Une augmentation au moins transitoire de la ploïdie est un événement fréquent de l'oncogenèse. L'hyperploïdisation déclenche un stress du réticulum endoplasmique (RE) caractérisé par l'hyperphosphorylation du facteur d'initiation eucaryote 2α (eIF2α) qui induit l'exposition consécutive de la calréticuline à la surface cellulaire. La calréticuline exerce un effet « adjuvant » en tant que un signal "mange-moi", pour les cellules dendritiques, entrainant un contrôle immunitaire de la tumeur par les lymphocytes T CD8+. Nous avons étudié la possibilité que l'hyperploïdisation puisse également affecter l'antigénicité des cellules cancéreuses en modifiant l'immunopeptidome. Cependant, la vaccination avec des peptides candidats n’a pas réussi à induire des réponses inhibitrices de la croissance tumorale de cellules hyperploïdes in vivo. Nous concluons donc que l'hyperploïdie augmente principalement l'immunogénicité des cellules cancéreuses en affectant leur adjuvanticité (via l’expression de calréticuline) plutôt que leur antigénicité. Nous montrons de plus que des fibrosarcomes induits par méthylcholanthrène (MCA), développés dans des souris Rag2-/-γc-/- immunodéficientes (mais pas dans des souris sauvages), sont particulièrement hyperploïdes, en corrélation avec une teneur en ADN plus élevée, une augmentation de la surface nucléaire, ainsi que l'hyperphosphorylation de eIF2α,. De telles cellules forment des tumeurs dans les souris Rag2-/-γc-/- (dépourvues de cellules T, B et NK) ainsi que dans les souris Rag2-/- (dépourvues de lymphocytes T et B) sans différence entre les deux souches de souris, suggérant que l'absence de cellules B et T est suffisante pour que ces cellules prolifèrent. Pour mesurer ces paramètres, nous avons développé un outil d'analyse morphométrique applicable à l'immunohistochimie. Cet algorithme identifie et quantifie automatiquement la surface des noyaux et l'intensité de la phosphorylation de eIF2α dans une région d'intérêt périnucléaire. Des analyses comparatives ont validé la précision de cette méthode, qui peut être utilisée pour étudier la ploïdie et le stress du RE dans les cancers in situ. / An at least transient increase of ploidy, usually by whole genome duplication, is a frequent event in oncogenesis. Hyperploidization triggers an endoplasmic reticulum (ER) stress characterized by the hyperphosphorylation of the eukaryotic initiation factor 2α (eIF2α), with leads to the exposure of calreticulin to the cell surface. Calreticulin is acting like an "adjuvant" effect as a "eat me" signal, for dendritic cells, ultimately eliciting immune control by CD8 + T lymphocytes. We investigated the possibility that hyperploidization might also affect the antigenicity of cancer cells by altering the immunopeptidome. However, vaccination with candidate peptides was unable to elicit tumor growth-inhibitory responses against hyperploid cells in vivo. We conclude that hyperploidy increases the immunogenicity of cancer cells mostly through their adjuvanticity (through calreticulin exposure) rather than their antigenicity. We also show that when developed in Rag2 - / - γc - / - immunodeficient mice (but not in WT mice) fibrosarcomas induced by methylcholanthrene (MCA) are particularly hyperploid, correlating with higher DNA content, increased nuclear surface, as well as the hyperphosphorylation of eIF2α. These cells are able to form tumors in Rag2 - / - γc - / - recipients (which lack T, B and NK cells) as well as in Rag2 - / - recipients (which only lack T and B lymphocytes) without any difference between the two strains, suggesting that the absence of B and T cells is enough to allow these cells to grow. To measure these parameters, we developed a morphometric analysis tool that is applicable to immunohistochemistry. This software automatically identifies and quantifies the surface of nuclei and the intensity of eIF2α phosphorylation within a perinuclear region of interest. Comparative analyzes validated the accuracy of this method, which can be used to investigate ploidy and ER stress in cancers in situ.

Transcriptional activation of Major Histocompatability Complex (MHC) I and II molecules by the cytokine interferon gamma (IFN-g) is a key step in cell-mediated immunity against pathogens and tumors. Following IFN-g induction, JAK/STAT signaling triggers activation of MHC genes. Recent evidence suggests suppression of MHC I and II expression on multiple tumor types plays important roles in tumor immunoevasion. One such tumor is malignant melanoma, the leading cause of skin cancer related deaths. Despite awareness of MHC expression defects, the molecular mechanisms by which melanoma cells suppress MHC and escape from immune-mediated destruction remain unknown. Here we analyze dysregulation of the JAK/STAT pathway and its role in suppression of MHC II in melanoma cell lines at the Radial Growth Phase (RGP), the Vertical Growth Phase (VGP) and the Metastatic Phase (MET). RGP and VGP cells express both MHC II and the MHC master regulator, the Class II Transactivator (CIITA). MET cells lack not only MHC II and CIITA, but also both STAT 1 and the STAT 1 coactivator, the Interferon Response Factor (IRF) 1. Our studies have implicated that the suppression of MHCII on the cell surface of metastatic melanoma is due to silencing at the level of STAT1 transcription. Furthermore, we determined that silencing of STAT1 is, in part, due to hemi-methylation of the STAT1 promoter.

Le système immunitaire joue un double rôle dans le cancer : il peut non seulement supprimer la croissance tumorale en détruisant les cellules cancéreuses, mais aussi promouvoir la progression de la tumeur en sélectionnant les cellules tumorales ou en créant un microenvironnement tumoral immunosuppresseur. Notre idée principale est de développer des stratégies pour mieux comprendre l’immunologie du cancer colique.Au cours de ma thèse, je me suis tout d’abord intéressée à une population du système immunitaire : les MDSC (Myeloïd Derived Suppressor Cells). Nous avons exploré des stratégies pour réduire le nombre de ces cellules au cours de la croissance tumorale. Nous avons pu découvrir que de petites doses de 5 fluorouracil sont capables d’induire spécifiquement une mort par apoptose des cellules myéloïdes suppressives. Nous avons ainsi caractérisé un effet immunologique positif nouveau du 5-fluorouracil. Cet effet immunologique contribue à l’effet antitumoral du 5-fluorouracil chez la souris. Dans une deuxième partie nous avons étudié le rôle pronostic des infiltrats immunitaires dans une série de patients présentant un cancer du côlon avec des métastases hépatiques. Nous avons étudié le rôle pronostic des infiltrats en cellules CD8, CD45R0 et Foxp3. Nous avons mis en évidence que la présence d’un fort infiltrat en cellules CD45RO et Foxp3 est un facteur de bon pronostic. L’association des 2 marqueurs permet de définir 3 groupes pronostics et ainsi d’individualiser un groupe de mauvais pronostic ne bénéficiant probablement pas de la chirurgie hépatique. / Immune system plays a dual role in cancer: it can not only suppress tumor growth by destroying cancer cells, but also promote tumor progression by selecting immunoresistant tumor cells or by establishing an immunosuppressive microenvironment. Our main objective is to foster on the context of immune response in colon cancer settingDuring my thesis, I focused on one population of the immunosuppressive cells immune system: MDSC (myeloid derived suppressor cells). In this work, we explored strategies to reduce the number of these cells during tumor growth. We have discovered that small doses of 5 Fluorouracil are able to specifically induce apoptotic death of MDSC. We have characterized a novel positive immunological effect of 5-fluororuracil. This immunological effect contributes to the antitumor effect of 5-fluorouracil in mice. In the second part we investigated the prognostic role of immune infiltrates in a series of colon cancers with liver metastases. We investigated the prognostic role of tumor infiltrates, by CD8, CD45R0 and Foxp3 cells. We found that the presence of a strong infiltrate of tumors by CD45RO and Foxp3 cells is a factor of good prognosis. The combination of the two markers could be used to define three prognostic groups and underline a poor prognosis group which may not benefit of liver surgery.

Les cellules NK sont des lymphocytes de l’immunité innée qui ont un rôle majeur dans le contrôle précoce des infections virales et dans l’immunosurveillance des tumeurs. Cependant, en cas de stimulation chronique, un état d’anergie, où les cellules NK n’exercent plus leur fonction a été mis en évidence. Les mécanismes conduisant à cette perte de fonction demeurent mal caractérisés et s’il s’agit d’une cause ou d’une conséquence de la chronicité n’est pas non plus déterminé. Cibler les cellules NK constitue une perspective thérapeutique de choix mais nécessite une meilleure compréhension de ces aspects. L’objectif de ce travail de thèse s’articule autour de trois points. Premièrement, nous avons généré un modèle tumoral murin sensible aux cellules NK permettant l’étude de la réponse anti-tumorale et l’établissement d’une stimulation chronique. Deuxièmement, l’utilisation de ce modèle a permis d’investiguer les mécanismes conduisant à la perte de fonctionnalité des cellules NK et de tester des stratégies de restauration. Enfin, nous avons mené une étude parallèle, chez l’homme, par analyse d’une cohorte de patients chroniquement infectés par le virus de l’Hépatite B dans le but de déterminer le phénotype des cellules NK et d’identifier les causes conduisant à leur perte de fonction dans ce contexte / NK cells are innate lymphocytes which play a crucial role in the early control of viral infection and in tumor immunosurveillance. However, a state of tolerance, where NK cells are poorly functional, occurs in the context of chronic stimulation. The mechanisms leading to this process remain poorly understood and whether this is a cause, or a consequence of chronicity is unknown. Targeting NK cells appears to be a potent therapeutic strategy but requires further investigation. With the lack of clarity in the field this work had three main objectives. First, we engineered a tumoral mouse model that was strongly immunogenic for NK cells and thus allowed us to study the anti-tumoral response of NK cells and to trigger chronic stimulation. Then, we used this model to investigate the mechanisms driving NK cell loss of function and to test potential therapeutic strategies to reverse this state. Finally, in the context of human chronic infection we analyzed samples from HBV infected patients in order to determine the phenotype, function and signaling capacity of NK cells to identify the drivers of NK cell dysfunction

Les traitements actuels anticancéreux ont une action cytotoxique directe sur les cellules tumorales mais également sur les cellules saines des systèmes immunitaires et hématopoïétiques. De plus, ces traitements ont l’incapacité de stimuler le système immunitaire et de prévenir les récidives. Cependant, certains agents tels que les anthracyclines, la radiothérapie ou encore la thérapie photodynamique ont la capacité d’induire une mort cellulaire dite immunogène. Durant cette modalité, l’exposition à la surface des cellules tumorales mourantes d’une protéine chaperonne du reticulum endoplasmique (RE), la calréticuline (CALR), est une étape essentielle et caractéristique de l’immunogénicité ainsi que la libération d’HMGB1, l’autophagie et la sécrétion d’ATP. Des données issues de la littérature prouvent que les anthracyclines sont également capables d’activer des marqueurs du stress du RE. Notre travail a consisté à étudier les liens moléculaires entre le stress du RE et les marqueurs de la mort cellulaire immunogène. Grâce à un criblage à haut débit, nous avons déterminé que les drogues dites immunogènes activaient la phosphorylation d’eIF2α (eukaryotic initiation factor 2 alpha) et qu’il existait une corrélation forte avec l’exposition de la CALR (R score 0,73 ; p<0,01). De manière surprenante, ces agents échouent à activer la voie de signalisation sous-jacente ainsi que les deux autres voies du stress du RE médiées par ATF6 (activating transcription factor 6) et XBP1s (spliced X-box binding protein 1). Par ailleurs, une anthracycline appelée mitoxantrone inhibe activement les trois voies du stress du RE en co-traitement avec un inducteur du stress du RE et inhibiteur de la N-glycosylation: la tunicamycine. Ces données in vitro ont également été validées dans un modèle in vivo de souris immunodéficientes xénogreffées. De plus, grâce à un algorithme reliant les propriétés physico-chimiques des drogues anti-cancéreuses avec leurs capacités à induire les marqueurs de mort cellulaire immunogène suivants: P-eIF2α, CALR, HMGB1, granules de stress et autophagie, un score prédictif d’immunogénicité a pu être déterminé. Nous devrons déterminer dans le futur comment utiliser ce score comme marqueur prédictif d’une réponse immunogène au cours des traitements cliniques. / Conventional anticancer chemotherapies display a high degree of toxicity with certain specificity for tumor cells. However most of these approaches fail to activate immune system-related bystander effects and thus do often fail to prevent from recurrence. Despite these premises, certain anticancer treatments (including anthracycline-based chemotherapy, radiotherapy and photodynamic therapy) have the ability to induce an immunogenic cell death (ICD) modality. The exposure of calreticulin (CALR) during the course of ICD is quintessential for the transfer of tumor antigen from dying tumors to dendritic cells of the immune system as well as translocation of high mobility group box 1 (HMGB1), autophagy and ATP secretion. Previous studies have shown that certain anticancer agents including anthracylins are able to activate markers of endoplasmic reticulum stress (ER stress). Here we investigated the molecular mechanisms that link ER stress responses with hallmarks of ICD. In a drug screening approach, we showed that ICD-inducing drugs triggered the phosphorylation of the eukaryotic initiation factor 2 alpha (P-eIF2α) and that this correlated with CALR exposure (R score 0.73, p<0.01). Surprisingly though the agents failed to induce downstream ER stress pathways including the transcriptional activation of activating transcription factor 4 (ATF4), the alternative splicing of X-box binding protein 1 (XBP1s) mRNA and the proteolytic cleavage of activating transcription factor 6 (ATF6). In addition, we found that mitoxantrone actively inhibited all three arms of the unfolded protein response, when co-administered with the inhibitor of N-linked glycosylation tunicamycin, whereas tunicamycin alone triggered all arms of ER-stress. These findings were validated in vivo in immunodeficient animals xenografted with biosensors for ER-stress responses. Moreover, using a machine learning approach that integrates physicochemical properties of oncologic drugs with their ability to elicit immunogenic hallmarks including the phosphorylation of eIF2α, the exposure of CALR, the translocation of HMGB1, the formation of stress granules and the induction of autophagy we established an in silico approach for ICD prediction. For the future, we further aim to investigate the possibility to use these score comprising P-eIF2α and its downstream consequences as biomarker for immunogenic responses during anticancer treatment in patients.

Le chondrosarcome (CHS) est caractérisé par une grande chimio et radiorésistance ; il y a un besoin urgent de nouvelles stratégies thérapeutiques pour cette tumeur. Parmi celles-ci, certaines approches d'immunothérapie pourraient être d'un grand intérêt. Nous étudions actuellement l'implication du système immunitaire dans la progression du CHS et la réponse thérapeutique à la fois sur des échantillons humains et dans le modèle de chondrosarcome de rat (SRC).Dans le CHS humain et de rat, des infiltrats immunitaires composés de lymphocytes et macrophages ont été identifiés dans la zone péritumorale. L’infiltration immunitaire est en corrélation avec l’évolution de la tumeur (grade, envahissement et taille). L'expression de PD1 et PDL1 ont été détectée dans les infiltrats immunitaires et cellules tumorales du CHS chez l’homme et le rat. Le niveau d'expression PD-L1 en corrélation avec la survie des patients et le taux de rechute. Dans le model SRC, la déplétion sélective de lymphocytes T a entrainé une accélération de la progression tumorale, tandis que la déplétion de macrophages l’a ralenti. Les splénocytes isolés de rats porteurs de CHS ont montré une cytotoxicité spécifique dirigée contre les cellules de chondrosarcome (27%), qui a diminué de manière significative avec des rats appauvrie en CD3 (11%). La voie de signalisation PI3K/mTOR ne peut pas être associée à une immunothérapie car elle induit une action immunosuppressive in vivo.L'environnement immunitaire contribue à la progression du CHS à la fois chez l’homme et chez le rat, ce qui suggère que une approche immunomodulatrice avec des anticorps bloquant PDL1 pourrait être testée pour le CHS / Chondrosarcoma is highly resistant to chemotherapy and radiation and there is an urgent need in developing new therapeutic strategies for this malignancy; among these, some immunotherapy approaches could be of great interest. We are currently investigating the immune system implication in chondrosarcoma progression and therapeutic response both on human samples and in rat chondrosarcoma model (SRC). In human and rat chondrosarcoma, immune infiltrates composed of lymphocytes and macrophages were identified in the peritumoral area. Immune infiltrates composition was found correlated with tumors characteristics and evolution (grade, invasiveness and size). Expression of PD-1 and PD-L1 was detected in CHS immune infiltrates, both in human and rat (and on tumor cells). PD-L1 expression level correlated with patients survival and relapse rate. In SRC, T lymphocytes depletion resulted in an accelerated tumor progression, while CD163+ macrophages depletion slowed down tumor progression. Splenocytes isolated from CHS bearing SRC showed a specific cytotoxicity directed against chondrosarcoma cells (27%), which significantly decreased in CD3 depleted SRC (11%). The immune environment contributes to CHS progression in both human and animal models, this associated with expression of immune checkpoint PD1/PDL1 suggest that immunomodulatory approaches with PD-L1 blocking antibody could be applied in CHS; this approach is currently being tested in SRC

Le cancer du sein est une maladie impactant le système immunitaire dont le rôle évolue au cours de la tumorigénèse, allant de la détection et l'élimination des cellules transformées (immunosurveillance) à la promotion du développement tumoral (immunosubversion). Les efforts déployés pour définir de nouvelles stratégies thérapeutiques ont révélé que rétablir l'immunité anti-tumorale chez les patientes permettrait d'améliorer leur pronostic. Durant ma thèse, nous avons mis en évidence l'existence de signaux activateurs et inhibateurs des pDC dans les cancers du sein, qui confèrent aux pDC un rôle dans l'immunosurveillance et dans l'échappement immunitaire du cancer du sein respectivement. Nous avons ainsi montré que le TGF-beta et le TNF-alpha sont impliqués dans l'inhibition fonctionnelle des TApDC en réprimant l'expression et l'activation d'IRF-7. Dans un second temps, nous avons montré i) la présence de complexes [ADN-LL37] produits par les neutrophiles dans les tumeurs et capables d'induire la production d'IFN-alpha par les pDC, ii) l'expression des gènes associés aux IFN-I dans les tumeurs de sein et iii) un rôle majeur de la voie des IFN-I dans l'immunosurveillance des tumeurs mammaires chez la souris. De plus, des données préliminaires chez la souris suggèrent que les pDC participent à l'immunosurveillance anti-tumorale in vivo. Les travaux présentés dans ce manuscrit apportent de nouvelles données sur le rôle des pDC dans l'immunosurveillance des cancers du sein et ouvrent sur de nouvelles stratégies d'immunothérapie anti-tumorale ciblant les pDC / Breast cancer are disease impacting immune system whose play role during tumorigenesis, to detect and eliminate malign cells (immunosurveillance) or promote tumoral development (immunosubversion). Efforts to define new therapeutic strategies revealed that restoring anti-tumor immunity in patients would improve their prognosis. During my thesis, first, we demonstrated the existence of stimulatory and inhibitory signals of pDCs in the breast, which give the pDCs a role in immunosurveillance and immune escape of breast cancer, respectively. We showed that TGF-beta and TNF-alpha are involved in the functional inhibition of TApDC repressing IRF-7 expression and activation. Secondly, we showed i) the presence of [DNA LL37] complex produced by neutrophils in tumors that can induce the production of IFN-alpha by pDCs, ii) the expression of type I IFN associated genes in breast tumors and iii) a major role of IFN-I pathway in immunosurveillance of mammary tumors in mice. In addition, in mice, preliminary data suggest that pDC could play a role in anti-tumor immunosurveillance in vivo. The work presented in this thesis provide new data on the role of pDCs in immunosurveillance of breast cancers, and open new anti-tumor immunotherapy strategies targeting pDCs

Understanding the impact of epigenetic mechanisms on tumorigenesis is essential, as epigenetic alterations are associated with tumor initiation and progression. Because epigenetic changes are reversible, they are potential targets for cancer therapy. Nucleosome Remodeling Factor (NURF) is a chromatin-remodeling complex that regulates gene expression by changing nucleosome positioning along the DNA sequence. Previous studies have shown a role for NURF in embryonic development as well as regulating genes involved in tumor progression. In this work we investigated the impact of eliminating NURF function in tumorigenesis in vivo. BALB/c mice challenged with syngeneic 67NR breast cancer cell lines, injected into the mammary fat pad, lacking NURF, due to knockdown of its essential subunits Bptf, showed reduction in tumor growth comparing to control tumors. The observed reduction in tumor growth was abrogated in immunodeficient mice lacking a functional immune system. Bptf KD and control 67NR cells grew at similar rates in vitro. Similar findings were observed in our lab using 66cl4 breast cancer cell lines. Using immunofluorescence staining, no significant difference in CD8+, CD4+, NK and MDSC cells infiltrations into the tumor microenvironment was observed in 66cl4 tumors. Preliminary results from 67NR tumors suggested more CD4+ and CD8+ cells. Gene expression profile of tumor tissues from BALB/c mice injected with 67NR and 66cl4 cell lines showed enrichment of genes associated with immune response. Our findings suggested a role of the immune system in targeting tumor cells lacking Bptf in vivo.

Activation of immunity to self-antigens is the goal in cancer immunotherapy, whereas blocking such responses is the goal in autoimmune disease. Thus, it is not surprising that investigation into cancer immunotherapy might also produce insights for the treatment of autoimmune disease. Heat shock protein, gp96, based therapies lead to the robust activation of CD8+ cytotoxic T cells that can slow tumor growth in 60-70% of mice, but only lead to the elimination of tumors in 30-40% of animals. The primary goal of the current studies was to understand why vaccination with a secreted gp96 vaccine was not efficacious in a larger proportion of animals, and identify combination therapies that enhanced the anti-tumor activity of gp96-Ig vaccination. It was found that in mice bearing established tumors, some mice responded well to vaccination with gp96-Ig, and that the induction of CD8+ T cells was found to correlate with tumor rejection; indicating that the proportion of mice that failed to reject tumors had established mechanisms of tumor-mediated suppression of anti-tumor immunity. The mechanism of this suppression was found to differ between various tumor models, so combination therapy sought to amplify CD8+ T cell responses directly, rather than by indirectly inhibiting suppressive factors induced by established tumors. It was found that antibody-based therapies leading to the stimulation of TNFRSF25, a powerful T cell co-stimulatory receptor, caused synergistic expansion of tumor-specific T cells when given in combination with gp96-Ig vaccination and led to enhanced rejection of multiple tumor types. Interestingly, TNFRSF25 agonistic antibodies were also found to directly stimulate the proliferation of natural CD4+FoxP3+ regulatory T cells. This activity was found to be beneficial in the prevention of allergic lung inflammation when administered prior to antigen challenge. These studies have therefore identified the conditions required for successful tumor elimination following gp96-Ig vaccination, and discovered that a TNFRSF25 agonistic antibody may be used to enhance anti-tumor immunity induced by gp96-Ig. These studies have also identified TNFRSF25 stimulation as the most powerful, and physiologically relevant, method to selectively induce Treg proliferation in vivo ever discovered, with important consequences for the treatment of autoimmune inflammation.

Le système immunitaire joue un double rôle dans le cancer: il peut non seulement supprimer la croissance tumorale en détruisant les cellules cancéreuses, mais aussi promouvoir la progression de la tumeur en sélectionnant les cellules tumorales ou en créant un microenvironnement tumoral immunosuppresseur. Au cours de ma thèse, je me suis intéressée à deux populations du système immunitaire : les MDSC (Myeloïd Derived Suppressor Cells) et les lymphocytes Th17. Dans ce travail, nous avons exploré les mécanismes impliqués dans l’activation et dans les fonctions suppressives de ces deux populations cellulaires au cours de la croissance tumorale. Tout d’abord, nous avons montré que les cellules tumorales activaient les MDSC en libérant des exosomes exprimant HSP72 à leur surface. HSP72 à la surface des exosomes permet l’activation de STAT3 via la voie de signalisation TLR2/Myd88 dans les MDSC et favorise leur fonction suppressive. Le facteur de transcription STAT3 joue aussi un rôle fondamental dans la différenciation des lymphocytes Th17. Le rôle des lymphocytes Th17 est controversé dans la croissance tumorale. Nous avons découvert que les lymphocytes Th17 exprimaient les ectonucléotidases CD39 et CD73 soutenant ainsi leur fonction suppressive. L'expression des ectonucléotidases est dépendante de l’activation de STAT3 par l’IL-6 et de l’inhibition de Gfi-1 par le TGFβ lors de leur différenciation. / Immune system plays a dual role in cancer: it can not only suppress tumor growth by destroying cancer cells, but also promote tumor progression by selecting immunoresistant tumor cells or by establishing an immunosuppressive microenvironment.During my thesis, I focused on two populations of the immune system: MDSC (myeloid derived suppressor cells) and Th17 lymphocytes. In this work, we explored the mechanisms involved in the activation of suppressive functions of these two cell populations during tumor growth. First, we showed that tumor cells activated MDSC by releasing exosomes that express HSP72 on their surface. HSP72 on exosomes surface induces STAT3 activation via Myd88/TLR2 signaling pathway in MDSC and promotes their suppressive function. The transcription factor STAT3 also plays a fundamental role in Th17 cells differentiation. The role of Th17 cells is controversial in tumor growth. We reported that Th17 cells express CD39 and CD73 ectonucleotidases and thereby supporting their suppressive function. The expression of ectonucleotidases is dependent on the activation of STAT3 by IL-6 and inhibition of Gfi-1 by TGFβ during their differentiation.