Durante as duas últimas décadas ocorreram progressos substanciais a respeito do entendimento da patofisiologia da cicatrização de feridas, e novas terapias têm sido desenvolvidas. Contudo, acelerar o processo de reparo continua sendo um desafio no campo da cirurgia plástica reconstrutiva. Tratamentos inovadores para melhorar a cicatrização e a regeneração cutânea são necessários e é nesse âmbito que as pesquisas com as células-troncos mesenquimais (MSCs) vêm ganhando espaço na última década. As MSCs foram estudadas em diversas áreas no que diz respeito ao seu efeito sobre a cicatrização de lesões e suas aplicações clínicas. O uso de MSCs, em feridas agudas ou crônicas, resultam em uma aceleração no processo cicatricial, em decorrência do impacto benéfico que elas trazem para todas as fases da cicatrização (inflamatória, proliferativa e remodelamento). O momento da aplicação das MSCs nas feridas e o número ideal de aplicações ainda não são bem conhecidos; alguns autores citam em sua metodologia o seu uso, mas dificilmente eles justificam ou concluem sobre as aplicações. Nessas condições, o presente trabalho visa apresentar os resultados da aplicação de células-tronco mesenquimais derivadas do tecido adiposo (ADSCs), em duas fases consecutivas da cicatrização – uma delas na fase inflamatória e outra na proliferativa. Além disso, irá indicar em qual dessas duas fases a aplicação de ADSCs é mais eficaz. Paralelamente a isso, definir se duas doses são mais eficientes do que apenas uma para promover a cicatrização durante sete dias de observação. Para tanto, os resultados foram divididos em dois artigos. O primeiro compara o momento da aplicação das células, ao passo que o segundo compara a eficiência de duas doses em relação a uma, ambos em um período de avaliação de sete dias. Portanto, no primeiro artigo o objetivo foi avaliar a ação das ADSCs no tratamento de feridas cutâneas agudas a fim de entender se o momento da aplicação das células resulta em diferença na cicatrização nos primeiros sete dias de lesão. As células-tronco foram isoladas de tecido adiposos de camundongos C57Bl/6 GFP+. Para tanto, foram utilizados 49 camundongos C57Bl/6 divididos em quatro grupos: Grupo I (GI/controle; n= 14); Grupo II (GII; n= 14): ADSCs injetadas ao no d0; Grupo III (GIII; n= 14): ADSCs injetadas no 3° dia após a indução da lesão (d3) e Grupo IV (GIV; n= 7): ADSCs injetadas no 5° dia após a indução da lesão (d5). As avaliações clínicas ocorreram nos dias 0, 3, 5 e 7 e as histopatológicas nos dias 5 e 7. Na metodologia proposta podemos observar que, em apenas sete dias de avaliação, o uso de ADSCs aumenta a vascularização, a formação de tecido de granulação, a colagenização e incrementa o número de folículos pilosos. Além disso, o momento da aplicação das células não repercutiu diferenças significativas na fase inflamatória e proliferativa do processo de cicatrização de feridas cutâneas. Contudo, os diferentes momentos de aplicação das ADSCs resultaram em efeitos benéficos para aspectos importantes dos mecanismos da cicatrização como a presença de tecido de granulação, a proliferação vascular, a colagenização e a presença de folículos pilosos, porém distintos. Assim, a escolha do momento de aplicação dependerá da necessidade de cada paciente e da intenção do médico quando estudos clínicos forem realizados. No segundo artigo o objetivo foi avaliar a ação das ADSCs no tratamento de feridas cutâneas agudas a fim de entender se duas aplicações consecutivas de células promovem a cicatrização nos primeiros sete dias de lesão. Para o experimento foram utilizados 49 camundongos C57Bl/6 divididos em quatro grupos: (G0/controle; n = 14); (G1D; n = 14): ADSCs injetadas no d0; Grupo 3D (G3D; n = 14): ADSCs injetadas no d0 e no d3; Grupo 5D (G5D; n = 7): ADSCs injetadas no d0 e no d5. As avaliações clínicas ocorreram nos dias 0, 3, 5 e 7 e as histopatológicas nos dias 5 e 7. Nesse estudo pode-se observar que o uso de duas doses de ADSCs aumenta a proliferação celular e vascular e uma aplicação incrementa o número de folículos pilosos em apenas sete dias de avaliação. Assim, é possível concluir que utilizar duas doses é mais eficiente do que uma quando avaliamos os sete primeiros dias de cicatrização. Além disso, não há diferença no momento de aplicação da segunda dose de ADSCs quando em um período de observação de 7d. / During the last two decades, there has been substantial progress regarding the understanding of the pathophysiology of wound healing, and new therapies were developed. However, in the field of reconstructive plastic surgery acceleration the repair process remains a challenge. It is necessary innovative treatments to improve healing and skin regeneration. In this context that research on mesenchymal stem cell (MSCs) have been gaining ground in the last decade in the field of reconstructive plastic surgery. MSCs studies in different areas with respect to their effect on the healing of injuries and their clinical applications. The use of MSCs in acute or chronic wounds, result in an acceleration of the healing process, due to the beneficial impact they bring to all stages of healing (inflammatory, proliferative and remodeling). The time of application of MSCs in the wounds and the ideal number of doses is still not very clear, and although some authors cite in their methodology use, they hardly justify or conclude about the applications. Under these conditions, the results of mesenchymal stem cells derived from adipose tissue (ADSCs) applied in two consecutive stages of healing - one in the inflammatory phase and another in proliferative. Also, indicate which of these two phases ADSCs of the application is more efficient. Parallel to this, determine whether two doses are more effective in promoting healing of a seven-day observation period. Therefore, the results were divided into two articles. The first compares the time of application of the cells, and the second article compares the efficiency of two doses instead one, both in seven days evaluation period. Therefore, the results were divided into two articles. The first compares the time of application of the cells, and the second article compares the efficiency of two doses instead one, both in seven days evaluation period. Therefore, in the first article we evaluated the action of ADSCs in the treatment of acute wounds in order to understand if the time of application of the cells results in difference in healing the first seven days of injury. The stem cells were isolated from adipose tissue of C57BL / 6 mice GFP +. Thus, we used 49 mice C57BL / 6 divided into four groups: Group I (GI / control, n = 14); Group II (GII; n = 14): ADSCs injected to the d0; Group III (GIII; n = 14): ADSCs injected on the 3rd day after the induction of injury (d3) and Group IV (GIV; n = 7): ADSCs injected on day 5 after induction of skin defect (d5). Clinical evaluations were performed on days 0, 3, 5 and 7 and the histopathology on days 5 and 7. In the proposed methodology, can be seen that the use of ADSCs increased vascularization, formation of granulation tissue, collagen deposition and increases the number of hair follicles in just seven days of evaluation. In addition, the time of application of the cells did not affect significant differences in the inflammatory and the proliferative phase of wound healing skin. However, the use of different periods ADSCs resulting in beneficial effects on important aspects of wound healing mechanisms. Such as the presence of granulation tissue, vascular proliferation, collagen deposition and the presence of hair follicles; but distinct. So, choose the time of application will depend on the needs of each patient and the doctor's intention. In the second article, we evaluated the action of ADSCs in the treatment of acute wounds in order to understand if two consecutive applications of cells promote healing in the first seven days of injury. For the experiment were used 49 C57BL / 6 mice divided into four groups: (G0 / control; n = 14); (G1D, n = 14): injected into the ADSCs d0; 3D Group (G3D; n = 14): ADSCs injected into the d0 and d3; 5D group (G5d; n = 7): ADSCs injected on d0 and d5. Clinical evaluations were performed on days 0, 3, 5 and 7 and the histopathology on days 5 and 7. In this study, it can be seen that the use of two doses of ADSCs enhances cell proliferation and vascular application and increases the number of follicles hair in just seven days of evaluation. Thus, we conclude that use two doses is more efficient than when evaluating the first seven days of healing. In addition, there is no difference in the time of the second treatment of ADSCs when an observation period of 7d.

Tese (doutorado)—Universidade de Brasília, Programa de Pós-Graduação em Ciências Médicas, 2013. / Submitted by Alaíde Gonçalves dos Santos (alaide@unb.br) on 2013-07-09T14:52:59Z No. of bitstreams: 1 2013_LeonardodeCastroDuraes.pdf: 72511577 bytes, checksum: e0c0b9fca29eddd2b49e420ea1b8a90e (MD5) / Approved for entry into archive by Guimaraes Jacqueline(jacqueline.guimaraes@bce.unb.br) on 2013-07-10T11:57:11Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2013_LeonardodeCastroDuraes.pdf: 72511577 bytes, checksum: e0c0b9fca29eddd2b49e420ea1b8a90e (MD5) / Made available in DSpace on 2013-07-10T11:57:12Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2013_LeonardodeCastroDuraes.pdf: 72511577 bytes, checksum: e0c0b9fca29eddd2b49e420ea1b8a90e (MD5) / Introdução: A cirurgia laparoscópica apresenta diversas vantagens em relação a cirurgia aberta, sendo cada vez mais utilizada. Para prover exposição cirúrgica é utilizado pneumoperitônio com dióxido de carbono (CO2), gerando aumento da pressão abdominal. O CO2 é utilizado em diversas especialidades médicas para melhorar o processo cicatricial. Os possíveis efeitos benéficos deste gás na cirurgia laparoscópica motivou este estudo. Objetivo: Verificar os efeitos do CO2 e da pressão abdominal na cicatrização de anastomoses colônicas em ratos. Material e método: 70 ratos foram distribuídos em 4 grupos. Foi realizada uma ressecção de segmento colônico proximal à reflexão peritoneal com anastomose colônica término-terminal vídeo-assistida, utilizando um novo modelo experimental, com pneumoperitônio nas pressões de 5 mmHg (grupo I), 12 mmHg (grupo II) ou 20 mmHg (grupo III). A mesma operação foi realizada por laparotomia (grupo IV). Os animais dos grupos I, II e III foram divididos em subgrupos para uso de CO2 ou hélio para confecção do pneumoperitônio. Os animais foram mortos após 7 dias. Foram avaliados os seguintes parâmetros: óbito, peso, achados intra-operatórios, pressão de ruptura da anastomose, força de ruptura da anastomose, características histopatológicas, histomorfometria do colágeno, dosagem de hidroxiprolina, fator de crescimento vascular endotelial (VEGF) e densidade de microvasos (CD31). Resultados: A pressão e os gases não influenciaram nos óbitos, nos achados intraoperatórios, na pressão de ruptura da anastomose, na força de ruptura da anastomose, na histopatologia, na dosagem de hidroxiprolina, no VEGF e no CD31. Há uma maior perda de peso na pressão de 20 mmHg em relação a cirurgia aberta (p=0,037). Na histomorfometria, o CO2 aumentou o percentual de colágeno em relação ao hélio na pressão de 20 mmHg (p=0,004). Conclusão: O CO2 não influenciou na cicatrização de anastomoses em cólon esquerdo de ratos nas pressões de 5 mmHg e 12 mmHg. Na pressão de 20 mmHg, o CO2 aumentou o percentual do colágeno na região anastomótica em relação ao hélio. _______________________________________________________________________________________ ABSTRACT / Introduction: Laparoscopic surgery has several advantages over open surgery, being increasingly used. Pneumoperitoneum with carbon dioxide (CO2) is used to provide surgical exposure, increasing abdominal pressure. CO2 is used in various medical specialties to improve the healing process. The possibility of beneficial effects caused by this gas in laparoscopic surgery motivated this study. Objective: To investigate the effects of CO2 and abdominal pressure on the healing of colonic anastomosis in rats. Methods: 70 rats were divided in 4 groups. We performed a video-assisted resection of a colonic segment proximal to the peritoneal reflection with an endto- end colonic anastomosis, using a new experimental model, at pneumoperitoneum pressures of 5 mmHg (group I), 12 mmHg (group II) or 20 mmHg (group III). The same operation was performed by laparotomy (group IV). The animals in groups I, II and III were divided into subgroups to use CO2 or helium for pneumoperitoneum. The animals were killed after 7 days. We evaluated the following parameters: mortality, weight, intraoperative findings, bursting pressure, breaking strength, histopathologic features, histomorphometry of collagen, serum hydroxyproline, vascular endothelial growth factor (VEGF) and microvessel density (CD31). Results: Neither the pressure nor the gas influenced in mortality, intraoperative findings, bursting pressure, breaking strength, histopathology, VEGF and CD31. There was a greater weight loss in pneumoperitoneum pressure of 20 mmHg compared to open surgery (p=0.037). In histomorphometry, the CO2 increased the percentage of collagen in relation to helium at a pressure of 20 mmHg (p=0.004). Conclusion: The CO2 had no effect on anastomotic healing in the left colon of rats at pressures of 5 mmHg and 12 mmHg. At a pressure of 20 mmHg, CO2 increased the percentage of collagen in the anastomosis compared to helium.

Dissertação (mestrado)—Universidade de Brasília, Faculdade de Medicina, 2006. / Submitted by Diogo Trindade Fóis (diogo_fois@hotmail.com) on 2009-11-06T19:28:31Z No. of bitstreams: 1 dissertação total01.pdf: 714792 bytes, checksum: fdfd3d22be39f9a1cbc64666ef7e68ae (MD5) / Approved for entry into archive by Gomes Neide(nagomes2005@gmail.com) on 2010-01-15T18:14:51Z (GMT) No. of bitstreams: 1 dissertação total01.pdf: 714792 bytes, checksum: fdfd3d22be39f9a1cbc64666ef7e68ae (MD5) / Made available in DSpace on 2010-01-15T18:14:51Z (GMT). No. of bitstreams: 1 dissertação total01.pdf: 714792 bytes, checksum: fdfd3d22be39f9a1cbc64666ef7e68ae (MD5) Previous issue date: 2006 / O diclofenaco sódico apresenta efeitos deletérios sobre a cicatrização e em vários estudos foi demonstrada a eficácia do Fator XIII da coagulação sanguínea sobre a cicatrização nas mais variadas situações no pós-operatório. Este estudo foi idealizado no intuito de avaliar se o Fator XIII da coagulação sanguínea poderia bloquear estes efeitos deletérios provocados pelo diclofenaco sódico. Este ensaio experimental randomizado duplo cego foi realizado com a utilização de 96 ratos da linhagem Winstar. Os animais foram distribuídos em quatro grupos de 24 animais de acordo com a utilização da drogas em estudo: DS (diclofenaco sódico), DSF (diclofenaco e Fator XIII da coagulação), SF (solução de NaCl a 0,9%) e F (Fator XIII da coagulação). Estes grupos foram realocados em três novos grupos cada de acordo com o dia de eutanásia (terceiro, sétimo e décimo - quarto) ficando cada grupo então com oito animais. Foi realizada incisão de 04 cm no dorso à esquerda com posterior sutura em pontos separados. A cicatrização foi avaliada quanto aos aspectos microscópicos do processo inflamatório cicatricial assim como a variação da resistência tênsil da ferida operatória no terceiro, sétimo e décimo - quarto dia de pós-operatório. Os resultados foram submetidos à análise estatística, tendo sido utilizado os testes Mann-Whitney Rank Sum Test e o t-test. Foi considerado estatisticamente significante p < 0,05. O Fator XIII da coagulação sanguínea diminuiu o edema no pós-operatório no 3º. dpo em relação ao grupo controle (p=0,015). O grupo do Fator XIII da coagulação sanguínea apresentou no 3º. dpo aumento da resistência tênsil em relação ao grupo do diclofenaco sódico (p=0,024). O grupo do diclofenaco sódico apresentou diferença estatisticamente significante com maior presença de leucócitos polimorfonucleares no sétimo dia de pós-operatório (p=0,04; p=0,01; p=0,04), maior presença de células mononucleares (p=0,021; p=0,021; p=0,021), maior neoformação vascular (p=0,038; p=<0,01; p=0,021) e maior quantidade de tecido de granulação (p=0,03; p=0,001; p=0,03) no décimo quarto dia de pós-operatório em relação aos demais grupos avaliados. O Fator XIII da coagulação sanguínea foi eficaz em bloquear parte dos efeitos deletérios na cicatrização provocados pelo diclofenaco sódico. ____________________________________________________________________________________ ABSTRACT / Diclofenac presents deleterious effects on the healing process and many studies showed effectiveness of Factor XIII in the healing of different kinds of post-operatory situations. The aim of this study was to detect if Factor XIII could block this pernicious effects in the healing process promoted by diclofenac. 96 rats was randomized in four groups: group DS (diclofenac), group DSF (diclofenac + Factor XIII), group SF (NaCl 0,9%) and group F (Factor XIII). Each group was divided again in another three groups of eight animals. Four groups of each initial group were killed in the third, seventh and fourteenth postoperatory day. The microscopic inflammatory healing process and the breaking strength of wound was examined in the third, seventh and fourteenth postoperatory day. The Mann-Whitney Rank Sum Test and the T-test was utilized in the statistical analysis. It was considered statistical significant p < 0,05. In third post-operatory day the Factor XIII decreased edema in relation to the control group (p=0,015) and increased the breaking strength in relation to the diclofenac group (p=0,024). In the seventh post-operatory day diclofenac increased the number of polymorfonuclear cells in relation to the other groups: DSF (p=0,04), SF (p=0,01) and F (p=0,04). In the fourteenth post-operatory day diclofenac increased the number of mononuclear cells in relation to the other groups: DSF (p=0,021), SF (p=0,021) and F (p=0,021). Also diclofenac increased vascular neofomation in relation to the other groups respectively (p=0,038; p=<0,01 and p<0,021) and granulation tissue (p=0,03; p=0,001 and p=0,03). The coagulation Factor XIII was efficient in prevent part of deleterious diclofenac effects in the normal healing process.

Dissertação (mestrado)—Universidade de Brasília, Faculdade de Medicina, 2006. / Submitted by Kathryn Cardim Araujo (kathryn.cardim@gmail.com) on 2009-11-17T11:37:49Z No. of bitstreams: 1 2006_Romulo Medeiros de Almeida.pdf: 2844435 bytes, checksum: 0249d83e5f51a5ada4a34b3b6db441ac (MD5) / Approved for entry into archive by Carolina Campos(carolinacamposmaia@gmail.com) on 2009-11-25T17:50:56Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2006_Romulo Medeiros de Almeida.pdf: 2844435 bytes, checksum: 0249d83e5f51a5ada4a34b3b6db441ac (MD5) / Made available in DSpace on 2009-11-25T17:50:56Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2006_Romulo Medeiros de Almeida.pdf: 2844435 bytes, checksum: 0249d83e5f51a5ada4a34b3b6db441ac (MD5) Previous issue date: 2006-03-15 / O óxido nítrico (ON) tem sido motivo de investigação em diversas áreas da Medicina, incluindo sua influência sobre a cicatrização de feridas, especialmente a anastomose intestinal. Os estudos têm mostrado divergência sobre o seu efeito, ora beneficiando, ora prejudicando a cicatrização. O suposto prejuízo seria causado pelo excesso de ON produzido pela indução da enzima óxido nítrico sintase induzível (ONSi) que é ativada e expressa em condições especiais como trauma e sepse, assim como na cicatrização, sendo secretada pelos macrófagos no ambiente da ferida. A inibição da enzima ONSi pela S-metilisotiouréia (SMT) tem sido associada a diversos efeitos in vitro e in vivo. Para avaliar o efeito da inibição da ONSi pela SMT sobre a cicatrização de anastomoses colônicas em ratos foram utilizados 60 ratos Wistar, machos, com peso corporal entre 248 e 360 g, distribuídos em dois grupos, controle e estudo cujos animais receberam 50mg/Kg de peso de SMT de 12/12 horas por 72 horas. Os grupos de 30 animais foram divididos em três subgrupos de 10 animais cada e submetidos a eutanásia no terceiro, sétimo e décimo quarto dias de pós-operatório (DPO). As variáveis analisadas foram a evolução clínica e dos pesos, a avaliação da cavidade abdominal à eutanásia, a análise da força tênsil de ruptura da anastomose, a dosagem de nitrito/nitrato no soro e a avaliação histopatológica. Das variáveis analisadas, foi observado que no terceiro dia havia mais neoformação vascular (p=0,006) e granulação (p=0,002) no grupo estudo e mais infiltrado mononuclear (p=0,041) no grupo controle, já no décimo quarto dia houve mais edema no grupo controle (p=0,008). Para todas as outras variáveis, inclusive a evolução clínica e a avaliação pós-operatória da cavidade não houve significância estatística. Conclui-se, portanto, que nas condições em que esta pesquisa foi realizada, a inibição da ONSi pela SMT interferiu acelerando o processo da cicatrização de anastomose intestinal no 3º DPO. _____________________________________________________________________________________ ABSTRACT / The nitric oxide (NO) has been reason investigation in several areas of the Medicine for, including his influence on the wound healing, especially the intestinal anastomosis. The studies have been showing divergence on his effect, some times benefitting, other times harming the wound healing. The assumption damage would be caused by the excess of NO produced by the induction of the enzyme nitric oxide sintase inducible (iNOS) that is activated and expressed in special conditions as trauma and sepsis, as well as in the healing of wounds, being secreted by the macrophages in the atmosphere of the wound. The inhibition of the enzyme ONSi for S-methylisothiourea (SMT) has been associated to several effects in vitro and in vivo. To evaluate the effect of the inhibition of iNOS for SMT about the healing of colonic anastomosis in 60 rats Wistar, males, with corporal weight between 248 and 360 g, distributed in two groups, control and study whose animals received 50mg/Kg of weight of SMT of 12/12 hours for 72 hours. The groups of 30 animals were divided in three subgroups of 10 animals each and submitted the euthanasia in the third, seventh and fourteenth postoperative days (POD). The analyzed variables were the clinical evolution and of the weights, the evaluation of the abdominal cavity to the euthanasia, the analysis of the tensil force of rupture of the anastomosis, the nitrite/nitrate dosage in the serum and the histopatologic evaluation. Of the analyzed variables, it was observed that in the third day there was more vascular neoformation (p=0,006) and granulation (p=0,002) in the study group and more mononuclear infiltrated (p=0,041) in the control group, already in the fourteenth day there was more edema in the control group (p=0,008). For all the other variables, besides the clinical evolution and the postoperative evaluation of the cavity didn't have statistical significancy. It is ended, therefore, that in the conditions in that this research was accomplished, the inhibition of ONSi for SMT interfered accelerating the process of the healing of intestinal anastomosis in the 3rd DPO.

Dissertação (mestrado)—Universidade de Brasília, Faculdade de Medicina, 2010. / Submitted by claudia teixeira (claudiadtx@gmail.com) on 2011-06-21T21:21:15Z No. of bitstreams: 1 DISSERTAÇÃO - Efeitos do pneumoperitônio com dióxido de carbono na cicatrização de anastomoses colônicas - Estudo experimental em ratos.pdf: 34003635 bytes, checksum: a50124f4f8e888d48c252069244ab334 (MD5) / Rejected by Marília Freitas(marilia@bce.unb.br), reason: Cláudia, O Arquivo que você inseriu não está protegido e o nome do arquivo está errado. on 2011-06-22T13:16:16Z (GMT) / Submitted by claudia teixeira (claudiadtx@gmail.com) on 2011-07-01T16:42:45Z No. of bitstreams: 1 2010_LeonardodeCastroDuraes.pdf: 34003635 bytes, checksum: a50124f4f8e888d48c252069244ab334 (MD5) / Rejected by Guilherme Lourenço Machado(gui.admin@gmail.com), reason: Arquivo sem senha. Por favor, substitua o arquivo e submeta novamente. on 2011-07-01T16:45:14Z (GMT) / Submitted by claudia teixeira (claudiadtx@gmail.com) on 2011-07-01T17:04:11Z No. of bitstreams: 1 2010_LeonardodeCastroDuraes.pdf: 34003356 bytes, checksum: 079620b0786d783e86f7c76066ade690 (MD5) / Approved for entry into archive by Guilherme Lourenço Machado(gui.admin@gmail.com) on 2011-07-15T12:42:02Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2010_LeonardodeCastroDuraes.pdf: 34003356 bytes, checksum: 079620b0786d783e86f7c76066ade690 (MD5) / Made available in DSpace on 2011-07-15T12:42:02Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2010_LeonardodeCastroDuraes.pdf: 34003356 bytes, checksum: 079620b0786d783e86f7c76066ade690 (MD5) / A cirurgia laparoscópica vem sendo cada vez mais realizada pelo cirurgião colorretal. Este procedimento utiliza o pneumoperitônio com dióxido de carbono (CO2) para prover exposição cirúrgica adequada da cavidade abdominal. A complicação mais temida na cirurgia colorretal é o comprometimento da cicatrização da anastomose colônica e consequente fístula anastomótica. O objetivo deste estudo é avaliar os possíveis efeitos do pneumoperitônio com CO2 na cicatrização de anastomose colônica. Foram utilizados 120 ratos da linhagem Wistar. Em todos os animais foi realizada uma ressecção de segmento colônico proximal à reflexão peritoneal, e anastomose colônica término-terminal. Os animais foram distribuídos em quatro grupos: I – animais submetidos a pneumoperitônio antes da laparotomia; II – animais submetidos a pneumoperitônio após a laparorrafia; III – animais submetidos a pneumoperitônio antes da laparotomia e após a laparorrafia; IV – grupo controle. O pneumoperitônio foi realizado por 30 minutos na pressão de 5 mmHg. Os grupos foram divididos em 3 subgrupos para eutanásia no 3º, 7º e 14º dia pós-operatório (DPO). Foram estudados evolução clínica, peso, força de ruptura da anastomose, características histopatológicas, histomorfometria do colágeno e dosagem de hidroxiprolina. Houve 6 óbitos, sendo 4 do grupo I (p=0,097). Não houve diferença estatística entre os grupos na evolução do peso dos animais submetidos a eutanásia no mesmo DPO (3ºDPO p=0,719; 7ºDPO p=0,195; 14ºDPO p=0,651). Não houve diferença na força de ruptura da anastomose entre os grupos no mesmo DPO (3ºDPO p=0,165; 7ºDPO p=0,219; 14ºDPO p=0,539). No estudo histopatológico, no 3ºDPO houve menor hemorragia no grupo II comparado com o grupo controle (p=0,003). No 7ºDPO houve menor infiltrado mononuclear (p=0,006), maior infiltrado polimorfonuclear (p=0,001) e maior necrose focal (p=0,001) no grupo II comparado com o grupo controle. No 14ºDPO houve menor fibrose do grupo II comparado com o grupo controle (p<0,001). No estudo histomorfométrico houve uma diminuição do colágeno nos grupos I e III em relação ao grupo controle no 7ºDPO (p<0,0001), e um aumento do colágeno nos grupos I e II em relação ao grupo controle no 14ºDPO (p<0,001). Não houve diferença estatística na dosagem da hidroxiprolina entre os grupos de animais submetidos a eutanásia no 3ºDPO (p=0,152), 7ºDPO (p=0,913) e 14ºDPO (p=0,981). Os resultados do estudo permitem concluir que o pneumoperitônio com CO2 na pressão de 5 mmHg não prejudica a cicatrização das anastomoses colônicas em ratos. _________________________________________________________________________________ ABSTRACT / Laparoscopic surgery is increasingly being performed by the colorectal surgeon. This procedure uses the pneumoperitoneum with carbon dioxide (CO2) to provide adequate surgical exposure of the abdominal cavity. The most feared complication in colorectal surgery is impaired of colonic anastomosis healing and subsequent anastomotic fistula. The aim of this study is to evaluate the possible effects of CO2 pneumoperitoneum on the healing of colonic anastomosis. A total of 120 Wistar rats were used. In all animals a colon segment proximal to the peritoneal reflection was resected, and an end-to-end anastomosis was performed. The animals were divided into four groups: I - animals submitted to pneumoperitoneum before laparotomy; II - animals submitted to pneumoperitoneum after laparorrhaphy; III - animals submitted to pneumoperitoneum before laparotomy and after laparorrhaphy; IV - control group. Pneumoperitoneum was performed for 30 minutes at a pressure of 5 mmHg. The groups were divided into three subgroups for euthanasia in the 3rd, 7th and 14th postoperative day (POD). We studied clinical evolution, weight, breaking strength of the anastomosis, histopathological features, histomorphometry of collagen and hydroxyproline concentration. There were six deaths, four of group I (p=0.097). There was no statistical difference among the groups in the evolution of the weight of animals euthanized in the same postoperative day (3rd POD p=0.719; 7th POD p=0.195; 14th POD p=0.651). There was no difference in breaking strength of the anastomosis among the groups in the same POD (3rd POD p=0.165; 7th POD p=0.219; 14th POD p=0.539). In histopathological features, on the 3rd postoperative day there was less bleeding in group II compared to the control group (p = 0.003). On the 7th postoperative day there was less infiltration of mononuclear cell (p=0.006), increased infiltration of polymorphonuclear cell (p=0.001) and increased necrosis (p=0.001) in group II compared with the control group. On the 14th postoperative day there was less fibrosis in group II compared to the control group (p<0.001). In the histomorphometric study there was a decrease of collagen in groups I and III compared to the control group on the 7th postoperative day (p<0.001), and an increase of collagen in groups I and II compared to the control group on the 14th POD (p<0.001). There was no statistical difference in the dosage of hydroxyproline among the groups of animals euthanized at the 3rd POD (p=0.152), 7th POD (p = 0.913) and 14 th POD (p = 0.981). The study results indicate that the CO2 pneumoperitoneum pressure of 5 mmHg does not impair the healing of colonic anastomosis in rats.

CoordenaÃÃo de AperfeiÃoamento de Pessoal de NÃvel Superior / O lÃtex da planta medicinal Calotropis procera (Apocynaceae) à um produto quÃmico complexo, constituÃdo de uma diversidade de molÃculas e tem sido amplamente utilizado na medicina popular sobre enfermidades dermatolÃgicas. O potencial da fraÃÃo de proteÃnas do lÃtex (PL) em induzir danos celulares foi avaliado pelos testes de MTT e LDH. AlÃm disso, PL foi utilizada no preparo de uma biomembrana associada ao poli (Ãlcool vinÃlico) (BioMem PVA/PL 0,2% e 1%). As propriedades fÃsico-quÃmica das membranas controle (PVA 1%) e teste (BioMem PVA/PL 1%) foram avaliadas atravÃs da espectroscopia de absorÃÃo na regiÃo do infravermelho com transformada de Fourier (FTIR) e anÃlise termogravimÃtrica (TGA). O efeito das proteÃnas do lÃtex na cicatrizaÃÃo foi investigado apÃs induÃÃo de feridas incisionais ou excisionais no dorso de camundongos, seguido da implantaÃÃo da BioMem PVA/PL 0,2% ou 1%. O processo cicatricial foi avaliado de acordo com os parÃmetros: anÃlise macroscÃpica (induÃÃo da neoformaÃÃo tecidual em feridas incisionais e edema, hiperemia, reduÃÃo da Ãrea e reepitelizaÃÃo em feridas excisionais); microscÃpica (degranulaÃÃo de mastÃcitos, edema, infiltrado de leucÃcitos, nÃmero de fibroblastos e colagÃnese). Marcadores e mediadores da fase inflamatÃria (MPO, nitrito, IL-1&#946; e TNF-&#945;) foram avaliados em feridas incisionais e excisionais. O efeito da BioMem PVA/PL sobre a densidade microvascular foi avaliado em feridas incisionais. O possÃvel efeito de PL em estimular diretamente macrÃfagos foi investigado em uma cultura de cÃlulas. PL nÃo apresentou in vitro citotoxicidade sobre neutrÃfilos humanos, visto pela baixa atividade de LDH e a alta viabilidade dos neutrÃfilos pelo teste do MTT. A anÃlises fÃsico-quÃmicas demonstraram que nÃo ocorreram interaÃÃes fortes do PVA com PL, jà que nÃo foi observada a formaÃÃo de novas bandas ou o deslocamento destas. AlÃm disso, a solubilizaÃÃo destes compostos tornou a BioMem PVA/PL termicamente mais estÃvel. Nos modelos experimentais de cicatrizaÃÃo, as anÃlises macroscÃpicas demonstraram que BioMem PVA/PL 0,2% e 1% induziram a neoformaÃÃo tecidual em feridas incisionais nos dias 2, 7 e 14 apÃs a implantaÃÃo das membranas. Entretanto, nÃo interferiu na densidade da microvascularizaÃÃo ao tecido neoformado. Em feridas excisionais, BioMem PVA/PL 0,2% induziu aumento do edema, mas nÃo interferiu na hiperemia na fase inflamatÃria. Na fase proliferativa da cicatrizaÃÃo, acelerou a reduÃÃo da Ãrea das feridas e favoreceu a reepitelizaÃÃo. A anÃlise microscÃpica de feridas incisionais e excisionais evidenciou que BioMem PVA/PL 0,2% ou 1% conferiu um estÃmulo à degranulaÃÃo de mastÃcitos, edema e migraÃÃo de leucÃcitos na fase inflamatÃria do processo cicatricial. Na fase proliferativa foi evidenciado aumento na populaÃÃo de fibroblastos e colagÃnese. A anÃlise da reepitelizaÃÃo de feridas excisionais evidenciou um aumento da espessura do epitÃlio neoformado. A implantaÃÃo da BioMem PVA/PL 0,2% aumentou os nÃveis de marcadores e mediadores da resposta inflamatÃria, tais como MPO, nitrito, IL-1&#946; e TNF-&#945;. MacrÃfagos cultivados de camundongos e estimulados com PL foram induzidos a liberaÃÃo de TNF-&#61537; e IL-1&#946;. A anÃlise integrada de todos os resultados sugerem que as proteÃnas do lÃtex (PL) atuam significativamente na fase inflamatÃria da cicatrizaÃÃo, o que parece influenciar diretamente as fases subseqÃentes do processo cicatricial. / The latex of the medicinal plant Calotropis procera (Apocynaceae) is a complex chemical, consisting of a variety of molecules and has been widely used in folk medicine on skin diseases. The potential of the latex proteins fraction (LP) in induce cell damage was assessed by MTT and LDH tests. Moreover, LP was used to prepare a biomembrana associated with poly (vinyl alcohol) (BioMem PVA/PL 0,2% and 1%).The physical-chemical properties of control (PVA 1%) and test (BioMem PVA/PL 1%) were assessed by infrared spectroscopy (FTIR) and thermogravimetric (TGA) analysis. The effect of laticifers proteins at healing was investigated after induction of incision or excision wounds on the back of mices, followed by implantation of BioMem PVA/PL 0,2% or 1%. Healing process was evaluated by the parameters: macroscopic analyses (induction of tissue neoformation of incisional wounds and edema, hyperemia, area reduction and re-epithelialization of excision wounds); microscopic (mast cell degranulation, edema, leucocyte infiltrate, number of fibroblasts and collagenesis). Inflammatory markers and mediators (MPO, nitrite, IL-1&#946; e TNF-&#945;) were evaluated in incision and excision wounds. Microvessel density was evaluated in incision wounds. The possible effect of soluble protein fraction (LP) to directly stimulate macrophages was investigated in a cell culture. PL shows no cytotoxicity in vitro in human neutrophils, since the low activity of LDH and high vibility of neutrophils by MTT test. The physico-chemical analysis showed that no strong interaction with PVA and LP occurred, since was not observed the formation of new bands or the displacement of these. Futhermore, the solubility of these compounds became the BioMem PVA/PL more thermally stable. At experimental healing models, macroscopic analyses showed that BioMem PVA/PL 0,2% e 1% leads tissue neoformation in incisional wounds at the 2, 7 and 14 days after membrane implantation. However, no effect on the microvascular density to neoformed tisse of incisional wounds were seen. At excisional wounds, BioMem PVA/PL 0,2% induce increase of edema, but not hyperemia at inflammatory phase. Moreover, accelerated the reduction in the wound area and an improved re-epithelialization at proliferative phase of wound healing. Microscopic analysis of incisional and excisional wounds showed that BioMem PVA/PL 0,2% or 1% lead a stimulus to mast cell degranulation, edema, leucocyte migration at inflammatory phase of the cicatricial process. At the proliferative phase, was evidenced an increase in the population of fibroblasts and collagenesis. Re-epithelialization of excisional wounds showed an increased thickness of the newly formed epithelium. BioMem PVA/PL 0,2% implantation increased the levels of markers and mediators of the inflammatory response, such as MPO, nitrite, IL-1&#946; and TNF-&#945;. Culture mouse macrophages stimulated with PL were induced to release of TNF-&#61537; e IL-1&#946;. Integrated analysis of all results suggest that PL act significantly in the inflammatory phase of healing, which seems to directly influence the subsequent phases of the healing process.

Durante as duas últimas décadas ocorreram progressos substanciais a respeito do entendimento da patofisiologia da cicatrização de feridas, e novas terapias têm sido desenvolvidas. Contudo, acelerar o processo de reparo continua sendo um desafio no campo da cirurgia plástica reconstrutiva. Tratamentos inovadores para melhorar a cicatrização e a regeneração cutânea são necessários e é nesse âmbito que as pesquisas com as células-troncos mesenquimais (MSCs) vêm ganhando espaço na última década. As MSCs foram estudadas em diversas áreas no que diz respeito ao seu efeito sobre a cicatrização de lesões e suas aplicações clínicas. O uso de MSCs, em feridas agudas ou crônicas, resultam em uma aceleração no processo cicatricial, em decorrência do impacto benéfico que elas trazem para todas as fases da cicatrização (inflamatória, proliferativa e remodelamento). O momento da aplicação das MSCs nas feridas e o número ideal de aplicações ainda não são bem conhecidos; alguns autores citam em sua metodologia o seu uso, mas dificilmente eles justificam ou concluem sobre as aplicações. Nessas condições, o presente trabalho visa apresentar os resultados da aplicação de células-tronco mesenquimais derivadas do tecido adiposo (ADSCs), em duas fases consecutivas da cicatrização – uma delas na fase inflamatória e outra na proliferativa. Além disso, irá indicar em qual dessas duas fases a aplicação de ADSCs é mais eficaz. Paralelamente a isso, definir se duas doses são mais eficientes do que apenas uma para promover a cicatrização durante sete dias de observação. Para tanto, os resultados foram divididos em dois artigos. O primeiro compara o momento da aplicação das células, ao passo que o segundo compara a eficiência de duas doses em relação a uma, ambos em um período de avaliação de sete dias. Portanto, no primeiro artigo o objetivo foi avaliar a ação das ADSCs no tratamento de feridas cutâneas agudas a fim de entender se o momento da aplicação das células resulta em diferença na cicatrização nos primeiros sete dias de lesão. As células-tronco foram isoladas de tecido adiposos de camundongos C57Bl/6 GFP+. Para tanto, foram utilizados 49 camundongos C57Bl/6 divididos em quatro grupos: Grupo I (GI/controle; n= 14); Grupo II (GII; n= 14): ADSCs injetadas ao no d0; Grupo III (GIII; n= 14): ADSCs injetadas no 3° dia após a indução da lesão (d3) e Grupo IV (GIV; n= 7): ADSCs injetadas no 5° dia após a indução da lesão (d5). As avaliações clínicas ocorreram nos dias 0, 3, 5 e 7 e as histopatológicas nos dias 5 e 7. Na metodologia proposta podemos observar que, em apenas sete dias de avaliação, o uso de ADSCs aumenta a vascularização, a formação de tecido de granulação, a colagenização e incrementa o número de folículos pilosos. Além disso, o momento da aplicação das células não repercutiu diferenças significativas na fase inflamatória e proliferativa do processo de cicatrização de feridas cutâneas. Contudo, os diferentes momentos de aplicação das ADSCs resultaram em efeitos benéficos para aspectos importantes dos mecanismos da cicatrização como a presença de tecido de granulação, a proliferação vascular, a colagenização e a presença de folículos pilosos, porém distintos. Assim, a escolha do momento de aplicação dependerá da necessidade de cada paciente e da intenção do médico quando estudos clínicos forem realizados. No segundo artigo o objetivo foi avaliar a ação das ADSCs no tratamento de feridas cutâneas agudas a fim de entender se duas aplicações consecutivas de células promovem a cicatrização nos primeiros sete dias de lesão. Para o experimento foram utilizados 49 camundongos C57Bl/6 divididos em quatro grupos: (G0/controle; n = 14); (G1D; n = 14): ADSCs injetadas no d0; Grupo 3D (G3D; n = 14): ADSCs injetadas no d0 e no d3; Grupo 5D (G5D; n = 7): ADSCs injetadas no d0 e no d5. As avaliações clínicas ocorreram nos dias 0, 3, 5 e 7 e as histopatológicas nos dias 5 e 7. Nesse estudo pode-se observar que o uso de duas doses de ADSCs aumenta a proliferação celular e vascular e uma aplicação incrementa o número de folículos pilosos em apenas sete dias de avaliação. Assim, é possível concluir que utilizar duas doses é mais eficiente do que uma quando avaliamos os sete primeiros dias de cicatrização. Além disso, não há diferença no momento de aplicação da segunda dose de ADSCs quando em um período de observação de 7d. / During the last two decades, there has been substantial progress regarding the understanding of the pathophysiology of wound healing, and new therapies were developed. However, in the field of reconstructive plastic surgery acceleration the repair process remains a challenge. It is necessary innovative treatments to improve healing and skin regeneration. In this context that research on mesenchymal stem cell (MSCs) have been gaining ground in the last decade in the field of reconstructive plastic surgery. MSCs studies in different areas with respect to their effect on the healing of injuries and their clinical applications. The use of MSCs in acute or chronic wounds, result in an acceleration of the healing process, due to the beneficial impact they bring to all stages of healing (inflammatory, proliferative and remodeling). The time of application of MSCs in the wounds and the ideal number of doses is still not very clear, and although some authors cite in their methodology use, they hardly justify or conclude about the applications. Under these conditions, the results of mesenchymal stem cells derived from adipose tissue (ADSCs) applied in two consecutive stages of healing - one in the inflammatory phase and another in proliferative. Also, indicate which of these two phases ADSCs of the application is more efficient. Parallel to this, determine whether two doses are more effective in promoting healing of a seven-day observation period. Therefore, the results were divided into two articles. The first compares the time of application of the cells, and the second article compares the efficiency of two doses instead one, both in seven days evaluation period. Therefore, the results were divided into two articles. The first compares the time of application of the cells, and the second article compares the efficiency of two doses instead one, both in seven days evaluation period. Therefore, in the first article we evaluated the action of ADSCs in the treatment of acute wounds in order to understand if the time of application of the cells results in difference in healing the first seven days of injury. The stem cells were isolated from adipose tissue of C57BL / 6 mice GFP +. Thus, we used 49 mice C57BL / 6 divided into four groups: Group I (GI / control, n = 14); Group II (GII; n = 14): ADSCs injected to the d0; Group III (GIII; n = 14): ADSCs injected on the 3rd day after the induction of injury (d3) and Group IV (GIV; n = 7): ADSCs injected on day 5 after induction of skin defect (d5). Clinical evaluations were performed on days 0, 3, 5 and 7 and the histopathology on days 5 and 7. In the proposed methodology, can be seen that the use of ADSCs increased vascularization, formation of granulation tissue, collagen deposition and increases the number of hair follicles in just seven days of evaluation. In addition, the time of application of the cells did not affect significant differences in the inflammatory and the proliferative phase of wound healing skin. However, the use of different periods ADSCs resulting in beneficial effects on important aspects of wound healing mechanisms. Such as the presence of granulation tissue, vascular proliferation, collagen deposition and the presence of hair follicles; but distinct. So, choose the time of application will depend on the needs of each patient and the doctor's intention. In the second article, we evaluated the action of ADSCs in the treatment of acute wounds in order to understand if two consecutive applications of cells promote healing in the first seven days of injury. For the experiment were used 49 C57BL / 6 mice divided into four groups: (G0 / control; n = 14); (G1D, n = 14): injected into the ADSCs d0; 3D Group (G3D; n = 14): ADSCs injected into the d0 and d3; 5D group (G5d; n = 7): ADSCs injected on d0 and d5. Clinical evaluations were performed on days 0, 3, 5 and 7 and the histopathology on days 5 and 7. In this study, it can be seen that the use of two doses of ADSCs enhances cell proliferation and vascular application and increases the number of follicles hair in just seven days of evaluation. Thus, we conclude that use two doses is more efficient than when evaluating the first seven days of healing. In addition, there is no difference in the time of the second treatment of ADSCs when an observation period of 7d.

Made available in DSpace on 2014-06-12T15:52:32Z (GMT). No. of bitstreams: 2 arquivo4545_1.pdf: 2124071 bytes, checksum: 575b8464fc324ef8393ae48b527e7584 (MD5) license.txt: 1748 bytes, checksum: 8a4605be74aa9ea9d79846c1fba20a33 (MD5) Previous issue date: 2007 / Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico / A lectina EmaL foi extraída da Eugenia malaccensis, importante espécie da família Myrtaceae. Com o objetivo de avaliar a influência do tratamento tópico com a EmaL no processo cicatricial cutâneo, foi produzida uma ferida na região dorsal (1 cm2) em camundongos albinos Swiss (Mus musculus) fêmeas (n= 15/grupo), tratados diariamente com EmaL 10 µg e NaCl 150 mM durante 12 dias. A avaliação clínica foi realizada diariamente, observando-se que as feridas tratadas com a EmaL apresentaram sinais inflamatórios como edema (&#967;2 = 3,63; p< 0,05) e hiperemia (&#967;2 = 2,66; p< 0,05) estatisticamente menos intensos quando comparadas ao controle. No 12o dia PO, as lesões tratadas com a lectina e o grupo controle apresentaram uma área média de 0,02 &#61617; 0,01 cm2 e 0,02 &#61617; 0,02 cm2, respectivamente. Biópsias para análise histopatológica e exames microbiológicos foram realizados após 2, 7 e 12 dias. A análise microbiológica das lesões evidenciou apenas o crescimento de Staphylococcus sp. Histopatologicamente, no 12º dia, as lesões tratadas com a EmaL apresentaram reepitelização (completa ou parcial), e áreas de transição mais bem evidenciadas do que as do grupo controle, especialmente devido ao arranjo bem organizado das fibras colágenas presentes no tecido de granulação fibroso. O presente estudo sugere uma evidência farmacológica preliminar sobre o uso da EmaL no processo de reparação de feridas cutâneas

Submitted by Alice Araujo (alice.caraujo@ufpe.br) on 2018-06-01T18:32:52Z No. of bitstreams: 1 TESE Elayne Karine Souto de Melo.pdf: 8028745 bytes, checksum: 7594ab3f006928192c0344d401e3a486 (MD5) / Made available in DSpace on 2018-06-01T18:32:52Z (GMT). No. of bitstreams: 1 TESE Elayne Karine Souto de Melo.pdf: 8028745 bytes, checksum: 7594ab3f006928192c0344d401e3a486 (MD5) Previous issue date: 2016-11-30 / CAPES / O metronidazol tópico (MTZ) tem sido amplamente utilizado de forma off-­label no controle de odor de feridas crônicas a partir de formas farmacêuticas como gel, solução ou comprimidos macerados. Diante disso, o objetivo deste trabalho foi preparar gel termoreversível contendo metronidazol 0,75% e avaliar a permeação cutânea in vitro e in vivo pelos métodos de dermatofarmacocinética e microdiálise, respectivamente. O metronidazol foi avaliado quanto às características térmicas, perfil difratométrico, espectroscopia FT-­IR, teor por Clae-­UV, distribuição granulométrica e MEV. Os géis de MTZ contendo ou não propilenoglicol (PG) denominados F11 e F12, foram preparados através de “cold-­method” e a solubilidade do fármaco avaliada. Também foi determinado do pH, a temperatura de transição de fase sol-­gel e as características reológicas. Além disso, o estudo de permeação cutânea in vitro e in vivo foi realizado através de pele de rato íntegra e lesionada por tape stripping. A permeação do MTZ nos termogéis foi avaliada frente ao medicamento de referência (Rozex®). O fármaco apresentou faixa de fusão entre 157,41 e 162,88 ºC, perfil espectrométrico FT-­IR sobreponível ao da substância química de referência, teor 99,62 ± 5,86%, granulometria média de 202,40 μm e hábito cristalino colunar. O fármaco apresentou solubilidade maior em propilenoglicol dentre os meios avaliados. Após a preparação dos termogéis, foram obtidos sistemas límpidos com pH 6,36 ± 0,04 para F11 e 6,24 ± 0,03 para F12. A Tsol-­gel foi determinada entre 34,5 e 36,5 ºC onde os géis apresentaram propriedades pseudoplásticas e tixotrópicas. Na avaliação da permeação cutânea in vitro, após 21 h, a quantidade de MTZ permeada foi maior a partir do Rozex®, tanto em pele integra quanto na pele lesionada. Ao mesmo tempo, a quantidade de MTZ retida na epiderme/derme foi superior para os termogéis na pele integra, não apresentando diferenças entre as três formulações na retenção na pele lesionada. Quanto ao estrato córneo (EC), o MTZ ficou retido em maior quantidade a partir do termogel sem PG. Foi também verificado que EC foi limitante para a permeação cutânea do MTZ tanto in vitro quanto in vivo. Sobre o estudo de microdiálise obteve-­se uma alta variabilidade dos resultados levando a dados inconclusivos. / Topical metronidazole (MTZ) has been widely used in an off-­label way in odor control of chronic wounds from pharmaceutical forms such as gel, solution or macerated tablets. Therefore, the objective of this work was to prepare thermoreversible gel containing 0.75% metronidazole and to evaluate cutaneous permeation in vitro and in vivo by dermatopharmacokinetics and microdialysis methods, respectively. Metronidazole was evaluated for thermal characteristics, diffraction profile, spectroscopy FT-­IR, HPLC-­UV content, granulometric distribution and SEM. MTZ gels containing or not propylene glycol (PG), designated F11 and F12, were prepared by cold-­method and the solubility of the drug evaluated. pH, sol-­gel phase transition temperature and the rheological characteristics were also determined. In addition, the in vitro and in vivo cutaneous permeation study was performed through intact rat skin and injured by tape stripping. The permeation of MTZ in thermogels was evaluated against the reference medicine (Rozex®). The drug had a melting range between 157.41 and 162.88 ºC, an FT-­IR spectrometric profile that was available to the reference chemical, content 99.62 5.86%, mean particle size of 202.40 μm and columnar crystalline habit. The drug had higher solubility in propylene glycol among the evaluated media. After preparation of the thermogels, clear systems were obtained with pH 6.36 0.04 for F11 and 6.24 0.03 for F12. Tsol-­gel was determined between 34.5 and 36.5 ° C where the gels had pseudoplastic and thixotropic properties. In the evaluation of skin permeation in vitro, after 21 h, the amount of MTZ permeated was higher from Rozex®, both in healthy skin and in the injured skin. At the same time, the amount of MTZ retained in the epidermis / dermis was higher for the thermogels in the healthy skin, showing no differences between the three formulations in retention on the injured skin. As for the stratum corneum (SC), the MTZ was retained in greater quantity from the thermogel without PG. It has also been found that SC was limiting to cutaneous permeation of MTZ both in vitro and in vivo. On the microdialysis study a high variability of the results was obtained leading to inconclusive data.

Orientadores: Ana Terezinha Guillaumon, Maria Beatriz Puzzi / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas. Faculdade de Ciências Médicas / Made available in DSpace on 2018-08-16T04:02:11Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Bosnardo_CarlaAparecidaFaccio_D.pdf: 1290843 bytes, checksum: bad65c993cc70377c548424ff8f543bc (MD5) Previous issue date: 2010 / Resumo: Introdução: A úlcera venosa é uma complicação da insuficiência venosa crônica, atinge indivíduos adultos, afastando-os do trabalho e do convívio social normal. Objetivo: Demonstrar uma nova terapêutica para o tratamento das úlceras venosas através do enxerto de queratinócitos autólogos. Casuística e Método: Foram selecionados, de forma aleatória no ambulatório de Moléstias Vasculares Periféricas da Faculdade de Ciências Médicas da UNICAMP - Vinte e Cinco ( 25) doentes com úlcera de venosa, CEAP 6 , que não obtiveram cicatrização, das mesmas, com tratamentos convencionais; divididos em dois grupos, Grupo I- 11 doentes, 10 mulheres e 1 homem; Grupo II- 14 doentes, 11 mulheres e 3 homens. Ambos os grupos foram submetidos à aplicação do autoenxerto de queratinócitos sobre o leito limpo da úlcera; e ao grupo II, foi também ministrada dose de diosmina hesperidina micronizada a cada 12 horas. A todos os doentes, foi solicitado um repouso de 30 minutos em Trendelemburg para duas horas de atividade habitual. Os queratinócitos foram cultivados no Laboratório de Cultura de Células da Pele, CIPED- FCM - UNICAMP. Resultados: Após a aplicação de testes estatísticos não paramétricos, devido ao tipo da amostra, foi observada cicatrização e/ou melhora das úlceras com redução do leito nos dois grupos, sendo que o Grupo II obteve resultados mais precoces. Conclusão . Esse método mostra ser uma boa opção terapêutica no auxílio à cicatrização das úlceras venosas / Abstract: The venous stasis ulcer is the most severe complication of venous insufficiency, affecting adults and keeping them away from work and from normal social life. Objective: To demonstrate a new therapeutic method for accelerating healing. Methods: Twenty-five (25) patients with venous stasis ulcers, CEAP VI, who have not healed with conventional treatments were selected from the Clinic of Peripheral Vascular Diseases, Faculty of Medical Sciences, UNICAMP - were treated with autograft keratinocytes, grown in the skub cell culture laboratory, CIPED-FCM - UNICAMP. They were divided into two groups, Group I-11 patients, 10 female and male, Group II-14 patients, 11 female and 3 male. Both groups were treated with autograft keratinocytes on the clean ulcer bed, and group II, was also given a dose of micronized diosmin hesperidin every 12 hours. All the patients were asked to take a 30-minute rest in the Trendelenburg position for two hours of usual activity. Results: After the evaluation of data with statistics methods no parametric Healing and/or improvement of the ulcers with significant reduction of the bed in both groups were observed, with Group II obtaining precocious results. Conclusion? This method proves to be a good therapeutic option to help in the healing of stasis ulcers / Doutorado / Cirurgia / Doutor em Cirurgia