Submitted by Marcos Anselmo (marcos.anselmo@unipampa.edu.br) on 2018-09-28T14:37:05Z No. of bitstreams: 1 Franciéle Romero Machado.pdf: 1266926 bytes, checksum: 83d41ed0777c033aeb8e5fa86ca9541c (MD5) / Approved for entry into archive by Marcos Anselmo (marcos.anselmo@unipampa.edu.br) on 2018-09-28T14:37:21Z (GMT) No. of bitstreams: 1 Franciéle Romero Machado.pdf: 1266926 bytes, checksum: 83d41ed0777c033aeb8e5fa86ca9541c (MD5) / Made available in DSpace on 2018-09-28T14:37:21Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Franciéle Romero Machado.pdf: 1266926 bytes, checksum: 83d41ed0777c033aeb8e5fa86ca9541c (MD5) Previous issue date: 2018 / A epigenética é o estudo das mudanças hereditárias relacionadas à expressão gênica sem envolver alterações na sequência do DNA. Dentre os mecanismos epigenéticos, a deacetilação das histonas catalizada por histonas deacetilases (HDACs) reprimem a transcrição. Fatores dietéticos influenciam as histonas, sendo importante interligar obesidade e aspectos epigenéticos. A HDAC3 ainda é pouco relatada em estudos metabólicos e pode ser inibida pelo RGFP966, inibidor seletivo tipo benzamida. O objetivo do presente estudo foi investigar o papel da HDAC3 em camundongos induzidos à obesidade via dieta hiperlipídica. Trata-se de um estudo experimental conduzido com 32 camundongos C57BJ/6 adultos (n=8), onde foram administradas dieta padrão (NPD) ou dieta rica em lipídeos (HFD) por 120 dias. Durante o dia 91 ao dia 120 dia foi administrado o RGFP966 (50 mg/kg; via subcutânea) para causar a hiperacetilação. O peso corporal foi aferido semanalmente e no 120º dia os animais foram submetidos à eutanásia com pentobarbital (180 mg/kg; via intraperitoneal) e o sangue e o hipocampo foram coletados para as análises bioquímicas. Foram analisados os seguintes parâmetros sanguíneos: glicose, insulina, perfil lipídico, leptina e adiponectina. No hipocampo foram analisados: interleucina 6 (IL-6), interleucina 1 beta (IL-1β) e fator de necrose tumoral alfa (TNF-α). Os resultados do presente estudo demonstraram que a HFD aumentou o peso corporal, os níveis plasmáticos de glicose, insulina, triglicerídeos, colesterol total e lipoproteína de baixa densidade (LDL) comparado ao controle, enquanto o RGFP966 (50 mg/Kg) reduziu esses níveis. A lipoproteína de alta densidade (HDL) no plasma teve valores menores nos camundongos com HFD, contudo o uso do RGFP966 levou ao acréscimo significativo dessa lipoproteína. As interleucinas IL-6, IL-1β e TNF-α no hipocampo aumentaram significativamente no grupo com HFD comparando com o grupo NPD. Em contraste, o inibidor RGFP966 reduziu as interleucinas, atenuando o processo inflamatório causado pela HFD. Quanto aos níveis de adipocinas, a HFD aumentou drasticamente os níveis de leptina e reduziu os níveis de adiponectina no plasma. O uso do inibidor atenuou essas alterações, pois sua administração no grupo HFD evitou a redução da adiponectina e o aumento da leptina, atuando na regularização da sinalização da ingesta alimentar e homeostase energética. Constata-se que a inibição seletiva da HDAC3 pelo RGFP966 modulou as alterações no peso corporal, parâmetros bioquímicos, adipocinas no sangue e citocinas pró-inflamatórias no hipocampo mesmo com administração de HFD, evidenciando que a enzima HDAC3 está envolvida nas alterações decorrentes da obesidade. Assim, a inibição da HDAC3 pode proteger contra o ganho de peso, alterações metabólicas e inflamatórias demonstrando ser um importante alvo terapêutico para estudos relacionados à obesidade. / Epigenetics is the study of hereditary changes related to gene expression without involving changes in DNA. Among the epigenetic mechanisms, histone deacetylase-catalyzed histone deacetylation (HDACs) represses the transcription. Dietary factors influence the histones, being important to interconnect obesity and epigenetic aspects. HDAC3 is still poorly reported in metabolic studies and may be inhibited by RGFP966, a selective inhibitor of the type benzamide. The objective of present study was to investigate the role of HDAC3 in mice induced to obesity via a hyperlipid diet. This is an experimental study conducted with 32 C57BJ / 6 adult mice (n = 8), where normal pellet diet (NPD) or high fat diet (HFD) were administred for 120 days. During the day 91 to day 120 was administered the RGFP966 (50 mg/kg; subcutaneously via) to cause hyperacetylation. Body weight was measured weekly and on day 120 animals were euthanized with pentobarbital (180 mg/kg; intraperitoneal via) and the blood and the hippocampus were collected for biochemical analysis. The following blood parameters were analyzed: glucose, insulin, lipid profile, leptin and adiponectin. In the hippocampus were analyzed: interleukin 6 (IL-6), interleukin 1 beta (IL-1β) and tumor necrosis factor alpha (TNF-α). The results of the present study demonstrated that HFD increased body weight, plasma glucose, insulin, triglycerides, total cholesterol and low density lipoprotein (LDL) levels compared to control, while RGFP966 (50 mg / kg) reduced these levels. Plasma high densitiy lipoprotein (HDL) had lower values in HFD mice, however the use of RGFP966 led to a significant increase of this lipoprotein. The interleukins IL-6, IL-1β and TNF-α in the hippocampus increased significantly in the HFD group compared to the NPD group. In contrast, the inhibitor RGFP966 reduced interleukins, attenuating the inflammatory process caused by HFD. As for adipokine levels, HFD dramatically increased leptin levels and reduced plasma adiponectin levels. The use of the inhibitor attenuated these changes, since its administration in the HFD group avoided the reduction of adiponectin and the increase of leptin, acting in the regularization of food intake signaling and energetic homeostasis. It was found that the selective inhibition of HDAC3 by RGFP966 modulated changes in body weight, biochemical parameters, blood adipokines and proinflammatory cytokines in the hippocampus even with HFD administration, evidencing that the HDAC3 enzyme is involved in the alterations resulting to obesity. Thus, the inhibition of HDAC3 may protect against weight gain, metabolic and inflammatory changes proving to be an important therapeutic target for studies related to obesity.

CoordenaÃÃo de AperfeiÃoamento de NÃvel Superior / O cÃncer colorretal (CCR) à a quinta neoplasia mais incidente no Brasil e sua freqÃÃncia vem aumentando em paÃses industrializados. A lesÃo prÃ-neoplÃsica mais precoce com presenÃa de displasia à o foco de cripta aberrante (FCA), estando relacionada como lesÃo precursora de adenomas colorretais e cÃncer em humanos. O entendimento destas lesÃes à fundamental para esclarecer os mecanismos da carcinogÃnese colorretal e sua prevenÃÃo. O objetivo foi verificar se a dieta hipercalÃrica (DH), hiperlÃpidica, interfere na formaÃÃo de criptas aberrantes na mucosa cÃlica induzida por azoximetano (AOM), em ratos. Foram usados 36 ratos Wistar, machos, com peso mÃdio inicial de 180g a 250g e 8 semanas de idade. Foram distribuÃdos em 04 grupos com 09 animais cada: GI- Grupo com ratos submetidos à DH e nÃo expostos ao AOM, GII- Grupo com ratos submetidos à dieta padrÃo (DP) e nÃo expostos ao AOM, GIII- Grupo com ratos submetidos à DH e expostos ao AOM, GIV- Grupo com ratos submetidos à DP e expostos ao AOM. Utilizou-se, a partir da 8 semana, nos grupos I e III uma dieta hipercalÃrica (4.250cal/kg), rica em gordura poliinsaturada, relaÃÃo &#969;-6: &#969;-3 = 3:1, acrescida de fibras, minerais e vitaminas. Os grupos II e IV receberam uma dieta padrÃo (3.000cal/kg). Na 16 semana, GIII e GIV receberam injeÃÃo de AOM 15mg/kg, intraperitoneal (IP), 01 vez por semana, por 02 semanas, enquanto GI e GII receberam soluÃÃo salina a 0,9%. Foram mortos na 15 semana apÃs a induÃÃo com carcinÃgeno ou administraÃÃo IP de soluÃÃo estÃril. Avaliaram-se os animais quanto ao peso, alteraÃÃo clÃnica, presenÃa de adenomas, FCA e o nÃmero de criptas por foco (multiplicidade) de acordo com a localizaÃÃo cÃlica (proximal, medial e distal). Os resultados foram submetidos aos testes de anÃlise de variÃncia e estabelecido o nÃvel de 5% (p < 0,05) para a rejeiÃÃo da hipÃtese de nulidade. Verificou-se que a dieta hipercalÃrica hiperlÃpidica promoveu um incremento no peso no grupo III, quando comparado ao grupo IV e nÃo apresentou aumento significante no nÃmero total de FCA nos segmentos mÃdio (p = 0,985) e distal (p = 0,854). Analisando ambos os grupos em relaÃÃo à multiplicidade de FCA, nÃo houve predominÃncia da presenÃa de 01 a 04 criptas nos segmentos mÃdio (p = 0,499) e distal (p = 0,244), como tambÃm, de 05 ou mais criptas nos segmentos mÃdio (p = 0,371) e distal (p = 0,820). Verificando a presenÃa do nÃmero total de criptas por foco em toda a mucosa cÃlica, o teste do qui-quadrado mostrou que o grupo IV apresenta, em proporÃÃo, um maior nÃmero de focos com 05 ou mais criptas do que o grupo III (P= 0,043). Conclui-se que a dieta usada aumenta o peso corporal, porÃm nÃo interfere na quantidade de FCA, contudo reduz o aparecimento de criptas aberrantes, quando &#8805; 5 criptas por foco, no colo de ratos Wistar, induzido por azoximetano. / Colorectal cancer is the fifth most common type of cancer in Brazil and the incidence is growing in developed countries. The earliest preneoplastic lesion presenting dysplasia is aberrant crypt foci (ACF), a precursor of colorectal adenoma and cancer in humans. Knowledge of ACF formation is crucial to understanding the mechanisms involved in colorectal cancer and their inhibition. The objective of this study was to determine whether a hypercaloric, hyperlipidic diet (HCD) affects azoxymethane (AOM)-induced ACF formation in rat colonic mucosa. Thirty-six 8-week old male Wistar rats weighing 180-250g were distributed into 4 groups of 9 animals each: Group I: HCD without AOM; Group II: normocaloric diet (NCD) without AOM; Group III: HCD and AOM; Group IV: NCD and AOM. From the eighth week onwards the animals in Groups I and III were fed HCD (4,250 cal/kg; rich in polyunsaturated fat; ratio &#969;6:&#969;3=3:1, with addition of fiber, minerals and vitamins). The animals in Groups II and IV were fed NCD (3,000 cal/kg). At 16 weeks, the animals in Groups III and IV were injected i.p. with 15 mg/kg AOM once a week for 2 weeks, while the animals in Groups I and II received 0.9% physiological saline. At 15 weeks after AOM or saline administration, the animals were euthanized and their weight, clinical changes, adenomas, ACF and number of crypts per focus (multiplicity) according to colon section (proximal, middle or distal) were registered. The findings were submitted to variance analysis and the level of statistical significance was set at 5% (p<0.05). HCD was found to promote weight increase in Group III compared to Group IV. No significant increase in the total number of ACF was observed for the middle and distal segments (p=0.985 and p=0.854, respectively). The multiplicity of foci with 1-4 aberrant crypts was similar for the middle and distal segments (p=0.499 and p=0.244, respectively). The corresponding figures for foci with &#8805;5 aberrant crypts were p=0.371 and p=0.820. The total number of ACF in the colonic mucosa differed significantly between Group IV and Group III (&#967;2 = 4.091; p=0.043). It may thus be concluded that HCD promotes weight increase and, while not affecting the total number of ACF, reduces the proportion of foci with &#8805;5 aberrant crypts, thereby indirectly preventing the emergence of preneoplastic lesions in rat colonic mucosa.

Uma dieta rica em gordura leva sabidamente a efeitos deletérios, associados a síndrome metabólica, por outro lado carboidratos como os frutooligossacarídeos (FOS) estão associados à melhora da saúde gastrointestinal e à prevenção do excesso de gordura corporal e das alterações metabólicas associadas. O presente estudo avaliou os efeitos em longo prazo de quantidades elevadas de FOS em parâmetros metabólicos, na esteatose hepática não alcoólica (EHNA) e nos ácidos graxos de cadeia curta (AGCC) de camundongos C57BL recebendo dieta normolipídica e hiperlipídica. Foram utilizados 60 animais divididos em seis grupos que receberam por quatro meses as seguintes dietas experimentais: controle (C), normolipídica rica em fibra (F), normolipídica suplementada com FOS (FOS), hiperlipídica (HL), hiperlipídica rica em fibras (HLF) e hiperlipídica com FOS (HLFOS). A dieta controle continha 5% de celulose microcristalina, enquanto a rica em fibras continha 15%; já as suplementadas com FOS, ambas continham 15% desse prebiótico. Foram analisados: peso dos animais; composição corporal; ingestão alimentar; glicemia de jejum; perfil lipídico sérico e hepático; histologias hepática e intestinal; malondialdeído (MDA), retinol e ?- tocoferol hepáticos; AGCC nas fezes. Ao final do período experimental não foi verificada alteração no consumo calórico entre os grupos, mas a suplementação com FOS na dieta hiperlipídica promoveu menor ganho de peso corporal e redução dos pesos do fígado e do tecido adiposo retroperitoneal em comparação ao HL e HF. O FOS preveniu a EHNA e diminuiu os níveis de da alanina aminotransferase e de colesterol sérico nos modelos experimentais animais de obesidade e síndrome metabólica (SM), mas sem alterações significativas no perfil lipídico hepático, na glicemia de jejum, na capacidade antioxidante total ou nas dosagens hepáticas de MDA, de retinol e de ?-tocoferol. Os grupos que receberam dieta rica em fibras não apresentaram melhora nos parâmetros metabólicos ou na EHNA como ocorreu com a suplementação de FOS, sendo que o grupo HLF apresentou aumento do MDA no fígado. Já na dieta normolipídica, o FOS e a celulose foram eficazes na preservação da vitamina E hepática. A histologia intestinal evidenciou que a dieta hiperlipídica aumentou o diâmetro total da luz intestinal e reduziu a espessura muscularentérica, sendo que tanto a suplementação com FOS como com celulose reverteram esses achados, sendo o FOS o mais efetivo. Já com relação aos grupos que receberam dieta normolipídica, houve diminuição da espessura muscular entérica tanto no grupo F como no FOS, sendo a celulose a que apresentou a maior redução, e o aumento do diâmetro da luz intestinal só foi verificado no grupo F. Por fim, não houve alteração nas dosagens dos três principais AGCC nas fezes. A suplementação em longo prazo com altas doses de FOS foi efetiva na redução do peso, da adiposidade, da EHNA e do colesterol sérico em camundongos C57BL com obesidade e SM induzidas por dieta hiperlipídica, além de prevenir parcialmente as alterações morfológicas do intestino presentes nesses modelos experimentais. Os benefícios encontrados com a oferta de altas doses de FOS não foram verificados nos grupos enriquecidos com celulose microcristalina / A high-fat diet is known to lead to deleterious effects associated with metabolic syndrome, on the other hand carbohydrates such as fructooligosaccharides (FOS) are associated with improved gastrointestinal health and prevention of excess body fat and associated metabolic abnormalities. The present study evaluated the long-term effects of high doses of FOS on metabolic parameters, non-alcoholic hepatic steatosis (NASH) and short chain fatty acids (SCFAs) of C57BL mice receiving normolipid and hyperlipidic diets. A total of 60 animals were divided into six groups, which received the following experimental diets for four months: control (C), fiber-rich normolipid (F), normolipid supplemented with FOS (FOS), hyperlipidic (HL), high-fiber hyperlipid (HLF) and hyperlipidemic with FOS (HLFOS). The control diet contained 5% microcrystalline cellulose, while the high fiber contained 15%; and those supplemented with FOS, both contained 15% of this prebiotic. It was analyzed: weight of the animals; body composition; food intake; fasting blood glucose; serum and hepatic lipid profile; hepatic and intestinal histologies; malondialdehyde (MDA), hepatic ?-tocopherol and retinol; AGCC in feces. At the end of the experimental period, no change in caloric intake between groups was observed, but supplementation with FOS in the hyperlipid diet promoted a lower body weight gain and reduced weights of the liver and retroperitoneal adipose tissue compared to HL and HF. FOS prevented NASH and decreased levels of alanine aminotransferase and serum cholesterol in experimental animal models of obesity and metabolic syndrome (MS), but without significant changes in hepatic lipid profile, fasting glycemia, total antioxidant capacity or dosages of MDA, retinol and ?-tocopherol. The groups that received a high fiber diet showed no improvement in metabolic parameters or NASH as occurred with FOS supplementation, and the HLF group presented increased MDA in the liver. In the normolipid diet, FOS and cellulose were effective in the preservation of hepatic vitamin E. The intestinal histology evidenced that the hyperlipidic diet increased the total diameter of the intestinal lumen and reduced enteric muscle thickness, and both FOS and cellulose supplementation reversed these findings, with FOS being the most effective. Regarding the groups that received a normolipid diet, there was a decrease in enteric musclethickness in both the F and FOS groups, with the cellulose being the one with the greatest reduction, and the increase in the diameter of the intestinal lumen was only verified in the F group. Finally, there was no change in the dosages of the three main SCFAs in the feces. Long-term supplementation with high doses of FOS was effective in reducing weight, adiposity, NASH and serum cholesterol in C57BL mice with obesity and MS induced by a hyperlipid diet, in addition to partially preventing the morphological alterations of the intestine present in these models experiments. The benefits found in the supply of high doses of FOS were not verified in groups enriched with microcrystalline celulose

Submitted by Liliane Ferreira (ljuvencia30@gmail.com) on 2018-03-01T12:16:05Z No. of bitstreams: 2 Tese - Nathalia Oda Amaral - 2018.pdf: 7340078 bytes, checksum: dd36d7fb333869ee8d969019a9f88b63 (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) / Approved for entry into archive by Luciana Ferreira (lucgeral@gmail.com) on 2018-03-01T13:16:17Z (GMT) No. of bitstreams: 2 Tese - Nathalia Oda Amaral - 2018.pdf: 7340078 bytes, checksum: dd36d7fb333869ee8d969019a9f88b63 (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) / Made available in DSpace on 2018-03-01T13:16:18Z (GMT). No. of bitstreams: 2 Tese - Nathalia Oda Amaral - 2018.pdf: 7340078 bytes, checksum: dd36d7fb333869ee8d969019a9f88b63 (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Previous issue date: 2018-02-02 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPES / Hypertension is the most common pathologies which affect population. Of the factors that can promote hypertension, food behavior is highlighted in relation to unhealthy eating habits present in western diet. Thus, present study sought to evaluate some aspects of this pathology in several situations, and themes were discussed separately in two chapters. In the first moment, effect of maternal hyperlipidic diet on metabolic and autonomic parameters in offspring was evaluated. It is known which obesity induced by maternal diet can modify central regulatory pathways of the fetus, mainly long-term regulation of appetite, but no work sought to evaluate the influence of the maternal hyperlipidic diet (HD) on cardiovascular and autonomic parameters in the offspring . Female Holtzman rats (280-300 g) were divided into two groups. One group received standard diet (SD) and other HD. The animals had free access to SD or HD for 6 weeks prior and during gestation and lactation period. All pups were weaned after 21 days of life and had free access to SD. After one week some offspring and mothers were submitted to glycemic test and later euthanized for removal of adipose tissue and blood. Other offspring were submitted to in situ preparation. DH increased adipose tissue in all females, but was able to change only metabolic triacylglycerols concentration. Offspring of HFD dams (OffHFD) showed an increase in adipose tissue and total cholesterol and HDL levels. Offspring of SD dams (OffSD) showed decrease in sympathetic activity after pre-colicular transection. This effect was not observed in males offspring of mothers with HFD (OffHFD). KCN infusion caused similar increases in abdominal activity (ABD), in phrenic nerve frequency (PNA f) and sympathetic activity (SNA), but in OffHFD this increase in SNA was smaller. KCN caused increase in phrenic nerve amplitude (PNA) and was higher in OffHFD. Hypercapnia resulted in increase in SNA, ABD and PNA and decrease in PNA f in both groups. The decrease in PNA f was more pronounced in OffHFD and increased PNA was higher in OffHFD. Phenylephrine caused in both groups decrease in SNA, ABD and PNA, and generated an increase in PNA f. The reduction of SNA was higher in OffHFD. These results suggest that maternal HFD during fetal development alters central connections in offspring. In second moment oxytocin effects on vascular reactivity and its role in hypernatremia-induced responses were evaluated. Changes in volume and/or extracellular compartments composition are known to evoke various autonomic, cardiovascular and hormonal responses that to modulate renal excretion of water and sodium. The main vegetative adjustments are: renal vasodilation and oxytocin secretion. Regulation of osmolarity and volume is critical for survival. Despite knowledge, no study evaluated interaction between renal sympathetic activity and oxytocin secretion on renal and cardiovascular responses induced by sodium overload. Male Wistar rats (280–350 g) were anesthetized with sodium thiopental (40 mg/kg, i.v.). Animals were also instrumented for measurement of mean arterial pressure (MAP) and renal blood flow (RBF). Renal vascular conductance (RVC) was calculated as the ratio of RBF by MAP. In anesthetized rats (n = 6), OT infusion (0.03 μg/kg, i.v.) induced renal vasodilation. Ex vivo experiments demonstrated that OT caused renal artery relaxation. Blockade of OT receptors (OTR) reduced these responses to OT, indicating a direct effect of this peptide on OTR on this artery. Hypertonic saline (3 M NaCl, 1.8 ml/kg b.wt., i.v.) was infused over 60 s. In sham rats (n=6), hypertonic saline induced renal vasodilation. The OXTR antagonist (AT; n=7) and renal denervation (RX) reduced the renal vasodilation induced by hypernatremia. Atosiban with renal denervation (RX+AT; n=7) completely abolished renal vasodilation induced by sodium overload. Intact rats excreted 51% of the injected sodium within 90 min. Natriuresis was slightly blunted by atosiban and renal denervation (42% and 42% of load, respectively), whereas atosiban with renal denervation reduced sodium excretion to 16% of the load. These results suggest that OT and renal nerves are involved in renal vasodilation and natriuresis induced by acute plasma hypernatremia. The understanding of regulatory mechanisms activated both during obesity and during hyperosmolarity allows greater possibility development new therapeutic tools for hypertension prevention and treatment. / A hipertensão arterial é uma das patologias mais comuns que afetam a população. Dentre os fatores que podem propiciar a hipertensão o comportamento alimentar ganha destaque no que se referem aos hábitos alimentares não saudáveis presentes na dieta ocidental. Sendo assim, o presente trabalho procurou avaliar alguns aspectos dessa patologia em diversas situações, e os temas foram discutidos de forma separada em dois capítulos. No primeiro momento avaliou-se o efeito da dieta hiperlipídica materna sobre os parâmetros metabólicos e autonômicos na prole. Sabe-se que a obesidade induzida pela dieta materna pode modificar os caminhos regulatórios centrais do feto, principalmente a regulação em longo prazo do apetite, porém nenhum trabalho procurou avaliar a influência da dieta hiperlipídica (DH) materna sobre os parâmetros cardiovasculares e autonômicos na prole. Ratas Holtzman adultas (280 - 300 g) foram divididas em dois grupos. Um grupo recebeu dieta padrão (DP) e o outro grupo DH. Os animais tiveram acesso livre a DP ou DH durante 6 semanas prévias (período de pré-gestação) e durante período de gestação e lactação. Todos os filhotes foram desmamados após 21 dias de vida e tiveram livre acesso a DP. Após uma semana alguns filhotes e as mães foram submetidos ao teste glicêmico e posteriormente eutanasiadas para retirada de tecido adiposo e sangue. Os outros filhotes foram submetidos à preparação coração-bulbo-hipotálamo (in situ). A DH aumentou o tecido adiposo nas ratas, mas foi capaz de alterar apenas as concentrações metabólicas de triacilgliceróis nesses animais. Filhotes machos de mães com DH (FMDH) apresentaram aumento no tecido adiposo, aumento nos níveis de colesterol total e nos níveis de HDL. Filhotes machos de mães com DP (FMDP) apresentaram redução da atividade simpática após transecção pré-colicular. Esse efeito não foi observado nos FMDH. A infusão de KCN provocou aumentos similares entre FMDP e FMDH quanto à atividade abdominal (ABD), na frequência do nervo frênico (f PNA) e na atividade simpática torácica (SNA), porém, no grupo FMDH esse aumento na SNA foi menor. O KCN provocou um aumento na amplitude do nervo frênico (PNA) sendo maior em FMDH. A hipercapnia provocou nos filhotes um aumento na SNA, na ABD e na PNA e gerou uma diminuição na f PNA em ambos os grupos. A diminuição na f PNA foi mais acentuada em FMDH e o aumento da PNA foi maior em FMDH. A fenilefrina provocou nos dois grupos uma diminuição na SNA, na ABD e na PNA, e gerou um aumento na f PNA. A simpatoinibição foi maior em FMDH. Esses resultados sugerem que a DH materna durante desenvolvimento fetal provavelmente altera as conexões centrais na prole. No segundo momento avaliou-se os efeitos da ocitocina sobre a reatividade vascular e seu papel nas respostas induzidas pela hipernatremia. Sabe-se que alterações no volume e/ou na composição dos compartimentos extracelulares evocam várias respostas autonômicas, cardiovasculares e hormonais que atuam em conjunto para modular a excreção renal de água e sódio. Os principais ajustes vegetativos são: vasodilatação renal e secreção de ocitocina. A regulação da osmolaridade e do volume é fundamental para sobrevivência. Apesar do vasto conhecimento na área nenhum estudo avaliou a interação entre a atividade simpática renal e a secreção de ocitocina sobre as respostas renais e cardiovasculares induzidas pela sobrecarga de sódio. Ratos Wistar machos (280-350 g) foram anestesiados e instrumentalizados para implantação de cateteres na bexiga, na veia e na artéria femoral e também para medição da pressão arterial média (PAM) e fluxo sanguíneo renal (FSR). Em ratos anestesiados (n = 6), a infusão de OT (0,03 μg/kg, i.v.) induziu vasodilatação renal. Em experimentações ex vivo a OT causou relaxamento da artéria renal. O bloqueio dos receptores de OT (OTR) reduziu essas respostas à OT, indicando um efeito direto desse peptídeo em seu receptor nesta artéria. O bloqueio dos receptores de ocitocina e a desnervação renal reduziu a vasodilatação renal e natriurese induzida pela sobrecarga de sódio aguda e a combinação do antagonista de receptores de ocitocina e a desnervação renal aboliram completamente a vasodilatação renal e reduziram ainda mais a natriurese induzida pela hipernatremia. Estes resultados sugerem que a OT e os nervos renais estão envolvidos na vasodilatação renal e natriurese induzida por hipernatremia aguda. O amplo conhecimento na área e a compreensão dos mecanismos regulatórios ativados tanto durante a obesidade quanto durante hiperosmolaridade permite uma maior possibilidade de desenvolvimento de novas ferramentas terapêuticas para a prevenção e tratamento da hipertensão.

Submitted by (lucia.rodrigues@ufrpe.br) on 2016-05-31T12:48:57Z No. of bitstreams: 1 Daniella Tavares Pessoa.pdf: 1486789 bytes, checksum: a6f7a6497263d8419ed731a88dac28b8 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-05-31T12:48:57Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Daniella Tavares Pessoa.pdf: 1486789 bytes, checksum: a6f7a6497263d8419ed731a88dac28b8 (MD5) Previous issue date: 2012-02-28 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPES / The increased consumption of hyperlipidic diet has been an increase in obesity rates and levels of serum cholesterol and triglycerides in a large part of the population, as well as, has been linked with the development of neurodegenerative diseases, such as Alzheimer's disease. On the other hand, several studies demonstrated the importance of lipids in brain structure and activity. Epilepsy is a pathology related to the brain activity disorder, with high rate of refractoriness to conventional therapeutics, in these cases hyperlipidic diet has been used such an alternative treatment. Therefore, the investigation of possible interference from hyperlipidemic diets in TLE can add new perspectives in understanding the behavior and treatment of this pathology. In the present study we used mathematical computational methods to analyze electrographic patterns of rats in status epilepticus induced by pilocarpine fed with hyperlipidic diet. These rats were analyzed through electrographic parameters using ECoG records and determining: energies of power spectrum in the frequency of delta, theta, alpha and beta waves; Lempel-Ziv complexity; and fractal dimension of phase space. Status epilepticus induced changes in the encephalographic pattern measured by distribution of main brain waves using power spectrum, Lempel-Ziv complexity and fractal dimension of phase space. Hyperlipidic diet in normal rats also changed the values of brain waves energy in power spectrum and Lempel-Ziv complexity; however, fractal dimension of phase space showed no significant differences due to hyperlipidic diet treatment. Despite the hyperlipidic diet reduced brain activity before pilocarpine administration, the nutritional status did not change the encephalographic pattern during status epilepticus. In conclusion, hyperlipidic diet induced slower brain waves and decreased the complexity of brain activity, opposite effects of status epilepticus. Therefore, the mathematical methods were effective to detect brain hyperactivity caused by status epilepticus and reduced brain activity induced by hyperlipidic diet. / O aumento do consumo de dietas hiperlipídicas vem elevando os índices de obesidade e os níveis de colesterol e triglicerídeos de grande parte da população, além de estar relacionado ao desenvolvimento de doenças neurodegenerativas, como a doença de Alzheimer. Por outro lado muitas pesquisas têm comprovado a importância dos lipídeos na estrutura e atividade do cérebro. A epilepsia é uma patologia relacionada à desordem da atividade cerebral, com alto índice de refratariedade a medicamentos convencionais, nesses casos, o consumo de dietas hiperlipídica vem sendo utilizado como uma terapia alternativa. A investigação de possíveis interferências de dietas hiperlipídicas na ELT pode acrescentar novas perspectivas na compreensão do comportamento e tratamento desta condição patológica. Nesse trabalho foram analisados ratos em status epilepticus induzido pela pilocarpina submetidos à dieta hiperlipídica. Esses ratos foram analisados através de parâmetros eletrográficos utilizando os registros de ECoG e determinando as energias do seu espectro de potência nas freqüências das ondas delta, teta, alfa e beta; a complexidade de Lempel-Ziv e a dimensão fractal do espaço de fase. O status epilepticus induziu alterações no padrão encefalográfico mensuradas pela distribuição de energia das principais ondas cerebrais utilizando o espectro de potência, a complexidade de Lempel-Ziv e a dimensão fractal do espaço de fase. A dieta hiperlipídica, em ratos normais, também alterou os valores da energia das ondas cerebrais no espectro de potência e na complexidade de Lempel-Ziv; entretanto, a dimensão fractal do espaço de fase não revelou diferenças significativas devido ao tratamento com a dieta hiperlipídica. Apesar da dieta hiperlipídica ter reduzido a atividade cerebral antes da administração da pilocarpina, a condição nutricional não influenciou o padrão encefalográfico durante o status epilepticus. Em conclusão, a dieta hiperlipídica causou uma desaceleração das ondas cerebrais e diminuição da complexidade da atividade cerebral, efeitos contrários aos do status epilepticus. Portanto, os métodos matemáticos utilizados foram eficientes na detecção da hiperatividade cerebral causada pelo status epilepticus e redução da atividade cerebral induzida pela dieta hiperlipídica.

Orientador: Marcio Alberto Torsoni / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-08-23T02:02:19Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Guimaraes_NicoleCorrea_M.pdf: 2579384 bytes, checksum: 1c61c716c6c09d41088ff284a70b8461 (MD5) Previous issue date: 2012 / Resumo: A obesidade é precursora de co-morbidades como o Diabetes Mellitus tipo 2 e doenças vasculares. Estudos demonstram que a composição da dieta materna durante a gestação pode modular o metabolismo da prole, promovendo um ajuste funcional conhecido como imprint metabólico, predispondo a prole ao ganho de peso e resistência da insulina (RI). A RI está diretamente relacionada com a adiposidade e com o aumento no nível de citocinas pró-inflamatórias no sangue. Estas citocinas são responsáveis pela ativação de serina-quinases que podem promover a redução do sinal intracelular. Considerando que o hipotálamo desempenha importante função no controle da homeostase energética e do metabolismo periférico, a alteração na expressão e ativação de proteínas chave neste tecido pode trazer conseqüências importantes para o organismo. Desta maneira, o presente estudo avaliou proteínas hipotalâmicas e hepáticas que possam ser moduladas pelo uso materno de dieta rica em gordura animal. Para isso foram utilizadas proles de camundongos fêmeas que fizeram uso de dieta rica em gordura (grupo HN) ou dieta padrão (grupo NN) durante o período de gestação e lactação e com idade de 4 e 12 semanas (4S e 12S) de vida. Inicialmente foram avaliados o ganho de peso, massa adiposa, a tolerância a glicose, os níveis séricos de insulina e citocinas pró-inflamatórias, a deposição hepática de gordura por histologia e o conteúdo de triglicérides hepáticos. As alterações metabólicas relacionadas à manutenção da homeostase glicêmica e do balanço energético foram avaliadas pela análise do conteúdo e/ou ativação das proteínas JNK, IKK, NFKB, AKT, IR, IRS1, IRS2, ACC, FAS, AMPK, PEPCK e HSL nos tecidos hepático, hipotalâmico e adiposo utilizando a técnica de Western Blot. A prole das fêmeas tratadas com a dieta especial apresentou maior ganho de peso e massa adiposa epididimal, menor tolerância à glicose, maior deposição hepática de gordura no fígado e maiores níveis de triglicérides hepáticos (4 e 12S), maiores níveis sanguíneos de insulina, TNF?, IL1? (12S). As serina quinases JNK e iKK estavam mais fosforiladas no fígado (4 e 12S) e hipotálamo (4S). A proteína NFKB estava mais presente no grupo HN em ambos os tecidos (4S). A proteína AKT apresentou menor fosforilação após estímulo com insulina no hipotálamo (4S) e fígado do grupo HN, bem como o IR, IRS1 e 2 (12S). A proteína PEPCK foi encontrada em maior quantidade no fígado dos animais HN (12S), A proteína FAS foi encontrada em maiores níveis no fígado dos animais HN (4S), entretanto o inverso foi observado na idade de 12 semanas. A enzima HSL estava menos fosforilada no tecido adiposo do grupo HN (12s). A proteína ACC hepática do grupo HN estava menos fosforilada em seu estado basal nos dois períodos, no hipotálamo a fosforilação da ACC não foi diferente do grupo NN (4s). O grupo HN apresentou menor desfosforilação da AMPK por estímulo de insulina. A partir destes resultados observamos que a nutrição hiperlipídica pré-natal foi capaz de influenciar negativamente a homeostase glicêmica da prole, além de modular as vias lipogênicas e o controle do balanço energético / Abstract: Obesity is a condition that preceeds co-morbidities as type 2 Diabetes Mellitus and vascular diseases. Studies demonstrate that the composition of the maternal diet during gestation can modulate offspring's metabolism, leading to a functional adjustment known as metabolic imprint, which predisposes the offspring to weight gain and insulin resistance (IR). IR is directly related to adiposity and the blood level of pro-inflammatory cytokines. These cytokines are responsible for the activation of serine-kinases that can promote a reduction of the intracellular signal. Considering that the hypothalamus plays an important role on the control of energetic homeostasis and peripheral metabolism, the alteration on the expression and activation of key proteins in this tissue may lead to important consequences to the organism. This way, the present study evaluated hypothalamic and hepatic proteins that can be modulated by the maternal use of animal fat rich diet. For that, offsprings of female mice fed a high fat diet (HN group) or standard diet (NN group) during pregnancy and lactation, at the ages of 4 and 12 weeks old (4W and 12W) were used. Initially weight gain, adipose mass, glucose tolerance, serum levels of insulin and pro-inflammatory cytokines, liver fat depot by histology, and liver triglycerides content were evaluated. The metabolic alterations related to the maintenance of glycemic homeostasis and energy balance were evaluated through the analysis of the expression and/or activation of the proteins JNK, IKK, NFKB, AKT, IR, IRS1, IRS2, ACC, FAS, AMPK, PEPCK and HSL in the liver, hypothalamus and asipose tissue using western blot technique. The offspring of the dams treated with the special diet presented higher weight gain and epididymal adipose mass, lower glucose tolerance, higher hepatic fat deposition and higher levels of liver triglycerides (4 and 12W), higher levels of blood insulin, TNF? and IL1? (12W). The serine-kinases JNK and IKK were more phosphorylated in the liver (4 and 12W) and hypothalamus (4W). The NFKB was found at a higher amount in both tissues (4W). The AKT presented lower phosphorylation after stimulation with insulin in the hypothalamus (4W) and liver of HN group, as the IR, IRS1 and 2 were more expressed (12W). PEPCK was found in higher quantity in the liver of HN animals (12W). FAS were found in higher levels in the liver of HN animals (4W), however the opposite was observed at the age of 12 weeks. The enzyme HSL was less phosphorylated in the adipose of HN group (12W). Hepatic ACC of HN group was less phosphorylated in its basal state at both ages; in the hypothalamus the phosphorylation of ACC was not different of NN group (4W). HN group showed lower dephosphorylation of AMPK with insulin stimulation. By these results we observe that the pre-natal hyperlipidic nutrition was able to influence negatively the glucose homeostasis of the offspring, besides the modulation of the lipogenic pathways and energy balance control / Mestrado / Bioquimica / Mestre em Biologia Funcional e Molecular