam baixo potencial citotóxico, e o mecanismo envolvido não está relacionado a indução de apoptose, e o extrato etanólico contém substâncias com capacidade antioxidante. / The present study evaluated the cytotoxic and cytoprotective potential of ethanolic extract obtained from the shells of Annona glabra, its fractions and isolated substances. The powder obtained from A.glabra husks was subjected to maceration with ethanol for 7 days, and the solution was concentrated in a rotavaporator to residue. The ethanolic extract from A.glabra was partitioned between aqueous hexane: methanol (9: 1). The methanolic fraction was fractionated in chromatographic column using as Sephadex stationary phase and mobile phase the methanol. The cytotoxicity of the ethanolic extract and fractions was evaluated by the MTT cell viability assay ([3- (4,5-dimethylthiazol-2-yl) -2,5-diphenyltetrazolium bromide]). The extract, fractions and subfractions were submitted to thin layer chromatography (CCD) analysis, and pooled according to similar characteristics. The 50% cytotoxic concentration (IC 50) was determined by linear regression. Fractions of the extract with IC50 ≤ 30 μg / mL and isolated substance with IC50 ≤ 4 μg / mL are considered cytotoxic. Fractions with moderate to low cytotoxicity were submitted to the induction of apoptosis and DNA fragmentation by flow cytometry. Also, these samples were submitted to evaluation of oxidative stress by the TEAC and DPPH method. The extract of A. glabra (8.39% yield) was partitioned to give the methanolic fraction (yield 88.14%) and hexane fraction (yield 8.08%). Ethanolic extract, methanolic fraction and rutin showed low cytotoxicity (IC50 = 137.7, 139.4,> 200 μg / mL, respectively). Hexanic fraction and subfractions 17 and 19 showed moderate non-significant cytotoxicity (IC50 = 45.07, 53.45, 80.65 μg / mL, respectively). All the evaluated samples did not induce apoptosis cells, however, ethanolic extract, hexane fraction and rutin promoted changes in the cell morphology. However, hexanic fraction, subfractions 6 and 7 showed the ability to fragment DNA from cells. The fractionation of the ethanolic extract favored the cytotoxic potential, with the hexane fraction being the most promising, and the antioxidant capacity was also favored, with group 5 being the most promising. These results suggest that A. glabra samples have low cytotoxic potential, and the mechanism involved is not related to the induction of apoptosis, and the ethanolic extract contains substances with antioxidant capacity.
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Obtenção e caracterização de formulação fitoterápica contendo extrato e tintura padronizados de arnica montana l e aesculus hippocastanum lARNILLAS, Elyan Andrade Pueyo 18 December 2015 (has links)
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Previous issue date: 2015-12-18 / Devido a grande difusão e utilização de plantas medicinais, as indústrias vêm
fabricando produtos a base de espécies vegetais, como extratos e tinturas, que são
utilizados principalmente por farmácia com manipulação. No entanto, são
questionáveis a garantia para a grande maioria destes produtos, quanto à sua
eficácia, segurança e qualidade, podendo trazer riscos à saúde do usuário. Assim,
torna-se importante a realização do controle de qualidade para produtos
fitoterápicos, de acordo com a legislação vigente. A formulação que deu origem à
pesquisa é um gel de carbopol contendo tintura de Arnica montana L e extrato de
Aesculus hippocastanum L. O presente estudo objetivou a obtenção e
caracterização da formulação citada e validar o emprego de metodologias da
tecnologia farmacêutica por meio da realização da padronização do extrato de
Aesculus hippocastanum L e da tintura de Arnica montana L, Para a avaliação
físioquímica foram realizados: O controle microbiológico, a caracterização
organolépticas, determinação de pH, densidade, resíduo seco, perda por
dessecação, determinação do teor de sólidos, comportamento reológico,
concentração, liofilização e prospecção química dos insumos vegetais . Para a
análise fitoquímica foi realizada Cromatografia em Camada Delgada da tintura de
Arnica (CCD) e Cromatografia Em Camada Delgada Comparativa (CCDC) do extrato
de Aesculus, Infravermelho e Análise Térmica tanto dos extratos como da
formulação. Para as caracterizações físico-química e validação dos Laudos de Análise dos
fornecedores das duas espécies vegetais os resultados encontram-se dentro dos
parâmetros estabelecidos pela Farmacopéia Brasileira Vª Ed. O controle
micróbiológico foi para comprovar a ausência de microorganismos patogênicos, os
resultados indicaram ausência de mico-organismos, pois a contaminação microbiana
dos insumos pode alterar a estabilidade do produto final e ainda caracterizar risco de
infecção ao usuário. A prospecção química das espécies vegetais, foi para identificar
metabólitos secundários relevantes, no caso do A. hippocastanum indicou a
presença de saponinas, representada pela escina que é a responsável pela
atividade farmacológica, foi um indício importante para a certificação da autenticidade da matéria prima em estudo. A viscosidade dos insumos vegetais e da
formulação foram determinadas através do Reômetro de Brookfield, os extratos
apresentaram comportamento de fluído Newtoniano e a formulação apresentou um
comportamento pseudo plástico. O resultado da Cromatografia em Camada Delgada
(CCD), auxiliou na identificação da amostra e possíveis adulterações que poderiam
ter ocorrido, assim como a CCDC serviu para demonstrar a seletividade do método,
pois identificou a presença da escina, substância responsável pela ação
farmacológica da Castanha da índia. Na validação da tintura de Arnica montana L.,
por CLAE foi detectado a presença da rutina na amostra in natura com o tempo de
retenção 10,84 min. As análises de infravermelho realizadas nas espécies vegetais,
foram obserdas bandas que podem indicar a presença dos principais marcadores
químicos, no caso da arnica indicou à presença da rutina, e a presença da escina no
extrato de castanha da índia. Na análise térmica TG/DTA, podemos dizer que o
primeiro evento de decomposição para as amostras ocorreu até 150º C, que
corresponde a perda de massa, os valores obtidos foram 6,5 e 8 % para à castanha
da índia e arnica respectivamente. Todos os resultados foram de relevância para a
caracterização e controle de qualidade, servindo de parâmetro para à padronização
do extrato e da tintura, as informações obtidas serviu também para a certificação de
um dos fornecedores de extratos e tinturas para as farmácias de manipulação em
Belém. / Because of the wide dissemination and use of medicinal plants, industries are
producing products based on plant species, such as extracts and tinctures, which are
mainly used by pharmacy with handling. However, it is questionable collateral for the
vast majority of these products as to their efficacy, safety and quality, and may bring
risks to the user's health. So, it is important to perform quality control for herbal
products, according to current legislation. The formulation that gave rise to the
research is a carbopol gel containing Arnica montana L dye and Aesculus
hippocastanum L extract. The present study aimed at obtaining and characterization
of said formulation and validate the use of methods of pharmaceutical technology by
performing the standardization of Aesculus hippocastanum L extract and Arnica
montana L dye, to the physio-chemical evaluation were performed: microbiological
control, organo-leptical characterization, determination of pH, density, dry, loss on
drying, determine the level solids, rheological behavior, concentration, lyophilization
and chemical prospecting of plant inputs. For the phytochemical analysis was
performed Thin Layer Chromatography of Arnica tincture (TLC) and Thin Layer
Chromatography In Comparative (TLCC) Aesculus extract, Infrared and Thermal
Analysis of both extracts as the formulation. For physicochemical characterization and validation of analysis Reports of the two plant species suppliers the results are within the parameters established by the Brazilian Pharmacopoeia Fifth Ed. The microbiologic control was to prove the absence of pathogenic microorganisms, the results indicated microorganisms absence of, for microbial contamination of the inputs can change the stability of the final product and further characterize risk of infection to the user. The chemical prospecting of plant species, was to identify relevant secondary metabolites, in the case of A. hippocastanum indicated the presence of saponins, represented by escin which is responsible for the pharmacological activity, was an important clue to the certification of the authenticity of the raw material in study. The viscosity of vegetable raw materials and formulation were determined by the rheometer of Brookfield, the extracts showed fluid behavior and Newtonian formulation showed a pseudo plastic
behavior. The result of the Thin Layer Chromatography (TLC), assisted in the identification of the sample and possible tampering that could have occurred as well as the TLCC served to demonstrate the selectivity of the method as identified the presence of aescin, substance responsible for pharmacological activity Chestnut from India. In the validation of Arnica montana L. dye, it was detected by HPLC the
presence of the rutin in the sample in nature with retention time 10.84 min. The infrared analyzes the plant species were observerd bands that may indicate the presence of the major chemical markers in the case Arnica indicated the presence of the rutin and escin in the presence of horse chestnut extract. In the thermal analysis TG / DTA, we can say that the first decomposition event occurred for the samples to
150 ° C, corresponding to weight loss, the values were 6.5 and 8% for the chestnut and arnica respectively. All results were significant for the characterization and quality control, used as benchmark for the standardization of the extract and tincture, the information obtained was also used for the certification of suppliers of extracts and tinctures for drugstores in Belém.
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Avaliação da adesão ao tratamento com alfadornase em pacientes com fibrose císticaFEITOSA, Keith Brabo Tavares January 2017 (has links)
Submitted by Rosana Moreira (rosanapsm@outlook.com) on 2018-11-19T13:16:33Z
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Previous issue date: 2017 / A Fibrose Cística (FC) é uma doença hereditária, que se manifesta clinicamente por
sintomas digestivos e respiratórios. O diagnóstico precoce oferece a possibilidade de
um melhor controle terapêutico do paciente favorecendo o prognóstico e
contribuindo para uma melhor qualidade de vida. O objetivo do estudo foi
demonstrar o comportamento dos pacientes frente à doença e avaliar a adesão ao
tratamento com a enzima alfadornase. Foi feito um estudo prospectivo, transversal e
observacional por meio de dados epidemiológicos coletados através de entrevistas
com pacientes e/ou responsáveis e por análise de prontuários. Para a avaliação da
adesão ao tratamento e conhecimento da doença foram aplicados os testes Morisky-
Green e Batalla Martinez. Para avaliar o perfil clínico foi utilizado o escore de
Shwachman-Kulczyki. Foram recrutados 51 pacientes com fibrose cística atendidos
no ambulatório do Hospital Universitário João de Barros Barreto em uso de
alfadornase. Participaram do estudo 47 pacientes no período de julho de 2015 a
junho de 2016. A maioria dos pacientes (53,2%) tinha idade inferior a 18 anos,
56,6% eram do sexo masculino e 40,4% provenientes do interior. Pacientes em
tratamento com alfadornase por mais de 5 anos, apresentaram maior adesão do que
os demais com menor período de tratamento e o sexo masculino esteve associado a
maior adesão, assim como a maior escolaridade e renda familiar. Após a aplicação
do teste de Batalla Martinez, apenas 40,42% demonstraram conhecimento sobre a
doença. Deste modo foram observados como fatores associados à baixa adesão:
uso de mais de cinco medicamentos, baixa escolaridade e sexo. Por outro lado, os
resultados mostram que a adesão à medicação esteve associada ao melhor escore
clínico. / Cystic Fibrosis is an inherited disease, clinically manifested by digestive and
respiratory symptoms. The early diagnosis offers the possibility of a better
therapeutic control of the disease’s symptoms in favor of the prognosis and
contributing to increasing quality of life. The aim of this study was to demonstrate the
patient's behavior towards the disease and to evaluate the adherence to the
treatment with the alfadornase enzyme. A cross-sectional study was carried out
using epidemiological data collected through direct interviews with patients and/or
their caregivers and by medical records analysis. Morisky-Green and Batalla
Martinez tests were employed in order to evaluate the patient’s adhesion and
knowledge of the disease, respectively. In addition, the clinical profile was assayed
by Shwachman-Kulczyki score. Fifty-one (51) patients with cystic fibrosis in treatment
with alfadornase were recruited at the outpatient clinic of the Hospital Universitário
João de Barros Barreto. At final, forty-seven (47) patients participated in the study.
Most of the patients (53.2%) were under 18 years of age, male (56.6%) and were
from countryside (40.4%). Patients with long term use of alfadornase (> 5 years)
show possess greater adherence than the others with a shorter treatment period.
The male sex was associated with higher adherence, as well as greater education
level and family income. The Batalla Martinez test demonstrates that only 40.42% of
patients had some knowledgement about their disease. Thus, the factors associated
with low adherence were: use of more than five medications, low education and
gender. On the other way, these results shows that adherence to the medication was
associated with the best clinical score.
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Investigação fitoquímica e atividade biológica das cascas de Luehea speciosa willdNASCIMENTO, Maisa Carmen Batista do 21 December 2017 (has links)
Submitted by Rosana Moreira (rosanapsm@outlook.com) on 2018-11-19T13:45:17Z
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Previous issue date: 2017-12-21 / CNPq - Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico / As cascas de Luehea speciosa, família Malvaceae, são utilizadas na medicina tradicional para o tratamento de disenteria, reumatismo, tumores, bronquites, feridas de pele, emagrecimento entre outros. Porém, existem poucas informações sobre a espécie na literatura. Dessa forma, faz-se de grande interesse investigar a sua constituição química e suas possíveis atividades biológicas, visto que a comprovação cientifica promove uma alternativa de tratamento de forma segura aos usuários. Neste sentido, o presente estudo buscou a constituição química do extrato bruto seco (EBS) e das frações hexânica (FHX), diclorometano (FDM), acetato de etila (FAE) e metanólica (FME), da espécie, através de analises por cromatografia liquida de alta eficiência acoplada a espectrometria de massas - LC/MS, bem como suas atividades antioxidante, por bioautografia, e citotóxica, in vitro, frente as linhagens de células tumorais, HELA e HEP-2 e VERO. As amostras apresentaram atividade antioxidante, sendo as frações FDM e FAE com perfil mais relevante. O EBS e as frações demonstraram citotoxidade sobre todas as linhas em estudo, porém a fração FDM apresentou maior atividade citotóxica contra células tumorais. Nas análises por LC/MS, foram detectados compostos fenólicos, com características sugestivas da presença do ácido chicórico, através do m/z = 148, além do espectro de UV semelhante. Esses resultados demonstram que a espécie em estudo possui atividade antioxidante e sugerem que a amostra exerce citotoxidade contra células tumorais, apresentando-se promissora para futuros estudos. / The barks of Luehea speciosa, family Malvaceae, are used in traditional medicine to treat dysentery, rheumatism, tumors, bronchitis, skin wounds, weight loss and others diseases. However, studies give little information about the species in the literature. Thus, it is of great interest to investigate its chemical constitution and biological activities, since the scientific proof of its activity can promote, in the future, a therapeutic alternative. The present study analyzed the chemical constitution of the dry crude extract (EBS) and hexane (FHX), dichloromethane (FDM), ethyl acetate (AED) and methanolic (FME) fractions of the species by high-performance liquid chromatography (HPLC) with tandem mass spectrometric - LC/MS, as well as its antioxidant activities by bioautography and cytotoxic assays, in vitro, against HELA, HEP-2 and VERO tumor cell lines. The samples showed antioxidant activity, being the fractions FDM and AED results more relevant. The EBS and fractions demonstrated cytotoxicity on all cell lines, however the FDM fraction had greater cytotoxic activity against tumor cells. In the LC/MS analyzes, were detected phenolic compounds and suggestive characteristics of chicoric acid presence through m/z = 148, as in the UV spectrum. These results demonstrate that this species has antioxidant activity and suggest its cytotoxicity against tumor cells, being a promising species for future studies.
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Fitoquímica e atividade antiplasmódica de Siparuna poeppigii (Tul.) A. DC. (Siparunaceae)PINA, Nayla Di Paula Vieira 10 November 2016 (has links)
Submitted by Rosana Moreira (rosanapsm@outlook.com) on 2018-11-20T17:50:08Z
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Previous issue date: 2016-11-10 / CAPES - Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / Na América Latina, o uso de plantas do gênero Siparuna é indicado no tratamento de febres e malária, a atividade antiplasmódica de algumas espécies já foi comprovada, o que motivou o estudo S. poeppigii, nativa da Amazônia. Este trabalho visa analisar a fitoquímica, a atividade antiplasmódica e a citotoxicidade de extratos e frações de S. poeppigii. De folhas e cascas do caule de um exemplar coletado em Belém, Pará, foram preparados extratos em etanol (EESPC e EESPF) e a separação de alcaloides foi realizada por extrações ácido-base (SPC-B e SPF-B; SPC-C e SPF-C). Os extratos etanólicos foram submetidos a re-extrações por refluxo com solventes de polaridades crescentes resultando nas frações hexano-diclorometano (HEX-DCM), diclorometano (DCM), acetato de etila (AcOEt) e metanol (MeOH). Análises fitoquímicas por UPLC-DAD e cromatografia em camada delgada (CCD) foram efetuadas com os extratos e frações. As frações Hex-DCM, AcOEt e MeOH foram submetidas a fracionamentos cromatográficos em colunas de sílica gel (CCS). A atividade antiplasmódica dos extratos e frações foi avaliada frente à cepa W2 de P. falciparum cloroquina-resistente pelo método de quantificação da lactato desidrogenase (ρLDH), nas concentrações de 50 μg/mL e 25 μg/mL. Para as frações mais ativas determinou-se a concentração Inibitória de 50% (CI50) e a concentração citotóxica de 50% (CC50) em células HepG2 pelo método do MTT, nas concentrações de 50; 25; 12,5; 6,25; 3,12 e 1,6 μg/mL para CI50 e 1, 10, 100 e 1000μg/mL para CC50. Os dados permitiram calcular o índice de seletividade (IS) de cada fração. A prospecção por CCD foi positiva para geninas e heterosídeos flavônicos, saponinas, alcaloides, triterpenos e esteroides. A CCS de SPC-B permitiu a obtenção das frações 5-8, 43-44, 61, 67-68, 95-97 e 84-88, consideradas ativas com CI50 de 5,95; 12,44; 14,32; 22,58; 22,67 μg/mL, respectivamente. Todas as frações ativas foram não citotóxicas, sendo os melhores IS das frações 5-8 (43,32) e 95-97 (>44,11). Estas frações ativas e a Fr 16 AcOEt (obtida da CCS da Fr AcOEt), foram caracterizadas por UPLC-ESI-MS sendo identificados os alcaloides reticulina e anonaina na Fr 16 AcOEt. As frações 84-88 e 111 foram re-cromatografadas em colunas de alumina e sephadex LH20, respectivamente obtendo-se substâncias SP-1 e SP-2. A análise por UPLC-DAD das amostras EESPC, EESPF, SPC-B e SPF-B revelou predomínio de um pico no tempo de retenção (TR) 6,5 min, com max 267 e 346 nm, sugestivo de cromóforos de flavonoides. A substância SP-1 exibiu pico (74% de área) no TR 3,6 min e UV com max 255 e 276 nm, compatível com UV online da liriodenina autêntica. SP-2 exibiu pico majoritário (90%) no TR 2,6 min e max 282 nm. As frações de alcaloides SPF-B e SPC-C foram ativas, com CI50 12,41 e 6,99μg/mL. Este trabalho relata dados inéditos de fitoquímica e atividade antiplasmódica da espécie S. poeppigii bem como a identificação da liriodenina, responsável, em parte, pela atividade antiplasmódica da espécie.
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