A tecnologia de impressão para incorporação do princípio ativo tem se mostrado promissora para o desenvolvimento de filmes para liberação oral. Estudos mostram que esta técnica foi eficiente na incorporação de fármacos sintéticos, entretanto pode ser interessante avaliar a possibilidade do uso desta técnica para incorporação de extratos naturais, devido as diversas atividades farmacológicas que eles podem apresentar. Dentre as fontes naturais, a romã (Punica granatum L.) tem se destacado pelo seu potencial antioxidante, anti-inflamatório e antimicrobiano. Este trabalho teve como objetivo avaliar as diferentes partes da Punica granatum L. como fonte de compostos ativos e analisar a possibilidade do uso da técnica de impressão para incorporação destes compostos em substratos para liberação oral. A extração dos compostos ativos foi avaliada para as diferentes partes da romã (casca, folha, mesocarpo e semente) em relação ao rendimento de sólidos solúveis totais, concentração de compostos fenólicos e flavonoides. O melhor extrato foi concentrado em rotaevaporador e avaliado em relação aos parâmetros importantes para uma solução de impressão (tensão superficial e viscosidade). Para utilização como substrato foram avaliados filmes à base de carboximetilcelulose (CMC), hidroxipropilmetilcelulose (HPMC) e blenda (CMC:HPMC - 1:1) produzidos pela técnica de tape-casting e papel comestível comercial. O extrato foi impresso utilizando uma impressora jato de tinta (L375, EPSON). Os substratos foram impressos com diferentes números de camada (1 à 4 camadas de impressão) e caracterizados em relação ao conteúdo de água, cor, pH de superfície, microscopia eletrônica de varredura e de força atômica, tempo de desintegração, concentração de compostos fenólicos, liberação in vitro, cinética de liberação, espectroscopia de infravermelho, difração de raio-X e estabilidade dos compostos fenólicos. A melhor extração foi obtida do mesocarpo, utilizando-se a temperatura de 70 ºC, tempo de 30 min e solução hidroalcoólica com 70% de álcool. Observou-se que os extratos obtidos do mesorcarpo (sem e com concentração) apresentaram intervalos de valores de tensão superficial e viscosidade dentro dos valores observados na literatura para impressora, entretato o extrato obtido do mesocarpo com remoção de 40% de solvente apresentou maior concentração de compostos fenólicos e por isso foi utilizado como solução de impressão. Analisando os substratos, observou-se que os filmes obtidos por tape-casting apresentaram maior tensão na ruptura, elongação e módulo elástico que o papel comestível comercial. Adicionalmente, os extratos apresentaram boa afinidade com os substratos testados. Os filmes à base de HPMC e blenda de CMC:HPMC não foram utilizados para impressão por curvarem rapidamente após serem retirados da placa, visto que essa deformação impediu que passassem pela cabeça de impressão sem serem danificados. Em relação aos filmes impressos, observou-se que o aumento do número de camadas aumentou a concentração de compostos fenólicos, possibilitando a produção sob demanda, de acordo com a necessidade individual. Não houve variação do pH de superfície e o tempo de desintegração do papel comestível comercial foi superior aos filmes à base de carboximetilcelulose. A liberação dos compostos foi influenciada pelo substrato utilizado e o lado de exposição (lado sem impressão e lado impresso). Os compostos fenólicos foram estáveis nos filmes no intervalo de 196 dias. Desta forma, pode-se concluir que a técnica de impressão pode ser utilizada para incorporação dos compostos fenólicos extraídos do mesocarpo da romã. / Printing technology for incorporation of the active compounds has shown promise for the development of oral release films. Studies show that this technique was efficient in the incorporation of synthetic drugs, however it may be interesting to evaluate the possibility of using this technique to incorporate natural extracts, due to the various pharmacological activities that they can present. Among the natural sources, pomegranate (Punica granatum L.) has been highlighted by its antioxidant, anti-inflammatory and antimicrobial potential. This work aimed to evaluate the different parts of Punica granatum L. as a source of active compounds and to analyze the possibility of using the printing technique to incorporate these compounds into substrates for oral release. The extraction of the active compounds was evaluated for different parts of the pomegranate (bark, leaf, mesocarp and seed) in relation to the yield of total soluble solids, concentration of phenolic compounds and flavonoids. The best extract was concentrated in a rotavaporator and evaluated in relation to the parameters important for a printing solution (surface tension and viscosity). Films based on carboxymethylcellulose (CMC), hydroxypropylmethylcellulose (HPMC) and blend (CMC: HPMC - 1: 1) produced by the tape-casting technique and commercial edible paper were evaluated for use as substrate. The extract was printed using a piezoelectric inkjet printer (L375, EPSON). The substrates were printed with different numbers of layers (1 to 4 printing layers) and characterized in relation to water content, color, surface pH, scanning and atomic force electron microscopy, disintegration time, phenolic compound concentration, release in vitro, release kinetics, infrared spectroscopy, X-ray diffraction and stability of phenolic compounds. The best extract was obtaind from the mesocarp, using the extraction temperature of 70ºC, time of 30 min and hydroalcoholic solution with 70% ethyl alcohol. It was observed that the extracts obtained from the mesorcarp (without concentration and with different percentages of concentration) presented ranges of values of surface tension and viscosity within the values observed in the literature for printer, and the extract with removal of 40 % of solvent present hither concentration of phenolic compounds and therefore was used as print solution. By analyzing the substrates, it was observed that the films obtained by tape-casting had a higher tension in the rupture, elongation and elastic modulus than commercial edible paper. In addition, the extracts showed good affinity with the substrates tested. HPMC-based films and blends (HPMC:CMC) were not used for printing by bending rapidly after being removed from the plate as this deformation prevented them from passing through the print head without being damaged. In relation to the printed films, it was observed that the increase in the number of layers also increased the concentration of phenolic compounds, allowing the production on demand, according to the individual needs. There was no variation of the surface pH and the disintegration time of the commercial edible paper was higher than the carboxymethylcellulose based films. The release of the compounds was influenced by the substrate used and the exposure side (unprinted side and printed side). The phenolic compounds were stable in the films within the 196 day. In this way, it can be concluded that the printing technique can be used to incorporate the phenolic compounds extracted from the mesocarp of the pomegranate.

Submitted by LUNA MARES LOPES DE OLIVEIRA (DINTER) null (lunamares@saolucas.edu.br) on 2017-01-27T02:26:31Z No. of bitstreams: 1 CAPITULO TESE - LUNA MARES LOPES DE OLIVEIRA.pdf: 792305 bytes, checksum: 7e19ae8eb4ac1ad2447d7290d4746ef9 (MD5) / Approved for entry into archive by LUIZA DE MENEZES ROMANETTO (luizamenezes@reitoria.unesp.br) on 2017-01-31T13:11:06Z (GMT) No. of bitstreams: 1 oliveira_lml_dr_araca.pdf: 792305 bytes, checksum: 7e19ae8eb4ac1ad2447d7290d4746ef9 (MD5) / Made available in DSpace on 2017-01-31T13:11:06Z (GMT). No. of bitstreams: 1 oliveira_lml_dr_araca.pdf: 792305 bytes, checksum: 7e19ae8eb4ac1ad2447d7290d4746ef9 (MD5) Previous issue date: 2016-01-19 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP) / As propriedades antimicrobianas da romã são atribuídas aos compostos fenólicos, mais especificamente aos taninos hidrolisáveis (THs) galotaninos (ácido gálico) e elagitaninos (ácido elágico), substâncias naturais de defesa da planta. Os objetivos deste estudo foram avaliar os níveis de ácido elágico e fenóis totais, rendimento dos métodos de extração e o potencial inibitório sobre Candida albicans de extratos de partes da Punica granatum. Amostras em triplicata de cascas, sementes e folhas desidratadas, trituradas, pulverizadas, foram submetidas a dois métodos de extração: soxhlet tendo como solventes etanol e metanol e percolação tendo como solvente o etanol. Após a obtenção dos extratos, foram determinados os teores de ácido elágico por cromatografia liquida de alta eficiência e fenóis totais expressos em ácido gálico pelo método espectrofotométrico. A atividade antifúngica dos extratos foi avaliada pelo método de difusão em disco, seguindo-se as normas do National Committee for Clinical and Laboratory Standards (NCCLS document M2-A8, 2003a.). As maiores concentrações de fenóis totais e de ácido elágico foram encontradas nas folhas e na casca da romã. Verificou-se maior eficiência de rendimento por meio da percolação. Os resultados de difusão em disco revelaram maior sensibilidade da cepa de C. albicans aos extratos etanólicos da casca por ambos os métodos de extração. O método percolação alcoólica a 70% e 25ºC e a casca da romã apresentaram a maior eficiência de extração e de atividade anti-fúngica contra uma cepa clínica de C. albicans. / The antimicrobial properties of pomegranate are attributed to the phenolic compounds, more specifically the hydrolyzable tannins (THs) galotaninos (gallic acid) and elagitaninos (ellagic acid), natural plant defense substances. The objectives of this study were to evaluate the levels of ellagic acid and total phenols, yield of the extraction methods and the inhibitory potential against Candida albicans of extracts from parts of Punica granatum. Samples of dried, peels, seeds and leaves were used in triplicates and the extracts were obtained by Soxhlet system and percolation using respectively ethanol, methanol and ethanol solvents. After obtaining the extracts, the ellagic acid contents were determined by high performance liquid chromatography (HPLC) and total phenols expressed in gallic acid by the spectrophotometric method. The antimicrobial activity was evaluated by the disc diffusion method, following the standards of the National Committee for Clinical and Laboratory Standards (NCCLS document M2-A8, 2003a.). The highest concentrations of THs were found in leaves and pomegranate peel. Greater yield efficiency was verified by percolation. The results of diffusion on disc revealed higher sensitivity of the C. albicans strain to the ethanolic extracts of peels by both methods of extraction, presenting inhibition halos of approximately 10 mm. The alcoholic percolation method at 70% and 25ºC and the pomegranate peel showed the highest extraction efficiency and antifungal activity against a clinical strain of C. albicans. / FAPESP: 2014/08643-2 / CAPES: 88881.030445/2013-1

La presente investigación es el desarrollo de una idea de negocio mediante el uso de la granada (Punica granatum L), fruta cultivada en suelo peruano con alto poder antioxidante, y aceites vegetales, con propiedades nutritivas e hidratantes, que dan como resultado la propuesta de “Granatum Rejuveness”, una crema facial hidratante y rejuvenecedora. De acuerdo a investigaciones de mercado, este producto reúne las características requeridas por el perfil del consumidor existentes en las zonas Lima 6 (Jesus María, Lince, Pueblo Libre, Magdalena y San Miguel) y Lima 7 (Miraflores, San Isidro, San Borja, Surco y La Molina) los cuales formarán parte de nuestro público objetivo. Nuestra propuesta tiene como punto de inicio a las tendencias de consumo natural, las necesidades e importancia de las personas por el cuidado de la piel, las cual va en aumento con el pasar de los años y la oportunidad identificada en el país de incentivar la rentabilización de nuestros productos sumergiéndolos a un proceso para el beneficio compartido junto a nuestros agricultores, quienes al día de hoy comercializan sus productos en materia bruta. En esta idea de negocio se llevaron a cabo entrevistas, encuestas y posicionamiento del producto mediante las redes sociales. No obstante, dada la coyuntura del país no se tuvo la oportunidad de desarrollar ventas mediante el canal tradicional. Asimismo, el equipo realizó una ardua investigación sobre el rubro de cosméticos, para así, identificar los desafíos y posteriormente idear la manera en como confrontarlos con el uso de recursos claves relacionados al negocio. / The present research is the development of a business idea through the use of pomegranate (Punica granatum L), fruit grown in Peruvian soil with high antioxidant power, and vegetable oils, with nutritional and moisturizing properties, resulting in the proposal of "Granatum Rejuveness", a hydrating and rejuvenating facial cream. According to market research, this product meets the characteristics required by the existing consumer profile in Lima 6 (Jesus María, Lince, Pueblo Libre, Magdalena and San Miguel) and Lima 7 (Miraflores, San Isidro, San Borja, Surco and La Molina) which will be part of our target audience. Our proposal has as a starting point the trends of natural consumption, the needs and importance of people for skin care, which is increasing over the years and the opportunity identified in the country to encourage profitability of our products by submerging them in a process for shared benefit with our farmers, who today market their products in raw material. In this business idea, interviews, surveys and product positioning were carried out through social networks. However, given the country's situation, there was no opportunity to develop sales through the traditional channel. Likewise, the team carried out an arduous investigation into the cosmetics sector, in order to identify the challenges and subsequently devise how to confront them with the use of key business-related resources. / Trabajo de investigación

Orientador: Debora de Barros Barbosa / Banca: Luiz Fernando Gorup / Banca: Aimée Maria Guiotti / Resumo: O presente estudo revisou na literatura trabalhos entre 2006 e 2017 relacionados à fitossíntese de nanopartículas de prata (AgNP) e destacar a variedade de plantas passíveis de serem utilizadas e o quanto estas influenciam as características e propriedades dessas nanopartículas. Avaliou-se também como a temperatura (25, 50, 70 e 95°C) e a concentração de extrato da casca de romã (Punica granatum) (7, 14 e 28 mg mL-1) interferem na efetividade da reação fitoquímica por meio da quantificação dos íons Ag+ livres na solução de AgNP. A atividade antifúngica das AgNP produzidas foi avaliada por meio do método da microdiluição (CLSI M27-A2) contra cepas padrão (ATCC) de Candida albicans e Candida glabrata. As AgNP foram caracterizadas por microscopia eletrônica de varredura (MEV), difração de raios-X e espectroscopia UV/visível. O extrato da casca desidratada da romã foi obtido por maceração seguido de percolação em etanol (70%) e desidratado em rota-evaporador. Quantificou-se os fenóis totais expressos em ácido gálico por método colorimétrico e o ácido elágico por HPLC, sendo respectivamente 158,61 e 4,21 mg mL-1. Foram revisados mais de duzentos artigos relacionados à fitossintese de AgNP, onde cerca de cento e setenta plantas foram utilizadas para esta síntese e sendo a maioria delas geograficamente concentradas nos continentes asiático e europeu. As AgNP fitossintezadas no presente estudo apresentaram concentração de íons livres de Ag+ proporcional à quantidade de extrato utiliz... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: The present work reviewed in the literature studies of phythosynthesis of silver nanoparticles (AgNP) between 2006 and 2017, highlighting the variety of plants used to and how they can influence the characacteristics and properties of AgNP. This work also evaluated the influence of temperature (25, 50, 70 and 95°C) and concentration of peel extract of pomegranate (Punica granatum) (7, 14 and 28 mg mL-1) on the effectiveness of phytosynthesis reaction by quantifying the free Ag+ ions in the AgNP soluction. The antifungal activity of AgNP against reference strains (ATCC) of Candida albicans and Candida glabrata were evaluated by the microdilution method (CLSI M27-A2). AgNP were characterized through scanning electron microscopy (SEM), X-Ray diffraction and UV-Vis spectroscopy. The pomegranate peel was dehydrated and the hydroalcoholic extract was obtained by maceration followed by percolation, and then obtained the crude extract using a rotary evaporator. Total phenols expressed in galic acid and elagic acid were quantified in the extract using a colorimetric method and by HPLC, and the values found were 158.61 and 4.21 mg mL-1, respectively. It was found more than two hundred studies using about an hundred seventy plants to synthesize AgNP, being the majority of those plants from the Asiatic and European Continents. The AgNp phytosynthesized in the present study presented the concentration of free Ag+ ions proportional with the quantity of pomegranate peel extract and it was high when the temepratures used in the reaction were above 50ºC. Also, AgNP were effective against both Candida reference strains evaluated / Mestre

Memoria para optar al Título Profesional de Ingeniero Agrónomo / Durante la temporada 2010/2011 se realizó un ensayo con granados ´Wonderful´ en Huechún conducido como multieje a 5 x 3 m, región Metropolitana; Cerrillos de Tamaya como copa a 6 x 4 m y Vicuña como copa y eje a 3 x 1,5 m en la región de Coquimbo. El objetivo fue evaluar las relaciones entre el peso promedio de frutos, productividad, intercambio gaseoso, incidencia de golpe de sol, partidura, color y ramaleo en diferentes sistemas de conducción y localidades. Para ello, se seleccionaron diez plantas para cada combinación sistema de conducción-localidad, cada uno sometido a diferentes niveles de carga frutal, regularmente distribuidos entre muy baja y muy alta, ajustad luego del cuaje de la segunda cohorte de floración. La carga frutal se expresó como frutos por unidad de superficie de suelo, área de sección transversal de tronco (ASTT) y fracción de radiación interceptada (FI). La FI se midió con un Ceptómetro lineal un mes después del ajuste de carga frutal. El intercambio gaseoso se registró mediante un analizador de gases infrarrojo portátil durante la mañana (AM), el mediodía (MD) y el atardecer (PM) durante el período de activo crecimiento del fruto y pre-cosecha. La fruta cosechada, se clasificó de acuerdo a su calibre. Los daños comerciales como golpe de sol, partidura, color y ramaleo, se expresaron como porcentaje. Se encontró una relación lineal positiva entre la fracción de radiación interceptada y el rendimiento. El peso promedio disminuyó, y la productividad aumentó al aumentar la carga frutal. El intercambio gaseoso aumentó al incrementar la carga frutal. El golpe de sol disminuyó al aumentar la carga mientras la partidura aumentó. El color y el daño por ramaleo no fueron afectados por la carga frutal. El huerto de Huechún tuvo un alto rendimiento promedio pero con una mayor proporción de frutos pequeños, mientras que en Cerrillos de Tamaya la productividad fue baja. En Vicuña, tanto el sistema de copa como eje, presentaron una alta precocidad, buen tamaño de fruto, baja partidura de frutos, por lo que esta zona y sistema de conducción, si se controla el golpe de sol, se proyectan como adecuadas para la producción de granados. Palabras clave: intercambio gaseoso, fracción de radiación interceptada, carga frutal, peso promedio, eficiencia productiva / A trail was conducted during 2010/2011 season, in pomegranate (Punica granatum L.) located in Huechún, Metropolitana Region (training as “multileader at 5x3); Cerrillos de Tamaya (training as vase at 6x4) and Vicuña (training as vase and leader at 3x1.5) Coquimbo Region, Chile. The objective was to determine the relationship between fruit mean weight, productivity, gaseous exchange (P sat) y (gs), and sunburn, cracking, color and russeting effects in different training systems and localities. For this ten plants were selected for own training system and locality, each tree was subjected to different level of crop load, evenly distributed between very low and very high, adjusted after fruit set of second cohort flowering. The crop load was expressed as fruits for unit area, trunk cross-sectional area (TCSA) and intercepted radiation fraction (FI). The intercepted radiation fraction was measured with a lineal ceptometer, one month before crop load adjustment. The gaseous exchange was measured with a portable infrared gas analyzer during afternoon, mid-day and moorning during active fruit growth and pre-harvest. The crop was classified accord to fruit size. The commercial damage with sunburn, cracking, color and russeting were expressed as percentage. Was found a lineal positive relation between the intercepted radiation fraction and yield. The mean weight decreased and yield increase with increasing crop load. The gaseous exchange increases with crop load. Sunburn decreases with crop load,but cracking increases. No relation between color, russeting with the crop load were observed. The higher yield was obtained in Huechún, but a high proportion of little fruit was observed; yield in Cerrillos de Tamaya was low. The vase and central leader in Vicuña have a high precocity, big fruits, and low cracking incidence. If sunburn damage is controlled project vicuña as a good area for pomegranate production in Chile.

Memoria para optar al título profesional de: Ingeniero Agrónomo Mención Agroindustrias / El objetivo de este estudio fue evaluar el efecto del genotipo y del tipo de envase utilizado sobre las características microbiológicas y sensoriales de arilos de granada mínimamente procesados de variedad „Wonderful‟ y de un clon seleccionado de esta última, „UCHNGD‟. Para ello los frutos enteros se sanitizaron con hipoclorito de sodio (200 mg L-1 ) durante 3 minutos y se conservaron a 6±0,5°C y 90±5% HR durante 103 días. Transcurrido este periodo, los frutos enteros de ambos genotipos fueron nuevamente sanitizados con hipoclorito de sodio (200 mg L-1 ) durante 3 minutos y luego desgranados, los arilos se sanitizaron con hipoclorito de sodio (100 mg L-1 ) durante 30 segundos y se envasaron en dos tipos de envases rígidos con tapa, uno de polipropileno con perforaciones y otro de poliester sin perforaciones, y se almacenaron por un período máximo de 14 días a 5±0,5°C y 90±5% de HR. Se evaluó la tasa respiratoria, concentración de gases en el interior de envases rígidos, color de arilos y de jugo de arilos, sólidos solubles, pH, acidez titulable, pérdida de masa, análisis sensorial y microbiológico los días 7 y 14. El día 3 sólo se midió la tasa respiratoria y concentración de gases directamente desde el interior de los envases rígidos. Luego del procesamiento la tasa respiratoria no registró diferencias significativas entre los días 0 y 14, siendo de 3,0 a 2,6 mL CO2 kg-1 h -1 respectivamente. La concentración de gases se vio influida por el tipo de envase utilizado, siendo significativamente mayor el CO2 (1,3 versus 0,7%) y menor el O2 (19,6 versus 20,3%) en aquellos tratamientos en que se utilizó envases sin perforaciones. El porcentaje de pérdida de masa también registró diferencias significativas entre envase con y sin perforaciones (4,9 y 0,1%, respectivamente el día 14), independiente del genotipo. El color de arilos estuvo determinado por el genotipo más que por el envase, siendo „Wonderful‟ más oscura que „UCH-NGD‟ hasta el final del estudio. En lo que respecta al color del jugo, „UCH-NGD‟ se oscureció más que „Wonderful‟ en el tiempo, así también presentó valores mayores de a* y b*. El porcentaje de sólidos solubles al final del estudio registró diferencias significativas determinadas por el tipo de envase, pero en la práctica éstas fueron irrelevantes (entre 13,4 y 14,1%). El pH y la acidez titulable también presentaron diferencias significativas, siendo en „Wonderful‟ menores los valores de pH (3,5 versus 3,6) y mayores los de acidez (1,1 versus 0,9%) que „UCH-NGD‟. Sensorialmente „Wonderful‟ fue mejor o igualmente calificada que „UCH-NGD‟ en todos los parámetros y días evaluados, y permitiría su comercialización por hasta 14 días, mientras que „UCH-NGD‟ podría comercializarse hasta por 7 días. El análisis microbiológico fue catalogado como aceptable a los 14 días a 5±0,5°C y 90±5% de HR por la legislación chilena para los recuentos de aerobios mesófilos, enterobacterias, Salmonella sp. y Staphylococcus aureus, independiente del genotipo, influenciado levemente por el tipo de envase. / The objective of this study was to evaluate the effect of two genotypes („Wonderful‟ and „UCH-NGD‟) and the type of package on the microbiological and sensorial characteristics of minimally processed pomegranate arils. Whole fruits were sanitized with sodium hypochlorite (200 mg L-1 ) for 3 minutes and stored at 6±0,5°C and 90±5 % RH for 103 days. After this, whole fruits of both genotypes were sanitized with sodium hypochlorite (200 mg L-1 ) for 3 minutes and the arils were removed from the fruits and sanitized with sodium hypochlorite (100 mg L-1 ) for 30 seconds. The arils were packaged on two different rigid packages, with or without perforations. The packages were stored for 14 days at 5±0,5°C and 90±5% RH. Respiration rate, gases concentration, arils and juice color, soluble solids, pH, titirable acidity, weight losses, sensorial and microbiological analysis were evaluated on day 7 and 14. On day 3, only respiration rate and gases concentration were evaluated. After processing, the respiration rate did not show significant differences between days 0 and 14 (3,0 to 2,6 mL CO2 kg-1 h -1 ). The gas concentrations were influenced by the type of rigid packages used; CO2 levels were significantly low (0,7 versus 1,3%) and O2 levels were significantly high (20,3 versus 19,6%) in perforated packages. Weight loss differences were also due to the type of packages (4,9 and 0,1% for perforated and unperforated packages, respectively). The arils color was affected by the genotype rather than the package; „Wonderful‟ color was darker than „UCH-NGD‟. Aril juice color of „UCH-NGD‟ was darker than „Wonderful‟ throughout storage. At the end of the study, soluble solid contents show significant differences according to the package type, nevertheless they were irrelevant into practice (13,4 to 14,1%). Also pH and titrable acidity showed statistic differences. „Wonderful‟ had minor pH (3,5 versus 3,6) and a higher titrable acidity (1,1 versus 0,9) than „UCH-NGD‟. Related with sensory quality, „Wonderful‟ was better or equally qualified than „UCH-NGD‟ in every parameter and in each evaluation day. „Wonderful‟ could be sold for up to 14 days; „UCH-NGD‟ only for up to 7 days. The microbiologic analysis was rated as acceptable for 14 days at 5±0,5°C and 90±5% RH by Chilean law for aerobic mesophilic, enterobacteria, Salmonella sp. and Staphylococcus aureus, independently of the genotype, slightly influenced by the package type.

Submitted by Luana Sauvesuk null (luana_sauvesuk@hotmail.com) on 2017-10-26T17:07:51Z No. of bitstreams: 1 Dissertação de mestrado- Luana Sauvesuk - UNESP-FOA 26.10 pós defesa.pdf: 4367747 bytes, checksum: 5e1aa26820a5d96f8ddb932295fee7aa (MD5) / Approved for entry into archive by Monique Sasaki (sayumi_sasaki@hotmail.com) on 2017-10-31T18:02:55Z (GMT) No. of bitstreams: 1 sauvesuk_l_me_araca.pdf: 4367747 bytes, checksum: 5e1aa26820a5d96f8ddb932295fee7aa (MD5) / Made available in DSpace on 2017-10-31T18:02:55Z (GMT). No. of bitstreams: 1 sauvesuk_l_me_araca.pdf: 4367747 bytes, checksum: 5e1aa26820a5d96f8ddb932295fee7aa (MD5) Previous issue date: 2017-10-16 / O presente estudo revisou na literatura trabalhos entre 2006 e 2017 relacionados à fitossíntese de nanopartículas de prata (AgNP) e destacar a variedade de plantas passíveis de serem utilizadas e o quanto estas influenciam as características e propriedades dessas nanopartículas. Avaliou-se também como a temperatura (25, 50, 70 e 95°C) e a concentração de extrato da casca de romã (Punica granatum) (7, 14 e 28 mg mL-1) interferem na efetividade da reação fitoquímica por meio da quantificação dos íons Ag+ livres na solução de AgNP. A atividade antifúngica das AgNP produzidas foi avaliada por meio do método da microdiluição (CLSI M27-A2) contra cepas padrão (ATCC) de Candida albicans e Candida glabrata. As AgNP foram caracterizadas por microscopia eletrônica de varredura (MEV), difração de raios-X e espectroscopia UV/visível. O extrato da casca desidratada da romã foi obtido por maceração seguido de percolação em etanol (70%) e desidratado em rota-evaporador. Quantificou-se os fenóis totais expressos em ácido gálico por método colorimétrico e o ácido elágico por HPLC, sendo respectivamente 158,61 e 4,21 mg mL-1. Foram revisados mais de duzentos artigos relacionados à fitossintese de AgNP, onde cerca de cento e setenta plantas foram utilizadas para esta síntese e sendo a maioria delas geograficamente concentradas nos continentes asiático e europeu. As AgNP fitossintezadas no presente estudo apresentaram concentração de íons livres de Ag+ proporcional à quantidade de extrato utilizada na reação e maior nas temperaturas mais elevadas, e foram efetivas contra ambas cepas padrão de Candida avaliadas. / The present work reviewed in the literature studies of phythosynthesis of silver nanoparticles (AgNP) between 2006 and 2017, highlighting the variety of plants used to and how they can influence the characacteristics and properties of AgNP. This work also evaluated the influence of temperature (25, 50, 70 and 95°C) and concentration of peel extract of pomegranate (Punica granatum) (7, 14 and 28 mg mL-1) on the effectiveness of phytosynthesis reaction by quantifying the free Ag+ ions in the AgNP soluction. The antifungal activity of AgNP against reference strains (ATCC) of Candida albicans and Candida glabrata were evaluated by the microdilution method (CLSI M27-A2). AgNP were characterized through scanning electron microscopy (SEM), X-Ray diffraction and UV-Vis spectroscopy. The pomegranate peel was dehydrated and the hydroalcoholic extract was obtained by maceration followed by percolation, and then obtained the crude extract using a rotary evaporator. Total phenols expressed in galic acid and elagic acid were quantified in the extract using a colorimetric method and by HPLC, and the values found were 158.61 and 4.21 mg mL-1, respectively. It was found more than two hundred studies using about an hundred seventy plants to synthesize AgNP, being the majority of those plants from the Asiatic and European Continents. The AgNp phytosynthesized in the present study presented the concentration of free Ag+ ions proportional with the quantity of pomegranate peel extract and it was high when the temepratures used in the reaction were above 50ºC. Also, AgNP were effective against both Candida reference strains evaluated.

Orientador: Sigmar de Mello Rode / Banca: Adriana Aigotti Haberbeck Brandão / Banca: Ana Christina Claro Neves / Banca: José Benedito Oliveira Amorim / Banca: Ricardo Carneiro Borra / Resumo: Embora diversos estudos já tenham sido realizados sobre a Punica granatum L., seus possíveis efeitos citotóxicos não são bem conhecidos. No presente trabalho foi avaliada a toxicidade da Punica granatum L. (PG) por meio de cultura celular com duas linhagens: fibroblastos humanos de mucosa oral (FLM) e células de carcinoma epidermóide oral humano (KB). As células foram submetidas ao teste de viabilidade celular por 24 horas em placas de 96 poços nas concentrações da PG (1%, 0,5%, 0,25%, 0,125%, 0,062% e 0,031%) e aos testes de citotoxicidade celular em placas de 24 poços, em cinco períodos diferentes (4 horas, 1, 3, 5 e 7 dias) e com quatro diferentes concentrações (1%, 0,5%, 0,25%, 0,062%). Todos os testes foram realizados em triplicata e em três momentos diferentes. Foram adicionados dois grupos, um controle negativo (Tryton 10%) e um controle positivo constituído de meio de cultura acrescido de soro bovino fetal 10% e sem o extrato de PG. A quantificação celular foi realizada pelo método do Resazurin, com avaliação por espectrofotometria óptica (espectrofotômetro UVM340 - Asys Hitech GmbH) e leitura de absorbância dos comprimentos de onda de 570 nm a 600 nm. Os dados obtidos foram submetidos à ANOVA (5%). Os resultados de viabilidade mostraram que nas concentrações de 0.031%; 0,062%; 0,125%; 0,25% e 0,05% o extrato de PG inibiu a viabilidade celular (≥ 40%) principalmente das células KB. O teste de citotoxicidade mostrou que apenas as culturas tratadas com PG a 0,062% exibiram citotoxicidade para as linhagens celulares. A PG a 1% foi tóxica para as células FLM e KB. O extrato de PG inibiu a citotoxicidade celular nas demais concentrações testadas. Estes resultados podem ser relacionados a propriedade anticarcinogênica da Punica granatum L. / Abstract: Several studies have been conducted on Punica granatum L., but their cytotoxic effects are not well known. The purpose of this study was to evaluate the cytotoxicity of Punica granatum L. extract (PG) in two cell lines: human oral mucosa fibroblasts (FLM) and cells of human oral squamous cell carcinoma (KB). The cells were analized to viability on 24 h using different concentrations of PG (1%, 0.5%, 0.25%, 0.125%, 0.062% and 0.031%) and to cell proliferation in five different periods (4 h, 1, 3, 5 and 7 days) using four different concentrations of PG (1%, 0.5%, 0.25%, 0.062%). All tests were performed in triplicate and in three different times. There were a negative control (Tryton 10%) and a positive control (culture medium plus 10% SBF, without PG extract). Cell quantification was performed by the Resazurin method, with evaluation by optical spectrophotometry (spectrophotometer UVM340 - Asys Hitech GmbH) and measure of absorbance at a wavelength of 570 nm to 600 nm. Data were submitted to ANOVA (5%). The results showed inhibition of cell proliferation in 0,031%, 0.062%, 0.125%, 0.25% and 0.05% concentrations of PG extract (≥ 40%) specialty to KB cells in comparison to FLM cells. PG 1% was toxic to KB and FLM cells. The proliferation test showed cell proliferation only when using PG 0,062%, for both cell lines and inhibited proliferation whith all other PG concentrations. These effects might be related to the anticarcinogenic properties of PG. / Doutor

CoordenaÃÃo de AperfeiÃoamento de Pessoal de NÃvel Superior / A periodontite à uma doenÃa infecto-inflamatÃria crÃnica caracterizada por intensa perda Ãssea. P. granatum (PNG) e IrradiaÃÃo com Laser de Baixa Intensidade (ILBI) tÃm demonstrado propriedades anti-inflamatÃrias e antioxidantes. O objetivo deste estudo foi avaliar as atividades anti-inflamatÃria e antirreabsortiva Ãssea da PNG combinada ou nÃo com ILBI na periodontite induzida por ligadura em ratos. A periodontite foi induzida em 72 ratos Wistar atravÃs da inserÃÃo de um fio de nylon-3.0 em torno do segundo molar superior esquerdo. A hemimaxila contralateral foi utilizada como controle. Grupos de 6 animais receberam soluÃÃo salina 0,9% (SAL), SAL+ILBI 4 J/cm2, PNG (60, 180, 540) mg/kg ou combinaÃÃo de PNG 540 mg/kg+ILBI 4 J/cm2. O laser de baixa intensidade GaAlAs foi aplicado imediatamente apÃs a cirurgia, enquanto a PNG foi administrada, por gavagem, diariamente, atà o 11 dia, quando, entÃo, os animais foram mortos, suas maxilas removidas e processadas para anÃlises macroscÃpica, histomÃtrica, histolÃgica e marcaÃÃo imunohistoquÃmica para TRAP. Amostras de tecido gengival foram obtidas para avaliaÃÃo da atividade de mieloperoxidase (MPO). Foram coletadas amostras de sangue para dosagem dos nÃveis sÃricos de fosfatase alcalina Ãssea (FAO), leucograma e anÃlise das funÃÃes hepÃtica e renal. Adicionalmente, os Ãndices hepÃtico e renal foram realizados. Os ratos foram pesados diariamente. A induÃÃo da periodontite causou intensa perda Ãssea alveolar (POA), reduÃÃo sÃrica da FAO, destruiÃÃo do ligamento periodontal e do cemento, e intensa infiltraÃÃo leucocitÃria. Sistemicamente, a periodontite induziu leucocitose e nÃo causou alteraÃÃes nos nÃveis sÃricos de transaminases hepÃticas, ureia ou creatinina, bem como nos Ãndices hepÃtico e renal. A POA foi prevenida significantemente por PNG (60= 34%, 180= 34%, 540= 42%), SAL+ILBI= 31% e PNG 540+ILBI= 48% (p<0.05). PNG 540 combinada ou nÃo com ILBI preveniu a perda Ãssea alveolar, a infiltraÃÃo leucocitÃria e preservou o periodonto de maxilas nas quais a periodontite foi induzida. Animais tratados com PNG 540+ILBI mostraram significante reduÃÃo na imunomarcaÃÃo positiva para TRAP (Periodonto NÃo desafiado=0,0  0,0; SAL= 0,016  0,004; SAL+ILBI= 0,01  0,003; PNG 540= 0,011  0,003; PNG 540+ILBI= 0,002  0,0003). O aumento da atividade de MPO foi prevenido por PNG (60= 46%, 180= 49%, 540= 76%), SAL+ILBI= 54% e PNG 540+ILBI= 80% (p<0.05). Embora a reduÃÃo da FAO observada no grupo salina nÃo tenha sido prevenida por PNG ou SAL+ILBI (p>0,05), PNG 540+ILBI causou um aumento significante nos nÃveis sÃricos de FAO (74,2  5,4 U/l), quando comparado ao SAL (44,9  3,0 U/l) (p<0,05). Nenhum grupo apresentou mudanÃas significantes nos nÃveis sÃricos de transaminases hepÃticas, ureia ou creatinina ou nos respectivos Ãndices hepÃtico e renal (p>0,05), e todos os grupos preveniram (p<0,05) a leucocitose quando comparada ao grupo SAL. Em suma, PNG combinada ou nÃo com ILBI reduziu a infiltraÃÃo leucocitÃria e o nÃmero de neutrÃfilos alÃm de reduzir a perda Ãssea alveolar, à custa da inibiÃÃo da ativaÃÃo de osteoclastos, sem causar alteraÃÃes sistÃmicas importantes / Periodontitis is a chronic infectious inflammatory disease. P. granatum (PNG) and low level laser irradiation (LLLI) have demonstrated anti-inflammatory properties and antioxidants. The aim of this study was to evaluate the anti-inflammatory and bone antiresorptive activities of PNG combined or not with LLLI in ligature-induced periodontitis in rats. Periodontitis was induced in 72 rats by inserting a nylon-3.0 around the left upper second molar. The contralateral hemimaxila was used as control. Groups of 6 animals received saline 0.9% (SAL), SAL+LLLI 4 J/cm2, PNG [60, 180, 540 (mg/kg)] or PNG 540 mg/kg+LLLI 4 J/cm2. The low intensity laser GaAlAs was applied immediately after surgery, while PNG was administered by gavage daily until day 11, when the animals were killed. The jaws were removed and processed for macroscopic, histometric, histological and immunohistochemical staining for TRAP. Gingival tissue samples were obtained to evaluate the activity of myeloperoxidase (MPO). Blood samples were collected for measurement of serum bone alkaline phosphatase (BALP), leukograms and analysis of liver and kidney function. Additionally, indexes of liver and kidney were performed. Rats were weighted daily. Periodontitis induction caused intense alveolar bone loss (ABL), reduction of BALP, cementum and periodontal ligament destructions, and intense leukocyte infiltration. Systemically, periodontitis induced leukocytosis and and did not alter hepatic transaminases, urea or creatinine serum levels, or liver and kidney indexes. The ABL was prevented by PNG (60= 34%, 180= 34%, 540= 42%), SAL+LLLI= 31% e PNG 540+LLLI= 48% (p<0.05). PNG 540 combined or not with LLLI decreased the alveolar bone resorption, the leukocyte infiltration and preserved the periodontium in the jaws in which the periodontitis was induced. Animals treated with PNG 540+LLLI showed an important decreasing of TRAP positive immunostaining (Periodontium Unchallenged = 0.0  0.0, SAL= 0.016  0.004; SAL+LLLI= 0.01  0.003; PNG 540= 0.011  0.003; PNG 540+LLLI = 0.002  0.0003). The raise of MPO activity was prevented by PNG (60= 46%, 180= 49%, 540= 76%), SAL+LLLI= 54% e PNG 540+LLLI= 80% (p<0.05). In spite the reduction of BALP, seen in SAL group was not prevented by SAL+LLLI or PNG (p>0.05), the combined treatment with PNG 540+LLLI caused an increase on BALP serum levels (74.2  5.4 U/l), when compared to SAL (44.9  3.0 U/l) (p<0.05). No change was seen for hepatic transaminases, urea or creatinine serum levels, or in liver and kidney indexes, in all groups (p>0.05) and all groups prevented (p<0.05) the leukocytosis observed in SAL group. In short, PNG combined or not with LLLI reduced leukocyte infiltration and the number of neutrophils and reduced alveolar bone loss, at the expense of inhibiting osteoclast activation, without causing systemic changes

Memoria para optar al título profesional de Ingeniera Agrónoma Mención Agroindustria / Actualmente en Chile la producción de granado se encuentra en aumento, siendo la variedad Wonderful, la más cultivada. La mayor superficie se ubica en la zona norte del país. Este trabajo tuvo como objetivos caracterizar física, química y sensorialmente frutos de granado de la variedad Wonderful, provenientes de tres zonas de cultivo y evaluar el efecto de la zona de cultivo en las características del fruto. La fruta provino de tres regiones de Chile: III Región (localidad de Copiapó), IV Región (localidad de Cerrillos de Tamaya) y Región Metropolitana (localidad de Huechún). El peso de los frutos de las localidades estudiadas varió entre 280 y 520 g. Los frutos de las regiones IV y RM presentaron tamaño grande y los de la III región, tamaño muy grande. El color externo, correspondió a Rojo y Rojo intenso, para las regiones III y IV y Amarillo rojizo a Rojo intenso para la Región Metropolitana. El rendimiento promedio de arilos en las tres localidades correspondió a un 40% respecto a peso de fruto entero. El rendimiento de jugo fluctuó entre 58 y 64,7 mL de jugo/100 g arilos, encontrándose los mayores valores en los frutos de la III región. Sin embargo, el rendimiento calculado en base a 100 g de fruta presentó valores similares entre las regiones en torno al 25%. Los valores encontrados en sólidos solubles variaron entre 15 y 16 °Brix y la acidez entre 1 y 1,9 g/100mL. El contenido de fenoles totales varió entre 0,9 y 1,9 g EAG/L y antocianos totales entre 0,3 y 0,9 g por litro, siendo ambos más altos en la IV Región. En relación a la capacidad antioxidante de los jugos se encontró valores de TEAC entre 2,7 y 5,7; presentándose una mayor capacidad antioxidante en los jugos obtenidos de fruta de la III Región. Los resultados indican que la zona de cultivo tiene un marcado efecto en el contenido de compuestos fenólicos, principalmente en el de antocianos. / Nowadays, in Chile the production of pomegranate has increased, being the Wonderful variety, the most important. The main production area is located in the northern region of the country. The aim of this study was to determine the physical, chemical and sensory characteristics of the pomegranate fruit cv. Wonderful grown in three different production areas, in order to evaluate the effect of the growing area in the fruit characteristics. The fruit comes from three regions of Chile: Third Region (locality of Copiapó), Fourth Region (locality of Cerrillos de Tamaya) and Metropolitan Region (locality of Huechún). The fruits weight varied between 280 and 520 g. The fruits of the fourth and the Metropolitan region showed Large size and those of the third region, Very large size. The external color ranged between to Red to Dark-red, for the fruits from the third and fourth regions and Reddish-yellow to Dark-red for the fruits from the Metropolitan Region. The average yield of the arils in the three regions was 40% respect to the whole fruit. Juice yield ranged between 58 and 64.7 mL/100g arils, being the highest values in the fruits of the third region. However, the yield calculated on the based 100 g of fruit showed similar values between the three regions, close to 25%. The values of soluble solids ranged between 15 and 16 °Brix and the acidity between 1 and 1.9g/100mL. The total phenolic content varied between 0.9 and 1.9 g GAE/L, total anthocyanins between 0.3 and 0.9 g per liter, being both higher in the IV region. The antioxidant capacity of the juices was between 2.7 and 5.7 TEAC, being higher in the fruit juice obtained from the third Region. The results show that the grown areas have a marked effect in the content of phenolics compounds, mainly in the anthocyanins.