Submitted by Ana Maria Fiscina Sampaio (fiscina@bahia.fiocruz.br) on 2012-07-30T21:26:19Z No. of bitstreams: 1 Mayara Ingrid Sousa Lima Seleção e caracterização de peptideos....pdf: 1915651 bytes, checksum: 4954d0969cc99ed5643d45ee27772173 (MD5) / Made available in DSpace on 2012-07-30T21:26:19Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Mayara Ingrid Sousa Lima Seleção e caracterização de peptideos....pdf: 1915651 bytes, checksum: 4954d0969cc99ed5643d45ee27772173 (MD5) Previous issue date: 2011 / Fundação Oswaldo Cruz. Centro de Pesquisas Gonçalo Moniz. Salvador, Bahia,Brasil / A hanseníase é uma doença infecciosa crônica, causada pelo Mycobacterium leprae, que apresenta manifestações clínicas variadas. Essas variações refletem em diferenças que vão de uma forte resposta imune celular com controle do crescimento do bacilo, no pólo tuberculóide, a uma anergia em resposta celular, no pólo virchoviano. A caracterização do perfil antigênico do M. leprae frente a esse quadro de múltiplos aspectos clínicos representa uma ferramenta fundamental para o desenvolvimento de novas plataformas para um diagnóstico diferencial mais sensível e/ou desenvolvimento de unidades vacinais. Dessa forma, o objetivo desse trabalho foi selecionar e caracterizar peptídeos miméticos de antígenos do M. leprae reativos contra IgGs totais purificadas de pacientes com hanseníase. Para a seleção foi utilizada a tecnologia de phage display, usando bibliotecas randômicas de peptídeos expressos em fagos filamentosos. Foi realizada uma seleção com IgGs de pacientes Tuberculóides e outra com IgGs de pacientes Virchovianos. A validação dos peptídeos foi realizada utilizando o imunoensaio ELISA, o teste de redução de colônias e análise de bioinformática. Após a pré-validação e sequenciamento foram encontradas 17 mimotopos para o pólo Vichorviano e 12 no pólo Tuberculóide. Foram validados 4 peptídeos, sendo 2 do pólo Tuberculóide (T03, T04) e 2 do pólo Virchoviano (V06 e V13). Os peptídeos TALFPWL (T03) e YSTTLSY (T04) foram imunorreativos em soros de pacientes paucibacilares, bem como em pacientes Virchovianos, além de terem alinhado com proteínas de membrana do M. leprae com potencial antigênico. O peptídeo V06 apresentou especificidade de 100% e sensibilidade de 94,74%, o que se complementa com os dados do teste de redução da pIII, o qual obteve uma taxa de redução de 82% em soros Virchovianos. O peptídeo V13 também foi reativo e apresentou similaridades com chaperonas e proteínas de membrana. Este estudo aponta perspectivas para a identificação de novos antígenos, propiciando a descoberta de novos alvos biológicos com potencial diagnóstico e/ou terapêutico. / Leprosy is a chronic infectious disease caused by Mycobacterium leprae, which has varied clinical manifestations. These variations reflect differences that spans from a strong cellular mediated immunity and bacili growth control the tuberculoid pole to a poor T cell immunity at the lepromatous pole. The antigenic profile characterization in both clinical forms represents a fundamental tool for the development of new platforms for a differential diagnosis more sensitive and/or development of vaccine units. Thus, the objective was to select and characterize mimetics peptides antigens of M. leprae reactive against total IgG purified from leprosy patients. The phage display technology was used for selection using random peptides libraries expressed on filamentous phages. A selection was performed with IgGs from tuberculoid patients and other IgGs of lepromatous patients. Peptides validation was performed using the ELISA immunoassay, the plaque reduction test and bioinformatics analysis. After the pre-validation and sequencing were found 17 valid sequences for the lepromatous pole and 12 tuberculoid pole. Four peptides were validated, two of tuberculoid pole (T03, T04) and two lepromatous pole (V06 and V13). The peptides TALFPWL (T03) and YSTTLSY (T04) were imunoreatives in sera from paucibacillary patients and in lepromatous patients. They had alignment with membrane proteins of M. leprae antigenic potential. The V06 peptide showed 100% specificity and 94.74% sensitivity, which is supplemented with the plaque reduction test, who obtained a reduction rate of 82% in lepromatous sera. The V13 peptide was also reactive and showed similarities with chaperones and membrane proteins. This study presents insights for new antigens identification, leading to discovery of new biological targets with potential diagnostic or therapeutic

Made available in DSpace on 2012-09-06T01:12:12Z (GMT). No. of bitstreams: 2 license.txt: 1748 bytes, checksum: 8a4605be74aa9ea9d79846c1fba20a33 (MD5) 249.pdf: 2200380 bytes, checksum: 3d3205b0b06a23c66e31518e6c25237b (MD5) Previous issue date: 1998 / Foi realizado com a finalidade de avaliar o papel protetor do BCG-ID, recebido nos primeiros anos de vida na proteçäo contra a hanseníase. Foram incluídos 620 comunicantes de pacientes com as formas multibacilares da hanseníase e acompanhados por um período de 5 anos. Os comunicantes foram recrutados no período de junho de 1987 a dezembro de 1992. Desses, 468 apresentavam cicatriz de BCG e 152 näo apresentavam cicatriz de BCG. A faixa etária variou de 0 a 28 anos e 72 (11,6 por cento) dos contatos estavam doentes ou adoeceram em algum momento do acompanhamento. O percentual de adoecimento foi de 8,33 por cento (39) com cicatriz de BCG e 21,7 por cento (33) sem cicatriz vacinal. Entre aqueles com cicatriz de BCG, 35 (7,5 por cento) foram classificados como PB e 4 (0,85 por cento) foram classificados MB. Para aqueles sem cicatriz de BCG, 24 (15,8 por cento) foram PB e 9 (5,9 por cento) foram MB. A proteçäo conferida pelo BCG para as formas multibacilares (BB/BL/LL) foi de 86 por cento e de 53 por cento para as formas paucibacilares (TT/BT/HI/NI). Entre as 59 contatos que adoeceram apresentando a forma paucibacilar 12 (20 por cento) tinham idade entre 0 a 9 anos e desenvolveram a forma Nodular Infantil (NI) e desses 10 (83,3 por cento) apresentaram cura espontânea, sugerindo que o BCG pode polarizar para a forma tuberculóide, crianças submetidas precocemente à infecçäo pelo M.leprae. A taxa de adoecimento considerando-se somente os casos co-prevalentes, foi 2 vezes maior nos pacientes sem cicatriz de BCG enquanto que, entre os casos incidentes esta taxa foi 7 vezes maior nos contatos sem cicatriz de BCG. Considerando todos os 72 contatos que adoeceram, a taxa de adoecimento foi 3 vezes maior para aqueles sem cicatriz de BCG quando comparados àqueles com cicatriz vacinal. Os dados incidentes se concentraram no primeiro ano após o diagnóstico do caso índice, sendo praticamente ausente após o quarto ano de seguimento. O risco de adoecer variou com a carga bacilar do caso índice, número de pessoas por cômodo da casa, mais de um doente multibacilar na família e tipo de convivência intradomiciliar com o caso índice. A proteçäo conferida pelo BCG variou de acordo com a faixa etária do contato, sendo de 55 por cento para aqueles com idade de 0 a 9 anos, de 91 por cento para 10 a 18 anos e nenhuma para aqueles com 19 a 28 anos, sugerindo um decréscimo no efeito protetor do BCG-ID provável influência da idade em que o contato recebeu a vacina. / The present study aimed to assess the role of the BCG-ID as a protector, received in the first years of life as a protection against leprosy. A total of 620 contacts of patients with the multibacillary forms of leprosy have been included and followed for period of five years. Such contacts were recruited from June 1987 to December 1992. These, 468 presented BCG scars and 152 did not present BCG scars. The age group varied from 0 to 28 years old and 72 (11.6%) of the contacts were sick or got sick sometime during the follow-up. The percentage of sickening was of 8.33% (39) with BCG scars and 21.7% (33) without vaccinal scars. Among those with BCG scars 35 (7.5%) were classified as PB and 4 (0.85%) were classified as MB. For those without BCG scars, 24 (15.8%) were PB and 9 (5.9%) were MB. Thus, the protection given by the BCG to the multibacillary forms (BB/BL/LL) was of 86% and of 53% to the paucibacillary forms (TT/BT/HI/INL). It was observed that among the 59 contacts who got sick presenting the paucibacillary form 12 (20%) were between 0 and 9 years old and developed the Infantum Nodular Leprosy (INL) form and out of these 10 (83.3%) presented spontaneous healing, suggesting that the BCG may polarize to the tuberculoid form, children that were early submitted to infection by the M.leprae. The sickening rate considering only the co-prevailing cases, was twice higher in those patient who did not present the BCG scar whereas, among the incident cases this rate was 7 times higher in the contacts without BCG scars. Considering all the 72 contacts who got sick, the sickening rate was 3 times higher for those without the BCG scars than when compared to those with the vaccinal scar. Another finding of this study was that the incident cases concentrated themselves in a meaningful way in the first year after the diagnosis of the rate case, being practically absent after the fourth year of follow-up, suggesting that the main source of infection in these contacts concentrated itself in the family environment. The risk of getting sick varied with the bacillus load of the rate case, number of people per room in the house, more than one multibacillary patient in the family and the kind of introdomicile living with the rate case. The protection given by the BCG varied according to the age group of the contact, being 55% for those with age from 0 to 9 years old, of 91% for 10 to 18 years old and none for those of 19 to 28 years old, suggesting a decrease in the protector effect of the BCG-ID and a probable influence of the age in which the contact received the vaccine.

Made available in DSpace on 2013-01-07T15:55:05Z (GMT). No. of bitstreams: 2 license.txt: 1748 bytes, checksum: 8a4605be74aa9ea9d79846c1fba20a33 (MD5) 7.pdf: 30303498 bytes, checksum: 88d366ad225123fe27db9aab5c4efceb (MD5) Previous issue date: 2006 / Analisa a rede asilar paulista de combate à lepra, constituída como parte integrante de um projeto de políticas públicas no período do isolamento compulsório (1929-1967), tendo como foco principal a trajetória de vida de Pedro Baptista, internado nos leprosários paulistas entre 1934 e 1955. Apresenta a conceituação da lepra como doença infecto-contagiosa e a discussão sobre a política de isolamento dos doentes; esta política foi fundamentada através das resoluções aprovadas nas Conferências Internacionais de Lepra, ocorridas entre 1897 e 1958. Investiga ainda o estigma sobre a lepra e o leproso através da perspectiva histórica desenvolvida no decorrer do trabalho.

Made available in DSpace on 2014-12-05T18:41:19Z (GMT). No. of bitstreams: 2 license.txt: 1748 bytes, checksum: 8a4605be74aa9ea9d79846c1fba20a33 (MD5) maristela_hernadez_ioc_dout_2007.pdf: 1703579 bytes, checksum: c6aea9db2011c8948799e66defbf0152 (MD5) Previous issue date: 2014-11-18 / Fundação Oswaldo Cruz. Instituto Oswaldo Cruz. Rio de Janeiro, RJ, Brasil / Os receptores da família LILR (Leukocyte Immunoglobulin- like Receptor) pertencem à superfarm1ia .das imunoglobulinas e são expressos em células de origem mielóide e linfóide. Os receptores inibidores (LILRB) apresentam longos domínios citoplasmáticos contendo de 2 a 4 domínios ITIM e são capazes de inibir ativação celular recrutando proteínas tirosinas fosfatases SHP-I. Já os receptores ativadores (LILRA) apresentam curto domínio citoplamático mas após associação com a cadeia gama do receptor Fc, que apresenta domínio ITAM, são capazes de transduzir sinais estimulatórios às células. Já foi demonstrado que LILRB I e LILRB2 podem inibir a citotoxidade de células NK e aumentar o limite de ativação de linfócitos T. Pouco se sabe a respeito da função dos receptores ativadores. No entanto. foi observado que LILRA2 estava com a expressão gênica aumentada nas lesões dos pacientes de hanseníase do polo lepromatoso. A função deste receptor foi investigada e os possíveis efeitos do Mycobacterium leprae sobre a ativação induzida por LILRA2 avaliados Foram realizados experimentos de "cross-linking" em células dendríticas derivadas de monócitos (MDDC). Inicialmente, foi observado que após a estimulação àtravés de LILRA2 ocorria aumento no conteúdo de proteínas tirosina fosforiladas, sugerindo haver transdução de sinal. Também foi observado que as MDDC estimuladas via LILRA2 apresentavam marcadores de ativação celular, como a expressão de CD83, aumento na expressão de moléculas co-estimulatórias e do MHC. Foi observado ainda que a ativação de LILRA2 não induz a secreção de níveis significativos das citocinas. No entanto, um forte efeito sinergístico na secreção de TNF e IL-IO pode ser observado quando as células eram estimuladas via LILRA2 e TLR4 ou CD40. Foi observado ainda que após o "cross-linking", as MDDC apresentam forte capacidade aloestimulatória. A presencade células LILRA2+ CD68+ nas lesões dos pacientes lepromatosos foi detectada utilizando microscopia confocal. Nos experimentos subseqüentes foi avaliado se o M. leprae ativaria as MDDC e modularia a ativação induzida por LILRA2. Inicialmente observamos que as MDDC estimuladas com M. tuberculosis, mas não com M. leprae, secretam TNF Baixas concentrações de IL-IO foram encontradas nas culturas estimuladas com M. leprae quando comparadas às culturas estimuladas com M tuberculosis. E ainda, o M. tuberculosis, mas não o M. leprae, teve efeito sinergístico com LILRA2 na produção de TNF. Na tentativa de encontrar o ligante deste receptor, foi gerado um tetrâmero e sua ligação a diversos tipos celulares foi testada. Interação do tetrâmero com monócitos estimulados com IL-4 e também MDDC foi detectada. Embora experimentos de imunoprecipitação tenham sido realizados, o ligante não foi encontrado. Até o momento, já observamos que a LILRA2 pode favorecer a maturação de MDDC, pelo menos in vitro, e contribuir para aumentada produção de citocinas. O M. leprae não parece ser um potente ativador das células dendríticas e ainda pode limitar a ativação induzida por outros receptores. A elevada expressão de moléculas coestimulatórias, a presença de IL-I O e ausência de IL-12 nas MDDC estimuladas com M. leprae ou via LILRA2 sugere que estes podem estar envolvidos na indução de tolerância observada nos pacientes lepromatosos / LILR (Leukocyte Immunoglobulin- like Receptor) are a family of receptors from the immunoglobulin superfamily expressed on myeloid and lymphoid cells. LILR are characterized by either 2 or 4 homologous Immunoglobulin-like dom ais. One subset of receptors, LILRB, displays long citoplasmatic tails containing immuno receptor tyrosine-based inhibitory motifs (ITIM). These receptors inhibit cell activation by recruiting protein tyrosine phosphatase SHP-1. Another subset of receptors, LILRA, contains short cytoplasmatic domain that lack recognizable docking motifs for signalling mediators. These rece ptors associate with the gamma chain of the Fc receptor, which transduces stimulatory signals b y recruiting protein tyrosine kinases through a cytoplasmatic immunoreceptor tyrosine-based activat ion motif (ITAM). A third subset of receptors has no transmembrane domain and is secret ed as a soluble receptor. Some of these receptors, LILRB1 and LILRB2, are specific receptor s for MHC class I molecules. LILRBs have been shown to inhibit cell activation in several ex perimental systems. Little is know about the activating receptors. LILRA2 was found to be up-reg ulated in lesions of lepromatous leprosy patients. In order to clarify whether this receptor might influence the immune response in leprosy, the function of this receptor was investigated. Cro ss-linking of LILRA2 on dendritic cell (DC) caused an up-regulation on protein tyrosine phospho rylation, suggesting LILRA2 stimulates intracellular signaling. Upon cross-linking, DC exp ress high levels of MHC I and II and co- stimulatory molecules, but cytokines were not detec ted on culture supernatant. However, a strong synergistic effect on TNF and IL-10 production was observed when cells were simultaneously stimulated by LILRA2 and TLR4 or CD40. LILRA2 activ ated DC also induced allogeneic T lymphocytes proliferation. By double immunofluoresc ence labeling, it was identified that LILRA2 is expressed on macrophage-like CD68+cells i n lepromatous leprosy skin lesions. The capacity of M. leprae to induce DC activation and/or to modulate LILRA2- induced activation was further investigated. In functional experiments it was observed that M. tuberculosis but not M. leprae stimulated cells induce TNF secretion. IL-10 was d etected on M. leprae -stimulated cultures, albeit at lower level than that of M. tuberculosis -stimulated cells. M. leprae had no synergistic effect on LILRA2 activated cells. To id entify LILRA2 ligand, a tetramer was generated and it’s binding to different cell types was tested. The tetramer interacted with IL-4 stimulated monocytes and DC. Although Immunoprecipi tation experiments were preformed, the ligand was not successfully identified. The data ob tained so far indicates that LILRA2 activation enhances DC maturation markers expression and cytok ine secretion by activated DC. M. leprae is not a potent DC activator. The high surface levels of co-stimulatory molecules, the presence of IL-10 and absence of IL-12 suggest that DC stimulat ed by M. leprae or LILRA2 are only partially activated and they might contribute to lepromatous leprosy tolerance

Made available in DSpace on 2014-12-05T18:41:20Z (GMT). No. of bitstreams: 2 license.txt: 1748 bytes, checksum: 8a4605be74aa9ea9d79846c1fba20a33 (MD5) lucineia_kontos_ioc_dout_2009.pdf: 75178965 bytes, checksum: 32149962187e4997d9d42f8788cd70c8 (MD5) Previous issue date: 2014-11-18 / Fundação Oswaldo Cruz. Instituto Oswaldo Cruz. Rio de Janeiro, RJ, Brasil / A hanseníase é uma doença sistêmica infecto-contagiosa crônica causada pelo patógeno intracelular obrigatório Mycobacterium leprae, que afeta principalmente a pele e nervos periféricos dos seres humanos. Apesar dos intensos e bem controlados programas de terapia multidroga, a transmissão desta doença continua ocorrendo e um grande número de indivíduos acometidos permanece em risco de desenvolver dano ao nervo. A lesão neural na hanseníase é decorrente da capacidade do M. leprae infectar os nervos periféricos, alojando-se preferencialmente no interior de células de Schwann (CS). O presente trabalho teve como objetivo geral contribuir para o entendimento da interação M. leprae - CS, e como objetivos específicos: 1) estabelecer e caracterizar fenotipicamente culturas de CS de rato (CSPR) e humanas primárias (CSHP), comparando com a linhagem de CS humana ST88-14; 2) determinar a cinética de associação do M. leprae a estas células; 3) analisar aspectos morfológicos da interação do M. leprae com a CS; e 4) estudar o efeito do M. leprae sobre a expressão da cadeia a-2 da laminina-2, Beta-distroglicana, Desert Hedgehog (Dhh) e gangliosídeo 9-O-acetil GD3 pela CS. Os resultados deste trabalho mostraram que as CS ST88-14, as CSPR e as CSHP apresentam características de CS com fenótipo amielínico. Através de microscopia eletrônica de varredura foi observado que as CS ST88-14 tratadas ou não com o M. leprae formaram monocamada e que 50 por cento destas células apresentaram M. leprae aderidos com 2 horas de tratamento. As bactérias apresentavam-se aderidas, envolvidas ou não por filopódios, e em processo de internalização. O grau de associação do M. leprae às CSPR e CSHP foi semelhante ao observado nas CS ST88-14. Uma baixa porcentagem de CS ST88-14 mostraram expressão constitutiva do gangliosídeo 9-O-Acetil GD3 Quando tratadas com o M. leprae letalmente irradiado estas células apresentaram uma modulação positiva para esta molécula e seu padrão de expressão, inicialmente difuso tornou-se pontual com o curso temporal do tratamento com as bactérias. A análise do efeito do M. leprae sobre a expressão da cadeia a-2 da laminina-2 em CSHP mostra que o bacilo não modula a expressão desta molécula tanto ao nível traducional como transcricional. Já o M. leprae modulou negativamente a expressão de RNAm de ß-distroglicana em CSHP. Entretanto não afetou o nível da protéina nas condições experimentais utilizadas. O M.leprae também modulou negativamente a expressão de RNAm de Dhh nestas células. Como camundongos ôknockoutõ para o gene dhh apresentam microfasciculação no nervo e 20 por cento das biopsias de nervo de pacientes com hanseníase apresentam microfasciculação, investigamos a expressão de Dhh em nervos de hanseníase com e sem microfasciculação. Biopsias com microfasciculação apresentaram uma considerável diminuição na expressão de RNAm de Dhh quando comparados com pacientes que apresentaram nervo sem microfasciculação. Com os resultados obtidos nesse trabalho mostramos que o M. leprae é capaz interagir com a CS in vitro e que moléculas potencialmente relevantes nesta interação são afetadas por esta bactéria, podendo isso desencadear e/ou promover a patogenia observada na hanseníase / Leprosy is an infectious and contagious disease caused by Mycobacterium leprae, an obligate intracellular parasite. The disease affects predominantly the skin and the peripheral nerves in humans. Despite the control programs implemented and the establishment of multidrug treatment (MDT), the transmission of the disease still occurs in high levels. Individuals affected by the disease are at risk of developing severe disabilities and deformities. The nerve damage observed in leprosy is caused by the presence of M. leprae in the nerves, mainly inside Schwann cells (SCs). The present study aimed to investigate the M. leprae-Schwann cell interaction, consisting of the following objectives: i) establishment and phenotypic characterization of cultures from primary rat Schwann cells (PRSC) and primary human Schwann cells (PHSC); ii) analysis of the capacity of M. leprae to associate these cells; iii) morphological analysis of M. leprae interaction with the ST88-14 human SC cell line by electron microscopy; and iv) investigation of the effect of M. leprae on the Schwann cell expression of α2- laminin, -dystroglycan, desert hedgehog (Dhh) and 9-O-acethyl-GD3. The results showed that ST88-14 SC, PRSC, and PHSC display a non-myelinating phenotype. Scanning electron microscopy showed that ST88-14 SC cultures treated or not with M. leprae formed a monolayer and that 50% of these cells displayed M. leprae on their surface after a two-hour treatment with the bacteria. The bacteria were in contact with the cell surface, amid fillipodia or lying on smooth membrane regions; some of them were in the course of being internalized. A similar degree of association of M. leprae to PRSC and to PHSC was observed. A low percentage of the ST8814 SC constitutively expressed the 9-O-acetyl GD3. After treatment with lethally irradiated M. leprae these cells exhibited an upregulation of this ganglioside, with an additional change in the expression pattern, which was initially difuse and became spotty. The results obtained also suggest that M. leprae is unable to modulate the expression of laminin-α2 in PHSC, both at the transcriptional and at the translational level. In contrast, live M. leprae was able to downregulate the levels of -dystroglican mRNA to in PHSC cultures, although protein levels were unaffected. Moreover, M. leprae stimulus induced downregulation of Dhh mRNA in PHSC. As dhh knockout mice present minifascicles in the nerves, and about 20% of leprosy biopsies display microfasciculation, we ascertained the Dhh expression in leprosy nerve biopsies with microfasciculation, comparing it with the ones without this morphological pattern. Nerve biopsies with microfasciculation exhibited significantly lower levels of this factor, speculatively related to the structural disarrangement usually found in the leprosy nerves. The results of this study showed the possible utilization of Schwann cells in vitro models to study M. leprae-Schwann cell interaction. M. leprae was able to affect the expression of relevant SC molecules involved in the interaction with the bacillus, with a potential link of this modulation with the pathogenesis of the leprosy nerve damage.

Made available in DSpace on 2015-12-29T16:20:09Z (GMT). No. of bitstreams: 2 raquel_barbieri_ini_mest_2013.pdf: 1834473 bytes, checksum: 1e591eb91c0a6e3d12d71fd1c53d6769 (MD5) license.txt: 1748 bytes, checksum: 8a4605be74aa9ea9d79846c1fba20a33 (MD5) Previous issue date: 2015-10-29 / Fundação Oswaldo Cruz. Instituto Nacional de Infectologia Evandro Chagas. Rio de Janeiro, RJ, Brasil / Introdução: Apesar do recente declínio dos coeficientes de detecção de casos novos, a hanseníase permanece endêmica no Brasil e em outros países do mundo. O diagnóstico da doença se baseia nos aspectos clínicos, embora o índice baciloscópico e a histopatologia sejam usados como suporte para o diagnóstico. Nas formas paucibacilares, bacilos são raramente detectados e o exame histopatológico pode ser inconclusivo. Neste estudo, analisamos os aspectos clínicos e histopatológicos de pacientes com suspeita de hanseníase paucibacilar e estabelecemos a contribuição do PCR no manejo clínico destes casos. Pacientes e Métodos: Foram estudados 66 pacientes com lesão cutânea única em placa, atendidos no Ambulatório Souza Araújo (ASA) da Fundação Oswaldo Cruz, Rio de Janeiro, Brasil, no período de janeiro de 2008 a dezembro de 2011. Dois patologistas independentes, que não tinham informações sobre a história clínica dos pacientes, realizaram a reanálise histopatológica. Os pacientes foram classificados como Alta (A), Média (M) e Baixa (B) probabilidade do diagnóstico de hanseníase ou outras dermatoses (O). O DNA foi extraído de fragmentos de biópsias de pele e os níveis de M. leprae Ag85B e 16S rDNA foram estimados usando a amplificação por PCR quantitativo (qPCR) Resultados: O qPCR foi positivo em 46/66 (69.7%) das amostras de pele. Dos 66 pacientes, 57 (86.3%) tinham recebido tratamento com poliquimioterapia (PQT) baseado nos aspectos clínicos e histopatológicos. A associação entre o resultado do PCR e a variável tratamento mostrou que entre os 19 pacientes classificados como L+O, 2 pacientes com PCR positivo não tinham recebido tratamento e 6 pacientes com PCR negativo tinham sido tratados com PQT por 6 meses. Conclusão: Concluímos que o qPCR é uma ferramenta útil para o diagnóstico e o manejo clínico dos pacientes com suspeita de hanseníase paucibacilar, nos casos em que a histopatologia não é conclusiva / Background: Despite recent decline in detection rates, leprosy remains endemic in Brazil and in others countries around the world. Frequently, the disease diagnosis is based only on clinical aspects, although the bacteriological index in skin smears and histopathological examination are used to support conclusions. In paucibacillary forms, ba cilli are rarely detected, and histopathological examination may not be conclusive. In this study, we analised the clinics and histopathological aspects of patients suspected of paucibacillary leprosy and try to establish the contribution of PCR to the clinical management of these cases. Methods: We evaluated 66 patients with single - plaque skin lesions who attended the Leprosy Outpatient Unit of Oswaldo Cruz Foundation, Rio de Janeiro, Brazil, between 2008 and 2011. Two independent pathologists who were blinded to the patients’ clinical details performed pathological reanalysis of slides. Patients were classified as High (H), Medium (M), and Low probability (L) for the diagnosis of leprosy or another dermatosis (O). DNA was extracted from the fragmen ts of skin biopsies, and the levels of M. leprae Ag85B and 16S rDNA were estimated using qPCR amplification . Findings: The qPCR was positive in 46/66 (69.7%) of skin samples. Out of 66 patients, 57 (86.3%) received multidrug therapy (MDT) based on clinical and histopathological examination. The association between previous treatment and qPCR results showed that among 19 patients classified as L+O, 2 qPCR - positive patients were not treated, whereas 6 patients with negative qPCR results were treated with MDT for 6 months. Conclusion: In conclusion, qPCR is a useful tool to diagnosis and clinical management in suspected cases of paucibacilary leprosy in cases with inconclusive histopathology.

Made available in DSpace on 2016-02-26T13:42:28Z (GMT). No. of bitstreams: 2 juliana_gomes_ioc_mest_2015.pdf: 784093 bytes, checksum: 27a8ff3a27d01ddae7267403cf87e66a (MD5) license.txt: 1748 bytes, checksum: 8a4605be74aa9ea9d79846c1fba20a33 (MD5) Previous issue date: 2016-02-23 / Fundação Oswaldo Cruz. Instituto Oswaldo Cruz. Rio de Janeiro, RJ, Brasil / A hanseníase é uma doença infecciosa e crônica, de alta infectividade, no entanto com baixa patogenicidade. Segundo o Ministério da Saúde, o exame de comunicantes é uma das atividades fundamentais para interromper a cadeia de transmissão da doença. Neste contexto, o Ambulatório Souza Araújo (ASA) do Instituto Oswaldo Cruz/Fundação Oswaldo Cruz, centro de referência em hanseníase, é responsável por aproximadamente 10% dos diagnósticos de casos da doença no Estado e no município do Rio de Janeiro. O Serviço Social do ASA atua por meio de ações de acolhimento, humanização e educação em saúde, conscientizando pacientes e familiares acerca dadoença. No entanto, apesar dos esforços da equipe para a captação dos contatos, o número de comunicantes examinados ainda está muito abaixo do esperado (cerca de 62%). Neste sentido, buscou-se o fortalecimento do diálogo entre equipe e usuários através da coleta de informações acerca destes e suas percepções sobre a doença visando, posteriormente, subsidiar a construção de um material educativo próprio que possa permitiruma maior compreensão da hanseníase e, consequentemente, o aumento na captação de contatos de pacientes portadores da doença. O grupo estudado foi composto por 15 contatos de pacientes novos, registrados no ASA, compondo uma amostragem por conveniência. Foram realizadas entrevistas individuais, utilizando um roteiro semi-estruturado que contemplou diversas questões relativas à doença. Foi adotada a técnica do Discurso do Sujeito Coletivo. Os resultados apontam para uma maior divulgação da doença na mídia uma vez que, apesar das palestras e dos materiais educativos impressos terem sido bem recebidos pelos contatos/familiares, estes sugerem que as ações de promoção e educação em saúde devem ultrapassar os limites institucionais, desvelando os mitos e sensibilizando a população para o enfrentamento da doença / Leprosy is an infectious and chronic disease with high infectivity, howeve r with low pathogenicity. According to the Ministry of Health, the examination of the contacts is one of the key activities to break the chain of transmission ‟s disease . In this context, the Ambulatory Souza Araújo (ASA) of the Instituto Oswaldo Cruz / Fun dação Oswaldo Cruz, referral center for leprosy, is responsible for approximately 10% of cases of disease diagnosis in the state and city of Rio de Janeiro. The ASA Social Services works through actions host, humanization and health education, educating pa tients and families about the disease. However, despite the team's efforts to capture the contacts, the number of contacts examined is still much lower than expected (about 62%). In this sense, we sought to strengthen the dialogue between staff and users b y collecting information about these and their perceptions about the disease in order subsequently subsidize the construction of its own educational materials that would enable a greater understanding of leprosy and consequently the increase in the uptake of contacts of patients with the disease. The study group was composed of 15 contact new patients, recorded in the ASA, composing a sample for convenience. Individual interviews were conducted using a semi - structured questionnaire that included several que stions related to the disease. It was adopted the technique of collective subject discourse. The results point to a wider spread of the disease in the media since, despite lectures and printed educational materials have been well received by contacts / fam ily, they suggest that the actions of health promotion and education should go beyond institutional boundaries, unveiling the myths and sensitizing the population to cope with the disease

Made available in DSpace on 2016-03-04T14:02:54Z (GMT). No. of bitstreams: 2 priscila_andrade_ioc_dout_2014.pdf: 6946480 bytes, checksum: 1eca06682311d8d83fb18d7d32053a36 (MD5) license.txt: 1748 bytes, checksum: 8a4605be74aa9ea9d79846c1fba20a33 (MD5) Previous issue date: 2016-01-13 / Fundação Oswaldo Cruz. Instituto Oswaldo Cruz. Rio de Janeiro, RJ, Brasil. / Na hanseníase, a reação reversa (RR) é considerada um fenômeno de reativação imune, no qual uma resposta inflamatória abrupta se inicia, comprometendo a pele e os nervos periféricos. A RR ocorre ao longo do espectro da hanseníase, sendo descrita, inclusive, nas formas anérgicas lepromatosas (LL) subpolares. É sugerido que nas formas reacionais, células imunes da pele como macrófagos e células dendríticas, se tornam ativadas espontaneamente e iniciam uma resposta imune contra componentes do Mycobacterium leprae (ML), o que levaria a quebra da imunossupressão pré-existente. O objetivo desse estudo é caracterizar as populações celulares que constituem as lesões de pele L-lep (BL e LL) antes e no início da RR, assim como, determinar a programação genética envolvida na quebra da anergia tecidual nesse grupo durante esse episódio. O início da RR altera drasticamente a organização e morfologia da lesão L-lep, levando ao aparecimento de novas estruturas e tipos celulares, como células epitelioides, granulomas e uma grande diversidade fenotípica de macrófagos e células dendríticas. O marcador de células dendríticas plasmocitoides, CD123, foi mais expresso em lesões de pele RR do que no tecido não reacional, com a população CD123+ exibindo tanto marcadores fenotípicos de macrófagos quanto de células dendríticas. Por sua vez, o ML pôde induzir a expressão dessa molécula in vitro A análise de expressão gênica mostrou um aumento dos níveis de RNA mensageiro da interleucina-3 (IL-3), fator estimulador de colônias de macrófagos (M-CSF), fator estimulador de colônias de macrófagos e granulócitos (GM-CSF), fator de necrose tumoral-\03B1 (TNF\03B1), interferon-\03B3 (IFN-\03B3), indoleamina-2,3-dioxigenase (IDO), interleucina-15 (IL-15), receptor de vitamina D (VDR), quimiocina CXCL10 e receptor Toll-like 2 (TLR2) nas lesões RR quando em comparação com o grupo L-lep. Em síntese, nosso estudo demonstrou que o microambiente da lesão RR favorece a diferenciação e plasticidade celular, além de exibir uma variedade de populações mielomonocíticas, destacando o papel das células CD123+ e de um eixo de ativação dependente de IL-3 durante a RR / In leprosy, type 1 reaction (T1R) is considered a Th1 immune reactivation in which a sudden inflammatory response takes place that compromises t he skin and peripheral nerves. T1R occurs across the leprosy clinical spectrum and has even been d escribed in the anergic subpolar lepromatous (LL) forms. It is hypothesized that in the T1R forms, skin immune cells such as macrophages and dendritic cells (DCs) become activated, which in turn could initiate a local innate immune response against the exi sting Mycobacterium leprae (ML) components, overwhelm ing the predominant immunosuppressive state. The aim of the present study is to characterize the skin cellular populations that constitute the BL and LL (L - lep) skin lesion before and during the T1R epis ode , as well as to determine the gene programming involved in the disruption of the tissue immunosuppression brought about by this phenomenon. The outset of T1R drastically alters the morphological landscape of the LL skin lesion, leading to the appearance of new structures and cell types such as epithelioid granulomas and a wide variety of macrophagic and DC phenotypes. The plasmacytoid DC marker, CD123, was more intensely expressed in T1R skin lesions than in non - reactional tissue, with CD123 + cells exhibiting both macrophag ic and DC phenotypic markers. In turn, ML, but not TNF - α, was able to increase CD123 expression while gene expression analyses demonstrated IL - 3, M - CSF , GM - CSF , TNF α , IFN - γ , IDO , IL - 15 , VDR , CXC L 10, and TLR2 upregulation in the T1R lesions in comparison to the non - reactional group. In summary , our study showed that the T1R lesion environment favors cell differentiation and plasticity in addition to displaying a high diversity of myelomonocytic populations and highlighting the role of CD123 + cells and the IL - 3 axis during the progression of T1R.

Made available in DSpace on 2016-05-02T13:01:26Z (GMT). No. of bitstreams: 2 37.pdf: 4579487 bytes, checksum: 7c96aa7d7d3f2f36e8248720aae56325 (MD5) license.txt: 1748 bytes, checksum: 8a4605be74aa9ea9d79846c1fba20a33 (MD5) Previous issue date: 2015 / O presente trabalho tem o objetivo de analisar quantitativa e descritivamente as características sócio demográficas, clínico-funcionais, de auto-percepção de saúde, bem estar e qualidade de vida dos idosos institucionalizados em uma ex-colônia de hanseníase,no município de Itaboraí, Rio de Janeiro. O fim do isolamento compulsório, a descoberta da cura para a hanseníase, o envelhecimento da população egressa das colônias, o início de prática educativa e de promoção de saúde das pessoas idosas para a melhoria da qualidade de vida, norteiam este trabalho. Foram utilizados dados de dois inquéritos de saúde realizados no ano de 2007 e em 2014 que contêm informações sócio demográficas e uma avaliação multidimensional desses idosos. Apresentamos análises estatísticas descritivas de variáveis de saúde, sócio demográficas e de qualidade de vida nos períodos de 2007 e 2014. As características da população estudada com idade média de 69,9 e 72,8 anos, respectivamente em 2007 e 2014, o grau de escolaridade predominantemente fundamental incompleto, e a maioria do grupo convivendo maritalmente, não são comparáveis às descritas para idosos institucionalizados no país. Como observado, de maneira geral, os entrevistados consideraram sua saúde boa ou muito boa, onde podemos supor que a percepção do indivíduo sobre a saúde não sobrevém apenas das sensações físicas de dor e desconforto, mas, sobretudo, das consequências sociais e psicológicas da presença da enfermidade. Espera-se que os resultados deste estudo sirvam de subsídio para a implantação de políticas públicas e programas que preconizem o envelhecimento saudável de idosos egressos do isolamento pela hanseníase, que, além das sequelas relacionadas à doença, também estão envelhecendo e necessitam de maiores intervenções e cuidados. / This work presents a descriptive research about clinical and functional status, quality oflife, subjective health perception and wellbeing of institutionalized elderly residents at Tavares de Macedo Hospital Colony (HETM) in Itaboraí, Rio de Janeiro State, who were affected by leprosy. The end of health policies that isolated those affected by the disease, alongside the discovery of a cure, aging of those who lived at the colony hospital and the use of health promotion activities in this population direct this work. Data from two health surveys conducted in 2007 and 2014 that contained variables on socio demographics, health conditions and quality of life. The variables collected at the two time points were different from each other, so we conducted separate descriptive statistics analyses for thetwo years. The mean age of residents was 69.9 and 72.8 years, in 2007 and 2014, respectively; educational level was predominantly incomplete primary education and marital status, married or in a civil union. These results are different from the mean in the general population of elderly in Brazil. In general, respondents considered their health good or very good, thus showing that individuals perception of their own health, on average, were not harshly affected by the physical sensations of pain, discomfort associated with the disease as well as by the social and psychological consequences of having survived an era of stigma and isolation in Brazil. We hope the results from this research will guide in the continuation of health promotion policies and subside new programs in hospitals where survivors of leprosy reside. (AU)^ien

Made available in DSpace on 2016-05-16T12:51:24Z (GMT). No. of bitstreams: 2 roberta_lemos_ipec_mest_2013.pdf: 497923 bytes, checksum: 1bbd7cb8b74e1aa86868187d3f51be96 (MD5) license.txt: 1748 bytes, checksum: 8a4605be74aa9ea9d79846c1fba20a33 (MD5) Previous issue date: 2013 / Fundação Oswaldo Cruz. Instituto Nacional de Infectologia Evandro Chagas. Rio de Janeiro, RJ, Brasil / O tratamento da hanseníase tem como objetivo a cura bacteriológica que interrompe a transmissão, a cura clínica que devolve bem estar ao paciente e a redução das incapacidades permanentes, sendo considerado um ponto estratégico para o controle da endemia e para sua eliminação como problema de saúde pública. Entretanto, as medicações da poliquimioterapia podem causar eventos adversos, levando a desfechos clínicos desfavoráveis, prejudicando a evolução clínica desses pacientes, podendo contribuir para o abandono da poliquimioterapia padrão. O esquema terapêutico substitutivo é indicado para pacientes que apresentam intolerância a poliquimioterapia padrão. Este estudo teve como objetivo avaliar a evolução clínica dos pacientes multibacilares tratados com esquema terapêutico substitutivo preconizado pelo Ministério da Saúde, comparando-os com aqueles submetidos ao esquema padrão (PQT/OMS \2013 12 doses) para o tratamento da hanseníase. Adicionalmente, pretendese descrever os principais eventos adversos que levaram a troca do esquema padrão. Foi realizado um estudo retrospectivo, utilizando uma coorte de 435 pacientes de hanseníase multibacilares registrados no Ambulatório Souza Araújo no período de janeiro de 1998 a dezembro de 2009. Os pacientes foram divididos em dois grupos: grupo 1 composto por 390 pacientes que realizaram tratamento com a poliquimioterapia padrão e o grupo 2 por 45 pacientes que realizaram tratamento com poliquimioterapia substitutiva. Os desfechos clínicos utilizados para comparação dos dois esquemas terapêuticos foram: evolução da carga bacilar, evolução do grau de incapacidade física e evolução da ocorrência de episódios reacionais após a alta da PQT/OMS, comparando com o esquema padrão Para isso, foi realizado um estudo retrospectivo, utilizando uma coorte de pacientes de hanseníase multibacilares registrados no Ambulatório Souza Araújo (Laboratório de Hanseníase/IOC/Fiocruz) no período de janeiro de 1998 a dezembro de 2009. Foram estudados os pacientes que concluíram o tratamento no serviço e que apresentaram acompanhamento de 1 ano após a alta do tratamento específico. Os pacientes foram divididos em dois grupos: grupo 1 composto por 390 pacientes que realizaram tratamento com a poliquimioterapia padrão e o grupo 2 por 45 pacientes que realizaram tratamento com poliquimioterapia substitutiva. O estudo demonstrou que a dapsona foi responsável pela troca de esquema terapêutico. A poliquimioterapia substitutiva foi semelhante ao esquema padrão com relação à evolução da carga bacilar e da incapacidade física com 1 ano após alta do tratamento. Quando avaliamos a presença de reação hansênica no período de 1 ano após o tratamento, os pacientes tratados com esquema substitutivos tiveram uma chance menor de ter quadros reacionais quando comparado com os pacientes com esquema padrão. Adicionalmente, os esquemas substitutivos mostraram ser tão efetivo quanto ao esquema padrão em relação ao controle da hanseníase e sua morbidade / The treatment of leprosy aims to bacteriological cu re that stops transmission, clinical cure that returns the patient welfare and reduce permane nt disability and is considered a strategic point for disease control and elimination as a publ ic health problem. However, medications can cause multidrugtherapy adverse events leading t o unfavorable clinical outcomes, impairing the clinical outcomes of patients and may contribute to the abandonment of standard polychemotherapy. The replacement regimen is indicated for patients who are intolerant to standard polychemotherapy. This study aimed to evaluate the clinical outcome of patients treated with multibacillary regimen sub stitute recommended by the Ministry of Health, comparing them with those undergoing standa rd regimen (WHO / MDT - 12 doses) for the treatment of leprosy. Additionally, we inte nd to describe the main adverse events that led to the exchange of the default schema. We condu cted a retrospective study using a cohort of 435 patients with multibacillary leprosy recorde d in Ambulatory Souza Araújo from January 1998 to December 2009. Patients were divide d into two groups: group 1 comprised of 390 patients who underwent standard treatment wi th multidrug therapy and group 2 of 45 patients who underwent treatment with multidrug the rapy replacement. Clinical outcomes used to compare the two regimens were: evolution of bacterial load, evolution of physical disability and evolution of the occurrence of react ional episodes after discharge from MDT / WHO, compared with the standard regimen. For this, we conducted a retrospective study using a cohort of multibacillary leprosy patients r egistered at the Clinic Souza Araújo (Leprosy Laboratory / IOC / Fiocruz) from January 1 998 to December 2009. We studied patients who completed treatment in the service and who had follow-up of 1 year after discharge from treatment. Patients were divided int o two groups: group 1 comprised of 390 patients who underwent standard treatment with mult idrug therapy and group 2 of 45 patients who underwent treatment with multidrug the rapy replacement. The study showed that dapsone was responsible for the exchange regim en. Chemotherapy substitution pattern was similar to the scheme with respect to the evolu tion of the bacterial load and disability 1 year after discharge from treatment. When we evalua ted the presence of leprosy reaction within 1 year after treatment, patients treated wit h replacement scheme had a lower chance of having reactional states when compared with pati ents with standard schema. Additionally, the replacement schemes proved as effective as the standard regimen in relation to leprosy control and morbidity.