Made available in DSpace on 2016-03-08T14:00:32Z (GMT). No. of bitstreams: 2 amanda_silva_ioc_dout_2015.pdf: 5657411 bytes, checksum: dd6832f72c07e39e96a4939a73d96d25 (MD5) license.txt: 1748 bytes, checksum: 8a4605be74aa9ea9d79846c1fba20a33 (MD5) Previous issue date: 2016-02-23 / Fundação Oswaldo Cruz. Instituto Oswaldo Cruz. Rio de Janeiro, RJ, Brasil / A família Herpesviridae abriga um grande número de vírus que infectam animais e o homem. Nove herpesvirus foram identificados que possuem o homem como hospedeiro primário e descritos através da análise filogenética foram classificados em três subfamília: Alfaherpesvirinae, Betaherpesvirinae e Gamaherpesvirinae. A família Herpesviridae agrupa vírus de genoma DNA e que estão associados a infecções latentes e a manifestações clínicas recorrentes. As infecções por herpesvírus podem se manifestar de forma assintomática ou sintomática, podendo causar diferentes síndromes clínicas. Estes vírus normalmente são benigno, sendo o aparecimento de lesões nas mucosas a forma mais comum da doença, podendo causar doenças neurológicas severas principalmente em pacientes imunocomprometidos. A incidência e severidade podem ser exacerbadas entre indivíduos imunocomprometidos. A presente tese é composta por três manuscritos, sendo dois trabalhos publicados e um submetido. Estes estudos se propuseram a padronizar métodos de silenciamento gênico, otimizar e comparar métodos para o diagnóstico e realizar a caracterização genotípica do herpes simples tipo 1 (HSV-1) e herpesvírus humano tipo 6 (HHV-6). Os estudos foram realizados em paciente imunocomprometidos do estado do Rio de Janeiro No primeiro artigo \201CRNA interference inhibits herpes simplex vírus type 1 isolated from saliva samples and mucocutaneos lesions\201D, foi possível realizar a comparação da sensibilidade para detecção do HSV-1 por isolamento viral e pela metodologia da reação de PCR em tempo real em amostras de lesão, saliva e cultura celular . Além disso, neste estudo foi possível obter-se a inibição de mais 99% da replicação viral do HSV-1 in vitro utilizando a técnica de RNA de interferência. No segundo estudo \201CGenotypic characterization of herpes simplex vírus type 1 isolates in immucompromised patients from Rio de Janeiro, Brazil\201D realizamos a primeira caracterização genotípica do HSV-1 no Rio de Janeiro. Os resultados demonstraram a existência de um único genótipo viral circulando nas amostras de pacientes imunocomprometidos. Além disso, as amostras brasileiras apresentam um alto grau de identidade estamos agrupadas no mesmo clado. No terceiro artigo \201CAcute liver failure in an immunocompetent patient\201D, foi possível a detecção do HHV-6B no soro e no fígado de paciente com hepatite fulminante. Neste estudo, foi possível mostrar a contribuição do HHV-6B na hepatite aguda fulminante sem etiologia definida. Esses estudos contribuem para o conhecimento das características clínicas e genéticas do HSV-1 e do HHV-6 circulantes em pacientes imunocomprometidos do Rio de Janeiro, Brasil / The Herpesviridae family has a la rge number of virus widespread in animal s and human . Nine herpesvirus a re identified that have hum a ns as their primary host and described by phylogenetic analysis were classified into three subfamily : Alfaherpesvirinae, Betaherpesvirinae and Gammaherpesvirinae. The family Herpesviridae is family of DNA virus and that are associated with latent infections and recurrent clinical manifestations. Herpesvirus infections can manifest themselves in asymptomatic or symptomatic form, may cause different clinical syndromes. These viruses are usually benign and the appearance of mucosal lesions are more common, but severe neur ological diseases can occurred especially in immunocompromised patients. The incidence and severity may be exacerbated among immunoc ompromised individuals. This thesis consists o f three manuscripts, two published papers and submitted. These studies set out to standardize methods of gene silencing, optimize and compare methods for the diagnosis and the genotypic characterization of herpes simplex type 1 (HSV - 1) and human herpesviru s type 6 (HHV - 6). The studies were conducted in immunocompromised patient Rio de Janeiro. In the first article "RNA interference inhibits herpes simplex virus type 1 isolated from saliva samples and mucocutaneous lesions", the comparison of sensitivity for detection of HSV - 1 for viral isolation and PCR methodology in real time is possible for different types of samples. Furthermore, in this study it was possible to obtain the most 99% inhibition of viral replication of HSV - 1 in vitro using RNA interference technique. In the second study "Genotypic characterization of herpes simplex virus type 1 isola tes in immucompromised patients from Rio de Janeiro, Brazil" held the first genotypic characterization of HSV - 1 in Rio de Janeiro. The results demons trated the existence of a unique viral genotype circulating in the samples of immunocompromised patients. Furthermore, viruses of the isolates show a high degree of identity and form a single clade. In the third article "Acute liver failure in an immunocompetent pati ent," HHV - 6B detection in serum and liver of patients with fulminant hepatitis was possible. In this study, we show the HHV - 6B contribution to acute fulminant hepatitis of unknown etiology. These studies contribute to the kn owledge of clinical and genetic HSV - 1 and HHV - 6 circulating in immunocompromised patients in Rio de Janeiro, Brazil.

PINTO, Marília Taumaturgo. Estudo comparativo da associação do vírus de epstein-barr com o linfoma de Hodgkin clássico em adulto : estudo imunohistoquimico e por hibridização in situ de casos do Ceará (Brasil) e de diferentes regiões da França. 2003. 80 f. Dissertação (Mestrado em Patologia) - Universidade Federal do Ceará. Faculdade de Medicina, 2003. / Submitted by denise santos (denise.santos@ufc.br) on 2011-12-22T13:48:11Z No. of bitstreams: 1 2003_dis_mtpinto.pdf: 641857 bytes, checksum: b7192fd1d4baa4ab6ad8b6e9c881c513 (MD5) / Approved for entry into archive by Eliene Nascimento(elienegvn@hotmail.com) on 2012-02-02T16:21:46Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2003_dis_mtpinto.pdf: 641857 bytes, checksum: b7192fd1d4baa4ab6ad8b6e9c881c513 (MD5) / Made available in DSpace on 2012-02-02T16:21:46Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2003_dis_mtpinto.pdf: 641857 bytes, checksum: b7192fd1d4baa4ab6ad8b6e9c881c513 (MD5) Previous issue date: 2003 / A associação do Linfoma de Hodgkin Clássico (LHc) com o vírus de Epstein-Barr (EBV) tem sido observada em vários países de diferentes condições sócio - econômicas. Recentemente usando-se técnica de Imunohistoquímica (IHQ) e Hibridização in situ (HIS) porções virais foi encontrada exclusivamente nas células características do Linfoma de Hodgkin que são as chamadas células de Reed-Sternberg (RS) e suas variantes chamadas células Hodgkin (H). Empregando estas técnicas nosso trabalho foi realizado de modo a fazer uma análise comparativa de uma amostra de 118 casos de origem do Ceará - Nordeste do Brasil e de diferentes regiões da França, sendo todos os pacientes de faixa etária entre 18 e 64 anos de idade. Com o propósito de convencionar parâmetros para análise comparativa e interpretação de resultados buscou-se alguns trabalhos de pesquisadores cujo objetivo maior era de avaliar o percentual dessa associação nos respectivos países onde observou- se uma escassez de trabalhos comparando dois ou mais países. A prevalência do EBV em lesões nodais de 37 pacientes do nordeste brasileiro com Linfoma de Hodgkin clássico foi comparada com 33 pacientes franceses.Houve predominância em pacientes brasileiros do sexo feminino (51,3%) e em pacientes franceses do sexo masculino (65,3%) sendo a média de idade similar em ambos os grupos (34,8 anos).Dos subtipos histológicos a Esclerose Nodular (EN) esteve presente em 23 casos brasileiros e em 29 franceses e Celularidade Mista (CM) em 11 brasileiros e 4 franceses. Depleção Linfocitária (DL) e não classificados foram raros. O LMP1 (Proteína de Membrana Latente) foi expresso nas células RS em 25 (67,5%) dos casos brasileiros e em 10 (30,3%) dos franceses e o Epstein-Barr encoded RNA (EBER) foi evidente em 75,6% de Brasil e 30,3% da França. A relação entre subtipo histológico e detecção viral foi mais freqüente no subtipo Celularidade Mista. Deduz-se com esses resultados que o EBV tenha uma maior participação na patogênese do LH Clássico nos casos do Ceará que em pacientes oriundos da França.

LIMA, Marcos Antonio Pereira de. Estudo do vírus Epstein-Barr (EBV) em adenocarcinoma gástrico : frequência, associação clínico-histopatológica e relação com a expressão das proteínas BCL-2, BAX e c-MYC. 2006. 147 f. Dissertação (Mestrado em Microbiologia Médica) - Universidade Federal do Ceará. Faculdade de Medicina, Fortaleza, 2006. / Submitted by denise santos (denise.santos@ufc.br) on 2012-01-05T13:40:30Z No. of bitstreams: 1 2006_dis_maplima.pdf: 3051748 bytes, checksum: efe5f1c5373b2f71cbc0edfbd4bcb484 (MD5) / Approved for entry into archive by Eliene Nascimento(elienegvn@hotmail.com) on 2012-02-02T14:03:59Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2006_dis_maplima.pdf: 3051748 bytes, checksum: efe5f1c5373b2f71cbc0edfbd4bcb484 (MD5) / Made available in DSpace on 2012-02-02T14:03:59Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2006_dis_maplima.pdf: 3051748 bytes, checksum: efe5f1c5373b2f71cbc0edfbd4bcb484 (MD5) Previous issue date: 2006 / The Epstein-Barr virus (EBV) has been related to the tumorigenesis of the gastric carcinomas, varying from 1.3-19.3% according to the studied population. Several studies have demonstrated strong evidences of its relation in this process, such as the monoclonality of the viral genome and its the presence in almost all tumor cells. However, most of the mechanisms used by the virus to control this process are still unknown. In this context, the present study aimed to investigate the frequency of the EBV and the association with the BCL-2, BAX and c-MYC proteins. Therefore, 100 cases of gastric carcinoma (67 males and 33 females), obtained from two hospitals in Fortaleza, were assessed to detect the EBV by PCR and in situ hybridization (aimed to the EBER1 transcript) using the standard method and GenPoint®. Immunohistochemistry technique was done to evaluate the expression of the referred cellular proteins, by streptavidin-biotin-peroxidase method. The distribution by sex, age, tumor anatomic site and the histopathologic analysis, in general, reproduced the pattern of the world scientific bibliographies. Regarding virus detection by in situ hybridization, 8 (8%) cases were positive, 6 of these had shown diffuse pattern of staining, and 2 had demonstrated focal pattern. From 100 cases, only 2 presented infected lymphocytes. In general, the EBV demonstrated higher association with: males (87.5%[p=0.265]), tumors situated in the cardia (37.5% [p=0.549]), advanced stage (IIIB and IV), intestinal type (87.5%[p=0.136]), and moderately differentiated (75%).There were no EBV-positive cases which exhibited BCL-2 staining. Although the BAX and the c-MYC (nuclear) proteins have demonstrated significant positivity index and scores averages in the EBV-positive group, these were lower than the values of the EBV-negative group, notably the c-MYC nuclear protein (Mann-Withney test LI p=0.039 and HS p=0.045). The cytoplasmic staining of the c-MYC protein revealed slightly higher staining values in the EBV-positive group. The balance between the BCL-2 and BAX proteins demonstrated that the majority of the evaluated cases had exhibited apoptosis-orientation, however 62.3% of the EBV-positive cases exhibited equilibrium between these proteins. Twenty-nine cases (28 negative and 1 positive) were submitted to the biotinyl tyramide system (in situ hybridization method - GenPoint®), demonstrating the same results obtained by the standard technique. From the 61 cases assessed by PCR, 35 (57.4%) were positive, being verified a low concordance index (kappa = -0.026 [±0.069]) with the standard in situ hybridization technique. The 30bp deletion of LMP1 gene was investigated in 24 out of 35 positive cases, being verified in 37.5% of these. The results obtained in the present study, concerning the EBV frequency and the correlation with clinic-histopathologic data, reproduced findings of researches done in several world regions. The correlation with the proteins suggests that in vivo the virus is not related to the overexpression of BCL-2 and c-MYC (nuclear) that could act in synergism to promote the tumor development. The suppression of the BAX expression might represent a viral mechanism for apoptosis inhibition. The results of the cytoplasmic c-MYC point to a possible involvement of the EBV with transport mechanisms of the nuclear membrane, resulting in its accumulation in the cytoplasm. The low frequency of infected lymphocytes indicates that they are not the main responsible of the high number of positivity in the PCR technique. It could be, at least in part, due to the infected normal and/or pre-neoplastic epithelium, suggesting a new latency pattern which not express the EBER1. / O vírus Epstein-Barr (EBV) tem sido associado com a tumorigênese dos adenocarcinomas gástricos, variando entre 1,3-19,3% de acordo com a população estudada. Diversos estudos têm demonstrado importantes evidências do envolvimento do EBV nesse processo, tais como a monoclonalidade do genoma viral e a presença do vírus em quase todas as células tumorais do sitio primário e em células metastáticas. No entanto, os mecanismos utilizados pelo vírus para orquestrar a transformação tumoral, ainda não foram totalmente elucidados. Neste contexto, o presente estudo objetivou investigar a freqüência do EBV e a associação com as proteínas BCL-2, BAX e c-MYC. Para tanto, 100 casos de adenocarcinomas gástricos (67 homens e 33 mulheres), obtidos de dois hospitais de Fortaleza, foram analisados quanto à presença do EBV, detectado através das técnicas de PCR e de hibridação in situ (direcionada ao transcrito viral EBER1) pelo método usual e GenPoint®. Procedeu-se também, estudo imuno-histoquímico das referidas proteínas celulares, através do método da estreptoavidina-biotina-peroxidase. A distribuição por sexo, idade, sítio anatômico do tumor e as análises histopatológicas, de modo geral, reproduziram as tendências da literatura mundial. Pela técnica de hibridação in situ, 8 (8%) casos foram positivos, 6 destes apresentaram marcação difusa e 2 apresentaram marcação focal. Apenas 2 apresentaram linfócitos infectados. De modo geral, o EBV apresentou maior associação com o sexo masculino (87,5% [p=0,265]), com tumores situados na cárdia (37,5% [p=0,549]), de estadiamento avançado (IIIB e IV), do tipo intestinal (87,5% [p=0,136]) e moderadamente diferenciados (75%). Nenhum dos casos EBV-positivos exibiram marcação para BCL-2. Embora as proteínas BAX e c-MYC (nuclear) apresentaram índices de positividade e médias de escores significativos no grupo EBV-positivo, estes foram inferiores aos valores do grupo EBV-negativo, sobretudo a proteína c-MYC nuclear (Teste de Mann-Withney LI p=0,039 e HS p=0,045). A marcação citoplasmática da proteína c-MYC revelou valores de marcação discretamente superiores no grupo EBV-positivo. O balanço entre as proteínas BCL-2 e BAX demonstrou que a maioria dos casos estudados apresentavam tendência à apoptose, mas 62,5% dos casos EBV-positivos exibiram um equilíbrio. Vinte e nove casos (28 negativos e 1 positivo) foram submetidos a outro método de hibridação in situ que emprega o sistema da biotinil-tiramida (GenPoint®),demonstrando resultados idênticos aos obtidos pela técnica convencional. De 61 casos analisados através da técnica de PCR, 35 (57,4%) foram positivos, sendo constatado um baixíssimo índice de concordância (kappa = -0,026 [±0,069]) com a técnica de hibridação in situ. Em 24/35 casos positivos, a deleção de 30pb do gene LMP1 foi investigada, sendo constatada em 37,5% destes. Os resultados obtidos no presente estudo quanto à freqüência do EBV e a correlação com critérios clínico-histopatológicos, reproduziram os achados de estudos realizados em diversas partes do mundo. A correlação com as proteínas sugere que in vivo, o vírus não esteja relacionado com a expressão de BCL-2 e de c-MYC (nuclear), que poderiam atuar em sinergismo favorecendo o desenvolvimento tumoral. A supressão da expressão de BAX, pode representar um mecanismo viral para inibição da apoptose. Os resultados da c-MYC citoplasmática apontam para um possível envolvimento do EBV com mecanismos de transporte da membrana nuclear, determinando o acúmulo da proteína no citoplasma. A baixa freqüência de linfócitos infectados indica que os mesmos não são os principais responsáveis pela elevada positividade da técnica de PCR, devendo ser ao menos em parte, decorrente de epitélio normal e/ou pré-neoplásico infectado sugerindo um padrão de latência que não expresse EBER1.

Submitted by Angelo Silva (asilva@icict.fiocruz.br) on 2016-07-13T18:45:42Z No. of bitstreams: 2 license.txt: 1748 bytes, checksum: 8a4605be74aa9ea9d79846c1fba20a33 (MD5) 71853.pdf: 2511930 bytes, checksum: c11c765cbeaf1ef6dbaa98b8cb800465 (MD5) / Approved for entry into archive by Anderson Silva (avargas@icict.fiocruz.br) on 2016-07-25T18:06:52Z (GMT) No. of bitstreams: 2 71853.pdf: 2511930 bytes, checksum: c11c765cbeaf1ef6dbaa98b8cb800465 (MD5) license.txt: 1748 bytes, checksum: 8a4605be74aa9ea9d79846c1fba20a33 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-07-25T18:06:52Z (GMT). No. of bitstreams: 2 71853.pdf: 2511930 bytes, checksum: c11c765cbeaf1ef6dbaa98b8cb800465 (MD5) license.txt: 1748 bytes, checksum: 8a4605be74aa9ea9d79846c1fba20a33 (MD5) Previous issue date: 2016 / Fundação Oswaldo Cruz. Instituto Oswaldo Cruz. Rio de Janeiro, RJ, Brasil / Os herpesvírus humanos (HHV) (herpes simples 1 e 2, varicella-zoster, Epstein-Barr, citomegalovírus humano, herpesvírus humanos 6A, 6B, 7 e 8) estão associados à diversas doenças, porém são nos indivíduos portadores do vírus da imunodeficiência humana (HIV) que estes herpesvírus causam infecção grave e duradoura, podendo levá-los ao óbito. Contudo, no Brasil, pouco é conhecido sobre a verdadeira prevalência das infecções causadas por HHV nesses indivíduos devido a poucos estudos realizados no país. Portanto, este trabalho visou determinar a prevalência desta co-infecção HIV/Herpesvírus humanos através de um diagnóstico diferencial que detecta simultaneamente as nove espécieis de HHV (Pan-herpesvírus). Este método é baseado na amplificação, por reação em cadeia da polimerase (PCR) Nested, de uma região altamente conservada (DPOL) do genoma desses vírus e na identificação da espécie viral por sequenciamento do genoma viral. Além disso, este estudo visou avaliar possíveis fatores associados com a prevalência desta co-infecção, como sexo, idade e taxas de linfócitos T CD4+ (LT CD4+), e destinou-se comparar a prevalência das infecções causadas por HHV entre indivíduos HIV reagentes (grupo teste) e indivíduos não reagentes para este vírus (grupo controle). Para isso, 241 amostras de soro de indivíduos portadores do HIV coletadas durante os anos de 2012 (95 amostras), 2013 (89 amostras) e 2014 (57 amostras), e 94 amostras de soro de indivíduos HIV não reagentes coletadas durante o ano de 2013 foram testadas através de PCR Nested As amostras amplificadas foram sequenciadas para a identificação da espécie viral. Com isso, neste estudo foi encontrada prevalência da co-infecção HIV/HHV de 14,1% (34/241), sendo 13% (31/241), 0,8% (2/241) e 0,4% (1/241) relacionado às co-infecções HIV/HSV-1, HIV/HHV-6 e HIV/HHV-8, respectivamente. Também foi observada diminuição estatisticamente significativa (p-valor < 0,0001) da prevalência da co-infecção HIV/HHV durante os anos estudados. Já o grupo controle obteve menor prevalência da infecção causada por HHV (1,1%; 1/94) e foi referente à infecção causada por HHV-6. Ademais, foi verificada associação estatisticamente significativa da detecção da co-infecção HIV/HSV-1 com as taxas de LT CD4+, evidenciando que a taxa LT CD4+ <500 células/mm³ é um fator de risco para infecções causadas por HSV-1 em indivíduos HIV reagentes (p-valor < 0,0327/ p-valor <0,0186). A partir disto, foi verificado que o Pan-herpesvírus foi eficiente na detecção das co-infecções HIV/HSV-1, HIV/HHV-6 e HIV/HHV-8. Sendo assim, este trabalho contribuiu para a investigação da prevalência das infecções causadas por herpesvírus humanos em indivíduos HIV reagentes no Rio de Janeiro/Brasil / The human herpesviruses (HHV) (herpes simplex 1 and 2, varicella-zoster, Epstein-Barr virus, human cytomegalovirus, human herpesviruses 6A, 6B, 7 and 8) are associated with several diseases, but these herpesviruses cause serious and lasting infection in individuals infected by the human immunodeficiency virus (HIV) and can lead to death. However, in Brazil few is known about the true prevalence of human herpesviruses infection in these individuals because of few studies in the country. Therefore, this study aimed to determine the prevalence of co-infection HIV/human herpesviruses through a differential diagnosis that simultaneously detects nine HHV species (Pan-herpesviruses). This method is based on amplification a highly conserved region (DPOL) genome of these viruses by Nested polymerase chain reaction (PCR) and on viral species identification by sequencing of the viral genome. In addition, this study aimed to evaluate possible factors associated with the prevalence of co-infection, such as sex, age and T CD4+ lymphocytes rates (LT CD4+), and aimed to compare the prevalence of infections caused by HHV among individuals HIV reagents and no reagents for this virus (control group). For this, 241 serum samples from individuals with HIV collected during the years 2012 (95 samples), 2013 (89 samples) and 2014 (57 samples), and 94 serum samples from individuals without HIV collected during the year 2013 were tested by Nested PCR The amplified samples were sequenced for identification of the viral species. This study found prevalence of co-infection HIV/HHV 14,1% (34/241), in which 13% (31/241), 0,8% (2/241) and 0,4% (1/241) were related with the co-infections HIV/HSV-1, HIV/HHV-6 and HIV/HHV-8, respectively. A decrease statistically significant (p-value <0,0001) in the prevalence of co-infection HIV/HHV was observed during the years of study. The control group had lower prevalence of infection caused by HHV (1,1%; 1/94) and was related with the infection caused by HHV-6. In addition, there was a statistically significant association between detection of co-infection HIV/HSV-1 with LT CD4+ rates, showing that LT CD4+ rate <500 cells/mm³ is a risk factor for infections caused by HSV-1 in individuals HIV reagents (p-value <0,0327 / p-value <0,0186). From this, was verified that the Pan-herpesviruses was efficient in the detection of co-infections HIV/HSV-1, HIV/HHV-6 and HIV/HHV-8. Therefore, this study contributed to the investigation of the prevalence of infections caused by human herpesviruses in people living with HIV in Rio de Janeiro/Brazil

Submitted by Fabio Sobreira Campos da Costa (fabio.sobreira@ufpe.br) on 2015-05-21T15:13:49Z No. of bitstreams: 2 license_rdf: 1232 bytes, checksum: 66e71c371cc565284e70f40736c94386 (MD5) DIGITAL.CCS.GEORGEA GERTRUDES DE OLIVEIRA MENDES CAHU.pdf: 2536289 bytes, checksum: 3d682a611b1761ef1a0a6979bde86913 (MD5) / Made available in DSpace on 2015-05-21T15:13:49Z (GMT). No. of bitstreams: 2 license_rdf: 1232 bytes, checksum: 66e71c371cc565284e70f40736c94386 (MD5) DIGITAL.CCS.GEORGEA GERTRUDES DE OLIVEIRA MENDES CAHU.pdf: 2536289 bytes, checksum: 3d682a611b1761ef1a0a6979bde86913 (MD5) Previous issue date: 2015-02-27 / A infecção pelo herpes vírus humano tipo 8 (HHV-8) é endêmica na Amazônia e de endemicidade intermediária em doadores de sangue no Brasil. Estudos demonstraram um aumento na prevalência deste vírus em pessoas vivendo com HIV/aids. Contudo, ainda são escassos dados sobre a distribuição geográfica e descrições epidemiológicas da infecção pelo HHV-8 nesse país de dimensão continental. O presente estudo se propôs a estimar a prevalência e os fatores de risco associados à infecção pelo HHV-8 em pessoas vivendo com HIV/aids de Recife, nordeste do Brasil, no período de novembro de 2013 a julho de 2014. Foram pesquisados anticorpos contra o HHV-8 utilizando o ensaio imunoenzimático de vírus total (ELISA) em amostras de plasma de 500 indivíduos vivendo com HIV/aids. A prevalência do anti-HHV-8 encontrada foi de 28,6% (143/500; 95% IC, 24,72–32,82). A infecção pelo HHV-8 foi mais frequente entre o sexo masculino (31,9% homens HHV-8+ vs. 22,6% mulheres HHV-8+, OR: 1,605, 95% IC: 1,054 – 2,443; p = 0,03). A soroprevalência da infecção não variou de acordo com a idade. A infecção pelo HHV-8 foi mais frequente entre os indivíduos que tiveram carga viral do HIV detectável (p = 0,048). Entre o grupo de mulheres, ter idade menor que 40 anos (OR: 2,190, p = 0,042) e ter <18 anos na primeira relação sexual (OR: 2,540, p = 0,051), são variáveis que mostraram uma associação significante com a infecção pelo HHV-8. A frequência deste vírus entre 140 homens que fazem sexo com homem (HSH) foi de 38,6%. Este foi o primeiro estudo que abordou os aspectos epidemiológicos da infecção pelo HHV-8 no Nordeste do Brasil, uma região não endêmica para esta infecção, e que descreveu um aumento da circulação deste vírus em pessoas vivendo com HIV/aids e de forma mais intensa entre HSH. O presente estudo sugere um possível papel da transmissão não sexual nesta população.

Dissertação (mestrado) - Universidade Federal de Santa Catarina. Programa de Pós-Graduação em Biotecnologia, Florianópolis, 2011 / Made available in DSpace on 2012-10-26T02:40:37Z (GMT). No. of bitstreams: 1 289417.pdf: 1893898 bytes, checksum: 17201c8d5b781dc68c78399d88568a31 (MD5) / Os cardenolídeos pertencem a um grupo de compostos naturais, que inibem a bomba de Na+/K+ (NKATPase). Tradicionalmente, eles têm sido utilizados para o tratamento da insuficiência cardíaca congestiva e de arritmias atriais, tais como a digoxina, a digitoxina e a ouabaína. Trabalhos recentes descreveram a potencial atividade anti-herpética de alguns cardenolídeos. Os Herpes Simplex Virus tipos 1 e 2 (HSV-1 e HSV-2) são responsáveis por infecções nas regiões oral, ocular e genital e, além disso, estes vírus podem estabelecer infecções persistentes (latência) no sistema nervoso. O tratamento é realizado com análogos de nucleosídeos, como o aciclovir, efetivo na maioria dos casos; entretanto, a resistência a esses fármacos tem aumentado devido ao seu uso prolongado, principalmente em pacientes imunocomprometidos. Inicialmente, a citotoxicidade (CC50) e a atividade anti-HSV foram avaliadas através do ensaio colorimétrico do MTT e do ensaio de inibição da formação das placas de lise (CI50), respectivamente. De acordo com os resultados obtidos através da triagem anti-HSV de 65 cardenolídeos e derivados, dois compostos (4 e 12) foram selecionados devido aos seus promissores índices de seletividade (IS=CC50/CI50) de 2.107 e 645 (HSV-1 cepa KOS); 4.566 e 792 (HSV-1 cepa 29-R) e 6.250 e 1.238 (HSV-2 cepa 333). O mecanismo de ação foi avaliado através de uma sequência de ensaios, que visaram avaliar a possível interferência destes compostos nas diversas etapas do ciclo de replicação viral. Na avaliação do efeito do tempo de adição e remoção, estes compostos inibiram significativamente a replicação viral, quando adicionados até 12 h pós-infecção, ou removidos após este período de tempo. Esses compostos não apresentaram atividade virucida, nem inibiram a entrada viral dos vírus nas células (adsorção e penetração). Entretanto, eles mantiveram sua atividade anti-HSV, mesmo no maior MOI testado (0,4), que foi 1000X maior que o MOI (0,0004) utilizado para a triagem antiviral. As amostras também inibiram a dispersão viral intercelular e interferiram na liberação viral, apresentando perfis concentração-dependentes. Os níveis de RNAm dos genes herpéticos não foram alterados pelo tratamento com os cardenolídeos nas condições experimentais testadas. Entretanto, a análise da expressão proteica viral mostrou que os compostos inibiram a expressão das proteínas ? (ICP27), ? (UL42) e ? (gB and gD), em diferentes intensidades. A avaliação da atividade anti-ATPásica demonstrou que esses cardenolídeos reduziram esta atividade enzimática, sugerindo que uma alteração do gradiente eletroquímico celular pode estar envolvida no mecanismo de inibição da replicação viral.

Submitted by Biblioteca da Faculdade de Farmácia (bff@ndc.uff.br) on 2017-03-28T16:51:43Z No. of bitstreams: 1 Oliveira, Rafael Portugal Rizzo Franco de [Dissertação, 2014].pdf: 2189274 bytes, checksum: ea08452f36c971680598c7fa0742290c (MD5) / Made available in DSpace on 2017-03-28T16:51:43Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Oliveira, Rafael Portugal Rizzo Franco de [Dissertação, 2014].pdf: 2189274 bytes, checksum: ea08452f36c971680598c7fa0742290c (MD5) / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / A busca por medicamentos mais seguros e com menores efeitos adversos levou o homem a desenvolver novas tecnologias de formulação. Neste contexto, a nanotecnologia tem contribuído para o surgimento de medicamentos cada vez mais específico para a doença a qual está destinado a tratar. O vírus Herpes simplex (HSV) é um patógeno muito conhecido pelo homem e estima-se que grande parte da população já esteja contaminada de maneira assintomática. Nas infecções bacterianas têm se tornado cada vez mais comum o surgimento de cepas resistentes aos antibióticos, por isso a descoberta de novos ativos antimicrobianos se torna cada dia mais essencial. Os flavonoides são metabolitos especiais que garantem às plantas resistência a microrganismos, tornando-se por isso, bastante promissores no desenvolvimento de novos agentes antivirais e antibacterianos. O presente estudo tem como objetivo elaborar uma nanoemulsão a base do extrato rico em flavonóides extraídos das folhas de Ocotea notata e avaliar suas atividades biológicas. O extrato de O. notata foi obtido por maceração e a análise de sua atividade antiviral demonstrou que esses possuíam percentual de inibição superior a 99% frente ao HSV tipos 1 e 2. Além disto, foi demonstrada a atividade antibacteriana desse extrato frente a quatro cepas bacterianas: S. aureus (MIC = 0,31 mg/mL), E. coli (MIC = 5,0 mg/mL), P. aeruginosa (MIC = 2,5 mg/mL) e Salmonella (MIC = 2,5 mg/mL).Uma nanoemulsão estável constituída de Miristato de isopropila, Transcutol®, Tween® 80, água e 1% (p/p) dos flavonoides de O. notata foi desenvolvida e avaliada quanto às atividades descritas. Como esperado, a nanoemulsão não apresentou atividade, uma vez que a concentração do ativo incorporada à formulação foi muito pequena (1%) não sendo possível observar as atividades biológicas nos modelos testados. Faz-se necessário, portanto, mais estudos para o desenvolvimento de um produto contendo o extrato de O. notata a fim de otimizar sua eficácia / The search for safer and minor adverse effects has led man to develop new technologies formulation that increases patient comfort. In this context, nanotechnology has contributed to the emergence of more specific drugs for the disease which is intended to treat. Herpes simplex virus (HSV) is a pathogen well known by man and it is estimated that a great part of the population is already infected asymptomatically. In bacterial infections has become the emergence of antibiotic-resistant strains, so the discovery of new antimicrobial active is becoming most essential. Flavonoids are special plant metabolites which guarantee resistance to microorganisms, making it therefore very promising in the development of new antiviral and antibacterial agents. This study aims to develop a nanoemulsion base of flavonoids extracted from leaves of Ocotea notata and evaluate their biological activities. Flavonoids of O. notata were extracted by maceration and analysis of its antiviral activity demonstrated that these had higher inhibition percentage at 99% compared to HSV types 1 and 2. Furthermore, we demonstrated the antiviral activity extract against four bacterial strains: S. aureus (MIC = 0.31 mg / ml), E. coli (MIC = 5.0 mg / ml), P. aeruginosa (MIC = 2.5 mg / ml) and Salmonella (MIC = 2.5 mg / ml). A stable nanoemulsion consisting of isopropyl myristate, Transcutol®, Tween® 80, and 1% (w/w) of the flavonoids of O. notata was developed and evaluated with respect to the described activities. As expected, the nanoemulsion showed no biological activity, once the concentrations of the active incorporated in the formulation was very small (1%) in the tested models.. It is necessary, therefore, further studies to the development of a product containing extract of O. notata in order to optimize its effectiveness

Made available in DSpace on 2014-08-11T12:37:19Z (GMT). No. of bitstreams: 2 license.txt: 1748 bytes, checksum: 8a4605be74aa9ea9d79846c1fba20a33 (MD5) patricia_pereira_ipec_mest_2011.pdf: 7410297 bytes, checksum: 4e58503c3df5b42c2c9ba06556e24b56 (MD5) Previous issue date: 2013-11-21 / Fundação Oswaldo Cruz. Instituto Nacional de Infectologia Evandro Chagas. Rio de Janeiro, RJ, Brasil / O sarcoma de Kaposi (SK) é a neoplasia mais diagnosticada em pacientes com SIDA e a detecção do antígeno nuclear latente do herpesvirus humano 8 (HHV8-LNA-1) tem se mostrado útil no seu diagnóstico histológico. O objetivo deste estudo é investigar a expressão do antígeno do HHV8 no sarcoma de Kaposi e seus simuladores histológicos em biópsias de pele de pacientes HIV positivos acompanhados no Instituto de Pesquisa Clínica Evandro Chagas (IPEC) entre 2003 e 2010. A pesquisa do antígeno foi realizada em protocolo de imuno-histoquímica em 49 casos de SK cutâneo e em 60 casos de eventuais simuladores histológicos desta lesão (12 dermatofibromas, 17 hemangiomas, 8 granulomas piogênicos e 23 dermatites de estase). Dados clínico-epidemiológicos foram coletados a partir da revisão dos prontuários. O diagnóstico de SK foi confirmado por dois patologistas. A expressão nuclear do antígeno HHV-8 foi detectada em todos os casos de SK independentemente do estágio clínico da doença, e nenhuma positividade foi encontrada nos demais casos. Nossos resultados confirmam o valor diagnóstico do antígeno nuclear latente do HHV8 (HHV8-LNA-1) para diferenciar o SK de seus simuladores e consolidam sua utilização na rotina do laboratório de Anatomia Patológica do IPEC / Kaposi sarcoma is the most diagnosed neoplasia in AIDS patients and detection of human herpes virus 8 latent nuclear antigen (HHV8 - LNA - 1) has been shown to be an useful histological diagnostic test. The goal of this study is to investigate the expression of HHV8 antigen in Kaposi sarcoma and its histological simulators on skin biopsies from HIV positive patients followed in the Instituto de Pesquisa Clínica E vandro Chagas (IPEC) between 2003 and 2010. Immunohistochemistry protocol for the antigen was applied in 49 cases of cutaneous KS and in 60 cases of occasional histological simulators of this lesion (12 dermatofibromas, 17 hemangiomas, 8 pyogenic granuloma s and 23 stasis dermatitis). Clinical and epidemiological data were obtained from clinical files. The diagnosis of KS was confirmed by two pathologists. Expression to HHV8 - LNA - 1 was detected in all cases of KS despite its clinical stage and no positivity w as observed in the remainder cases. Our results confirm the diagnostic value of HHV8 latent nuclear antigen to distinguish KS from its simulators and consolidate its use in IPEC’s pathology laboratory daily practice

Made available in DSpace on 2016-03-28T12:39:38Z (GMT). No. of bitstreams: 2 viviane_andrade_ioc_mest_2014.pdf: 2228142 bytes, checksum: da0fd6680c74fa05fb6671ad6d8bfc07 (MD5) license.txt: 1748 bytes, checksum: 8a4605be74aa9ea9d79846c1fba20a33 (MD5) Previous issue date: 2016-01-13 / Fundação Oswaldo Cruz. Instituto Oswaldo Cruz. Rio de Janeiro, RJ, Brasil / A infecção pelo herpes é causada pelo HSV-1, o qual representa o agente etiológico de uma das infecções mais prevalentes na população mundial. Indíviduos imunodeprimidos, como aqueles infectados pelo HIV-1, possuem maior susceptibilidade de contrair infecções oportunistas, como aquelas causadas por herpesvírus, enfatizando a necessidade de estudos mais profundos à cerca da co-infecção HIV-1/HSV-1. Estudos in vitro mostram que a infecção pelo HSV-1 pode modular a replicação do HIV-1 através de ativação transcricional. A partir do ano 2000, diversos estudos sobre fatores de restrição (FRs) à replicação do HIV-1 tem surgido. No entanto, o impacto do HSV-1 sobre os FR\2019s é desconhecido. Observamos um aumento na produção de HIV-1 na co-infecção com HSV-1. Este último vírus levou a redução nos níveis do FR IFITM3. Baseado nesse resultado, nós analisamos as mudanças na expressão de IFITM3 durante as primeiras 24 h de infecção por HSV-1. Durante as primeiras horas, os níveis de IFITM3 encontraram-se ligeiramente aumentados; no entanto, em fases tardias da infecção, seus níveis reduziram significativamente Em seguida, macrófagos infectados com HSV-1 foram tratados com Acyclovir ou IFN-2\03B1, a fim de monitorarmos o conteúdo de IFITM3. Nós observamos que a capacidade do HSV-1 de modular negativamente os níveis de IFITM3 foi prevenida em ambos os tratamentos, indicando que a replicação viral e a capacidade de induzir sinalização por IFN é crítica para produzir esse fenômeno. Diversas proteínas de fase tardia do HSV-1 prejudicam a sinalização por IFN, como a ICP34.5, Us3, Us11 e VHS. Realizamos então o knockdown desses transcritos e observamos que os dois últimos foram capazes de previnir a redução do conteúdo de IFITM3 induzida por HSV-1. Além disso, o aumentos da replicação do HIV-1 na co-infecção foi previnida pelos siRNAs para Us11 e VHS. Uma vez que a co-infecção HIV-1/HSV-1 é bastante comum e a presença desse tipo de co-infecção pode definer a progressão clínica para a AIDS, nosso trabalho fornece evidências adicionais relacionadas à imunopatogênese desses virus em co-infecções / Herpes infection is caused by HSV - 1 virus, which is one of the most prevalent infection worldwide . Immunocompromised individuals, such as those infected with HIV - 1 , have an increased susceptibility to contract opportunistic infection s , such as those caused by herpesvirus h ighlighting the necessity of more in - depth investigations on HIV - 1/HSV - 1 co - infections. In vitro studies have shown that HSV - 1 can mod ulate the replication of HIV - 1, mainly by means of transcriptional activation. S ince the 2000 ’s , several studies on restriction factors (RFs) to HIV - 1 replication have emerged . The impact of HSV - 1 on such RF is unknown . We observed an increase d HIV - 1 production during co - infection with HSV - 1. This last virus led to a reduction in the levels of the RF IFITM 3 . Based on that, we analyzed the changes in IFITM 3 levels over time, during the first 24 h of HSV - 1 infection. During the first hours , IFITM 3 levels were found slightly increased ; however, at late phase of infection, IFITM3 content decline d s ignificantly . Next , HSV - 1 - infected macrophages were treated with Acyclovir or IFN - 2α to monitor IFITM3 content. We observed that the ability of HSV - 1 to downregulate IFITM 3 was prevented by both treatments, meaning that viral replication and ability to overcome IFN signaling are critical to produce the observed phenomena. Several HSV - 1 late proteins impair IFN signaling, such as ICP34.5, Us3, US11, and VHS . W e performed knock down of th ese t ranscripts and observed that the last two prevented HSV - 1 - induced IFITM 3 reduction . Consistently, HSV - 1 - induced enhancement of HIV - 1 replication was prevented by the siRNA against US11 and VHS. Since HIV - 1/HSV - 1 co - infection is very common a nd the presence of co - infections such as this may dictate the clinical progression to AIDS, our work provides additional evidence on the immunopathogenesis of these viruses on co - infection s

Made available in DSpace on 2013-08-07T18:41:25Z (GMT). No. of bitstreams: 1 000433347-Texto+Completo-0.pdf: 402554 bytes, checksum: 52bf760eed71594340bcbb1efd3cb4a1 (MD5) Previous issue date: 2011 / Human herpesvirus 6 (HHV-6) is a Betaherpesvirus associated with Roseola Infantum (Exanthema Subitum) in primary infection. Due to its neurotropic characteristic and latency in the central nervous system, many reports associate HHV-6 with epilepsy, febrile seizures, multiple sclerosis and others neurologic diseases. In this study, HHV-6 DNA was investigated in 42 hippocampal samples from 14 patients with mesial temporal lobe epilepsy (MTLE) submitted to amygdalohippocampectomy (AH) or anterior temporal lobectomy (ATL) surgeries using a nested polymerase chain reaction (PCR). Three samples from each patient were collected and analyzed: from hippocampal head, body and tail. HHV-6 was detected in twelve of fourteen patients (85. 7%) with MTLE. Analyzing the samples resulting positive for HHV-6, all three samples were positive in three patients, in four patients two samples were positive and in five patients only one sample was positive. According to the origin of samples, seven samples from hippocampal head were positive, eight from hippocampal body and seven from hippocampal tail, showing no preferential site for viral establishment. HHV-6 positivity found in patients of the present study is higher then data found in the literature. A possible explanation would be differences in the study design, with three samples collected from each patient, which could be more representative than only one sample. Our results corroborate the hypothesis of a possible role of HHV-6 infection in epilepsy. / O Herpesvírus Humano tipo 6 (HHV-6) é um vírus da família Herpesviridae associado ao desenvolvimento de roséola infantil ou exantema súbito, doença caracterizada por febre alta, rash cutâneo e ocasionalmente convulsões febris. A prevalência mundial de infecção por HHV-6 é alta. Estima-se que cerca de 83% das crianças até 13 meses e mais de 95% das com idade até 2 anos já entraram em contato com o vírus. Existem duas variantes do HHV-6 já identificadas, as variantes A e B, sendo o HHV-6B o agente principal relacionado aos casos de roséola infantil. Epilepsia é um termo aplicado a um grupo de patologias crônicas caracterizadas, principalmente, pela ocorrência de crises epilépticas. As epilepsias representam em torno de 1% dos distúrbios neurológicos que afetam a população mundial. As crises são provocadas por uma disfunção da atividade elétrica cerebral associada a anormalidades estruturais e metabólicas causadas, em alguns casos, pela presença de vírus no sistema nervoso central. Por apresentar características como neurotropismo e latência no sistema nervoso central, procuramos relacionar o HHV-6 com a epilepsia do lobo temporal mesial (ELTM). Através de reação em cadeia da polimerase (PCR), pesquisamos a presença do vírus em 42 amostras de hipocampo de 14 pacientes com epilepsia do lobo temporal mesial (ELTM) submetidos a amígdalo-hipocampectomia (AH) ou lobectomia temporal anterior (LTA) como tratamento para a epilepsia. Três amostras de cada paciente foram analisadas: cabeça, corpo e cauda do hipocampo. O DNA do HHV-6 foi detectado em 12 dos 14 pacientes (85,7%) com ELTM. Três pacientes foram positivos em todas as três amostras, 4 pacientes foram positivos em duas amostras e 5 em apenas uma amostra. Com relação à origem das amostras, 7 foram positivas na cabeça do hipocampo, 8 no corpo do hipocampo e 7 na cauda do hipocampo, demonstrando não haver um sítio de preferência para o estabelecimento do vírus. A positividade para HHV-6 encontrada nos pacientes deste estudo é maior do que os dados encontrados na literatura. Uma possível explicação para esta elevada positividade poderia ser as diferenças na concepção do estudo, com três amostras coletadas de cada paciente, o que II pode ser mais representativo do que a coleta de apenas uma amostra. Nossos resultados reforçam a hipótese de um possível papel da infecção pelo HHV-6 na epilepsia.