A família Orchidaceae apresenta imensa diversidade taxonômica, bioquímica, fisiológica e genética. Por essa razão não existe um modelo único que possibilite o sucesso na propagação in vitro para todas as suas espécies e variedades. Assim, esse trabalho teve como objetivo estudar aspectos envolvidos com a propagação, o desenvolvimento inicial in vitro e a aclimatização de Brassavola martiana Lindl., espécie ocorrente no estado do Tocantins. Testou-se os efeitos dos meios de cultura de Knudson C [KC], de Vacin e Went [VW] e de Murashige e Skoog nas concentrações de 100 e 50% de seus macronutrientes [MS e ½MS] na germinação e desenvolvimento inicial in vitro. Analisou-se também a influência da idade das sementes no processo germinativo. Foram avaliados os efeitos de diferentes concentrações de sacarose (0%, 1%, 2%, 3%, 4%, 5% e 6%) bem como do ácido naftalenoacético (ANA) e da benziladenina (BA) em combinações de 0; 0,57; e 2,28 μM na multiplicação e desenvolvimento de plantas, em experimentos separados. Verificou-se também a possibilidade de se multiplicar a espécie por meio de segmentos caulinares estiolados. Por fim, foi desenvolvido um protocolo para aclimatização de B. martiana utilizando-se substratos comerciais. O meio ½MS foi o mais promissor para a germinação de B. martiana, enquanto que o KC foi o melhor para o desenvolvimento dos protocormos e formação de novas plantas. Para a obtenção de uma germinabilidade superior a 60% recomenda-se utilizar sementes com pelo menos 7 meses de idade. A adição de 3% de sacarose ao meio de cultura favoreceu a multiplicação e desenvolvimento in vitro. O uso de concentrações iguais de ANA e BA (0,57 μM) favoreceu o desenvolvimento tanto da parte aérea quanto das raízes. A utilização de segmentos caulinares estiolados foi eficaz para a propagação de B. martiana. Para a aclimatização, as plantas de B. martiana devem inicialmente serem transferidas para recipientes comunitários contendo o substrato Bioplant e após oito semanas transplantadas para vasos individuais contendo o substrato Ouro Negro e cultivados durante 90 dias. A porcentagem de sobrevivência das plantas foi considerada satisfatória. / The Orchidaceae family presents immense taxonomic, biochemical, physiological and genetic diversity. For this reason, there is no single model that allows the success of in vitro propagation for all species and varieties. Thus, the objective of this work was to study aspects involved in the propagation, initial in vitro development and acclimatization of Brassavola martiana Lindl., A species occurring in the state of Tocantins. The effects of the cultivation media of Knudson C [KC], Vacin and Went [VW] and Murashige and Skoog at the concentrations of 100 and 50% of their macronutrients [MS and ½MS] on initial in vitro germination and development. The influence of seed age on the germination process was also analyzed. The effects of different concentrations of sucrose (0%, 1%, 2%, 3%, 4%, 5% and 6%) as well as naphthaleneacetic acid (ANA) and benzyladenine (BA) were evaluated in combinations of 0; 0.57; and 2.28 μM in plant multiplication and development, in separate experiments. It was also verified the possibility of multiplying the species by means of stretched cauline segments. Finally, a protocol for the acclimatization of B. martiana was developed using commercial substrates. The ½MS medium was the most promising for the germination of B. martiana, while the KC was the best for the development of protocormos and formation of new plants. To obtain germinability higher than 60%, it is recommended to use seeds at least 7 months old. The addition of 3% sucrose to the culture medium favored multiplication and development in vitro. The use of equal concentrations of ANA and BA (0.57 μM) favored the development of both shoot and roots. The use of styrofoam segments was effective for the propagation of B. martiana. For acclimatization, B. martiana plants should initially be transferred to community vessels containing the Bioplant substrate and after eight weeks transplanted into individual pots containing the Ouro Negro substrate and cultured for 90 days. The percentage of plant survival was considered satisfactory.

Made available in DSpace on 2015-03-26T13:36:35Z (GMT). No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 3012323 bytes, checksum: 96e79a49116ebbc5c759193ecd754c2b (MD5) Previous issue date: 2006-02-24 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / The plants propagated in vitro are usually affected by stress conditions, which can lead to the hyperhydricity development. In this sense, this study was carried out to investigate the influence of the gelling agents, cytokinin-6-benzylaminopurine (BAP) and type of the flask sealing upon the induction of hyperhydricity in grapevine and strawberry plants. So, strawberry plants Dover and Burkley and the rootstock of the grapevine 'VR043 - 43', kept in vitro in growth room at 25 ± 2 ºC, under a 16-hour photoperiod and irradiance 36 µmol m-2 s-1. Strawberry explants were cultivated in medium containing salts and vitamins of MS, 30 g L-1 sucrose, 100 mg L-1 myo-inositol added with Agar (6.5 g L-1) or Phytagel® (2.5 g L-1) and BAP at different concentrations (0.5; 1.0; 2.0 and 3.0 mg L-1). Some grapevine internodes were transferred to MS/2 or to Q & L medium, with the same amounts of sucrose and myo-inositol added with Agar (6.5 g L-1) or Phytagel® (2,5 g L-1) and BAP (1.0 or 2.0 mg L-1). The ethylene levels were measured inside the flasks at 5, 10, 20, and 30 days under culture for strawberry plant, as well as at 3, 7, 14, 20, 30 and 40 days for grapevine. After 35 days, the following analyses were accomplished: biochemistry (SOD, CAT, POD, isozymes, lipid peroxidation, chlorophyll content), structural (light microscopy and scanning electron microscopy), besides the morphologic characteristics of the hyperhydricity. To study the influence of the sealing upon the development of hyperhydricity, the grapevine and strawberry plants were transferred to flasks containing both inductor and noninductor medium of hyperhydricity. The flasks were sealed with either rigid polypropylene lid with and without membrane permeable to gaseous exchanges or two layers of plastic PVC film. The ethylene levels were measured at 7, 20 and 40 days under culture. After 35 days, the following were analyzed: fresh and dry matter of the buds, lipid peroxidation, enzymatic systems MDH, ADH and POD, electrolyte leakage, and ultra-structural characteristics (scanning). The BAP addition to the culture medium induced the oxidative stress, which caused changes in the physiologic state of both strawberry and grapevine plants, that were characterized by increase in either the activity of antioxidant enzymes and the peroxidation of lipids, alterations at cellular level, malformations in stomata and epidermal cells, besides increased production ethylene inside the culture flasks. The sealing type affected the internal ambient of the flasks, therefore the hyperhydricity development. In the flasks sealed with permeable membrane, even in hyperhydricity inducing medium, no morphologic characteristics of such a phenomenon were observed, although an increase in both peroxidase activity and electrolyte leakage were observed in the grapevine plants submitted to this treatment. The sealing of the flasks with rigid polypropylene lid or with PVC film, in presence of BAP, promoted higher hyperhydricity index, therefore confirming that the sealing type of the flasks associated to the components of the medium and culture conditions are related to the appearance of this physiological disorder in plants grown in vitro. / Plantas propagadas in vitro são freqüentemente afetadas por condições de estresse que podem levar ao desenvolvimento de hiperidricidade. Nesse sentido, o presente trabalho teve como objetivos investigar a influência de agentes gelificantes, da citocinina 6-benzilaminopurina (BAP) e do tipo de vedação dos frascos sobre a indução de hiperidricidade em videira e morangueiro. Para tal, foram utilizadas plantas de morangueiros Dover e Burkley e do porta-enxerto de videira VR043 43 , mantidas in vitro em sala de crescimento a 25 ± 2 ºC, sob fotoperíodo de 16 h e irradiância 36 mmol m-2 s-1. Explantes de morangueiro foram cultivados em meio contendo sais e vitaminas de MS, 30 g L-1 de sacarose, 100 mg L-1 de inositol, acrescido de Ágar (6,5 g L-1) ou Phytagel® (2,5 g L-1) e BAP em diferentes concentrações (0,5; 1,0; 2,0 e 3,0 mg L-1). Segmentos de entrenós de videira foram transferidos para meio MS meia força ou para meio Q & L, com as mesmas quantidades de sacarose e mioinositol, acrescidos de Ágar (6,5 g L-1) ou Phytagel® (2,5 g L-1) e BAP (1,0 ou 2,0 mg L-1). Foram mensurados os níveis de etileno no interior dos frascos aos 5, 10, 20, e 30 dias de cultivo, para morangueiro, e aos 3, 7, 14, 20, 30 e 40 dias, para videira. Após 35 dias, foram realizadas analisadas bioquímicas (SOD, CAT, POD, isoenzimas, peroxidação de lipídios, teor de clorofila), estruturais (microscopia fotônica e eletrônica de varredura), além da análise das caracteristicas morfológicas da hiperidricidade. Para estudar a influência do tipo de vedação no desenvolvimento de hiperidricidade, plantas de videira e morangueiro foram transferidas para frascos contendo meio indutor e não indutor de hiperidricidade. Os frascos foram vedados com tampa rígida de polipropileno, com e sem membrana permeável a trocas gasosas ou duas camadas de filme pástico de PVC. Foram mensurados os níveis de etileno aos 7, 20 e 40 dias de cultivo e, após 35 dias, foram analisados massas fresca e seca dos brotos, peroxidação de lipídios, sistemas enzimáticos (MDH, ADH e POD), extravasamento de solutos e características ultraestruturais. A adição de BAP no meio de cultivo induziu ao estresse oxidativo que, por sua vez, causou mudanças no estado fisiológico de plantas de morangueiro e videira, caracterizadas por aumento da atividade de enzimas antioxidantes e da peroxidação de lipídios, alterações em nível celular, malformações de estômatos e de células epidérmicas, além de aumento na produção de etileno no interior dos frascos de cultivo. O tipo de vedação utilizado influenciou o ambiente interno dos frascos e, conseqüentemente, o desenvolvimento de hiperidricidade. Nos frascos vedados com membrana permeável, mesmo em meio indutor de hiperidricidade, não foram observadas características morfológicas desse fenômeno, embora tenha sido observado aumento da atividade de peroxidases e de extravasamento de eletrólitos em plantas de videira, submetidas a este tratamento. A vedação de frascos com tampa rígida de polipropileno ou com filme de PVC, em presença de BAP, promoveram maior índice de hiperidricidade, confirmando que o tipo de vedação dos frascos, em combinação com componentes do meio e com condições de cultivo, estão relacionados ao surgimento dessa desordem fisiológica em plantas cultivadas in vitro.

Made available in DSpace on 2015-03-26T13:36:41Z (GMT). No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 2068629 bytes, checksum: eb96e9d8515f536c1ff0792a31972219 (MD5) Previous issue date: 2010-02-23 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / In this work, the propagation in vitro of Anthurium andraeanum cv. Eidibel through somatic embryogenesis was investigated, evaluating the induction of the embryogenic cultures (Experiment I); pre-maturation of the somatic embryos (Experiment II); and maturation of the somatic embryos with subsequent regeneration of the plants (Experiment III). In Experiment I, the subdivision of plants of anturio established in vitro was used, to obtain the explant sources. Analyzed in DIC with factorial 5 x 5 x 5, with five explant types (whole leaves were cut across the midrib of leaves; petioles; stem segments with one bud; and root segment without the apex radicular; each explant was cut into pieces of about 1.0 cm); five auxins (Picloram, ANA, AIB, 2.4-D and Picloram) in five concentrations (0.0; 2.5; 5.0; 7.5 and 10.0 μM) and five additional witness, in other words, each explant source added to the treatment without auxin. The repetition was composed by five Petri dishes (90 x 15 mm), containing 25 mL of Pierik medium, and each unit experimental nine explant/placa. Cultures were maintained in growth room, at 25 ± 2 ºC, in the darkness. After 60 days of cultivation, it was evaluated the presence of embryogenic cultures, shoots, roots and mass of the produced callus. The production of the first callus was observed in petioles and stem explants, and its production was in average containing 7.5 μM ANA and 10.0 μM Picloram. In the concentrations of 10.0 μM, there was no different statistics among the treatments with the auxins ANA, 2.4-D and Picloram, being superior to the others. For the production of shoots, the explant with the largest average was the stem segments, in average without the auxins. The proliferation of roots was observed in stem segments and roots explants, mainly in average with AIB. Histochemistry analysis were determined, through the double stained with acetocarmine and Evan's blue and lugol test. However, it was observed in histological cuts that the callus produced in Pierik medium containing 10.0 μM of ANA presented well developed embryos, with protoderm and procambium, with polarization signs. For the proliferation of the embryogenic cultures, the subdivision of the selected callus was accomplished, and inoculated in Petri dishes with Pierik medium containing 10.0 μM of ANA, in five successive subcultures, with 60 days each. In the experiment II, the callus was inoculated, produced in the proliferation of the embryogenic cultures, with about 90 mg weight, in Erlenmeyers of 125 mL, containing 25 mL of average liquid , Pierik and AA2, with different concentrations of 2.4-D (0.00; 4.52; 9.05 μM) and kinetin, (0.00; 0.47; 2.32 μM), analyzed in DIC with factorial 2 x 3 x 3, maintained at growth room at 25 ± 2 ºC, in the darkness, staying under orbital agitation of 100 rpm. After 45 days of cultivation, it was evaluated a mass of the embryogenic callus; production of somatic embryos; production of secondary somatic embryos; oxidation percentage; coloration, texture of the embryogenic callus and development of the somatic embryos produced. The production of somatic embryos was better in Pierik medium with 0.47 μM of kinetin, being observed a smaller production of secondary somatic embryos, smaller oxidation percentage, with friable texture of the callus, being one of the treatments with larger development of the embryos, proven for the histological cuts, in which it was observed embryos in the globular stadium, with polarization signs, even mature embryos, with the presence of primary leaf and meristematic zone. In the Experiment III, the callus produced were inoculated in Erlenmeyers containing 25 mL of liquid and semi-solid medium, Pierik and AA2, suplemented with the kinetin concentrations (0.0; 1.16; 2.32; 4.64 μM), analyzed in DIC with factorial 2 x 2 x 4. Cultures were maintained under a 16 hours of light, photoperiod at 36 μmol m-2 s-1 provided by cool white fluorescent lamps at 25 ± 2 ºC. The liquid medium staying under orbital agitation of 100 rpm. After 45 days of cultivation, it was evaluated the number of callus with mature embryos; percentage of conversion of plants; oxidation percentage; and number of embryos with complete maturation. Pierik medium containing 2.32 μM of kinetin is recommended, in which, it was much better to the number of embryogenic callus with mature embryos, number of embryos with complete maturation and for the best conversion in plants. The plants were acclimatized ex vitro in the bench of the laboratory and transferred, in the end of two months to a greenhouse. The present study evidenced that the induction and proliferation of embryogenic cultures starting from stem segmentswere dependent on the type and concentration of the auxins. For the pre-maturation and maturation of the somatic embryos, it is necessary the retreat or the reduction of the auxin in the medium, adding ideal concentrations of cytokinins, and obtaining high conversion of the somatic embryos in plants, in the final process. / O presente trabalho teve como objetivo estabelecer a propagação in vitro de Anthurium andraeanum cv. Eidibel via embriogênese somática, avaliando a indução das culturas embriogênicas (Experimento I); pré-maturação dos embriões somáticos (Experimento II); e maturação dos embriões somáticos e posterior regeneração das plantas (Experimento III). No experimento I, adotou-se a subdivisão de plantas de antúrio estabelecidas in vitro, para a obtenção das fontes de explante. Utilizou-se o delineamento inteiramente casualizado (DIC), em disposição fatorial 53, representados por cinco tipos de explantes (folhas inteiras e seccionadas ao meio; pecíolos; segmentos nodais com uma gema; e segmento de raiz sem o ápice radicular; cada explante com ~ 1,0 cm); cinco auxinas (AIA, ANA, AIB, 2,4-D e Picloram) em cinco concentrações (0,0; 2,5; 5,0; 7,5 e 10 μM) e cinco testemunhas adicionais, ou seja, cada fonte de explante adicionada ao tratamento sem auxina. A repetição foi composta por cinco placas de Petri (90 x 15 mm), contendo 25 mL de meio Pierik, e cada unidade experimental nove explantes/placa, mantidas em sala de crescimento, a 25 ± 2 ºC, no escuro. Após 60 dias de cultivo, avaliou-se a presença de calos embriogênicos, brotos, raízes e massa freca dos calos produzidos. A produção dos primeiros calos foi observada em explantes de pecíolo e segmento nodal, e a sua produção ocorreu, principalmente, nos meios acrescidos de ANA e Picloram, nas concentrações de 7,5 e 10,0 μM, respectivamente. Em 10,0 μM, não houve diferença estatística entre os tratamentos com as auxinas ANA, 2,4-D e Picloram, sendo superiores aos demais. Para a produção de brotos, o explante com a maior média foi o segmento nodal, em meio sem a adição de auxina. Observaram-se a proliferação de raízes em explantes de segmento nodal e radicular, principalmente em meio suplementado com AIB. A partir de análise histoquímica, determinaram-se, por meio da dupla coloração com carmim acético e azul de Evans e teste de lugol, características embriogênicas dos calos. No entanto, observou-se em cortes histológicos que os calos produzidos em meio Pierik acrescido de 10,0 μM de ANA apresentaram embriões bem desenvolvidos, com presença de procâmbio e protoderme, demostrando sinais de polarização. Para a proliferação das culturas embriogênicas, foi adotada a subdivisão dos calos selecionados, e inoculados em placas de Petri com meio de cultura Pierik acrescido de 10,0 μM de ANA, em cinco subcultivos sucessivos, com 60 dias cada. No experimento II, foram inoculados os calos produzidos na fase de proliferação, com cerca de 90 mg, em Erlenmeyers de 125 mL, contendo 25 mL de meio de cultura líquido, Pierik e AA2,com diferentes concentrações de 2,4-D (0,00; 4,52; 9,05 μM) e cinetina, (0,00; 0,47; 2,32 μM), analisados em DIC com fatorial 2 x 3 x 3, mantidos em sala de crescimento a 25 ± 2 ºC, no escuro, permanecendo sob agitação orbital de 100 rpm. Avaliadas aos 45 dias de cultivo, quanto a: massa dos calos embriogênicos; produção de embriões somáticos; produção de embriogênese somática secundária; porcentagem de oxidação; coloração, textura dos calos embriogênicos e desenvolvimento dos embriões somáticos produzidos. A produção de embriões somáticos foi superior no meio Pierik acrescido de 0,47 μM de cinetina, observando-se a menor produção de embriogênese somática secundaria, menor porcentagem de oxidação, com textura friável dos calos, sendo um dos tratamentos com maior desenvolvimento dos embriões, comprovado pelos cortes histológicos, no qual observaram embriões no estádio globular, com sinais de polarização, até embriões maturados, com a presença de folha primária e zona meristemática. No Experimento III, os calos produzidos na fase de pré-maturação foram inoculados, em Erlenmeyers contendo 25 mL de meio líquido e semi-sólido, Pierik e AA2, suplementados com as concentrações de cinetina (0,0; 1,16; 2,32; 4,64 μM), formando um DIC com fatorial 2 x 2 x 4, mantidos em sala de crescimento, a 25 ± 2 ºC, sob fotoperíodo de 16 horas, irradiância luminosa de 36 μmol m-2 s-1. Os meios líquidos permaneceram sob agitação orbital de 100 rpm. Avaliou-se aos 45 dias de cultivo quanto ao número de calos com embriões maturados; porcentagem de conversão em plantas; porcentagem de oxidação; e número de embriões com maturação completa. Recomenda-se o meio Pierik suplementado com 2,32 μM de cinetina, no qual, foi superior para o número de calos embriogênicos com embriões maturados, número de embriões com maturação completa e principalmente pela melhor conversão em plantas. As plantas produzidas foram aclimatizadas ex vitro na bancada do laboratório e transferidas, no final de dois meses, para casa de vegetação. O presente estudo evidenciou que a indução e proliferação de calos embriogênicos a partir de segmentos nodais de antúrio foi dependente do tipo e da concentração das auxinas. Para as fases de pré-maturação e maturação dos embriões somáticos, é necessária a retirada ou a redução da auxina no meio de cultura, adicionando concentrações ideais de citocinina para cada fase, e assim, obtendo máxima conversão dos embriões somáticos em plantas, no final do processo.

The present work is a study of two techniques for multiplication and conservation of Fevillea trilobata L., and an evaluation of popular knowledge of the related plant. For the multiplication study, techniques were used for propagation ´in vitro´and cutting. For the evaluation of popular knowledge of gindiroba was applied a semi-structured questionnaire to sellers who sell seeds and / or natural products in the Municipal Market Albano Franco and in fair-free in Mosqueiro Beach, both located in Aracaju / SE, beyond some sellers from the municipality of Carmópolis / SE. Plant-matrices of gindiroba, sources of explants for micropropagation experiments, were grown in the mini-garden of the Department of Biology / UFS, from seeds provided by EMBRAPA-CPATC. ´In vitro´propagation, the culture medium used was Murashige & Skoog (MS), supplemented with vitamins of Morel and Wetmore, 3% sucrose, 0.01% casein and myo-inositol, and 0.6% agar plus the BAP (0, 1, 2, 4 and 6 mgL-1), pH adjusted to 5.8, temperature 27 º ± 1 º C, photoperiod of 12 hours and irradiance of 45μmol.m-2.s-1 with cool white light. The cutting experiment was conducted in the greenhouse of the Department of Biology / UFS. For this technique had been developed two experiments. The first one with medium plant cuttings in juvenile phase and the second with cuttings of plants in reproductive phase. The treatments were formed by the combination type of cutting (stem and stem + leaf) with concentration of AIB (0, 1 and 2mg L-1) in substratum sand + clay soil (2:1). The results were submitted to analysis of variance, where significant interactions were analyzed by the Tukey test at 5% level of probability. The data were analyzed by the software GraphPad Prism, version 4. According to the results of the in vitro propagation, callus formation was higher in seedlings treated with 1 mg/L-1 BAP. For the variable of sprouting of leaves, the treatment 2 showed a statistically significant difference. The cutting experiment 1, cutting + leaf without immersion in AIB showed higher formation of new roots and leaves. For cuttings in reproductive stage, cutting + leaf immersed in 1 mg L-1 of AIB was more effective in the formation of roots and leaves. Cuttings in juvenile and reproductive phase of treatments 4, 5 and 6 had presented dehydration, although some of them have given roots and small leaves. Stakes younger and without immersion in AIB, were most suitable for the technique of cutting. According to the results of the interviews, gindiroba is used as a medicinal plant in Sergipe. However the users are unaware of the biotechnological potential of this species. / O presente trabalho é um estudo sobre duas técnicas para multiplicação e conservação da Fevillea trilobata L., bem como uma avaliação sobre o conhecimento popular da referida planta. Para o estudo de multiplicação foram utilizadas as técnicas de propagação in vitro e estaquia. Para a avaliação do conhecimento popular da gindiroba foi aplicado um questionário semi-estruturado a vendedores que comercializam sementes e/ou produtos naturais no Mercado Municipal Albano Franco e da feira-livre da praia do Mosqueiro, ambos situados em Aracaju/SE, além de alguns proprietários do município de Carmópolis/SE. Plantas-matrizes de gindiroba, fontes de explantes para experimentos de micropropagação, foram cultivadas no do mini-horto do Departamento de Biologia/UFS, oriundas de sementes fornecidas pela EMBRAPA-CPATC. Na propagação in vitro o meio de cultura utilizado foi o Murashige & Skoog (MS), suplementado com vitaminas de Morel e Wetmore, sacarose a 3%, caseína e mio-inositol a 0,01%, ágar a 0,6%, acrescido de BAP a (0; 1; 2; 4 e 6 mgL-1 ), pH ajustado em 5,8, temperatura de 27º±1º C, fotoperíodo de 12 horas e irradiância de 45μmol.m-2.s-1 com luz branca fria. O experimento de estaquia foi conduzido na estufa do Departamento de Biologia/UFS. Para essa técnica foram desenvolvidos dois experimentos, sendo o primeiro com estacas medianas de planta em fase juvenil e o segundo com estacas de plantas em fase reprodutiva. Os tratamentos utilizados foram formados pela combinação tipo de estaca (caule e caule+folha) com concentração de AIB(0; 1 e 2mgL-1), em substrato areia+solo argiloso (2:1). Os resultados obtidos foram submetidos à análise de variância, onde as interações significativas foram analisadas através do teste de Tukey em nível de 5% de probabilidade. Os dados foram analisados como auxilio do software GraphPad Prism, versão 4. De acordo com os resultados obtidos com a propagação in vitro, houve maior formação de calos em plântulas tratadas com 1 mgL-1 de BAP e para a variável brotamento de folhas, o tratamento 2 apresentou diferença significativa estatisticamente. O experimento 1 de estaquia, estaca+folha sem imersão em AIB apresentou maior formação de raízes e folhas novas. Já para estacas em fase reprodutiva, estaca+folha imerso em 1mg L-1 de AIB foi mais efetivo na formação de raízes e folhas. Estacas em fase juvenil e reprodutiva dos tratamentos 4, 5 e 6 apresentaram desidratação, embora algumas delas tenham emitido raízes e pequenas folhas. Estacas mais jovem e sem imersão em AIB, mostraram-se mais adequadas para a técnica de estaquia. De acordo com os resultados das entrevistas, a gindiroba é utilizada em Sergipe como planta medicinal. Entretanto os usuários desconhecem o potencial biotecnológico dessa espécie.

Made available in DSpace on 2014-08-20T14:22:04Z (GMT). No. of bitstreams: 1 TESE_Paulo_Sergio_Gomes_da_Rocha.pdf: 4345555 bytes, checksum: fc4e983fbe38c737dd47b9126efe2f3c (MD5) Previous issue date: 2008-02-21 / nus. To obtain peach plants that produce fruits of high quality and to obtain high productivity, it is necessary a modern and tecnified nursery plant production. The objective for this study was to establish an appropriated and low cost methodology for production of nursery Prunus plants. The experiments were carried out at the Faculdade de Agronomia Eliseu Maciel Universidade Federal de Pelotas during the period from 2003 to 2005. For the in vitro establishment phase were used explants of peach rootstocks cvs. Mr. S. 2/5, Sírio, Tsukuba, Nemaguard, Nemared and Flordaguard. The variables evaluated on the establishment phase were: type of explant; culture medium solidifiers; light quality; bud location; type of culture medium; and different BAP concentrations in the media culture. Regarding to the in vitro multiplication phase, the peach rootstocks cultivars tested were: Mr. S. 2/5; Sírio; and Tsukuba, which were evaluated about the effects of the following variables: light quality; BAP concentrations; type of explant; and type of culture medium. Regarding to the in vitro rooting phase, the peach rootstock tested was the cv. Mr. S. 2/5, which was evaluated about the following variables: light quality; vermiculite as a substitute of agar in culture media; and sucrose and AIB concentrations in culture medium. In the phase of in vitro establishment it was observed that: in general the best explant was nodal segment; the best culture medium solidifier was agar; the culture medium solidifier phytagel caused explants vitrification; and the nº 088 green filter for light promoted shoot morfogenesis on rootstock cv. Mr. S. 2/5. On the in vitro multiplication phase it was observed that: light quality had no effect on sprouting; addition of BAP 1,2 mg L-1 to the culture media had no effect on adventitious shooting in the Tsukuba rootstocks; the sprouts from shoot tip explants had more growth; and the MS culture medium gave the best results. On the in vitro rooting phase it was observed that: sucrose was essential for in vitro rooting; vermiculite substituted for agar in medium without affecting in vitro rooting; and the different light filters did not increase the. / Na cultura do pessegueiro, a implantação de um sistema moderno e tecnificado de produção de mudas é determinante para a obtenção de frutos de qualidade e uma alta produtividade. Desta forma, a qualidade genética e sanitária do material propagativo é imprescindível para alcançar o sucesso no empreendimento agrícola. Com o objetivo de adequar uma metodologia de propagação e de redução dos custos para a produção de mudas, foram desenvolvidos uma série de experimentos com porta-enxertos de Prunus spp. nas fases de estabelecimento, multiplicação e enraizamento in vitro. Os experimentos foram realizados na Faculdade de Agronomia Eliseu Maciel durante o período de 2003 a 2005. Para a fase de estabelecimento foram utilizados os porta-enxertos cvs. Mr. S. 2/5, Sírio, Tsukuba, Nemaguard, Nemared e Flordaguard. Nesta fase foram testados os tipos de explantes, solidificantes do meio de cultura, qualidade da luz através da utilização de filtros, efeito da localização da gema no ramo, tipos de meio de cultura e diferentes concentrações de BAP. Na segunda fase, a de multiplicação, para os porta-enxertos cvs. Mr. S. 2/5, Sírio e Tsukuba, avaliou-se a qualidade daxvii luz, diferentes concentrações de BAP, tipos de explantes e meios de cultura. Na terceira, a de enraizamento in vitro, avaliou-se a qualidade da luz, a vermiculita como substituto do ágar no meio de cultura, diferentes concentrações de sacarose e AIB no enraizamento do porta-enxerto de Prunus cv. Mr. S. 2/5. Na fase de estabelecimento observou-se que o melhor tipo de explante é o segmento nodal e o ágar foi o melhor solidificante, pois, o phytagel causou vitrificação. Em relação à qualidade da luz, o filtro verde nº 088 favoreceu a morfogênese das brotações do porta-enxerto cv. Mr. S. 2/5. A melhor região no ramo para a coleta dos explantes pode variar de acordo com o porta-enxerto. Na fase de multiplicação verificou-se que a qualidade da luz não influenciou a formação das brotações. Não houve formação de brotações adventícias no porta-enxerto cv . Tsukuba cultivado no meio acrescido de até 1,2 mg L-1 de BAP. Dos explantes testados na cv . Tsukuba, aquele contendo o ápice proporcionou o maior crescimento dos explantes. O meio de cultura MS foi o que apresentou os melhores resultados na multiplicação. Para a fase de enraizamento verificou-se que a adição de sacarose no meio de cultura é imprescindível e que a vermiculita pode substituir o ágar no meio. Os filtros utilizados para modificar as condições de luz não contribuíram para aumentar o potencial de enraizamento.

Made available in DSpace on 2014-08-20T14:22:05Z (GMT). No. of bitstreams: 1 dissertacao_jussara_ferri.pdf: 17890283 bytes, checksum: 29dfc3e77cedf523a06e365180e450bf (MD5) Previous issue date: 2008-03-27 / Blueberry cultivation is recent in Brazil, and the area expansion of this production is limited by the lack of quality seedlings. The in vitro propagation make possible, in little time, to produce of mass form, high quality plants. In this work, the first objective was to study some involved factors in the establishment, multiplication and rooting of blueberry rabbiteye group, seeking yield increase of the seedlings production through micropropagation. The second objective was to study some involved factors seedlings development of the Aliceblue, Climax, O Neal and Georgiagem cultivars, seeking make available to producers seedlings sufficiently developed and adapted to orchard implantation. The work was developed in 2 stages. The first stage was constituted for 4 trials micropropagation related, and consisted respectively in the in vitro establishment, multiplication of the material previously in vitro established and rooting sprout obtained in the multiplication stage. Was verified that zeatin is necessary for in vitro establishment Powderblue and Florida cultivars, be able to utilize the smaller concentration (9 μM). Cultivars Woodard, Bluebelle and Bluegem explants presented the most bud number. The most rooting percentage was obtained with 6 µM of IBA added in culture media. The basal stakes presented the most root quantity. The 6 µM concentration of growth regulator ANA provide the most root length. The second stage of this work was constituted for 2 trials vegetative establishment related. In the first trial were utilized 2 blueberry cultivars of rabbiteye group and 4 substrates tips. In the second trial were utilized 2 cultivars blueberry group and 4 substrates tips. It recommended 70% sawdust + 20% coconut fiber + 10% bovine manure mixture to the most growth aerial part, the most mass of dry matter aerial and root, and the most sprout number. For the rabbiteye group, Climax cultivar presented the most vegetative development, parallel O´Neal cultivar highbush group. / O cultivo do mirtilo no Brasil é recente, e a expansão da área de produção é limitada pela disponibilidade de mudas de qualidade. A propagação in vitro possibilita em curto espaço de tempo, produzir de forma massal, plantas sadias com alta qualidade. Neste trabalho, o primeiro objetivo foi estudar alguns dos fatores envolvidos no estabelecimento, na multiplicação e no enraizamento de cultivares de mirtilo do grupo rabbiteye , visando o aumento do rendimento na produção de mudas através da micropropagação. O segundo objetivo foi estudar alguns dos fatores relacionados ao desenvolvimento de mudas das cultivares Aliceblue, Climax, O Neal e Georgiagem, visando disponibilizar ao produtor uma muda suficientemente desenvolvida e adaptada para a implantação de pomares. O trabalho foi realizado em duas etapas. A primeira etapa foi constituída por 4 experimentos relacionados a micropropagação e consistiram respectivamente em estabelecimento, multiplicação do material já estabelecido in vitro e enraizamento de brotações obtidas na fase de multiplicação. Foi verificado que zeatina é necessária para o estabelecimento in vitro das cultivares Powderblue e Florida, podendo ser utilizada a menor concentração (9 μM). Explantes das cultivares Woodard, Bluebelle e Bluegem na posição vertical do explante apresentaram maior número de gemas. A maior porcentagem de enraizamento na cv. Climax foi obtida com a adição de 6 µM de AIB no meio de cultura. As estacas basais apresentaram maior quantidade de raiz. O fitorregulador ANA a 6 µM, proporciona maior comprimento de raiz. A segunda etapa deste trabalho constituiu-se de dois experimentos relacionados ao desenvolvimento vegetativo. No primeiro foram utilizadas 2 cultivares de mirtilo do grupo rabbiteye e 4 tipos de substratos. No segundo experimento foram utilizadas 2 cultivares de mirtilo do grupo highbush e 4 tipos de substratos. Recomenda-se a mistura 70% serragem + 20% fibra de coco + 10% esterco bovino para maior crescimento da parte aérea, maior massa da matéria seca da parte aérea e do sistema radicular e maior número de brotações. Para o grupo rabbiteye a cultivar Climax foi a que apresentou maior desenvolvimento vegetativo, paralelamente à cultivar O´Neal para o grupo highbush'.

Thesis (Ph. D. (Plant Production)) -- University of Limpopo, 2015 / Wild watermelon (Cucumis africanus LF.) and wild cucumber (Cucumis myriocarpus Naude.) are known for their ethnomedicine, ethnopesticide, ethnonematicide and nutritional properties, along with nematode resistance. The two Cucumis species were successfully used as inter-generic seedling rootstocks for watermelon (Citrullus lanatus Thunb.) cultivars, where nematode-resistant genotypes are not available. Also, the two Cucumis species are hardy and resilient to inland South Africa conditions, where temperatures are predicted to increase by 6°C in the year 2030. Seeds in the Cucurbitaceae Family contain high concentration of cucurbitacins, which induce auto-allelopathy that inherently inhibits plant growth and germination. Poor germination and non-uniform stands as a result of seed dormancy are a major challenge in sexual propagation of wild Cucumis species for various potential industries. Generally, true-to-type, uniform and disease-free plants in plant production are asexually-generated through in vitro propagation techniques. This study was therefore, initiated to address seed dormancy and related challenges of sexual propagation in the two wild Cucumis species by determining whether: (1) seed dormancy in C. africanus and C. myiocarpus would be ameliorated to allow for in vitro sexual propagation to establish pathogen-free parent stock, (2) the testa in C. africanus and C. myiocarpus seeds would possess structures, which interfere with imbibition and movement of water to the endosperm, (3) all organs of C. africanus and C. myriocarpus would be suitable for in vitro propagation, (4) suitable potting medium for in vitro propagated plantlets of C. africanus and C. myriocarpus would be available for acclimatisation of plantlets and (5) in vitro-produced xxviii plantlets from nematode-resistant C. africanus and C. myriocarpus would retain their resistance to Meloidogyne incognita race 2 under greenhouse conditions. In vitro and ex vitro experiments were conducted to achieve the stated objectives, with treatments in the laboratory and the greenhouse being arranged in completely randomised and randomised complete block designs, respectively. Validity was primarily ensured through the use of factorial trials, while the reliability of data was ensured by using appropriate levels of statistical significance. Leaching alone in C. africanus improved germination, while in C. myriocarpus this treatment had no effect on germination. The optimum leaching time in leached-control seeds of C. africanus was achieved at 7.1 h, with a 25-day mean germination time (MGT) and 52% optimum germination percentage (GP). In the two Cucumis species, the combined effect of leaching seeds in running tapwater and physical scarification of seeds at the chalaza region escalated germination in both Cucumis species, suggesting that both chemical and physical seed dormancies were involved. In C. africanus, cucurbitacin B (C32H48O8) was deposited exogenously to the testa, whereas in C. myriocarpus cucurbitacin A [cucumin (C27H4009) and leptodermin (C27H3808)], was deposited endogenously to the testa. The optimum leaching time in leached-scarified (LS) seeds of C. africanus was achieved at 5.7 h, with at least 40-day MGT and 89% optimum GP. In contrast, in C. myriocarpus LS seeds had the optimum leaching time of 6.3 h, with at least 41 days MGT and 93% optimum GP. Field emission SEM confirmed that there were two “water-gaps”, one at the micropylar region (hilum end) and the other at chalaza region (abaxial end) of seeds in both Cucumis species. Five distinct testa layers in seeds of C. myriocarpus were observed, namely, (i) epidermis, (ii) hypodermis, (iii) sclerenchyma, (iv) aerenchyma xxix and (v) chlorenchyma. In contrast, C. africanus seeds did not have the hypodermis between the micropylar and chalaza regions, but was present around both regions, which may provide some explanation of sporadic germination in non-leached and non-scarified seeds in this Cucumis species. The most suitable plant propagules for in vitro mass propagation of the two Cucumis species were nodal and apical buds. The optimum PGRs for shoot regeneration using both propagules in C. africanus and C. myriocarpus were at 0.80 and 0.35 μM 6-benzyladeninepurine (BAP), respectively. In contrast, the largest number of roots was regenerated at 0.31 and 0.44 μM indole-3-butyric acid (IBA) for C. africanus and C. myriocarpus, respectively. In vitro-produced plantlets were successfully acclimatised to ex vitro conditions, with sand + compost potting medium being the most suitable growing medium for weaning both Cucumis species. The in vitro-produced plantlets retained their resistance to M. incognita race 2. In conclusion, seeds of C. africanus and C. myriocarpus are structurally and chemically different, with strong evidence of chemical and physical dormancies. Structurally, C. myriocarpus seeds consist of five layers, four lignified and one non-lignified, whereas those of C. africanus have four layers, three lignified and one non-lignified. Evidence suggested that in C. africanus seeds, allelochemicals were primarily deposited outside the testa, whereas in C. myriocarpus they were deposited within the testa. The identified seed dormancies could successfully be ameliorated through combining leaching and scarification in both Cucumis species. The developed in vitro propagation protocols accord the two Cucumis species the potential for use as future crops in the context of climate-smart agriculture and research. / Flemish Interuniversity Council (VLIR)

Made available in DSpace on 2015-03-26T13:42:19Z (GMT). No. of bitstreams: 1 01 - capa_abstract.pdf: 100582 bytes, checksum: cde5c201a478c09c14bf733b80e5a159 (MD5) Previous issue date: 2006-09-26 / Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico / The great value of bromeliads as ornamental plants creates demands for development of propagation techniques. These techniques allow commercial exploitation of bromeliad stocks diminishing the pressure for gathering, preserving threatened wild populations. O. grossiorum is a typical bromeliad from Atlantic forestry threatened of extinction. The objectives of this research were to select O. grossiorum clones with ornamental values easy to propagate in vitro, and establish in vitro propagation protocols for these clones. The project was developed in three steps: germination and in vitro selection of seedlings responsive to BAP (6-benzylaminopurine), selection of clones with ornamental values, and establishment of protocol for in vitro propagation of the selected clones. In the first step only 18.33% of plantlets germinated in vitro were found responsive to BAP. These plantlets were selected and replicated in vitro several times, each replicated plantlet constituting a clone. In the second step these clones were established ex vitro and surveyed for ornamental attributes. Five out of 11 clones were selected in this step. These clones presented distinct phenotypic traits and were considered of high ornamental quality. In the third step a protocol for in vitro propagation were developed for each selected clone. / O grande valor das bromélias como plantas ornamentais gera grande demanda para desenvolvimento de técnicas de propagação. Estas técnicas permitem a exploração comercial das bromélias e diminui a pressão pelo extrativismo, preservando as populações naturais desta espécie e também pode gerar renda e empregos, tendo, portanto, valor econômico e social. O. grossiorum é uma bromélia ameaçada de extinção típica de Mata Atlântica. Os objetivos deste trabalho foram selecionar clones de O. grossiorum com potencial ornamental e de fácil propagação in vitro, e estabelecer protocolo de propagação in vitro para estes clones. O trabalho foi desenvolvido em três etapas: germinação e em seleção in vitro de plântulas responsivas a BAP (6-benzylaminopurine), seleção de clones com valores ornamentais, e estabelecimento de protocolo para propagação in vitro dos clones selecionados. Na primeira etapa foi observado que apenas 18.33% das plântulas germinadas in vitro eram responsivas a BAP. Estas plântulas foram selecionadas e reproduzidas em in vitro, sendo que cada plântula selecionada e reproduzida constitui um clone. Na segunda etapa estes clones foram estabelecidos ex vitro e selecionados em relação aos atributos ornamentais. Foram selecionados cinco entre 11 clones nesta etapa. Estes clones apresentaram características fenotípicas distintas, sendo considerados de alta qualidade ornamental. Na terceira etapa o protocolo para em propagação in vitro foi desenvolvido para cada clone selecionado.

Made available in DSpace on 2016-12-06T17:42:05Z (GMT). No. of bitstreams: 1 PGPV14DA008.pdf: 1515332 bytes, checksum: 0e69f0adeb0a1a547c9cf883320c34c0 (MD5) Previous issue date: 2014-07-30 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / The development of a breeding program for the pear culture has great importance to the expansion of the culture and the creation/selection of new rootstocks with traits of interest is able to impulse its productivity. Thus, main objective of this study was to select new genotypes from rootstocks seedlings of Pyrus communis L. providing plants of low vigor, and to develop a micropropagation protocol for these genotypes, aiming at sustainability of the pear culture in southern Brazil. The experiments were conducted at the Agroveterinaries Sciences Center at University of Santa Catarina State (CAV / UDESC). Plants used for the experiments were Pyrus communis L. with potential as rootstock for pear culture. The experimental design was completely randomized and the variables evaluated were: plant height, trunk diameter, bud number, branches of the year number and height, lenticels number (paper I) bacterial contamination, fungal contamination, explant survival (paper II) shoots number and height, bud number, leaf number, rooting percentage, root number and height, shoot height, callus intensity, explant survival (paper III) IAA production, rooting percentage, root number and height, shoot height and callus intensity (paper IV). Genotypes 409, 548, 570 and 577 remained constant in the group of medium vigor and were selected for micropropagation, in order to assess its potential in orchard conditions. At the in vitro establishment PPM is an effective biocide for controlling microbial contamination and in low concentrations do not affect survival of the explant. The asepsis with alcohol 70% + sodium hypochlorite 2,5% + PPM 2 mL L-1 in media culture is effective for explants derived from mother plants placed in a growth chamber and the asepsis with PPM 5% and PPM 5 % + PPM 2 mL L-1 in media culture are effective in explants derived from field mother plants. The QL modified medium plus 3,5 mL L-1 BAP showed higher multiplication of explants during the stage of in vitro multiplication. The QL modified medium with IBA in the range between 1,0 and 1,5 mL-1 showed better rooting during the rooting stage. The longest survival of explants was observed in the acclimatization using transparent cups with lid, containing the mix commercial substrate + vermiculite + coconut fiber (2:2:1). The explants of Pyrus communis L. should be acclimated 60 days after in vitro rooting having roots up to 30 mm. It was concluded that it was possible to select genotypes with superior characteristics within the population of Pyrus communis L. rootstocks, and it was possible to develop a micropropagation protocol for selections / O desenvolvimento de um programa de melhoramento para a cultura da pereira é de grande importância para a expansão da cultura e a criação/seleção de novos portaenxertos com características de interesse é capaz de impulsionar sua produtividade. Diante disto o objetivo principal deste trabalho foi selecionar novos genótipos de portaenxertos originários de seedlings de Pyrus communis L. que confiram menor vigor às plantas, e desenvolver um protocolo de micropropagação para estes genótipos, visando à sustentabilidade da cultura da pereira no sul do Brasil. Os experimentos foram conduzidos no Centro de Ciências Agroveterinárias da Universidade do Estado de Santa Catarina (CAV/UDESC). Foram utilizadas para os experimentos plantas da espécie Pyrus communis L. com potencial de portaenxerto para a cultura da pereira. O delineamento experimental utilizados foi inteiramente casualizado, as variáveis avaliadas foram: altura de planta, diâmetro do caule, número de gemas, número e comprimento de ramos do ano, número de lenticelas (artigo I) contaminação bacteriana, contaminação fúngica, sobrevivência de explantes (artigo II) número e comprimento de brotos, número de gemas, número de folhas, percentagem de enraizamento, número e comprimento de raiz, comprimento de parte aérea, intensidade de calo, sobrevivência de explantes (artigo III) produção de AIA, percentagem de enraizamento, número e comprimento de raiz, comprimento de parte aérea e intensidade de calo (artigo IV). Os genótipos 409, 548, 570 e 577 se mantiveram constantes no grupo de vigor médio e foram selecionados para a micropropagação, a fim de avaliar seu potencial em condições de pomar. No estabelecimento in vitro o PPM é um biocida eficaz no controle de contaminações microbianas e em baixas concentrações não afeta a sobrevivência do explante. A assepsia com álcool 70% + hipoclorito de sódio 2,5% + PPM 2 mL L-1 no meio de cultura é eficaz para explantes oriundos de plantas matrizes acondicionadas em câmara de crescimento e as assepsias PPM 5% e PPM 5% + PPM 2 mL L-1 no meio de cultura são eficazes para explantes oriundos de plantas do campo. O meio QL modificado acrescido de 3,5 mL L-1 de BAP apresentou maior multiplicação dos explantes durante o estádio de multiplicação in vitro. O meio QL modificado acrescido de AIB na faixa entre 1,0 e 1,5 mg L-1 apresentou melhor enraizamento in vitro durante o estádio de enraizamento. Maior sobrevivência foi verificada na aclimatização em copos transparentes com tampa, contendo a mistura substrato comercial + vermiculita + fibra de coco (2:2:1). Os explantes de Pyrus communis L. devem ser aclimatizados 60 dias após o enraizamento in vitro, possuindo raízes com até 30 mm. Conclui-se que foi possível selecionar genótipos com características superiores dentro da população de portaenxerto de Pyrus communis L., bem como, foi possível desenvolver um protocolo de micropropagação para as seleções

Made available in DSpace on 2016-12-08T16:44:33Z (GMT). No. of bitstreams: 1 PGPV09MA033.pdf: 454969 bytes, checksum: 67852c8e8b73af524f20dddd33667e7e (MD5) Previous issue date: 2009-05-08 / The pear cultivation in Brazil is the less prominent among the fruit produced and is considered the most imported fruit. The production of pears in Brazil is low because there are other fruit more adapted to the climate of country, with high quality and quickly economic returns for the producers. The in vitro propagtion is a way ro attend the producer s demando f cultivars with quality, because of its efficiency and good technical and economic return. There isn t suficiente production of pear seedings, because there is a lack of protocols for in vitro propagation. The objective of this paper was to establish a simple protocol for in vitro propagation of pear, cv. Packam s Triumph, to produce healthy and quality seedlings to increase national production of pears. Experiments were performed for each stage of in vitro propagation. For in vitro establishment were tested diferente explants and asepsis. The explants were buds from mother plants in the greenhouse room, meristems and buds from mother plants of the field. The asepsis tested were hypochlorite and calcium hypochlorite. The variables analyzed were oxidation, bacterial and fungal contamination. For the in vitro multiplication BAP was tested at concentrations 0.2, 0.8, 1.4 and 2.0 mg.L¯¹ in two types of culture médium (MS and MS⅟2). The variables analyzed were number of buds and length of shoots. For the in vitro rooting the auxins NAA and IBA were tested in concentrations 0.1, 0.5, 1.0, 1.5, 2.0 and 3.0 mg.L¯¹. the variables amalyzed were formation os roots and callus. The results for in vitro establishment determined that fungal and bacterial contamination showed no significant diferences for the aseptic types and the explants that had higher incidence in the two cases were the buds of field plants. For oxidation the explants with higher incidence were the buds of field plants, regardless of asepsis, and meristems treated with calcium hypochlorit. For in vitro multiplication was deermined that the best concentration of BAP for buds development was 1.3 mg.L¯¹ and to lenght of shoots the best culture médium was MS. For in vitro rooting the auxins NAA showed no significant diferences in relation to adventitious roots formation. The treatment that showed less formation of callus were ANA in doses 0.1, 0.5 and 1.0 mg.L¯¹. The auxin IBA was significant for the variables length and number of roots. The increase of IBA caused a decrease in length f roots, and reached the highest number of roots at dose 1.6 mg.L¯¹. The variables fresh and dry weight of root, and shoot length were not directly affected by the type and dose of IBA and NAA / O cultivo de pêra no Brasil não tem destaque entre as frutíferas mais produzidas, sendo considerada a fruta mais importada. A produção de pêra no Brasil é reduzida, pois existem outras frutíferas melhor adaptadas às condições climáticas do país, com alta qualidade e que dão retorno econômico ao produtor mais rapidamente. A propagação in vitro é uma maneira de atender a demanda dos fruticultores por cultivares de qualidade, que devido a sua eficiência possui um bom retorno técnico e econômico. Não há produção suficiente de mudas de cultivares-copa de pêra, pois há uma carência de protocolos de propagação in vitro. O objetivo do trabalho foi estabelecer um protocolo de propagação in vitro de pereira, cv. Packham s Triumph, visando à produção de mudas sadias e de qualidade para incrementar a produção nacional de peras. Foram realizados experimentos para cada estágio da propagação in vitro. Para o estabelecimento in vitro foram testados diferentes explantes e assepsias. Os explantes utilizados foram gemas oriundas de plantas matrizes acomodadas em casa de vegetação, meristemas e gemas oriundas de plantas matrizes do campo. As assepsias testadas foram hipoclorito de sódio e hipoclorito de cálcio. As variáveis analisadas foram oxidação, contaminação bacteriana e fúngica. Na multiplicação in vitro o BAP foi testado nas concentrações 0,2; 0,8; 1,4 e 2,0 mg.L-1 sob dois tipos de meio de cultura (MS e MS ½). As variáveis analisadas foram número de gemas e comprimento de brotos. No enraizamento in vitro foram testadas as auxinas ANA e AIB nas concentrações 0,1; 0,5; 1,0; 1,5; 2,0 e 3,0 mg.L-1. As variáveis analisadas foram formação de raízes e de calo, comprimento e número de raiz, massa fresca e seca de raiz e comprimento de parte aérea. Os resultados obtidos no estabelecimento in vitro determinaram que a contaminação fúngica e bacteriana não apresentaram diferenças significativas quanto ao tipo de assepsia e os explantes que tiveram maior incidência nos dois casos foram as gemas de plantas do campo. Os explantes que apresentaram maior oxidação foram as gemas de plantas do campo, independente da assepsia, e o meristema tratado com hipoclorito de cálcio. Na multiplicação in vitro foi determinado que a melhor concentração de BAP no desenvolvimento de gemas foi 1,3 mg.L-1 e para comprimento de broto o melhor meio de cultura foi o MS. No enraizamento in vitro, as auxinas ANA e AIB não apresentaram diferenças significativas em relação à formação de raízes adventícias. Os tratamentos em que houve menor formação de calo foram ANA nas doses 0,1; 0,5 e 1,0 mg.L-1. A auxina AIB foi significativa para as variáveis comprimento e número de raiz. O aumento da concentração do AIB causou uma diminuição no comprimento das raízes e atingiu um maior número de raízes na dose de 1,6 mg.L-1. Já as variáveis massa fresca e seca de raiz, e comprimento de parte aérea não foram diretamente afetadas pelo tipo e dose de AIB e ANA