Submitted by Eduardo Barros de Almeida Silva (eduardo.philippe@ufpe.br) on 2015-04-17T14:49:44Z No. of bitstreams: 2 Dissertação Sandrine Lima.pdf: 902329 bytes, checksum: 83147db27edaf8354efe02565a0beca3 (MD5) license_rdf: 1232 bytes, checksum: 66e71c371cc565284e70f40736c94386 (MD5) / Made available in DSpace on 2015-04-17T14:49:44Z (GMT). No. of bitstreams: 2 Dissertação Sandrine Lima.pdf: 902329 bytes, checksum: 83147db27edaf8354efe02565a0beca3 (MD5) license_rdf: 1232 bytes, checksum: 66e71c371cc565284e70f40736c94386 (MD5) Previous issue date: 2013-02-27 / CAPES / Os micro-organismos, em particular as actinobactérias, são conhecidos por produzir um vasto número de metabólitos secundários bioativos de interesse farmacêutico. O objetivo deste estudo foi investigar as atividades antimicrobiana e citotóxica de metabólitos secundários produzidos pela actinobactéria ACTSM-9H isolada da rizosfera de Paullinia cupana Kunth de Maués - Amazonas. Para identificação taxonômica da linhagem foram utilizadas as técnicas de caracterização fenotípica e molecular. A produção dos metabólitos secundários foi avaliada através da fermentação em cultivo submerso utilizando farinha de soja como substrato e em meio sólido utilizando arroz. A atividade antimicrobiana foi determinada através da técnica de microdiluição em caldo, a citotoxicidade através do método do MTT e a atividade hemolítica realizada frente a membrana plasmática de eritrócitos murinos. A actinobactéria foi identificada como Streptomyces hygroscopicus S75-5. No estudo bioguiado para a avaliação das atividades antimicrobiana e citotóxica o extrato metanólico da biomassa proveniente da fermentação em cultivo submerso apresentou melhor atividade, sendo escolhido para ser particionado com n-hexano, acetato de etila e 2-butanol. A prospecção química indicou a presença de alcalóides, açúcares redutores e saponinas nos extratos metanólico e fase butanólica. A fase butanólica apresentou atividades antimicrobiana e citotóxica, sendo fracionada. Quatro frações obtidas da fase butanólica foram analisadas por bioautografia e apresentaram pelo menos um composto com atividade frente a Staphylococcus aureus. A fração EB1 apontou a presença de um alcalóide (Rf 0,7) com atividade antimicrobiana na bioautografia. A atividade antimicrobiana da fração EB1 mostrou valores da CMI iguais ou abaixo de 3,9 μg/mL frente aos micro-organismos testados. Na atividade citotóxica, a fração EB1 apresentou valores da IC50 frente às linhagens tumorais humanas HEp-2, HT-29, NCI-H292 e HL- 60, sempre menores ou iguais a doxorrubicina, utilizada como padrão, sendo mais seletividade para HL-60 com IC50 de 0,009 μg/mL. Em conclusão, os metabólitos produzidos por Streptomyces hygroscopicus S75-5 apresentaram potentes atividades antimicrobiana e antitumoral, evidenciando a importância de estudos futuros visando o isolamento dos compostos responsáveis por esta atividade.

Submitted by Divisão de Documentação/BC Biblioteca Central (ddbc@ufam.edu.br) on 2017-08-23T15:20:20Z No. of bitstreams: 2 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Dissertação - Fabiano B. Prado.pdf: 1126403 bytes, checksum: c0f9bb60edf0feead22f8e7b9e867947 (MD5) / Approved for entry into archive by Divisão de Documentação/BC Biblioteca Central (ddbc@ufam.edu.br) on 2017-08-23T15:20:34Z (GMT) No. of bitstreams: 2 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Dissertação - Fabiano B. Prado.pdf: 1126403 bytes, checksum: c0f9bb60edf0feead22f8e7b9e867947 (MD5) / Approved for entry into archive by Divisão de Documentação/BC Biblioteca Central (ddbc@ufam.edu.br) on 2017-08-23T15:20:50Z (GMT) No. of bitstreams: 2 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Dissertação - Fabiano B. Prado.pdf: 1126403 bytes, checksum: c0f9bb60edf0feead22f8e7b9e867947 (MD5) / Made available in DSpace on 2017-08-23T15:20:50Z (GMT). No. of bitstreams: 2 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Dissertação - Fabiano B. Prado.pdf: 1126403 bytes, checksum: c0f9bb60edf0feead22f8e7b9e867947 (MD5) Previous issue date: 2017-03-30 / CAPES - Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / Fungi remain one of the most important sources of bioactive compounds, among which, the genus Aspergillus predominates as an alternative for the production of secondary metabolites of industrial interest, especially as source of antimicrobials, enzymes and antioxidants. This work aimed to verify the influence of the preservation method on the activity of secondary metabolites and to select a species of Aspergillus as a source of compounds with antimicrobial activity. The antimicrobial activity against Gram-positive (Staphylococcus aureus), Gram-negative (Escherichia coli) and Candida albicans yeast was determined by agar diffusion and bioautography techniques. The viability of the fungi was performed based on the morphological characteristics and reproduction structures of the Aspergillus species. The production of the bioactive compounds was carried out in yeast extract agarose extract (YES). The organic extracts, ethanolic, ethyl acetate and hexane obtained from the cultures were tested by agar diffusion method against Staphylococcus aureus (Gram-positive bacteria), Escherichia coli (Gram-negative) and Candida albicans (unicellular fungus). The results showed that filamentous fungi continue to be one of the most important sources of bioactive compounds, among which, the genus Aspergillus predominates as an alternative for the production of metabolites of industrial interest, such as Lovastatin and other antimicrobials. The extracts that demonstrated antibiosis by agar diffusion were analyzed by agar immunoassay and subsequent determination of the minimum inhibitory concentration (MIC) using the multiwell plate dilution method. The viability of Aspergillus species predominated in cultures preserved in distilled water, the phenomenon of pleomorphism was observed in 2.5% and 7.5% of the Aspergillus species preserved in water and mineral oil, respectively. Contamination by other filamentous fungi was observed in 2.5% in both water and mineral oil preserves. The profile of the antimicrobial activity by diffusion in agar showed the activity of one to three extracts of Aspergillus cultures predominantly against S. aureus. Growth of E. coli and C. albicans was inhibited only by ethyl acetate extract of A. japonicus DPUA 613 and ethanolic extract of A. flavo furcatis DPUA 1451, respectively. In bioautography, antimicrobial activity was detected in different compounds against S. aureus, ranging from one to three zones of inhibition, in the Rf range of 0.70 to 0.81. In this test, A. flavo furcatis DPUA 1451 was the only growth inhibitory species of C. albicans, composed of Rf 0.75 constituent of the hexane extract. The data presented here showed that Aspergillus species, although preserved for different periods under in vitro conditions, synthesize compounds with antibacterial and antifungal activity capable of inhibiting the growth of S. aureus, E. coli and C. albicans. / Fungos continuam sendo uma das fontes mais importantes de compostos bioativos, entre os quais, o gênero Aspergillus predomina como uma alternativa para produção de metabólitos secundários de interesse industrial, especialmente como fonte de antimicrobianos, enzimas e antioxidantes. Este trabalho teve como objetivo verificar a influência do método de preservação na atividade de metabólitos secundários e selecionar uma espécie de Aspergillus como fonte de compostos com atividade antimicrobiana. A atividade antimicrobiana contra bactéria Gram-positiva (Staphylococcus aureus), Gram-negativa (Escherichia coli) e a levedura Candida albicans foi determinada pelas técnicas da difusão em ágar e bioautografia. A viabilidade dos fungos foi realizada com base nas características morfológicas e estruturas de reprodução das espécies de Aspergillus. A produção dos compostos bioativos foi realizada em ágar extrato de levedura sacarose (YES). Os extratos orgânicos, etanólico, acetato de etila e hexânico obtidos das culturas foram testados pelo método de difusão em ágar por poço frente a Staphylococcus aureus (bactéria Gram-positiva), Escherichia coli (Gram-negativa) e Candida albicans (fungo unicelular). Os resultados mostraram que fungos filamentosos continuam sendo uma das fontes mais importantes de compostos bioativos, entre os quais, o gênero Aspergillus predomina como uma alternativa para produção de metabólitos de interesse industrial, a exemplo da Lovastatina e outros antimicrobianos. Os extratos que demonstraram antibiose por difusão em ágar foram analisados pelo método de bioautografia por imersão em ágar e posterior determinação da concentração mínima inibitória (CMI) utilizando o método de diluição em placa multipoços. A viabilidade das espécies de Aspergillus predominou nas culturas preservadas em água destilada, o fenômeno do pleomorfismo foi observado em 2,5% e 7,5% das espécies de Aspergillus preservadas em água e óleo mineral, respectivamente. A contaminação por outros fungos filamentosos foi constatada em 2,5% tanto nos preservados em água quanto em óleo mineral. O perfil da atividade antimicrobiana por difusão em ágar mostrou a atividade de um a três dos extratos das culturas dos Aspergillus de forma predominante frente a S. aureus. O crescimento de E. coli e C. albicans foi inibido somente por extrato acetato de etila de A. japonicus DPUA 613 e extrato etanólico de A. flavo furcatis DPUA 1451, respectivamente. Na bioautografia, a atividade antimicrobiana foi detectada em diferentes compostos frente a S. aureus, variando de uma a três zonas de inibição, na faixa de Rf de 0,70 a 0,81. Neste teste, A. flavo furcatis DPUA 1451 foi a única espécie inibidora do crescimento de C. albicans, composto de Rf 0,75 constituinte do extrato hexânico. Os dados aqui apresentados mostraram que espécies de Aspergillus, ainda que preservadas por diferentes períodos, em condições in vitro, sintetizam compostos com atividade antibacteriana e antifúngica capazes de inibir o crescimento de S. aureus, E. coli e C. albicans.

Submitted by Rosana Moreira (rosanapsm@outlook.com) on 2018-11-19T13:45:17Z No. of bitstreams: 2 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Dissertacao_InvestigacaoFitoquimicaAtividade.pdf: 1641240 bytes, checksum: 643b624233be3806d4ea6f4bad257e80 (MD5) / Approved for entry into archive by Edisangela Bastos (edisangela@ufpa.br) on 2019-01-30T16:03:11Z (GMT) No. of bitstreams: 2 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Dissertacao_InvestigacaoFitoquimicaAtividade.pdf: 1641240 bytes, checksum: 643b624233be3806d4ea6f4bad257e80 (MD5) / Made available in DSpace on 2019-01-30T16:03:11Z (GMT). No. of bitstreams: 2 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Dissertacao_InvestigacaoFitoquimicaAtividade.pdf: 1641240 bytes, checksum: 643b624233be3806d4ea6f4bad257e80 (MD5) Previous issue date: 2017-12-21 / CNPq - Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico / As cascas de Luehea speciosa, família Malvaceae, são utilizadas na medicina tradicional para o tratamento de disenteria, reumatismo, tumores, bronquites, feridas de pele, emagrecimento entre outros. Porém, existem poucas informações sobre a espécie na literatura. Dessa forma, faz-se de grande interesse investigar a sua constituição química e suas possíveis atividades biológicas, visto que a comprovação cientifica promove uma alternativa de tratamento de forma segura aos usuários. Neste sentido, o presente estudo buscou a constituição química do extrato bruto seco (EBS) e das frações hexânica (FHX), diclorometano (FDM), acetato de etila (FAE) e metanólica (FME), da espécie, através de analises por cromatografia liquida de alta eficiência acoplada a espectrometria de massas - LC/MS, bem como suas atividades antioxidante, por bioautografia, e citotóxica, in vitro, frente as linhagens de células tumorais, HELA e HEP-2 e VERO. As amostras apresentaram atividade antioxidante, sendo as frações FDM e FAE com perfil mais relevante. O EBS e as frações demonstraram citotoxidade sobre todas as linhas em estudo, porém a fração FDM apresentou maior atividade citotóxica contra células tumorais. Nas análises por LC/MS, foram detectados compostos fenólicos, com características sugestivas da presença do ácido chicórico, através do m/z = 148, além do espectro de UV semelhante. Esses resultados demonstram que a espécie em estudo possui atividade antioxidante e sugerem que a amostra exerce citotoxidade contra células tumorais, apresentando-se promissora para futuros estudos. / The barks of Luehea speciosa, family Malvaceae, are used in traditional medicine to treat dysentery, rheumatism, tumors, bronchitis, skin wounds, weight loss and others diseases. However, studies give little information about the species in the literature. Thus, it is of great interest to investigate its chemical constitution and biological activities, since the scientific proof of its activity can promote, in the future, a therapeutic alternative. The present study analyzed the chemical constitution of the dry crude extract (EBS) and hexane (FHX), dichloromethane (FDM), ethyl acetate (AED) and methanolic (FME) fractions of the species by high-performance liquid chromatography (HPLC) with tandem mass spectrometric - LC/MS, as well as its antioxidant activities by bioautography and cytotoxic assays, in vitro, against HELA, HEP-2 and VERO tumor cell lines. The samples showed antioxidant activity, being the fractions FDM and AED results more relevant. The EBS and fractions demonstrated cytotoxicity on all cell lines, however the FDM fraction had greater cytotoxic activity against tumor cells. In the LC/MS analyzes, were detected phenolic compounds and suggestive characteristics of chicoric acid presence through m/z = 148, as in the UV spectrum. These results demonstrate that this species has antioxidant activity and suggest its cytotoxicity against tumor cells, being a promising species for future studies.

Lavandula genus plants are known by a variety of volatiles and used for centuries in perfumes and medicinal applications. Several species in the world with productive potential, for example, Lavandula dentata L. species grown in many countries which includes Brazil, to aromatic and medicinal purposes. In addition to the diversity of varieties of lavender plants are quite resistant to adverse conditions of weather and temperature. There are many features that differentiate them from their morphological characters to the constitution of their volatile oils that have ecological functions well established in the plant. And there can be intraspecific variation of these compounds, and these differences can be related to the plant interactions with the environment, which trigger various biochemical processes that result in differences both in proportion as the phytochemical composition of the volatile oil. Natural products, such as volatile oil has been intensively studied for its productive aspects and biological activities. This study aimed to determine the effect of two intensities of solar radiation, and different harvesting times in biomass production, yield and chemical composition of the volatile oil from leaves and L. dentata plant inflorescences in soilless cultivation and how to evaluate the antimicrobial activity, genotoxic and antiproliferative the volatile compound. The experiment was conducted in a greenhouse in a closed system, the plants were grown in nutrient solution in polypropylene pots containing sand as substrate. They were collected for each harvest leaves and inflorescences to determine the fresh and dry weight of plants. The remaining green mass of each plot was used for the extraction of volatile oil by hydrodistillation method and the composition determined by gas chromatography (GC / MS). We used a completely randomized design, the biomass data and income were submitted ANOVA and the variables that showed significant differences were determined by Tukey test, the genotoxicity data were compared using the chi-square test (X²). We evaluated the aboveground biomass production and essential oil of lavender in two radiation intensity (with and without shading), at different times of collection (150, 213 and 320) days after planting. And also assess the antimicrobial effect by the method and bioautography genotoxicity oil concentrations (100%) and (0.05%), respectively. The oil yield, fresh weight (MF) and dry (MS) leaves (F) and inflorescences (I) were affected by shading and different times of collection, (MFI) was higher in the spring harvest (213 DAP ) without shading and (MFF), while for leaves the best time was in the summer period (320 DAP), and there was no effect on the use of 50% shading to (MF). However, there was a reduction in average values of MSF and MSI. The production of volatile oil in the leaves was higher in all collections held in the summer, to 320 DAP. The major constituents found in the volatile oil were 1.8 cineole, camphor and linalool. The oil (100%) showed moderate activity against the bacteria Staphylococcus aureus, Bacillus cereus and Salmonella typhimurium, the volatile oil (0.05%) from lavender showed no antiproliferative activity or genotoxic effect. / Plantas do gênero Lavandula são conhecidas por uma variedade de compostos voláteis e empregadas há séculos na fabricação de perfumes e aplicações medicinais. São várias as espécies no mundo com potencial produtivo, como por exemplo, a espécie Lavandula dentata L. cultivada em vários países onde se inclui o Brasil, para fins aromáticos e medicinais. Além da diversidade de variedades, plantas de lavanda são bastante resistentes às condições adversas de clima e temperatura. São muitas as características que as diferenciam desde seus caracteres morfológicos à constituição de seus óleos voláteis que apresentam funções ecológicas bem estabelecidas na planta. Podendo ainda ocorrer uma variação destes compostos intraespecífica, e estas diferenças podem estar associadas às interações da planta com o ambiente, que desencadeiam vários processos bioquímicos que resultam em diferenças tanto na proporção quanto na composição fitoquímica do óleo volátil. Produtos naturais, tais como o óleo volátil vem sendo intensamente estudados, quanto seus aspectos produtivos e atividades biológicas. O presente trabalho teve como objetivo determinar o efeito de duas intensidades da radiação solar, e de diferentes épocas de colheita na produção de fitomassa, rendimento e composição química do óleo volátil de folhas e inflorescências de L. dentata no cultivo sem solo, bem como avaliar a atividade antimicrobiana, genotóxica e antiproliferativa do composto volátil. O experimento foi conduzido em casa de vegetação em sistema fechado, as plantas foram cultivadas com solução nutritiva em vasos de polipropileno contendo areia como substrato. Foram coletadas para cada época folhas e inflorescências para determinar a massa fresca e seca das plantas. O restante das plantas de cada parcela foi utilizado para extração do óleo volátil pelo método de hidrodestilação e a composição determinada por cromatografia gasosa (GC/MS). Foi utilizado o delineamento inteiramente casualizado, os dados de fitomassa e rendimento foram submetidos ANOVA e as variáveis que apresentaram diferença significativa foram determinadas pelo teste de Tukey, e os dados de genotoxidade foram comparados pelo teste Qui-quadrado (X²). Avaliou-se a produção de biomassa da parte aérea e óleo volátil da lavanda sob duas intensidades de radiação (com e sem sombreamento), em três épocas de coleta (150, 213 e 320) dias após o plantio. O óleo volátil foi avaliado quanto o efeito antimicrobiano pelo método de bioautografia e genotoxidade nas concentrações (100%) e (0,05%), respectivamente. O rendimento do óleo, a massa fresca (MF) e seca (MS) de folhas (F) e inflorescências (I) foi afetada pelo sombreamento e pelas diferentes épocas de coleta, a (MFI) foi maior na colheita da primavera (213 DAP) sem sombreamento enquanto a (MFF), a melhor época foi no período de verão (320 DAP), e não houve efeito quanto ao uso do sombreamento 50% para (MF). Porém, houve uma redução dos valores médios de MSF e MSI. A produção de óleo volátil nas folhas foi superior em todas as coletas, realizada no verão, aos 320 DAP. Os constituintes majoritários encontrados no óleo volátil foram 1,8 cineol, cânfora e linalol. O óleo (100%) apresentou atividade antimicrobiana moderada para as bactérias Staphylococcus aureus, Bacillus cereus e Salmonella typhimurium, o óleo volátil (0,05%) de lavanda não apresentou atividade antiproliferativa nem efeito genotóxico.

Made available in DSpace on 2014-06-12T16:31:41Z (GMT). No. of bitstreams: 2 arquivo6185_1.pdf: 1986687 bytes, checksum: 8a72beab280fcdc564c73079c55a4aee (MD5) license.txt: 1748 bytes, checksum: 8a4605be74aa9ea9d79846c1fba20a33 (MD5) Previous issue date: 2007 / O aumento da resistência bacteriana aos antibióticos é uma ameaça à saúde da população mundial, aumentando as recorrências por doenças infecciosas, devido ao surgimento de bactérias multirresistentes que dificulta e onera o tratamento antimicrobiano. Um exemplo importante destes germes, é o S. aureus MRSA que no Brasil, como em outras partes do mundo, são os microorganismos frequentemente isolados, tendo sua maior prevalência a nível hospitalar, sendo também uma importante causa de infecções na comunidade. A ocorrência de S. aureus MRSA multirresistentes susceptíveis só a vancomicina, constitui um grave problema a resolver, ainda mais, com o surgimento recente de cepas de S. aureus com susceptibilidade intermediária e resistentes a vancomicina. Deste fato, é de fundamental importância, a pesquisa de compostos alternativos, principalmente a partir de plantas medicinais que constitui uma fonte inesgotável de novas moléculas. No presente trabalho, foram escolhidas duas plantas para estudar o perfil fitoquímico e antimicrobiano: Caesalpinia pyramidalis Tull. (Catingueira), das leguminosas e Schinopsis brasiliensis Engl. (Baraúna ou braúna), das anacardiáceas, ambas as famílias com representantes de reconhecida atividade biológica, incluída a antimicrobiana. Neste sentido foi estudada a atividade dos extratos secos (por extração hexanólica, em acetato de etila ou metanol) da folha, casca do caule, casca da raiz, flor, vagem e semente da Braúna e Catingueira inicialmente frente a padrões ATCC de bactérias Gram negativas e Gram positivas, confirmando-se uma melhor ação para Staphylococcus aureus. Na segunda etapa os ensaios foram realizados com 22 cepas de Staphylococcus aureus, 18 isolados clínicos MRSA multirresistentes identificados como Clones Epidêmicos, 2 isolados S. aureus MSSA e 2 cepas padrões ATCC. Dos resultados obtidos para as plantas em estudo, a Schinopsis brasiliensis apresentou melhor atividade sobre as cepas de S. aureus, inclusive os clones epidêmicos mais resistentes. Os extratos secos de extração metanólica foram mais ativos com dados de CMI para a flor e raiz de Braúna de 125 μg.mL-1 quanto que pela técnica de poços foram obtidos para uma das cepas de Staphylococcus aureus MRSA multirresistente (CEB) halos da ordem de 20 mm. Os extratos secos de extração por acetato de etila mostraram-se menor ação, o que pode ser atribuído à uma difusão diminuída no agar. Nos testes, os antibióticos usados como padrão foram tetraciclina e oxacilina na determinação das CMI e tetraciclina na técnica de poços, confirmando a oxacilina o caráter MRSA ou MSSA das cepas e a tetraciclina seu perfil de resistência. Os dois diluentes utilizados DMSO à 50% e Tween 80 à 4% não apresentaram nenhuma inibição. Concluindo, considera-se que as plantas em estudo e particularmente a Schinopsis brasiliensis apresentou uma atividade promissora sobre as cepas de S. aureus MRSA inclusive os clones multirresistentes, considerando-se que em parte esta atividade é justificada pela presença de flavonóides e, especialmente, ácidos fenólicos que foram detectados experimentalmente por bioautografia confirmando dados da literatura e por screening fitoquímico

Submitted by Alisson Mota (alisson.davidbeckam@gmail.com) on 2015-07-13T18:17:07Z No. of bitstreams: 1 Tese - Ana Lúcia Basílio Carneiro.pdf: 16610047 bytes, checksum: c4cd629d2777cd22001ca4ee47db8b8c (MD5) / Approved for entry into archive by Divisão de Documentação/BC Biblioteca Central (ddbc@ufam.edu.br) on 2015-07-15T18:51:06Z (GMT) No. of bitstreams: 1 Tese - Ana Lúcia Basílio Carneiro.pdf: 16610047 bytes, checksum: c4cd629d2777cd22001ca4ee47db8b8c (MD5) / Approved for entry into archive by Divisão de Documentação/BC Biblioteca Central (ddbc@ufam.edu.br) on 2015-07-15T18:57:21Z (GMT) No. of bitstreams: 1 Tese - Ana Lúcia Basílio Carneiro.pdf: 16610047 bytes, checksum: c4cd629d2777cd22001ca4ee47db8b8c (MD5) / Made available in DSpace on 2015-07-15T18:57:21Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Tese - Ana Lúcia Basílio Carneiro.pdf: 16610047 bytes, checksum: c4cd629d2777cd22001ca4ee47db8b8c (MD5) Previous issue date: 2015-06-15 / CNPq - Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico / Tropical forests are species-rich reserves for the discovery and development of antimicrobial drugs. The aim of this work is to investigate the in vitro antimicrobial potential of Amazon plants found within the National Institute on Amazon Research’s Adolpho Ducke forest reserve, located in Manaus, state of Amazonas, Brazil. 75 methanol, chloroform and water extracts representing 12 plant species were tested for antimicrobial activity towards strains of Mycobacterium smegmatis, Escherichia coli, Streptococcus sanguis, Streptococcus oralis, Staphylococcus aureus and Candida albicans using the gel-diffusion method. Active extracts were further evaluated to establish minimum inhibitory concentrations (MIC) and antimicrobial profiles using bioautography on normal-phase thin-layer chromatography plates. Diclinanona calycina presented extracts with good antimicrobial activity and S. oralis and M. smegmatis were the most sensitive bacteria. D. calycina and Lacmellea gracilis presented extracts with the lowest MIC (48.8 μg/ml). D. calycina methanol and chloroform leaf extracts presented the best overall antimicrobial activity. All test organisms were sensitive to D. calycina branch chloroform extract in the bioautography assay. This is the first evaluation of the biological activity of these plant species and significant in vitro antimicrobial activity was detected in extracts and components from two species, D. calycina and L. gracilis. / O objetivo deste trabalho foi avaliar a atividade citotóxica, antitumoral e antimicrobiana de espécies vegetais amazônicas da Reserva Florestal Adolpho Ducke do Instituto Nacional de Pesquisas da Amazônia (INPA). As espécies vegetais sem estudos anteriores selecionadas e coletadas foram: Diclinanona calycina Benoist, (Annonaceae), Lacmellea gracilis (Mull. Arg.) Markgr. (Apocynaceae), Pleurisanthes parviflora (Ducke) Howard (Icacinaceae), Dilkea johannesii Berb. Rodr. (Passifloraceae), Sterigmapetalum obovatum Kuhlm. (Rhizophoraceae), Elaeoluma nuda (Baehni) Aubrév. (Sapotaceae). Após coleta e extração as amostras foram avaliadas quanto a citotoxicidade frente a Artemia franciscana e em linhagens de células tumorais. O potencial antimicrobiano foi determinado pelo método de difusão em ágar frente a Mycobacterium smegmatis, Escherichia coli, Streptococcus sanguis, S. oralis, Staphylococcus aureus e Candida albicans. Extratos ativos foram conduzidos a avaliação da concentração inibitórioa mínima (CIM) e bioautografia para identificar Rfs de componentes antimicrobianos. Prospecção fitoquímica das espécies promissoras foi realizada para detecção dos principais constituintes químicos. Dos 38 extratos avaliados para toxicidade em A. franciscana, dois apresentaram valores de CL50 inferiores a 100 μg/mL, portanto, tóxicos para essa espécie. A menor CL50 foi do extrato de D. calycina obtido em clorofórmio com valor de 22,9 ± 0,8 μg/mL. No screening para atividade antitumoral, nove extratos representando quatro espécies vegetais foram considerados muito ativos (MA) frente à célula tumoral de sistema nervoso (E. nuda e S. obovatum), cólon (S. obovatum), mama (E.nuda) e leucemia (L. gracilis, P. parviflora, S. obovatum). A maioria dos 75 extratos analisados inibiram o crescimento dos microrganismos teste com halos entre 8 e 40 mm de diâmetro. Extratos de D. calycina demonstraram atividade antimicrobiana com CIM de 48,8 μg/mL frente a S. aureus, S. oralis e S. sanguis e 97,7 μg/mL e 195 μg/mL frente a M. smegmatis. L. gracilis foi ativa apenas contra M. smegmatis (CIM 48,8 μg/mL). A bioautografia confirmou o potencial antimicrobiano de D. calycina e L. gracilis. Todos os microrganismos avaliados por bioautografia foram sensíveis ao extrato de galho de D. calycina obtido em clorofórmio. Na prospecção fitoquímica detectou-se a presença de fenóis, taninos, flavonóides, alcalóides e antraquinonas, em extratos de D. calycina e antraquinonas e cumarinas na espécie L. gracilis. Assim, a seleção permitiu identificar espécies vegetais amazônicas com atividade antimicrobiana e antitumoral in vitro e sugerir as espécies D. calycina, L. gracilis, E. nuda e S. obovatum para apreciação detalhada em outros estudos, pois poderão ter aplicação terapêutica no tratamento de doenças infecciosas e câncer.

Submitted by Alisson Mota (alisson.davidbeckam@gmail.com) on 2015-07-13T19:08:16Z No. of bitstreams: 1 Tese - Milena Rodrigues Soares Mota.pdf: 10830184 bytes, checksum: b6f2977c2b749cd675523693c33de0ff (MD5) / Approved for entry into archive by Divisão de Documentação/BC Biblioteca Central (ddbc@ufam.edu.br) on 2015-07-15T17:58:31Z (GMT) No. of bitstreams: 1 Tese - Milena Rodrigues Soares Mota.pdf: 10830184 bytes, checksum: b6f2977c2b749cd675523693c33de0ff (MD5) / Approved for entry into archive by Divisão de Documentação/BC Biblioteca Central (ddbc@ufam.edu.br) on 2015-07-15T18:07:20Z (GMT) No. of bitstreams: 1 Tese - Milena Rodrigues Soares Mota.pdf: 10830184 bytes, checksum: b6f2977c2b749cd675523693c33de0ff (MD5) / Made available in DSpace on 2015-07-15T18:07:20Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Tese - Milena Rodrigues Soares Mota.pdf: 10830184 bytes, checksum: b6f2977c2b749cd675523693c33de0ff (MD5) Previous issue date: 2011-03-25 / Não Informada / This study describes the therapeutic potential of extracts and standardized fractions of Arrabidaea chica leaves. A. chica is a Bignoniaceae popularly known as “crajiru”. The genus Arrabidaea occurs in Tropical America, from the Southern Mexico to the Southern Brazil. The red color of its dried leaves is attributed to two flavonoidal pigments: carajurina (main pigment) and carajurona. Chemical studies described the isolation of saponins and flavonoids from the plant leaves; purified 3- desoxyanthocyanidins were reported as anti-inflammatory. The infusion or decoction of the plant leaves is used in the folk medicine to treat anemia, inflammation and in skin wound-healing. In this work, the antimicrobial activity of the standardized extracts and fractions of A. chica cultivated at Embrapa Amazônia Ocidental, Manaus, were evaluated against fungal and bacterial microorganisms grown either from local domestic dogs and cats, or from human samples supplied by the Microorganism Collection of FIOCRUZ, in Manaus, Brazil. The plant dried leaves were extracted with increasing polarity solvents and progressively purified in preparative thin layer chromatography (TLC) and silica-gel column; the semi-purified extracts were standardized in TLC. The agar diffusion method; bioautography; minimum inhibitory concentrations tested against Staphylococcus epidermidis (CBAM 293), Staphylococcus aureus (CBAM 324), Pseudomonas aeruginosa (CBAM 232), Escherichia coli (CBAM 002), Trichophyton mentagrophytes (CFAM 1288), Microsporum canis (CFAM 1289), Malassezia pachydermatis (CFAM 1290) e Candida albicans (CFAM 1285). The standardized fractions were effective against all these microorganisms, but more intensively against Microsporum canis and Staphylococcus epidermidis. The results might favour the use of the standardized sub-fractions of A. chica as topic phytotherapic agent to treat canine external otitis. So far oleanolic and ursolic acids were identified as the main compounds in the active semi-purified fraction but other compounds of the leaves extract were not discarded. Later studies will consider the veterinarian use of the standardized extract, of the active pure entities and the convenience of the natural active antibiotic mix. / Este estudo analisou o potencial terapêutico de extratos e frações purificadas da planta amazônica Arrabidaea chica visando seu uso tópico como medicamento e eficácia comprovada em doenças cutâneas. A. chica Verl., é uma Bignoniaceae conhecida popularmente como crajiru. O gênero Arrabidaea ocorre na América tropical, do sul do México ao sul do Brasil. A cor avermelhada da folha seca e sua propriedade tintorial são devidas a dois pigmentos flavonoídicos: a carajurina, que é o pigmento principal e a carajurona. Dela foram isolados saponinas e flavonóides; As 3-desoxiantocianidinas, descritas na planta parecem possuir atividade antiinflamatória. A medicina popular utiliza o decocto ou a infusão das folhas para tratar anemia, inflamações e na cicatrização da pele. Neste trabalho, a atividade antimicrobiana de extratos e frações padronizadas da A. chica cultivada na Embrapa Amazônia Ocidental, em Manaus/AM, foi avaliada contra fungos e bactérias de amostras clínicas coletadas de animais domésticos e contra amostras humanas depositadas na coleção de Microrganimos da FIOCRUZ, Manaus/AM. Para isso, as folhas secas da planta foram extraídas com solventes de polaridade crescente, as frações foram progressivamente purificadas em cromatografia de placa ou coluna de sílica-gel, os extratos semi-purificados foram padronizados em cromatografia líquida de alta eficiência acoplada à espectrometria de massas. Os testes de difusão em ágar, bioautografia e concentração inibitória mínima foram usados para avaliar a atividade antimicrobiana das subfrações padronizadas frente aos microrganismos Staphylococcus epidermidis (CBAM 293), Staphylococcus aureus (CBAM 324), Pseudomonas aeruginosa (CBAM 232), Escherichia coli (CBAM 002), Trichophyton mentagrophytes (CFAM 1288), Microsporum canis (CFAM 1289), Malassezia pachydermatis (CFAM 1290) e Candida albicans (CFAM 1285). As frações padronizadas foram ativas contra todos esses microrganismos, com melhores resultados contra M. pachydermatis e S. epidermidis. Os resultados foram favoráveis à utilização das subfrações padronizadas na formulação de um produto fitoterápico para uso tópico em otite canina. Nas frações ativas foram identificados os ácidos oleanólico e ursólico. Estudos posteriores deverão avaliar a possibilidade de uso humano das frações purificadas ou dos compostos identificados.