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Hepatopatias fulminantes/febres hemorrágicas na Amazônia: revisão histórica, padrões de lesão hepática e diagnóstico etiológico / Fulminant hepatic failure/hemorrhagic fever in Amazon Basin: historical review, hepatic damage patterns and etiological diagnosis.Leonidas Braga Dias Junior 30 January 2006 (has links)
A presente análise das três séries históricas, compondo um total de 42 casos de hepatopatias fulminantes da região Amazônica, teve por objetivos o estudo de aspectos morfológicos e imuno-histoquímicos no diagnóstico diferencial entre febre amarela (FA), hepatite de Lábrea (HL) e de outras entidades. Visou, ainda, aprimorar o conhecimento de aspectos da morfogênese da morte hepatocelular, de eventual fibrose, relacionando-as aos padrões de regeneração e de lesões vasculares, conforme recentemente descrito na gênese de hepatopatias crônicas. Dentre o extenso painel de critérios histológicos aqui estudados, os padrões de morte hepatocelular e sua distribuição, incluindo corpos apoptóticos medio-zonais, assim como a balonização foram os achados mais característicos da FA, enquanto as células em mórula foram o principal achado na HL. Dezenove casos bem caracterizados (10 FA e 9 HL) foram então submetidos a estudos imuno-histoquímicos para a detecção dos antígenos da FA, AgHBs e antígeno do vírus da hepatite D (VHD), sendo então demonstrado que, em ambas as doenças, mas principalmente na HL, flebite, principalmente de ramos da veia porta, foi evidente e deve ter tido participação na patogênese do dano hepático, com extensa extinção parenquimatosa hepática e aproximação de espaços porta. O padrão de regeneração também foi marcante: nos casos de FA, um elevado índice de proliferação celular foi observado enquanto que, na HL, multinucleações e transformação pseudoacinar, associadas a depósitos portais de colágeno do tipo I e de fibras elásticas, foram encontrados. Concluindo, a pesquisa imuno-histoquímica de antígenos virais permitiu a caracterização etiológica dos casos destas importantes séries históricas de hepatopatias fulminantes da Amazônia, mesmo em amostras arquivadas em parafina por até sete décadas. Permitiu, ainda, o relato original de cinco casos de possível superposição de infecção pelos vírus da FA, VHB e/ou VHD. Dentre os aspectos histopatológicos, o quadro dominante na FA fulminante incluiu apoptose medio-zonal associada com flebite portal e um alto índice de proliferação celular, em pacientes sem evidência de dano hepático prévio. Por outro lado, a HL fulminante mostrou extensa necrose lítica de hepatócitos, associada à flebite portal e de veia hepática e à presença de células em mórula, em pacientes com evidências morfológicas de doença hepática crônica. / This study aimed at assessing morphological and immunohistochemical aspects useful for the differential diagnosis of yellow fever (YF), Labrea hepatitis (LH) and other entities by revisiting 42 fulminant hepatic failure cases, from three historical series from Amazon Basin. Additional studies were performed aiming at further understanding the morphogenesis of hepatocelular death, in relation to regeneration and fibrosis patterns and to vascular lesions, as recently described in chronic hepatic diseases. Among the extensive panel of histological criteria studied, liver cell death pattern and distribution, including midzonal apoptotic bodies, as well as hepatocelular ballooning degeneration were YF most characteristic findings, while morula cells were the major hint for LH. Five cases were herein suggested as coinfected with YF, HBV and/or HDV, a finding not previously reported. Nineteen well characterized cases (10 YF and 9 LH) were further submitted to immunohistochemical studies for YF antigen, HBsAg and Delta virus Ag. In both diseases, but mainly in LH, phlebitis, mainly of portal vein branches, was evident and closely related to the degree of hepatocellular damage, with severe hepatic parenchymal extinction and portal tract approximation. Regeneration pattern was also remarkable: in YF cases, a high hepatocellular proliferative index was detected whereas in LH, multinucleation and pseudo-acinar transformation, associated with portal type I collagen and elastic fiber deposition were found. In conclusion, immunohistochemical viral antigen detection yielded further etiological characterization of these important historical cases of fulminant hepatic failure from Amazon Basin, even in paraffin samples stored for up to seven decades. YF morphology depicted midzonal apoptosis, portal phlebitis and a high hepatocellular proliferative index, in patients without evidence of previous hepatic injury. On the other hand, fulminant LH showed extensive lytic hepatocellular necrosis, portal and hepatic vein phlebitis and the presence morula cells, in patients with morphological evidences of chronic liver disease.
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Ciência, nação e região: as doenças tropicais e o saneamento no Estado do Amazonas (1890-1930) / Science, nation and region: the tropical diseases and the sanitation in Amazonas State (1890-1930)Schweickardt, Júlio Cesar January 2009 (has links)
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Previous issue date: 2009 / O objetivo da tese é refletir sobre as atividades de saneamento no Estado do Amazonas no período da Primeira República no Brasil. O momento coincide com o auge e o declínio da economia da borracha, fazendo da Região um importante centro de repercussão da cultura e das idéias científicas. Analisamos como as idéias da medicina tropical foram apropriadas por médicos do Amazonas e como foram colocados em prática os princípios daquela disciplina, com o objetivo de realizar a profilaxia da febre amarela e da malária. Essas duas endemias mobilizaram os diversos atores em torno das teorias, que debatiam sobre os mecanismos de transmissão e sobre as formas de combater e controlar os vetores. Diferentes comissões atuaram no Amazonas nesse período, que envolveram: médicos,cientistas e engenheiros de Manaus, da Capital Federal e de Instituições internacionais. A única comissão que realizou o saneamento do interior do Estado foi o Serviço de Saneamento e Profilaxia Rural, que transformou o posto rural em posto itinerante. O saneamento do Amazonas foi proposto e realizado por estas diferentes comissões, que teve como pano de fundo o ambiente e o regime das águas: na capital os igarapés, e no interior a imensa rede de rios e lagos. O Amazonas, nesse período, constituiu-se, portanto, em uma espécie de laboratório para a pesquisa e a experimentação das idéias científicas correntes. A região, em relação à nação, afirmou a sua autonomia e a sua identidade, através da ação dos médicos e cientistas que refletiram sobre a o saneamento do Estado .
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Charges e discurso: o episódio da febre amarelaDominguez, Bruno Camarinha January 2012 (has links)
Submitted by Gentil Jeorgina (jeorgina@icict.fiocruz.br) on 2013-03-20T22:20:07Z
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Previous issue date: 2012 / Entre dezembro de 2007 e abril de 2008, a febre amarela praticamente dominou o noticiário nacional, ocupando posição de destaque — em notas e reportagens, mas também em editoriais e charges. Em meio à atualização dos números de casos suspeitos e de mortes de macacos, as publicações alardearam a ocorrência de uma epidemia de febre amarela e a volta do seu tipo urbano ao país, não registrado desde 1942. De forma geral, havia segundo os jornais uma ameaça pública, uma “epidemia”. Entendemos que os discursos midiáticos têm papel fundamental na reprodução, manutenção ou transformação das representações sociais na atualidade. Pertencente ao universo midiático, a charge também é vista como modo de produção e ressignificação de sentidos que interfere na produção e compreensão dos fatos, processos e relações. Nesse sentido, o presente trabalho objetiva analisar de que forma as charges publicadas na imprensa nacional construíram discursivamente o episódio da febre amarela e descrever os modos de mostrar das charges sobre febre amarela e suas condições de produção. / From December 2007 to April 2008, yellow fever practically dominated brazilian national news, occupying a prominent position - in notes and reports, but also in editorials and cartoons. In the midst of updating the number of suspected cases and deaths of monkeys, publications touted the occurrence of an epidemic of yellow fever and the return of its urban kind to the country, not seen since 1942. Overall, according to the newspapers, there was a public threat, an "epidemic". We understand that the media discourse play a fundamental role in reproduction, maintenance or transformation of social representations today. Belonging to the media universe, the cartoon is also seen as a mode of production and reframe the way that interferes with the production and comprehension of facts, processes and relationships. Accordingly, this paper aims to examine how the cartoons published in the national press discursively constructed the episode yellow fever and describe the way cartoons show the yellow fever and their production conditions.
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Perfil da imunidade humoral para o vírus da febre amarela em duas populações assintomáticas da zona rural de região de Mata Atlântica do estado de São Paulo, Brasil. / Humoral immunity profile against the yellow fever virus of two asymptomatic populations from the Atlantic Forest rural region of São Paulo state, Brazil.Lilia Mara Mesquita Dutra 11 December 2009 (has links)
A Febre Amarela (FA) é uma doença viral infecciosa, não contagiosa que pode se manifestar desde um quadro febril até a forma clássica íctero-hemorrágica, cujo agente etiológico é o vírus da febre amarela (VFA). A doença tem avançando para as regiões Sudeste e Sul com um aumento de 4 vezes no número de vítimas fatais. O presente trabalho teve como objetivos avaliar a possível circulação do vírus da febre amarela silvestre, através da detecção de anticorpos IgM por meio da técnica de MAC-ELISA, e anticorpos IgG, pelas técnicas de Inibição da hemaglutinação e Neutralização; detecção do genoma viral utilizando a técnica de RT-PCR no soro de indivíduos assintomáticos; bem como avaliar a proteção vacinal, por meio da técnica de neutralização em soros de indivíduos das zonas rurais do município de Jacupiranga e Teodoro Sampaio. Um total de 238 soros foram coletados, 152 (Jacupiranga) e 86 (Teodoro Sampaio). Foram detectados um total 15,9% (38/238) de anticorpos IH contra o vírus selvagem e/ou vacinal. Destes 13,16% (5/38) anticorpos IH foram provenientes dos soros de Jacupiranga e 86,84 (33/38) de Teodoro Sampaio. Anticorpos neutralizantes foram detectados em 34% (13N/38IH) dos IH reativos, destes 15,38% (2/13) foram oriundos deJacupiranga e 84,62% (11/13). A detecçção de anticorpos neutralizantes nos indivíduos de Jacupiranga levantam a necessidade de pesquisas futuras na busca do vírus da febre amarela nos seus reservatórios selvagens e vetores. Não houve a detecção do genoma viral por RTPCR nas duas populações, bem como a detecção de anticorpos IgM específicos, por meio das reações de MACELISA, o que evidencia a não circulação recente deste vírus na população estudada. O grau de imunizaçao na população de Teodoro Sampaio, com histórico de vacinação, por meio das reações de IH e Neutralização foi baixo, uma vez que somente 42,30% da população apresentou anticorpos inibidores da hemaglutinação e o grau de proteção pela reação de neutralização foi de apenas 33,33%. Este trabalho aponta não só para a necessidade de monitoramento pós-vacinal em áreas endêmicas de febre amarela, com indicação de vacinação, como também a necessidade de estudos epidemiológicos, uma vez que se detectou reação monotípica no teste do IH, além de anticorpos neutralizantes para o vírus selvagem da febre amarela em um indivíduo residente em município de risco para a febre amarela. / Yellow fever (YF) is an non-contagious infection disease. The clinical signs can be a nonspecific fever or the classical ictero-hemorrhagic form as a result of the Yellow Fever virus (YFV) infection. Considering the recent spread of the disease to the South and Southeast of Brazilian regions and the increased number of fatal cases, the aim of this study was to evaluate the possible circulation of the YFV, using the IgM enzyme-linked immnunosorbent assay (MACELISA) and Reverse transcriptase polymerase chain reaction (RT-PCR), as well as, to conduct a serological inquire and evaluate the protective vaccine response, by the hemagglutination inhibition test (HI) and serum neutralization test (SN), in the rural population of Jacupiranga and Teodoro Sampaio, located in the southern region of Brazil. A total of 238 serum samples were tested, 152 from Jacupirang and 86 from Teodoro Sampaio. Of the serum collected, 15,9% (38/238) were positive by HI, using wild and vaccine strains of YF, and out of these 13,16% (5/38) were from Jacupiranga and 86,84% (33/38) were from Teodoro Sampaio. Neutralizing antibodies were detected in 34% of the HI positive samples (13SN/38HI) and out of these 15,38% (2/13) were from Jacupiranga and 84,62% (11/13) were from Teodoro Sampaio. None of the samples were positive by MACELISA and RT-PCR indicating no evidences of recent virus circulation in the population analyzed in this study. However, the YF neutralizing antibodies detection in samples from Jacupiranga indicates the necessity of further researches in order to detect the YFV in its wild reservoirs and vectors. On the other hand, considering that 42,30% of the Teodoro Sampaio samples were positive by HI and out of these only 33,33% had neutralizing antibodies to the YFV, our results also pointed out to the importance of pos-vaccination protective immunity surveys, in order to evaluate the efficiency of the vaccines in endemic areas.
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Poder e saude : a republica, a febre amarela e a formação dos serviços sanitarios no Estado de São PauloTelarolli Junior, Rodolpho 16 June 1993 (has links)
Orientador : Ana Maria Canesqui / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciencias Medicas / Made available in DSpace on 2018-07-18T09:53:27Z (GMT). No. of bitstreams: 1
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Previous issue date: 1993 / Resumo: Este trabalho tem por objetivo a investigação das mediações da organização política, em sua vertente estado/municípios, e dos fundamentos tecnológicos das práticas sanitárias, na formação dos serviços de saúde no Estado de São Paulo, entre a Proclamação da República, em 1889, e 1911. A caracterização epidemiológica e demográfica do Estado no período mostrou que o fio condutor da ação sanitária estadual foi o combate às doenças epidêmicas, em especial a febre amarela, que repercutia no funcionamento da máquina administrativa, no cotidiano da população e nas atividades do complexo cafeeiro, desde a imigração subsidiada até a exportação da produção. O padrão tecnológico dos serviços sanitários, de ações de polícia médica executadas na forma de campanhas sanitárias, teve seus fundamentos discutidos a partir dos debates médicos em torno das teorias sobre as formas de propagação, tratamento e profilaxia da febre amarela, encerrados no início do século XX, com a aceitação da teoria da transmissão da doença pelo vetor. A formação e o funcionamento dos serviços sanitários no interior paulista apresentaram muitas particularidades em relação aos principais centros urbanos do Estado. As relações das lideranças políticas municipais e estaduais, sob o chamado pacto coronelista, suporte regional para a estrutura de poder oligarquizada da Primeira República, foi fundamental na conformação assumida pelos serviços sanitários no período. Através dos debates no Legislativo estadual, identificou-se o papel de aspectos do ideário republicano, como a defesa do princípio da autonomia municipal e das liberdades individuais, na gestão dos serviços de saúde. A influência desses princípios foi mais marcante no início do período republicano, até 1896, quando predominou um modelo municipalizante dos serviços sanitários; a partir de então, saiu vencedor o pragmatismo das oligarquias cafeeiras, em defesa de seus interesses políticos e econômicos imediatos, resultando na estadualização das ações sanitárias. / Abstract: In this dissertation examine both the mediation of the political organization between states and counties and the technological foundations of the sanitary practices that guided public health services in the state of São Paulo, Brazil, from 1889, Brazil's Republic Proclamation, to 1911. The epidemiological and demographic characterization of the state in that period revealed that state sanitary actions focused on the eradication of epidemic infectious diseases, particularly yellow fever, which tampered with the administrative- apparatus, the everyday life of the people, and the coffee business complex, which included the subsidized immigration and the production exportacion. The technological pattern of both the sanitary services and the medical intervention policies, which were put into practice as sanitary programs, was grounded on the results of medical panel discussions, ended in the beginning of the twentieth century, on theories that advocated the transmission of the disease by the vector. The set up and operation of sanitary services in the interior of the State of São Paulo had many peculiarities that differed them from the ones in the main urban centers of the state. The region had an important role in the political and economical organization of that time. Its role in the formulation of the support and management models of sanitary services was quite influential. The political and municipal leadership relation under what has been called the pacto coronelista (a pact made by powerful land owners) - the regional support for the First Republic oligarchic political power structure - was then crucial to the shaping of the sanitary services. The analysis of the debates in the State Legislative Assembly made it possible to identify the role of some aspects of the republican ideais, e.g., the defense of municipal autonomy and individual rights, in the definition of the support and management models of sanitary practices. The influence of these principies was more evident from the beginning of the republican period to 1896, when a municipal model of sanitary services prevailed. From this period on, the pragmatism of the coffee oligarchic group, which defended their own political and economical interests, triumphed. / Doutorado / Saude Coletiva / Doutor em Medicina
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[pt] DESENVOLVIMENTO DE MÉTODOS ESPECTROFLURIOMÉTRICOS PARA A DETERMINAÇÃO DE ERITROMICINA E CANAMICINA E APLICABILIDADE NA VACINA CONTRA A FEBRE AMARELA / [en] DEVELOPMENT OF SPECTROFLUORIMETRIC METHODS FOR DETERMINATION OF ERYTHROMYCIN AND KANAMYCIN AND THEIR APPLICATION IN THE YELLOW FEVER VACCINEVIRGINIA DE LOURDES MENDES FINETE 27 December 2005 (has links)
[pt] Os antibióticos eritromicina e canamicina, pertencentes às
classes dos
macrolídeos e aminoglicosídeos respectivamente, têm sua
importância como
agentes preservativos no processo de preparação e durante
o processo de
utilização da vacina contra a febre amarela - apresentação
de cinco doses -
produzida no Instituto de Tecnologia em Imunobiológicos,
Bio-Manguinhos,
FIOCRUZ, RJ. Este trabalho propõe apresentar duas novas
abordagens para a
determinação espectrofluorimétrica desses antibióticos,
considerando o
desempenho, inclusive com relação à seletividade, na
análise dessa matriz
específica (vacina). Um estudo preliminar do comportamento
luminescente
(fosforescência e fluorescência) dessas substâncias foi
realizado em diferentes
condições experimentais a fim de encontrar as que
permitissem o
desenvolvimento dos métodos analíticos. Para a
eritromicina, que não apresentou
luminescência nativa, foi utilizado um procedimento de
derivação fotoquímica de
soluções do analito preparadas em meio contendo ácido
sulfúrico. Como resultado
obteve-se um foto-produto que apresentou fluorescência em
412/465 nm. As
condições experimentais foram otimizadas visando a
maximização desse sinal
fluorescente. Nesse caso, foram estudados o tempo de
irradiação com UV, o tipo e
a concentração do ácido utilizado, o tempo e a temperatura
de aquecimento. O
método foi parcialmente validado apresentando limites de
detecção e de
quantificação iguais a 0,25 ug mL-1 e 0,85 ug mL-1
respectivamente. A faixa
linear do método estendeu-se até 200 ug mL-1 e os
parâmetros de precisão e
robustez foram bastante satisfatórios. O método foi
aplicado na análise de uma
simulação de vacina contra a febre amarela e na análise de
medicamentos
comerciais com um percentual de recuperação entre 98,2 e
105,2 %. A
metodologia desenvolvida para a canamicina, que também não
apresentou fluorescência natural, baseou-se na reação de
oxirredução deste composto com o
Ce (IV) produzindo o Ce (III), que é uma espécie
fortemente fluorescente
(255/360 nm). As intensidades dos sinais fluorescentes
medidos no par
excitação/emissão do Ce (III) foram diretamente
proporcionais às concentrações
de canamicina. As condições para a realização da reação
foram estudadas,
avaliando a quantidade de Ce (IV), a concentração e tipo
de ácido usado no meio
reacional e o tempo e temperatura de aquecimento. A ampla
faixa linear (até 1000
ug mL-1) foi obtida, com limites de detecção e
quantificação de 1,22 ug mL-1 e
4,08 ug mL-1, respectivamente. O percentual de recuperação
obtido na análise da
vacina diluída foi de 109,8 % e em amostra diluída de
urina enriquecida com o
analito foi de 103,4 %. / [en] The antibiotics erythromycin and kanamycin, members of the
macrolide and
aminoglycoside classes respectively, have their importance
as preservative agents
for the preparation process and during the using of the
yellow fever vaccine, five
doses presentation, produced in Technology on
Immunobiologicals Institute, Bio-
Manguinhos, FIOCRUZ, RJ. In this work two new approaches
for the
spectrofluorimetric determination of these antibiotics are
presented, taking into
consideration their selectivity performance for this
specific matrix (vaccine). A
preliminary study was performed to evaluate the
luminescent behavior
(phosphorescence and fluorescence) of these substances in
different experimental
conditions aiming to find the best ones that would lead to
the development of the
analytical methods. For erythromycin, which does not
present native
luminescence, a photochemical derivatization was employed
using analite
solutions prepared in sulfuric acid. As a result, a photo-
product was obtained,
which presented fluorescence at 412/465 nm. The
experimental conditions were
optimized aiming the maximization of the fluorescent
signal. In this case, the
studied parameters were the UV irradiation time, the type
and concentration of the
acid utilized, and the time and temperature used for the
heating step. The method
was partially validated, indicating limits of detection
and quantification of
0.25 ug mL-1 and 0.85 ug mL-1, respectively. The linear
dynamic range of the
method extended up to 200 ug mL-1 and the parameters
related to precision and
robustness were very satisfactory. The method was applied
in the analysis of a
simulated yellow fever vaccine and in commercial
pharmaceutical formulations.
Recovery percent between 98.2 and 105.2 % were achieved.
The methodology
developed for kanamycin, which also do not presented
natural fluorescence, was
based on the oxirreduction reaction of this compound with
Ce (IV), producing Ce
(III), a strongly fluorescent species (255/360 nm). The
fluorescence intensities, measured in the
excitation/emission pair of Ce (III), was directly
proportional to
the kanamycin concentration. The reaction conditions were
studied by the
evaluation of the amount of Ce (IV), the type and
concentration of the acid
utilized in reactional medium and heating time and
temperature. Large linear
range (up to 1000 ug mL-1) was obtained, with detection
and quantification limits
of 1.22 ug mL-1 and 4.08 ug mL-1, respectively. The
recovery percent obtained in
the analysis of a diluted vaccine was 109.8 % while the
recovery achieved for
diluted spiked urine was 103.4 %.
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Produção e atividade antiviral das isoformas da fosfolipase A2 crotoxina B recombinante / Production and antiviral activity of phospholipase A2 crotoxin B recombinant isoformsRusso, Raquel Rinaldi 10 October 2017 (has links)
O vírus da dengue (DENV) e o vírus da febre amarela (YFV) (gênero Flavivirus, família Flaviviridae) representam importantes arbovírus causadores de doenças em humanos que afetam as regiões tropicais e sub-tropicais do planeta, somando milhões de infectados anualmente. Embora exista uma vacina contra o YFV, ainda são notificados muitos casos de febre amarela nas regiões endêmicas das Américas e, principalmente, da África. Recentemente, foi licenciada uma vacina contra o DENV, mas seu uso ainda é bastante restrito. Não existem agentes terapêuticos para tratamento da infecção contra nenhum desses vírus. Portanto, estudos para identificação de fármacos para combaterem a infecção pelos DENV e YFV são de suma importância. Nosso grupo descreveu a ação antiviral da fosfolipase A2 crotoxina B (PLA2-CB) da serpente Crotalus durissus terrificus, a qual tem ação diretamente sobre o envelope de DENV e YFV. A meta principal deste trabalho foi a produção das duas isoformas da PLA2-CB (CB1 e CB2) recombinantes e avaliação de suas atividades antivirais, a fim de contribuir com a prospecção de novas drogas antivirais. Para alcançar tais propósitos, as sequências codificadoras das isoformas foram otimizadas para expressão em sistema procarioto, quimicamente sintetizadas e enzimaticamente inseridas no vetor de expressão pGS-21a. Os plasmídeos gerados foram utilizados para transformar células E. coli das cepas BL21(DE3), Origami B(DE3) e ArcticExpress (DE3). As proteínas recombinantes foram expressas juntamente com uma cauda de polihistidina (6xHis) no extremo C-terminal (CB1+6xHis_opt e CB2+6xHis_opt). Ambas as proteínas foram reconhecidas por anticorpos produzidos contra a PLA2-CB in natura em ensaio de Western Blot. Considerando que as proteínas foram expressas de forma insolúvel, a purificação foi realizada em sistema de cromatografia líquida (FPLC), utilizando coluna com resina de afinidade por níquel sob condições desnaturantes, utilizando ureia como agente solubilizador. As proteínas foram renaturadas na própria coluna de níquel (on-column) durante a purificação, utilizando um gradiente decrescente de ureia (6-0M - 120ml - 0,1ml/min) e o detergente CHAPS como agente estabilizador. As proteínas CB1+6xHis_opt e CB2+6xHis_opt em ensaio colorimétrico de hidrólise de fosfatidilcolina apresentaram atividade fosfolipásica, indicando preservação do sítio catalítico. Em ensaio virucida contra o DENV-2, YFV e outros dois vírus envelopados: Vírus Chikungunya (CHIKV) e vírus Zika (ZIKV), as proteínas recombinantes reduziram a formação de placas de lise exibindo índices de seletividade na média de 0,6. As proteínas CB1+6xHis_opt e CB2+6xHis_opt podem vir a ser um importante modelo na prospecção de novas drogas antivirais e como ferramenta no estudo do mecanismo de replicação viral. / Dengue virus (DENV) and yellow fever virus (YFV) (genus Flavivirus, family Flaviviridae) are important arboviruses that cause diseases in humans affecting the tropical and subtropical regions of the planet with millions of infected annually. Although there is a vaccine against YFV, many cases of yellow fever are still reported in the endemic regions of the Americas, and especially in Africa. A vaccine against DENV has recently been licensed, but its use is still quite restricted. There are no therapeutic agents to treat the infection against any of these viruses. Therefore, studies to identify drugs to combat DENV and YFV infection are of extreme importance. Our group described the antiviral action of the phospholipase A2 crotoxin B (PLA2-CB) isolated from Crotalus durissus terrificus, which acts directly on the envelope of DENV and YFV. The aim of this study was to produce the two recombinant PLA2-CB (CB1 and CB2) isoforms and evaluate their antiviral activities in order to contribute to the prospection of new antiviral drugs. To achieve such purposes, the coding sequences of the isoforms were optimized for prokaryotic expression system, chemically synthesized and enzymatically inserted into the pGS-21a vector. The plasmids generated were used to transform E. coli cells from BL21 (DE3), Origami B (DE3) and ArcticExpress (DE3) strains. Recombinant proteins were expressed tagged with a polyhistidine (6xHis) tail at the C-terminus (CB1+6xHis_opt and CB2+6xHis_opt). Both proteins were recognized by antibodies raised against native PLA2-CB in Western blot assay. Considering that the proteins were expressed in insoluble form, purification was performed in liquid chromatography system (FPLC) using nickel resin column under denaturing conditions, using urea as the solubilizing agent. The proteins were renatured on-column during purification procedure using a decreasing gradient of urea (6-0M - 120ml - 0,1ml/min) and CHAPS as a stabilizing agent. CB1+6xHis_opt and CB2+6xHis_opt proteins showed phospholipase activity in a colorimetric assay based on phosphatidylcholine hydrolysis, indicating preservation of the catalytic site. In a virucidal assay against DENV-2, YFV and two other enveloped viruses: Chikungunya virus (CHIKV) and Zika virus (ZIKV), the recombinant proteins reduced the plaques of lysis formation exhibiting selectivity indices at the mean of 0.6. The CB1+6xHis_opt and CB2+6xHis_opt proteins could be important models for the prospection of new antiviral drugs and as tools for the study of the mechanism of viral replication.
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Filogeografia da febre amarela na América do Sul / Phylogeography of the Yellow Fever in South AmericaSouza, Renato Pereira de 11 April 2013 (has links)
Os Flavivírus são vírus de 40 50 nm de diâmetro, com formas esféricas e RNA de fita simples, com sentido positivo e aproximadamente 11 kb de comprimento. O Vírus da Febre Amarela, protótipo do grupo, é o agente causador da Febre Amarela, uma antiga doença que causou epidemias generalizadas na África, Américas do Norte e do Sul e Europa do século XVII ao início do século XX, e depois ressurgiu nas últimas décadas na África sub- saariana e América do Sul tropical. O presente trabalho busca a reconstrução da transmissão da Febre Amarela na América do Sul, no tempo e espaço, em especial, considerando a provável influência das populações humanas, primatas não humanos e mosquitos, na evolução e distribuição das linhagens genéticas de Febre Amarela, aplicando modelos de inferência Bayesiana para análises filogenéticas e filogeográficas e testando hipóteses de distribuição geográfica com modelagem de nicho ecológico. Os dados dão poucas evidências de que as estratégias de vacinação vigentes tenham efetivamente colaborado para a diminuição da ocorrência de Febre Amarela, indicando possíveis erros na estratégia de vacinação. A partir da análise Coalescente da população viral de Febre Amarela, a população viral apresentou um decréscimo importante iniciado em meados dos anos 90. A análise filogeográfica sugere um padrão geral de transmissibilidade Source-Sink destacando a região amazônica como fonte de diversidade para as outras áreas estudadas, com uma estrutura filogeográfica secundária em ondas. Assim, as introduções do vírus em áreas fora da amazônia tem ocorrência aleatória e podem ser ligadas temporalmente e geograficamente ao norte da America do Sul. Os modelos de distribuição geográfica corroboram esse padrão e indicam uma área possível para circulação da Febre Amarela ampla, englobando diversos ecótonos. Os resultados indicam um possível efeito em longo prazo da vacinação atuando diretamente sobre a evolução e dinâmica filogenética da Febre Amarela e sugere que monitorar a evolução do vírus da Febre Amarela é uma estratégia válida para compreender sua distribuição geográfica e evidenciar mecanismos complexos de transmissão e introdução. Por sua vez, os modelos de Nicho Ecológico mostraram ser ferramentas adequadas para calcular o risco da doença em determinadas áreas, sem sua ocorrência prévia, contribuindo como um modelo preditivos para orgãos de Vigilância prepararem suas estratégias de prevenção e controle no caso de possível introdução de patógenos / The flaviviruses are viruses of 40-50 nm in diameter, with spherical shaped and single-strand RNA with positive sense and approximately 11 kb in length. The Yellow Fever virus is the prototype of the group and the causative agent of Yellow Fever, a disease which caused widespread epidemics in Africa, North America, South America and Europe of the seventeenth century to the early twentieth century. The disease reemerged in recent decades in sub-Saharan Africa and tropical South America. This manuscript aims to reconstruct, in time and space, the transmission of yellow fever in South America, through the applying of a Bayesian inference model, considering the probable influence of human populations, nonhuman primates and mosquitoes on the evolution and distribution of Yellow Fever genetic lineages. Distributional pattern hypothesis will be tested by computational modeling of ecological niche. The data provide little evidence that current vaccination strategies have effectively contributed to reducing the occurrence of Yellow Fever, indicating possible errors in the vaccination strategy. From the analysis of the Yellow Fever population Coalescence, the viral population showed a significant decrease started in the mid-90s. The phylogeographic analysis suggests a general pattern of transmissibility \"Source-Sink\" highlighting the Amazon region as a source of diversity for the other areas studied, with a secondary phylogeographic wave like structure. Thus, the introductions of the virus into areas outside the Amazon has random occurrence and can be linked temporally and geographically to the north of South America The geographical distribution models corroborate this pattern and indicate a broad possible area for Yellow Fever circulation, encompassing many ecotones. The results indicate a possible long-term effect of vaccination acting directly on the evolution and phylogenetic dynamics of Yellow Fever and suggests that monitoring the evolution of the Yellow Fever virus is a valid strategy to understand the geographical distribution and highlight complex transmission mechanisms and spatial movements. In turn Ecological Niche models showed as an appropriate tool to calculate disease risk in certain areas without previous occurrence of the disease, working as a predictive model for Surveillance institutions prepare their strategies for prevention and control in the case of possible pathogen introduction
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A reconfigura??o urbana de Campinas no contexto das epidemias de Febre Amarela no final do S?culo XIX (1880-1900) / The urban reconfiguration of Campinas during the period of the Yellow Fever epidemics in the end XIX century (1880-1900)Krogh, Daniela da Silva Santos 25 February 2013 (has links)
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Previous issue date: 2013-02-25 / The objective of this study is to investigate the urban reconfiguration of the City of Campinas in the period between 1880 and 1900. During the big yellow fever epidemics in 1889, the city was in poor sanitary conditions, lack of water and waste supply infrastructure and also with some flooding areas. Those conditions made this city a favorable place to epidemics diffusion in the urban area. In the period between 1893 and 1990, the actions of sanitary authorities were strengthen in fighting against epidemics and sanitary improvements among urban area promoting a urban reconfiguration of Campinas. The study evaluate this reconfiguration analyzing two different moments: from 1893 to the beginning of 1896, when there was activities from the city sanitary authorities, the "Intend?ncia Municipal" and from July 1896 to 1900, when the activities were under the responsibility of the Sanitary Commission of S?o Paulo State lead by Doctor Em?lio Ribas and also the Sanitary Commission lead by the sanitary Engineer Saturnino de Brito. / Este trabalho tem como objetivo investigar a reconfigura??o urbana de Campinas, no per?odo entre 1880 e 1900. Quando da grande epidemia de febre amarela ocorrida em 1889, a cidade se encontrava em prec?rias condi??es sanit?rias, com falta de redes de infraestrutura de abastecimento domiciliar de ?gua e canaliza??o de esgoto sanit?rio e ainda, com a presen?a de ?reas alagadi?as, condi??es estas que tornaram a cidade um local prop?cio para a difus?o de epidemias em sua ?rea urbana. No per?odo entre 1893 e 1900, a atua??o das autoridades sanit?rias foi conduzida com maior rigor no combate ?s epidemias e no saneamento do meio urbano promovendo uma reconfigura??o urbana de Campinas. O trabalho analisa esta reconfigura??o atrav?s do estudo do per?odo que foi dividido em dois momentos: de 1893 at? os primeiros meses de 1896, onde h? a atua??o das autoridades sanit?rias municipais, ou seja, a Intend?ncia Municipal e engenheiros da C?mara; e de julho de 1896 at? 1900, onde h? a atua??o da Comiss?o Sanit?ria do Estado de S?o Paulo, chefiada pelo m?dico Em?lio Ribas e da Comiss?o de Saneamento, sob a responsabilidade do engenheiro sanit?rio Saturnino de Brito.
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Os debates médicos sobre as epidemias de febre amarela em Campinas (1889-1890) / Medical debates about epidemics of yellow fever in Campinas (1889-1890)Silva, Felipe Nascimento da 05 October 2012 (has links)
Durante os anos de 1889 e 1890 uma forte epidemia se abateu sobre Campinas. Alguns médicos diziam ser a temida febre amarela, outros, no entanto, não concordavam com o diagnóstico e supunham ser alguma outra das tantas febres que reinavam na cidade. E a doença voltaria a se manifestar em 1890, colocando na pauta do dia antigas discussões. Mesmo considerando que as epidemias que se abateram em Campinas foram realmente de febre amarela, as discórdias entre os médicos evidenciavam o quanto alguns aspectos da doença ainda eram desconhecidos da comunidade médica; essas desavenças sugerem também que, ao contrário do que indica a bibliografia sobre a história da cidade de Campinas, nem sempre a classe médica daquela cidade superou suas discórdias particulares em favor da erradicação da doença na cidade. O tema da febre amarela em Campinas é pouco comentado na bibliografia sobre a história daquela cidade, e, em tais exceções, a perspectiva das narrações sempre recaia sobre os esforços de médicos e sanitaristas em vencer a doença e livrar Campinas dos infortúnios da febre amarela, prevalecendo sempre a figura de determinados personagens. Dessa maneira, ao invés de seguir essa linha costumeira e considerar apenas os esforços considerados efetivamente válidos no combate à febre amarela, interessa-nos mais observar, no próprio contexto, quais eram as percepções que aqueles clínicos possuíam sobre a doença e como essas percepções ditavam suas práticas médicas. / During the Years of 1889 and 1890, a swift epidemic outbrake stroke the city of Campinas. Even though some physicians argued that it was in fact the \"dreaded\" Yellow Fever, many doctors disagreed, assuming it was just one of the many other illnesses that had previously hunted the town. By the year of 1890, the disease was back in the hospitals and in the medical agenda. Even considering that the epidemics that fell upon Campinas in the course of those years were endeed Yellow Fever outbrakes, these opposing diagnostics clearly show that some aspects of this condition were still unknown to the medical community. They also suggest that, contrary to what the majority of the bibliography concearning Campinas\'s history states, the medical community of that area wasn\'t always able to overcome personal issues in favor of the erradication of this disease. The topic of the Yellow fever outbrake in Campinas has never been sufficiently explored by historians. In the few cases where that happened, the narratives exlusively focus on the medical and hygienical efforts to overcome the epidemic burst of the fever in the city, prevailing the image and accomplishes of some specific characters. Therefore, instead of seeing this through tradicional angles, considering just the approved measures taken back then to fight the disease, it\'s more in our interest to explore what perceptions these physicians had about this particular ilness and, more importantly, how these perceptions defined their medical practice.
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