Orientador: Decio Teixeira / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Odontologia de Piracicaba / Made available in DSpace on 2018-07-14T01:32:06Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Agostinho_SoniaMariadosSantos_M.pdf: 1675543 bytes, checksum: 8f0eec845c0549a03915933d84a1bca3 (MD5) Previous issue date: 1987 / Resumo: Não informado / Abstract: Not informed. / Mestrado / Bases Farmacologicas para a Terapeutica Medicamentosa / Mestre em Odontologia

Orientadores : Maria Adelia Collier Farias, Denys Emilio Campion Nicolosi / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Engenharia Eletrica / Made available in DSpace on 2018-07-14T01:49:07Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Gattei_Celso_M.pdf: 6308958 bytes, checksum: 605dc133866ad937d2c2af4d41ff2e4e (MD5) Previous issue date: 1991 / Resumo: Este trabalho visa o desenvolvimento de urna Bomba de infusão lenta a qual utiliza o processo peristáltico rotativo para o deslocamento de fluidos, substituindo o sistema manual em infusões de drogas, onde a confiabilidade e exatidão são necessárias. Inicialmente são abordados os vários métodos de infusão (automáticos e não automáticos) destacando-se os princípios de funcionamento e suas aplicações. Em seguida são definidas as características gerais do projeto e os componentes (mecânicos e eletrônicos) que comporão o protótipo.Finalmente são descritos vários testes para a avaliação do desempenho do protótipo / Abstract: Not informed. / Mestrado / Engenharia Biomedica / Mestre em Engenharia Elétrica

Orientador : Julia Prado Francheschi / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciências Médicas / Made available in DSpace on 2018-07-14T02:00:07Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Zappellini_Aldete_M.pdf: 1943638 bytes, checksum: d681f5b052540f56a0eb44ceaadfdf0d (MD5) Previous issue date: 1991 / Resumo: A B. erythromelas é uma serpente que habita exclusivamente as regiões quentes do Nordeste brasileiro (Bahia ao Ceará). Nesta Tese avaliaram-se características bioquímicas e farmacológicas de sua peçonha. Verificou-se que o veneno apresenta atividades coagulante, proteolítica (caseinolítica), fosfolipásica e hemorrágica, bem como discreta atividade TAME-esterásica. Os fracionamentos realizados revelaram a presença de três (Sephadex G-75) e quatro (Sephadex G-100) picos distintos. No primeiro pico detectaram-se as atividades proteolítica e coagulante, no segundo, TAME-esterásica (ausente em Sephadex G-75), no terceiro, fosfolipásicae coagulante. Nenhuma atividade foi detectada no último pico. Através do estudo farmacológico, verificou-se que a peçonha de B. elyrhromelas é menos tóxica do que a de B. jararaca para camundongos (via intraperitoneal); no entanto, esta relação se inverteu para pintainhos (via, intramuscular). Estudamos também os efeitos deste veneno sobre,a pressão arterial sistêmica e a respiração, bem como sobre o tempo de coagulação, de cães anestesiados. Observou-se que após administração de 25 fJ.g/kg da peçonha (via endovenosa, "bolus"), os animais apresentaram uma queda da pressão arterial que revelou a presença de dois componentes distintos: o primeiro manifestou-se por uma queda de rápida instalação e de moderada intensidadee o segundo, por uma queda mais acentuada e persistente. Verificou-se também que o veneno determinou a morte de 58,8% dos animais, por parada respiratória precedida por hiperpnéia. Incoagulabilidade sanguínea, após uma breve fase de hipercoagulabilidade (coagulopatiade consumo) foi também observada. O pré-tratamento dos animais, de forma independente, com heparina, sulfato de celulose, NW-nitro-L arginina metil éster (L-NAME) , indometacina, soro antibotrópico (SAB), e sulfato de celulose e indometacina associados, determinou a sobrevida de 100% dos animais experimentados. O primeiro componente hipotensor foi inibido significativamente pelo sulfato de celulose, bem como pela heparina, enquanto que o segundo componente hipotensor foi abolido em 50% dos animais tratados com indometacina. A associação de sulfato de celulose e indometacina inibiu completamente as alterações pressóricas induzidas pelo veneno, bem como as anomalias respiratórias. Estes resultados sugerem que bradicinina seja responsável pela queda inicial da pressão arterial e que eicosanóides com ação vasodilatadora, tais como prostacic1ina e/ou prostaglandina E2 sejam os mediadores da segunda queda pressórica. O estado de choque, por sua vez, seria mantido pela liberação de óxido nítrico pelas células endoteliais, uma vez que o pré-tratamento com L-NAME determinou uma recuperaçãoacelerada dos níveis pressóricos, ainda que não tenha interferido com nenhuma das respostas hipotensoras. As alterações na coagulação somente foram revertidas com o uso do SAB, no entanto em proporção 30 vezes superior àquela recomendada pelo Instituto Butantan / Abstract: B. elythromelas is a snake found exc1usivelyin the Northeast of Brazil (from Bahia to Ceará). In this Thesis, some of the biochemical and pharmacological characteristics of this venom were examined. B. erythromelas venom possesses coagulant activity as well as proteolytic (caseinolytic), phospholipase and TAME-esterase activities. Practionation of the venom yielded either three (Sephadex G-75) or four (Sephadex G-IOO) distinct peaks. The first peak contained primarily proteolytic and clotting activities; in the second one, TAME-esterase activity was detected (this peak was absent in the G-75 fractionation). The third peak contained phospholipase activity and in the last, no activity could be detected. B. erythromelas venom, compared with B. jararaca venom, is less toxic in mice, when given i.p.. However, this potency is inverted when the venoms are given i.m. in chicks. The effects of B. erythromelas venom on arterial blood pressure and respiration, as well as clotting time "in vivo" (anaesthetized dogs), were also examined. A bolus injection of B. Erythromelas venom (25 f-tg/kg,i.v.) induced a biphasic hypotensive response consisting of a rapid initial decrease followed by a partial recovery (early phase) which was then succeeded by a more sustained hypotension (late phase). The dose of venom used caused a 58.8% mortality. The animals died following a period of profound respiratory alterations. Independent pre-treatment of the animaIs with heparin, cellulose sulphate, NW-Nitro-L arginine methyl ester (L-NAME), indomethacin, antibothropic serum, or a combination of cellulose sulphate and indomethacin, abolished the lethality. The ear1yphase of hypotension was inhibited by cellulose sulphate as well as by heparin, while the late phase was partially inhibited (50%) by indomethacin. Pre-treatment with cellulose sulphate and indomethacin abolished the venom-induced alterations in blood pressure and respiration. These results suggest that bradykinin may be responsible for the initial hypotensive response and that vasodilatory eicosanoids, such as prostacyclin and/or prostaglandin E2 may mediate the late phase. Pre-treatment with L-NAME led to a more rapid recovery from the sustained late phase of hypotension although there was no effect on the immediate hypotensive response. This observation suggests that nitric oxide release, from endothelial cells, may contribute to the maintenance of the venom-induced shock. On the other hand, the hemostatic alterations were prevented only by pre-treatment with antibothropic serum, however in a dose 30 fold above that recommended by the Butantan Institute / Mestrado / Mestre em Farmacologia

Orientador: Gilberto de Nucci / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciencias Medicas / Dados retirados da capa / Made available in DSpace on 2018-07-14T02:22:25Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Borges_NeyCarterdoCarmo_M.pdf: 987938 bytes, checksum: d5cbce73e0bd89562ae0bdf5807eda06 (MD5) Previous issue date: 1992 / Resumo: Esta tese descreve a atividade contrátll em músculo liso vascular de coelho do veneno da aranha arrnadeira Phoneutria nigriventer. ° endotélio dos vasos foi retirado mecanicamente e os mesmos foram montados em um sistema de cascata, superfundidos com solução de Krebs aquecida (37°C) e oxigenada (95% 02 + 5% C02)' ° Phoneutria nigriventer (0.3 - 30 µg) produziu contrações dependentes da dose em arterias (pulmonar, mesentérica e celíaca) e veias (jugular, mesentérica e cava). A atividade contrátll do veneno em tecidos venosos e na artéria pulmonar não foi alterada quando o mesmo foi submetido a diálise (20-72h) ou quando os tecidos .foram perfundidos com metisergida, indicando que tal atividade não depende da serotonina contida no veneno. A atividade contrátll nas artérias mesentérica e celíaca foi abolida com a diálise do veneno ou com o uso da metisergida, indicando a serotonina corno principal agente espasmogênico nestes tecidos. A tetrodotoxina e a fenoxibenzarnina não afetaram significativamente a. contração induzida pelo Phoneutria nigriventer, sugerindo que o efeito contrátll independe da ativação de canais de sódio e da liberação de catecolarninas das terminações nervosas da parede do vaso. A atividade contrátll do Phoneutria nigriventer apresentou urna redução significativa quando incubado com tripsina, indicando que o veneno contém polipeptídeos responsáveis pela atividade espasmogênica. Após o fracionamento parcial do veneno através de filtração em gel de Sephadex G-1O e cromatografia de troca iônica, obtivemos 8 frações as quais revelaram atividade contrátll em tecido liso vascular. A eletroforese em gel de SDS-poliacrilarnida-tricina mostrou que o massa molecular destas frações está situado entre 8-50 kDa. / Abstract: The effects produced by Phoneutria nigriventer("armed spider") venom (PNV) in rabbit vascular smooth musc1e have been investigated. De endothelialized vascular strips were superfused in a cascade system with oxygenated (95% O2 /5% C02) and warmed (37°C) Krebs' solution at 5 rnl/min. PNV (0.3-30 µg) produced dose-dependent contractions in both 'venous and arterial tissues (cava, mesenteric and jugular veins and puImonazy, mesenteric and coeliac arteries, respectively). Methysergide did not s1gniflcantly a:ffect PNV-induced contractions in venous tissues or Í'Il puImonazy artery ind1cating that serotonin 1s not involved. Furthermore, d1alysis of the venom for up to 48 h d1d not alter th1s contractile activity. Ne1ther tetrodotoxin nor phenoxybenzamine s1gnificantly affected PNV induced contractlons suggesting that voltage-dependent sodium channel actlvatlon and endogenous catecholamine release from vessel wall autonomic nerve endings are also Í10t involved in the PNV response. The incubatlon with trypsin reduced significantly PNV-induced contractions. suggesting that the venom contains polypeptides Following gel-filtration, 10n-exchange chromatography and trtcine SDS- PAGE electrophoresis of the PNV, 8 fractlons (mw 8-50 kDa) with contractile activity were isolated. / Mestrado / Mestre em Farmacologia

Orientador: Mario Roberto Vizioli / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Odontologia de Piracicaba / Made available in DSpace on 2018-07-14T02:53:10Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Andrade_EduardoDiasde_D.pdf: 1914643 bytes, checksum: 1a274ce533050317bd06b64043ef8906 (MD5) Previous issue date: 1985 / Resumo: O presente trabalho teve como finalidade a avaliação experimental, em ratos, dos efeitos antiinflamatórios da betametasona, quando empregada em posologias e preparações distintas. Os resultados obtidos demonstraram que, quando este corticosteroide sintetico foi administrado na dose unicade 0,1 mg/kg, no pós-operatório imediato, sob a forma de preparação de depósito, observou-se uma atenuação dos fenômenos que caracterizam a resposta inicial do processo inflamatório. O mesmo também foi observado quando a betametasona foi utilizada sob um novo esquema terapêutica, na dose total de 0,05 mg/kg, dividida em duas doses de 0,025 mg/kg, com uma preparação injetável convencional, 1 hora antes e 4 horas após o ato operatório. Por outro lado, os tecidos dos animais submetidos a corticosteroideterapia, em ambos os esquemas estudados, tiveram sua reparação retardada quando comparada àquela observada nos tecidos obtidos de animais sob condições normais. Entretanto, a inibição do processo de reparação parece ter sido menos marcante nos tecidos tratados com a preparação convencional da betametasona, se comparada com aquela provocada pelo tratamento com a preparaçãode deposito do mesmo corticosteroide. A partir desses resultados, também foi posslvel concluir que o esquema terapêutica original proposto com a betametasona seria o mais indicado, quando se pretende uma eficácia antiinflamatória, equilibrada e, ao mesmo tempo, uma interferência, a menor possível, na evolução dos processos de reparação / Abstract: Not informed. / Doutorado / Farmacologia, Anestesiologia e Terapeutica / Doutor em Odontologia

Orientador: Mario Roberto Vizioli / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Odontologia de Piracicaba / Made available in DSpace on 2018-07-14T02:52:58Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Andrade_EduardoDiasde_M.pdf: 2536663 bytes, checksum: e57c11b779ca389858b668ac081334b3 (MD5) Previous issue date: 1980 / Resumo: O presente trabalho teve como uma de suas finalidades de acompanhar a síntese de colágeno e glicosaminoglicanas(M.P.A.) no tecido de granulação, induzido artificialmente em ratos, de uma fase precoce até sua maturação. Por outro lado, objetivou-se estudar os efeitos de drogas antiinflamatórias, com princípios ativos diferentes, na evolução deste mesmo tecido, comparando-a com aquela observada em animais sob condições normais. Os resultados obtidos demonstraram que a dexametasona 21-fosfato, na dose de 0,1 mg/kg/dia é uma potente inibidora da síntese de mucopolissacarídeos ácidos (glicosaminoglicanas) , e de colágeno, o mesmo acontecendo com a fenilbutazona (20 mg/ kg/dia), esta porém, inibindo a síntese de glicosaminog1icanas e colágeno em menor grau. Paralelamente, a tripsina(0,1 mg/kg/ dia) interferiu na proliferação do tecido de granulação de uma maneira positiva, tanto quantitativa como qualitativamente. A partir desses resultados, pôde-se concluir que;o antiinflamatório esteróide (dexametasona 21-fosfato), assim como o não esteróide e não enzimático (fenilbutazona), nas doses administradas constituem-se em grandes recursos terapêuticos quando houver necessidade de uma inibição da proliferação do tecido de granulação. Ao contrário, o antiinflamatório enzimático (tripsina) estaria justamente indicado em patologias nas quais uma síntese mais rápida e organizada do tecido de granulação fosse de primordial importância / Abstract: This work had the purpose to follow up the synthesis of collagen and glicosaminoglycanas artificially-induced granulation tis sue in rats, since an early phase till the maturation of this tissue. It were also studied the effects of anti inflammatory drugs with different active principIes upon the evolution of granulation tissue, and a comparison wasmadewith .the dynamics of normal granulation tissue. The results have showed that dexamethasone-2l-phosphate, in doses of 0,1 mg/kg/day is a powerfull inhibitory action upon the glycosaminoglycans (acid mucopolysacharides) and collagen synthesis, the same happening in relation to phenylbuta zone (20 mg/kg/day), with the difference thatphenylbutazoneas a smaller inhibitory effect. Trypsin (0,1 mg/kg/day)has showed an action of accelaration of the maturation of granulation tisue. From these results, it was concluded that the steroid, antiinflammatory(dexamethasone:2l-phosphate), as well as non¬steroid and non-enzimatic agent (phenylbutazone) in the used doses are of great therapeutic valuewhen the inhibition, of granulation process is needed. Contrarily, the enzimatic antiinflamatory drug (trypsin) could be indicated in situations when a faster synthesis of granulation tis sue was recomended. / Mestrado / Farmacologia Aplicada a Clinica Odontologica / Mestre em Odontologia

Orientador: Edson Antunes / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciencias Medicas / Made available in DSpace on 2018-08-04T03:35:25Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Penteado_CarlaFernandaFranco_D.pdf: 6702498 bytes, checksum: f838742ae536c24bf084965358fe1412 (MD5) Previous issue date: 2004 / Resumo: O tratamento neonatal com capsaicina em ratos acarreta aumento da inflamação alérgica pulmonar, sugerindo um papel protetor para as fibras C nas vias aéreas (MEDEIROS et ai, 2001). O objetivo deste trabalho foi investigar os mecanismos responsáveis pelo aumento do influxo neutrofílico pulmonar em ratos desprovidos de neuropeptídeos pelo tratamento neonatal com capsalclna, sensibilizados e desafiados com ovalbumina (OVA) na fase adulta. Os animais receberam capsaicina (30 mg/Kg, s.c.) no segundo dia de vida, sendo os protocolos experimentais realizados nos animais na fase adulta dos mesmos (60- 70 dias de vida). A sensibilização com OVA foi realizada pela injeção subcutânea de 200 ~g de OVA adsorvida em 8 mg de AI (OHh, O desafio antigênico com OVA (1 mg) foi realizado 14 dias após a sensibilização. A contagem de células no LBA, sangue periférico e medula óssea foi realizada 6h após o desafio com OVA. Nos animais desafiados com OVA observamos um aumento no número de neutrófilos no LBA, sendo este aumento significativamente maior em animais pré-tratados com capsaicina. Em ambos os grupos, controle e capsaicina, observamos redução do número de neutrófilos no sangue periférico de ratos desafiados com OVA, sendo esta reduçao maior no grupo capsaicina. Na medula óssea, observamos aumento significativo das formas imaturas e maduras de neutrófilos em ratos desafiados com OVA, não foi observado diferenças estatísticas entre o grupo controle e capsaicina. Empregando o modelo de adesão in vitra, nossos resultados mostraram que os neutrófilos sanguíneos obtidos de ratos tratados com capsaicina têm a mesma capacidade de aderir em resposta ao fMLP (0.1 ~M) ou PMA (1 ~M) em placas recobertas com soro ou fibronectina. Além disso, neutrófilos obtidos de animais controle ou pré-tratados com capsaicina são XXV1ll capazes de migrar in vitro em resposta ao fMLP (10 flM), PAF (0.1 j.1M) e a substância P (50 j.1M) de maneira semelhante. Observamos um aumento significativo nos níveis de TNF-a, IL-5, IL-10 e LTB4 no LBA dos ratos desafiados com OVA e pré-tratados com capsaicina. Nos animais tratados com capsaicina observamos um aumento significativo na expressão do RNAm para CINC-3 e redução do RNAm para CINC-2 no pulmão após o desafio com OVA, quando comparado com o seu respectivo controle. Macrófagos alveolares obtidos de animais tratados com capsaicina foram capazes de gerar a mesma quantidade de ânion superóxido, nitrito e TNF-a (basal e estimulada) quando comparado com o grupo controle. O tratamento crônico dos ratos com o composto 48/80 preveniu o aumento do influxo de neutrófilos no grupo de animais tratados com capsaicina (desafiados com OVA) e restaurou os níveis de TNF-a aos valores encontrados no grupo controle. No conjunto, estes resultados sugerem que o tratamento neonatal com capsaicina resulta em "up-regulação" dos mastócitos, que, uma vez ativados pela exposição ao antígeno, passam a liberar grandes quantidades de mediadores inflamatórios, principalmente do TNF-a e a CINC-3, amplificando desta forma aumento do influxo de neutrófilos nas vias aéreas destes animais. Paralelamente, observamos que ratos pré-tratados com capsaicina apresentam aumento no número basal de neutrófilos imaturos e maduros na medula óssea, quando comparado aos animais controle. Este aumento está associado à elevação da expressão da PPT-I e do receptor NK1 na medula óssea, sugerindo que estas proteínas estão "upreguladas" em animais desprovidos de neuropeptídeos pelo tratamento neonatal com capsaicina / Abstract: This study was undertaken to clarify the mechanisms by which C-fiber degeneration at neonatal stages exacerbates the inflammatory responses of rat airways. Rats were treated with capsaicin at neonatal stag es and immunized with ovalbumin (OVA) at adult ages. Challenge of capsaicin pretreated rats with OVA promoted a higher influx of neutrophils in bronchoalveolar lavage (BAL) fluid compared with the vehicle group. No significant differences were found for the other cell types. The increased adhesion of fMLP (0.1 ~M) and PMA (1 ~M)-treated neutrophils to fibronectin-coated wells did not differ among vehicle- and capsaicinpretreated rats. Additionally, fMLP (1O ~M), PAF-(0.1 ~M) and substance P (50~M) induced a significant neutrophil chemotaxis, but no differences were found among vehicle and capsaicin groups. Increased levels of TNF-a, IL-5, IL-10 and LTB4 in BAL fluid as well as higher expression of CINC-3 in lung homogenates were detected in the capsaicin group compared with vehicle group. In the capsaicin group, chronic treatment with compound 48/80 restored the TNF-a levels to control values and prevented the neutrophil influx in BAL fluid. The enhanced production of TNF-a, superoxide anion and nitrite by isolated alveolar macrophages in response to LPS (3 ~g/ml), PMA (10 nM) and/or zymosan (100 particles/cell) did not differ between vehicle- and capsaicin-pretreated rats. In conclusion, chronic neuropeptide depletion promoted by neonatal capsaicin treatment upregulates airways mast cells, which upon activation by antigen at adult ages, release large amounts of cytokines such as TNF-a and CINC-3 that accounts for the massive airways neutrophil infiltration. Parallel to this, we observed that capsaicinXXX pretreated rats present higher numbers of both immature and mature neutrophils in bone marrow, compared with control rats. This was accompanied by higher expression of mRNA for PPT-I and tackynin-NK1 receptor in bone marrow, suggesting that these proteins are up-regulated in rats chronically depleted of neuropeptides by neonatal capsaicin treatment / Doutorado / Farmacologia / Doutor em Farmacologia

Orientador: Gilberto de Nucci / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciencias Medicas / Made available in DSpace on 2018-08-04T03:29:56Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Mendes_GustavoDuarte_M.pdf: 15864596 bytes, checksum: 09970d46e36b10883e44d62f84b26e12 (MD5) Previous issue date: 2003 / Resumo: O objetivo deste estudo foi comparar a biodisponibilidade de duas formulações (Sigmasporin Microoral® da Novaquímica Divisão Nature's Plus, Brasil, formulação teste e Sandimmun Neoral® da Novartis Biociências S.A, Brasil, como formulação referência) de cápsula de ciclosporina em 24 voluntários sadios do sexo masculino. O estudo foi conduzido aberto, aleatorizado, dois períodos com intervalo de uma semana entre as doses. Amostras de sangue total foram obtidas em intervalos de até 12 horas após administração de cada cápsula de ciclosporina. As concentrações sanguíneos de ciclosporina foram quantificadas por Imunoensaio de Fluorescência Polarizada (FPIA) produzidos por Abbott e por radioimunoesnaio (RIA) produzidos por DiaSorin. Utilizando estes testes obtivemos as curvas de concentrações sanguíneos de ciclosporina e os parâmetros farmacocinéticos (ASC último, ASCinf, Cmax). A média geométrica e os intervalos de confiança de 90% para Microoral®/Neoral® foram94.5% (90.8-98.4%) para ASC último,93.8 % (89.7-98.1%) para ASC inf e 98.1% (94.5-101.8%) para Cmax no FPIA e foram 96.1% (91.9-100.6%) para ASC último,95.2 % (90.2-100.5%) para ASC inf, and 99.4% (96.4-102.4%) para Cmax no RIA. Considerando que os intervalos de 90% para as razões geométricas de Cmax, ASC último e ASC inf estão dentro dos intervalos estabelecidos pela Food and Drug Administration (80-125%), conclui-se que a formulação de cápsula de 100 mg de ciclosporina elaborada pelos laboratórios Nature's Plus Farmacêutica Ltda/Sigma Pharma é bioequivalente à cápsula de 100 mg de ciclosporina (Sandimmun Neoral® elaborada pelos Laboratórios Novartis Biociências S.A, tanto para a taxa como para extensão da absorção / Abstract: Objective: the aim of study was to compare the bioavailability of two cyclosprine capsule formulations (100 mg; SigmasporinMicrooral® from NovaquímicaDivisão Nature's Plus Farmaceutica Ltd., Brazil, as test formulation and Sandimmun Neoral® from Novartis Biociências S.A., Brazil, as reference formulation) in 24 healthy male volunteers. Methods: The study was conducted in an open, randomized, two-period crossover fashion with an one-week washout interval between doses. Blood samples were obtained over a 12-hour interval after each cyclosporine oral administration (2 capsules of 100 mg of each formulation). Cyclosporine blood concentrations were quantified by a Fluorescence Polarization Immunoassay (FPIA) System provided by Abbott Axsym® System and by Cyclo- Trac® SP - Whole Blood Radioimmuoassay (RIA) kit provided by DiaSorin®.Using these assays we obtained the time curves of cyclosporin blood concentration and the following pharmacokinetic parameters were also evaluated: AUClast, AUCinf, Cmax. Results: geometric mean and 90% confidence intervals (CI) of Microoral® /Neoral@percent ratio were 94.5% (90.8-98.4%) for AUC last, 93.8% (89.7-98.1%) for AUCinf,and 98.1% (94.5-101.8%) for Cmax asdetermined by using FPIA and were 96.1% (91.9-100.6%) for AUClast,95.2 % (90.2-100.5%) for AUCinf, and 99.4% (96.4-102.4%) for Cmaxas determined by using RIA. Conclusion: since the 90% CI for Cmax,AUClastand AUCinf ratio were within the 80-125% interval proposed by US-FDA, it is concluded that Sigmasporin Microoral@100 mg capsule formulation is bioequivalent to Sandimmun Neoral®100 mg capsule formulation for both the rate and the extent of absorption / Mestrado / Farmacologia / Mestre em Farmacologia

Orientador: Stephen Hyslo / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciencias Medicas / Made available in DSpace on 2018-08-04T18:20:37Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Linardi_Alessandra_D.pdf: 15128970 bytes, checksum: 4be731ddc0db6384f8f9441ec592a817 (MD5) Previous issue date: 2004 / Resumo: As peptidases desempenham um papel importante na modulação da atividade de peptídeos endógenos em situações normais e patológicas. Neste trabalho, investigamos a atividade e expressão de quatro peptidases (aminopeptidase M- APM, dipeptidil peptidase IV - DPP IV, endopeptidase neutra - NEP 24.11 e metaloendopeptidase 24.15 - MEP 24.15) em tecidos (aorta, cérebro, coração, fígado, pulmão e rim) de ratos em dois modelos de hipertensão: a hipertensão induzida pelo tratamento crônico de ratos com NliJ-nitro-L-arginina metil éster (L-NAME), um inibidor da biossíntese de óxido nítrico (NO), e em ratos espontaneamente hipertensos (SHR). A atividade enzimática foi avaliada por ensaios enzimáticos fluorométricos ou colorimétricos enquanto a expressão foi avaliadapor westernblotting.Em ratos tratadoscom L-NAME(80 mg kg-1day-1, p.o., durante 4 semanas), não houve alteração na atividade das quatro peptidases estudas em cérebro, coração, fígado, pulmão e rim (a NEP 24.11 foi detectada apenas no pulmão e rim). Entretanto, na aorta torácica, a atividade da APM mostrou um pequeno decréscimo enquanto as atividades da DPP IV e MEP 24.15 foram significativamente aumentadas. A expressão de DPP IV e MEP 24.15 também foi aumentada pelo tratamento com L-NAME.As atividades da MEP 24.15 recombinante ou DPP IV renal não foram afetadas pela incubação com L-NAME (1-100 fJM)ou nitroprussiato de sódio e 3-morfolinosidnonimina (1-100 fJM cada), ambos doadores de NO. A administração de N-[1-(R,S)-carboxi-3-fenilpropil]-Ala- Aib-Tyr-p-aminobenzoato (JA2), um inibidor de MEP 24.15/MEP 24.16, em ratos anestesiados com pentobarbital sódico aumentou a resposta hipotensora da bradicinina. No modelo SHR, a atividade da DPP IV foi aumentada no cérebro, enquanto que as atividades da MEP 24.15 e NEP 24.11 foram aumentadas no pulmão (MEP 24.15 e NEP 24.11) e rim (NEP 24.11). Por outro lado, as atividades da DPP IV e MEP 24.15 foram reduzidas na aorta torácica; a APM foi inalterada e a NEP 24.11 não foi detectada neste tecido. Western blotting para DPP IV e MEP 24.15 mostrou redução correspondente na expressão de ambas as enzimas na aorta e um aumento para DPP IV no cérebro; não houve alteração na expressão da MEP 24.15 no pulmão e nem da NEP 24.11 no pulmão ou rim. A administração do JA2 em SHR não alterou as respostas à bradicinina. Estes resultados indicam que há alterações na atividade e expressão das peptidases estudadas (exceto APM) nos dois modelos de hipertensão. Entretanto, a variabilidade nestas alterações entre os dois modelos sugere que a hipertensão per se não é a causa principal destas diferenças, mas que provavelmente resultam de alterações bioquímicas associadas a cada modelo e seletivas para cada peptidase / Abstract: Peptidases play an important role in modulating the activity of endogenous peptides in normal and pathological situations. In this work, we investigated the activity and expression of four peptidases (aminopeptidase M - APM, dipeptidyl peptidase IV - DPP IV, metalloendopeptidase 24.15 - MEP 24.15 and neutral endopeptidase 24.11 - NEP 24.11) in rat tissues (aorta, brain, heart, kidney, liver and lung) in two models of hypertension, namely, chronic treatment with NlV-nitro-Larginine methyl ester (L-NAME), a nitric oxide (NO) synthase inhibitor (80 mg kg-1 dai1, p.o. for 4 weeks), and spontaneously hypertensive rats (SHR). Enzymatic activity was assayed fluorometrically or colorimetrically and protein expression was assessed by westem blotting. Treatment with L-NAME did not significantly alter the activities of the four peptidases in brain, heart, kidney, liver and lung (NEP was detected only in kidney and lung). In contrast, in thoracic aorta, the activity of APM was slightly but significantly reduced whereas those of DPP IV and MEP 24.15 were markedly enhanced. Immunoblotting for DPP IV and MEP 24.15 showed increased expression in aortic tissue. Neither L-NAME (1-100 J.lM)nor the NO donors sodium nitroprusside and 3-morpholinosydnonimine (1-100 J.lMeach) had any consistent effect on the activity of recombinant MEP 24.15 or renal DPP IV. Administration of the MEP 24.15/MEP 24.16 inhibitor N-[1-(R,S)-carboXy-3- phenylpropyl]-Ala-Aib-Tyr-p-aminobenzoate (JA2) in pentobartibal-anesthetized rats significantly potentiated the hypotensive response to bradykinin. In SHR, the activity of DPP IV was significantly increased in brain, whereas MEP 24.15 and NEP 24.11 activities were markedly enhanced in lung (MEP 24.15 and NEP 24.11) and kidney (NEP 24.11). In contrast, the activities of DPP IV and MEP 24.15 were markedly decreased in aortic tissue; APM was unaltered and NEP 24.11 was not detected in this tissue. Immunoblotting for DPP IV and MEP 24.15 showed decreased expression in aortic tissue and increased expression of DPP IV in the brain; there was no alteration in the expression of MEP 24.15 in the lung or of NEP 24.11 in kidney and lung. The administration of JA2 to SHR did not alter the responses to bradykinin. These results indicate that there were alterations in the activity and expression of the peptidases studied (except for APM) in both models of hypertension. However, the different patterns of afterations seen between the two models suggests that the changes were not caused by the hypertension per se, but rather were probably the result of biochemical alterations associated with each model and selective for each peptidase / Doutorado / Doutor em Farmacologia

Dissertação (mestrado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciências Biológicas. Programa de Pós-Graduação em Farmacologia, Florianópolis, 2016 / Made available in DSpace on 2016-09-20T04:06:11Z (GMT). No. of bitstreams: 1 340473.pdf: 1268724 bytes, checksum: 77ed5fdf1bd0f6c64b04d5b8ca3cab41 (MD5) Previous issue date: 2016 / A participação do óxido nítrico (NO) proveniente da isoforma neuronal da óxido nítrico sintase (NOS-1) tem sido reconhecida como um fator importante em diversas doenças, como a sepse. A inibição de alta seletividade in vivo dessa isoforma pelo 7-nitroindazol (7-NI) melhora parâmetros como mortalidade e reatividade vascular na sepse. Porém este composto possui curto tempo de meia vida plasmático (~2 h), limitando seu uso. Com o objetivo de melhor evidenciar o papel da NOS-1 em condições patológicas, desenvolvemos uma formulação de nanoemulsão de óleo de rícino contendo 7-NI e, então, a caracterizamos pelos aspectos de tamanho, índice de polidispersão, teor e eficiência de encapsulação. Uma metodologia analítica para a detecção do composto na nanoemulsão foi desenvolvida e validada. Também, investigamos a estabilidade térmica e à luz no armazenamento durante 30 dias. O estudo de estabilidade mostrou que sistema de nanoemulsões de 7-NI é fotossensível, sendo mais estáveis quando mantidas a 25oC, na ausência de luz. Avaliamos a produção de NO de maneira indireta pela mensuração de nitrito em cultura de células, 48 horas após a inibição com 7-NI livre ou nanoemulsionado. A nanoemulsão de 7-NI reduziu a produção de NO pela NOS-1 de maneira prolongada em células de músculo liso A7r5. Não houve inibição pelo 7-NI livre. Nem o composto livre e nem a nanoemulsão de 7-NI apresentaram citotoxicidade. A nanoemulsão e o composto livre mostraram o mesmo perfil dose-resposta de inibição da produção de NO proveniente da NOS-1 de maneira direta, através da intensidade de fluorescência da sonda DAF-FM DA, seletiva para o NO. Por fim, testamos os efeitos do pré-tratamento com a nanoemulsão de 7-NI em ratos sépticos pelo modelo de ligadura e perfuração do ceco (CLP) e em camundongos com sepse por pneumonia. A nanoemulsão de 7-NI preveniu em 40% a mortalidade nos dois modelos, enquanto que o 7-NI livre preveniu na mesma proporção apenas no modelo de sepse por CLP. Nossos resultados mostram que nanoemulsões melhoram o tempo de ação do 7-NI, podendo ser ferramenta interessante para o estudo de doenças que envolvam o desequilíbrio da produção de NO pela NOS-1. <br> / Abstract : The role of nitric oxide (NO) derived fom the neuronal isoform of NO synthase (NOS-1) has been recognized as an important factor in several conditions such as sepsis. The inhibition of this isoform by a highly selective in vivo compound 7-nitroindazol (7-NI) improves parameters such as mortality and vascular reactivity in sepsis. However, 7-NI has a very short plasma half-life (~ 2 h), limiting its use. In order to provide a tool for better characterization of the role of NOS-1 in pathological conditions, we developed a formulation of castor oil nanoemulsion containing 7-NI and, then, characterized it by size, polydispersion index, content and encapsulation efficiency. An analytical method for detecting the compound in the nanoemulsion has been developed and validated. Also, we investigated the thermal and light stability for 30 days. The stability study showed that the system with the nanoemulsions of 7-NI is photosensitive, being more stable when maintained at 25°C in the absence of light. NO production was assessed indirectly by measuring nitrite in cell culture 48 hours after inhibition with free or nanoemulsion 7-NI. The nanoemulsion reduced NO production by NOS-1 in a long-lasting manner in A7r5 smooth muscle cells. NO inhibitory effect was induced by free 7-NI. Neither the free compound or the nanoemulsion and 7-NI showed cytotoxicity. The nanoemulsion and free compound showed the same profile of dose-response inhibition of NO production measured by the fluorescence intensity of DAF-FM probe, selective to NO. Finally, we tested the effects of pretreatment with the nanoemulsion 7-NI in septic rats by cecal ligation and puncture model (CLP) and in mice rendered septic by pneumonia. The nanoemulsion reduced the mortality by 40% mortality in both models, whereas the free 7-NI reduced it by the same amount only in the CLP model. Our results show that nanoemulsions extend the effective time of 7-NI, which may be an interesting tool to study diseases involving the imbalance of NO production by NOS-1.