An apple wine produced by Kiviks Musteri AB have an undesirable flavor of yeast. As a step in the development to reduce this off-flavour the wine flavor was analyzed by gas chromatography-mass spectrometry (GCMS) with headspace solid-phase microextraction (HS-SPME). Two other wines without the flavor of yeast where analyzed as references. Samples from the production step prior to clarification where also analyzed. Through matching against mass spectrum library, retention index and in some cases references a total of 37 volatile compounds were identified in the apple wines. Some uncertainty in the relative quantification of a few compounds was caused by insufficient clearance (deadsorption) of the SPME-fiber. When comparing the different wines the compounds were divided into groups: key compounds, ethyl esters, derivatives of 3-methyl-1-butanol, other compounds: group 1 and other compounds: group 2. In each group the percent area for each compound was calculated. Comparing the percent area of each wine showed that the samples prior to clarification contains a higher number of volatile compounds e.g. ethyl esters and 3-methylbutanol derivatives than the final wine products. The comparisons also revealed differences between the wines. The results from the analyses indicated that the compounds that hypothetically contribute to the yeast-flavor could be 2-phenylethanol; 3-methylbutanoic acid; 2-methyl-1-butanol; 2-phenylacetaldehyde och 2-methylthiolan-3-one. The results need to be verified e.g. by an odor panel if they are going to be useful for Kivik Musteri AB in its effort to solve the taste problem in the wine.

A Aniba canelilla (H.B.K.) Mez é uma planta aromática proveniente da região amazônica cujo óleo essencial apresenta como componentes majoritários o 1-nitro-2-feniletano e o metileugenol. Apesar das atividades antifúngicas e anti-inflamatórias cientificamente comprovadas e do uso popular do óleo para o tratamento de dermatites, acnes e feridas, não existe até o momento um estudo que verse sobre a quantificação desses compostos na pele. O objetivo deste trabalho foi a validação de um método bioanalítico otimizado por microextração em fase sólida no modo headspace em cromatógrafo gasoso com detector de ionização de chama (HS-SPME-GC-FID) para a determinação do 1-nitro-2-feniletano e metileugenol a partir do óleo essencial em diferentes amostras de estudo de permeação cutânea in vitro. Uma metodologia foi desenvolvida e validada por HS-SPME-GC-FID. A faixa da curva de calibração foi de 2,08 - 207,87 μg.mL-1 para o 1-nitro-2-feniletano e de 0,40-40,41 μg.mL-1 para o metileugenol. A presença de matriz e as características intrínsecas da metodologia de HS-SPME requereram uma transformação da curva de calibração. A transformação logarítmica (Log10) foi então aplicada aos dados e os resultados apresentaram homocedasticidade, resíduos dispersos, coeficiente de determinação (r²> 0,99) e recuperação adequados. Estudos de permeação cutânea foram realizados em células de Franz com diferentes quantidades (20, 100 e 200 μL) de óleo essencial de A. canelilla para avaliar o perfil de permeação e retenção em pele de orelha suína e fluido receptor. A análise das amostras nas condições validadas mostrou uma grande permeação e retenção dos compostos na seguinte ordem: fluido receptor >> derme >> epiderme >> estrato córneo. Verificou-se um aumento progressivo e dependência na retenção com base na quantidade aplicada no compartimento doador e grande retenção principalmente no fluido receptor e derme, resultado este compatível com as características físico-químicas de Log P, afinidade ao ambiente hidrofílico e lipofílico, tamanho e peso molecular do 1-nitro-2-feniletano e metileugenol. Em conclusão, o método proposto por HS-SPME-GC-FID para quantificar os compostos majoritários do óleo essencial de A. canelilla em amostras de pele de orelha suína e fluido receptor foi seletivo, preciso, exato e adequado, e pode ser utilizado em análises futuras. / Aniba canelilla (H.B.K.) Mez is an aromatic plant from the Amazon region whose essential oil has 1-nitro-2-phenylethane and methyleugenol as major compounds. Despite of the scientifically proved antifungal and anti-inflammatory activities and the popular use of oil for the treatment of dermatitis, acnes and wounds, there is no study up to date about the quantification of these compounds in skin samples. The aim of this study was the validation of an optimized bioanalytical method by solid phase microextraction on headspace mode in gas chromatograph with flame ionization detector (HS-SPME-GC-FID) for the determination of 1-nitro-2-phenylethane and methyleugenol from the essential oil in different samples of in vitro cutaneous permeation study. A methodology was developed and validated by HS-SPME-GC-FID. The ranges of calibration curves were 2.08 - 207.87 μg.mL-1 for 1-nitro-2-phenylethane and 0.40 - 40.41 μg.mL-1 for methyleugenol. The presence of matrix and the intrinsic characteristics of the HS-SPME methodology required a transformation to the calibration curves. The logarithmic transformation (Log10) was then applied to the data and the results showed homoscedasticity, dispersed residues, and adequate coefficient of determination (r²> 0.99) and recovery. Skin permeation studies were performed on Franz cells with different amounts (20, 100 and 200 μL) of A. canelilla essential oil to evaluate the skin permeation and retention profile in porcine ear skin and receptor fluid. The analysis of the samples under the validated conditions showed a high permeation and retention of the major compounds in the following order: receptor fluid >> dermis >> epidermis >> stratum corneum. A progressive increase and retention dependence were observed based on the amount applied in the donor compartment, and large retention mainly on the receptor fluid and dermis was observed, in accordance with the physicochemical characteristics of Log P, affinity to the hydrophilic and lipophilic environment, size and molecular weight of 1-nitro-2-phenylethane and methyleugenol. In conclusion, the method proposed by HS-SPME-GC-FID to quantify the major compounds of A. canelilla essential oil in porcine ear skin and receptor fluid samples was selective, accurate, precise and adequate, and can be used in future analyzes.

Standoff detection of targets using volatiles is essential when considering substances that are hazardous or dangerous, or for which the presence or location is unknown. For many invasive biological threats, their presence is often not realized until they have begun visibly affecting and spreading through crops or forests. The fungus Raffaelea lauricola is a biothreat vectored by the invasive beetle Xyleborus glabratus, or redbay ambrosia beetle (RAB), whose presence in avocado groves is currently detectable by visual inspection. Once visually identified, the affected trees must be removed and destroyed to protect those remaining trees. However, if the fungus is identified via standoff volatile detection, there is anecdotal evidence that it can be treated with propiconazole and saved from progression to the fatal laurel wilt disease. As a result of the rapid spread of R. lauricola and the quick death of trees, early detection through standoff methods is essential. The only current method of pre-symptomatic identification is canine detection. Canines are sensitive and selective biological detectors that can trace odors to their source, despite the presence of a variety of background odors. The present research evaluated the volatile organic compounds (VOCs) of the laurel wilt disease and R. lauricola using headspace solid phase microextraction-gas chromatography-mass spectrometry (HS-SPME-GC-MS). Additionally, a new method for odor collection and presentation to trained detection canines was developed. Knowledge of the disease and standoff volatile detection capabilities are improved using this information.

Submitted by Paulo Mesquita (prrmesquita@gmail.com) on 2016-10-18T17:10:54Z No. of bitstreams: 1 Tese Doutorado Mesquita_FINAL.pdf: 3135632 bytes, checksum: dd198da88e048f82bac99316af7e483b (MD5) / Approved for entry into archive by Uillis de Assis Santos (uillis.assis@ufba.br) on 2016-10-18T17:18:46Z (GMT) No. of bitstreams: 1 Tese Doutorado Mesquita_FINAL.pdf: 3135632 bytes, checksum: dd198da88e048f82bac99316af7e483b (MD5) / Made available in DSpace on 2016-10-18T17:18:46Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Tese Doutorado Mesquita_FINAL.pdf: 3135632 bytes, checksum: dd198da88e048f82bac99316af7e483b (MD5) / FAPESB e CNPq. / O comércio de frutas tropicais, principalmente das regionais e exóticas, apresenta-se como uma grande oportunidade para produtores e outros profissionais brasileiros. No entanto, a sua comercialização tem crescido aquém das expectativas devido, em certa parte, à necessidade de maior fomento a pesquisas relacionadas a estas espécies frutíferas e seus possíveis produtos derivados. Entre as diversas abordagens que estão sendo estudadas na área agrícola, se destacam a caracterização dos metabólitos presentes nas diferentes espécies de plantas de interesse econômico, o entendimento do papel biológico dos mesmos e possíveis alterações neste metaboloma gerados por ataques de diferentes tipos de patógenos. Este trabalho teve como objetivo caracterizar os metabólitos presentes na pitangueira (Eugenia uniflora L.) e diferentes tipos de maracujazeiros (Passiflora spp.), e avaliar possíveis mudanças no perfil destes compostos. Foram determinados os perfis de compostos orgânicos voláteis (COVs), extraídos de folhas de E. uniflora de plantas que apresentavam diferentes biotipos de cor dos seus frutos (laranja, vermelho ou roxo), coletadas em diferentes regiões da Bahia. Os compostos foram extraídos e identificados através da técnica HS-SPME/GC-MS e o perfil das amostras foi avaliado através de técnicas de análise multivariada (PCA e HCA). Através das técnicas aplicadas foi possível identificar 33 compostos nas plantas com cada biotipo de cor de fruto e discriminar entre os três grupos de amostras com base neste perfil de metabólitos. Também foram extraídos e caracterizados, utilizando a técnica HS-SPME/GC-MS, os perfis de COVs de cinco espécies do gênero Passiflora: P. edulis, P. cincinnata, P. maliformis, P. gibertii e P. setacea. Em seguida avaliou-se alterações no perfil de COVs destas espécies após infecção pelo Cowpea aphid-borne mosaic virus (CABMV). Blocos de 4 plantas sadias e inoculadas com o CABMV foram mantidas em casa de vegetação e fitotron, sob condições controladas. Também foram avaliadas mudanças no perfil de compostos em P. cincinnata até o 28º dia após a inoculação com o CABMV. Foram identificados 43 COVs nas cinco espécies de Passiflora e a utilização das técnicas de análise multivariada (PCA, PLS-DA e HCA) permitiu discriminar entre as amostras sadias e infectadas pelo CABMV nas diferentes espécies, através do seu perfil de metabólitos. Além disso, foi possível identificar potenciais biomarcadores de infecção ao CABMV comuns e específicos para cada uma das cinco espécies. Ao avaliar a infecção de plantas da espécie P. cincinnata em diferentes períodos, se verificou que a partir de 3 dias de inoculação já é possível distinguir claramente o perfil das amostras infectadas comparado ao das amostras sadias. A abordagem metabolômica utilizada neste trabalho possibilitou identificar diferentes tipos de biomarcadores, tanto de espécies de Passiflora quanto prováveis variedades de E. uniflora para estudos de quimiotaxonomia, além de metabólitos sinalizadores de infecção pelo CABMV em Passiflora spp. / The trading of regional and exotic tropical fruits can be presented as a great opportunity for producers and other Brazilian professionals. However, their marketing has grown short of expectations due to some part to the need for higher encouragement of research related to these fruit species and its possible derivatives. Among the various approaches being studied in agriculture, stand characterization of metabolites present in different plant species of economic interest, understanding of the biological role of these and possible changes in the metabolome of different types generated by pathogen attacks. This study aimed to characterize the metabolites present in the species Eugenia uniflora L. and species of Passiflora, and evaluate possible changes in the profile of these compounds. It was determined the profiles of VOCs extracted from E. uniflora leaves of plants showing different color biotypes of its fruits (orange, red or purple), collected in different regions of Bahia. The compounds were extracted by HS-SPME/GC-MS technique and the profile of the samples was evaluated using multivariate analysis (PCA and HCA). Through the techniques applied were identified 33 compounds in plants with each fruit color biotype and discriminate between the three groups of samples based on this metabolite profile. Also were characterized using the HS-SPME/GC-MS technique, the VOC profiles of five species of the genus Passiflora: P. edulis, P. cincinnata, P. maliformis, P. gibertii and P. setacea. Then we evaluated changes in VOC profile of these species after infection by Cowpea aphid-borne mosaic virus (CABMV). Blocks of four healthy and inoculated plants with CABMV were kept in a greenhouse and phytotron, under controlled conditions. They evaluated changes in compounds profile in P. cincinnata until the 28th day after inoculation with CABMV. Were identified 43 VOCs in five species of Passiflora spp. and use of multivariate analysis (PCA, PLS-DA and HCA) allowed the discrimination between healthy and infected with CABMV samples in different species, through its metabolite profile. Moreover, it was possible to identify potential biomarkers of infection CABMV the common and specific to each of the five species. When evaluating infection of plants of the species P. cincinnata at different times, it was found that from 3 days of inoculation is already possible to distinguish the profile of the infected sample compared to the healthy samples. The metabolomic approach used in this study enabled us to identify different types of biomarkers, both species of Passiflora spp. as likely varieties of E. uniflora for chemotaxonomy studies, besides flags metabolites of infection by CABMV in Passiflora spp.

A Aniba canelilla (H.B.K.) Mez é uma planta aromática proveniente da região amazônica cujo óleo essencial apresenta como componentes majoritários o 1-nitro-2-feniletano e o metileugenol. Apesar das atividades antifúngicas e anti-inflamatórias cientificamente comprovadas e do uso popular do óleo para o tratamento de dermatites, acnes e feridas, não existe até o momento um estudo que verse sobre a quantificação desses compostos na pele. O objetivo deste trabalho foi a validação de um método bioanalítico otimizado por microextração em fase sólida no modo headspace em cromatógrafo gasoso com detector de ionização de chama (HS-SPME-GC-FID) para a determinação do 1-nitro-2-feniletano e metileugenol a partir do óleo essencial em diferentes amostras de estudo de permeação cutânea in vitro. Uma metodologia foi desenvolvida e validada por HS-SPME-GC-FID. A faixa da curva de calibração foi de 2,08 - 207,87 μg.mL-1 para o 1-nitro-2-feniletano e de 0,40-40,41 μg.mL-1 para o metileugenol. A presença de matriz e as características intrínsecas da metodologia de HS-SPME requereram uma transformação da curva de calibração. A transformação logarítmica (Log10) foi então aplicada aos dados e os resultados apresentaram homocedasticidade, resíduos dispersos, coeficiente de determinação (r²> 0,99) e recuperação adequados. Estudos de permeação cutânea foram realizados em células de Franz com diferentes quantidades (20, 100 e 200 μL) de óleo essencial de A. canelilla para avaliar o perfil de permeação e retenção em pele de orelha suína e fluido receptor. A análise das amostras nas condições validadas mostrou uma grande permeação e retenção dos compostos na seguinte ordem: fluido receptor >> derme >> epiderme >> estrato córneo. Verificou-se um aumento progressivo e dependência na retenção com base na quantidade aplicada no compartimento doador e grande retenção principalmente no fluido receptor e derme, resultado este compatível com as características físico-químicas de Log P, afinidade ao ambiente hidrofílico e lipofílico, tamanho e peso molecular do 1-nitro-2-feniletano e metileugenol. Em conclusão, o método proposto por HS-SPME-GC-FID para quantificar os compostos majoritários do óleo essencial de A. canelilla em amostras de pele de orelha suína e fluido receptor foi seletivo, preciso, exato e adequado, e pode ser utilizado em análises futuras. / Aniba canelilla (H.B.K.) Mez is an aromatic plant from the Amazon region whose essential oil has 1-nitro-2-phenylethane and methyleugenol as major compounds. Despite of the scientifically proved antifungal and anti-inflammatory activities and the popular use of oil for the treatment of dermatitis, acnes and wounds, there is no study up to date about the quantification of these compounds in skin samples. The aim of this study was the validation of an optimized bioanalytical method by solid phase microextraction on headspace mode in gas chromatograph with flame ionization detector (HS-SPME-GC-FID) for the determination of 1-nitro-2-phenylethane and methyleugenol from the essential oil in different samples of in vitro cutaneous permeation study. A methodology was developed and validated by HS-SPME-GC-FID. The ranges of calibration curves were 2.08 - 207.87 μg.mL-1 for 1-nitro-2-phenylethane and 0.40 - 40.41 μg.mL-1 for methyleugenol. The presence of matrix and the intrinsic characteristics of the HS-SPME methodology required a transformation to the calibration curves. The logarithmic transformation (Log10) was then applied to the data and the results showed homoscedasticity, dispersed residues, and adequate coefficient of determination (r²> 0.99) and recovery. Skin permeation studies were performed on Franz cells with different amounts (20, 100 and 200 μL) of A. canelilla essential oil to evaluate the skin permeation and retention profile in porcine ear skin and receptor fluid. The analysis of the samples under the validated conditions showed a high permeation and retention of the major compounds in the following order: receptor fluid >> dermis >> epidermis >> stratum corneum. A progressive increase and retention dependence were observed based on the amount applied in the donor compartment, and large retention mainly on the receptor fluid and dermis was observed, in accordance with the physicochemical characteristics of Log P, affinity to the hydrophilic and lipophilic environment, size and molecular weight of 1-nitro-2-phenylethane and methyleugenol. In conclusion, the method proposed by HS-SPME-GC-FID to quantify the major compounds of A. canelilla essential oil in porcine ear skin and receptor fluid samples was selective, accurate, precise and adequate, and can be used in future analyzes.

Submitted by Maurílio Figueiredo (maurilioafigueiredo@yahoo.com.br) on 2014-07-02T18:25:21Z No. of bitstreams: 2 license_rdf: 23148 bytes, checksum: 9da0b6dfac957114c6a7714714b86306 (MD5) DISSERTAÇÃO_EstudoComparativoMétodos.pdf: 2292877 bytes, checksum: 835505b7bbaee9d0eecceaf24630beaa (MD5) / Approved for entry into archive by Gracilene Carvalho (gracilene@sisbin.ufop.br) on 2014-07-17T18:38:52Z (GMT) No. of bitstreams: 2 license_rdf: 23148 bytes, checksum: 9da0b6dfac957114c6a7714714b86306 (MD5) DISSERTAÇÃO_EstudoComparativoMétodos.pdf: 2292877 bytes, checksum: 835505b7bbaee9d0eecceaf24630beaa (MD5) / Made available in DSpace on 2014-07-17T18:38:52Z (GMT). No. of bitstreams: 2 license_rdf: 23148 bytes, checksum: 9da0b6dfac957114c6a7714714b86306 (MD5) DISSERTAÇÃO_EstudoComparativoMétodos.pdf: 2292877 bytes, checksum: 835505b7bbaee9d0eecceaf24630beaa (MD5) Previous issue date: 2012 / Produzidos desde a década de 40, os organofosforados foram os primeiros a substituírem os organoclorados, aos quais os insetos já apresentavam resistência. Dentre estes o clorpirifós apresenta-se como um inseticida altamente tóxico. Devido à sua elevada lipossolubilidade é absorvido pelo organismo humano, especialmente pela pele. Os organofosforadossão conhecidos por induzirem ou agravarem certos problemas de saúde; assim é importante seu monitoramento. Para a determinação de clorpirifós em amostras aquosas geralmente utiliza-se etapas de extração/pré-concentração antes de se efetuar a quantificação. Neste trabalho, foramavaliadas as técnicasextração líquido-líquido com partição a baixa temperatura (LLE-LTP) e microextração em fase sólida com headspace (HS-SPME) e as técnicas de cromatografia gasosa com detecção por captura de elétrons (GC-ECD) e cromatografia gasosa acoplada à espectrometria de massas (GC-MS) para definição do método analítico mais sensível, utilizando planejamentos experimentais multivariados para a otimização dos métodos de preparo de amostra. Após a otimização, o método HS-SPME/GC-ECD foi validado para o monitoramento de clorpirifós em cursos d’água superficiais próximos às principais plantações de batata na zona rural de Ouro Branco/MG. Apresença de agrotóxicos, como o clorpirifós nesses cursos d’água, foi relacionada em pesquisas anteriores aos altos índices dos casos de hipertensão e aborto da população da zona rural. A definição dos pontos de coleta foi feita após visitas de campo e levantamento de informações obtidas junto aos órgãos e pessoas competentes. O planejamento fatorial completo apontou as variáveis tempo (1)e temperatura de extração (2), volume de amostra (3) e concentração de eletrólito (4) como importantes para o sistema;logo as mesmas foram avaliadas em mais níveis pela matriz Doehlert.As variáveis 1, 2 e 3 foram apontadas como as que influenciam o sistema. O modelo quadrático do planejamento Doehlert foi significativo não apresentando falta de ajuste e a condição ótima foi definida no tempo e temperatura de extração de 60 min e 85 °C, respectivamente, com um volume de amostra de 11 mL e 0,04 mol/L de concentração de eletrólito. O método otimizado foi validado considerando os parâmetros seletividade, linearidade, precisão (repetitividade e precisão intermediária), exatidão e os limites de detecção (LOD) e quantificação (LOQ). O LOQ e LOD foram 0,76 e 2,28 μg/L, respectivamente. O método se mostrou linear com R2 igual a 0,992. Os resultados indicaram que o método HS-SPME/GC-ECD proposto é eficiente para a determinação de clorpirifós em água e as análises das amostras coletadas indicaram a presença de clorpirifós em concentrações entre osvalores de LOD e LOQ. Os resultados desta pesquisa foram informados à Prefeitura Municipal de Ouro Branco e órgãos competentes. __________________________________________________________________________________________ / ABSTRACT: Produced since1940, organophosphates were the first to replace the organochlorines, which already had bug resistance. Among these chlorpyrifos presents itself as a highly toxic insecticide. Due to its high lipossolubility it is absorbed by the human body, especially the skin. Organophosphates are known to induce or worsen certain health problems; so it is important its monitoring. For the determination of chlorpyrifos in aqueous samples generally are used steps of extraction/pre-concentration before performing the measurement. In this study it was investigated the liquid-liquid extraction technique withlow temperature partition (LLE-LTP) and solid phase microextraction with headspace (HS-SPME) and the techniques of gas chromatography with electron capture detection (GC- ECD) and gas chromatography coupled to mass spectrometry (GC-MS) to define the most sensitive analytical method, using multivariate experimental designs for the optimization of the sample preparation techniques. After optimization, the HS-SPME/GC-ECD method was validated for the monitoring of chlorpyrifosin surface water bodies close to the main potato fields in countryside of OuroBranco/MG; the presence of pesticides, such as chlorpyrifos, in these streams has been linked in previous research to the high rates of hypertension and abortion cases of the population in rural areas. The definition of the sampling was made after field visits and information survey obtained from the competent agencies and people. The full factorial design showed the variables time (1) and temperature of extraction (2), sample volume (3) and concentration of electrolyte (4) as important to the system; in this way the same ones were evaluated in more levels by Doehlert matrix. Variables 1, 2 and 3 were identified as those that affect the system, the quadratic modelof Doehlert design was significant not showing lack of fit and the optimal condition was set in the time and temperature of extraction of 60 min and 85 °C, respectively, with a volume of 11 mL and 0.04 mol/L of electrolyte concentration. The optimized method was validated considering the parameters selectivity, linearity, precision (repeatability and intermediate precision), accuracy and limits of detection (LOD) and quantitation (LOQ). The LOD and LOQ were 0.76 and 2.28 μg/L, respectively. The method was linear with R2 equal to 0.992. The results indicate that the method HS-SPME/ECD-GC proposed is efficient for the determination of chlorpyrifos in water and the analysis of the samples indicated the presence of chlorpyrifos in concentrations between the values of LOD and LOQ. These results were reported to the Ouro Branco City Hall and competent agencies.

A Aniba canelilla (H.B.K.) Mez é uma planta aromática proveniente da região amazônica cujo óleo essencial apresenta como componentes majoritários o 1-nitro-2-feniletano e o metileugenol. Apesar das atividades antifúngicas e anti-inflamatórias cientificamente comprovadas e do uso popular do óleo para o tratamento de dermatites, acnes e feridas, não existe até o momento um estudo que verse sobre a quantificação desses compostos na pele. O objetivo deste trabalho foi a validação de um método bioanalítico otimizado por microextração em fase sólida no modo headspace em cromatógrafo gasoso com detector de ionização de chama (HS-SPME-GC-FID) para a determinação do 1-nitro-2-feniletano e metileugenol a partir do óleo essencial em diferentes amostras de estudo de permeação cutânea in vitro. Uma metodologia foi desenvolvida e validada por HS-SPME-GC-FID. A faixa da curva de calibração foi de 2,08 - 207,87 μg.mL-1 para o 1-nitro-2-feniletano e de 0,40-40,41 μg.mL-1 para o metileugenol. A presença de matriz e as características intrínsecas da metodologia de HS-SPME requereram uma transformação da curva de calibração. A transformação logarítmica (Log10) foi então aplicada aos dados e os resultados apresentaram homocedasticidade, resíduos dispersos, coeficiente de determinação (r²> 0,99) e recuperação adequados. Estudos de permeação cutânea foram realizados em células de Franz com diferentes quantidades (20, 100 e 200 μL) de óleo essencial de A. canelilla para avaliar o perfil de permeação e retenção em pele de orelha suína e fluido receptor. A análise das amostras nas condições validadas mostrou uma grande permeação e retenção dos compostos na seguinte ordem: fluido receptor >> derme >> epiderme >> estrato córneo. Verificou-se um aumento progressivo e dependência na retenção com base na quantidade aplicada no compartimento doador e grande retenção principalmente no fluido receptor e derme, resultado este compatível com as características físico-químicas de Log P, afinidade ao ambiente hidrofílico e lipofílico, tamanho e peso molecular do 1-nitro-2-feniletano e metileugenol. Em conclusão, o método proposto por HS-SPME-GC-FID para quantificar os compostos majoritários do óleo essencial de A. canelilla em amostras de pele de orelha suína e fluido receptor foi seletivo, preciso, exato e adequado, e pode ser utilizado em análises futuras. / Aniba canelilla (H.B.K.) Mez is an aromatic plant from the Amazon region whose essential oil has 1-nitro-2-phenylethane and methyleugenol as major compounds. Despite of the scientifically proved antifungal and anti-inflammatory activities and the popular use of oil for the treatment of dermatitis, acnes and wounds, there is no study up to date about the quantification of these compounds in skin samples. The aim of this study was the validation of an optimized bioanalytical method by solid phase microextraction on headspace mode in gas chromatograph with flame ionization detector (HS-SPME-GC-FID) for the determination of 1-nitro-2-phenylethane and methyleugenol from the essential oil in different samples of in vitro cutaneous permeation study. A methodology was developed and validated by HS-SPME-GC-FID. The ranges of calibration curves were 2.08 - 207.87 μg.mL-1 for 1-nitro-2-phenylethane and 0.40 - 40.41 μg.mL-1 for methyleugenol. The presence of matrix and the intrinsic characteristics of the HS-SPME methodology required a transformation to the calibration curves. The logarithmic transformation (Log10) was then applied to the data and the results showed homoscedasticity, dispersed residues, and adequate coefficient of determination (r²> 0.99) and recovery. Skin permeation studies were performed on Franz cells with different amounts (20, 100 and 200 μL) of A. canelilla essential oil to evaluate the skin permeation and retention profile in porcine ear skin and receptor fluid. The analysis of the samples under the validated conditions showed a high permeation and retention of the major compounds in the following order: receptor fluid >> dermis >> epidermis >> stratum corneum. A progressive increase and retention dependence were observed based on the amount applied in the donor compartment, and large retention mainly on the receptor fluid and dermis was observed, in accordance with the physicochemical characteristics of Log P, affinity to the hydrophilic and lipophilic environment, size and molecular weight of 1-nitro-2-phenylethane and methyleugenol. In conclusion, the method proposed by HS-SPME-GC-FID to quantify the major compounds of A. canelilla essential oil in porcine ear skin and receptor fluid samples was selective, accurate, precise and adequate, and can be used in future analyzes.

In der vorliegenden Arbeit wurde ein analytisches Verfahren zur quantitativen Bestimmung von Fettsäureethylestern (FSEE) im Haar und in Hautoberflächenlipiden mittels Headspace-Festphasenmikroextraktion (HS-SPME) und Gaschromatographie-Massenspektrometrie (GC-MS) sowie eine auf Hochleistungs-Flüssigchromatographie mit Photodiodenarray-Detektion (HPLC-DAD) basierende Methode zur Bestimmung der Squalenkonzentrationen in Lipidextrakten entwickelt. Die bei Untersuchung von Proben verschiedener Konsumentengruppen erhaltenen Konzentrationswerte wurden hinsichtlich ihrer Eignung als Marker für chronisch exzessiven Alkoholkonsum untersucht. Aus den Ergebnissen lässt sich schließen, dass Fettsäureethylester im Haar als Alkoholmarker den bisher üblicherweise genutzten Markern wie GGT, CDT oder MCV bezüglich Sensitivität und Spezifität mindestens ebenbürtig sind. Es wurden die folgenden vorläufige Cut-off-Werte festgelegt: wenn sich im Haar für die Summenkonzentration der vier in der höchsten Konzentration vorkommenden FSEE (Ethylmyristat, Ethylpalmitat, Ethyloleat und Ethylstearat) ein Wert > 1 ng/mg ergibt, kann mit hoher Sicherheit von chronisch exzessivem Alkoholkonsum ausgegangen werden, für Abstinenzler werden typischerweise Werte < 0,4 ng/mg gefunden. Durch Bildung des Quotienten der FSEE-Konzentrationen und der Squalenkonzentrationen wurden relative FSEE-Konzentrationen erhalten, die im Falle der Haaranalyse zu einer Verbesserung der Zuordnungssicherheit zu den entsprechenden Konsumentengruppen führten bzw. bei der Analyse von Hautoberflächenlipiden einen sinnvollen Vergleich der Werte erst ermöglichten. Als vorläufiger Cut-off-Wert für die relativen FSEE-Konzentrationen wurde ein Wert von 2 ng/µg vorgeschlagen. Als weiteres wichtiges Ergebnis der Arbeit wurde der Einlagerungsmechanismus der FSEE ins Haar aufgeklärt. Es konnte gezeigt werden, dass Fettsäureethylester in erster Linie über das Sebum ins Haar gelangen. / The current doctoral thesis presents the development of an analytical procedure for the quantitative analysis of fatty acid ethyl esters (FAEE) in hair and in skin surface lipids using headspace solid phase microextraction (HS-SPME) and gas chromatography-mass spectrometry (GC-MS) as well as a method based on high-performance liquid chromatography with photodiode array detection (HPLC-DAD) to determine squalene concentrations in lipid extracts. The results obtained from analysis of samples from different alcohol consuming groups showed that FAEE are suitable markers for long-term alcohol misuse. Concerning sensitivity and specifity they are at least as good as other commonly used markers like GGT, CDT or MCV. The following provisional cut-off values were established: for chronically excessive alcohol consumption, the sum of the four FAEE (ethyl myristate, ethyl palmitate, ethyl oleate and ethyl stearate) found in the highest mean concentrations should be > 1 ng/mg in hair; for non-drinkers, concentrations < 0,4 ng/mg are typical. The quotient obtained by dividing the FAEE concentration by the squalene concentration was defined as the relative FAEE concentration, which provides a better classification of the samples regarding the consumer groups through hair analysis. Relative FAEE values also allow a reasonable comparison in the case of skin surface lipid concentrations for the first time. 2 ng/µg is suggested as a preliminary cut-off value. As a further important result of the current work, the mechanism of incorporation of FAEE into hair was clarified. It was shown that fatty acid ethyl esters are incorporated into hair mainly through sebum.

Made available in DSpace on 2017-07-10T18:08:12Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Wagner Alex Jann Favreto.pdf: 2401353 bytes, checksum: 8e382cf32a6bec4d2e8a69fffdafffff (MD5) Previous issue date: 2008-11-28 / In the present work we describe the methodology to obtain and modify the surface of glass fibers composed by Li2O - ZrO2 - BaO - SiO2 with zinc oxide. The glass fibers were obtained by classical fusion followed by the stretch of the vitreous fused mass, where the diameter of the fibers was controlled by the stretching velocity. They were recovered with ZnO by dip-coating and sol-gel processing of deposition, using both inorganic and organic polymeric gel methods, where the zinc acetate dihydrate was the zinc oxide precursor. The superficial morphology of the fiber was verified by scanning electron microscopy (SEM) and the zinc oxide layer was characterized by mapping of K&#945; and L&#945; lines of the zinc by EDX analyses. The results of the SEM characterization pointed out the deposition of ZnO by inorganic polymeric gel method results in a thick layer of the oxide without apparent porosity, while by the organic polymeric gel method results a dip homogeneous and porous layer of ZnO over the glass fiber surface. The glass fibers recovered with ZnO by organic polymeric gel were used to develop an analytical methodology to simultaneous determination of trihalomethanes (THM´s) in drinking water using headspace-SPME-Gas Chromatography. The study was based on the selectivity, linearity, accuracy, precision and recovery of the analytical method using the glass fiber/ZnO. The effect of the salt addition, extraction temperature and extraction, desorption and incubated time on the analytical response were evaluated too. Good linear dynamic range was observed from the method quantification limits with correlation coefficients better than 0.9900 for all compounds. The method was accurate with recoveries ranging from 95,00 to 105,00%. and the range of linearity observed was 30 ng/mL to 500 ng/mL to trichloromethane, 20 ng/mL to 250 ng/mL to dichlorobromomethane and dibromochloromethane and 10 ng/mL to 100 ng/mL to tribromethane. The method is also robust and has great potential to be used in a trihalomethane determination. / No presente trabalho encontram-se descritas a metodologia para obtenção, e para a modificação da superfície de fibras de vidro de composição Li2O - ZrO2 - BaO - SiO2 com óxido de zinco. As fibras de vidro foram obtidas pelo método de fusão clássico, seguido do estiramento da massa vítrea fundida, controlando-se o diâmetro através da velocidade de estiramento. Estas foram recobertas com ZnO, utilizando-se da técnica sol-gel em dip-coating controlado, usando-se os métodos de deposição do gel polimérico inorgânico e do gel polimérico orgânico, onde o acetato de zinco di-hidratado foi empregado como reagente precursor do óxido de zinco. Utilizou-se a técnica de Microscopia Eletrônica de Varredura (MEV) para avaliar a morfologia das fibras sem recobrimento e das fibras recobertas. O recobrimento com óxido de zinco sobre a superfície das fibras, foi mapeado através das linhas K&#945; e L&#945; do zinco, por Microssonda de Energia Dispersiva (EDS), sendo observado uma camada regular de ZnO sobre a superfície do suporte. Através dos resultados obtidos por MEV, verificou-se que pela técnica de deposição do gel polimérico inorgânico as fibras apresentam recobrimento bastante espesso, mas sem porosidade aparente. Quanto à técnica de deposição do gel polimérico orgânico, obtem-se fibras com um recobrimento mais homogêneo, espesso e poroso. Desta forma utilizaram-se as fibras recobertas pelo método do gel polimérico orgânico, para o desenvolvimento de metodologia analítica para determinações cromatográficas de trihalometanos (THM s) em solução aquosa. Utilizou-se da técnica de extração em head-space (HS) por Microextração em Fase Sólida (SPME) (HS-SPME) conjugada a Cromatografia Gasosa (CG). O estudo foi baseado na seletividade, linearidades, exatidão, precisão e na recuperação do método analítico usando a fibra de vidro/ZnO. O efeito da adição de sal, temperatura e tempo de extração, tempo de dessorção e o tempo de incubação na resposta analítica. O bom alcance dinâmico linear, foi observado nos limites da quantificação do método com coeficientes de correlação maiores que 0,99 observados para todos os compostos. O método demonstrou-se exato e com a recuperações que variam de 95,00 a 105,00% com escala de linearidades observadas entre 30 ng/mL a 500 ng/mL para o triclorometano, 20 ng/mL a 250 ng/mL ao diclorobromometano e o dibromoclorometano e 10 ng/mL a 100 ng/mL para o tribromometano. O método apresentou-se robusto, e possui grande potencial para ser usado em determinações de trihalometanos.

Made available in DSpace on 2017-07-10T18:08:21Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Maycon Fernando Percio.pdf: 4386871 bytes, checksum: fd68bea53c4d4cbfe32a314a01715c6e (MD5) Previous issue date: 2012-02-28 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / In the present work a vitreous composition based on combination of the oxides BaO-SiO2-Li2O modified by adding of oxides Nb2O5, TiO2, V2O5 and ZrO2 as nucleating agent was evaluated and used in the manufacture of glass and glass-ceramic fibers for use in SPME-CG. The stability of the resulting glasses was accompained by X-ray diffraction (XRD) and differential thermal analysis (DTA). The stability parameters of Weinberg (KW), Hubrÿ (KH), Lu e Liu (KLL), Du and Huang (KDU) and Saad and Poulain (KSP) were obtained by DTA data. By KSP was observed that stability of glassy phases follows the descending order: Composition 5 (ZrO2) > Composition 2 (Nb2O5) > Composition 1 (without nucleant) > Composition 4 (V2O5) > Composition 3 (TiO2). Through these data it was possible to determine the apparent activation energies of the crystallization process by the crystallization peaks of the DTA curves, whereby the decreasing order was obtained: Composition 5 (ZrO2)> Composition 4 (V2O5) > Composition 2 (Nb2O5) > Composition 3 (TiO2) > Composition 1 (without nucleant). It was found, through the Avrami index, a surface crystallization mechanism of the compositions that leads to a correspondent transition to the glass ceramic. From DRX data obtained after thermal treatment at varying time, the TTT diagrams (Time, Temperature and Transformation) of the compositions were constructed, which delimited the conditions for preparation of glass ceramic fibers. The XRD analysis indicated that the main crystalline phases formed after heat treatments are rhombic Li2SiO3 Li2Si2O5. The fibers obtained were further tested in chromatographic analysis by HS-SPME-GC of the methanol in aqueous solution at concentrations of 10 and 100 mgL-1 with satisfactory results. / No presente trabalho, foram estudadas composições vítreas baseada na combinação dos óxidos Li2O-BaO-SiO2 modificadas pelos óxidos Nb2O5, TiO2, V2O5 e ZrO2, utilizados como nucleantes na fabricação de fibras de vidro e vitrocerâmicas para a utilização em SPME-CG. Determinou-se a estabilidade vítrea para cada composição através da difração de raio-X (DRX) e análise térmica diferencial (DTA) sendo observada a estabilidade das fases vítreas na ordem decrescente: Composição 5 (ZrO2) > Composição 2 (Nb2O5) > Composição 1 (sem nucleante) > Composição 4 (V2O5) > Composição 3 (TiO2). Através destes dados foi possível determinar as energias de ativação aparente das fases cristalinas através dos picos de cristalização das curvas de DTA, cuja ordem decrescente obtida foi: Composição 5 (ZrO2) > Composição 4 (V2O5) > Composição 2 (Nb2O5) > Composição 3 (TiO2) > Composição 1 (sem nucleante). Verificou-se através do índice de Avrami que as composições vítreas obtidas apresentaram mecanismo de nucleação de superfície para a formação do vitrocerâmico. Os dados de DTA possibilitaram a obtenção de diagramas de Tempo, Temperatura e Transformação (TTT), que delimitaram as condições de preparo das fibras vitrocerâmicas. Foram fabricados 5 tipos diferentes de fibras vítreas (Fibras A), que após tratamento térmico deram origem a fibras vitrocêramicas parcialmente cristalizadas (Fibras B) e fibras vitrocerâmicas totalmente cristalizadas (Fibras C), resultando um total de 15 espécies de fibras de composições e estruturas cristalinas diferentes. As análises por DRX indicaram que as principais fases cristalinas formadas depois dos tratamentos térmicos são Li2SiO3 e Li2Si2O5 ortorrômbicos. As fibras obtidas foram ainda testadas em análises cromatográficas por Cromatografia Gasosa na extração de metanol em solução aquosa nas concentrações de 10 e 100 mgL-1 com resultados satisfatórios.